CN101475483A - β-(3,4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯类化合物的医药用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了式(I)β－(3，4－二羟基苯基)－α－羟基丙酸酯类化合物。本发明还涉及式(I)β－(3，4－二羟基苯基)－α－羟基丙酸酯类化合物在制备用于防止Aβ聚集和/或促进已聚集的Aβ降解，促进神经干细胞增殖，治疗、预防和/或延缓神经退行性疾病的药物中的用途。本发明式(I)β－(3，4－二羟基苯基)－α－羟基丙酸酯类化合物可以有效治疗所述相关病症。

Description

β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯类化合物的医药用途

技术领域

本发明涉及一类β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯类化合物，本发明还涉及β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯类化合物在制备用于治疗、预防和/或延缓神经退行性疾病以及相关疾病的药物中的用途。

背景技术

神经退行性疾病是一种以神经细胞的损伤和退化为特征的复杂的多因素慢性进行性精神衰退疾病，神经退行性疾病包括阿尔兹海默氏症(AD)、帕金森氏疾病(PD)、亨廷顿疾病(HD)、多发性硬化症(MS)等。临床表现为神经细胞退行性病变，病变使得脑细胞功能丧失，引发多种脑部疾病。神经退行性疾病严重危害人类的身体健康和生活质量，给患者家庭和社会造成了很大的负担和压力。

以阿尔兹海默氏疾病为例，该病是由病理医生阿尔兹海默在患者脑病理切片发现大量淀粉样斑块(即老年斑，SP)而命名的。现有的研究结果显示，这种神经退行性疾病的主要原因是神经细胞的损伤病变，而这种损伤的原因是由于淀粉样蛋白β肽(Amyloid β Peptide，在本文中简称Aβ)聚集缠结形成淀粉样斑块造成的。因此，预防和治疗AD疾病的策略，可以是防止Aβ聚集或能够降解已聚集的Aβ形成的老年斑块，也可以是促进体内神经细胞增长以替代损伤的细胞。两种方案都是目前预防和治疗AD疾病的靶向策略。

β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸俗称丹参酸，是中药丹参水溶性部分的主要成分。丹参传统上是一味用于治疗心血管疾病的中药，也是诸多用于预防和/或治疗心血管疾病的中药或中药提取物的主要有效成分之一，但是丹参类化合物不易通过血脑屏障。因此，提高这类化学成分的进脑量以提高治疗脑部疾病的效果一直是本领域技术人员所期待的。

发明内容

本发明的目的是提供一类β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯类化合物。本发明的另一目的是提供所述β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯类化合物在制备用于治疗、预防和/或延缓神经退行性疾病以及相关疾病的药物中的用途。本发明通过将丹参的一种水溶性成分β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸与具有羟基结构的醇类化合物反应形成β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯类化合物。本发明人发现通过上述结构改造，有效地增加了β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸的脂溶性以及通过血脑屏障的能力，其靶向作用更为明显，发明人基于此发现而得以实现本发明。

发明概述：

本发明第一方面提供了式(I)化合物：

其中R₁选自

未取代或者被一个或多个取代基取代的直链或支链C₁-C₆烷基，未取代或者被一个或多个取代基取代的单环-或二环-或多环-的C₃-C₁₈环烷基，

未取代或者被一个或多个取代基取代的多酚类化合物基团；

并且，所述取代基各自独立地选自羟基、卤素、硝基、氰基、氨基、C₁-C₆烷基；

或其药学可接受的盐、异构体或水合物。

在本发明式I化合物的一个实施方案中，其中R₁选自未取代或者被一个或多个取代基取代的直链或支链C₁-C₄烷基，未取代或者被一个或多个取代基取代的单环-或二环-或多环-的C₃-C₁₂环烷基，未取代或者被一个或多个取代基取代的多酚类化合物基团；并且，所述取代基各自独立地选自羟基、卤素、硝基、氰基、氨基、C₁-C₄烷基。

在本发明式I化合物的一个实施方案中，其中R₁选自正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基、冰片基、多酚类化合物基团，其任选被选自以下的取代基取代：氢、羟基、卤素、硝基、氰基、氨基、直链或支链的C₁-C₄烷基。

在本发明式I化合物的一个实施方案中，其中R₁选自正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基、冰片基、儿茶素基团(例如儿茶素的吡喃环上的羟基与β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸分子中的羧基形成酯结构)。

在本发明式I化合物的一个实施方案中，该式I化合物选自：

化合物1：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯(简称为SBE)，其结构式为：

化合物2：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯，其结构式为：

化合物3：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸儿茶素酯，其结构式为：

本发明第二方面提供了本发明式(I)化合物的制备方法。

本发明第三方面提供了本发明式(I)化合物在制备用于防止Aβ聚集和/或促进已聚集的Aβ降解的药物中的用途。

本发明第四方面提供了本发明式(I)化合物在制备用于促进神经干细胞增殖的药物中的用途。

本发明第五方面提供了本发明式(I)化合物在制备用于治疗、预防和/或延缓神经退行性疾病的药物中的用途。

在本发明第五方面的一个实施方案中，所述的神经退行性疾病选自阿尔兹海默氏症(AD)、帕金森氏疾病(PD)、亨廷顿疾病(HD)、多发性硬化症(MS)。

本发明第六方面提供了一种药物组合物，其包含治疗有效量的本发明式(I)化合物和任选的药学可接受的载体。本发明的药物组合物可用作防止Aβ聚集和/或促进已聚集的Aβ降解，促进神经干细胞增殖，治疗、预防和/或延缓神经退行性疾病等方面的药物。

发明详述；

下面对本发明的各个方面、实施方案、优点等作进一步的描述。本文所用的各种术语具有本领域技术人员理解的一般含义，特别是本文所描述的定义，除非另有特别说明。

本文所用的术语“烷基”包括含指定数目碳原子的直链和支链烷烃基，例如甲基、乙基以及直链和支链的丙基和丁基。

本文所用的术语“环烷基”包括含指定数目碳原子的环状脂肪族烃基，例如单环环烷基如环丙基、环丁基、环戊基和环己基，螺环烃基，桥环烃基如冰片基。本文使用的术语“冰片基”是指所述的冰片分子中的羟基与β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸分子中的羧基形成酯结构基团部分，该酯的冰片部分即为本发明所述的“冰片基”。

术语“卤素＂或“卤代”在本文中定义为包括氟、氯、溴或碘。

术语“氨基”单独或在组合中包括-NH₂或-NR_aR_b基团，其中R_a和R_b独立地是氢、烷基等。

术语“多酚类化合物(polyphenolic compounds)”是指被多个羟基取代的酚类化合物，即指其分子结构中有若干个酚性羟基的化合物，优选的多酚类化合物可以是源于天然产物的多酚类化合物，例如儿茶素。本文使用的术语“多酚类化合物基团”是指所述的多酚类化合物中的醇羟基与β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸分子中的羧基形成酯结构基团部分。例如儿茶素分子中吡喃环上的羟基可以与β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸分子中的羧基形成酯结构，该酯的儿茶素部分即为本发明所述的“多酚类化合物基团”，具体可以称为儿茶素基团。

术语“多酚类化合物的醇羟基”在本文中单独或在组合中定义为单环或多环多酚类化合物的羟基(例如儿茶素醇羟基、表儿茶素醇羟基)，其可未被取代，或者被例如一个或多个、特别是一至三个例如但不限于以下的取代基取代：H、OH、卤素、CN、NO₂、CF₃、C_1-6烷基等。

在本发明中，β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸(即丹参酸)的式中，α和β分别为丹参酸的丙酸中的α和β位碳，即如下式中所示：

本发明的某些化合物可以以不同的异构体(例如对映异构体和非对映异构体)形式存在。本发明考虑了所有这种异构体的纯化形式和混合形式，包括外消旋混合物。烯醇形式也包括在内。

本发明的化合物可以以非溶剂合物和溶剂合物的形式存在，包括水合形式，例如半水合物、一水合物。一般来说，对于本发明的目的，与药学可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂合物形式与非溶剂合物形式相当。

本发明的某些化合物还可形成药学可接受的盐，例如酸加成盐。例如，氮原子可与酸成盐。用于成盐的合适酸的实例是盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、草酸、丙二酸、水杨酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸、抗坏血酸、马来酸、甲磺酸和本领域技术人员公知的其他矿物酸和羧酸。这些盐是通过以常规方式使游离碱形式与足量的所需酸相接触而产生盐来制备的。用合适的稀碱水溶液如氢氧化钾、碳酸钾、氨水和碳酸氢钠的稀水溶液处理所得的盐，可使游离碱形式再生。各游离碱形式与它们各自的盐形式在某些物理性质(如在极性溶剂中的溶解度)上稍有不同，但对于本发明目的，各酸式盐与它们各自的游离碱形式相当。(参见例如S.M.Berge，et al.，“Pharmaceutical Salts，”J.Pharm.Sci.，66：1-19(1977)，其通过引用并入本文。

本发明式(I)化合物还可以以“药学可接受的前药”的形式使用。本文所用的术语“药学可接受的前药”代表本发明化合物的前药，其在可靠的医学判断范围内适合用于与人类和低等动物的组织接触而不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，与合理的效果/风险比相称且对其预定用途有效，在可能的情况下还代表本发明化合物的两性离子形式。本发明的前药可例如通过在血液中水解而在体内快速转化成上式的母体化合物。充分讨论提供于T.Higuchi and V.Stella，Pro-drugsas Novel Delivery Systems，V.14 of the A.C.S.Symposium Series，以及Edward B.Roche，ed.，Bioreversible Carriers in Drug Design，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press(1987)，其通过引用并入本文。

本发明的式(I)化合物易于通过血脑屏障而到达脑细胞，并且具有防止Aβ聚集、促进已经聚集的Aβ降解和促进神经干细胞增殖的作用，因此本类化合物可进一步通过已知的技术开发成为药用化合物，具有广泛的医药应用前景。基于上述作用，本发明的式(I)化合物可以用于治疗、预防和/或延缓神经退行性疾病。本发明所述的神经退行性疾病包括但不限于阿尔兹海默氏症(AD)、帕金森氏疾病(PD)、亨廷顿疾病(HD)、多发性硬化症(MS)等。

本发明提供了本发明式(I)化合物的制备方法。作为一种示例性的制备方法可以是：在有机溶剂例如但不限于四氢呋喃中，使用或不使用催化剂例如但不限于对甲基苯磺酸，使β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸与包含R₁基团的羟基化合物反应，得到式(I)化合物。在本发明上述制备方法中，可以在高温条件下例如在室温至反应溶剂的沸点温度下进行反应，特别是例如40℃至反应溶剂的沸点温度下进行反应，更特别地是例如在50至70℃条件下进行反应。

本文所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。在本发明的一个实施方案中，本发明所述的组合物是指药物组合物。

本发明提供的药物组合物可以只含有治疗有效量的β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯或其药学可接受的盐、异构体或水合物。或者，本发明提供的药物组合物也可以含有治疗有效量的β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯或其药学可接受的盐、异构体或水合物及药学上可以接受的载体或赋形剂。或者本发明提供的药物组合物可以含有治疗有效量的β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸酯或其药学可接受的盐、异构体或水合物，用于治疗的具有与本发明式(I)化合物相同或不同的其他有效成分，以及药学上可以接受的载体或赋形剂。

本发明提供的药物组合物制剂剂型包括药学上可以接受的任何剂型。可以通过将活性成分与可药用的一种或更多的载体一起混合，按照制剂学技术领域公知的任意方法来制备，还可以通过已知的缓释技术制成含该类药物组合物的缓释剂型。

作为给药途径，希望使用在治疗时最有效的途径，例如可列举出口服或静脉内给药等非口服途径。

作为给药剂型的例子，可列举出片剂、散剂、颗粒剂、糖浆剂、注射剂、硬胶囊剂、软胶囊剂等。

作为适合于口服给药的例如糖浆剂之类的液体制剂，可以通过使用下述物质来制备，所说物质包括：水、蔗糖、山梨糖醇、果糖等的糖类；聚乙二醇、丙二醇等醇类；芝麻油、橄榄油、大豆油等的油类；对羟基苯甲酸酯类等防腐剂；草莓香精、薄荷等香料类等。另外，片剂、散剂和颗粒剂等可以通过使用下述物质来制备，所说物质包括：乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇等赋形剂；淀粉、海藻酸钠等崩解剂；硬脂酸镁、滑石等润滑剂；聚乙烯醇、羟丙基纤维素、明胶等粘合剂；脂肪酸酯等表面活性剂；甘油等增塑剂等。

适合于非口服给药的制剂优选使用含有与接受者的血液等渗的活性化合物的灭菌水性剂来制备。例如，在注射剂的场合，可以使用由盐溶液、葡萄糖溶液或者盐水与葡萄糖溶液的混合物组成的载体等来配制注射用的溶液。

另外，即使在非口服剂的场合，也可以添加选自在描述口服剂时例示的稀释剂、防腐剂、香料剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、表面活性剂、增塑剂等之中的一种或多种辅助成分。

在本发明的一个实施方案中，所述的药物组合物是呈软胶囊剂的形式。所述的软胶囊剂可以是用水相容介质例如聚乙二醇类如PEG200、PEG300、PEG600等制备的，或者是用水不相容介质例如油类例如大豆油、棉籽油、花生油等制备的。作为本发明的一个优选实施方案，所述的软胶囊剂是用水不相容介质例如油类例如大豆油、棉籽油、花生油等制备的。

当用于上述治疗或其他治疗时，治疗有效量的一种本发明化合物可以以纯净的形式应用，或者以药学可接受的盐、酯或前药形式(在存在这些形式的情况下)应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药学可接受赋形剂的药物组合物给药。词语“治疗有效量”的本发明化合物指以适用于任何医学治疗的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物例如剂型；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

给予人或哺乳动物的本发明式(I)化合物总日剂量可在约0.01至约500mg/kg/天的范围内。如果需要，有效的日剂量可出于给药目的分成多剂量，即在一天之内给药多次；因此，单剂量组合物可含有这种数量或其分剂量，以构成总的日剂量。在一个实施方案中，本发明式(I)化合物给予人类患者。在通常口服的场合，按照成人每人每次0.1mg～50mg，优选0.5mg～20mg的给药量，每天一次至三次给药。在静脉内给药等的非口服给药的场合，按照成人每人0.1～50mg，优选0.5～20mg的给药量，每天一次至三次给药。

本发明式(I)化合物可以有效地改善AD症状、降解体内的Aβ、和促进神经干细胞增殖。

附图说明

图1：化合物1(1)、化合物2(2)、和化合物3(3)的¹H-NMR谱图。

图2：荧光分析化合物1、2、3降解聚集的Aβ的作用。

图3：电镜分析化合物1剂量依赖地促进Aβ降解的方式。

图4：化合物1、化合物2、和化合物3对大鼠神经干细胞的增殖试验研究。

具体实施方式

下面通过具体实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

化合物制备例1：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯的制备(化合物1)

将0.12mol的β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸(本实验室提取，纯度96％)和0.18mol冰片中加入500ml四氢呋喃，加入催化剂对甲基苯磺酸0.86g，65℃反应8h。反应结束后除去催化剂、溶剂和未反应的冰片，得棕色粘稠物，柱色谱分离得淡黄色油状物(化合物1)。

IR v(液体石蜡)cm^-1：3320，2955，2915，1810，1596，1519，1450，1280，1113，885，801。

ESI+：335

¹H NMR见图1(1)。

化合物制备例2：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯的制备(化合物2)

化合物2

照以上反应流程，将0.1mol化合物a与0.1mol化合物b溶于水中，室温反应4h，分离出c。c与乙酸钠和3，4-二羟基苯甲醛按照1:1.2:1.5在100℃反应30min，分离出d。d先与锌-汞齐浓盐酸回流反应7h反应，后加入碳酸氢钠调节pH值为5左右，析出e。e与异丙醇按照1:1.2室温反应即生成目的产物化合物2。

ESI+：241

¹H NMR见图1(2)。

化合物制备例3：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸儿茶素酯的制 备(化合物3)

按照常规成酯方法，选择比较温和的条件，将0.1mol丹参酸(本实验室提取，纯度96.8％)和0.18mol儿茶素溶于200ml苯中，加入催化剂对甲基苯磺酸0.86g，室温反应12h。反应结束后除去催化剂、溶剂和未反应的儿茶素，得化合物3。

ESI+：471

¹H NMR见图1(3)。

制剂制备例1：B-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯注射用乳 剂

β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯按照常规方法制备注射用乳剂：将β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯、注射用油、乳化剂、稳定剂、注射用水和等渗调节剂分别搅拌，制得油水两相，将油相和水相混合进行乳化得初乳，再进一步乳化，通过搅拌、高压均化等工艺制备出符合静脉注射要求的β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯乳剂。灭菌，分装，检漏，包装，质检，即得5mg/5ml/支安瓿，一次可分装100支。

制剂制备例2：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯软胶囊

按照常规方法制备SBE的软胶囊：以10％～30％油蜡/植物油的混合油作为药物赋形剂，以β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯:混合油＝10:200(w/w)的比例配制软胶囊内容物。将明胶为主的软质囊材制成厚薄均匀的胶片，将药液置于两胶片间，用钢板模或旋转模压制成为椭圆形、球形或其他形状。

制剂制备例3：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯片剂

将以下组分按下述重量配比来制备β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯片剂：

SBE         50

乳糖        620

马铃薯淀粉  300

聚乙烯醇    20

硬脂酸镁    10

将β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯细粉、乳糖、马铃薯淀粉混合均匀，另取聚乙烯醇配成50％水溶液，按上述质量配比加入混合粉末中，混合均匀，通过20目筛制成湿粒，60℃沸腾干燥。用整粒机对经以上工序获得的β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯颗粒进行整粒，以得到80-12目的β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯颗粒。按重量配比称取过60目以上筛的硬脂酸镁，与以上工序获得的β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯颗粒混合5分钟，以保证其均匀性。在压片机上用β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯总混粉进行压片，控制片重差异，制成10mg/片的片剂；分装。

实验例1：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯、B-(3，4-二羟基 苯基)-α-羟基丙酸异丙酯和B-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸儿茶素酯 在体外对AB聚集的降解作用及效果

(1)荧光筛选的方法

向1mg的Aβ(Sigma)中加入含EDTA的PBS溶液(使终浓度为100uM)溶液，在37℃、300rpm下孵育72h后，稀释5倍。向1.5ml离心管中加入需要测量的药物溶液2ul及Aβ溶液20ul。在37℃、300rpm的摇床上，孵育30分钟。以2ul的DMSO和20ul的Aβ溶液的混合物作为参比溶液。向15ul的、以上孵育好的、由2ul的药物溶液和20ul的Aβ溶液组成的混合物中，分别加入1500ul的3uM的硫磺素T(简写为Tht)，充分混匀。将上述混合液室温下孵育30分钟，取325ul样品置于比色皿中，用荧光分光光度计(RF-5301PC型，日本岛津公司生产)测量，激发波长442.0nm，发射波长450.0nm，测量范围是起始460.000nm，终止700.000nm，峰低0.000，峰高20.000，激发波长5nm，发射波长10nm。

β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯(化合物1)、β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯(化合物2)及β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸儿茶素酯(化合物3)的实验方法如上，实验结果参见图2。

图中横坐标表示所测化合物，纵坐标表示Aβ降解百分比。Aβ+Tht表示100％聚集的Aβ，Tht表示无聚集Aβ。结果显示：化合物(1)、(2)、(3)均能在体外具有促进聚集的Aβ降解的显著作用。

(2)透射电镜方法

取上述实验例1(1)中溶液5ul，滴加到特制的透射电镜专用铜网上，放置十分钟左右，多余的液体用干净的滤纸吸去，将磷钨酸负染液5ul滴加到铜网上，放置30秒左右，将铜网上过剩磷钨酸液体用滤纸吸去。放置，直到铜网上的液体干燥，待用。按常规方法进行透射电镜检测。

用透射电镜方法对荧光方法获得的实验结果进行确证，以化合物(1)为例。实验结果如图3所示。从肉眼可见，β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯在体外具有促进聚集的Aβ降解作用，且浓度越大，降解作用越明显。

实验例2：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯、β-(3，4-二羟基 苯基)-α-羟基丙酸异丙酯和β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸儿茶素酯 促进大鼠神经干细胞增殖体外研究

将大鼠神经干细胞培养于无血清培养基中，实验分为实验对照组、β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯组、β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯组，β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸儿茶素酯用ATP化学发光法进行检测。

图中横坐标表示所测化合物，纵坐标表示ATP化学发光强度，发光强度越大表示细胞数量越多。实验结果如图4所示，发现化合物(1)、(2)、(3)均对大鼠神经干细胞具有促进增殖的作用。

实验例3：β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯、β-(3，4-二羟基 苯基)-α-羟基丙酸异丙酯和β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸儿茶素酯 的药效学评价

本实验利用脑立体定位仪和微量注射泵向大鼠海马齿状回背侧细胞带(前囟后3.0mm，右侧旁开2.0mm，硬脑膜下3.2mm，门齿钩平面低于耳间线平面2.4mm)定位注射聚合态的5ug/ul Aβ1-402ul(0.4ul/min，5min)，2周后建模完成。

实验分组：生理盐水组(脑内注射生理盐水，尾静脉注射DMSO生理盐水，10只)；模型组(脑内注射Aβ1-40，尾静脉注射DMSO生理盐水，10只)；化合物(1)给药组(脑内注射Aβ1-40，尾静脉注射β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯的高、中、低剂量DMSO生理盐水溶液，30只)；化合物(2)给药组(高、中、低剂量各10只)；化合物(3)给药组(高、中、低剂量各10只)。连续给药30天。

行为学实验：按照常规Morris水迷宫评价方法进行。记录实验动物的逃避潜伏期、垮台次数及在象限偏好性等，进行比较。

发现化合物(1)、(2)、(3)给药组大鼠学习效果均好于模型对照组。证明它们均对AD的症状有所改善。

Claims (10)

1、式(I)化合物：

其中R₁选自

未取代或者被一个或多个取代基取代的直链或支链C₁-C₆烷基，

未取代或者被一个或多个取代基取代的单环-或二环-或多环-的C₃-C₁₈环烷基，

未取代或者被一个或多个取代基取代的多酚类化合物基团；

并且，所述取代基各自独立地选自羟基、卤素、硝基、氰基、氨基、C₁-C₆烷基；

或其药学可接受的盐、异构体或水合物。

2、权利要求1所述的化合物，其中

R₁选自未取代或者被一个或多个取代基取代的直链或支链C₁-C₄烷基，未取代或者被一个或多个取代基取代的单环-或二环-或多环-的C₃-C₁₂环烷基，未取代或者被一个或多个取代基取代的多酚类化合物基团；并且，所述取代基各自独立地选自羟基、卤素、硝基、氰基、氨基、C₁-C₄烷基。

3、权利要求1所述的化合物，其中R₁选自正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基、冰片基、多酚类化合物基团，其任选被选自以下的取代基取代：氢、羟基、卤素、硝基、氰基、氨基、直链或支链的C₁-C₄烷基。

4、权利要求1所述的化合物，其中

R₁选自正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基、冰片基、儿茶素基团。

5、权利要求1所述的化合物，其选自：

β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯，

β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯，和

β-(3，4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸儿茶素酯。

6、权利要求1至5任一项的化合物在制备用于防止Aβ聚集和/或促进已聚集的Aβ降解的药物中的用途。

7、权利要求1至5任一项的化合物在制备用于促进神经干细胞增殖的药物中的用途。

8、权利要求1至5任一项的化合物在制备用于治疗、预防和/或延缓神经退行性疾病的药物中的用途。

9、权利要求8所述的用途，其中所述的神经退行性疾病选自阿尔兹海默氏症、帕金森氏疾病、亨廷顿疾病、多发性硬化症。

10、一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1至5任一项的化合物和任选的药学可接受的载体。

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