因此,本发明涉及一种组合物,其包含:
a)通式(I)的化合物
其中:
A表示选自下组的取代基:-C(O)-、-C(S)-、-CH2-、-CHR10-、-CR10R11-、-C(O)O-、-C(O)S-、-C(S)O-、-C(S)S-、-C(O)NH-、-C(NH)NH-和-C(S)NH-;
·亚芳基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚芳基;
·亚萘基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚萘基;
·衍生自分别含有5个或6个原子的二环稠合的芳环的二价基团;
·衍生自分别含有5个或6个原子并含有1或2个选自氮、氧或硫的杂原子的二环稠合的芳环或杂芳环的二价基团;
·亚联苯基;
·或含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚联苯基;
这些基团可以被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
C表示选自下组的取代基:-O-、-S-、-CH2-、-CHR17-、-CR17R18-和-NR19;
D表示含2-20个碳原子的直链或支链、饱和或不饱和烃基链;
E和G各自独立地表示选自下组的取代基:H、OH、OR20、NH2和NHR20;
R1表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、C(O)H和C(O)CH3;
R2、R3、R6、R14、R15、R16和R19各自独立地表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、C(O)C1-6-烷基、-C(S)C1-6-烷基、-C(O)OC1-6-烷基、-C(O)NH2、-C(S)NH2、-C(NH)NH2、-C(O)NHC 1-6-烷基、-C(S)NHC1-6-烷基和-C(NH)NHC1-6-烷基;
R4表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基和R21;
R5表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、岩藻糖基(fucosyl)和R22;
R7表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、阿拉伯糖基和R23;
R8表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、岩藻糖基、甲基岩藻糖基、磺基岩藻糖基、乙酰基岩藻糖基、阿拉伯糖基、SO3H、SO3Li、SO3Na、SO3K、SO3N(C1-8烷基)4和R24;
R9表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、甘露糖、丙三醇和R25;
R10、R11、R17和R18各自独立地表示选自下组的取代基:C1-6-烷基和F;
R20、R21、R22、R23、R24和R25各自独立地表示选自下组的取代基:C(O)C1-6-烷基、-C(S)C1-6-烷基、-C(O)OC1-6-烷基、-C(O)NH2、-C(S)NH2、-C(NH)NH2、-C(O)NHC1-6-烷基、-C(S)NHC1-6-烷基和-C(NH)NHC1-6-烷基;
及其农业上可接受的可能的几何和/或光学异构体、对映异构体和/或非对映异构体、互变异构体、盐、N-氧化物、亚砜、砜以及金属或准金属(metalloid)络合物,在上文定义的化合物中,最重要的化合物是盐,尤其是锂盐、钠盐、钾盐或四烷基铵盐;
和
b)杀真菌剂化合物;
其中(a)/(b)的重量比为1/1-1/1014。
依据本发明的组合物提供一种协同效应。该协同效应减少了化学物散布到环境中,并降低了杀真菌处理的成本。
在本发明的叙述中,术语“协同效应”依据题为″除草剂组合物的协同和拮抗反应的计算(Calculation ofthe synergistic and antagonistic responses ofherbicide combinations)″Weeds,(1967),15,第20-22页的文章由Colby定义。
上述文章中提到方程式:
其中E表示两种杀菌剂以特定剂量(例如,分别等于x和y)组合对疾病的预期抑制百分率,x是观察到的特定剂量(等于x)的化合物(I)对疾病的抑制百分率,y是观察到的特定剂量(等于y)的化合物(II)对疾病的抑制百分率。当观察到的组合的抑制百分率大于E时,表明有协同效应。
依据本发明的组合物包含通式(I)的化合物。在本发明的一个具体实施方式中,通式(I)的化合物单独或组合具有以下一个或多个特征:
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在这些化合物中,优选的是同时具有以下特征的通式(I)的化合物:
R1表示H、CH3或C(O)CH3;
R2、R3、R5、R6、R7和R9表示H;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
n表示2或3;
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
最优选的是同时具有以下特征的通式(I)的化合物:
C表示-O-;
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在这些优选的化合物中,可提及的是同时具有以下特征的通式(I)的化合物:
D表示含11个碳原子的直链烃基链,其可以是饱和的或在第4和第5个碳原子之间是不饱和的;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在本发明的组合物中,特别有利的是包含可用通式(Ia)表示的其中A表示羰基的化合物(I)的组合物:
其中
·亚芳基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚芳基;
·亚萘基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚萘基;
·衍生自分别含5个或6个原子的二环稠合的芳环的二价基团;
·衍生自分别含5个或6个原子并含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的二环稠合的杂芳环的二价基团,和;
·亚联苯基;
·或含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚联苯基;这些基团可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
C表示选自下组的取代基:-O-、-S-、-CH
2-、-CHR
17-、-CR
17R
18-、-NH-和-NR
19;
D表示含2-20个碳原子的直链或支链、饱和或不饱和烃基链;
E和G各自独立地表示选自下组的取代基:H、OH、OR
20、NH
2和NHR
20;
R
1表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、C(O)H和C(O)CH
3;
R
2、R
3和R
6各自独立地表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
R
4表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基和R
21;
R
5表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基和R
22;
R
7表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、阿拉伯糖基和R
23;
R
8表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基、甲基岩藻糖基、磺基岩藻糖基、乙酰基岩藻糖基、阿拉伯糖基、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4和R
24;
R
9表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、甘露糖、丙三醇和R
25;
R
10、R
11、R
17和R
18各自独立地表示选自下组的取代基:C
1-6-烷基和F;
R
14、R
15、R
16和R
19各自独立地表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、-C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
R
20、R
21、R
22、R
23、R
24和R
25各自独立地表示选自下组的取代基:C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
及其农业上可接受的可能的几何和/或光学异构体、对映异构体和/或非对映异构体、互变异构体、盐、N-氧化物、亚砜、砜以及金属或准金属络合物。在上文定义的化合物中,最重要的化合物是盐,尤其是锂盐、钠盐、钾盐或四烷基铵盐。
在这些通式(Ia)的化合物中,优选的是独立或组合地具有以下特征的那些化合物:
B表示亚苯基;
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R1表示H或CH3;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
R4表示H、C(O)CH3或C(O)NH2;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在这些通式(Ia)的化合物中,更优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R4表示H、C(O)CH3或C(O)NH2;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
或者那些同时具有以下特征的化合物:
D表示含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或者在第4个碳原子和第5个碳原子之间是不饱和的;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在本发明的组合物中,特别有利的是包含可用通式(Ib)表示的其中A表示亚甲基的化合物(I)的组合物:
其中
·亚芳基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚芳基;
·亚萘基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚萘基;
·衍生自分别含5个或6个原子的二环稠合的芳环的二价基团;
·衍生自分别含5个或6个原子并含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的二环稠合的芳环或杂芳环的二价基团;
·亚联苯基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚联苯基;
这些基团可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
C表示选自下组的取代基:-O-、-S-、-CH
2-、-CHR
17-、-CR
17R
18-、-NH-和-NR
19;
D表示含2-20个碳原子的直链或支链、饱和或不饱和的烃基链;
E和G各自独立地表示选自下组的取代基:H、OH、OR
20、NH
2和NHR
20;
R
1表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、C(O)H和C(O)CH
3;
R
2、R
3和R
6各自独立地表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、C(S)NH
2、C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
R
4表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基和R
21;
R
5表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基和R
22;
R
7表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、阿拉伯糖基和R
23;
R
8表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基、甲基岩藻糖基、磺基岩藻糖基、乙酰基岩藻糖基、阿拉伯糖基、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4和R
24;
R
9表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、甘露糖、丙三醇和R
25;
R
10、R
11、R
17和R
18各自独立地表示选自下组的取代基C
1-6-烷基和F;
R
14、R
15、R
16和R
19各自独立地表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、-C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
R
20、R
21、R
22、R
23、R
24和R
25各自独立地表示选自下组的取代基:C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
及其农业上可接受的可能的几何和/或光学异构体、对映异构体和/或非对映异构体、互变异构体、盐、N-氧化物、亚砜、砜以及金属或准金属络合物。在上文定义的化合物中,最重要的化合物是盐,尤其是锂盐、钠盐、钾盐或四烷基铵盐。
在这些通式(Ib)的化合物中,优选的是独立或组合地具有以下特征的化合物:
n表示2或3;
C表示-O-;
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
E和G表示NHC(O)CH3;
R1表示H或C(O)CH3;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
E和G表示NHC(O)CH3;
R4表示H、C(O)CH3或C(O)NH2;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在这些通式(Ib)的化合物中,更优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R8表示H、SO3H、SO3Li、SO3Na、SO3K、SO3N(C1-8烷基)4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
或同时具有以下特征的那些化合物:
C表示-O-;
D表示含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或在第4个碳原子与第5个碳原子之间是不饱和的;
R1表示H或C(O)CH3;
R4表示H、C(O)CH3或C(O)NH2;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在本发明的组合物中,包含可用通式(Ic)表示的其中C表示氧原子的化合物(I)的组合物也是特别有利的:
其中:
A表示选自下组的取代基:-C(O)-、-C(S)-、-CH
2-、-CHR
10-、-CR
10R
11-、-C(O)O-、-C(O)S-、-C(S)O-、-C(S)S-,-C(O)NH-,-C(NH)NH-和-C(S)NH-,优选是-C(O)-;
·亚芳基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚芳基;
·亚萘基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚萘基;
·衍生自分别含5个或6个原子的二环稠合的芳环的二价基团;
·衍生自分别含5个或6个原子并含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的二环稠合的芳环或杂芳环的二价基团;
·亚联苯基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚联苯基;
这些基团可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
D表示含2-20个碳原子的直链或支链、饱和或不饱和烃基链,优选是含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或在第4个碳原子与第5个碳原子之间是不饱和的;
E和G各自独立地表示选自下组的取代基:H、OH、OR
20、NH
2和NHR
20,优选的是NHC(O)CH
3;
R1表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、C(O)H和C(O)CH3,优选的是H或CH3;
R
2、R
3和R
6各自独立地表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、-C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;优选的是H;
R
4表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基和R
21,优选的是H、C(O)CH
3或C(O)NH
2;
R
5表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基和R
22,优选的是H;
R
7表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、阿拉伯糖基和R
23,优选的是H;
R
8表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基、甲基岩藻糖基、磺基岩藻糖基、乙酰基岩藻糖基、阿拉伯糖基、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4和R
24,优选的是H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
R
9表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、甘露糖、丙三醇和R
25,优选的是H;
R
10、R
11、R
17和R
18各自独立地表示选自下组的取代基:C
1-6-烷基和F;
R14、R15、R16和R19各自独立地表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、-C(O)C1-6-烷基、-C(S)C1-6-烷基、-C(O)OC1-6-烷基、-C(O)NH2、-C(S)NH2、-C(NH)NH2、-C(O)NHC1-6-烷基、-C(S)NHC1-6-烷基和-C(NH)NHC1-6-烷基;
R20、R21、R22、R23、R24和R25各自独立地表示选自下组的取代基:C(O)C1-6-烷基、-C(S)C1-6-烷基、-C(O)OC1-6-烷基、-C(O)NH2、-C(S)NH2、-C(NH)NH2、-C(O)NHC1-6-烷基、-C(S)NHC1-6-烷基和-C(NH)NHC1-6-烷基;
及其农业上可接受的可能的几何和/或光学异构体、对映异构体和/或非对映异构体、互变异构体、盐、N-氧化物、亚砜、砜以及金属或准金属络合物。在上文定义的化合物中,最重要的化合物是盐,尤其是锂盐、钠盐、钾盐或四烷基铵盐。
在通式(Ic)的化合物,优选的是独立或组合地具有以下一种或多种特征的化合物:
B表示亚苯基;
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是那些同时具有以下特征的化合物:
E和G表示NHC(O)CH3;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是那些同时具有以下特征的化合物:
A表示-C(O)-或-CH2-;
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R1表示H、CH3或C(O)CH3;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
最优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
B表示亚苯基;
D表示含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或在第4个碳原子与第5个碳原子之间是不饱和的;
R8表示H、SO3H、SO3Li、SO3Na、SO3K、SO3N(C1-8烷基)4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在本发明的组合物中,最特别有利的是包含可用通式(Id)表示的其中A表示羰基、C表示氧原子的化合物(I)的组合物:
其中
n表示1、2或3,优选是2或3;
·亚芳基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚芳基;
·亚萘基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚萘基;
·衍生自分别含5个或6个原子的二环稠合的芳环的二价基团;
·衍生自分别含5个或6个原子并含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的二环稠合的芳环或杂芳环的二价基团;
·亚联苯基;
·或含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚联苯基;
这些基团可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
D表示含2-20个碳原子的直链或支链、饱和或不饱和的烃基链,优选是含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或在第4个碳原子与第5个碳原子之间是不饱和的;
E和G各自独立地表示选自下组的取代基:H、OH、OR
20、NH
2和NHR
20,优选是NHC(O)CH
3;
R
1表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、C(O)H和C(O)CH
3,优选的是H或CH
3;
R
2、R
3和R
6各自独立地表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、-C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;优选是H;
R
4表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基和R
21,优选是H、C(O)CH
3或C(O)NH
2;
R
5表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基和R
22,优选是H;
R
7表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、阿拉伯糖基和R
23,优选是H;
R
8表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基、甲基岩藻糖基、磺基岩藻糖基、乙酰基岩藻糖基、阿拉伯糖基、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4和R
24,优选的是H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
R
9表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、甘露糖、丙三醇和R
25,优选的是H;
R
10、R
11、R
17和R
18各自独立地表示选自下组的取代基:C
1-6-烷基和F;
R
14、R
15、R
16和R
19各自独立地表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、-C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
R
20、R
21、R
22、R
23、R
24和R
25各自独立地表示选自下组的取代基:-C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
及其农业上可接受的可能的几何和/或光学异构体、对映异构体和/或非对映异构体、互变异构体、盐、N-氧化物、亚砜、砜以及金属或准金属络合物。在上文定义的化合物中,最重要的化合物是盐,尤其是锂盐、钠盐、钾盐或四烷基铵盐。
在通式(Id)的化合物中,优选的是独立或组合地具有以下一种或多种特征的化合物:
n表示2或3;
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是同时具有以下特征的那些化合物:
E和G表示NHC(O)CH3;
R1表示H或CH3;
R4表示H、C(O)CH3或C(O)NH2;
R8表示H、SO3H、SO3Li、SO3Na、SO3K、SO3N(C1-8烷基)4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是那些同时具有以下特征的化合物:
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R8表示H、SO3H、SO3Li、SO3Na、SO3K、SO3N(C1-8烷基)4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
最优选的是那些同时具有以下特征的化合物:
D表示含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或在第4个碳原子与第5个碳原子之间是不饱和的;
E和G表示NHC(O)CH3;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在本发明的组合物中,最特别有利的还包括包含可用通式(Ie)表示的其中A表示亚甲基、C表示氧原子的化合物(I)的组合物,
其中
·亚芳基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚芳基;
·亚萘基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚萘基;
·衍生自分别含5个或6个原子的二环稠合的芳环的二价基团;
·衍生自分别含5个或6个原子并含1个或2个选自氮、氧或硫的
杂原子的二环稠合的芳环的二价基团;
·亚联苯基;
·或含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚联苯基;
这些基团可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
D表示含2-20个碳原子的直链或支链、饱和或不饱和的烃基链,优选是含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或在第4个碳原子与第5个碳原子之间是不饱和的;
E和G各自独立地表示选自下组的取代基:H、OH、OR
20、NH
2和NHR
20,优选是NHC(O)CH
3;
R1表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、C(O)H和C(O)CH3,优选是H或CH3;
R2、R3和R6各自独立地表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、C(O)C1-6-烷基、-C(S)C1-6-烷基、-C(O)OC1-6-烷基、-C(O)NH2、-C(S)NH2、-C(NH)NH2、-C(O)NHC1-6-烷基、-C(S)NHC1-6-烷基和-C(NH)NHC1-6-烷基;优选是H;
R
4表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基和R
21,优选是H、C(O)CH
3或C(O)NH
2;
R
5表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基和R
22,优选是H;
R
7表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、阿拉伯糖基和R
23,优选是H;
R
8表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、岩藻糖基、甲基岩藻糖基、磺基岩藻糖基、乙酰基岩藻糖基、阿拉伯糖基、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4和R
24,优选的是H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
R
9表示选自下组的取代基:H、C
1-6-烷基、甘露糖、丙三醇和R
25,优选的是H;
R
10、R
11、R
17和R
18各自独立地表示选自下组的取代基:C
1-6-烷基和F;
R14、R15、R16和R19各自独立地表示选自下组的取代基:H、C1-6-烷基、-C(O)C1-6-烷基、-C(S)C1-6-烷基、-C(O)OC1-6-烷基、-C(O)NH2、-C(S)NH2、-C(NH)NH2、-C(O)NHC1-6-烷基、-C(S)NHC1-6-烷基和-C(NH)NHC1-6-烷基;
R
20、R
21、R
22、R
23、R
24和R
25各自独立地表示选自下组的取代基:C(O)C
1-6-烷基、-C(S)C
1-6-烷基、-C(O)OC
1-6-烷基、-C(O)NH
2、-C(S)NH
2、-C(NH)NH
2、-C(O)NHC
1-6-烷基、-C(S)NHC
1-6-烷基和-C(NH)NHC
1-6-烷基;
及其农业上可接受的可能的几何和/或光学异构体、对映异构体和/或非对映异构体、互变异构体、盐、N-氧化物、亚砜、砜以及金属或准金属络合物。在上文定义的化合物中,最重要的化合物是盐,尤其是锂盐、钠盐、钾盐或四烷基铵盐。
在通式(Ie)的化合物中,优选的是独立或组合地具有以下一个或多个特征的化合物:
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
R1表示H或C(O)CH3;
R4表示H、C(O)CH3或C(O)NH2;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是那些同时具有以下特征的化合物:
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
更优选的是那些同时具有以下特征的化合物:
D表示含3-17个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;
E和G表示NHC(O)CH3;
R1表示H或C(O)CH3;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基;
最优选的是那些同时具有以下特征的化合物:
B表示亚苯基;
D表示含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或在第4个碳原子与第5个碳原子之间是不饱和的;
R
8表示H、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K、SO
3N(C
1-8烷基)
4、岩藻糖基或甲基岩藻糖基。
在包含本发明的通式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)的化合物的组合物中,优选的是具有以下特征的化合物:
其中R12和R13表示各自独立地选自下组的两个取代基:卤素、CN、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基。
在依据本发明的通式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)的化合物中,优选的是那些具有以下特征的化合物:
·亚芳基;
·含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚芳基;
·亚萘基;
·或含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚萘基;
这些基团可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
优选是具有以下特征的那些化合物:
·亚芳基;
·或含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚芳基;
这些基团可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
更优选是具有以下特征的那些化合物:
·亚苯基;
·或含1个或2个选自氮、氧或硫的杂原子的杂亚苯基;
这些基团可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R12和R13取代:卤素、CN、C(O)OR14、C(O)NR15R16、CF3、OCF3、-NO2、N3、OR14、SR14、NR15R16和C1-6-烷基;
尤其可提及的是具有以下特征的那些化合物:
B表示可被各自独立地选自下组的一个或两个取代基R
12和R
13取代的亚苯基B1:卤素、CN、CF
3、OCF
3、-NO
2、N
3、OR
14、SR
14、NR
15R
16和C
1-6-烷基。
在优选的本发明组合物中,还可提及的是包含独立或组合地具有以下特征中的一个的化合物(I)的组合物:
A表示-C(O)-或-CH2-;
C表示-O-;
R
4表示选自下组的取代基:H、C(O)CH
3和C(O)NH
2;
R
8选自下组的取代基:H、岩藻糖基、甲基岩藻糖基、磺基岩藻糖基、乙酰基岩藻糖基、阿拉伯糖基、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K和SO
3N(C
1-8烷基)
4;
更优选的是那些具有以下特征组合的化合物:
n=2或3;
A表示-C(O)-或-CH2-;
D表示含7-15个碳原子的直链、饱和或不饱和的烃基链;优选的是依据以下通式之一的烃基链:
其中
·m=1-12
·p=0-11
·q=6-14
·s=5-13
·其中m+p≤12且m+p≥4;更优选的是依据以下通式之一的烃基链:
其中
·m=1-12
·p=0-11
·q=6-14
·其中m+p≤12且m+p≥4;最优选的是含11个碳原子的直链烃基链,其是饱和的或在第4个碳原子和第5个碳原子之间是不饱和的;
E和G表示NHC(O)CH3;
R
4表示选自下组的取代基:H、C(O)CH
3和C(O)NH
2;
R
8表示选自下组的取代基:H、岩藻糖基、甲基岩藻糖基、磺基岩藻糖基、乙酰基岩藻糖基、阿拉伯糖基、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K和SO
3N(C
1-8烷基)
4:
尤其是R8表示H、SO3H、SO3Li、SO3Na、SO3K、SO3N(C1-8烷基)4或以下通式的取代基的化合物:
其中
R26表示选自H或CH3的取代基,优选是H;
R
27和R
28各自独立地表示选自下组的取代基:H、C(O)CH
3、SO
3H、SO
3Li、SO
3Na、SO
3K和SO
3N(C
1-8烷基)
4,优选R
27和R
28表示H。
作为本发明组合物的例子,特别有利和优选的是包含选自以下通式化合物的列L1的化合物:
其中,当存在M时,M表示选自下组的阳离子:H+、Li+、Na+、K+和(C1-8烷基)4N+。
除了刚才具体描述的本发明的组合物,对通式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)和(Ie)进行合理取代的组合的变体也构成了本发明的一部分。
已知不含脂质链的几丁质寡聚物不具活性,因此,通过打断根围的酰胺键来降解Nod因子导致其活性丧失。
为限制甚至防止这种降解,制备了一系列类似的化合物,其中一些比天然的Nod因子更加稳定。在本专利申请中进一步描述了依据本发明的这类化合物(I)的例子。
依据本发明的组合物包含杀真菌剂化合物(b)。合适的可进行混合的杀真菌剂的例子选自以下:
b1)能抑制核酸合成的化合物,例如苯霜灵、苯霜灵-M(benalaxyl-M)、乙嘧酚磺酸酯、柯罗泽尔昆(clozylacon)、甲菌定、乙嘧酚、呋霜灵、恶霉灵、精甲霜灵(mefenoxam)、甲霜灵、高效甲霜灵、呋酰胺、恶霜灵、恶喹酸;
b2)能够抑制有丝分裂和细胞分裂的化合物,例如苯菌灵、多菌灵、乙霉威、噻唑菌胺、麦穗宁、戊菌隆、噻菌灵、甲基硫菌灵、苯酰菌胺;
b3)能抑制呼吸的化合物,例如
CI-呼吸抑制剂,如氟嘧菌胺(diflumetorim);
CII-呼吸抑制剂,如啶酰菌胺(boscalid)、萎锈灵、甲呋酰胺、氟酰胺、呋吡菌胺(furametpyr)、弗灭克(furmecyclox)、灭锈胺、氧化萎锈灵(oxycarboxine)、吡噻菌胺(penthiopyrad)、噻氟菌胺;
CIII-呼吸抑制剂,如吲唑磺菌胺(amisulbrom)、嘧菌酯、氰霜唑、醚菌胺(dimoxystrobin)、厄内斯卓宾(enestrobin)、恶唑菌酮、咪唑菌酮、氟嘧菌酯(fluoxastrobin)、醚菌酯、苯氧菌胺、肟醚菌胺(orysastrobin)、啶氧菌酯(picoxystrobin)、唑菌胺酯(pyraclostrobin)、肟菌酯;
b4)能起解偶联剂作用的化合物,例如消螨普、氟啶胺、密特克(meptyldinocap);
b5)能抑制ATP产生的化合物,例如三苯基乙酸锡、三苯基氯化锡、三苯基氢氧化锡、硅噻菌胺(silthiofam);
b6)能抑制AA和蛋白质生物合成的化合物,例如胺扑灭(andoprim)、杀稻瘟菌素-S、嘧菌环胺、春雷霉素、水合盐酸春雷霉素(kasugamycinhydrochloride hydrate)、嘧菌胺、嘧霉胺;
b7)能抑制信号转导的化合物,例如拌种咯、咯菌腈、苯氧喹啉;
b8)能抑制脂和膜合成的化合物,例如联苯、乙菌利、敌瘟磷、土菌灵、依杜卡(iodocarb)、异稻瘟净、异菌脲、稻瘟灵、腐霉利、霜霉威、霜霉威盐酸盐、吡菌磷、甲基立枯磷、乙烯菌核利;
b9)能抑制麦角固醇生物合成的化合物,例如阿尔迪莫(aldimorph)、氧环唑、联苯三唑醇、糠菌唑、环丙唑醇、苄氯三唑醇(diclobutrazole)、苯醚甲环唑、烯唑醇、烯唑醇-M(diniconazole-M)、十二环吗啉、十二环吗啉乙酸酯(dodemorph acetate)、氟环唑、乙环唑、氟苯嘧啶醇、腈苯唑、环酰菌胺、苯锈啶、丁苯吗啉(fenpropimorph)、氟喹唑、呋嘧醇(flurprimidol)、氟硅唑、粉唑醇、呋菌唑、呋醚唑、己唑醇、抑霉唑、抑霉唑硫酸盐(imazalil sulfate)、亚胺唑、种菌唑、叶菌唑、腈菌唑、萘替芬(naftifine)、氯苯嘧啶醇、恶咪唑、多效唑、稻瘟酯、戊菌唑、咪鲜胺、丙环唑、丙硫菌唑(prothioconazole)、稗草丹、啶斑肟、硅氟唑、螺环菌胺、戊唑醇、特比萘芬(terbinafine)、四氟醚唑、三唑酮、三唑醇、十三吗啉、氟菌唑、嗪胺灵、灭菌唑、烯效唑、烯霜苄(viniconazole)、伏立康唑(voriconazole);
b10)能抑制细胞壁合成的化合物,例如苯噻菌胺(benthiavalicarb)、烯酰吗啉、氟吗啉、异丙菌胺、双炔酰菌胺(mandipropamid)、多抗霉素(polyoxins)、多氧霉素(polyoxorim)、有效霉素A;
b11)能抑制黑素生物合成的化合物,例如环丙酰菌胺、双氯氰菌胺、氰菌胺、四氯苯酞(phtalide)、咯喹酮、三环唑;
b12)能诱导宿主防御的化合物,例如活化酯-S-甲基(acibenzolar-S-methyl)、噻菌灵、噻酰菌胺(tiadinil);
b13)具有多位点(multisite)作用的化合物,例如波尔多液、敌菌丹、克菌丹、百菌清、环烷酸铜、氧化铜、氯氧化铜、铜制剂如氢氧化铜、硫酸铜、抑菌灵、二噻农、多果定、多果定游离碱、福美铁、氟佛匹特(fluorofolpet)、灭菌丹、双胍辛(guazatine)、双胍辛乙酸盐、双胍辛胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐(iminoctadine albesilate)、双胍辛胺三乙酸盐、代森锰铜、代森锰锌、代森锰、代森联(metiram)、代森联锌(metiram zinc)、喹啉铜、丙森锌、硫和硫制剂,包括多硫化钙、福美双、甲苯氟磺胺、代森锌、福美锌;
b14)选自以下的化合物:(2E)-2-(2-{[6-(3-氯-2-甲基苯氧基)-5-氟嘧啶-4-基]氧基(oxy)}苯基)-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基乙酰胺、(2E)-2-{2-[({[(1E)-1-(3-{[(E)-1-氟-2-苯基乙烯基]氧基}苯基)亚乙基]氨基}氧基)甲基]苯基}-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基乙酰胺、1-(4-氯苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)环庚醇、1-[(4-甲氧基苯氧基)甲基]-2,2-二甲基丙基-1H-咪唑-1-羧酸酯、1-甲基-N-[2-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酰胺(carboxamide)、2,3,5,6-四氯-4-(甲基磺酰基)吡啶、2-丁氧基-6-碘代-3-丙基-4H-色烯-4-酮、2-氯-N-(1,1,3-三甲基-2,3-二氢-1H-茚-4-基)烟酰胺、2-苯基苯酚和盐、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-[2-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]-1H-吡唑-4-羧酰胺、3-(二氟甲基)-N-[(9R)-9-异丙基-1,2,3,4-四氢-1,4-甲酮萘(methanonaphthalen)-5-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、3-(二氟甲基)-N-[(9S)-9-异丙基-1,2,3,4-四氢-1,4-甲酮萘-5-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、3-(二氟甲基)-N-[4′-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、3,4,5-三氯吡啶-2,6-二腈、3-[5-(4-氯苯基)-2,3-二甲基异噁唑烷-3-基]吡啶、3-氯-5-(4-氯苯基)-4-(2,6-二氟苯基)-6-甲基哒嗪、4-(4-氯苯基)-5-(2,6-二氟苯基)-3,6-二甲基哒嗪、5-氯-7-(4-甲基哌啶-1-基)-6-(2,4,6-三氟苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶、8-羟基喹啉硫酸盐、苯并噻唑、贝斯氧杂嗪(bethoxazin)、卡巴西霉素(capsimycin)、香芹酮(carvone)、灭螨猛、硫杂灵(cufraneb)、环氟菌胺(cyflufenamid)、霜脲氰、棉隆、咪菌威、双氯酚、哒菌酮、氯硝胺、野燕枯、野燕枯甲基硫酸盐(difenzoquat methylsulphate)、二苯胺、埃克玛(ecomate)、嘧菌腙、氟酰菌胺、氟吡菌胺(fluopicolide)、氟氯菌核利(fluoroimide)、磺菌胺、三乙膦酸铝(fosetyl-aluminium)、乙膦酸钙(fosetyl-calcium)、乙膦酸钠(fosetyl-sodium)、六氯苯、人间霉素(irumamycin)、异太乐(isotianil)、磺菌威(methasulfocarb)、(2E)-2-{2-[({环丙基[(4-甲氧基苯基)亚氨基]甲基}硫基(thio))甲基]苯基}-3-甲氧基丙烯酸甲酯、1-(2,2-二甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-1H-咪唑-5-羧酸甲酯、异硫氰酸甲酯、苯菌酮(metrafenone)、米多霉素(mildiomycin)、N-(3′,4′-二氯-5-氟联苯-2-基)-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3-乙基-3,5,5-三甲基环己基)-3-(甲酰氨基)-2-羟基苯甲酰胺、N-(4-氯-2-硝基苯基)-N-乙基-4-甲基苯磺酰胺、N-(4-氯苄基)-3-[3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基]丙酰胺、N-[(4-氯苯基)(氰基)甲基]-3-[3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基]丙酰胺、N-[(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲基]-2,4-二氯烟酰胺、N-[1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙基]-2,4-二氯烟酰胺、N-[1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙基]-2-氟-4-碘代烟酰胺、N-[2-(1,3-二甲基丁基)苯基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-{(Z)-[(环丙基甲氧基)亚氨基][6-(二氟甲氧基)-2,3-二氟苯基]甲基}-2-苯基乙酰胺、N-{2-[1,1′-二(环丙基)-2-基]苯基}-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-{2-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、纳他霉素(natamycin)、N-乙基-N-甲基-N′-{2-甲基-5-(三氟甲基)-4-[3-(三甲基甲硅烷基)丙氧基]苯基}亚氨基甲酰胺(imido formamide)、N-乙基-N-甲基-N′-{2-甲基-5-(二氟甲基)-4-[3-(三甲基甲硅烷基)丙氧基]苯基}亚氨基甲酰胺、二甲基二硫代氨基甲酸镍、酞菌酯、O-{1-[(4-甲氧基苯氧基)甲基]-2,2-二甲基丙基}1H-咪唑-1-硫代羟酸酯(carbothioate)、辛噻酮、奥克斯莫卡宾(oxamocarb)、氧代奋欣(oxyfenthiin)、五氯苯酚和盐、亚磷酸及其盐、病花灵、霜霉威乙膦酸盐(propamocarb fosetylate)、普罗帕诺欣钠(propanosine-sodium)、丙氧喹啉(proquinazid)、派本卡必(pyribencarb)、吡咯叠氮(pyrrolnitrine)、五氯硝基苯、S-烯丙基-5-氨基-2-异丙基-4-(2-甲基苯基)-3-氧代(oxo)-2,3-二氢-1H-吡唑-1-硫代羟酸酯、叶枯酞、四氯硝基苯、咪唑嗪、水杨菌胺、威乐尼(valiphenal)、氰菌胺。
较佳地,杀真菌剂化合物(b)选自以下:
N-[2-(1,3-二甲基丁基)苯基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、苯霜灵、乙嘧酚、恶霉灵、精甲霜灵、甲霜灵、高效甲霜灵、苯菌灵、多菌灵、麦穗宁、戊菌隆、噻菌灵、苯酰菌胺、啶酰菌胺、萎锈灵、氟酰胺、呋吡菌胺、吡噻菌胺、噻氟菌胺、噻氟菌胺、噻氟菌胺、醚菌胺、恶唑菌酮、咪唑菌酮、氟嘧菌酯、苯氧菌胺、肟醚菌胺、啶氧菌酯、唑菌胺酯、肟菌酯、氟啶胺、硅噻菌胺、嘧菌环胺、春雷霉素、嘧菌胺、嘧霉胺、拌种咯、咯菌腈、异菌脲、腐霉利、霜霉威、甲基立枯磷、联苯三唑醇、环丙唑醇、苯醚甲环唑、烯唑醇、氟环唑、乙环唑、环酰菌胺、氟喹唑、粉唑醇、己唑醇、抑霉唑、亚胺唑、种菌唑、叶菌唑、咪鲜胺、丙硫菌唑、硅氟唑、螺环菌胺、戊唑醇、四氟醚唑、三唑酮、三唑醇、氟菌唑、灭菌唑、环丙酰菌胺、甲苯氟磺胺、氟吡菌胺、异太乐、N-{2-[1,1′-二(环丙基)-2-基]苯基}-3-(二氟甲基)-,1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、霜霉威乙膦酸盐、咪唑嗪、N-(3′,4′-二氯-5-氟联苯-2-基)-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-{2-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(三氟甲基)苯甲酰胺。
最佳地,杀真菌剂化合物(b)选自下列L2:
N-[2-(1,3-二甲基丁基)苯基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、甲霜灵、多菌灵、戊菌隆、咪唑菌酮、氟嘧菌酯、肟菌酯、嘧霉胺、异菌脲、联苯三唑醇、氟喹唑、种菌唑、咪鲜胺、丙硫菌唑、戊唑醇、三唑醇、灭菌唑、环丙酰菌胺、甲苯氟磺胺、氟吡菌胺、异太乐、N-{2-[1,1′-二(环丙基)-2-基]苯基}-3-(二氟甲基)-,1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、霜霉威乙膦酸盐、咪唑嗪、N-(3′,4′-二氯-5-氟联苯-2-基)-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-{2-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(三氟甲基)苯甲酰胺。
依据本发明的组合物包含通式(I)(a)的化合物和杀真菌剂化合物(b),其中(a)/(b)的重量比为1/1-1/1014。较佳地,(a)/(b)的重量比为1/10-1/1013。更佳地,(a)/(b)的重量比为1/102-1/1012。对于一些应用,例如通过种子处理施加组合物时,(a)/(b)的重量比宜为1/102-1/108,优选为1/103-1/106,更优选为1/103-1/105。本领域普通技术人员能够依据施用的方法和化合物决定适当的比率。
依据本发明的合适的混合物的非限制性例子可包括选自L1的化合物与选自L2的杀真菌剂化合物的混合物。
本发明的组合物还可包含至少一种其它不同的杀真菌活性组分(c)。
合适的可进行混合的杀真菌剂的例子选自以下:
c1)能抑制核酸合成的化合物,例如苯霜灵、苯霜灵-M(benalaxyl-M)、乙嘧酚磺酸酯、柯罗泽尔昆(clozylacon)、甲菌定、乙嘧酚、呋霜灵、恶霉灵、精甲霜灵(mefenoxam)、甲霜灵、高效甲霜灵、呋酰胺、恶霜灵、恶喹酸;
c2)能够抑制有丝分裂和细胞分裂的化合物,例如苯菌灵、多菌灵、乙霉威、噻唑菌胺、麦穗宁、戊菌隆、噻菌灵、甲基硫菌灵、苯酰菌胺;
c3)能抑制呼吸的化合物,例如
CI-呼吸抑制剂,如氟嘧菌胺(diflumetorim);
CII-呼吸抑制剂,如啶酰菌胺(boscalid)、萎锈灵、甲呋酰胺、氟酰胺、呋吡菌胺(furametpyr)、弗灭克(furmecyclox)、灭锈胺、氧化萎锈灵(oxycarboxine)、吡噻菌胺(penthiopyrad)、噻氟菌胺;
CIII-呼吸抑制剂,如吲唑磺菌胺(amisulbrom)、嘧菌酯、氰霜唑、醚菌胺(dimoxystrobin)、厄内斯卓宾(enestrobin)、恶唑菌酮、咪唑菌酮、氟嘧菌酯(fluoxastrobin)、醚菌酯、苯氧菌胺、肟醚菌胺(orysastrobin)、啶氧菌酯(picoxystrobin)、唑菌胺酯(pyraclostrobin)、肟菌酯;
c4)能起解偶联剂作用的化合物,例如消螨普、氟啶胺、密特克(meptyldinocap);
c5)能抑制ATP产生的化合物,例如三苯基乙酸锡、三苯基氯化锡、三苯基氢氧化锡、硅噻菌胺(silthiofam);
c6)能抑制AA和蛋白质生物合成的化合物,例如胺扑灭(andoprim)、杀稻瘟菌素-S、嘧菌环胺、春雷霉素、水合盐酸春雷霉素(kasugamycinhydrochloride hydrate)、嘧菌胺、嘧霉胺;
c7)能抑制信号转导的化合物,例如拌种咯、咯菌腈、苯氧喹啉;
c8)能抑制脂和膜合成的化合物,例如联苯、乙菌利、敌瘟磷、土菌灵、依杜卡(iodocarb)、异稻瘟净、异菌脲、稻瘟灵、腐霉利、霜霉威、霜霉威盐酸盐、吡菌磷、甲基立枯磷、乙烯菌核利;
c9)能抑制麦角固醇生物合成的化合物,例如阿尔迪莫(aldimorph)、氧环唑、联苯三唑醇、糠菌唑、环丙唑醇、苄氯三唑醇(diclobutrazole)、苯醚甲环唑、烯唑醇、烯唑醇-M(diniconazole-M)、十二环吗啉、十二环吗啉乙酸酯(dodemorph acetate)、氟环唑、乙环唑、氟苯嘧啶醇、腈苯唑、环酰菌胺、苯锈啶、丁苯吗啉(fenpropimorph)、氟喹唑、呋嘧醇(flurprimidol)、氟硅唑、粉唑醇、呋菌唑、呋醚唑、己唑醇、抑霉唑、抑霉唑硫酸盐(imazalil sulfate)、亚胺唑、种菌唑、叶菌唑、腈菌唑、萘替芬(naftifine)、氯苯嘧啶醇、恶咪唑、多效唑、稻瘟酯、戊菌唑、咪鲜胺、丙环唑、丙硫菌唑(prothioconazole)、稗草丹、啶斑肟、硅氟唑、螺环菌胺、戊唑醇、特比萘芬(terbinafine)、四氟醚唑、三唑酮、三唑醇、十三吗啉、氟菌唑、嗪胺灵、灭菌唑、烯效唑、烯霜苄(viniconazole)、伏立康唑(voriconazole);
c10)能抑制细胞壁合成的化合物,例如苯噻菌胺(benthiavalicarb)、烯酰吗啉、氟吗啉、异丙菌胺、双炔酰菌胺(mandipropamid)、多抗霉素(polyoxins)、多氧霉素(polyoxorim)、有效霉素A;
c11)能抑制黑素生物合成的化合物,例如环丙酰菌胺、双氯氰菌胺、氰菌胺、四氯苯酞(phtalide)、咯喹酮、三环唑;
c12)能诱导宿主防御的化合物,例如活化酯-S-甲基(acibenzolar-S-methyl)、噻菌灵、噻酰菌胺(tiadinil);
c13)具有多位点(multisite)作用的化合物,例如波尔多液、敌菌丹、克菌丹、百菌清、环烷酸铜、氧化铜、氯氧化铜、铜制剂如氢氧化铜、硫酸铜、抑菌灵、二噻农、多果定、多果定游离碱、福美铁、氟佛匹特(fluorofolpet)、灭菌丹、双胍辛(guazatine)、双胍辛乙酸盐、双胍辛胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐(iminoctadine albesilate)、双胍辛胺三乙酸盐、代森锰铜、代森锰锌、代森锰、代森联(metiram)、代森联锌(metiram zinc)、喹啉铜、丙森锌、硫和硫制剂,包括多硫化钙、福美双、甲苯氟磺胺、代森锌、福美锌;
c14)选自以下的化合物:(2E)-2-(2-{[6-(3-氯-2-甲基苯氧基)-5-氟嘧啶-4-基]氧基(oxy)}苯基)-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基乙酰胺、(2E)-2-{2-[({[(1E)-1-(3-{[(E)-1-氟-2-苯基乙烯基]氧基}苯基)亚乙基]氨基}氧基)甲基]苯基}-2-(甲氧基亚氨基)-N-甲基乙酰胺、1-(4-氯苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)环庚醇、1-[(4-甲氧基苯氧基)甲基]-2,2-二甲基丙基-1H-咪唑-1-羧酸酯、1-甲基-N-[2-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-羧酰胺(carboxamide)、2,3,5,6-四氯-4-(甲基磺酰基)吡啶、2-丁氧基-6-碘代-3-丙基-4H-色烯-4-酮、2-氯-N-(1,1,3-三甲基-2,3-二氢-1H-茚-4-基)烟酰胺、2-苯基苯酚和盐、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-[2-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]-1H-吡唑-4-羧酰胺、3-(二氟甲基)-N-[(9R)-9-异丙基-1,2,3,4-四氢-1,4-甲酮萘(methanonaphthalen)-5-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、3-(二氟甲基)-N-[(9S)-9-异丙基-1,2,3,4-四氢-1,4-甲酮萘-5-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、3-(二氟甲基)-N-[4′-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)联苯-2-基]-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、3,4,5-三氯吡啶-2,6-二腈、3-[5-(4-氯苯基)-2,3-二甲基异噁唑烷-3-基]吡啶、3-氯-5-(4-氯苯基)-4-(2,6-二氟苯基)-6-甲基哒嗪、4-(4-氯苯基)-5-(2,6-二氟苯基)-3,6-二甲基哒嗪、5-氯-7-(4-甲基哌啶-1-基)-6-(2,4,6-三氟苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶、8-羟基喹啉硫酸盐、苯并噻唑、贝斯氧杂嗪(bethoxazin)、卡巴西霉素(capsimycin)、香芹酮(carvone)、灭螨猛、硫杂灵(cufraneb)、环氟菌胺(cyflufenamid)、霜脲氰、棉隆、咪菌威、双氯酚、哒菌酮、氯硝胺、野燕枯、野燕枯甲基硫酸盐(difenzoquat methylsulphate)、二苯胺、埃克玛(ecomate)、嘧菌腙、氟酰菌胺、氟吡菌胺(fluopicolide)、氟氯菌核利(fluoroimide)、磺菌胺、三乙膦酸铝(fosetyl-aluminium)、乙膦酸钙(fosetyl-calcium)、乙膦酸钠(fosetyl-sodium)、六氯苯、人间霉素(irumamycin)、异太乐(isotianil)、磺菌威(methasulfocarb)、(2E)-2-{2-[({环丙基[(4-甲氧基苯基)亚氨基]甲基}硫基(thio))甲基]苯基}-3-甲氧基丙烯酸甲酯、1-(2,2-二甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-1H-咪唑-5-羧酸甲酯、异硫氰酸甲酯、苯菌酮(metrafenone)、米多霉素(mildiomycin)、N-(3′,4′-二氯-5-氟联苯-2-基)-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-(3-乙基-3,5,5-三甲基环己基)-3-(甲酰氨基)-2-羟基苯甲酰胺、N-(4-氯-2-硝基苯基)-N-乙基-4-甲基苯磺酰胺、N-(4-氯苄基)-3-[3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基]丙酰胺、N-[(4-氯苯基)(氰基)甲基]-3-[3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基]丙酰胺、N-[(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲基]-2,4-二氯烟酰胺、N-[1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙基]-2,4-二氯烟酰胺、N-[1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙基]-2-氟-4-碘代烟酰胺、N-[2-(1,3-二甲基丁基)苯基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-{(Z)-[(环丙基甲氧基)亚氨基][6-(二氟甲氧基)-2,3-二氟苯基]甲基}-2-苯基乙酰胺、N-{2-[1,1′-二(环丙基)-2-基]苯基}-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-{2-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(三氟甲基)苯甲酰胺、纳他霉素(natamycin)、N-乙基-N-甲基-N′-{2-甲基-5-(三氟甲基)-4-[3-(三甲基甲硅烷基)丙氧基]苯基}亚氨基(imido)甲酰胺、N-乙基-N-甲基-N′-{2-甲基-5-(二氟甲基)-4-[3-(三甲基甲硅烷基)丙氧基]苯基}亚氨基甲酰胺、二甲基二硫代氨基甲酸镍、酞菌酯、O-{1-[(4-甲氧基苯氧基)甲基]-2,2-二甲基丙基}1H-咪唑-1-硫代羟酸酯(carbothioate)、辛噻酮、奥克斯莫卡宾(oxamocarb)、氧代奋欣(oxyfenthiin)、五氯苯酚和盐、亚磷酸及其盐、病花灵、霜霉威乙膦酸盐(propamocarb fosetylate)、普罗帕诺欣钠(propanosine-sodium)、丙氧喹啉(proquinazid)、派本卡必(pyribencarb)、吡咯叠氮(pyrrolnitrine)、五氯硝基苯、S-烯丙基-5-氨基-2-异丙基-4-(2-甲基苯基)-3-氧代(oxo)-2,3-二氢-1H-吡唑-1-硫代羟酸酯、叶枯酞、四氯硝基苯、咪唑嗪、水杨菌胺、威乐尼(valiphenal)、氰菌胺。
较佳地,杀真菌剂化合物(c)选自以下:
N-[2-(1,3-二甲基丁基)苯基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、苯霜灵、乙嘧酚、恶霉灵、精甲霜灵、甲霜灵、高效甲霜灵、苯菌灵、多菌灵、麦穗宁、戊菌隆、噻菌灵、苯酰菌胺、啶酰菌胺、萎锈灵、氟酰胺、呋吡菌胺、吡噻菌胺、噻氟菌胺、噻氟菌胺、噻氟菌胺、醚菌胺、恶唑菌酮、咪唑菌酮、氟嘧菌酯、苯氧菌胺、肟醚菌胺、啶氧菌酯、唑菌胺酯、肟菌酯、氟啶胺、硅噻菌胺、嘧菌环胺、春雷霉素、嘧菌胺、嘧霉胺、拌种咯、咯菌腈、异菌脲、腐霉利、霜霉威、甲基立枯磷、联苯三唑醇、环丙唑醇、苯醚甲环唑、烯唑醇、氟环唑、乙环唑、环酰菌胺、氟喹唑、粉唑醇、己唑醇、抑霉唑、亚胺唑、种菌唑、叶菌唑、咪鲜胺、丙硫菌唑、硅氟唑、螺环菌胺、戊唑醇、四氟醚唑、三唑酮、三唑醇、氟菌唑、灭菌唑、环丙酰菌胺、甲苯氟磺胺、氟吡菌胺、异太乐、N-{2-[1,1′-二(环丙基)-2-基]苯基}-3-(二氟甲基)-,1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、霜霉威乙膦酸盐、咪唑嗪、N-(3′,4′-二氯-5-氟联苯-2-基)-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-{2-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(三氟甲基)苯甲酰胺。
最佳地,杀真菌剂化合物(c)选自下列L2:
N-[2-(1,3-二甲基丁基)苯基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、甲霜灵、多菌灵、戊菌隆、咪唑菌酮、氟嘧菌酯、肟菌酯、嘧霉胺、异菌脲、联苯三唑醇、氟喹唑、种菌唑、咪鲜胺、丙硫菌唑、戊唑醇、三唑醇、灭菌唑、环丙酰菌胺、甲苯氟磺胺、氟吡菌胺、异太乐、N-{2-[1,1′-二(环丙基)-2-基]苯基}-3-(二氟甲基)-,1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、霜霉威乙膦酸盐、咪唑嗪、N-(3′,4′-二氯-5-氟联苯-2-基)-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酰胺、N-{2-[3-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]乙基}-2-(三氟甲基)苯甲酰胺。
当组合物中包含上述第三活性组分(c)时,该化合物的含量应使得(a)∶(b)∶(c)的重量比为1/1/1-1/104/1014。较佳地,(a)/(b)的重量比为1/10/10-1/1013/1013。更佳地,(a)/(b)的重量比为1/102/102-1/1012/1012。对于一些应用,例如当通过种子处理施用组合物时,(a)/(b)的比率宜为1/102/102-1/108/108,优选为1/103/103-1/106/106,更优选为1/103/103-1/105/105。本领域普通技术人员能够依据施用的方法和化合物决定适当的比率。
依据本发明的合适的混合物的非限制性例子可包括选自L1的化合物与选自L2的第一杀真菌剂化合物和不同于选自L2的第一杀真菌剂化合物的第二杀真菌剂的混合物。
依据本发明的组合物还包含其它组分,例如农业上可接受的担体(support)、载体或填料(filler)。
在本说明书中,术语“担体”表示天然或合成的有机或无机材料,它与活性材料组合或联合使用,使活性材料更容易施用,特别是施用到植物各部分上。因此,此担体通常是惰性的,并且应该是农业上可接受的。担体可为固体或液体。合适的担体的例子包括粘土、天然或合成的硅酸盐、二氧化硅、树脂、蜡、固体肥料、水、醇(特别是丁醇)、有机溶剂、矿物油和植物油以及它们的衍生物。也可以使用这些担体的混合物。
依据本发明的组合物也可以包含其它的组分。具体地,所述组合物还可包含表面活性剂。表面活性剂可为离子或非离子型乳化剂、分散剂或润湿剂或这些表面活性剂的混合物。例如,聚丙烯酸盐、木质素磺酸盐、苯酚磺酸盐或萘磺酸盐、环氧乙烷与脂肪醇或脂肪酸或脂肪胺的缩聚物、取代的苯酚(特别是烷基苯酚或芳基苯酚)、磺基琥珀酸酯的盐、牛磺酸衍生物(特别是牛磺酸烷基酯(alkyl taurate))、聚氧乙基化醇或苯酚的磷酸酯、多元醇的脂肪酸酯,以及含有硫酸、磺酸和磷酸官能团的上述化合物的衍生物。当活性材料和/或惰性担体不溶于水并且当施用的媒介试剂是水时,至少一种表面活性剂的存在通常是至关重要的。较佳地,以组合物的重量为基准计,表面活性剂的含量为5重量%至40重量%。
还可包括附加的组分,例如,保护性胶体、胶粘剂、增稠剂、触变剂、渗透剂、稳定剂(stabilisers)、掩蔽剂(sequestering agent)。一般来说,活性化合物可根据常用的配方技术与任何固体或液体添加剂相混合。
本发明的组合物一般可含有0.05重量%至99重量%的活性物质,较佳为10重量%至70重量%。
本发明的组合物可以各种形式使用,诸如气雾分散剂、胶囊悬浮剂(capsule suspension)、冷雾浓缩剂、可撒粉剂、可乳化的浓缩剂、水包油乳剂、油包水乳剂、微囊粒剂、细粒剂、种子处理用可流动的浓缩剂、气体(在压力下)制剂、气体发生剂、颗粒剂、热雾浓缩剂、大粒剂、微粒剂、油可分散性粉剂、油可混溶性可流动的浓缩剂、油可混溶液体、糊剂、植物棒剂、干种子处理用粉剂、农药包衣的种子、可溶性浓缩剂、可溶性粉剂、种子处理用溶液、悬浮浓缩剂(可流动的浓缩剂)、超低容量(ULV)液体、超低容量(ULV)悬浮剂、水可分散粒剂或片剂、浆液处理用水可分散性粉剂、水溶性粒剂或片剂、种子处理用水溶性粉剂和可润湿性粉剂。
这些组合物不仅包括通过合适的设备如喷雾或撒粉设备施用到待处理的植物或种子上或施用到土壤中的犁沟中的现成组合物,还包括在施用到农作物之前必须稀释的浓缩商品组合物。
本发明的农药组合物可用来治疗性或预防性地控制农作物的植物病原真菌,而且可以提高植物的产量、生长或活力。
因此,依据本发明的另一方面,提供了一种治疗性或预防性地控制农作物植物病原真菌并且提高植物的产量、生长或活力的方法,该方法的特征在于将上述组合物通过种子处理、叶敷、茎施用或浸润/滴注施用(chemigation)而施用到种子、植物和/或植物的果实上,或者施用到正在生长或需要生长植物的土壤、特别是梨沟中,以及/或者施用到正在生长或需要生长植物的惰性基材上(例如无机基材(例如沙、石棉、玻璃棉、膨胀材料(例如珍珠岩、蛭石、沸石、膨胀粘土))、轻石、火成碎屑物/凝灰岩、合成有机基材(例如聚氨酯)、有机基材(例如泥炭、堆肥、树木废料(例如椰纤维、木质纤维/碎屑、树皮绉)),以及/或者施用到正在生长或需要生长植物的液体基材上(例如漂浮水耕体系(floating hydroponic systems)、营养膜技术(Nutrient Film Technique)、气栽法(Aeroponics))。
用于抵抗植物病原真菌的组合物包含有效且非植物毒性量的杀真菌剂化合物。“有效且非植物毒性量”的表达方式指本发明组合物的量足以控制或破坏存在于或易于出现在农作物上的害虫和疾病,而该剂量并不会使所述农作物产生任何可以观察到的植物毒性症状。该量根据以下因素可在很宽的范围内变化:要对抗或控制的害虫和疾病、农作物的类型、气候条件和包含在本发明的组合物中的化合物。
该量可通过系统性田间试验来确定,这在本领域技术人员的能力范围内。
本发明的处理方法可用于处理繁殖材料如块茎或根茎,并且可用于处理种子、幼苗或移植(pricking out)苗以及植物或移植植物。该处理方法也可用于处理根。本发明的处理方法也可用于处理植物的地上部分如有关植物的干、茎或梗、叶子、花和果实。
可依据本发明方法保护的植物是豆科植物或非豆科植物。
在可用本发明的方法保护的植物中,包括棉花;亚麻;葡萄藤;水果或蔬菜作物,诸如蔷薇科(Rosaceae sp.)(例如,仁果类水果,如苹果和梨,还有核果,如杏、杏仁和桃子)、茶蔗子科(Ribesioidae sp.)、胡桃科(Juglandaceaesp.)、桦木科(Betulaceae sp.)、漆树科(Anacardiaceae sp.)、山毛榉科(Fagaceaesp.)、桑科(Moraceae sp.)、木犀科(Oleaceae sp.)、猕猴桃科(Actinidaceae sp.)、樟科(Lauraceae sp.)、芭蕉科(Musaceae sp.)(例如香蕉树和粉芭蕉(plantins))、茜草科(Rubiaceae sp.)、山茶科(Theaceae sp.)、梧桐科(Sterculiceae sp.)、芸香科(Rutaceae sp.)(例如柠檬、橙子和葡萄柚);茄科(Solanaceae sp.)(例如,西红柿)、百合科(Liliaceae sp.)、紫菀科(Asteraceae sp.)(例如莴苣)、伞形科(Umbelliferae sp.)、十字花科(Cruciferae sp.)、藜科(Chenopodiaceae sp.)、葫芦科(Cucurbitaceae sp.)、蝶形花科(Papilionaceae sp.)(例如豌豆)、蔷薇科(Rosaceae sp.)(例如草莓);大作物,诸如禾本科(Graminae sp.)(例如玉米、菌苔或谷物如小麦、稻、大麦和黑小麦)、紫菀科(Asteraceae sp.)(例如向日葵)、十字花科(Cruciferae sp.)(例如油菜(colza))、豆科(Fabacae sp.)(例如花生)、蝶形花科(Papilionaceae sp.)(例如大豆)、茄科(Solanaceae sp.)(例如马铃薯)、藜科(Chenopodiaceae sp.)(例如甜菜根);园艺作物和森林作物;以及这些作物的遗传修饰的同系物。
在豆科植物中,可提及的是大豆、豌豆、蚕豆、落花生、黄豆、羽扇豆、紫花苜蓿或三叶草。
在可通过本发明方法控制的植物或农作物疾病中,可提及的有:
白粉病(powdery mildew),例如:
小麦白粉病(Blumeria diseases),例如由小麦白粉菌(Blumeria graminis)引起;
叉丝单囊壳属病(Podosphaera diseases),例如由白叉丝单囊壳(Podosphaera leucotricha)引起;
单丝壳属病(Sphaerotheca diseases),例如由苍耳单丝壳(Sphaerothecafuliginea)引起;
钩丝壳属病(Uncinula diseases),例如由葡萄钓丝壳(Uncinula necator)引起;
锈病,例如:
胶锈属病(Gymnosporangium diseases),例如由赛宾锈菌(Gymnosporangium sabinae)引起;
驼孢锈病(Hemileia diseases),例如由咖啡驼孢锈菌(Hemileia vastatrix)引起;
层锈菌属病(Phakopsora diseases),例如由豆薯层锈菌(Phakopsorapachyrhizi)或山马蝗层锈菌(Phakopsora meibomiae)引起;
柄锈菌属病(Puccinia diseases),例如由隐匿柄锈菌(Puccinia recondita)引起;
单孢锈菌属病(Uromyces diseases),例如由疣顶单胞锈菌(Uromycesappendiculatus)引起;
卵菌病(Oomycete diseases),例如:
盘梗霉属病(Bremia diseases),例如由莴苣盘梗霉(Bremia lactucae)引起;
霜霉属病(Peronospora diseases),例如由豌豆霜霉(Peronospora pisi)或芸苔霜霉(P.brassicae)引起;
疫霉属病(Phytophthora diseases),例如由致病疫霉(Phytophthorainfestans)引起;
单轴霉属病(Plasmopara diseases),例如由葡萄生单轴霉(Plasmoparaviticola)引起;
假霜霉属(Pseudoperonospora diseases),例如由葎草假霜霉(Pseudoperonospora humuli)或古巴假霜霉(Pseudoperonospora cubensis)引起;
腐霉属病(Pythium diseases),例如由终极腐霉(Pythium ultimum)引起;
叶斑病(Leafspot disease)、污叶病(leafblotch disease)和叶枯病(leaf blightdisease),例如:
支链孢属病(Alternaria diseases),例如由茄链格孢(Alternaria solani)引起;
尾孢霉属病(Cercospora diseases),例如由甜菜生尾孢(Cercosporabeticola)引起;
金孢子菌属病(Cladiosporum diseases),例如由瓜枝孢(Cladiosporiumcucumerinum)引起;
旋孢腔菌病(Cochliobolus diseases),例如由禾旋孢腔菌(Cochliobolussativus)引起;
刺盘孢属病(Colletotrichum diseases),例如由豆刺盘孢(Colletotrichumlindemuthanium)引起;
油橄榄孔雀斑病(Cycloconium diseases),例如由油橄榄孔雀斑菌(Cycloconium oleaginum)引起;
腐皮壳菌层病(Diaporthe diseases),例如由桔柑间座壳(Diaporthe citri)引起;
痂囊腔菌属病(Elsinoe diseases),例如由桔柑痂囊腔菌(Elsinoe fawcettii)引起;
长孢属病(Gloeosporium diseases),例如由悦色盘长孢(Gloeosporiumlaeticolor)引起;
小丛壳属病(Glomerella diseases),例如由围小丛壳(Glomerella cingulata)引起;
球座菌属病(Guignardia diseases),例如由葡萄球座菌(Guignardiabidwelli)引起;
小球腔菌属病(Leptosphaeria diseases),例如由十字花科小球腔菌(Leptosphaeria maculans);颖枯小球腔菌(Leptosphaeria nodorum)引起;
稻瘟病(Magnaporthe diseases),例如由稻瘟菌(Magnaporthe grisea)引起;
球腔菌属病(Mycosphaerella diseases),例如由禾生球腔菌(Mycosphaerella graminicola);落花生球腔菌(Mycosphaerellaarachidicola);香蕉黑条叶斑病菌(Mycosphaerella fijiensisi)引起;
壳针孢属病(Phaeosphaeria diseases),例如由颖枯壳针孢(Phaeosphaerianodorum)引起;
核腔菌属病(Pyrenophora diseases),例如由圆核腔菌(Pyrenophora teres)引起;
柱隔孢属病(Ramularia diseases),例如由辛加柱隔孢(Ramularia collo-cygni)引起;
喙孢属病(Rhynchosporium diseases),例如由黑麦喙孢(Rhynchosporiumsecalis)引起;
壳针孢属病(Septoria diseases),例如由芹菜小壳针孢(Septoria apii)或番茄壳针孢(Septoria lycopercisi)引起;
核瑚菌属病(Typhula diseases),例如由肉孢核瑚菌(Typhula incarnata)引起;
黑星菌属病(Venturia diseases),例如由苹果黑星菌(Venturia inaequalis)引起;
根和茎疾病,例如:
伏革菌病(Corticium diseases),例如由禾伏革菌(Corticium graminearum)引起;
镰孢菌(霉)属病(Fusarium diseases),例如由尖镰孢(Fusarium oxysporum)引起;
鲟形属病(Gaeumannomyces diseases),例如由禾顶囊壳(Gaeumannomyces graminis)引起;
丝核菌属病(Rhizoctonia diseases),例如由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起;
塔普斯(Tapesia)病,例如由塔普斯梭状芽胞杆菌(Tapesia acuformis)引起;
根串珠霉属病(Thielaviopsis diseases),例如由根串珠霉(Thielaviopsisbasicola)引起;
耳穗和圆锥花序疾病,例如:
链格孢属病(Alternaria diseases),例如由链格孢(Alternaria spp.)引起;
曲霉病(Aspergillus diseases),例如由黄曲霉(Aspergillus flavus)引起;
枝孢属病(Cladosporium diseases),例如由枝孢(Cladosporium spp.)引起;
麦角菌属病(Claviceps diseases),例如由麦角菌(Claviceps purpurea)引起;
镰孢菌(霉)属病(Fusarium diseases),例如由大刀镰孢菌(Fusariumculmorum)引起;
赤霉属病(Gibberella diseases),例如由玉米赤霉(Gibberella zeae)引起;
水稻云形病(Monographella),例如由水稻云形菌(Monographella nivalis)引起;
黑穗病和腥黑穗病,例如:
轴黑粉菌属病(Sphacelotheca diseases),例如由丝轴黑粉菌(Sphacelotheca reiliana)引起;
腥黑粉菌属病(Tilletia diseases),例如由小麦网腥黑粉菌(Tilletia caries)引起;
条黑粉菌属病(Urocystis diseases),例如由隐条黑粉菌(Urocystis occulta)引起;
黑粉菌属病(Ustilago diseases),例如由裸黑粉菌(Ustilago nuda)引起;
果实腐烂和霉菌病,例如:
曲霉病(Aspergillus diseases),例如由黄曲霉(Aspergillus flavus)引起;
葡萄孢属病(Botrytis diseases),例如由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起;
青霉菌病(Penicillium diseases),例如由扩展青霉(Penicillium expansum)引起;
核盘菌属病(Sclerotinia diseases),例如由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起;
轮枝孢属病(Verticilium diseases),例如由黑白轮枝孢(Verticiliumalboatrum)引起;
种子和土壤传播的腐烂,霉菌,枯萎,腐烂和猝倒病:
镰孢菌(霉)属病(Fusarium diseases),例如由大刀镰孢菌(Fusariumculmorum)引起;
疫霉属病(Phytophthora diseases),例如由恶疫霉(Phytophthora cactorum)引起;
腐霉属病(Pythium diseases),例如由终极腐霉(Pythium ultimum)引起;
丝核菌属病(Rhizoctonia diseases),例如由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起;
小核菌病(Sclerotium diseases),例如由齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)引起;
微结节菌属病(Microdochium diseases),例如由雪腐微座孢(Microdochium nivale)引起;
溃疡病(Canker)、松碎(broom)和梢枯病,例如:
丛赤壳属病(Nectria diseases),例如由干癌丛赤壳菌(Nectria galligena)引起;
枯萎病,例如:
链核盘菌属病(Monilinia diseases),例如由核果链核盘菌(Monilinia laxa)引起;
叶疱病或缩叶病,例如:
外囊菌属病(Taphrina diseases),例如由畸形外囊菌(Taphrina deformans)引起;
木质植物的衰退病,例如:
依科病(Esca diseases),例如由根霉格孢菌(Phaemoniella clamydospora)引起;
花和种子的疾病,例如:
葡萄孢属病(Botrytis diseases),例如由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起;
根茎类疾病,例如:
丝核菌属病(Rhizoctonia diseases),例如由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起。
本发明的杀真菌组合物还可以用来抵抗易于在木材上或木材内部生长的真菌疾病。术语“木材”指所有种类的木材,以及对该木材进行加工用于建筑物的所有类型的加工材料,例如实木、高密度木材、层压木材和胶合板。本发明处理木材的方法主要包括:使木材与本发明的一种或多种化合物或本发明的组合物接触;这包括例如直接施用、喷涂、浸涂、注入或任何其它合适的方式。
本发明的组合物也可以用于处理用本发明的化合物或本发明的农用化学组合物遗传修饰的生物体。遗传修饰的植物是其基因组被稳定地整合入编码相关蛋白的异源基因的植物。“编码相关蛋白的异源基因”主要是指给予转化植物新的农学性质的基因,或用于改善转化植物的农学性质的基因。
在根据本发明的处理方法中,对于应用于叶处理时,活性物质通常施用剂量优选为10-800克/公顷,更好为50-300克/公顷。如果可以采用浸润/滴注/犁沟内施用,则剂量可以更低,特别是在石棉或珍珠岩之类的人造基材中。对于种子处理,活性物质的施用剂量通常优选为0.5-200克/100千克种子,更好为1-150克/100千克种子。应该清楚地理解,上述剂量是作为本发明方法的说明性例子给出。本领域技术人员知道如何根据待处理农作物的性质调节施用剂量。
II-1.依据本发明的化合物(I)的结构
制备了含有间位取代的苯甲酰胺基的化合物。宜保持相同的链原子总数(16)和第9位顺式类型的不饱和性。实践中,对制造原料,脂质链可通过氧原子连接到芳环上。
合成了含有间位取代的苄胺官能团的类似物4,以及N-乙酰化的类似物5,N-乙酰化可使其能够恢复天然产物的总电荷。这些类似物制备成硫酸化系列。
4 R1=H
5 R1=Ac
两种其它的硫酸化类似物,一种含有完全饱和的链,另一种含有炔式不饱和链,可用来研究天然产物中出现的第9位上Z型不饱和键的作用。
最后,两种硫酸化的类似物,一种芳环上的取代基在邻位,另一种在对位,可用来研究天然产物第2位的反式不饱和键的作用。
最后,制备了链上具有间位取代基的衍生自岩藻糖基五聚体的类似物。
生物学测试的参照物是以下化合物:
11 R8=SO3Na R=C16:1Δ9Z
12 R8=SO3Na R=C16:2Δ2E,9Z
III.1制备各种寡糖骨架的实施例
对应于通式(I)的寡糖骨架可通过生物技术方法制得,例如使用重组细菌细胞,例如包含根瘤菌的异源基因的重组大肠杆菌(Escherichia coli)细胞。例如,向大肠杆菌中引入来自茎瘤固氮根瘤菌(Azorhizobium caulinodans)的nodBC基因可以制得四-N-N-乙酰基壳五糖(chitopentaose)(Samain E.等,Carbohydr.Res.,1997,302,35-42)。使用来自苜蓿中华根瘤菌(Rhizobium meliloti)的nodBC可以制得三-N-乙酰基壳四糖(chitotetraose)。而且,使用其它基因,例如nodH(根瘤菌磺基转移酶)或nodL(根瘤菌O-乙酰基转移酶),可以对特定的羟基引入修饰(Samain E等,J.Biotechnol.,1999,11,33-47)。根瘤菌或非根瘤菌基因的其它组合可以通过对羟基或氨基进行不同的修饰而制得各种壳寡糖骨架,这些壳寡糖(chitooligosaccharidic)骨架可用作通式(I)分子制备过程中酰化步骤的原料。
还可以使用碳水化合物化学中经典且众所周知的方法和策略,通过标准化学合成方法制得寡糖骨架。最近的合适方法的描述可在许多教科书和综述中找到,更具体是参见例如《化学和生物学中的碳水化合物(Carbohydrates inChemistry and Biology),编辑:B.Ernst,G.W.Hart,P.
Wiley-VCH,Weinheim;2000。正确选择保护基团,将这些保护基团引入到羟基或氨基的特定位置,依次或正交地(orthogonally)除去,释放出选择性修饰所需的任何给定基团,从而在寡糖骨架上引入特定的修饰,包括例如特定羟基的酰化或烷基化或糖基化或者特定氨基的酰化和烷基化。
可用于保护胺并且能依次或正交除去的保护基团包括例如苯二酰亚氨基、四氯苯二酰亚氨基、叠氮基、叔丁氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧基羰基和三氯乙酰基。可用于保护醇并且能依次或正交除去的保护基团包括例如乙酰基、苄基、对甲氧基苄基、三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基和叔丁基二苯基甲硅烷基,以及环状缩醛,例如亚甲基、亚乙基、异亚丙基、亚苄基或对甲氧基亚苄基缩醛。处理保护基团的典型方法和条件可以参见例如“保护基团(Protecting Groups)”,P.J.Kocienski,第2版,Georg Thieme Verlag,Stuttgart,2000或“有机合成中的保护基团(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)”,T.W.Greene,P.G.M.Wuts,第3版,Wiley,纽约,1999。
可通过在所需位置受控地组装包含正确选择的保护基团的单糖结构单元来制备寡糖骨架。该组装可依据寡糖化学合成领域中典型的标准方法进行。随后除去保护基团,接着对脱保护的羟基或氨基进行化学修饰,从而制得符合通式(I)的分子。引入由岩藻糖部分代表的另一种糖的例子在现有文献中很容易找到,包括例如A.I.Zinin等,Russ.Chem.Bull.,1998,47,496-501和J.S.Debenham等,J.Org.Chem.,1996,61,6478-6479。单糖组装的的典型方法包括例如异头(anomeric)三氯亚氨逐乙酸酯、O-戊烯基、烷硫基、芳硫基、亚砜基(sulfoxydo)、卤素或磷酸基(phosphato)的活化。寡糖合成的各种例子可以参见许多综述,上述的一系列专论或例如“糖科学、化学和化学生物学(Glycoscience,Chemistry and Chemical Biology)”,编辑:B.Fraser-Reid,K.Tatsuta,J.Thiem,Springer-Verkag,Berlin Heidelberg,2001。
可以依据下文所述的示例性方案化学合成通式(I)的产物(在该方案中,氨基上的PxH也可代表苯二酰亚氨基或四氯苯二酰亚氨基之类的保护基团,如果在该碳水化合物的2位是叠氮基,则PxH也可代表N2)。P1-P20代表临时保护基团或最终骨架中所需的永久引入的修饰基团,例如酰化、烷基化或糖基化。X1-X4代表可异头活化的离去基团,例如三氯亚氨逐乙酸酯、O-戊烯基、烷硫基、芳硫基、亚砜基、卤素或磷酸基。可依据标准糖基化方案之一将两个含正确保护基团的单糖偶联在一起。正确选择的保护基团(P6)可以在不影响其它保护基团的条件下从得到的二糖的所需位置除去。将另一个单糖偶联到该脱去保护的位置,生成三糖。在不影响其它保护基团的条件下将正确选择的保护基团(P10)从得到的三糖中除去,然后可在该脱去保护的位置偶联另一个单糖,生成四糖。在不影响其它保护基团的条件下将正确选择的保护基团(P14)从得到的四糖中除去,然后可在该脱去保护的位置偶联另一个单糖,生成五糖。在不影响其它保护基团的条件下,除去得到的五糖的羟基或氨基上的任何正确选择的保护基团,从而在该位置进行特定的化学修饰,例如酰化、烷基化或糖基化。根据需要,该过程可以重复多次,在骨架上引入所有所需的修饰。最后对残余的保护基团进行脱保护,获得所需的骨架。
现有技术中可以找到该方案的代表性例子,包括例如K.C.Nicolaou等,J.Am.Chem.Soc,1992,114,8701。
可以依据下文所述的另一种示例性方案化学合成通式(I)的产物(在该方案中,氨基上的PxH也可代表苯二酰亚氨基或四氯苯二酰亚氨基之类的保护基团,如果在该碳水化合物的2位是叠氮基,则PxH也可代表N2)。P1-P16代表临时保护基团或最终骨架中所需的永久引入的修饰基团,例如酰化、烷基化或糖基化。X1-X3代表可异头活化的离去基团,例如三氯亚氨逐乙酸酯、O-戊烯基、烷硫基、芳硫基、亚砜基、卤素或磷酸基。Y1-Y4代表保护基团或可转化为可活化的离去基团的其它稳定基团,例如三氯亚氨逐乙酸酯、O-戊烯基、烷硫基、芳硫基、亚砜基、卤素或磷酸基。可依据标准糖基化方案将两个含正确保护基团的单糖偶联在一起。正确选择的基团(Y1)的活化可以引入可异头活化的基团X2,从而使得到的二糖与另一个单糖偶联。正确选择的基团(Y2)的活化可以引入可异头活化的基团X3,从而使得到的三糖与另一个单糖偶联。正确选择的基团(Y4)的活化可以引入可异头活化的基团X3,从而使得到的四糖与另一个单糖偶联,生成五糖。在不影响其它保护基团的条件下,除去得到的五糖的羟基或氨基上的任何正确选择的保护基团,从而在该位置进行特定的化学修饰,例如酰化、烷基化或糖基化。根据需要,该过程可以重复多次,在骨架上引入所有所需的修饰。最后对残余的保护基团进行脱保护,获得所需的骨架。
现有技术中可以找到该方案的代表性例子,包括例如D.Tailler等,J.Chem.Soc.,Chem.Commun.,1994,1827和J.S.Debenham等,J.Org.Chem.,1997,62,4591-4600。
除了上述两个在每一轮循环步骤中都加入单糖的基本常规例子外,现有技术中还包括其它方案的代表性例子,例如,不是加入单糖而是加入适当制备的二糖。这些方案包括例如S.Ikeshita等,Tetrahedron Lett.,1994,3123和L.X.Wang等,J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1,1994,621中所揭示的制备方法。
III-2.各种芳族链的合成
对于苯甲酰胺LCO,用苯甲酰氯进行与氨基四聚物偶联(酰化)的反应,对于苄基LCO,用苯甲醛来偶联(还原性烷基化)。
III-2.1.合成用十一碳-4Z-烯氧基链间位取代的芳族链
按照下面的反应过程制备甲酯15,可将其还原成醛或皂化成酸(酰氯前体)。为进行这一步,用1-碘代十一碳-4Z-烯13来烷基化3-羟基苯甲酸甲酯。酯15以76%的产率分离。
用两个步骤将酯转化成醛17。
此外,将酯15皂化,然后再与草酰氯反应得到酰氯19。
III-2.2.合成用十一烷氧基和十一碳-4-炔氧基链间位取代的芳族链
在无水DMF中用1-溴代十一烷或1-碘代十一碳-4-炔进行相同的过程,之后进行皂化并形成氯化物,得到酰氯23和27。
III-2.3.合成用十一碳-4Z-烯氧基链邻位或对位取代的芳族链
用类似的方法从29和33制备酰氯31和35,29和33000已经通过威廉森(Williamson)偶联1-碘代十一碳-4Z-烯13和2-羟基苯甲酸甲酯28(或水杨酸甲酯)或4-羟基苯甲酸甲酯32获得,其产率分别为66%和79%。
皂化和转化成氯化物在两种情况下都是定量的。
III-3.用各种苯甲酰氯N-酰化硫酸化的四聚物CO-IV(NH 2 ,S)
CO-IV(NH
2
,S)
III-3.1.与3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰氯19偶联
偶联可在存在碳酸氢钠时将原料溶于DMF-水混合物来进行。在这些条件下只有游离胺被酰化。用6当量氯化物在反应18小时之后,转化率达到约60%,但所述反应是高度选择性的。然后分离出33%所需产物3。产物的纯度通过HPLC检测。
产物3的紫外(UV)吸收光谱与参考化合物12完全不同,尤其是由于3中存在289nm的吸收峰。由于不存在苯甲酰胺基团,化合物12中不存在该峰。这极好地说明了,与天然Nod因子不同,本发明一些化合物的UV特性使它们易于检测。
与化合物12不同,当在289nm激发时化合物3时在345nm也具有特征性荧光。
II-3.2.偶联3-(十一烷氧基)苯甲酰氯23和3-(十一碳-4-炔氧基)苯甲酰氯27
重复对上述衍生物进行的相同过程,即溶于DMF-水混合物并使用若干当量的氯化物。
在这些条件下,以32%的产率(转化率为47%)获得了饱和的类似物6,并以31%的产率(转化率为70%)获得了含有三键的类似物7。其纯度也通过HPLC检测。
III-3.3.与2-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰氯31和4-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰氯35偶联
对这两种类似物采用类似的处理方法,邻位取代的衍生物8的产率为48%,对位取代的衍生物9的产率为40%。在这两个反应中使用4当量的氯化物。纯度通过HPLC检测。
III-4.用3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰氯19N-酰化未硫酸化的四聚物CO-IV(N H 2 )
CO-IV(NH
2
)
如前面的描述在DMF-水混合物中进行反应,其中的原料和氯化物都是可溶的。为便于最终的纯化,反应在碱性Dowex树脂(HCO3 -)存在下进行。
反应结束之后用乙腈/水混合物稀释反应介质,所需化合物通过过滤树脂、通过酸性Dowex(H+)树脂,浓缩,并用乙酸乙酯然后用水洗涤固体残余物得以纯化。如此分离出22%所需产物2。
III-5.用3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰氯19N-酰化岩藻糖化的五聚物CO-V(N H 2 ,Fuc)
CO-V(NH
2
,Fuc)
如对前面的产物描述在DMF-水混合物中进行反应,其中的原料和氯化物都是可溶的。为便于最终的纯化,反应在碱性Dowex树脂(HCO3 -)存在下进行。
反应结束之后用乙腈/水混合物稀释反应介质,所需化合物通过过滤树脂,通过酸性Dowex树脂(H+),浓缩,并用乙酸乙酯然后用水洗涤固体残余物得以纯化。如此分离出28%所需产物10。
III-6.用3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲醛还原性烷基化硫酸化的四聚物
III-6.1.烷基化四聚物CO-IV(NH 2 ,S)
还原性烷基化反应是在存在溴化锂时在无水DMF中进行的。采用12当量醛和15当量氰基硼氢化钠,24小时后通过硅胶层析分离出71%所需偶联产物4。
III-6.2.N-乙酰化获自还原性烷基化的偶联产物
该反应在存在碳酸氢钠时在乙酸乙酯-甲醇-水混合物中通过添加乙酸酐进行。12小时后通过H+树脂除去原料4。硅胶纯化之后以77%的产率分离出所需产物5。纯度通过HPLC检测。
IV化合物(I)的实施例
对于芳族衍生物,按照官方命名法对环进行编号。
在描述CO和LCO的NMR光谱时,糖从还原端开始编号:
对每种糖采用惯用编号。
2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰基)氨基-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-D-吡喃葡糖(2)
将7.2mg CO-IV(NH 2 )溶于200μL水和500μL DMF中,然后加热至40℃。然后加入36mg Dowex 1×2-100树脂(HCO3 -),之后加入160μL用蒸馏的THF配制的19的溶液(26μmol)。在48小时内分三次加入108mg HCO3 -树脂和480μL用蒸馏的THF配制的19的溶液(78μmol)。反应介质用3mL 1/1的乙腈/水混合物稀释,收集反应介质,除去树脂,然后通过脱脂棉过滤以除去未去除的树脂珠。使滤液通过Dowex 50×8-100树脂(H+)然后浓缩,然后用乙酸乙酯接着用水洗涤固体残余物。得到2mg白色粉末,产率为22%。
1H NMR(400MHz,20/1DMSO-d6/D2O)δ(ppm):
7.40-7.31(m,3H,ArH-2,ArH-6 and ArH-5),7.04(m,1H,ArH-4),5.41-5.35(m,2H,CH=CH),4.87(d,0.7H,J1.2=2.3Hz,H-1αI),4.52(d,1H,J=8.3Hz,H-1βIV),4.42(d,0.3H,J=8.0Hz,H 1-βI),4.33(2d,2H,J=8.3Hz,H-1 βII-III),3.98(t,2H,J=6.0Hz,ArOCH 2-CH2).3.78-3.05(m,24H,其它糖的H),2.16(dt,2H,J=5.8和J=6.7Hz,CH 2 -CH=CH),1.97(dt,2H,J=6.0和J=6.2Hz,CH=CH-CH 2 ),1.81/1.81/1.79(3s,9H,3COCH 3 ),1.80-1.72(m,2H,ArOCH2-CH 2-CH2),1.28-1.13(m,8H,4CH 2),0.81(t,3H,CH 3,J=6.5Hz)。
质谱:
正电喷雾(ESI)电离m/z=1183.5[M+Na]+
2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰基)氨基-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-6-O-磺基-D-吡喃葡糖,钠盐(3)
将15mgCO-IV(NH 2 ,S)(17μmol)溶于100μL水和250μL DMF。然后加入3mg碳酸氢钠(34μmol),之后加入20μL浓度为0.25g/mL(16.4μmol)的19的THF溶液。将反应介质加热至60℃并在18小时内分六次加入100μL 48的溶液和10mg碳酸氢钠。浓缩之后将残余物置于二氯甲烷(DCM)/甲醇(5/1)中用硅胶柱纯化,同时大量稀释以除去脂质链。然后用E/M/W(7/2/1乙酸乙酯/甲醇/水)进行洗脱。这样分离出6.5mg白色固体,产率为33%。
1H NMR(400MHz,DMSO-CD3OD(1/2))δ(ppm):
7.48和7.41(m,2H,ArH-2和ArH-6),7.36(dd,1H,ArH-5,J5.67.7Hz和J5.48.1Hz),7.07(ddd,1H,ArH-4,J4.2≈J4.6 1.4Hz),5.41(m,2H,CH=CH),5.03(d,0.8H,H-1αI,J1*a*.2 3.2Hz),4.68-4.59-4.50(3d,3H,H-1βII,III,IV,J1 .2 8.4Hz,8.5Hz和8.7Hz),4.56(d,0.2H,H-1βI,J1 .2 7.7Hz),4.25-3.30(m,26H,CH 2-OAr,糖的其它H),2.25(td,2H,CH 2-CH=CH-CH2,J6.7Hz和J6.2Hz),2.10-1.90(m,11H,CH2-CH=CH-CH 2和3CH 3CO),1.83(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2,J 6.7Hz),1.35-1.20(m,8H,4CH 2),0.88(m,3H,CH 3)
质谱:
负ESI m/z=1139.4[M-Na]-
UV:289nm
荧光:λex:289nm;λem:345nm
2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-3-(十一碳-4Z-烯氧基)苄基)氨基-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-6-O-磺基-D-吡喃葡糖,钠盐(4)
将11mgCO-IV(NH 2 ,S)(12μmol)溶于0.5mL DMF并在其中加入12mg溴化锂。加入2mg氰基硼氢化钠(32μmol)和100μL浓度为73mg/mL(26μmol)的17的THF溶液。反应介质在40℃加热4小时。每2小时加入2当量醛和2.5当量氰基硼氢化钠,即总共加入12当量醛和15当量氰基硼氢化钠。尽管转化未完全,用0.5N盐酸破坏过量的氰基硼氢化钠来终止反应。当不再产生气体时用水稀释介质并冻干。将所得物质溶于水,加入5mg碳酸氢钠(59μmol)至碱性pH,然后将所得物质与甲醇一起共蒸发两次。将残余的白色固体置于DCM/甲醇(5/1)中放置在硅胶柱上,同时大量稀释以除去脂质链。然后用E/M/W(5/2/1)之后是(4/1/1)进行洗脱。这样分离出10mg白色针状物,产率为71%。
1H NMR(400MHz,DMSO-CD3OD(2/1))δ(ppm):
7.31(dd,1H,ArH-5,J4.5 8.2Hz和J5.6 7.8Hz),7.02(m,2H,ArH-2和ArH-6),6.90(dd,1H,ArH-4,J4.6 2.3Hz),5.51(m,2H,CH=CH),5.08(d,0.8H,H-1αI,J1 .2 3.1Hz),4.67(m,2.2H,H-1βI,II,III),4.47(d,1H,H-1βIV,J1 .2 8.0Hz),4.06(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),3.94(s,2H,NH-CH 2-Ar),4.25-3.45(m,23H,糖的其它H),2.45(dd,1H,H 2 IV,J1 .2≈J2.3 8.8Hz),2.31-2.12(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),2.07-2.04-2.01(3s,9H,3 CH 3CO),1.89(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH,J6.9Hz),1.45-1.25(m,8H,4 CH 2),0.97(t,3H,CH 3,J6.8Hz)
13C NMR(50MHz,DMSO-CD3OD(2/1))δ(ppm):
172(3CH3 CO),160(ArC-3),132-131-130(ArC-1,ArC-5,CH=CH),122(ArC-6),115(ArC-2,ArC-4),105(C-1βII,III,IV),98(C-1βI),92(C-1αI),82-53(糖的21个C和Ar-CH2-NH),68(CH2-OAr),33-23(10CH2和3CH3CO),14(CH3)
质谱:
负ESI m/z=1125.4[M-Na]-
2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-3-(十一碳-4Z-烯氧基)苄基)乙酰氨基-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-6-O-磺基-D-吡喃葡糖,钠盐(5)
将20mg碳酸氢钠和15μL乙酸酐加入0.3mL E/M/W(1/1/1)中的13mg4(11μmol)的溶液。反应介质在室温下搅拌12小时。浓缩之后,将残余的油状物溶于E/M/W(1/1/1)并加入Dowex 50×8-100H+树脂。过滤混合物并在滤液中加入Amberlite IR120Na+树脂。过滤和浓缩之后,用E/M/W(4/1/1)通过层析纯化产物。如此分离出10mg白色固体,产率为77%。
1H NMR(400MHz,DMSO-CD3OD(2/1))δ(ppm):
7.25-7.18(2t,1H,ArH-5,J5.4 7.8Hz和J5.6 7.9Hz),7.10-6.85(m,2H,ArH-2和ArH-6),6.82-6.75(2d,1H,ArH-4),5.40(m,2H,CH=CH),5.06(d,0.6H,H-1I,J1 .2 3.4Hz),4.75-4.35(m,3.4H,H-1βI,II,III,IV),4.30-4.05(m,2H,H-6a,bI),4.00-3.30(m,25H,糖的其它H和CH 2-OAr),3.80(s,2H,NAc-CH 2-Ar),2.90(m,1H,H-2IV),2.23-2.03(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.99-1.90(m,12H,CH 3CO),1.80(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH,J6.9Hz),1.35-1.20(m,8H,4CH 2),0.87(m,3H,CH 3)
13C NMR(50MHz,DMSO-CD3OD(2/1))δ(ppm):176(CH3 CON),174-173-173(3CH3 CO),161(ArC-3),141(ArC-1),132-130-129-127(ArC-2,ArC-4,ArC-5,ArC-6,CH=CH),103(3C-1βI,II,IV),100(C-1βI),92(C-1αI),82-50(糖,Ar-CH2-NH和CH2-OAr的24C),33-23(10CH2和3CH3CO),14(CH3)
质谱:负ESI m/z=1067.4[M-Na]-
2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-3-(十一烷酰氧基)苯甲酰基)氨基-β-D-吡喃葡糖基)-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-6-O-磺基-D-吡喃葡糖,钠盐(6)
将15mgCO-IV(NH 2 ,S)(17μmol)溶于100μL水和250μL DMF。然后加入6mg碳酸氢钠(71μmol)和25μL浓度为210mg/mL(17μmol)的23的THF溶液。将反应介质加热至60℃并在24小时内分8次加入200μL氯化物溶液和16mg碳酸氢钠。浓缩之后,通过将残余物置于DCM/甲醇(5/1)中在硅胶柱上进行纯化,同时大量稀释以除去脂质链。然后用E/M/W(4/1/1)进行洗脱。如此分离出6.3mg白色固体,产率为32%。
1H NMR(400MHz,DMSO-CD3OD(1/3))δ(ppm):7.44(m,2H,ArH-2和ArH-6),7.39(dd,1H,ArH-5,J5.4≈J5.6 7.9Hz),7.10(ddd,1H,ArH-4,J4.6≈J4.22.1Hz),5.05(d,0.7H,H-1αI,J1 .2 3.0Hz),4.70-4.40(m,3.3H,H-1βI,II,III,IV),4.22(m,1H,H-6aI),4.10-3.20(m,24H,CH 2-OAr和糖的其它H),2.03-1.99-1.96(3s,9H,CH 3CO),1.80(m,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2),1.35-1.25(m,8H,4CH 2),0.92(t,3H,CH 3,J6.5Hz)
质谱:负ESI m/z=1141.5[M-Na]-
2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-3-(十一碳-4Z-炔氧基)苯甲酰基)氨基-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-6-O-磺基-D-吡喃葡糖,钠盐(7)
将14mgCO-IV(NH 2 ,S)(16μmol)溶于100μL水和250μL DMF。然后加入5mg碳酸氢钠(60μmol)和25μL浓度为190mg/mL(16μmol)的27的THF溶液。将反应介质加热至60℃并在24小时内分8次加入200μL氯化物溶液和16mg碳酸氢钠。浓缩之后,通过将残余物置于DCM/甲醇(5/1)中在硅胶柱上进行纯化,同时大量稀释以除去脂质链。然后用E/M/W(4/1/1)进行洗脱。如此分离出5.7mg白色固体状的所需产物,产率为31%。
1H NMR(400MHz,DMSO-CD3OD(1/2))δ(ppm):7.43(m,2H,ArH-2和ArH-6),7.37(dd,1H,ArH-5,J5.4 8.1Hz和J5.6 8.0Hz),7.10(ddd,1H,ArH-4,J4.2≈J4.62.0Hz),5.04(d,0.7H,H-1αI,J1 .2 3.3Hz),4.65-4.59(2d,2H,H-1βII,III,J1 .28.4Hz和J1 .28.5Hz),4.54(d,0.3H,H-1βI,J1 .2 7.9Hz),4.49(d,1H,H-1βIV,J1 .28.7Hz),4.23(dd,1H,H-6aI,J6a.6b 11.1Hz和J6a.5 3.7Hz),4.12(t,2H,CH 2-OAr,J 6.2Hz),4.10-3.40(m,21H,糖的其它H),2.35-2.13(2m,4H,CH 2-C≡C-CH 2),2.02-1.98-1.96(3s,9H,3CH 3CO),1.92(m,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2),1.45-1.25(m,8H,4CH 2),0.88(t,3H,CH 3,J6.7Hz)
13C NMR(62.5MHz,DMSO-CD3OD(1/2))δ(ppm):
173(3CH3 CO),170(NCOAr),158(ArC-3),137(ArC-1),131(ArC-5),121(ArC-6),119(ArC-4),115(ArC-2),103(C-1βII,III,IV),96(C-1βI),92(C-1αI),82-50(糖,C≡C和CH2-OAr的20C),33-16(7CH2和3CH3CO),15(CH3)
质谱:
负ESIm/z=1137.1[M-Na]-
2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-2-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰基)氨基-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-6-O-磺基-D-吡喃葡糖,钠盐(8)
将10mgCO-IV(NH 2 ,S)(11μmol)溶于100μL水和250μL DMF。然后加入2mg碳酸氢钠(24μmol)和15μL浓度为115mg/mL(6μmol)的31的THF溶液。将反应介质加热至60℃并在18小时内分7次加入105μL氯化物溶液和6mg碳酸氢钠。浓缩之后,通过将残余物置于DCM/甲醇(5/1)中在硅胶柱上进行纯化,同时大量稀释以除去脂质链。然后用E/M/W(9/2/1)进行洗脱。如此分离出6.2mg白色固体,产率为48%(但转化率仅为50%)。
1H NMR(400MHz,DMSO-CD3OD(1/2))δ(ppm):
7.99(dd,1H,ArH-6,J6.5 7.5Hz和J6.4 1.8Hz),7.55(ddd,1H,ArH-4,J4.3 8.3Hz和J4.5 7.8Hz),7.20(d,1H,ArH-3),7.10(dd,1H,ArH-5),5.52(m,2H,CH=CH),5.06(d,0.7H,H-1αI,J1 .2 3.0Hz),4.70-4.60-4.53(4d叠加的,3.6H,H-1βI,II,III,IV),4.20-3.40(m,25H,糖的其它H和CH 2-OAr),2.33-2.11(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),2.03-2.01-2.00(3s,9H,3CH 3CO),2.05(m,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2),1.50-1.20(m,8H,4CH 2),0.94(t,3H,CH 3,J6.8Hz)
13C NMR(62.5MHz,DMSO-CD3OD(1/2))δ(ppm):
172(3CH3 CO),171(NCOAr),158(ArC-1),133(ArC-4,CH=CH),129(ArC-6),122(ArC-5,),114(ArC-3),103(C-1βII,III,IV),96(C-1βI),92(C-1αI),82-50(糖的所有其它C和CH2OAr),33-24(7CH2和3CH3CO),15(CH3)
质谱:
负ESI m/z=1139.5[M-Na]-
2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-4-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰基)氨基-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-6-O-磺基-D-吡喃葡糖,钠盐(9)
将10mgCO-IV(NH 2 ,S)(11μmol)溶于100μL水和250μL DMF。然后加入2mg碳酸氢钠(24μmol)和15μL浓度为115mg/mL(6μmol)的35的THF溶液。将反应介质加热至60℃并在17小时内分7次加入105μL氯化物溶液和6mg碳酸氢钠。浓缩之后,通过将残余物置于DCM/甲醇(5/1)中在硅胶柱上进行纯化,同时大量稀释以除去脂质链。然后用E/M/W(9/2/1)进行洗脱。如此分离出5.2mg白色固体,产率为40%(但转化率仅为60%)。
1H NMR(400MHz,DMSO-CD3OD(1/2))δ(ppm):
7.89(d,2H,ArH-2和ArH-6,J2.3≈J6.5 8.8Hz),7.04(d,2H,ArH-3和ArH-5),5.48(m,2H,CH=CH),5.05(d,0.6H,H-1αI,J1 .2 3.1Hz),4.69-4.55-4.50(4d叠加的,3.6H,H-1βI,II,III,IV),4.30-3.40(m,23H,糖的其它H),4.10(t,CH 2-OAr,J6.3Hz),2.28-2.09(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),2.02-1.99-1.97(3s,9H,3CH 3CO),1.89(m,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2),1.45-1.25(m,8H,4CH 2),0.93(t,3H,CH 3,J7.0Hz)
13C NMR(62.5MHz,DMSO-CD3OD(1/2))δ(ppm):
172(3CH3 CO),169(NCOAr),163(ArC-1),132-130-129(ArC-2,ArC-6,CH=CH),115(ArC-3,ArC-5),103(C-1βII,III,IV),97(C-1βI),92(C-1αI),83-50(糖的所有其它C和CH2OAr),33-23(7CH2和3CH3CO),15(CH3)
质谱:
负ESI m/z=1139.5[M-Na]-
2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-4-O-{2-乙酰氨基-4-O-[2-乙酰氨基-2-脱氧-4-O-(2-脱氧-2-(N-3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰基)氨基-β-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基}-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖基]-2-脱氧-6-O-(-α-L-吡喃岩藻糖基(fucopyranosyl))-D-吡喃葡糖(10)
将岩藻糖基五聚体CO-V(NH 2 ,Fuc)(7.3mg,6.4μmol)溶于H2O(140μL),然后加入DMF(350μL)并使混合物达到30℃。然后加入Dowex 1×2-100树脂(HCO3 -),之后加入酰氯19(6mg)的溶液(THF,110μL)。将反应混合物搅拌24小时,期间再加入三次树脂和酰氯溶液。然后将反应介质稀释于H2O/CH3CN(1/1,2mL),加热至56℃,然后通过脱脂棉过滤上清液。树脂珠和烧瓶壁在56℃用H2O/CH3CN(4/1、7/3、3/2、1/1、2/3、3/7和1/4,每次2mL)萃取数次。使各部分通过Dowex 50×8-100树脂(H+),然后收集并浓缩。残余物依次用EtOAc(3×1mL)和H2O(3×1mL)洗涤,然后通过加热至56℃然后超声使其重溶于H2O/CH3CN(1/1,10mL)。然后冻干溶液得到白色粉末状的所需产物(2.5mg,28%)。
然后用氨水溶液(H2O,2%)洗脱留在酸性树脂上的原料(2.3mg,31%)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6/D2O 20/1)δ(ppm):
7.43-7.30(m,3H,ArH-2,ArH-6和ArH-5);7.05(m,1H,ArH-4);5.45-5.32(m,2H,CH=CH);4.84(d,0.8H,J1.2=1.9Hz,H-1αI);4.66(d,0.8H,J1.2<1.0Hz,H-1Fuc-GlcNAc),4.65(d,0.2H,J1.2<1.0Hz,H-1Fuc-GlcNAcβ),4.52(d,H,J=8.5Hz,H-1βIV),4.45/4.35/4.33(4d,4H,J=8.5Hz,H-1βII-IV),4.42(d,0.2H,J=7.0Hz,H-1βI);3.99(t,2H,J=6.1Hz,ArOCH 2-CH2),3.88(dt,1H,H-5Fuc),3.78-3.05(m,33H,糖的其它H),2.17(dt,2H,J=6.0和J=6.8Hz,CH 2 -CH=CH),1.99(dt,2H,J=5.9和J=6.2Hz,CH=CH-CH 2 ),1.82/1.81/1.81/1.79(4s,12H,4COCH 3 ),1.80-1.72(m,2H,ArOCH2-CH 2),1.31-1.15(m,8H,4CH 2),1.08(d,0.6H,J5.6=6.9Hz,H-6Fuc-GlcNAcβ),1.05(d,2.4H,J5.6=6.5Hz,H-6Fuc-GlcNAc),0.82(t,3H,CH 3,J=6.5Hz).
3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酸甲酯(15)
在无水DMF(20mL)中的1.7g13(6.07mmol)中加入850mg14(6.15mmol)和900mg K2CO3(6.51mmol)。在90℃反应4小时后浓缩反应介质,溶解于DCM中,然后用水洗涤。得到1.87g黄色油状物,用戊烷/乙酸乙酯(50/1)在硅胶上对其进行层析。分离出1.37g黄色油状物,产率为76%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.60(ddd,1H,ArH-6,J6.58.0Hz和J6.4≈J6.2 0.5Hz),7.52(dd,1H,ArH-2,J2.43.0Hz),7.31(dd,1H,ArH-5,J5.4 8.0Hz),7.07(ddd,1H,ArH-4),5.38(m,2H,CH=CH),3.98(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),3.89(s,3H,OCH 3),2.22-1.99(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.83(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH,J6.8Hz),1.55-1.20(m,8H,4CH 2),0.84(t,3H,CH 3,J 7.5Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
131-129-128(C-5,CH=CH),122(C-6),120(C-4),115(C-2),66(CH2-OAr),52(CH3O),32-22(7CH2),14(CH3)
质谱:
正ESI m/z=327.2[M+Na]+
C19H28O3Na的高分辨率计算值:327.193614,实测值:327.193200
元素分析:
计算值实测值
C 74.96 74.68
H 9.27 9.37
O 15.77 15.79
红外(cm-1):2970-2950-2927-2858-1726-1586-1446-1288-1228-756
3-(十一碳-4Z-烯氧基)苄醇(16)
0℃下向在乙醚(3mL)中的140mg15(460μmol)中加入35mg氢化铝锂(922μmol)。反应1小时30分钟之后反应介质,用乙醚稀释并用2滴水使其水解。通过硅藻土过滤之后用Na2SO4干燥并浓缩,分离出127mg无色油状物,产率为99%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.18(dd,1H,ArH-5,J5.6 8.0Hz和J5.4 8.3Hz),6.84(m,2H,ArH-2和ArH-4),6.75(dd,1H,ArH-4,J4.2 2.9Hz),5.32(m,2H,CH=CH),4.58(s,2H,CH 2OH),3.89(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),2.16-1.95(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.76(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH,J6.8Hz),1.45-1.18(m,8H,4CH 2),0.84(t,3H,CH 3,J6.3Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
159(C-3),142(C-1),131-130-128(C-5,CH=CH),119(C-6),114(C-4),113(C 2),67(CH2-OAr),65(CH2OH),32-23(7CH2),14(CH3)
质谱:
正ESI m/z=299.2[M+Na]+
C18H28O2Na的高分辨率计算值:299.198700,实测值:299.199250红外(cm-1):3329,3005,2940,2925,2855,1669,1602,1452,1264
3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲醛(17)
氩气下,在通过与甲苯共蒸发干燥的120mg醇16(434μmol)中加入10mL无水DCM,然后加入190mg PCC(881μmol)。将反应物在DCM的回流点加热1小时。冷却后用乙醚稀释反应介质并通过Florisil过滤。浓缩之后得到118mg黄色油状物,产率为99%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
9.95(s,1H,CHO),7.42(m,2H,ArH-6和ArH-5),7.36(d,1H,ArH-2,J2.4 2.9Hz),7.15(m,1H,ArH-4),5.39(m,2H,CH=CH),3.99(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),2.21-1.99(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.84(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH,J6.8Hz),1.40-1.15(m,8H,4CH 2),0.84(t,3H,CH 3,J6.6Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)(ppm):
192(CHO),160(C-3),138(C-1),131-130-128(C-5,CH=CH),123(C-6),122(C-4),113(C-2),67(CH2-OAr),52(CH3O),32-23(7CH2),14(CH3)
质谱:
化学电离(CI) 1%的DCM溶液
良好的解吸峰
M+1=275
红外(cm-1):3005-2940-2927-2855-2723-1700-1599-1452-1263-787
3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酸(18)
将4mL 1N氢氧化钠溶液(4.0mmol)分批加入在甲醇(30mL)中的1.14g15(3.74mmol)。将溶液回流过夜。再加入4mL 1N氢氧化钠溶液,并将混合物再回流1小时30分钟。蒸发去溶剂之后反应介质用0.5N HCl酸化并用DCM萃取。得到1.04g黄色油状物,产率为96%。
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ(ppm):
10.00-9.00(bd,1H,CO2 H),7.69(d,1H,ArH-6,J6.5 7.8Hz),7.60(d,1H,ArH-2,J2.4 2.4Hz),7.35(dd,1H,ArH-5,J5.4 8.3Hz),7.14(dd,1H,ArH-4),5.40(m,2H,CH=CH),4.00(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),2.21-2.00(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.85(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH,J6.8Hz),1.35-1.05(m,8H,4CH 2),0.85(t,3H,CH 3,J6.5Hz)
13C NMR(50MHz,CDCl3)δ(ppm):
172(CO2H),159(C-3),131-130-130-128(C-1,C-5,CH=CH),121-122(C-4,C-6),115(C-2),67(CH2-OAr),32-23(7CH2),14(CH3)
质谱:
负ESI m/z=289.1[M-H]-
C18H25O3的高分辨率计算值:289.180370,实测值:289.180730
元素分析:
计算值实测值
C 74.45 74.29
H 9.02 9.01
红外(cm-1):2970-2950-2925-2854-1695-1585-1286-757
3-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰氯(19)
氩气下,在溶于20mL无水DCM的100mg用甲苯干燥的18(345μmol)中加入1mL草酰氯(11.5mmol)和2滴无水DMF。将此介质在室温下搅拌2小时,然后浓缩得到106mg黄色油状的所需氯化物,产率为99%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.71(ddd,1H,ArH-6,J6.5 8.3Hz,J6.4 2.4Hz和J6.2 0.9Hz),7.57(dd,1H,ArH-2,J2.4 1.6Hz),7.39(dd,1H,ArH-5,J5.4 8.3Hz),7.20(ddd,1H,ArH-4),5.40(m,2H,CH=CH),3.99(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),2.23-2.00(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.85(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH,J7.0Hz),1.28-1.15(m,8H,4CH 2),0.85(t,3H,CH 3,J6.5Hz)
3-(十一烷氧基)苯甲酸甲酯(21)
将350mg14(2.30mmol)和330mg K2CO3(2.39mmol)加入在无水DMF(7mL)中的554mg 1-溴代十一烷(2.35mmol)。在90℃反应16小时之后将反应介质浓缩,溶解于DCM中并用水洗涤。得到607mg黄色油状物,用戊烷/乙酸乙酯(60/1)对其进行硅胶层析。分离出579mg黄色油状的所需偶合产物,产率为82%。
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.62(m,1H,ArH-6),7.55(m,1H,ArH-2),7.34(dd,1H,ArH-5,J5.4 8.1Hz和J5.6 7.7Hz),7.10(ddd,1H,ArH-4,J4.6 2.8Hz和J4.2 0.8Hz),4.00(t,2H,CH 2-OAr,J6.6Hz),3.92(s,3H,OCH 3),1.80(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2,J6.6Hz和J6.4Hz),1.52-1.20(m,16H,8CH 2),0.89(t,3H,CH 3,J6.7Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
167(CO2CH3),159(C-3),131(C-1),129(C-5),122(C-6),120(C-4),115(C-2),68(CH2-OAr),52(CH3O),32-23(9CH2),14(CH3)
质谱:
正ESI m/z=329.2[M+Na]+
C19H30O3Na的高分辨率计算值:329.209264,实测值:329.207940红外(cm-1):2950-2925-2854-1727-1586-1446-1287-1228-756
3-(十一烷氧基)苯甲酸(22)
将600μL 1N氢氧化钠溶液(600μmol)分批加入在甲醇(4mL)中的112mg21(366μmol)。将溶液回流2小时。蒸发去溶剂之后反应介质用0.5N HCl酸化并用DCM萃取。得到107mg白色固体状的所需酸,产率为99%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.70(d,1H,ArH-6,J6.5 7.8Hz),7.62(m,1H,ArH-2),7.38(dd,1H,ArH-5,J5.48.0Hz),7.16(dd,1H,ArH-4,J4.2 2.1Hz),4.02(t,2H,CH 2-OAr,J6.5Hz),1.99(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2,J6.6Hz),1.55-1.20(m,16H,8CH 2),0.89(t,3H,CH 3,J6.5Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
171(CO2H),159(C-3),130(C-1),129(C-5),122(C-6),121(C-4),115(C-2),68(CH2-OAr),32-23(9CH2),14(CH3)
质谱:
负ESI m/z=291.2[M-H]-
C18H27O3的高分辨率计算值:291.196020,实测值:291.196560红外(cm-1):2950-2920-2850-2700-2400-1680-1603-1455-1420-1312-1247-757熔点:88℃
3-(十一烷氧基)苯甲酰氯(23)
氩气下,在溶于20mL无水DCM的93mg用甲苯干燥的酸22(318μmol)中加入1mL草酰氯(11.5mmol)和2滴无水DMF。将此介质在室温下搅拌2小时,然后浓缩得到99mg黄色油状物,产率为99%。
3-(十一碳-4-炔氧基)苯甲酸甲酯(25)
将325mg14(2.14mmol)和300mg K2CO3(2.17mmol)加入600mg在无水DMF(7mL)中的24(2.16mmol)。在90℃反应6小时后将反应介质浓缩,用DCM洗涤然后溶解于水中。得到639mg黄色油状物,用戊烷/乙酸乙酯(50/1)对其进行硅胶层析。分离出429mg黄色油物,产率为66%。
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.63(m,1H,ArH-6),7.57(m,1H,ArH-2),7.31(dd,1H,ArH-5,J5.4 8.1Hz和J5.6 7.8Hz),7.11(ddd,1H,ArH-4,J4.62.4Hz和J4.2 0.8Hz),4.11(t,2H,CH 2-OAr,J6.2Hz),3.92(s,3H,OCH 3),2.39-2.15(2m,4H,CH 2-C≡C-CH 2),1.98(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-C≡C,J6.5Hz),1.52-1.23(m,8H,4CH 2),0.88(t,3H,CH 3,J6.7Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
167(CO2CH3),159(C-3),131(C-1),129(C-5),122(C-6),120(C-4),115(C-2),81-79(C≡C),67(CH2-OAr),52(CH3O),31-15(7CH2),14(CH3)
质谱:
正ESI m/z=325.1[M+Na]+
C19H26O3Na的高分辨率计算值:325.177964,实测值:325.178070红外(cm-1):2950-2931-2857-1726-1586-1446-1288-1228-756
3-(十一碳-4-炔氧基)苯甲酸(26)
将300μL 1N氢氧化钠溶液(300μmol)分批加入在甲醇(2mL)中的48mg25(157μmol)。将溶液回流1小时30分钟。蒸发去溶剂之后反应介质用0.5NHCl酸化并用DCM萃取。得到45mg淡黄色油状物,产率为99%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
11.00-10.00(bd,1H,CO2 H),7.72(d,1H,ArH-6,J6.5 7.7Hz),7.64(m,1H,ArH-2),7.38(dd,1H,ArH-5,J5.4 8.1Hz),7.17(dd,1H,ArH-4,J4.2 2.7Hz),4.13(t,2H,CH 2-OAr,J6.1Hz),2.39-2.15(2m,4H,CH 2-C≡C-CH 2),1.99(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-C≡C,J6.5Hz),1.50-1.20(m,8H,4CH 2),0.88(t,3H,CH 3,J6.7Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
172(CO2H),159(C-3),131(C-1),129(C-5),123(C-6),121(C-4),115(C-2),81-79(C≡C),67(CH2-OAr),31-15(7CH2),14(CH3)
质谱:
负ESI m/z=287.1[M-H]-
C18H23O3的高分辨率计算值:287.164719,实测值:287.164820红外(cm-1):2954-2929-2855-2700-2400-1690-1592-1452-1414-1288-1247-756
3-(十一碳-4Z-炔氧基)苯甲酰氯2(27)
氩气下,在溶于17mL无水DCM的80mg用甲苯干燥的酸26(278μmol)中加入850μL草酰氯(9.74mmol)和2滴无水DMF。将此介质在室温下搅拌2小时,然后浓缩得到85mg黄色油状物,产率为99%。
2-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酸甲酯(29)
将88mg28(578μmol)和77mg K2CO3(557μmol)加入140mg在无水DMF(2mL)中的13(500μmol)。在90℃反应8小时后将反应介质浓缩,溶解于DCM中并用水洗涤。得到137mg黄色油状物,用戊烷/乙酸乙酯(40/1)对其进行硅胶层析。分离出100mg黄色油物,产率为66%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.79(dd,1H,ArH-6,J6.5 8.1Hz和J6.4 1.9Hz),7.43(ddd,1H,ArH-4,J4.3 8.5Hz,J4.5 7.3Hz),6.94(m,2H,ArH-5和ArH-3),5.40(m,2H,CH=CH),4.02(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),3.89(s,3H,OCH 3),2.28-2.01(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2,J6.6Hz),1.89(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2,J6.6Hz),1.50-1.16(m,8H,4CH 2),0.86(t,3H,CH 3,J6.6Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
167(C=O),158(C-2),133(C-4),131(CH=CH),128(C-6),120(C-1),119(C-5),113(C-3),68(CH2-OAr),52(CH3O),32-22(7CH2),14(CH3)
质谱:
正ESI m/z=327.2[M+Na]+
C19H28O3Na的高分辨率计算值:327.193914,实测值:327.192560红外(cm-1):3000-2962-2925-2855-1734-1601-1491-1456-1305-1250-754
2-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酸(30)
将500μL 1N氢氧化钠溶液(500μmol)分批加入在甲醇(3mL)中的80mg29(263μmol)。将溶液回流24小时。蒸发去溶剂之后反应介质用0.5N HCl酸化并用DCM萃取。得到76mg黄色油状物,产率为99%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
12.00-10.00(bd,1H,CO2 H),8.16(dd,1H,ArH-6,J6.5 7.8Hz和J6.4 1.9Hz),7.54(ddd,1H,ArH-4,J4.3 8.4Hz和J4.5 7.6Hz),7.10(ddd,1H,ArH-5,J5.3 0.8Hz),7.03(dd,1H,ArH-3),5.40(m,2H,CH=CH),4.24(t,2H,CH 2-OAr,J6.4Hz),2.25(m,2H,CH 2-CH=CH-CH2),1.97(m,4H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH-CH 2),1.35-1.10(m,8H,4CH 2),0.84(t,3H,CH 3,J6.6Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
165(CO2H),157(C-2),135(C-4),134-132(CH=CH),127(C-6),122(C-5),117(C-1),112(C-3),69(CH2-OAr),32-22(7CH2),14(CH3)
质谱:
负ESI m/z=289.2[M-H]-
C18H25O3的高分辨率计算值:289.180370,实测值:289.179060
2-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰氯(31)
氩气下,在溶于15mL无水DCM的76mg用甲苯干燥的酸30(262μmol)中加入800μL草酰氯(9.17mmol)和2滴无水DMF。将此介质在室温下搅拌2小时,然后浓缩得到80mg黄色油状物,产率为99%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.97(dd,1H,ArH-6,J6.5 7.9Hz和J6.4 1.7Hz),7.46(m,1H,ArH-4),6.90(m,2H,ArH-5和ArH-3),5.30(m,2H,CH=CH),3.95(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),2.20-1.90(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.79(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2-CH=CH,J6.6Hz),1.20-1.09(m,8H,4CH 2),0.76(t,3H,CH 3,J6.7Hz)
4-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酸甲酯(33)
将90mg32(590μmol)和81mg K2CO3(590μmol)加入150mg在无水DMF(2mL)中的13(535μmol)。在90℃反应7小时后将反应介质浓缩,溶解于DCM中并用水洗涤。得到163mg黄色油状物,用戊烷/乙酸乙酯(80/1)对其进行硅胶层析。分离出129mg黄色油状的所需偶联产物,产率为79%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.97(d,2H,ArH-2和ArH-6,J6.5≈J2.3 8.8Hz),6.89(d,2H,ArH-3和ArH-5),5.39(m,2H,CH=CH),3.99(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),3.88(s,3H,OCH 3),2.22-2.00(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.84(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2,J6.8Hz),1.40-1.12(m,8H,4CH 2),0.85(t,3H,CH 3,J6.6Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):167(C=O),163(C-4),131(C-2和C-6),130-128(CH=CH),122(C-1),114(C-5和C-3),67(CH2-OAr),52(CH3O),32-23(7CH2),14(CH3)
质谱:
正ESI m/z=327.2[M+Na]+
C19H28O3Na的高分辨率计算值:327.193914,实测值:327.192630红外(cm-1):3000-2962-2925-2855-1720-1607-1511-1435-1279-1254-846
4-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酸(34)
将550μL 1N氢氧化钠溶液(550μmol)分批加入在甲醇(4mL)中的109mg33(358μmol)。将溶液回流20小时。蒸发去溶剂之后反应介质用0.5N HCl酸化并用DCM萃取。得到102mg白色固体,产率为98%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
12.00-11.00(bd,1H,CO2 H),8.07(d,2H,ArH-2和ArH-6,J2.3≈J6.5 8.5Hz),6.94(d,2H,ArH-3和ArH-5),5.42(m,2H,CH=CH),4.03(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),2.26-2.03(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.88(tt,2H,ArO-CH2-CH 2-CH2,J6.8Hz),1.40-1.10(m,8H,4CH 2),0.89(t,3H,CH 3,J6.6Hz)
13C NMR(62.5MHz,CDCl3)δ(ppm):
172(CO2H),164(C-4),132(C-2和C-6),131-128(CH=CH),121(C-1),114(C-3和C-5),67(CH2-OAr),32-22(7CH2),14(CH3)
质谱:
负ESI m/z=289.2[M-H]-
C18H25O3的高分辨率计算值:289.180370,实测值:289.178710
4-(十一碳-4Z-烯氧基)苯甲酰氯(35)
氩气下,在溶于18mL无水DCM的101mg用甲苯干燥的酸34(348μmol)中加入1mL草酰氯(11.5mmol)和2滴无水DMF。将此介质在室温下搅拌2小时,然后浓缩得到107mg黄色油状物,产率为99%。
1H NMR(250MHz,CDCl3)δ(ppm):
7.96(d,2H,ArH-2和ArH-6,J2.3≈J6.5 8.7Hz),6.99(d,2H,ArH-3和ArH-5),5.43(m,2H,CH=CH),4.10(t,2H,CH 2-OAr,J6.3Hz),2.27-2.03(2m,4H,CH 2-CH=CH-CH 2),1.91(tt,2H,ArO-CH2-CH2-CH 2,J6.7Hz),1.35-1.12(m,8H,4CH 2),0.89(t,3H,CH 3,J6.6Hz)
V.活性测试
V.1对Galegoid属温带豆科植物的活性测试
Galegoid属的温带豆科植物具有根瘤菌产生的结,它制造的Nod因子中具有含有与羰基共轭的双键的疏水链。该属中包括重要的豆科农作物,如紫花苜蓿、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆和三叶草。
测试了组合物对紫花苜蓿根瘤形成的诱导作用,以及对模型豆科植物蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)编码早期结瘤蛋白的共生基因表达的诱导作用。
V.1.1紫花苜蓿的结瘤试验
使紫花苜蓿苗在无菌条件下在试管内的少氮(nitrogen-poor)琼脂培养基上生长(Demont-Caulet等,Plant Physiol.,120,83-92,1999)。未处理的苗或用天然Nod因子或合成LCO处理过的苗作为对照。
V.1.2.测试早期结瘤蛋白对蒺藜苜蓿的诱导作用
进行这些测试来确定组合物是否通过激活与天然Nod因子相同的信号转导途径来诱导共生反应。该测试是对模型豆科植物蒺藜苜蓿进行的。研究了组合物对“野生型”植物和突变型植物(Nod因子信号转导中DMI1基因发生改变)的活性(Catoira等Plant Cell,12,1647-1665,2000)。作为参考的化合物是用C16:2Δ2E,9Z链酰化的硫酸化的四聚物12,它是天然Nod因子是类似物。未处理的苗或单独用天然nod因子或合成LCO处理的苗用作对照。
V.1.2.1报告基因
在生物学过程中通常难以确定对特定基因表达的调节,这是由于大多数这些基因的特定产物不易检测或测量。为了克服这一问题,使用了与“报告基因”(即编码易于检测的蛋白质的基因)融合的技术。融合是将含有需要研究的基因调节区的DNA序列和报告基因的DNA序列组合。然后通过转化将此装配物再引入植物中。因此,如果靶基因被表达,则报告基因也被自动表达。然后就是检测报告基因蛋白的问题了。
为避免与植物活性的负相互作用,使用不编码任何通常由植物形成的酶的报告基因。一种最常用的酶是大肠杆菌的β-葡糖醛酸酶(GUS),这是一种催化切割大β-葡糖苷酸的水解酶。作为这种酶的商业底物,可以使用:
X-Gluc(Sigma B-4782):5-溴-4-氯-3-吲哚基葡糖苷酸;形成的阴离子具有蓝色.
V.1.2.2Enod11::GUSA
与调节有关的豆科植物的基因可分成两大类:
早期结瘤蛋白基因(ENOD),该基因在感染和结瘤过程激活的最初几天被激活;
晚期结瘤蛋白基因,该基因直到施加细菌后数天才被激活,且直到根瘤成熟期才发挥作用。
鉴定了蒺藜苜蓿的一个新基因MtENOD11,该基因编码RPRP(重复富含脯氨酸的蛋白),并在结节根和组织受结瘤感染的最初步骤中转录(Journet等,Mol.Plant-Microbe Interact.,14,737-748,2001)。采用表达MtENOD11::GUSA融合体的转基因蒺藜苜蓿植物,有可能确定加入植物培养基中的组合物是否诱导ENOD11基因的转录。
在ENOD11转录试验中,用Fahraeus培养基进行调节试验,但其中不含琼脂。将幼苗放在含有培养基的纸袋中。比较两种类型带有MtENOD11::GUS融合体的转基因植物的反应:“野生型”(WT)Jemalong植物和DMI1基因中突变的植物,后者无法转导Nod因子信号。让植物生长5天,然后用各种浓度的LCO处理幼苗。6小时后,移出幼苗并在含有X-Glu的含水培养基中放置1-2小时。然后计算出现特征性蓝色反应的根的数目。
该试验相对敏感,它在低于结瘤试验的LCO浓度下也可能有效。
V.2对其它豆科植物的活性测试
百脉根(Lotus corniculatus)是一种在根瘤菌的作用下产生根瘤的草料作物,其根瘤菌产生的Nod因子极其类似于使大豆结瘤的根瘤菌产生的Nod因子:几丁质寡聚物主链有5个葡糖胺残基,N-酰基链实质上是异油酸(C18:1)而还原葡糖胺残基不是硫酸化的而是被岩藻糖残基O-取代的。选择百脉根作为模型系统是由于其种子和幼苗较小且易于操作。
V.2.1百脉根的根毛变形测定
将百脉根(cv Rodeo)的种子灭菌。将小根长度约为1厘米的发芽的种子无菌转移到Farhaeus软琼脂平板上。平板用石蜡膜(Parafilm)密封并在植物生长室(25℃,光照期为16小时,相对湿度75%,光照类型为OsramVFluora L77,平板顶端的光照强度水平为30μE.m-2.s-1)内垂直放置2天以使植物生长并使根毛发育。然后倒入2ml Nod因子衍生物的无菌溶液以覆盖百脉根的根系统,30分钟后除去过量的液体。在植物生长室内再温育16小时。将5棵植株的根转移到载玻片和盖玻片之间并在用亚甲基蓝染色之后通过亮视野显微镜观察。
为评估植物的反应,选择明确的根毛分支(许多分支在根系统的一侧以上出现)标准,并将出现这些明确反应的植株定为《+》。基于费氏《Exact》检验(SAS软件)通过比例比较来计算《+》反应比例的统计学显著性(P=0.05)。
V.3计算协同效应
当活性化合物组合的杀真菌活性高于活性化合物单独施用的活性之和时,杀真菌剂的协同效应显现。
对于给定的两种活性化合物的组合所预期的活性可以通过以下方法计算(参考Colby,S.R.,″除草剂组合物的协同和拮抗反应的计算(CalculatingSynergistic and Antagonistic Responses of Herbicide Combinations)″,Weeds 15,第20-22页,1967):
如果
X是以m克活性化合物/公顷的施用率施用活性化合物A时的效力,
Y是以n克活性化合物/公顷的施用率施用活性化合物B时的效力,
E是以m克和n克活性化合物/公顷的施用率施用活性化合物A和B时所预期的效力,
则
效力度以百分数表示。0%表示对照的效力,而100%效力表示没有观察到疾病。
如果实际杀真菌活性超过计算值,则组合的活性是超加性的,即存在协同效应。在此情况中,实际观察到的效力必须大于由上述公式计算的预期效力值(E)。
V.4.短茎青霉菌(Penicillium brevicaule)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
短茎青霉菌的孢子悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养7天后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
施用率(ppm) |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A1+B1 |
10000∶1 |
0.3+0.00003 |
40 |
37 |
V.5.采绒革盖菌(Coriolus versicolor)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
采绒革盖菌的菌丝体悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养3天后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A1+B1 |
10000∶1 |
0.01+0.000001 |
100 |
98 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A2+B2 |
10000∶1 |
0.003+0.0000003 |
79 |
50 |
V.6.苹果链格孢(Alternaria mali)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
苹果链格孢的孢子悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养4天后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A3+B2 |
10000∶1 |
3+0.0003 |
100 |
98 |
V.7.稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
稻瘟病菌的孢子悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养5天(组合A3+B1)或3天(组合A4+B1)后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A3+B1 |
10000∶1 |
0.3+0.00003 |
99 |
96 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A4+B1 |
10000∶1 |
0.1+0.00001 |
97 |
64 |
V.8.小麦壳针孢(Septoria tritici)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
小麦壳针孢的孢子悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养3天后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A1+B1 |
10000∶1 |
0.01+0.000001 |
24 |
5 |
V.9.灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
灰葡萄孢的孢子悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养5天(组合A2+B1)、4天(组合A3+B3)或7天(组合A5+B1)后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A2+B1 |
10000∶1 |
0.3+0.00003 |
70 |
51 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率 |
实际效力 |
使用Colby公式计算的预 |
|
|
ppm |
(%) |
期值 |
A3+B3 |
10000∶1 |
0,1+0,00001 |
43 |
37 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A5+B1 |
10000∶1 |
0.0003+0.00000003 |
30 |
14 |
V.10.立枯丝核菌(Rhizoctania solani)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
立枯丝核菌的菌丝体悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养3天(组合A1+B3,A3+B2)、7天(组合A2+B1)、4天(组合A4+B2)或5天(组合A5+B1)后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A1+B3 |
10000∶1 |
0.003+0.0000003 |
93 |
86 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A2+B1 |
10000∶1 |
0.1+0.00001 |
72 |
55 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A3+B2 |
10000∶1 |
3+0.0003 |
67 |
55 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A4+B2 |
10000∶1 |
1+0.0001 |
80 |
65 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A5+B1 |
10000∶1 |
0.0003+0.00000003 |
93 |
88 |
V.11.隐地疫霉(Phytophthora cryptogea)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
隐地疫霉的菌丝体悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养4天后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
丙硫菌唑+LCO-CC150 |
10000∶1 |
3+0.0003 |
61 |
32 |
V.12.燕麦散黑粉菌(Ustilago avenae)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
燕麦散黑粉菌的孢子悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养5天后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
V.13.玉米赤霉(Gibberella zeae)的体外微试验
使用微量滴定板在含马铃薯-葡萄糖肉汤(PDB)的液体培养基中进行微试验。
活性化合物作为溶解在甲醇中的工业级活性物质施用。
玉米赤霉的孢子悬浮液用于接种。在摇晃(10Hrz)避光下培养4天(组合A1+B3)、3天(组合A3+B1,A4+B1)或5天(A4+B2)后,借助微量滴定板读数计评价各孔中的光密度。
0%指对应于对照的效力,而100%效力表示没有观察到真菌生长。
下表清楚地表明依据本发明的活性化合物组合所观察到的活性高于计算的活性,即存在协同效应。
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A1+B3 |
10000∶1 |
1+0.0001 |
58 |
49 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A3+B1 |
10000∶1 |
0.01+0.000001 |
40 |
13 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A4+B1 |
10000∶1 |
0.1+0.00001 |
98 |
89 |
组合 |
混合物的比例 |
活性化合物的施用率ppm |
实际效力(%) |
使用Colby公式计算的预期值 |
A4+B2 |
10000∶1 |
1+0.0001 |
84 |
79 |