CN101613734B - 血浆多肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种血浆多肽的制备方法:它是将动物血液经过细胞破壁,混合溶解,灭菌,胰蛋白酶、碱式蛋白酶和木瓜蛋白酶三种酶酶解和酶失活后,再通过分子膜过滤器过滤和喷雾干燥,得到血浆多肽粉剂。该制备方法操作简单,可在常温常压下进行,节能环保,成本低廉,血浆多肽的提取效率高,产品多肽含量高,极大地提高了动物蛋白的消化和转化率。
Description
技术领域
本发明涉及生物工程技术领域,尤其是以动物血液为原料制备血浆多肽的方法。
技术背景
动物血液是一种宝贵蛋白资源,具有很高的营养价值,其用途广泛,适用于饲料、食品、保健品等,市场需求量大,前景广阔,产品价值高。目前国外内对血粉的研究较多,血粉的传统利用方法有蒸煮法、热变性处理法及喷雾干燥法等,较为现代的方法有酸水解法、发酵法和酶解法。酸水解法是利用酸来水解畜血蛋白,提高了血粉的消化率,但是却破坏了血粉中的一种必需氨基酸一一色氨酸;发酵法是将特定的微生物菌种接入血粉与透气性好的辅料(如米糠、豆饼粉、菜粕等)组成的混合原料中,让菌种在堆积原料中自然发酵产酶而达到水解血粉的目的。但是这种方法发酵降解血粉原料不完全。如何更好地开发动物血浆资源,使其丰富的营养得到更充分的利用,同时最大限度地减少对环境的污染,是国内众多专家关注的焦点。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供一种成本低廉、产品收率高、多肽含量高的血浆多肽的制备方法。
本发明血浆多肽的制备方法包括以下几个步骤:
(a)将冷冻结块的动物血液缓化,用离心机分离成血浆和血球;
(b)将血球原料液用大功率超声波破碎机进行细胞破壁;
(c)将血浆与破壁血球混合后加水溶解,形成血浆血球混合溶液;
(d)将血浆血球混合溶液加热到80~100℃,保温20~50分钟灭菌;
(e)将经过灭菌的血浆血球混合溶液温度降到37~40℃,加入胰蛋白酶,保温酶解2~4小时;
(f)将经过胰蛋白酶酶解后的血浆血球混合溶液加热到45~50℃,加入碱式蛋白酶,保温酶解4~6小时;
(g)将经过碱式蛋白酶酶解后的血浆血球混合溶液加热到55~65℃,加入木瓜蛋白酶,保温酶解7~9小时;
(h)将经过三种酶解完成后的血浆血球混合溶液加热到80~100℃,保温10~40分钟,使酶失活;
(i)将经过使酶失活处理后得到的血浆血球混合溶液通过分子膜过滤器过滤,得到血浆多肽浓缩液;
(j)将血浆多肽浓缩液在180℃~200℃下进行喷雾干燥,得到血浆多肽粉剂。
步骤(i)所述的通过分子膜过滤器过滤,它包括两次过滤,第一次经过10000道尔顿的分子膜过滤,第二次经过1000道尔顿的分子膜过滤。
本发明所述的动物血液可以是猪血、牛血、羊血、鸭血和鸡血中的一种或几种。
本发明喷雾干燥时的进风温度为180~220℃,出风温度为70~80℃,而且血浆多肽浓缩液在待干燥过程中保持搅拌。
本发明具有如下优点:1、本发明提供的制备方法在常温常压下进行;2、血浆多肽的提取效率高:酶解液通过截留分子量为1000道尔顿的分子膜进行分子筛分从而保证产品的肽含量达到80%以上。3、操作简单,易实现自动化控制。4、本发明环保。工艺彻底摒弃了以往的有机溶剂提纯方法,操作过程中对人员和周围环境不产生危害。5、本工艺大大加强了动物蛋白的消化和转化率。
具体实施方式
实施例1:一种血浆多肽的制备方法,包括以下几个步骤:(a)将冷冻结块的鸡血液缓化,用离心机分离成血浆和血球;(b)将血球原料液用大功率超声波破碎机进行细胞破壁;(c)将血浆与破壁血球混合后加水溶解,形成血浆血球混合溶液;(d)将血浆血球混合溶液加热到85℃,保温30分钟灭菌;(e)将经过灭菌的血浆血球混合溶液温度降到38℃,加入胰蛋白酶,保温酶解3小时;(f)将经过胰蛋白酶酶解后的血浆血球混合溶液加热到48℃,加入碱式蛋白酶,保温酶解5小时;(g)将经过碱式蛋白酶酶解后的血浆血球混合溶液加热到60℃,加入木瓜蛋白酶,保温酶解8小时;(h)将经过三种酶解完成后的血浆血球混合溶液加热到90℃,保温20分钟使酶失活;(i)将经过使酶失活处理后得到的血浆血球混合溶液通过分子膜过滤器过滤,第一次经过10000道尔顿的分子膜过滤,第二次经过1000道尔顿的分子膜过滤,得到血浆多肽浓缩液;(j)将血浆多肽浓缩液在190℃下进行喷雾干燥,得到血浆多肽粉剂。
实施例2:一种血浆多肽的制备方法,包括以下几个步骤:(a)将冷冻结块的猪血液缓化,用离心机分离成血浆和血球;(b)将血球原料液用大功率超声波破碎机进行细胞破壁;(c)将血浆与破壁血球混合后加水溶解,形成血浆血球混合溶液;(d)将血浆血球混合溶液加热到90℃,保温20分钟灭菌;(e)将经过灭菌的血浆血球混合溶液温度降到39℃,加入胰蛋白酶,保温酶解3.5小时;(f)将经过胰蛋白酶酶解后的血浆血球混合溶液加热到50℃,加入碱式蛋白酶,保温酶解4小时;(g)将经过碱式蛋白酶酶解后的血浆血球混合溶液加热到62℃,加入木瓜蛋白酶,保温酶解7小时;(h)将经过三种酶解完成后的血浆血球混合溶液加热到85℃,保温30分钟使酶失活;(i)将经过使酶失活处理后得到的血浆血球混合溶液通过分子膜过滤器过滤,第一次经过10000道尔顿的分子膜过滤,第二次经过1000道尔顿的分子膜过滤,得到血浆多肽浓缩液;(j)将血浆多肽浓缩液在200℃下进行喷雾干燥,得到血浆多肽粉剂。
Claims (4)
1.一种血浆多肽的制备方法,其特征在于,该方法包括以下几个步骤:
(a)将冷冻结块的动物血液缓化,用离心机分离成血浆和血球;
(b)将血球原料液用大功率超声波破碎机进行细胞破壁;
(c)将血浆与破壁血球混合后加水溶解,形成血浆血球混合溶液;
(d)将血浆血球混合溶液加热到80~100℃,保温20~50分钟灭菌;
(e)将经过灭菌的血浆血球混合溶液温度降到37~40℃,加入胰蛋白酶,保温酶解2~4小时;
(f)将经过胰蛋白酶酶解后的血浆血球混合溶液加热到45~50℃,加入碱式蛋白酶,保温酶解4~6小时;
(g)将经过碱式蛋白酶酶解后的血浆血球混合溶液加热到55~65℃,加入木瓜蛋白酶,保温酶解7~9小时;
(h)将经过三种酶解完成后的血浆血球混合溶液加热到80~100℃,保温10~40分钟,使酶失活;
(i)将经过使酶失活处理后得到的血浆血球混合溶液通过分子膜过滤器过滤,得到血浆多肽浓缩液;
(j)将血浆多肽浓缩液在180℃~200℃下进行喷雾干燥,得到血浆多肽粉剂。
2.按照权利要求1所述的血浆多肽的制备方法,其特征在于:步骤(i)所述的通过分子膜过滤器过滤,它包括两次过滤,第一次经过10000道尔顿的分子膜过滤,第二次经过1000道尔顿的分子膜过滤。
3.按照权利要求1或2所述的血浆多肽的制备方法,其其特征在于:所述的动物血液是猪血、牛血、羊血、鸭血和鸡血中的一种或几种。
4.按照权利要求1或2所述的血浆多肽的制备方法,其特征在于:所述喷雾干燥时的进风温度为180~220℃,出风温度为70~80℃,而且血浆多肽浓缩液在待干燥过程中保持搅拌。
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