CN101637102B - 高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法，冬虫夏草是虫草蝠蛾幼虫被虫草真菌寄生后形成的虫菌结合体，是独特生境下真菌、昆虫、植物生物链的特殊产物。本发明属于野药野培生物工程，在高寒道地产区增殖菌和寄主，增植、呵护高寒草甸和高寒灌丛草甸植被，补增该生物链活性，开发人为难以模拟的虫草生境的地理生态资源。并降低天敌危害，确保冬虫夏草稳产、优质的这一珍稀物种，保护和改善脆弱的高寒草甸植被。其方法：采用寄主不同种群，分级分区辅助增卵、提高孵化率，增加幼虫密度；菌种分离纯化、发酵提供菌源，从而提高虫菌的感染机率；同时补增寄主幼虫喜食植物，施用生长调节剂和肥料悬液，呵护高寒草甸植被。

Description

高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法

技术领域

本发明属于《野药野培》的生物工程，尤其涉及高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法。 

背景技术

冬虫夏草(Cordyceps sinensis)是高寒地区虫草蝠蛾(Hepialus armorieanus oberthur)幼虫被冬虫夏草真菌(Cordyceps sinensis(berk)sacc)寄生后形成的虫菌结合体，是独特生境下真菌、昆虫、植物生物链的特殊产物，历来自生自衍。寄主蝠蛾生活史中有98％的时间都在土壤中营生，寄主幼虫蚕食高寒草甸和高寒灌丛草甸植物地下部分。植被因蚕食而遭到破坏，加之人为掠夺性采挖和天敌危害，虫草资源越来越匮乏。冬虫夏草是我国特有珍稀名贵药材。为补市场需求，国内采用虫草菌工业化扩大发酵，或虫草菌接种于蚕蛹，喷洒于蘑菇体等，其产品不成冬虫夏草“虫形”，有损“珍奇”等属性，受到外观上的贬值和对虫菌结合体的认可；若模拟虫草生境《野药家栽》，投资大，曾不少国内外专家多年尝试，都未能如愿。 

发明内容

冬虫夏草形成是真菌→昆虫→植物缺一不可的生物链。本发明的目的在于为解决上述问题，实施冬虫夏草野培，开发虫草产区人为难以模拟的最廉价的生境地理资源，激活该生物链的三大环节(菌、寄主、食物)，而提供一种高寒虫草产区冬虫夏草野培及殖被复新的方法。 

本发明采用的技术方案是：高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法， 其特征是呵护开发虫草道地产区最廉价的人为难以模拟的得天独厚的虫草生境资源，在产区增殖虫草菌和寄主虫草蝠蛾；增殖寄主蝠蛾幼虫喜食的29种高寒草甸和高寒灌丛草甸植物，采取栽培管理措施呵护脆弱生态植被；并尽力降低虫草菌、寄主(蛹、卵、虫、蛾)和虫草的现已知的83种天敌危害，确保冬虫夏草稳产、优质的这一珍稀物种。 

所述的高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法，其特征是该方法采用以下步骤： 

(1)实施地分区划片，4月中旬～5月底，各区育苗补栽、扦插、压条，增补寄主幼虫喜食植物，喷施营养生长调节剂和洒施营养肥料悬液两次(5月、6月各一次)，呵护植被； 

(2)采集子囊孢子或僵虫鲜体，及时在室内制备菌液待用； 

(3)在植被严重被寄主幼虫蚕食区，4月中旬～5月底带土挖蛹于育虫区，自然羽化；6月上旬～7月中旬，4h30min～7h30min捕获成虫于育虫区，提高该区蝠蛾密度，17h30min～20h30min人工辅助提高虫卵授精率和扩大产卵范围，并采取保湿措施提高虫卵孵化率，增加幼虫密度； 

(4)在虫菌感染区(生产区)5月中旬～7月中旬两次喷洒菌液，提高寄主感染机率，增加虫草数量，也可分片不分区，同步进行； 

(5)若土壤中发现康科格线蚓(Cognettia cogretti)、单齿线虫(Mononchus)异皮线虫(Heterodera)、小杆线虫(Rhabditis)、红斑郭公甲(Tricholes sinac)、横斑飘甲(Coccinelle)等，在菌液喷洒和寄主蛹羽化前10d～12d喷2～4％来苏儿于土表，减少天敌对虫草菌和寄主卵的危害：虫草蝠蛾有夜间集中迁栖习性，该范围采用风动机械驱赶天敌和洞边下毒饵的防治，减少鸟禽类、节肢动物、昆虫、两栖类、鼠蝠、鼠兔、獾、獭等天敌危害。 

所述的高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法，其特征所述虫草菌、寄主和植物的增殖(植)方法采用如下步骤： 

(1)菌液制备 

采集子囊孢子→无菌浸泡、离心收集→依次用15％～30％蔗糖溶液冲洗2～3次，再用40％蔗糖溶液离心收集浮面孢子→洗涤净化→无菌接种于《培养液》→控温16～22℃静置培养3～4d后吹氧培养2～4d，观察待用(于2～6℃)； 

或者采集3～4龄被感的染寄主幼虫(僵虫)鲜体→冲洗净化→消毒(1mg/kg升汞溶液消毒)→蒸馏水洗涤数次→无菌条件下取虫体白色组织压碎接种于培养液→控温静培与上同； 

《培养液》制备：葡萄糖15～20g，蛋白胨8～10g，KH₂PO₄0.03～0.05g， 

MgSO₄0.02～0.04g，NaCl0.2～0.6g，CaSO₄0.4～0.8g溶于 1升蒸馏水中，高压灭菌(118千帕压力)40min，冷却，无菌加入维生素B₁B₂各0.1～0.2g和酵母粉2～4g，混均待用； 

(2)寄主增殖：选用产区寄主当家种群或引种换代，分级(海拔高度)、分区(育虫区、虫菌感染区)，采用人工辅助措施提高虫卵授精率和扩大蝠蛾产卵范围，并采取保湿措施提高虫卵的孵化率，从而增加生产区虫卵密度； 

(3)虫草增殖：于虫菌感染区在寄主幼虫增殖的基础上，适时喷洒1～3次，3～5μl/L的待用菌液； 

(4)规范化培植高寒植被：因地制宜用养结合，采用种子繁殖、育苗补栽、扦插、压条等增补虫草蝠蛾幼虫喜食的29种高寒草甸植物，同时适时喷施自研的6～8μl/L的专用营养生长调节剂(ZL91102193.0)，和洒施300～500mg/Kg的专用肥(申请号99122188.5)悬浊液，呵护植被； 

(5)降低天敌危害：针对已知的虫草菌丝体、寄主蝠蛾(蛹、成虫、卵、幼虫)和虫草的天敌83种，以及天敌的危害方式：捕食、触杀、寄生、蚕食、破坏寄主幼虫栖居地等，采用风动机械驱赶或毒饵、2～4％来苏儿化学防治，尽力减轻其危害，制定较完善的天敌防范措施。 

多年来，为虫草野培寻求理论依据和措施，探索虫草菌寄主的生活史，食物、天敌、生态环境(土壤、气候、植被)，分布及指示动植物等，于川、青、藏虫草产区调研，定点观察、取样化验分析，野外培殖(植)，摸索出较为成熟的技术和资料积累，初步因地制宜补增寄主幼虫喜食的29种高寒草甸植物，如：蓼科珠芽蓼、头花蓼、小大黄、玄参科马先蒿、禾本科狭穗针茅、莎草科苔草、豆科鬼箭锦鸡儿、黄芪科青海黄芪、百合科波氏贝母、蔷薇科金露梅、杜鹃花科百里香叶杜鹃、菊科车前状垂头菊等；并喷施研制的专用营养生长调节剂和专用肥，呵护高寒产区脆弱的高寒植被。同时采用措施尽力降低虫草菌、寄主蝠蛾(蛹、卵、幼虫、成虫)和虫草的现已知的83种天敌危害，如：肩部甲虫、马陆、惊蚁取食寄主；康科格线蚓取食虫草真菌；线虫、姬蜂寄生；雪鸡捕食蛹、蛾、还啄食出土虫草；蠼螋蚕食虫草等。 

本发明的优点和效果是： 

高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法，保护和改善脆弱的高寒草甸植被，是冬虫夏草野培产业化可持续发展的基础保障。这不尽确保虫草稳产、优质这一珍稀物种，而且也是三江源虫草主产区(青、川、藏、滇)生态转产农牧民长远生计措施之一。 

在实施区第二年对实施区“框控”检测：一、采用200m×30m框控检测虫菌感染区与相同生境无处理的对照区(CK)，三次重复，虫菌感染区比对照采集虫草增加5.3～10.8％；二、采用20m×20m框控检测植被复盖度，三次重复， 实施区(虫菌感染区、育虫区)比对照区(CK)植被复盖度增加10.0～12.0％。 

本发明激发了道地产区冬虫夏草生物链活性，呵护了高寒植被，确保了冬虫夏草稳产、优质这一珍稀物种，这也是虫草产区生态转产农牧民靠山吃山的长远生计。 

具体实施方式

以下结合实例对本发明作进一步详述： 

实施地属黄河流域，于昆仑山支脉阿尼玛卿山区，阴坡，海拔3848～3900m，历来是虫草少产区，土壤属高山灌丛草甸土，PH7.6，有机质含量16.6％，全氮0.764％，全磷0.16％，速N588.5mg/Kg，速P21mg/Kg，水份7.76％，容重rs2.14g/cm³；寄主幼虫食物链优势种有金露梅(Dasiphora fruticosa)、箭叶锦鸡儿(Caragana jubata)、山生柳(Saiix Dritrepha schncid)、百里香叶杜鹃(R.thymifolium.Maxim)；气象资料：平均气温0.7℃、最低温-13.3℃、年平均降水434.0(mm)、年平均相对湿度55％。 

本发明的高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法，采用以下步骤： 

(1)实施地分区划片，4月中旬～5月底，各区育苗补栽、扦插、压条、增补寄主幼虫喜食植物，喷施营养生长调节剂和洒施营养肥料悬液两次(5月、6月各一次)，呵护植被； 

(2)采集子囊孢子或僵虫鲜体，及时在室内制备菌液，待用； 

(3)在植被严重被寄主幼虫蚕食区，4月中旬～5月底带土挖蛹于育虫区，自然羽化；6月上旬～7月中旬，4h30min～7h30min捕获成虫于育虫区，提高该区蝠蛾密度。17h30min～20h30min人工辅助提高虫卵授精率和扩大产卵范围，并采取保湿措施提高虫卵孵化率，增加幼虫密度； 

(4)在虫菌感染区(生产区)5月中旬～7月中旬两次喷洒菌液，提高寄主感染机 率，增加虫草数量。也分片不分区，同时进行。 

(5)若土壤中发现康科格线蚓、单齿线虫、异皮线虫、小杆线虫、红斑郭公甲、横斑飘甲等，在菌液喷洒和寄主蛹羽化前10d～12d，喷2～4％来苏儿于土表面，减少对虫草菌和寄主卵的危害，虫草蝠蛾有夜间集中迁栖的习性，该范围采用风动机械驱赶天敌和洞边下毒饵的防治，减少鸟禽类、节肢动物、昆虫、两栖类、鼠蝠、鼠兔、獾、獭等天敌危害。 

本发明激发了道地产区冬虫夏草生物链的活性，呵护了高寒植被，确保了冬虫夏草稳产、优质这一珍稀物种，这也是虫草产区生态转产农牧民靠山吃山的长远生计。 

Claims (2)

1.一种高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法，为呵护开发虫草道地产区最廉价的人为难以模拟的得天独厚的虫草生境资源，在产区增殖虫草菌和寄主虫草蝠蛾；增植寄主蝠蛾幼虫喜食的29种高寒草甸和高寒灌丛草甸植物，采取栽培管理措施呵护脆弱生态植被；并尽力降低虫草菌、寄主和虫草的现已知的83种天敌危害，所述寄主是：蛹、卵、虫、蛾四种形态，确保冬虫夏草稳产、优质的这一珍稀物种，

其特征是：该方法采用以下步骤：

(1)实施地分区划片，4月中旬～5月底，各区育苗补栽、扦插、压条，增补寄主幼虫喜食植物，喷施营养生长调节剂和洒施营养肥料悬液两次、5月、6月各一次，呵护植被；

(2)采集子囊孢子或僵虫鲜体，及时在室内制备菌液，待用；

(3)在植被严重被寄主幼虫蚕食区于4月中旬～5月底带土挖蛹于育虫区，自然羽化；6月上旬～7月中旬，4：30～7：30捕获成虫于育虫区，提高该区蝠蛾密度；17：30～20：30人工辅助提高受精率和扩大产卵范围，并采取保湿措施提高虫卵孵化率，增加幼虫密度；

(4)在虫菌感染区5月中旬～7月中旬两次喷洒菌液，提高寄主感染机率，增加虫草数量；

(5)若土壤中发现康科格线蚓(Cognettia cogretti)、单齿线虫(Mononchus)、异皮线虫(Heterodera)、小杆线虫(Rhabditis)、红斑郭公甲(Tricholes sinac)、横斑飘甲(Coccinelle geminpunetata)，在菌液喷洒和寄主蛹羽化前10d～12d喷2～4％来苏儿于土表，减少天敌对虫草菌和寄主卵的危害；虫草蝠蛾有夜间集中迁徙习性，迁徙范围内采用风动机械驱赶天敌和洞边下毒饵的防治，减少鸟禽类、节肢动物、两栖类、鼠耳蝠、鼠兔、獾、獭天敌危害。

2.根据权利要求1所述的高寒虫草产区冬虫夏草野培及植被复新的方法，其特征是：所述虫草菌、寄主和植物的增殖／植方法采用如下步骤：

(1)菌液制备

采集子囊孢子→无菌浸泡、离心收集→依次用15％～30％蔗糖溶液冲洗2～3次，再用40％蔗糖溶液离心收集浮面孢子→洗涤净化→无菌接种于培养液，控温16～22℃静置培养3～4d后吹氧培养2～4d，于2-6℃下观察待用；或者采集3～4龄被感染的寄主幼虫鲜体→冲洗净化→1mg／kg升汞溶液消毒→蒸馏水洗涤数次→无菌条件下取虫体白色组织压碎接种于培养液→控温静培与上同；

培养液制备：葡萄糖15～20g，蛋白胨8～10g，KH₂PO₄0.03～0.05g，

MgSO₄0.02～0.04g，NaCl0.2～0.6g，CaSO₄0.4～0.8g溶于1升蒸馏水中，在118千帕压力下高压灭菌40min，冷却，无菌加入维生素B₁、B₂各0.1～0.2g和酵母粉2～4g，混均待用；

(2)寄主增殖：选用产区寄主当家种群或引种换代，按海拔高度分级，分育虫区、虫菌感染区；采用人工辅助措施提高受精率和扩大蝠蛾产卵范围，并采取保湿措施提高虫卵的孵化率，从而增加生产区虫卵密度；

(3)虫草增殖：于虫菌感染区在寄主幼虫增殖的基础上，适时喷洒1～3次，3～5μl／L的待用菌液；

(4)规范化培植高寒植被：因地制宜用养结合，采用种子繁殖、育苗补栽、扦插、压条增补虫草蝠蛾幼虫喜食的29种高寒草甸植物，同时适时喷施6～8μl／L的营养生长调节剂和洒施300～500mg／Kg的营养肥料悬液，呵护植被；

(5)降低天敌危害：针对已知危害虫草菌丝体，寄主蝠蛾的蛹、成虫、卵、幼虫和虫草的83种天敌，以及天敌的危害方式：捕食、触杀、寄生、蚕食、破坏寄主幼虫栖居地，而采用风动机械驱赶或毒饵、2～4％来苏儿化学防治，尽力减轻其危害，制定较完善的天敌防范措施。