CN101485671A - 8-乙酰氧基山栀苷甲酯的医药新用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了8－乙酰氧基山栀苷甲酯的医药新用途，具体涉及其在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用，以及8－乙酰氧基山栀苷甲酯的制备方法。

Description

8—乙酰氧基山栀苷甲酯的医药新用途

技术领域

本发明涉及8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。

背景技术

独一味为唇形科植物独一味Lamiophlomis rotata(Benth)Kudo的全称，为我国藏族、蒙古族、纳西族等民间常用草药。1992年张承忠等从独一味地上部分分得8—乙酰氧基山栀苷甲酯【刘阿丽，李丽，仝武军，独一味的研究进展及临床应用，中国疗养医学2007年4月第16卷第4期】。但目前8-乙酰氧基山栀苷甲酯对心脑血管疾病的作用还未见报道，基于此，本发明人通过大量的实验研究，提供了8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。

发明内容

本发明提供了8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。

本发明提供了8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防冠心病、心绞痛、心肌缺血或心肌梗塞等药物中的应用。

本发明提供了8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防脑损伤、脑缺血等药物中的应用。

本发明提供的8—乙酰氧基山栀苷甲酯可以与各种常规辅料制成各种药物剂型，可以是注射剂、粉针剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、微粒剂，优选冻干粉针剂。

本发明提供的8—乙酰氧基山栀苷甲酯在用于心脑血管疾病时，其注射使用剂量范围是30mg～5000mg，优选为30mg～2500mg；其口服使用剂量范围是200mg～10000mg，优选为200mg～5000mg。

本发明人进行了下列试验来证实8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的作用，但不仅限于此。

具体实施方式

制备例1：制备8-乙酰氧基山栀苷甲酯

取独一味药材20kg，将其粉碎，过10目筛，加8倍量(V/W)70％乙醇浸泡过夜，回流提取两次，每次2小时，提取液回收乙醇至无醇味，过滤，滤液上处理好聚酰胺柱，水洗6倍柱体积，收集洗脱液，上处理好的AB-8大孔树脂柱，水洗至流出液无色，再用10％乙醇洗脱10倍柱体积，最后用25％乙醇洗脱4倍柱体积，收集25％乙醇洗脱液，上氧化铝柱，95％丙酮洗脱，收集洗脱液，蒸干，得含量为98％的8-乙酰氧基山栀苷甲酯白色粉末。

制备例2：制备8-乙酰氧基山栀苷甲酯

取独一味药材20kg，将其粉碎，过10目筛，加10倍量(V/W)30％乙醇浸泡2小时，回流提取两次，每次1.5小时，提取液回收乙醇至无醇味，过滤，滤液上处理好聚酰胺柱，水洗6倍柱体积，收集洗脱液，上处理好的D101大孔树脂柱，水洗至流出液无色，再用15％乙醇洗脱8倍柱体积，最后用50％乙醇洗脱4倍柱体积，收集50％乙醇洗脱液，上氧化铝柱，95％丙酮洗脱，收集洗脱液，蒸干，得含量为95％的8-乙酰氧基山栀苷甲酯白色粉末。

制备例3：8-乙酰氧基山栀苷甲酯注射液

处方：

按处方量取8-乙酰氧基山栀苷甲酯3.0g，氯化钠89g，用注射用水10000ml溶解，搅拌；加入活性炭50g，搅拌20分钟，溶液经过微孔滤膜过滤澄明，分装于125ml输液瓶中，每瓶100mL，灭菌，检查合格后包装即可。其它检查项应该符合中华人民共和国药典2005年版注射液项目要求。

制备例4：8-乙酰氧基山栀苷甲酯冻干粉针

取30g，混合后加注射用水2000ml，加甘露醇8g，搅拌溶解，超滤，得到无热源的澄清液，灌入10ml西林瓶中，2ml/只，按冻干粉针工艺冻干，制成每支含30mg的冻干粉针。

制备例5：8-乙酰氧基山栀苷甲酯片剂

处方：

按处方量取8-乙酰氧基山栀苷甲酯200g，淀粉150g，羧甲基淀粉钠50g，微晶纤维素100g，硬脂酸镁5g，混和，加入50％乙醇适量制粒，干燥，整粒，压片，检查合格后，包装。

试验例1：8-乙酰氧基山栀苷甲酯对大鼠心肌缺血损伤的影响

(1)材料：

8-乙酰氧基山栀苷甲酯，按制备例1方法制备。

氯化硝基四氮唑蓝(N-BT)，由军事医学科学院药材供应站提供。

实验动物：普通级SD大鼠，雄性，体重280g—350g，雌雄各半，山东绿叶制药股份有限公司实验动物中心提供，合格证号：SYXK(鲁)20030020。

(2)方法与结果：

动物随机分为模型对照组(生理盐水)、硝苯地平组(6mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组1(3mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组2(7.5mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组3(20mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组4(50mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组5(250mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组6(500mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组1(20mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组2(100mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组3(500mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组4(1000mg/kg)。每组10只。禁食12小时后，ip.乌拉坦(1.2g/kg)麻醉，测肢体II导联心电图。剪去左胸前皮毛，碘酒及酒精消毒，沿胸骨左缘1cm处，剪开胸壁肌肉及二条肋骨，迅速打开胸腔，暴露心脏，在动脉圆锥与左心耳之间结扎左冠状动脉，立即将心脏放回，排挤出胸腔空气，用止血钳闭合胸腔，造成大鼠急性心肌缺血模型。硝苯地平组在麻醉前灌胃给药，灌胃给药组连续给药3天，于第2天给药后禁食16小时后，第3天给药30分钟后手术，其余各组术后随既静脉注射相应药物。记录给药前及给药后1.5h、3h心电图，测量心电图J点的升高值，6h后取出心脏，以冷生理盐水洗净后，-20℃冰箱冷冻过夜。次日，将冷冻的心脏由结扎处至心尖部等厚切成5片，浸入新鲜配制的0.25％N-BT磷酸缓冲液(pH7.4)中。37℃水浴振摇10～15min。用滤纸吸干切片表面的染色液，分离染色部分和未染色部分，称重，记算梗死面积。梗死面积(％)＝梗死部分重量/(非梗死部分重量+梗死部分重量)×100％。数据用X±s表示，以组间t检验进行统计学处理。

结果如表1所示，心肌缺血6小时后，模型组大鼠心肌出现明显的灶状缺血区，达到26％左右。8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组1(3mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组2(7.5mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组3(20mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组4(50mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组5(250mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组6(500mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组1(20mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组2(100mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组3(500mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组4(1000mg/kg)降低肢体导联心电图J点的升高、减少缺血面积(与模型组比较，p<0.05或p<0.01)；8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射高剂量组5(250mg/kg)与8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组6(500mg/kg)比较，对肢体导联心电图J点的升高及缺血面积无明显差异(p>0.05)；8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉灌胃组3(500mg/kg)与8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃组4(1000mg/kg)比较，对肢体导联心电图J点的升高及缺血面积无明显差异(p>0.05)。

表1  8-乙酰氧基山栀苷甲酯对大鼠心肌缺血损伤的影响(n＝10)

与模型对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01。

试验例2：8—乙酰氧基山栀苷甲酯对大鼠局部脑缺血损伤的影响

(1)材料：

8-乙酰氧基山栀苷甲酯，按制备例1方法制备。

红四氮唑：美国Sigma公司产品，临用前用生理盐水配成4％溶液。

实验动物：普通级SD大鼠，雄性，体重280g—350g，雌雄各半，山东绿叶制药股份有限公司实验动物中心提供，合格证号：SYXK(鲁)20030020。

(2)方法与结果：

动物随机分为模型对照组(生理盐水)、尼莫地平组(1.0mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组1(3mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组2(7.5mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组3(20mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组4(50mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组5(250mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组6(500mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组1(20mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组2(100mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组3(500mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组4(1000mg/kg)。每组10只。每组10只。禁食12小时后，水合氯醛(350mg/kg，i.p.)麻醉，分离右侧颈总动脉，夹闭颈内、颈总动脉，颈外动脉近心端及远心端结扎，中间剪断。将颈外动脉游离端拉至与颈内动脉成一条直线，将栓线(选用直径0.24mm尼龙线，长度5.0cm)由颈外动脉插入至颅内，遇轻微阻力时停止，插入深度约为2cm。结扎颈外动脉开口，并打开颈总动脉动脉夹，消毒缝合伤口，造成右侧大脑中动脉缺血模型；假手术组仅进行右侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉的分离(以上实验均在23℃～25℃进行)。灌胃给药组连续给药3天，于第2天给药后禁食16小时后，第3天给药30分钟后手术，其余各组术后静脉注射相应药物。24小时后按文献【刘小光，徐理纳，一种能评价溶栓和抗溶栓的大鼠脑中动脉模型，药学学报，1995，30：662】所述方法及标准观察并记录大鼠的行为障碍：(A)提鼠尾观察前肢屈曲情况，如双前肢对称伸向地面，计为0分，如手术对侧前肢出现腕屈曲计为1分，肘屈曲计为2分，肩内旋计为3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩内旋者，计为4分。(B)将动物置于平地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等且有力，计为0分，如向手术对侧推动时阻力下降者，根据下降程度不同分为轻、中、重三度，分别计为1，2和3分。(C)将动物双前肢置一金属网上，观察双前肢的肌张力。双前肢肌张力对等且有力者计为0分。同样根据手术对侧肌张力下降程度不同计为1，2和3分。(D)动物有不停地向一侧转圈者，计为1分。根据标准评分，满分为11分，分数越高，表示动物行为障碍越严重。

行为评分后处死大鼠，取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，冠状切成5片，脑片用红四氮唑(TTC)染色，正常组织经染色后呈红色，梗塞组织呈白色，染色后照相，用中国航空航天大学病理图像分析软件求梗塞面积比。数据用X±s表示，以组间t检验进行统计学处理。

结果如表2所示，缺血24小时后，模型组大鼠表现出明显的行为障碍，大鼠脑组织也出现明显的灶状缺血区，达到全脑24％左右。8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组1(3mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组2(7.5mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组3(20mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组4(50mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组5(250mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组6(500mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组1(20mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组2(100mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组3(500mg/kg)、8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃剂量组4(1000mg/kg)显著改善大鼠行为障碍、减少缺血面积(与模型组比较，p<0.05或p<0.01)，8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组5(250mg/kg)与8-乙酰氧基山栀苷甲酯静脉注射剂量组6(500mg/kg)比较，对改善大鼠行为障碍、减少缺血面积无明显差异(p>0.05)；8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃组3(500mg/kg)与8-乙酰氧基山栀苷甲酯灌胃组4(1000mg/kg)比较，对改善大鼠行为障碍、减少缺血面积无明显差异(p>0.05)。

表2 8-乙酰氧基山栀苷甲酯对大鼠脑缺血损伤的影响(n＝10)

与模型对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01。

Claims (4)

1.8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。

2.8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防冠心病、心绞痛、心肌缺血或心肌梗塞的药物中的应用。

3.8-乙酰氧基山栀苷甲酯在制备治疗或预防脑损伤、脑缺血的药物中的应用。

4.根据权利要求1—3任一所述的应用，其中8—乙酰氧基山栀苷甲酯的制备方法为：独一味药材粉碎、过筛、浸泡、回流提取后提取液回收乙醇至无醇味，过滤，滤液上处理好的聚酰胺柱，水洗，收集洗脱液上处理好的大孔树脂柱，水洗至流出液无色，醇洗，收集洗脱液上氧化铝柱，洗脱，收集洗脱液，蒸干既得。