CN101648948B - 降血压药物3-烷氧基-芒果苷、合成及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了具有如下通式的3-烷氧基-芒果苷，其中R为碳原子数为1-18的烷基；还公开了该3-烷氧基-芒果苷的制备方法和应用，由芒果苷、碳酸氢钠和卤代烷在溶剂中回流反应制得，操作简便易行，收率高，成本低；体外抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性实验结果显示，与芒果苷相比，3-烷氧基-芒果苷具有更强的抑制ACE酶活性，可以用于制备高效、安全的降血压药物，有着良好的应用前景。

Description

降血压药物3-烷氧基-芒果苷、合成及应用

技术领域

本发明涉及一类新化合物及其医药用途，具体涉及一类新的化学物质，3-烷氧基-芒果苷衍生物。

背景技术

芒果苷(mangiferin)，又称莞知母宁，是从芒果叶，以及知母的根茎、地上部分等中提取出来的一种双苯吡酮类化合物。临床上主要用于慢性支气管炎，肝炎等疾病的治疗用药。近年来的药理研究发现，芒果苷及其某些结构衍生物具有平川止咳祛痰、免疫、抗菌、抗炎、保肝利胆、抗氧化、降血压、降血糖、降血脂、延缓衰老等多重药理活性(Biol Pharm Bull，2001，24(9)：1009-1011)。天然化合物经过结构修饰后，其生物活性往往会发生较大的变化。对芒果苷的构效关系研究结果表明，在芒果苷分子的三个酚羟基上引入烷基后，形成3，6，7-O-三取代芒果苷衍生物，部分化合物的活性增强(华西药学杂志，2008，23(4)：385～387)；在分子的三位引入钠离子，形成芒果苷-3-钠盐，其生理活性也增加(时珍国医国药，2008，19(4)：816)。但是，到目前为止，在分子的3位引入烷基，以及引入烷基后的生理活性方面的研究工作，尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提出3-烷氧基-芒果苷衍生物，公开其抑制血管紧张素转化酶(ACE)方面的用途，该类化合物的降血压效果明显高于芒果苷。

本发明涉及一类新的化学物质，3-烷氧基-芒果苷，其分子结构式如下：

其中，R＝C_nH2n+1，n＝1～18。

3-烷氧基-芒果苷的合成方法如下：

(1)、以二甲基甲酰胺(DMF)为反应溶剂，将芒果苷加入到20倍量m/V的DMF中，升温溶解后，将与芒果苷等摩尔比的碳酸氢钠与卤代烷，在1小时内搅拌下分批次的加入到上述二甲基甲酰胺与芒果苷的反应溶液中，混合均匀后，回流反应1～8小时；

(2)、反应完成后，冷却到室温，加入5％的碳酸钠溶液析出沉淀，沉淀为3-烷氧基-芒果苷粗品，过滤，沉淀依次用水、石油醚、三氯甲烷洗涤，得到较纯的3-烷氧基-芒果苷；最后将较纯的3-烷氧基-芒果苷过硅胶柱，用二氯甲烷和甲醇洗脱，减压蒸馏得3-烷氧基-芒果苷纯品。

上述合成工艺获得的3-十二烷氧基-芒果苷的结构表征结果如下：

黄色粉末状固体，微溶于稀甲醇，R_f＝0.34，收率：64.0％。m.p.＝143-147℃；UV(CH₃OH)λmax：438，350，243(nm)；IR(KBr)v：3071(CH_Ar)、2929 and 2856(CH)、1605(Ar)、1520(C＝N)、1463and1352(CH)、1283--1016(C-O)、730((-CH₂-)n，n≥4)cm^-1；¹H NMRδ(ppm)：13.6(s，H)、10.79(s，H)、9.74(s，H)、7.41(s，H)、7.14(s，H)、6.47(s，H)、4.86(s，2H)、4.60(s，H)；4.22(s，H，)、4.11(s，2H)、3.90(s，H)、2.73(s，4H)、1.98(s，2H)、1.62-1.43(m，19H)、0.85(s，4H)、¹³C NMRδ(ppm)：.178.889、174.852、162.008、157.427、152.122、149.338、143.028、113.053、109.122、108.288、100.412、96.809、96.097、80.586、79.357、74.708、70.392、70.166、68.531、60.740、31.336、29.059、28.753、28.545、25.492、22.130、13.993。

对比芒果苷和3-十二烷氧基-芒果苷的结构表征数据发现，修饰后的芒果苷分子中，3-十二烷氧基芒果苷分子中3位质子消失，新出现烷基相应的峰。表明合成的确实是3-十二烷氧基-芒果苷。

利用同样的光谱数据，可以证明按照上述方法可以合成其他的3-烷氧基-芒果苷。

该类化合物具有以下几个特点：

1、3-烷氧基-芒果苷为第一次合成的新物质。

2、对3-烷氧基-芒果苷，随着衍生物的烷基链长度增加，其对ACE酶的抑制活性先增加，然后下降，到3-十烷氧基-芒果苷时活性最高。

3、本化合物收率高，价格低，具有极好的开发利用价值。

芒果苷是芒果叶和知母的主要降血压活性成分。本发明发现，3-烷氧基-芒果苷的降糖活性明显高于芒果苷，因此，将3-烷氧基-芒果苷做成降血压的药物片剂等剂型单独使用(后面实施例中具体谈比例，此处为宏观表述，是否不用详细？)，或者与其他降血压药物同时使用，或者与其他中药和中成药同时使用，其治疗高血压的效果将更好。因此3-烷氧基-芒果苷可以作为一种治疗高血压的新原料药开发利用。

本发明化合物可以组合物的形式通过口服、注射或外用等给药的方式用于相关疾病的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊等，制成液体制剂如水油悬浮剂或糖浆等；用于注射给药时，可将其制成注射用溶液或油悬浮剂等；用于外用可以制成贴膏或擦剂。以上各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。

本发明化合物的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗疾病的类型和严重程度等变化。

具体实施方式

以下的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以此限制本发明。

实施例1：3-十二烷氧基-芒果苷

制备方法如下：

(1)、以DMF为反应溶剂，将0.1摩尔芒果苷加入到2摩尔的DMF中，升温到60℃溶解后，在搅拌的条件下将0.1摩尔的碳酸氢钠及0.1摩尔的溴代十二烷，在1小时内分批次的加入到DMF与将芒果苷的反应溶液中，混合均匀后，回流反应5小时；

(2)、反应完成后，冷却到室温，加入5％的碳酸钠溶液析出沉淀，沉淀为3-十二烷氧基-芒果苷粗品，过滤，沉淀用水洗涤、离心，去掉上清液。逐滴加入二甲亚砜至沉淀刚好溶解，然后依次用石油醚、三氯甲烷洗涤，得到较纯的3-十二烷氧基-芒果苷；最后将较纯的3-十二烷氧基-芒果苷过硅胶柱，用二氯甲烷和甲醇洗脱，收集洗脱液，减压蒸馏得3-十二烷氧基-芒果苷纯品。

实施例2：3-辛氧基-芒果苷

制备方法如下：

(1)、以DMF为反应溶剂，将0.1摩尔芒果苷加入到100毫升DMF中，升温到60℃溶解后，在搅拌的条件下将0.1摩尔的碳酸氢钠及0.1摩尔的溴代十二烷，在1小时内分批次的加入到DMF与将芒果苷的反应溶液中，混合均匀后，回流反应8小时；

(2)、反应完成后，冷却到室温，加入体积百分比5％的碳酸钠溶液析出沉淀，沉淀为3-辛氧基-芒果苷粗品，过滤，沉淀用水洗涤、离心，去掉上清液。逐滴加入二甲亚砜至沉淀刚好溶解，然后依次用石油醚、三氯甲烷洗涤，得到较纯的3-辛氧基-芒果苷；最后将较纯的3-辛氧基-芒果苷过硅胶柱，用二氯甲烷和甲醇洗脱，收集洗脱液，减压蒸馏得3-辛氧基-芒果苷纯品。

实施例3：3-甲氧基-芒果苷

制备方法如下：

(1)、以DMF为反应溶剂，将0.1摩尔芒果苷加入到100毫升DMF中，升温到58℃溶解后，在搅拌的条件下将0.1摩尔的碳酸氢钠及0.1摩尔的溴代十二烷，在1小时内分批次的加入到DMF与将芒果苷的反应溶液中，混合均匀后，回流反应1小时；

(2)、反应完成后，冷却到室温，加入体积百分比5％的碳酸钠溶液析出沉淀，沉淀为3-甲氧基-芒果苷粗品，过滤，沉淀用水洗涤、离心，去掉上清液。逐滴加入二甲亚砜至沉淀刚好溶解，然后依次用石油醚、三氯甲烷洗涤，得到较纯的3-甲氧基-芒果苷；最后将较纯的3-甲氧基-芒果苷过硅胶柱，用二氯甲烷和甲醇洗脱，收集洗脱液，减压蒸馏得3-甲氧基-芒果苷纯品。

实施例4、3-十二烷氧基-芒果苷片的制备

称取3-十二烷氧基-芒果苷10g、球粒状乳糖70g、硬脂酸镁15g和微晶纤维素5g，按照片剂常规制备方法制得3-十二烷氧基-芒果苷片200片，每片含3-十二烷氧基-芒果苷50mg。

实施例5、3-十二烷氧基-芒果苷口服液的制备

称取3-十二烷氧基-芒果苷10g、吐温-80 5g和甜菊糖1g，加水溶解并稀释至1000mL，按照口服液常规制备方法制得3-十二烷氧基-芒果苷口服液200支，每支含3-十二烷氧基-芒果苷50mg。

下面将用3-十二烷氧基-芒果苷体外抑制ACE活性实验及结果来说明其在制备降血压药物中的应用。

ACE酶活力研究方法：

试剂与药品：马尿酰-组氨酰-亮氨酸(HHL)，购自Sigma公司；血管紧张素转化酶(ACE)，购自Sigma公司；800/mg。1mol/L硼酸缓冲液(pH8.3)：硼酸6.18g溶解于蒸馏水中，(硼酸难溶，可采用在超声中溶解)，再称取NaCl，17.53g溶解与硼酸一起溶解，加入NaOH调节pH8.3定溶至1000mL待用。HHL溶液：取HHL适量，以0.1mol/L硼酸缓冲液(pH8.3，含0.3mol/LNaCl)溶解配置成0.8mmol/L的HHL溶液。酸标准液制备：取马尿酸标准品适量，用双蒸水配置不同浓度的马尿酸标准液待用。抑制剂配置：准确称取合成抑制剂，加入以上配制的0.1mol/L硼酸缓冲液，配制1mg/mL的样品溶液。HPLC分析：流动相：A相：双蒸水+0.1％三氟乙酸，B相：甲醇+0.1％三氟乙酸(TFA)；流速1ml/min，检测波长228nm，进样量20μL。洗脱条件：A相40％，B相60％。

抑制试验：

马尿酸标准曲线的制作：称取马尿酸溶于0.1mol/L硼酸缓冲盐溶液中配置成不同浓度的马尿酸标准品，并采用上述高效液相色谱法测定其峰面积值。每个浓度测定值均做三次重复，并取得其平均值。采用马尿酸浓度(μg/mL)做横坐标，峰面积值(mAU.S)为纵坐标，进行线性回归并得到回归方程。ACE抑制活性的测定：加液方式

反应液：PH 8.3硼酸缓冲液10ul+HHL 25ul+抑制药20ul

阳性对照：PH 8.3硼酸缓冲液50ul+HHL 25ul

以此加入上述试剂后加入ACE酶20ul，反应总体积为75μL，在37℃恒温水浴加热50min后取出，加入200μL的1M HCl终止反应，在微量高速离心机中采用10000r/min离心10min，得到上清液采用20μL进样，测定ACE的活性。

表4-1  ACE体外抑制活性测定方法

抑制剂对ACE活性的抑制率计算公式为：R＝(A-B)/A×100％

式中，R为ACE抑制剂样品对ACE的抑制率(％)；A为空白对照组中马尿酸的峰面积(mAU.S)；B为添加ACE抑制剂样品中马尿酸的峰面积(mAU.S)。

结果：见表1，由表可知，3-烷氧基-芒果苷对ACE活力抑制率均明显高于芒果苷，且随着烷基链长度增加，ACE活力抑制率逐渐增加，至癸基时达到最高值，之后随着烷基链长度继续增加，ACE活力抑制率又逐渐降低。

表2、部分3-烷氧基-芒果苷体外抑制ACE活性实验结果

基于上述实验结果，可得出如下结论：与芒果苷相比，本发明的3-烷氧基-芒果苷具有更强的抑制ACE活性，可以作为活性成分，单独使用或与其它具有药理活性的化合物和/或提取物组成复方使用，并与药学上可接受的载体按照药学领域的常规制剂方法制成各种剂型(如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、口服液、糖浆或注射液等)的降血压药物，再通过适当的途径施用，以达到高效、安全地治疗高血压的目的。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。

Claims (3)

1.3-烷氧基-芒果苷，其分子结构式如下：

其中，R＝C_nH2n+1，n＝1～18，但n≠1。

2.合成权利要求1所述的3-烷氧基-芒果苷的方法，其特征在于步骤如下：

(1)、以二甲基甲酰胺为反应溶剂，将芒果苷加入到20倍量的二甲基甲酰胺中，其中芒果苷与二甲基甲酰胺为质量体积比m/V，单位是克/毫升，然后将二甲基甲酰胺与芒果苷的反应溶液升温到60℃溶解后，再将与芒果苷等摩尔比的碳酸氢钠与与芒果苷等摩尔比的卤代烷，在1小时内搅拌下分批次的加入到二甲基甲酰胺与芒果苷的反应溶液中，混合均匀后，回流反应1～8小时；

(2)、反应完成后，冷却到室温，加入浓度为5％的碳酸钠溶液析出沉淀，沉淀为3-烷氧基-芒果苷粗品，过滤，沉淀依次用水、石油醚、三氯甲烷洗涤，得到较纯的3-烷氧基-芒果苷；最后将较纯的3-烷氧基-芒果苷过硅胶柱，用二氯甲烷和甲醇洗脱，减压蒸馏得3-烷氧基-芒果苷纯品。

3.权利要求1所述的3-烷氧基-芒果苷在制备抑制血管紧张素转化酶及降血压方面的药物中的应用。