CN101664424B - 芝麻油在制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及芝麻油在制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂中的应用,研究发现应用糖皮质激素导致大鼠出现皮肤生长抑制,表皮层显著变薄,弹力纤维减少、断裂,皮肤羟脯氨酸明显含量减少,在给予糖皮质激素的同时,给予芝麻油进行预防,结果表明芝麻油对糖皮质激素导致的大鼠皮肤生长延缓,表皮层显著变薄,弹力纤维减少、断裂,皮肤羟脯氨酸明显含量减少等作用要明显的改善作用。因此,本发明提出了芝麻油可用于制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂,可用于防治药物性皮肤衰老,同时也可用于各种原因的皮肤老化,增白美容,保护皮肤的弹性,保持皮肤柔嫩、细致和光滑。芝麻油作为防治皮肤衰老的药物或保健食品时,可制成临床其他可接受的药物制剂,如滴丸、胶囊剂、注射剂、片剂、丸剂、冲剂、颗粒剂、皮肤外用制剂中的任何一种,供临床应用。也可以作为糖皮质激素药物制剂的辅料,添加进糖皮质激素的药物制剂中,组成新型的糖皮质激素制剂,供临床应用。
Description
技术领域 本发明涉及芝麻油在制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂中的应用。
背景技术 糖皮质激素是临床常用的药物,在皮肤病的治疗中,糖皮质激素是十分重要的药物,但是,长期应用可导致局部出现皮肤萎缩,变薄等衰老样病变,已有许多报道对此进行了观察,但至今还没有防治良策。芝麻自古以来就被认为是健康食品,黑芝麻可入药。芝麻油与其他植物油相比,具有较高的稳定性,主要原因是芝麻油中含有芝麻素类物质,此类物质是芝麻油中的一类特殊的内源性抗氧化物质,除了具有强抗氧化性能外,还能调节脂质代谢、降低胆固醇、保护肝脏、抑制乳腺癌、增强免疫能力。但是否可以对糖皮质激素皮肤衰老样改变有防治作用,一直没有人报道,我们在探讨防治糖皮质激素的不良反应的研究中,发现芝麻油对糖皮质激素造成的皮肤衰老样改变有很好的预防作用,应用醋酸泼尼松大鼠皮肤表皮层显著变薄,弹力纤维减少、断裂,皮肤羟脯氨酸明显含量减少,而应用醋酸泼尼松同时应用芝麻油时,大鼠皮肤可见表皮增厚,弹力纤维面积百分比增大,皮肤衰老样改变明显减轻,这一发现,提示了芝麻油可为我们克服糖皮质激素导致的皮肤衰老样病变提供了了一个很好的药物制剂,也为我们把芝麻油开发成为护肤美容产品奠定了基础。
发明内容 发现及证明了芝麻油具有防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的作用。本发明提到的芝麻油可以通过下述方法制备:
方法1:取成熟芝麻,170℃烘烤20分钟至香熟,粉碎后芝麻酱按总重量85%分两次加水,并在80℃水浴中保温搅至油出,离心,取上油层,作为实验用芝麻油。
方法2:取成熟芝麻粉碎,80℃干燥20min,取石油醚按料液比1∶12加入,静置,超声45min,抽滤,减压挥尽溶剂,即得芝麻油,作为实验用的芝麻油。
方法3:取成熟芝麻,170℃烘烤20分钟至香熟,粉碎,加10倍70%乙醇浸泡24小时,加热回流提取2次,过滤,保留滤液。滤渣按总重量85%分两次加水,并在80℃水浴中保温搅至油出,离心,取上油层,与第一次乙醇提取的滤液混合,得实验用的芝麻油。
本项目组通过糖皮质激素建立大鼠皮肤损害的模型,应用糖皮质激素导致大鼠出现皮肤生长抑制,表皮层显著变薄,弹力纤维减少、断裂,皮肤羟脯氨酸明显含量减少的状态,然后,按照我们前面提到的芝麻油制备方法制备出供实验用的芝麻油,在给予糖皮质激素的同时,给予芝麻油进行预防,结果表明芝麻油对糖皮质激素导致的大鼠皮肤生长延缓,表皮层显著变薄,弹力纤维减少、断裂,皮肤羟脯氨酸明显含量减少等作用要明显的改善作用。因此,本发明提出了芝麻油可用于制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂,可用于防治药物性皮肤衰老,同时也可用于各种原因的皮肤老化,增白美容,保护皮肤的弹性,保持皮肤柔嫩、细致和光滑。芝麻油作为防治皮肤衰老的药物或保健食品时,可制成临床其他可接受的药物制剂,如滴丸、胶囊剂、注射剂、片剂、丸剂、冲剂、颗粒剂、皮肤外用制剂中的任何一种,供临床应用。也可以作为糖皮质激素药物制剂的辅料,添加进糖皮质激素的药物制剂中,组成新型的糖皮质激素制剂,供临床应用。
具体实施方式:
实施例一:
1.1实验动物与饲养条件
1.2芝麻油的制备方法:
参照本专利申请提出的芝麻油的生产方法生产出供实验应用的芝麻油。
1.3实验方法
1.4.1分组与给药
24只SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(NS)、醋酸泼尼松组(GC)、芝麻油组(GC+SO),每组8只。每周称体重一次,NS上午给予蒸馏水5ml.kg-1.d-1灌胃,GC给予醋酸泼尼松混悬液3.5mg.5ml-1.kg-1.d-1灌胃。芝麻油组先给予醋酸泼尼松混悬液3.5mg.5ml-1.kg-1.d-1灌胃3小时后,给芝麻油按5ml.kg-1.d-1灌胃。
1.3.2取材方法与实验标本制备
88天后心脏取血处死大鼠,取背部正中皮肤以15%硫化钠水溶液脱去鼠毛,清水反复冲洗残余硫化钠,取0.5cm×0.5cm大小皮肤迅速放入Bouin液中固定,做组织切片进行组织形态学观察及定量分析。常规标本石蜡切片,切片厚度4~5μm,皮肤生长表皮细胞采用HE染色法,弹力纤维染色采用Weigert间苯二酚-碱性品红染色法。
1.3.3组织病理学形态观察
主要观察生长表皮厚度、细胞层数、基底层细胞排列分布及形态;观察弹力纤维的形态及数量。
1.3.4计算机图像分析系统定量分析
采用LeicaMPS30荧光-光学显微镜下摄影,应用相应计算机图像分析软件KSS ImageAnalysis(version 2.0 KSS scientific consultants,UT USA),在每张片随机选择5个高倍镜视野,测量皮肤生长表皮厚度(HE染色下,垂直于生长表皮基底层至角质层的长度)及真皮层弹力纤维面积百分比(Weigert间苯二酚-碱性品红染色下呈黑蓝色的弹力纤维积分占视野组织的百分比)平均值。
1.3.5单位皮肤中羟脯氨酸含量的测定
每只大鼠取约0.05g背部去毛去皮下结缔组织皮肤,精密称定并记录其重量,按照试剂盒说明书操作,计算皮肤中羟脯氨酸含量。
1.3.6统计学处理
计量资料数据结果用均数±标准差(x±s)表示,数据分析用SPSS12.0软件进行检验,数据间差异性比较采用方差分析,P<0.05,P<0.01表示具有统计学意义。
2实验结果
2.1皮肤组织形态学观察
2.1.1芝麻油对醋酸泼尼松致大鼠皮肤生长表皮的影响
GC组与NS组相比,大鼠皮肤生长表皮明显变薄,细胞层数减少,基底细胞胞体变小,真皮层胶原纤维厚度变薄,胶原束变长,平行于生长表皮呈条索状排列;与GC组相比,芝麻油组大鼠皮肤生长表皮厚度及细胞层数均增加,排列紧凑,角质层明显,胶原纤维规则,呈波浪状。
2.1.2芝麻油对醋酸泼尼松致大鼠真皮弹力纤维的影响
GC组与NS组相比,大鼠真皮层弹力纤维变短、减少。芝麻油组真皮层弹力纤维与GC组相比略有增多,且交织。
2.2大鼠生长表皮厚度、弹力纤维面积百分比的计算机图像分析系统定量分析
大鼠生长表皮厚度(E.Th)、弹力纤维面积百分比(E.F.Per Area)的计算机图像分析系统定量分析结果见表1。
表1醋酸泼尼松及芝麻油对大鼠生长表皮厚度和真皮弹力纤维面积百分比(x±s)
注:*P<0.05,**P<0.01vsNS;▲P<0.05,▲▲P<0.01vsGC(下同)
由表1可见,GC组与NS组比较,大鼠生长表皮厚度和弹力纤维面积百分比明显减少(P<0.01);芝麻油组与GC组相比,大鼠生长表皮厚度增加(P<0.05),与正常组相当,弹力纤维面积有增加的趋势,但差异无统计学意义。
2.3醋酸泼尼松及芝麻油对大鼠单位皮肤中羟脯氨酸含量的影响
醋酸泼尼松及芝麻油对大鼠单位皮肤中羟脯氨酸含量的影响结果见表2。
表2醋酸泼尼松及芝麻油对大鼠单位皮肤中羟脯氨酸的影响(x±s)
由表2可见,GC组及芝麻油组大鼠单位皮肤中羟脯氨酸含量低于NS组(P<0.05)。
3讨论
由皮肤组织形态学结果可见,长期应用醋酸泼尼松可致大鼠皮肤生长表皮显著变薄,弹力纤维、胶原纤维减少,断裂等变化,呈现衰老样病变。此病变可能与糖皮质激素使皮肤血管收缩产生对局部组织微循环和代谢的不良影响有关。已有报道指出,泼尼松引起的胶原含量减少也可能与糖皮质激素受体GCF介导的在转录水平抑制相关基因的表达有关。
经过芝麻油预防服用后,镜下两组大鼠生长表皮厚度及细胞层数均增加,细胞排列较紧凑,角质层明显;胶原束明显增多,排列较致密、规则,呈波浪状;皮肤弹力纤维增多,较长;而计算机图像分析系统的量化分析结果亦与上述镜下所见描述平行。提示芝麻油能够改善长期应用醋酸泼尼松引起的皮肤衰老样病变。
芝麻油作为一种较为贵重的食用油,其营养物质丰富,在化学、生理方面与其它植物油有着明显的不同。芝麻油有显著的稳定性,这是因为芝麻油中含有脂溶性不皂化物——芝麻木酚素,在芝麻油中约含有1%,其主要包括:芝麻素、表芝麻素、芝麻酚、芝麻林素等。芝麻木酚素有很强的抗氧化活性,近年研究发现芝麻木酚素,特别是芝麻素还具有很强的生理活性。日本学者实验证明,芝麻木酚素在机体内有较强的抗氧化活性,可消除有机自由基、过氧化物及羟自由基。芝麻油对家蚕寿命影响的研究[9]也指出,芝麻油可显著延长家蚕幼虫期和全生存期的时间,能显著延长五龄期家蚕饥饿时间,说明芝麻油在延缓衰老方面具有研究开发的价值。提示芝麻油中的抗氧化活性成分可对抗长期应用醋酸泼尼松引起的皮肤衰老样病变。
本实验的研究结果表明,芝麻油对预防临床上长期应用糖皮质激素所致的皮肤衰老样改变将会是一种很有价值的植物油。
研究表明,芝麻油可制成防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂,如滴丸、胶囊剂、注射剂、片剂、丸剂、冲剂、颗粒剂、皮肤外用制剂中的任何一种,供临床应用。也可以作为糖皮质激素药物制剂的辅料,添加进糖皮质激素的药物制剂中,组成新型的糖皮质激素制剂,供临床应用。芝麻油也可用于保健食品及化妆品中,发挥皮肤抗衰老作用,增加皮肤的弹性,保持保持皮肤柔嫩、细致和光滑。
Claims (3)
1.芝麻油在制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂中的应用。
2如权利要求1所述的芝麻油在制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂中的应用,其特征是所述芝麻油可以通过下述生产方法获得:
方法1:取成熟芝麻,170℃烘烤20分钟至香熟,粉碎后芝麻酱按总重量85%分两次加水,并在80℃水浴中保温搅至油出,离心,得芝麻油。
方法2:取成熟芝麻粉碎,80℃干燥20min,取石油醚按料液比1∶12加入,静置,超声45min,抽滤,减压挥尽溶剂,即得芝麻油。
方法3:取成熟芝麻,170℃烘烤20分钟至香熟,粉碎,加10倍70%乙醇浸泡24小时,加热回流提取2次,过滤,保留滤液。滤渣按总重量85%分两次加水,并在80℃水浴中保温搅至油出,离心,取上油层,与第一次乙醇提取的滤液混合,得芝麻油。
3.如权利要求1所述的芝麻油在制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂中的应用,其特征是所述芝麻油可制成临床其他可接受的药物制剂,如滴丸、胶囊剂、注射剂、片剂、丸剂、冲剂、颗粒剂、皮肤外用制剂中的任何一种,供临床应用。
4.如权利要求1所述的芝麻油在制备防治糖皮质激素皮肤衰老样改变的药物制剂中的应用,其特征是所述芝麻油可以作为糖皮质激素药物制剂的辅料,添加进糖皮质激素的药物制剂中,组成新型的糖皮质激素制剂,供临床应用。
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