CN101516496A - 固体载体 - Google Patents

固体载体 Download PDF

Info

Publication number
CN101516496A
CN101516496A CNA2007800344248A CN200780034424A CN101516496A CN 101516496 A CN101516496 A CN 101516496A CN A2007800344248 A CNA2007800344248 A CN A2007800344248A CN 200780034424 A CN200780034424 A CN 200780034424A CN 101516496 A CN101516496 A CN 101516496A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bead
polymer
solid carrier
hole
carrier
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2007800344248A
Other languages
English (en)
Inventor
D·A·韦灵斯
S·古尔扎
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
CHROMATIDE Ltd
Original Assignee
CHROMATIDE Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by CHROMATIDE Ltd filed Critical CHROMATIDE Ltd
Publication of CN101516496A publication Critical patent/CN101516496A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28014—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their form
    • B01J20/28016—Particle form
    • B01J20/28019—Spherical, ellipsoidal or cylindrical
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28002—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their physical properties
    • B01J20/28004—Sorbent size or size distribution, e.g. particle size
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28014—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their form
    • B01J20/28042—Shaped bodies; Monolithic structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28095—Shape or type of pores, voids, channels, ducts
    • B01J20/28097—Shape or type of pores, voids, channels, ducts being coated, filled or plugged with specific compounds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3204—Inorganic carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
    • B01J20/3208—Polymeric carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/327—Polymers obtained by reactions involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/3272—Polymers obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3289—Coatings involving more than one layer of same or different nature
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3291—Characterised by the shape of the carrier, the coating or the obtained coated product
    • B01J20/3293—Coatings on a core, the core being particle or fiber shaped, e.g. encapsulated particles, coated fibers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/551—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being inorganic

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Catalysts (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

描述了包含聚合物浸渍的珠粒的固体载体，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔和布置在该孔内的聚合物。该载体可用于固相合成，尤其是肽的固相合成，和分子尤其是酶的固定以及其它应用范围。

Description

固体载体
本发明涉及包含聚合物的固体载体，载体的制备方法和该载体在固相方法中的用途。该载体可用于其中要求与底物相互作用的宽的物理和化学方法范围，例如固相有机合成、固相萃取、固相试剂、物质的固定、细胞培养、催化、层析和用于医学诊断。
可用于固相合成方法的固体载体材料是已知的。宽范围的物理和化学方法采用固体载体材料，包括例如有机分子，尤其是肽和低聚核苷酸的合成，物质的固定，催化中的载体，离子交换，物质从材料的萃取以及层析。
有机分子以多段的合成通常涉及许多离析步骤以分离在每个阶段产生的中间体，然后进行到后一个使用该中间体作为原料的阶段。这些方法可能是耗时、昂贵的并且可能在产率方面是低效的。中间体通常要求纯化以除去过量的试剂和反应副产物并且可以采用程序例如沉淀、过滤、两相溶剂萃取、固相萃取、结晶和层析。
固相合成提供一些优于液相合成的优点。例如，可以通过使靶分子可逆地附贴于固体载体而在一定程度上避免用于液相合成的离析程序。可以通过过滤和洗涤固体载体除去过量的试剂和一些副产物。在一些方法中可以按高乃至基本上定量的产率回收靶分子。在液相合成中以高产率回收通常是困难的。此外，要求在固体载体上进行操作的时间通常比以液相合成执行类似的阶段所要求的时间少得多。
在一定范围的方法中物质的固定也是已知的。例如，聚合物载体通常用于固定用在传统有机化学(包括化学和生物催化)的催化剂。固定化酶可以用于广泛的方法，包括有机化学反应或用于手性拆分，例如使用固定化青霉素酰胺酶拆分仲醇(E.Baldaro等人，Tet.Asym.4，1031，(1993))并且固定化青霉素G酰胺酶还在阿莫西林的制造中用于苄青霉素的水解(Carleysmith，S.W.andLilly，M.D..Biotechnol.Bioeng.，21，1057-73，1979)。
固体载体，例如聚合物珠粒也可以用来使用于医学和诊断应用的生物学大分子固定。这种应用的实例包括蛋白质、单克隆抗体和多克隆抗体的固定。细胞培养通常在具有特定表面特征和形态的固体载体上进行。固定化酶可以用作传感器来生成信号，例如通过葡萄糖氧化酶/过氧化酶偶合酶系检测葡萄糖，其中葡萄糖的存在产生过氧化氢，它又是过氧化酶用于将各种底物氧化而提供着色、荧光或发光信号的底物。
其荧光对特定阳离子或阴离子敏感的各种荧光剂可以固定在聚合物珠粒上以指示用于pH值测量的特定离子(包括氢离子)的浓度。
聚合物颗粒通常用于其中固体载体称作静止相的层析。在层析的某些模式中，静止相的成本可能较高并限制使用。静止相的物理性质在一些应用中可能不足以获得完全的有效性。例如，软聚合物通常用于亲合力、离子交换和凝胶渗透层析，但是不能在高流速下有效地使用，因为颗粒的可变形性质。用于其它层析模式的刚性大孔聚合物通常可能是机械脆弱的且随后具有短寿命。
固体载体或静止相在层析分离中的应用是非常广泛的，包括例如药物和生物工程工业中使用制备层析用于纯化高值产物的复合高技术分离和采矿工业中采用的大规模分离。世界的钯(催化转化器和其它工业过程中的关键组分)的大部分可以使用固定化冠醚进行精炼(Traczyk，F.P.；Bruening，R.L.；Izatt，N.E.″The Application ofMolecular Recognition Technology(MRT)for Removal and Recoveryof Metal Ions from Aqueous Solutions″，In Fortschritte in derHydrometallurgie；1998，beim 34.Metallurgischen Seminardes Fachausschusses fuer Metallurgische Aus-und Weiterbildungder GDMB；18-20 November 1998；Goslar)。
聚合物颗粒在固相萃取和固相试剂的制备中的应用也是化学、药物和生物工程工业中已知的。
已知的固相载体通常包含特定尺寸和物理性质的聚合物颗粒以适应应用。为了便于使用，这些聚合物颗粒通常是球形的并且具有限定的颗粒尺寸分布。颗粒的球形性质改进聚合物的流动和渗失特性。虽然固体载体的使用具有操作优点，但是存在对固相路径的缺点。例如，可商购的常用于肽和低聚核苷酸的固相合成的载体可能是昂贵的。聚合物颗粒通常可以通过分散或乳液聚合方法制备，其中单体的溶液在聚合的引发之前分散在不混容溶剂(连续相)中。然后通常过滤、洗涤和分级形成的聚合物颗粒。这些方法在某些方面是不利的，包括单体损失到连续相中，颗粒尺寸的范围产生，和细颗粒在聚合期间产生。单体到连续相的损失就原材料和环境成本而言可能是低效的。聚合物颗粒的分级以离析为特定应用所要求的颗粒尺寸可能是费力和复杂的过程，通常包括可能导致产率损失的筛分和(或)气流分级。通常产生‘细的’颗粒。这些细粒物料可能在聚合物珠粒的离析时成问题并且可能要求附加的加工，例如沉积和滗析来除去它们。
除了不希望的制造成本和在制备期间的损耗之外，还可能使已知的聚合物颗粒的物理性能产生某些缺点。通常使用微孔聚合物和大孔聚合物并且它们的制造可能是昂贵和复杂的。
微孔聚合物具有较低水平的交联剂，这允许聚合物颗粒在适合的溶剂中溶剂化并因此溶胀。然而，微孔聚合物颗粒通常是软的并且通常不适合于以高流速用于填充柱床。此外，这种软颗粒可能被不希望地压缩并引起结垢，例如在过滤期间，这通常导致压缩插入正在使用的烧结物或网孔中。
大孔聚合物具有在聚合物基体中具有高水平的交联剂并且包含大孔隙。这些聚合物颗粒通常是刚性的并且在填充柱中具有良好的流动特性。刚性大孔和大网眼颗粒更适于填充柱床中的高流速。然而，由于刚性性质，颗粒可能易碎并且在物理应力下结构破坏。
与载体的生产成本、损耗、物理完整性有关的问题和差的产品性能可以通过提供具有孔的预成型固体珠粒改善，该孔有效地用作聚合物载体的容器。
在第一个方面中，本发明提供包含聚合物浸渍的珠粒的固体载体，其中该珠粒具有在该珠粒中或优选穿过该珠粒的孔和布置在该孔内的聚合物。
本文采用的术语″聚合物″包括无机聚合物，其中硅石是一个实例，和有机聚合物，其中聚苯乙烯是一个实例。
有利地，该珠粒是刚性和机械坚固的并且可以以高流速在填充柱床中使用。该珠粒还容易在不连续操作中过滤，从而允许快速加工。
该珠粒适宜包含惰性材料。惰性材料适合地选自玻璃、陶瓷、聚合物、金属例如钢、木材和其它天然材料。在优选的实施方案中，珠粒是由玻璃预成型的。常用于珍宝工业的玻璃种子珠粒尤其可用于这一应用。它们是大规模生产的并且不昂贵以及提供具有有用的尺寸和结构完整性的载体。适合地，珠粒是球形、接近球形或椭圆形的。珠粒的球形性质在许多应用中是有利的并且便于例如，塞进柱中和在过滤期间在床上改进的流动特性。然而，也可以使用不规则、椭圆和其它形状的珠粒。
在另一个实施方案中，可以使用管材的短片。
本发明可以采用任何尺寸的珠粒，但是珠粒的孔中聚合物栓越大，材料向聚合物中扩散的效率越低。优选地，珠粒中的孔在与穿透该珠粒的孔的轴线垂直的方向上具有小于2mm，尤其是小于1mm，更优选0.01-0.75mm，0.01-0.5mm，特别是0.05-0.5mm的直径。珠粒越小，其中材料正被结合或吸收的聚合物内扩散作用越好，此外珠粒间的填充越紧密。
适合地，珠粒直径不超过2mm，优选不超过1.5mm，希望地不超过1.2mm。优选地，珠粒直径是至少0.01mm，希望地至少0.05mm。在一个优选的实施方案中，珠粒直径为0.1-1.2mm，更优选0.1-1.0，希望地0.3-0.8mm。一般而言，从功能性观点，优选珠粒的直径尽可能小，但是这应与制备较小珠粒的经济情况平衡。最佳地，珠粒具有0.4-0.7mm的直径。
本发明与多孔载体的区别在于珠粒优选包含单个孔并且另外该孔具有大于通常与多孔材料相关的那些的尺寸。适合地，固体载体在孔内包含聚合物的单个栓或堆。珠粒可以是多孔的，但是除了可能存在的任何孔隙之外还必须具有孔。孔适合地是哑铃形的或肿胀形(中间大)的，这帮助聚合物在孔中的物理保持或可以是圆柱形。
在一个优选的实施方案中，珠粒的孔衬有聚合物以致底物可以通过具有聚合物衬里的珠粒。这样提供对接触更可接近的表面区域并且可以改进底物穿过珠粒的流动。
适合的珠粒可以商业上获得，例如从Miyuki beads和从Tohobeads获得或可以如下制得：将毛细管切割成短片，然后将它们刚好加热到该玻璃熔融点下。在该温度下，毛细管的小片缩回而形成珠粒。
通常，可容易地获得11/0和15/0尺寸的玻璃种子珠粒。例如，15/0尺寸珠粒沿孔方向测量为大约1.15mm并且宽度测量为大约1.55mm。
适合地，该聚合物是在珠粒的孔中形成的。该聚合物可以直接或间接地与该珠粒共价键接。当珠粒由具有活性部位的材料制成时，例如在纤维素材料中提供羟基的木材，该聚合物可以直接地键接。当珠粒由更惰性材料，例如玻璃制成时，可能希望处理该珠粒以提供可以与聚合物键接的活性部位。当珠粒包含玻璃时，适合地用蚀刻剂，优选氟化物蚀刻溶液，例如氟氢酸溶液和氟化氢铵溶液处理它以提供适合于与衍生物反应的表面。
令人希望地，将珠粒衍化以提供用于与聚合物反应的活性部位。可以采用用于衍化玻璃表面的已知材料和方法。在一个特别优选的实施方案中，所述衍生物包含硅烷并且包含与聚合物键接的活性部位。优选地，所述活性部位是乙烯基。
硅烷基适合地具有通式-(O)nSi[(CH2)p[Z]qCR＝CR2](4-n)，其中n为1-3，p为0-6，其中R独立地是H或烷基，q是0或1，Z是二价连接基。
优选地，Z具有通式-(CH2]rNRC(O)-，其中r为1-6。
在一个尤其优选的实施方案中，载体包含玻璃珠，该玻璃珠具有与它键接的硅烷基，其中该硅烷基选自-O3SiCH＝CH2和-O3Si(CH2)3NHCOCH＝CH2。优选地，该-O3SiCH＝CH2基衍生自三乙氧基乙烯基硅烷。优选地，-O3Si(CH2)3NHCOCH＝CH2基衍生自氨基丙基三甲氧基硅烷，它与玻璃反应并且该胺基然后与丙烯酰氯反应。
聚合物可以是任何根据所需应用适合的材料。在一个优选的实施方案中，聚合物是有机聚合物并且选自聚合物树脂、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、纤维素、聚二甲基丙烯酰胺、聚二甲基甲基丙烯酸酯、聚脲、聚丙烯酰基吗啉和聚β羟基酯、Polyhipe、聚亚烷基二醇例如聚乙二醇和聚丙二醇，和多糖例如琼脂糖。
聚合物可以是无机聚合物并且适合地选自氧化铝、硅石和其它金属氧化物。
聚合物可以进一步反应而为给定应用提供特定的官能团。适合地，使聚合物与具有至少两个官能团的化合物反应，一个官能团用于与聚合物反应，另一个官能团用来提供游离官能团以便在所需应用中使用。在一个优选的实施方案中，使聚合物，例如聚二甲基丙烯酰胺和含N-丙烯酰基肌氨酸甲酯的聚丙烯酰基吗啉共聚物与二胺化合物，例如亚乙基二胺反应。胺官能化的载体例如适合于在肽合成、低聚核苷酸合成和固相有机化学中使用。
胺官能化的载体可以进一步加以官能化，例如通过根据需要使用琥珀酸转化成羧酸。举例来说，为将蛋白质，例如蛋白质A固定作准备，可以用N-羟基琥珀酰亚胺和1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二酰胺盐酸盐处理胺官能化的载体。
在另一个实施方案中，载体包含珠粒和在该珠粒孔内的聚合物和附加材料。附加材料的实例包括惰性材料例如，具有高吸收性的化学惰性材料。特别优选的惰性材料是Polyhipe。Polyhipe是多孔和高度吸收性的。这种材料对其中材料将被载体所吸收的应用是尤其优选的。
根据本发明的固体载体还可以包含被聚合物担载的功能性材料。适合的功能性材料的实例包括催化剂，有机合成例如肽合成的引发剂物质，药物活性材料，农用化学活性材料，大分子，酶，核酸序列和蛋白质。
本发明尤其可用于担载贵金属催化剂，例如钯催化剂。一个特定的有利实例是乙酸钯。在一个优选的实施方案中，乙酸钯被担载在聚脲上。
本发明的固体载体可以通过有效和较简单的方法制备。本发明在第二个方面中提供固体载体材料的制备方法，包括以下步骤：提供具有穿透的孔的珠粒让该珠粒与单体或单体的溶液接触，引起该单体的聚合以致形成聚合物，和任选地让该包含聚合物的珠粒经历进一步处理以从该珠粒的表面除去聚合物。
适合地，通过本领域技术人员已知的方法引发聚合。例如，将含单体或该单体的溶液的珠粒添加到与该单体溶剂不混容的溶剂中并加热以引起聚合。
当单体溶液是水性溶液时，所述溶剂例如是煤油。
可以通过常规方法干燥或固化聚合物，例如加热和紫外线辐射。
优选地，一旦聚合物形成，就让该聚合物经历物理打磨，例如在辊磨机中，以致从该珠粒的外表面除去聚合物，而留下位于该珠粒孔中的聚合物。
适合地，当将珠粒暴露于想要的聚合物载体的成分单体或成分单体的溶液中时，毛细管作用保持这一溶液在孔中并通过聚合领域技术人员已知的已知引发方法形成该聚合物。
任选地，固体载体材料的制备方法包括以下步骤：在让珠粒与单体或单体的溶液接触之前处理该珠粒的表面以提供活性部位。
在珍宝和织物贸易中使用的玻璃珠通常称为种子珠粒。种子珠粒的使用具有特定的优点，在于聚合物栓适合地是哑铃形的或肿胀式的并且聚合物由于它的形状因而将被物理地钳制。该聚合物栓由于形状而本身适合地固定在珠粒的孔内。
如果优选，聚合物栓可以在聚合期间或在聚合之后与刚性珠粒共价连接。或者，成分单体中一种或多种可以在聚合引发之前与珠粒表面共价连接。当聚合物由于物体约束被钳制在孔中并且与珠粒表面共价键接时，该聚合物-珠粒组合是尤其坚固的。本发明的固体载体可以用于其中使用固体载体的任何化学或物理方法。
在另一个实施方案中，本发明提供包含聚合物浸渍的珠粒的固体载体，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔并且该孔的壁包括聚合物层以致在该珠粒的孔中提供聚合物环。
具有聚合物的衬里或环而不是栓的载体可以通过与具有聚合物栓的那些相同的方法只是使用更稀的聚合物溶液制备。通过定制聚合物溶液的浓度，可以控制衬里的厚度。在一个优选的实施方案中，衬里是至少1微米，希望地至少5微米厚并且可以与珠粒中的孔的尺寸一样厚，允许确保仍存在聚合物环而不是实心栓。适合地，衬里至多100微米，优选至多50微米，更优选至多20微米厚。特别优选的范围是1-100微米，5-100微米，和5-50微米厚。
具有聚合物衬里(例如1-20微米厚)的载体在细胞培养和医学诊断应用中是特别有利的。
固体载体尤其可用于有机物质尤其是大分子的固相合成。在一个优选的实施方案中，固体载体可以用于肽、低聚核苷酸或低聚糖的合成。作为聚合物载体的聚二甲基丙烯酰胺在肽合成中是尤其有利的。
本发明的固体载体还可用于固相萃取以从与该载体接触的溶液中除去物质，不管呈间歇形式或作为在载体上的流体，例如离子萃取和离子交换。
本发明的固体载体特别可用于使物质固定，该物质包括固相试剂、金属和其它催化剂、生物催化剂、酶、蛋白质、包括多克隆和单克隆抗体的抗体、整体细胞和聚合物。本发明在担载酶，例如辣根过氧化物酶和葡萄糖氧化酶方面是尤其有利的，尤其是与聚二甲基丙烯酰胺和其它类似的亲水性聚合物结合地担载。
本发明特别可用于亲和层析，例如亲和配体例如蛋白质A的固定。亲和层析主要用于生物制品例如生物药物的分离。亲和配体适合地固定在静止相上。这种配体对待与载体接触的生物混合物的组分具有特别的亲合力。该亲合力可以基于相互作用的任何形式例如从酶和底物，受体和配体和抗原和抗体见到的特定生物相互作用。
在一个优选的实施方案中，亲和配体包含蛋白质A并且用来与免疫球蛋白相互作用。蛋白质A与若干免疫球蛋白抗体的Fc区域结合并且许多生物药物基于免疫球蛋白。
在另一个实施方案中，本发明提供包含聚合物浸渍的珠粒的固体载体，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔和布置在该孔内的聚合物并且该聚合物包含固定的蛋白质A。
在本领域中，具有大分子例如蛋白质A的静止相可按两种形式获得，其中载体是大孔树脂或具有更低交联水平的更软载体。大孔树脂具有低的表面积并随后经历低负荷。该更软的载体用足够的交联剂制造以提供足够的刚性以便用于低至中压层析。然而，它们仍然是较高度交联的并且不能容易地被生物学大分子穿透。结果，层析分离中观察到的谱带较宽并且不是所有固定的配体可进入。
有利地，本发明允许具有极低交联水平的适合的聚合物的固定，于是提供对聚合物中所有活性部位的改进扩散和利用。
在另一个优选的实施方案中，本发明提供包含聚合物浸渍的珠粒的固体载体，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔并且该孔的壁包括聚合物的层以致在该珠粒的孔中提供聚合物环并且该聚合物包含固定的蛋白质A。
在另一个实施方案中，固体载体可以用作在细胞培养尤其是干细胞培养领域中的载体。作为块体或涂层板的聚羟基酯通常用于干细胞的培养。采用这些体系，细胞通常难以回收并且通常由于物理应力而从聚合物表面去除。在这一体系中，由于笼子环境，基于细胞-聚合物相互作用的物理应力降低，即聚合物在珠粒内而不是在它的外表面上，并且另外，与块体聚合物或涂层板相比，聚合物按更可用的物理形式提供。
固体载体可以用于涉及导电和发光聚合物的应用。含发光聚合物的固体载体可以设置在显示板上。
本发明的载体可用来使包括抗体、低聚核苷酸、酶或荧光剂的物质固定并且可以按阵列布置，其中每个载体分析溶液的不同组分。具有与和表面结合的聚合物共价连接的配体的珠粒可以用作“井”。然后可以使用制定的方法检测靶配体例如抗原或互补DNA或RNA序列的特定结合。
本发明的固体载体可用于制备用于层析分离，例如亲和层析、离子交换层析、反相层析、正相层析、手性层析和凝胶渗透层析的静止相。
在另一个应用中，固体载体可以用作吸收剂。在这一应用中，如果载体含有与珠粒结合并且与聚合物结合的惰性吸收性材料，则是特别有利的。Polyhipe是尤其优选的惰性材料。固体载体可用来吸收家庭溢出液，例如茶、咖啡和酒，或可以用于较大规模应用例如，从吸收溢出液吸收油。该吸收性载体可用来吸收溢出液，然后被物理地移除，或在水体中的油溢出液的情况下，有效地俘获该油然后沉到水体的底部。
本发明的固体载体可以用作运载体来运载待随时间释放的化合物，例如药物或农用化学化合物或组合物。这种应用提供根据载体中化合物的装载量定制该化合物的剂量状态的手段。在药物的情况下，这可能有利于帮助活性材料的正确剂量，例如连续的缓慢释放而不是要求病人定期摄取大剂量，例如在化疗中。
在一个优选的实施方案中，本发明提供包含聚合物浸渍的珠粒并且还包含药物化合物或组合物的固体载体，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔和布置在该孔内的聚合物。
本发明的固体载体可以应用于其中当前采用聚合物载体的任何化学生物或物理固态方法。
本发明尤其可用于医学诊断试验例如免疫试验。相应地，本发明进一步提供检测样品中化合物的存在的医学诊断方法，提供包含聚合物浸渍的珠粒的固体载体，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔和布置在该孔内的聚合物和被该载体中的聚合物担载的用于选择性地与该样品中的化合物反应或结合的功能性材料，例如酶，例如辣根过氧化酶，并使该样品与该固体载体接触。
该珠粒还可以装载或填充到柱中并且用聚合物填充该孔和隙间空间以形成整料。本发明进一步提供包含多个根据本发明的固体载体材料珠粒，并且在隙间空间中任选地包含聚合物的固体载体整料，该固体载体材料珠粒以堆，例如柱排列填充。
根据需要，整料中珠粒间的隙间空间可以填有与该珠粒孔内保持的聚合物不同的聚合物。在另一个实施方案中，整料中珠粒间的隙间空间可以填有不同的组分例如细胞培养营养素。在这一实施例中，细胞可以在该孔内部的聚合物基体上培养。
珠粒孔中的聚合物可以被着色，例如使用染料着色以提供美学或功能特性。
本发明还包括这样的实施方案，其中具有聚合物栓或衬里的珠粒进一步包含更小的珠粒，该更小的珠粒具有在该更大珠粒的孔内的聚合物栓或衬里。在该更小珠粒中的聚合物可以与该更大珠粒中的相同或不同。
图1-4各自以平面图、侧视图和剖面图示出了本发明固体载体的说明性实施方案。图5和6示出了用于本发明的经蚀刻的玻璃珠。图7-9示出了本发明固体载体的照片。
在图1中，珠粒(1)中的孔(2)具有布置在其中的聚合物(3)。从截面图，聚合物的端部(4)具有比聚合物的中央(5)更大的直径并且提供哑铃形状截面并且聚合物(3)物理地保持在孔(2)内，从而为载体提供提高的强度。
图2示出了其中聚合物栓(3)基本上是圆柱形的载体。
在图3中，聚合物栓(4)基本上是圆柱形的并且珠粒(1)是管式形状的。
图4示出了本发明的在珠粒(1)中具有肿胀式形状孔(2)的载体并且聚合物(3)在该孔内比在端部厚，如此提供将聚合物栓物理地保持在孔(2)中的手段。
图5和6中示出了在接收聚合物栓或衬里之前的经蚀刻的玻璃珠。在图5中，经蚀刻的15/0珠粒显示紧挨着更小的0.25mm玻璃珠，在图6中，紧挨着更小的0.65mm玻璃珠。
图7示出了在珠粒的孔中具有聚合物栓的15/0经蚀刻的玻璃珠。
图8示出了一组在珠粒的孔中具有聚合物栓的15/0玻璃珠，该聚合物已被茚三酮着色而更清楚地显示该聚合物。
图9示出了具有用茚三酮染色的聚合物环的15/0经蚀刻玻璃珠，该聚合物环为该珠粒的衬里。
将通过以下非限制性实施例说明本发明。
实施例1-具有活性表面的珠粒的制备
1.珠粒蚀刻
将尺寸15/0玻璃珠(144g)放入250cm3聚丙烯瓶子中并用Dip′nEtch，即氟化氢铵的溶液(100cm3)覆盖。将该瓶子放入超声波浴中保持6h，然后静置16h。
用水(10×50cm3)，氢氧化钠水溶液(15％w/v，10×50cm3)，水(10×50cm3)，盐酸水溶液(1mol/dm3，10×50cm3)，然后水(10×50cm3)洗涤该珠粒。然后在100℃下干燥该珠粒1h(产量138g，BI)。
使用相同程序蚀刻一批尺寸11/0珠粒(100g)，产生97g蚀刻的珠粒(BII)。
2.蚀刻的珠粒与乙烯基三乙氧基硅烷的反应
将30g蚀刻的尺寸15/0珠粒放入聚丙烯瓶子中并用乙烯基三乙氧基硅烷在甲醇中的溶液(40cm3，1∶1v/v)覆盖并添加水(1cm3)。将该混合物放入超声波浴中保持1小时，然后用丙酮洗涤并在氮气流下干燥而产生乙烯基官能化的珠粒(BV I)。
3.蚀刻的珠粒与氨基丙基三甲氧基硅烷的反应
将30g蚀刻的尺寸15/0珠粒(30g，B I)放入聚丙烯瓶子中并且用氨基丙基三甲氧基硅烷在甲醇中的溶液(40cm3，1∶1v/v)覆盖并添加水(1cm3)。将该混合物放入超声波浴中保持1小时，然后用丙酮洗涤并在氮气流下干燥而产生氨基丙基官能化的珠粒(BAm I)。
4.氨基丙基官能化的珠粒与丙烯酰氯的反应
将上面制备的氨基丙基官能化的珠粒(30g，BAm I)覆盖在二氯甲烷(30cm3)中并添加丙烯酰氯(5cm3)接着添加4-甲基吗啉(5cm3)。使该混合物旋动，允许静置1小时，然后用二氯甲烷(3×30cm3)洗涤，然后在氮气流中干燥而产生丙烯酰胺官能化的珠粒(BAc I)。
实施例2-固体载体的制备
1.聚二甲基丙烯酰胺的聚合
将N，N-二甲基丙烯酰胺(100mmol，9.9g)、N-丙烯酰基肌氨酸甲酯(13mmol，2.0g)和双-丙烯酰基乙二胺(5mmol，0.82g)和水(3cm3)放入圆底烧瓶中。添加过硫酸铵水溶液(0.75g，在2cm3中)。立即将上面实施例1段4中制备的丙烯酰胺珠粒(30g，BAc I)添加到该单体溶液中并施加微真空以从该珠粒的孔除去气泡。
使用不锈钢筛排出过量的单体溶液。然后将该含珠粒的筛子放入在80℃下的煤油浴中，确保所有珠粒浸于该煤油中。
在2h之后，将该含珠粒的筛子放入冷水浴中并允许静置1h。将此时包含包封在孔内的聚合物的珠粒连同磁力搅拌棒一起转移至锥形烧瓶中。添加水(50cm3)并在磁力搅拌器上搅拌该混合物5分钟。通过滗析除去上层清液，它包含从珠粒表面冲刷的聚合物的小不规则颗粒。重复该洗涤过程直到上层清液不包含可辨别的聚合物颗粒。将该珠粒-聚合物复合固体载体(BP I)储存在水下。
2.珠粒-聚合物复合材料与乙二胺的反应
排出上面制备的珠粒-聚合物复合材料(～33g，BP I)上的水并用乙二胺覆盖该珠粒。允许该混合物静置一整夜(～16h)，然后用水(10×50cm3)洗涤。
在水下储存该胺官能化的珠粒(BPAm I)。该固体载体适合用于肽合成。
3.Polyhipe在11/0珠粒中的聚合
将苯乙烯(3cm3)、二乙烯基苯(7cm3)和sorbitane一油酸酯(Span80)(2cm3)放入烧杯中并在200rpm下搅拌并缓慢地添加含过硫酸铵(0.75g)的水(300cm3)直到形成光滑的乳液。
将尺寸11/0蚀刻的珠粒(30g，BII)与～50cm3这种乳液在圆底快速装配烧瓶中混合。施加微小真空以从珠粒的孔排出空气并在60℃下加热该混合物2h。
用平勺打碎形成的实心块体并添加水(～50cm3)。添加水(50cm3)并在磁力搅拌器上搅拌该混合物5分钟。通过滗析除去上层清液，它包含从珠粒表面冲刷的聚合物的小不规则颗粒。重复该洗涤过程直到上层清液不包含可辨别的聚合物颗粒。在100℃下干燥该珠粒-聚合物复合材料一整夜并干燥储存(BP II)。
4.Polyhipe在15/0珠粒中的聚合
将尺寸15/0蚀刻的珠粒(34g)与～50cm3上面实施例2-3中制备的乳液混合并进行相同程序。在100℃下干燥所形成的珠粒-聚合物复合材料一整夜并干燥储存(产量34.5g，BP III)。
5.聚丙烯酰基吗啉在BP III内的聚合
将4-丙烯酰基吗啉(90mmol，12.65g)、N-丙烯酰基肌氨酸甲酯(15mmol，2.36g)和双-丙烯酰基乙二胺(2mmol，0.35g)和水(1cm3)放入圆底烧瓶中。添加过硫酸铵水溶液(0.5g，在1cm3中)。立即将上面实施例2-4中制备的Polyhipe珠粒(34.55g，BP III)添加到该单体溶液中并施加微小真空以从该珠粒的孔排除任何残存的气泡。
使用不锈钢筛排出过量的单体溶液。然后将该含珠粒的筛子放入在80℃下的煤油浴中，确保所有珠粒浸于该煤油中。作为在煤油中浸渍下加热的替代方案，可以在室温下对珠粒进行紫外线辐射处理。
在2h之后，将该含珠粒的筛子放入冷水浴中并允许静置1h。将此时包含包封在孔内的聚合物的珠粒连同磁力搅拌棒一起转移至锥形烧瓶中。添加水(50cm3)并在磁力搅拌器上搅拌该混合物5分钟。通过滗析除去上层清液，它包含从珠粒表面冲刷的聚合物的小不规则颗粒。重复该洗涤过程直到上层清液不包含可辨别的聚合物颗粒。将该珠粒-聚合物复合材料(BP IV)储存在水下。
取出50颗珠粒并在100℃下干燥一整夜(181mg)。最终重量对应于每10g玻璃珠加1g聚合物。
6.珠粒-聚合物复合材料与乙二胺的反应
排出上面制备的珠粒-聚合物复合材料(BP IV)上的水并用乙二胺覆盖该珠粒。允许该混合物静置一整夜(～16h)，然后用水(10×50cm3)洗涤。该胺官能化的珠粒(BPAm II)在水下储存并且适合用于肽合成。
实施例3-Leu-Enkephalinamide的合成
1.内标氨基酸的偶合
将胺官能化的珠粒(11.8cm3，实施例2-6中制备的BPAm II)放入玻璃层析柱(17mm直径)中并在重力下用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)的等分试样(10×10cm3)洗涤。
将Fmoc-Ala-OH(1.25g，4mmol)(Fmoc＝9-芴基甲氧基羰基)和2-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基四氟硼酸脲(TBTU)(1.21g，3.8mmol)溶于DMF(3cm3)。添加4-甲基吗啉(NMM)(0.528cm3，4.8mmol)并预活化该混合物2-3分钟，然后添加到柱中并且允许在重力下排到珠粒上。
通过茚三酮分析，该偶合反应在3h内完成。用DMF的等分试样(10×10cm3)在重力下洗涤该珠粒。
将哌啶/DMF(10cm3，20％v/v)添加到该柱中并允许在重力下排到该珠粒上。允许反应静置10分钟。用哌啶/DMF(10cm3，20％v/v)进行第二次处理20分钟并用DMF(10×10cm3)洗涤该珠粒。
2.键合剂的偶合
使用实施例3-1中给出的程序，按分析的那样在5小时中偶合Fmoc-Am-Rink-OH(2.05g，3.8mmol)，然后用哌啶/DMF进行处理，不同之处在于使用Fmoc-Am-Rink-OH代替Fmoc-Ala-OH。
3.Fmoc-Leu-OH的偶合
使用实施例3-1中给出的程序，按分析的那样在4小时中偶合Fmoc-Leu-OH(1.32g，4mmol)，然后用哌啶/DMF进行处理，不同之处在于使用Fmoc-Leu-OH代替Fmoc-Ala-OH。
4.Fmoc-Phe-OH的偶合
使用实施例3-1中给出的程序，按分析的那样在16小时中偶合Fmoc-Phe-OH(1.55g，4mmol)，然后用哌啶/DMF进行处理，不同之处在于使用Fmoc-Phe-OH代替Fmoc-Ala-OH。
5.Fmoc-Gly-OH的偶合
使用实施例3-1中给出的程序，按分析的那样在16小时中偶合Fmoc-Gly-OH(1.19g，4mmol)，然后用哌啶/DMF进行处理，不同之处在于使用Fmoc-Gly-OH代替Fmoc-Ala-OH。
用DMF(10×10cm3)洗涤。
6.Fmoc-Gly-OH的偶合
使用实施例3-1中给出的程序，按分析的那样在16小时中偶合Fmoc-Gly-OH(1.19g，4mmol)，然后用哌啶/DMF进行处理，不同之处在于使用Fmoc-Gly-OH代替Fmoc-Ala-OH。
7.Fmoc-Tyr(tBu)-OH的偶合
使用实施例3-1中给出的程序，按分析的那样在16小时中偶合Fmoc-Tyr(tBu)-OH(1.84g，4mmol)，然后用哌啶/DMF进行处理，不同之处在于使用Fmoc-Tyr(tBu)-OH代替Fmoc-Ala-OH。
8.肽裂解
用二氯甲烷(5×10cm3)洗涤珠粒并添加含三氟乙酸(TFA)的水(10cm3，5％v/v)并在重力下排到该珠粒上。该珠粒内的聚合物变红，指示裂解正在进行。在10分钟之后，添加TFA(10cm3)的另一等分试样并保持该混合物裂解1小时。
用TFA(5×10cm3)洗涤该珠粒。在旋转蒸发器上将该合并的TFA裂解溶液和洗液缩减成油。将该油与二乙醚一起研制形成白色固体。通过滗析除去醚并风干肽2h(产量308mg)。
该肽通过反相HPLC显示含有一种主要组分并且具有通过MALDI-TOF质谱测定的预期的分子量。
实施例4-酶的固定
1.葡萄糖氧化酶和辣根过氧化酶与固体载体的偶合
将葡萄糖氧化酶(黑曲霉，27.6mg)溶于乙酸钠(5.5cm3，0.1mol/dm3pH值5.5)。将辣根过氧化酶(25.7mg)溶于乙酸钠(5.14cm3，0.1mol/dm3，pH值5.5)。
单独地相对水(500cm3)透析这些溶液的等分试样(3cm3)一小时，然后相对乙酸钠(500cm3，0.1mol/dm3，pH值5.5)透析。再使每一制剂相对乙酸钠(200cm3，0.1mol/dm3，pH值5.5)透析3小时。
通过在5cm3聚丙烯管子中将冷钠-m-高碘酸盐(0.27cm3，88mmol/dm3)的等分试样添加到2.7cm3体积的每一经透析的酶溶液中进行碳水化合物在每一酶上的高碘酸盐氧化。将该管子包在铝箔中以保护内容物不见光并在瓶子辊上混合20分钟。通过添加甘油在水(20mm3)中的十倍稀释液并迅速地混合将反应猝灭。
通过使每种氧化酶溶液相对300cm3体积的0.1mol/dm3 MES，0.15mol/dm3 NaCl，在冷冻机中在pH值5.0下大规模透渗析1小时除去反应副产物。在冷冻机中，相对300cm3体积的这种缓冲物再进行每种珠粒制剂的透渗析1小时，然后相对300cm3透渗析一整夜。进行每种制剂相对400cm3这种缓冲物的最终透渗析。冷冻储存这些氧化酶制剂直到合要求。
将实施例2-2中制备的珠粒批料BPAm I添加在水中以使10cm3聚丙烯管子加倍而产生大约1cm3填充体积。滗析上层清液并保留在水(10cm3)中在冷冻机中一整夜。进行另一次水洗涤(10cm3)和用0.1mol/dm3磷酸钠、0.15mol/dm3NaCl，pH值7.4(3×10cm3)洗涤，其中每一次在瓶子辊上混合10分钟。进行每种珠粒制剂的最终延长的30分钟洗涤并且将上层清液体积缩减到大约1.5cm3。
为了在所述珠粒上将伯胺转化成受保护的肼，用琥珀酰亚胺基4-hydrazinonicotinate丙酮腙(SANH)处理该珠粒。在实践中，将SANH(25mg)溶于二甲亚砜(DMSO)(1.2cm3)并将等分试样(0.3cm3)添加到珠粒制剂中的每一种中并涡动。将0.1M磷酸钠，0.15M NaCl，pH值7.4缓冲物(1.5cm3)添加到每个管子中并在瓶子辊上在室温下混合4小时。吸出上层清液并用该缓冲物进行洗涤(3×10cm3)，接着用水(3×10cm3)洗涤。然后用0.1mol/dm3 MES，0.15mol/dm3 NaCl，pH值5.0(4×10cm3)洗涤该珠粒而留下为粒料的珠粒制剂。
如下进行所述氧化酶中的每一种经由它们的醛与SANH-改性珠粒的偶合：酌情将1cm3氧化葡萄糖氧化酶或氧化辣根过氧化酶添加到每个珠粒粒料中，并在室温下在黑暗中混合3小时。
吸出上层清液并用所述pH值5.0缓冲物(5×10cm3)接着用水(5×10cm3)洗涤每一珠粒制剂，每次简短地摇动该珠粒悬浮液，然后小心吸出上层清液。将珠粒制剂储存在冷冻机中的10cm3体积的水中(BPAmI I-辣根过氧化酶和BPAm II-葡萄糖过氧化酶)。
实施例5-固定的酶的试验
固定的辣根过氧化酶
在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中洗涤实施例4中制备的固定辣根过氧化酶的珠粒三次，每一次2分钟。倒掉PBS并添加调节到pH6.4的染色介质，该染色介质由含过氧化氢(0.35mmol/dm3)的磷酸钠水溶液(0.1mol/dm3)和二氨基联苯胺(0.5mg/cm3)构成。在5分钟之后，珠粒整体染色成暗褐色，指示酶的存在并证实酶是活性的。
在37℃下进行染色。洗涤珠粒以除去染色介质并在Nikon倒置显微镜上拍照×50。
固定的葡萄糖氧化酶
在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中洗涤固定葡萄糖氧化酶的珠粒三次，每一次2分钟。倒掉PBS并添加染色介质，该染色介质由都在PBS pH6.9中的D-葡萄糖(42mmol/dm3)、吩嗪甲硫酸盐(0.1mg/cm3)和氮蓝四唑(0.5mg/cm3)构成。在5分钟之后，珠粒整体染色成深蓝色，指示酶的存在并证实酶是活性的。
在37℃下进行染色。洗涤珠粒以除去染色介质并在Nikon倒置显微镜上拍照×50。
实施例6-蛋白质A的固定
r蛋白质A与珠粒的偶合
将填充床体积(5cm3)的实施例2-6中制备的珠粒批料BPAm II分配到50cm3聚丙烯管子中。滗析过剩水并用水(5×40cm3)洗涤该珠粒制剂，每次使该珠粒再悬浮并允许它们在重力下沉降。类似地进行用硼酸钠(0.1mol/dm3，pH8.3，4×40cm3)的洗涤并让该珠粒在另一50cm3的这种缓冲物中冷冻一整夜。
为了在珠粒上将这种胺转化成羧酸基，用琥珀酸酐处理它们。将琥珀酸酐(1.2g)溶于DMSO(60cm3)。从该珠粒滗析硼酸盐缓冲物并将这种琥珀酸酐溶液的等分试样(30cm3)添加到该珠粒制剂中，简短地摇动并瓶子辊上在室温下混合6小时。用水(8×40cm3)洗涤该珠粒制剂，每次使该珠粒简短地再悬浮并吸出上层清液。添加吗啉基乙磺酸(MES)缓冲物(25mmol/dm3，pH值5.0，40cm3)的等分试样，然后在冷冻机中保留该珠粒一整夜。用这种缓冲物(2×40cm3)进一步洗涤该珠粒并留下为粒料的珠粒。
将N-羟基琥珀酰亚胺(1.6g)溶于冷MES缓冲物(25mmol/dm3，pH值5.0，32cm3)并将这一溶液的等分试样(15cm3)添加到该珠粒粒料中并简短地混合。将1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二酰胺盐酸盐(EDC，1.6g)溶于MES缓冲物(25mmol/dm3，pH值5.0，32cm3)并将这一溶液的等分试样(15cm3)添加到该珠粒制剂中。在瓶子辊上混合该珠粒制剂30分钟以激活。滗析上层清液并迅速地用MES缓冲物(25mmol/dm3，pH值5.0，5×40cm3)洗涤每一制剂而留下为粒料的珠粒。
立即，将r蛋白质A溶液(15cm3，4mg/cm3，在25mmol/dm3 MES中，pH值5.0)的等分试样(10cm3)添加到该珠粒制剂中并允许进行在室温下偶合两小时，同时在瓶子辊上混合。滗析上层清液并添加Trizma-HCl，pH值7.4的等分试样(30cm3)并混合两小时以使任何残存的N-羟基琥珀酰亚胺酯成块。滗析上层清液并在珠粒制剂上进行水洗(8×40cm3)并让该珠粒留在水(10cm3)中(BPAm II-蛋白质A)。实施例7-作为吸收剂的用途
使用上面实施例2-3中制备的固体载体按该载体质量的许多倍的量吸收红油的溢出液。当将该固体载体应用于该溢出液时，该红油被该固体载体完全地吸收，说明该载体作为吸收剂的应用。
实施例8-乙酸钯的包封
将制备实施例1部分3制备的氨基官能化珠粒，BAm I(1g)珠粒添加到乙酸钯(0.1g)和聚(苯基异氰酸酯-共聚-甲醛)(0.64g)在氯仿(0.86g)中的溶液中并保持5分钟。短暂地施加真空并将该珠粒转移至筛子中并排出过量的乙酸钯/聚(苯基异氰酸酯-共聚-甲醛)溶液。将该含珠粒的筛子浸于水浴中并保持一整夜以允许完成聚合。用DMF洗涤该珠粒并保持在DMF中再搅拌24小时以确保从该珠粒外部除去所有聚合物碎屑。用水洗涤该珠粒并允许风干。
实施例9
玻璃表面在新珠粒上的蚀刻
将中心挖空的小玻璃珠(新珠粒图4，3.86g)放入50cm3聚丙烯瓶子中并用Dip′n Etch[氟化氢铵]溶液(10cm3)覆盖。将该瓶子放入超声波浴中保持2h，然后保留16h。
用水(10×5cm3)，氢氧化钠水溶液(15％w/v，10×5cm3)，水(10×5cm3)，盐酸水溶液(1mol/dm3，10×5cm3)，然后水(10×5cm3)洗涤该珠粒。然后在100℃下干燥该珠粒1h(产量2.8g)。
蚀刻的珠粒与氨基丙基三甲氧基硅烷的反应
准备氨基丙基三甲氧基硅烷(0.1cm3)在乙醇∶水(5cm3，95∶5v/v)中的溶液并允许静置10分钟。将上面制备的蚀刻珠粒(2g)放入聚丙烯瓶子中并用这种预激活的溶液覆盖。将该混合物放入超声波浴中保持1小时，然后用丙酮洗涤并在氮气流下干燥而产生氨基丙基官能化的珠粒。然后在110℃下固化该珠粒2h。
氨基丙基官能化的珠粒与丙烯酰氯的反应
将上面制备的氨基丙基官能化珠粒(2g)覆盖在含4-甲基吗啉(0.5cm3)的二氯甲烷(2cm3)中并于5分钟内缓慢地添加丙烯酰氯(0.5cm3)在二氯甲烷(2cm3)中的溶液。使该混合物旋动，允许静置1小时，然后用二氯甲烷(3×5cm3)洗涤，然后在氮气流中干燥而产生丙烯酰胺官能化的珠粒。
聚二甲基丙烯酰胺的聚合
将N，N-二甲基丙烯酰胺(10mmol，1g)、N-丙烯酰基肌氨酸甲酯(1.3mmol，0.2g)和双-丙烯酰基乙二胺(0.25mmol，0.04g)和水(0.3cm3)放入圆底烧瓶中。添加过硫酸铵水溶液(0.08g，在0.2cm3中)。立即将上面制备的丙烯酰胺珠粒(2g)添加到该单体溶液中并施加微小真空以从该珠粒的孔除去气泡。
使用不锈钢筛排出过量的单体溶液。然后将该含珠粒的筛子保留在UV灯下一整夜。
将该含珠粒的筛子放入冷水浴中并允许静置1h。将此时包含包封在孔内的聚合物的珠粒连同磁力搅拌棒一起转移至锥形烧瓶中。添加水(5cm3)并在磁力搅拌器上搅拌该混合物5分钟。通过滗析除去上层清液，它包含从珠粒表面冲刷的聚合物的小不规则颗粒。重复该洗涤过程直到上层清液不包含可辨别的聚合物颗粒。将该珠粒-聚合物复合固体载体储存在水下。
实施例10
蚀刻的珠粒与氨基丙基三甲氧基硅烷的反应
准备氨基丙基三甲氧基硅烷(1cm3)在乙醇∶水(50cm3，95∶5v/v)中的溶液并允许静置10分钟。将蚀刻的尺寸15/0珠粒(30g，BI)放入聚丙烯瓶子中并用该预激活的溶液覆盖。将该混合物放入超声波浴中保持1小时，然后用丙酮洗涤并在氮气流下干燥而产生氨基丙基官能化的珠粒。然后在110℃下固化该珠粒2h。
氨基丙基官能化的珠粒与丙烯酰氯的反应
将上面制备的氨基丙基官能化珠粒(30g)覆盖在含4-甲基吗啉(5cm3)的二氯甲烷(15cm3)中并于5分钟内缓慢地添加丙烯酰氯(5cm3)在二氯甲烷(15cm3)中的溶液。使该混合物旋动，允许静置1小时，然后用二氯甲烷(3×30cm3)洗涤，然后在氮气流中干燥而产生丙烯酰胺官能化的珠粒。
聚二甲基丙烯酰胺的聚合
将N，N-二甲基丙烯酰胺(100mmol，9.9g)、N-丙烯酰基肌氨酸甲酯(13mmol，2.0g)和双-丙烯酰基乙二胺(5mmol，0.82g)和水(3cm3)放入圆底烧瓶中。添加过硫酸铵水溶液(0.75g，在2cm3中)。立即将上面制备的丙烯酰胺珠粒(30g)添加到该单体溶液中并施加微小真空以从该珠粒的孔除去气泡。
使用不锈钢筛排出过量的单体溶液。然后将该含珠粒的筛子保留在UV灯下一整夜。
将该含珠粒的筛子放入冷水浴中并允许静置1h。将此时包含包封在孔内的聚合物的珠粒连同磁力搅拌棒一起转移至锥形烧瓶中。添加水(50cm3)并在磁力搅拌器上搅拌该混合物5分钟。通过滗析除去上层清液，它包含从珠粒表面冲刷的聚合物的小不规则颗粒。重复该洗涤过程直到上层清液不包含可辨别的聚合物颗粒。将该珠粒-聚合物复合固体载体储存在水下。
实施例11
制备具有衬里的固体载体。遵循实施例2的程序，不同之处在于将水和过硫酸铵的水平分别加倍到6cm3水和在4cm3过硫酸铵溶液中的1.5g。制备具有大约50微米厚的聚合物衬里的珠粒。

Claims (43)

1.包含聚合物浸渍的珠粒的固体载体，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔和布置在该孔内的聚合物。
2.根据权利要求1的固体载体，其中该珠粒包含惰性材料。
3.根据权利要求2的固体载体，其中该惰性材料选自玻璃、陶瓷、聚合物、木材(或其它天然材料)和金属。
4.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中该珠粒基本上是球形或椭圆形的。
5.根据权利要求1-3中任一项的固体载体，其中该珠粒是管状的。
6.根据权利要求1-3中任一项的固体载体，其中该珠粒是不规则形状的。
7.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中珠粒中的孔具有基本上哑铃形的纵向截面。
8.根据权利要求1-6中任一项的固体载体，其中珠粒中的孔具有基本上管式形状的纵向截面。
9.根据权利要求1-6中任一项的固体载体，其中珠粒中的孔具有基本上肿胀式(中央更宽)形状的纵向截面。
10.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中珠粒内的聚合物具有小于2mm的颗粒尺寸。
11.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中珠粒内的聚合物具有0.01-0.5mm的颗粒尺寸。
12.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中该聚合物是在珠粒的孔中形成的。
13.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中该聚合物直接或间接地与该珠粒共价键接。
14.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中该珠粒包含玻璃并且已经用蚀刻剂加以处理以提供活性部位，该活性部位适合于与用来和该聚合物连接的衍生物反应。
15.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中该珠粒是用硅烷衍化的以提供用于与聚合物反应的活性部位。
16.根据权利要求15的固体载体，其中该活性部位是乙烯基。
17.根据权利要求15或权利要求16的固体载体，其中该硅烷基具有通式-(O)nSi[(CH2)p[Z]qCR＝CR2](4-n)，其中n为1-3，p为0-6，其中R独立地是H或烷基，q是0或1，Z是二价连接基。
18.根据权利要求17的固体载体，其中Z具有通式-(CH2]rNRC(O)-其中r为1-6。
19.根据权利要求15-18中任一项的固体载体，其中该硅烷基选自-O3SiCH＝CH2和-O3Si(CH2)3NHCOCH＝CH2。
20.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中该活性部位包含除硅烷以外的官能团，该官能团能够在珠粒和聚合物之间形成共价键。
21.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中所述聚合物选自聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、纤维素、聚二甲基丙烯酰胺、聚二甲基甲基丙烯酸酯、聚脲、聚丙烯酰基吗啉、聚β羟基酯、Polyhipe、聚亚烷基二醇和多糖。
23.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中该载体在珠粒的孔内包含惰性材料并且该聚合物与该惰性材料结合或，当该惰性材料是多孔惰性材料时，该聚合物被保持在该惰性材料的孔隙内。
24.根据权利要求21的固体载体，其中该惰性材料包含Polyhipe或多孔无机聚合物例如多孔硅。
25.根据上述权利要求中任一项的固体载体，还包含被该聚合物担载的功能性材料。
26.根据权利要求25的固体载体，其中该功能性材料选自催化剂、肽合成的引发剂物质、低聚核苷酸合成的引发剂物质、固相有机合成的引发剂物质、药物活性材料、农用化学活性材料、蛋白质或其它生物学大分子。
27.根据上述权利要求中任一项的固体载体，其中该聚合物呈在珠粒孔中的实心栓形式。
28.根据权利要求1-26中任一项的固体载体，包含聚合物浸渍的珠粒，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔并且该孔的壁包括聚合物层以致在该珠粒的孔中提供聚合物环。
29.根据权利要求28的固体载体，其中该聚合物层具有1-100微米的厚度。
30.用于检测分析生物样品中化合物存在与否的医学诊断产品，包含根据权利要求1-26中任一项的固体载体并且包含被该载体结合或保持的功能性材料，该功能性材料具有用于与该生物样品中的化合物相互作用的特定结合部位。
31.根据权利要求30的医学诊断产品，其中该功能性材料包含被该聚合物担载的酶。
32.含装在柱中的根据权利要求1-29中任一项的固体载体的整料。
33.用于检测生物样品中化合物存在与否的医学诊断方法，提供包含聚合物浸渍的珠粒的固体载体，其中该珠粒具有穿透该珠粒的孔和布置在该孔内的聚合物和被该载体中的聚合物担载的用于选择性地与该生物样品中的化合物反应或结合的功能性材料，并使该生物样品与该固体载体接触。
34.固体载体材料的制备方法，包括以下步骤：提供具有穿孔的珠粒，让该珠粒与单体或单体的溶液接触，聚合该单体以形成聚合物，和任选地对该包含聚合物的珠粒进行进一步处理以从该珠粒的表面除去不希望的聚合物。
35.根据权利要求34的方法，其中将该单体或单体的溶液添加到珠粒中并在与该单体或单体溶剂不混容的溶剂存在下进行聚合。
36.根据权利要求34或权利要求35的方法，其中让该包含聚合物的珠粒经历物理打磨以致从该珠粒的外表面除去聚合物，留下位于该珠粒孔中的聚合物。
37.权利要求1-32中任一项的固体载体在化学、生物或物理方法中的用途。
38.固体载体的根据权利要求37的用于物质固相合成的用途，该物质选自肽、低聚核苷酸、低聚糖。
39.固体载体的根据权利要求37的用于固相萃取的用途。
40.固体载体的根据权利要求37的用于固相有机化学的用途。
41.固体载体的根据权利要求37的用于物质固定的用途，该物质选自固相试剂、金属和其它催化剂，生物催化剂，酶，蛋白质，包括多克隆和单克隆抗体的抗体，整体细胞和聚合物。
42.固体载体的根据权利要求37的用于细胞培养的用途。
43.固体载体的根据权利要求37的制备层析分离用静止相的用途。
44.固体载体的根据权利要求37的作为吸收剂的用途。
CNA2007800344248A 2006-07-25 2007-07-24 固体载体 Pending CN101516496A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0614727.6A GB0614727D0 (en) 2006-07-25 2006-07-25 Solid support
GB0614727.6 2006-07-25

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101516496A true CN101516496A (zh) 2009-08-26

Family

ID=37006094

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2007800344248A Pending CN101516496A (zh) 2006-07-25 2007-07-24 固体载体

Country Status (7)

Country Link
EP (1) EP2051803A1 (zh)
JP (1) JP2010500919A (zh)
KR (1) KR20090046857A (zh)
CN (1) CN101516496A (zh)
AU (1) AU2007278481A1 (zh)
GB (1) GB0614727D0 (zh)
WO (1) WO2008012064A1 (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102711978A (zh) * 2010-01-08 2012-10-03 塔斯马尼亚大学 多孔聚合物整料、其制备方法及其用途
CN103769238A (zh) * 2012-10-24 2014-05-07 中国石油化工股份有限公司 一种多孔道材料及催化剂的制备方法
CN108059878A (zh) * 2016-11-09 2018-05-22 株式会社理光 硬化型组成物、硬化型墨水、硬化物、硬化性化合物
CN110234427A (zh) * 2016-11-22 2019-09-13 瑞典仿生3000有限公司 长形固相体
CN110841607A (zh) * 2019-11-22 2020-02-28 中国科学院地质与地球物理研究所 一种超低本底金特效树脂及其制备和应用

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101071589B1 (ko) 2008-10-09 2011-10-11 인하대학교 산학협력단 새로운 크로마토그래피 컬럼용 모노리트 프릿 및 이의 제조방법
GB2473814B (en) 2009-09-16 2014-06-11 Spheritech Ltd Hollow particulate support
GB201106742D0 (en) 2011-04-20 2011-06-01 Spheritech Ltd Cross-linked poly-e-lysine
CN106459978B (zh) 2014-01-28 2020-05-19 帝测分子Sv有限公司 附接有识别化合物的整料、该些整料的阵列及用途
WO2016160475A1 (en) * 2015-03-30 2016-10-06 Genapsys, Inc. Beads for nucleic acid sequencing
CN106984825B (zh) * 2016-01-20 2018-07-20 中国药科大学 基于银还原和咖啡酸氧化聚合制备哑铃型双面纳米粒子
WO2017176055A1 (ko) * 2016-04-06 2017-10-12 경희대학교산학협력단 세포 배양용 마이크로 비드 및 이를 이용한 세포 배양 모니터링 방법
KR101975100B1 (ko) 2016-04-06 2019-05-03 경희대학교 산학협력단 세포 배양용 마이크로 비드 및 이를 이용한 세포 배양 모니터링 방법
EP3473695A1 (en) * 2016-06-21 2019-04-24 KYB Corporation Hydraulic fluid
KR102068665B1 (ko) * 2017-12-21 2020-01-21 주식회사 에스피엘 세포 배양용 지지체, 이의 제조 방법, 및 이를 이용한 세포 배양 방법
CN109793902A (zh) * 2019-03-26 2019-05-24 中国人民大学 一种固体凝胶片及其制备方法与应用
CN113522256B (zh) * 2021-07-19 2022-06-21 中国科学院兰州化学物理研究所 一种水凝胶@二氧化硅液相色谱填料的制备及应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5247355B2 (zh) * 1974-10-15 1977-12-01
FR2522282A1 (fr) * 1982-03-01 1983-09-02 Can Med Inc Adsorbant a base d'oxyde de zirconium
AT500669B1 (de) * 2001-09-24 2007-02-15 Oesterr Forsch Seibersdorf Fester träger zur immobilisierung von biomolekülen

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102711978A (zh) * 2010-01-08 2012-10-03 塔斯马尼亚大学 多孔聚合物整料、其制备方法及其用途
CN102711978B (zh) * 2010-01-08 2015-11-25 塔斯马尼亚大学 多孔聚合物整料、其制备方法及其用途
CN103769238A (zh) * 2012-10-24 2014-05-07 中国石油化工股份有限公司 一种多孔道材料及催化剂的制备方法
CN103769238B (zh) * 2012-10-24 2017-02-01 中国石油化工股份有限公司 一种多孔道材料及催化剂的制备方法
CN108059878A (zh) * 2016-11-09 2018-05-22 株式会社理光 硬化型组成物、硬化型墨水、硬化物、硬化性化合物
US10781325B2 (en) 2016-11-09 2020-09-22 Ricoh Company, Ltd. Curable composition, curable ink, accommodating container, image forming device, image forming method, cured matter, and acrylamide compound
CN110234427A (zh) * 2016-11-22 2019-09-13 瑞典仿生3000有限公司 长形固相体
CN110841607A (zh) * 2019-11-22 2020-02-28 中国科学院地质与地球物理研究所 一种超低本底金特效树脂及其制备和应用

Also Published As

Publication number Publication date
KR20090046857A (ko) 2009-05-11
WO2008012064A1 (en) 2008-01-31
JP2010500919A (ja) 2010-01-14
EP2051803A1 (en) 2009-04-29
AU2007278481A1 (en) 2008-01-31
GB0614727D0 (en) 2006-09-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101516496A (zh) 固体载体
CN102630241B (zh) 中空微粒主体
Liu et al. A review on the use of ionic liquids in preparation of molecularly imprinted polymers for applications in solid-phase extraction
CN100537022C (zh) 制备色谱基质的方法
CN103597011B (zh) 交联的‑e‑赖氨酸颗粒
JP5250985B2 (ja) 充填床用新規充填剤及びその用途
CN101903296B (zh) 复合聚合物过滤介质
KR101215171B1 (ko) 크로마토그래피 매트릭스의 제조 방법
JPH01151596A (ja) 結合オリゴヌクレオチド及びペプチドを有する膜
JPH0458311B2 (zh)
US20120208256A1 (en) Enzyme-functionalized supports
CN117377521A (zh) 具有分级多层结构的合成聚合物多孔介质及其设计、合成、改性和液相色谱应用
CN114534310B (zh) 一种复合型阴离子层析介质及其制备方法与应用
CN112126638B (zh) 一种脂肪酶固载树脂及其制备方法
GB2562004B (en) Cross-linked poly-e-lysine particles
JPH0440367A (ja) 球状分離剤
Hoshino et al. 12 Stimuli responsive polymers in bioprocessing
Galaev et al. 24.3 Polymers, Biotechnology, and Medical Applications
WO2009027085A1 (en) Process for carrying out a chemical reaction in a cell

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Open date: 20090826