CN101472470A - miR155转基因小鼠中前B细胞增殖和淋巴母细胞性白血病/高度淋巴瘤 - Google Patents
miR155转基因小鼠中前B细胞增殖和淋巴母细胞性白血病/高度淋巴瘤 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101472470A CN101472470A CNA2007800230938A CN200780023093A CN101472470A CN 101472470 A CN101472470 A CN 101472470A CN A2007800230938 A CNA2007800230938 A CN A2007800230938A CN 200780023093 A CN200780023093 A CN 200780023093A CN 101472470 A CN101472470 A CN 101472470A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- animal
- cell
- transgenic
- lymphadenia
- disease
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108091033773 MiR-155 Proteins 0.000 title claims abstract description 71
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 title claims description 21
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 title description 68
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 title description 67
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 title description 4
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 title description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 title 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 156
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 97
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims abstract description 78
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 63
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 46
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 claims abstract description 45
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 39
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 39
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 68
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 67
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 51
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 claims description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 39
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 35
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 35
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 35
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 33
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 claims description 25
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 claims description 25
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 claims description 20
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 claims description 19
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 19
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 18
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 16
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 10
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 claims description 9
- 208000007541 Preleukemia Diseases 0.000 claims description 9
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 9
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 claims description 8
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 7
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 claims description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 7
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 claims description 4
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 claims description 4
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 claims 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 46
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 230000001589 lymphoproliferative effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 abstract 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 76
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 52
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 45
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 31
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 27
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 19
- 102000003729 Neprilysin Human genes 0.000 description 18
- 108090000028 Neprilysin Proteins 0.000 description 18
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 17
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 16
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 16
- 101000608935 Homo sapiens Leukosialin Proteins 0.000 description 16
- 102100039564 Leukosialin Human genes 0.000 description 16
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 16
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 14
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 14
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 14
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 14
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 13
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 13
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 12
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 12
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 11
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 11
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 10
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 9
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 9
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 9
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 8
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 8
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 8
- 101710133359 Agglutinin receptor Proteins 0.000 description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 7
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 7
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 7
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 6
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 6
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 6
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 6
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 6
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 6
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 6
- 238000011277 treatment modality Methods 0.000 description 6
- 108010087504 Beta-Globulins Proteins 0.000 description 5
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 5
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 5
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 5
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 5
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 5
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 5
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 5
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 5
- 108091068661 Mus musculus miR-155 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 4
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 4
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 4
- 108091006207 SLC-Transporter Proteins 0.000 description 4
- 102000037054 SLC-Transporter Human genes 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 4
- 230000002559 cytogenic effect Effects 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 4
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 4
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 208000004736 B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 3
- 102100024348 Beta-adducin Human genes 0.000 description 3
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 3
- 108010009575 CD55 Antigens Proteins 0.000 description 3
- 108091022894 CDPdiacylglycerol-Serine O-Phosphatidyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 102000009331 Homeodomain Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010048671 Homeodomain Proteins Proteins 0.000 description 3
- 101000689619 Homo sapiens Beta-adducin Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 3
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 3
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 3
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 3
- 241000269368 Xenopus laevis Species 0.000 description 3
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 244000144987 brood Species 0.000 description 3
- HNNSUZPWERIYIL-UHFFFAOYSA-N chembl1730100 Chemical compound O1CC2(O)CC3=CC(O)=C(O)C=C3C2=C2C1=C(O)C(=O)C=C2 HNNSUZPWERIYIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 3
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 3
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 3
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 3
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 208000009575 Angelman syndrome Diseases 0.000 description 2
- 102100031366 Ankyrin-1 Human genes 0.000 description 2
- 101710191059 Ankyrin-1 Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 2
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 2
- -1 Deng Proteins 0.000 description 2
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 2
- 101150066968 GPR183 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 2
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 2
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 2
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical group C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 102000004447 HSP40 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010042283 HSP40 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 101000966257 Homo sapiens Limb region 1 protein homolog Proteins 0.000 description 2
- 101000844029 Homo sapiens Probable non-functional T cell receptor beta variable 7-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000848721 Homo sapiens Rap guanine nucleotide exchange factor 4 Proteins 0.000 description 2
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 2
- 101000830894 Homo sapiens Targeting protein for Xklp2 Proteins 0.000 description 2
- 101000904868 Homo sapiens Transcriptional regulator ATRX Proteins 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 102000000704 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 2
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 2
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 2
- 102100034866 Kallikrein-6 Human genes 0.000 description 2
- 101710176224 Kallikrein-6 Proteins 0.000 description 2
- 102100040547 Limb region 1 protein homolog Human genes 0.000 description 2
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 102100037611 Lysophospholipase Human genes 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 108030002254 Phosphate acyltransferases Proteins 0.000 description 2
- 108010058864 Phospholipases A2 Proteins 0.000 description 2
- 102100038121 Phospholipid phosphatase 1 Human genes 0.000 description 2
- 101710117878 Phospholipid phosphatase 1 Proteins 0.000 description 2
- 208000007452 Plasmacytoma Diseases 0.000 description 2
- 201000010769 Prader-Willi syndrome Diseases 0.000 description 2
- 102100032175 Probable non-functional T cell receptor beta variable 7-1 Human genes 0.000 description 2
- 101710098761 Protein alpha-1 Proteins 0.000 description 2
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 2
- 102100034591 Rap guanine nucleotide exchange factor 4 Human genes 0.000 description 2
- 108010034782 Ribosomal Protein S6 Kinases Proteins 0.000 description 2
- 102000009738 Ribosomal Protein S6 Kinases Human genes 0.000 description 2
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 2
- 102000008963 Shugoshin Human genes 0.000 description 2
- 108050000907 Shugoshin Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 2
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 102100024813 Targeting protein for Xklp2 Human genes 0.000 description 2
- 102100023931 Transcriptional regulator ATRX Human genes 0.000 description 2
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 2
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 2
- 210000001109 blastomere Anatomy 0.000 description 2
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N cytidine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 210000003981 ectoderm Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 2
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 229940100994 interleukin-7 Drugs 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 2
- 208000019420 lymphoid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 210000003887 myelocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 210000002353 nuclear lamina Anatomy 0.000 description 2
- 230000005937 nuclear translocation Effects 0.000 description 2
- 102000039479 opioid growth factor receptor family Human genes 0.000 description 2
- 108091056482 opioid growth factor receptor family Proteins 0.000 description 2
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 210000001948 pro-b lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 201000006845 reticulosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 2
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000017105 transposition Effects 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150052384 50 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N Adamantane Natural products C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100039736 Adhesion G protein-coupled receptor L1 Human genes 0.000 description 1
- 101710186708 Agglutinin Proteins 0.000 description 1
- 108010058060 Alanine-tRNA ligase Proteins 0.000 description 1
- 102100037399 Alanine-tRNA ligase, cytoplasmic Human genes 0.000 description 1
- 102000005369 Aldehyde Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108020002663 Aldehyde Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102100034452 Alternative prion protein Human genes 0.000 description 1
- 108010049777 Ankyrins Proteins 0.000 description 1
- 102000008102 Ankyrins Human genes 0.000 description 1
- 108010024284 Apolipoprotein C-II Proteins 0.000 description 1
- 102100039998 Apolipoprotein C-II Human genes 0.000 description 1
- 102000018757 Apolipoprotein L1 Human genes 0.000 description 1
- 108010052469 Apolipoprotein L1 Proteins 0.000 description 1
- 101100064323 Arabidopsis thaliana DTX47 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100022143 Arsenite methyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 102100022717 Atypical chemokine receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101710149863 C-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 102100032976 CCR4-NOT transcription complex subunit 6 Human genes 0.000 description 1
- PCDQPRRSZKQHHS-XVFCMESISA-N CTP Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 PCDQPRRSZKQHHS-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 241000244203 Caenorhabditis elegans Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100022789 Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type IV Human genes 0.000 description 1
- 102100024436 Caldesmon Human genes 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102100032145 Carbohydrate sulfotransferase 10 Human genes 0.000 description 1
- 101710096630 Carbohydrate sulfotransferase 10 Proteins 0.000 description 1
- 108090000018 Carboxypeptidase D Proteins 0.000 description 1
- 102100032407 Carboxypeptidase D Human genes 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100025053 Cell division control protein 45 homolog Human genes 0.000 description 1
- 102100039118 Centromere/kinetochore protein zw10 homolog Human genes 0.000 description 1
- 102100029173 Choline-phosphate cytidylyltransferase B Human genes 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 102100028796 Chromosome transmission fidelity protein 18 homolog Human genes 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 101710099671 Component of Sp100-rs Proteins 0.000 description 1
- 206010053138 Congenital aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 102100032649 Copine-4 Human genes 0.000 description 1
- 101710125085 Copine-4 Proteins 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- 102000001493 Cyclophilins Human genes 0.000 description 1
- 108010068682 Cyclophilins Proteins 0.000 description 1
- 102100023419 Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator Human genes 0.000 description 1
- 206010067477 Cytogenetic abnormality Diseases 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011087 DEP domains Human genes 0.000 description 1
- 108050001299 DEP domains Proteins 0.000 description 1
- 241000252212 Danio rerio Species 0.000 description 1
- 101100412663 Danio rerio rasgef1bb gene Proteins 0.000 description 1
- 102100030220 Diacylglycerol kinase zeta Human genes 0.000 description 1
- 101710192015 Diacylglycerol kinase zeta Proteins 0.000 description 1
- 101100011517 Drosophila melanogaster ELOVL gene Proteins 0.000 description 1
- 102000002266 Dual-Specificity Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108010000518 Dual-Specificity Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- 102000015699 E2F1 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010063774 E2F1 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000005628 E2F7 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010059718 E2F7 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039639 E3 ubiquitin-protein ligase pellino homolog 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710150169 E3 ubiquitin-protein ligase pellino homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 1
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 1
- 241001226424 Erato <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108010007005 Estrogen Receptor alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100038595 Estrogen receptor Human genes 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical class CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108010007577 Exodeoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- 102100029075 Exonuclease 1 Human genes 0.000 description 1
- 201000004939 Fanconi anemia Diseases 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008959 G-Protein-Coupled Receptor Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000006575 G-Protein-Coupled Receptor Kinases Human genes 0.000 description 1
- 102100034004 Gamma-adducin Human genes 0.000 description 1
- 102100021023 Gamma-glutamyl hydrolase Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000028180 Glycophorins Human genes 0.000 description 1
- 108091005250 Glycophorins Proteins 0.000 description 1
- 102100033067 Growth factor receptor-bound protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 102100029360 Hematopoietic cell signal transducer Human genes 0.000 description 1
- 101710157460 Hematopoietic cell signal transducer Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004989 Hepsin Human genes 0.000 description 1
- 108090001101 Hepsin Proteins 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100025110 Homeobox protein Hox-A5 Human genes 0.000 description 1
- 101000901111 Homo sapiens Arsenite methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101000678879 Homo sapiens Atypical chemokine receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000974816 Homo sapiens Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type IV Proteins 0.000 description 1
- 101000910297 Homo sapiens Caldesmon Proteins 0.000 description 1
- 101000934421 Homo sapiens Cell division control protein 45 homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000743902 Homo sapiens Centromere/kinetochore protein zw10 homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000988443 Homo sapiens Choline-phosphate cytidylyltransferase B Proteins 0.000 description 1
- 101000916387 Homo sapiens Chromosome transmission fidelity protein 18 homolog Proteins 0.000 description 1
- 101000907783 Homo sapiens Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator Proteins 0.000 description 1
- 101000799011 Homo sapiens Gamma-adducin Proteins 0.000 description 1
- 101000871017 Homo sapiens Growth factor receptor-bound protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001077568 Homo sapiens Homeobox protein Hox-A5 Proteins 0.000 description 1
- 101000599868 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001091266 Homo sapiens Kinesin-like protein KIF13A Proteins 0.000 description 1
- 101001050567 Homo sapiens Kinesin-like protein KIF2C Proteins 0.000 description 1
- 101000780202 Homo sapiens Long-chain-fatty-acid-CoA ligase 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000978570 Homo sapiens Noelin Proteins 0.000 description 1
- 101000904196 Homo sapiens Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2 Proteins 0.000 description 1
- 101000911588 Homo sapiens Protein FAM169B Proteins 0.000 description 1
- 101001041365 Homo sapiens Serine protease HTRA2, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101000759984 Homo sapiens Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 46 Proteins 0.000 description 1
- 101000772904 Homo sapiens Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D1 Proteins 0.000 description 1
- 101710146024 Horcolin Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 206010053574 Immunoblastic lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100037874 Intercellular adhesion molecule 4 Human genes 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 102100030703 Interleukin-22 Human genes 0.000 description 1
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 description 1
- 102100034870 Kallikrein-8 Human genes 0.000 description 1
- 101710176225 Kallikrein-8 Proteins 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 102100034865 Kinesin-like protein KIF13A Human genes 0.000 description 1
- 102100023424 Kinesin-like protein KIF2C Human genes 0.000 description 1
- 102100037652 Kynurenine 3-monooxygenase Human genes 0.000 description 1
- 108010033242 Kynurenine 3-monooxygenase Proteins 0.000 description 1
- YGPSJZOEDVAXAB-QMMMGPOBSA-N L-kynurenine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(=O)C1=CC=CC=C1N YGPSJZOEDVAXAB-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 108050008782 Latrophilin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101710189395 Lectin Proteins 0.000 description 1
- 206010024305 Leukaemia monocytic Diseases 0.000 description 1
- 102100034337 Long-chain-fatty-acid-CoA ligase 6 Human genes 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 101710179758 Mannose-specific lectin Proteins 0.000 description 1
- 101710150763 Mannose-specific lectin 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710150745 Mannose-specific lectin 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010027336 Menstruation delayed Diseases 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000016397 Methyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108091034054 MiR-138 Proteins 0.000 description 1
- 108091093082 MiR-146 Proteins 0.000 description 1
- 108091028695 MiR-224 Proteins 0.000 description 1
- 102100026930 Mitogen-activated protein kinase 13 Human genes 0.000 description 1
- 108700015928 Mitogen-activated protein kinase 13 Proteins 0.000 description 1
- 102000005398 Monoacylglycerol Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108020002334 Monoacylglycerol lipase Proteins 0.000 description 1
- 206010060880 Monoclonal gammopathy Diseases 0.000 description 1
- 102100030710 NAD-dependent protein deacetylase sirtuin-3, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 1
- 102000005665 Neurotransmitter Transport Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010084810 Neurotransmitter Transport Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100023731 Noelin Human genes 0.000 description 1
- 102000007399 Nuclear hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100021133 Nuclear protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710170054 Nuclear protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 101710131039 Opsin-5 Proteins 0.000 description 1
- 102000016304 Origin Recognition Complex Human genes 0.000 description 1
- 108010067244 Origin Recognition Complex Proteins 0.000 description 1
- 102100025201 Origin recognition complex subunit 6 Human genes 0.000 description 1
- 101710201847 Origin recognition complex subunit 6 Proteins 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 102100037601 P2X purinoceptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000025443 POZ domain binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091014659 POZ domain binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 102100024019 Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2 Human genes 0.000 description 1
- 208000002774 Paraproteinemias Diseases 0.000 description 1
- 102000009658 Peptidylprolyl Isomerase Human genes 0.000 description 1
- 108010020062 Peptidylprolyl Isomerase Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 108010089430 Phosphoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007982 Phosphoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 description 1
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 231100000766 Possible carcinogen Toxicity 0.000 description 1
- 102100023202 Potassium channel subfamily K member 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710185490 Potassium channel subfamily K member 5 Proteins 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- 108010049395 Prokaryotic Initiation Factor-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100035703 Prostatic acid phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 102000006010 Protein Disulfide-Isomerase Human genes 0.000 description 1
- 102100026935 Protein FAM169B Human genes 0.000 description 1
- 108010015499 Protein Kinase C-theta Proteins 0.000 description 1
- 102000001892 Protein Kinase C-theta Human genes 0.000 description 1
- 108010003506 Protein Kinase D2 Proteins 0.000 description 1
- 102000006478 Protein Phosphatase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010058956 Protein Phosphatase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710089165 Protein white Proteins 0.000 description 1
- 108010080192 Purinergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100031535 RAD51-associated protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710182832 RAD51-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101150004497 RBP2 gene Proteins 0.000 description 1
- 108050007282 Rab30 Proteins 0.000 description 1
- 102000028598 Rab30 Human genes 0.000 description 1
- 102100022308 Ras-related protein Rab-3A Human genes 0.000 description 1
- 102000019196 RecQ Helicases Human genes 0.000 description 1
- 108010012737 RecQ Helicases Proteins 0.000 description 1
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 description 1
- 102100035753 Rho GTPase-activating protein 21 Human genes 0.000 description 1
- 101710110421 Rho GTPase-activating protein 21 Proteins 0.000 description 1
- 101150022125 Rimbp2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 102000000395 SH3 domains Human genes 0.000 description 1
- 108050008861 SH3 domains Proteins 0.000 description 1
- 101150026676 SID1 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 102100021117 Serine protease HTRA2, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 102100037312 Serine/threonine-protein kinase D2 Human genes 0.000 description 1
- 102100031206 Serine/threonine-protein kinase N1 Human genes 0.000 description 1
- 108010041218 Sirtuin 3 Proteins 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010019965 Spectrin Proteins 0.000 description 1
- 102000005890 Spectrin Human genes 0.000 description 1
- 102100039024 Sphingosine kinase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100036831 Steroid hormone receptor ERR2 Human genes 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108700025695 Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000011222 THUMP domains Human genes 0.000 description 1
- 108050001457 THUMP domains Proteins 0.000 description 1
- 108090000925 TNF receptor-associated factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100034779 TRAF family member-associated NF-kappa-B activator Human genes 0.000 description 1
- 102000012607 Thrombomodulin Human genes 0.000 description 1
- 108010079274 Thrombomodulin Proteins 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 1
- 102100034686 Tight junction protein ZO-1 Human genes 0.000 description 1
- 108050001370 Tight junction protein ZO-1 Proteins 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 101710154711 Tribbles Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 102100025025 Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 46 Human genes 0.000 description 1
- 102100030433 Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D1 Human genes 0.000 description 1
- 101710123661 Venom allergen 5 Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 208000006254 Wolf-Hirschhorn Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 210000002593 Y chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 102100036562 Zinc finger protein 224 Human genes 0.000 description 1
- 102100028392 Zinc finger protein 26 Human genes 0.000 description 1
- 101710160531 Zinc finger protein 26 Proteins 0.000 description 1
- 101710160530 Zinc finger protein 27 Proteins 0.000 description 1
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003217 anti-cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 101150036080 at gene Proteins 0.000 description 1
- 208000004668 avian leukosis Diseases 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940112869 bone morphogenetic protein Drugs 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J calcium;potassium;sodium;2-hydroxypropanoic acid;sodium;tetrachloride Chemical compound [Na].[Na+].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].CC(O)C(O)=O ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009015 carbon catabolite repression of transcription Effects 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 210000002230 centromere Anatomy 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 210000004081 cilia Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 102000013035 dynein heavy chain Human genes 0.000 description 1
- 108060002430 dynein heavy chain Proteins 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 102000012805 ependymin Human genes 0.000 description 1
- 108060002564 ependymin Proteins 0.000 description 1
- 108091008558 estrogen-related receptor beta Proteins 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- ZXKXJHAOUFHNAS-UHFFFAOYSA-N fenfluramine hydrochloride Chemical compound [Cl-].CC[NH2+]C(C)CC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZXKXJHAOUFHNAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 108010062699 gamma-Glutamyl Hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 238000003500 gene array Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000013427 histology analysis Methods 0.000 description 1
- 208000018875 hypoxemia Diseases 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 108010074109 interleukin-22 Proteins 0.000 description 1
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 1
- 229940118526 interleukin-9 Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 210000000088 lip Anatomy 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 1
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091030496 miR-138 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091072763 miR-151 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091074057 miR-16-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091054642 miR-194 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091035328 miR-217 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091039135 miR-217-1 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 108091029206 miR-217-2 stem-loop Proteins 0.000 description 1
- 238000010208 microarray analysis Methods 0.000 description 1
- 238000000329 molecular dynamics simulation Methods 0.000 description 1
- 201000006894 monocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 1
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 108020004017 nuclear receptors Proteins 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000000505 pernicious effect Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 210000002824 peroxisome Anatomy 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 210000001586 pre-b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- ULWHHBHJGPPBCO-UHFFFAOYSA-N propane-1,1-diol Chemical class CCC(O)O ULWHHBHJGPPBCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 238000003498 protein array Methods 0.000 description 1
- 108020003519 protein disulfide isomerase Proteins 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 108010061151 protein kinase N Proteins 0.000 description 1
- 108010046566 rab3A GTP Binding Protein Proteins 0.000 description 1
- 108700042226 ras Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 210000005132 reproductive cell Anatomy 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000009938 salting Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229940079827 sodium hydrogen sulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 108010035597 sphingosine kinase Proteins 0.000 description 1
- 108010022412 splicing factor 3a Proteins 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 150000003544 thiamines Chemical class 0.000 description 1
- 102000004217 thyroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000721 thyroid hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/0004—Screening or testing of compounds for diagnosis of disorders, assessment of conditions, e.g. renal clearance, gastric emptying, testing for diabetes, allergy, rheuma, pancreas functions
- A61K49/0008—Screening agents using (non-human) animal models or transgenic animal models or chimeric hosts, e.g. Alzheimer disease animal model, transgenic model for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2207/00—Modified animals
- A01K2207/05—Animals modified by non-integrating nucleic acids, e.g. antisense, RNAi, morpholino, episomal vector, for non-therapeutic purpose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
- A01K2217/054—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic) inducing loss of function
- A01K2217/058—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic) inducing loss of function due to expression of inhibitory nucleic acid, e.g. siRNA, antisense
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/105—Murine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/0331—Animal model for proliferative diseases
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pathology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
Abstract
一种转基因非人动物,如小鼠,具有包括一个核酸构建体的基因组,该核酸构建体具有能指导在动物的B细胞中表达的至少一个转录调节序列,其中该转录调节序列与编码miR155基因产物的核酸可操作连接。一种测试试剂在治疗或预防淋巴组织增生疾病中的治疗功效的方法包括评估该试剂对转基因非人动物的影响。
Description
政府支持
本发明完全或者部分得到美国政府财政补贴的支持。政府享有本发明的某些权利。
发明背景
急性白血病是一种骨髓和血液的快速进行性恶性疾病,其导致未成熟的,无功能的细胞,所谓的胚细胞,在髓和血液中的累积。胚细胞在髓中的累积可阻断正常血细胞的发育。结果,没有产生足够数量的红细胞,白细胞和血小板。当疾病是由于髓淋巴细胞祖细胞而引起的时,它导致急性淋巴母细胞性白血病(ALL),而当疾病是由于髓细胞样祖细胞引起的时,它导致急性髓性白血病(AML)。
ALL是一种快速进行性癌症,其开始于髓淋巴细胞的恶变。ALL是最常见的儿童期白血病类型,而且在所有的年龄组中每年有3,000例新病例。转化的,目前恶性的,细胞增殖并在髓中累积为白血病淋巴母细胞。淋巴母细胞阻断髓中正常血细胞的形成,其导致不足的红细胞,白细胞和血小板产生。
高度淋巴瘤,也称为侵袭性淋巴瘤,包括淋巴瘤的几个亚型,其如果不治疗就会相对快速地进展。这些亚型包括,例如,AIDS相关的淋巴瘤,退行性变化的大细胞淋巴瘤,伯基特氏淋巴瘤,弥散性大细胞淋巴瘤,免疫母细胞淋巴瘤,淋巴母细胞性淋巴瘤和小的未裂解细胞淋巴瘤。相较于弥散性大B细胞淋巴瘤,高度淋巴瘤表现更具侵袭性,需要更强烈的化疗,而且更常发生于儿童中。因为快速分裂的细胞对抗癌剂更敏感,而且由于年轻患者通常没有其他的健康问题,所以这些淋巴瘤中的一些显示对治疗的显著应答。急性淋巴母细胞性白血病和高度淋巴瘤是儿童中最常见的白血病和淋巴瘤。这些疾病,绝大部分,是多克隆的,这表明仅仅少数遗传变化就足以诱导恶性肿瘤。
微小RNA(miRNA)表示一类新的丰富的小RNA,其按照与靶的互补程度,通过结合靶向的mRNA,和阻断它们的翻译或者启动它们的降解,在转录后水平上发挥重要的调节作用。自从它们1993年在Caenorhabditis elegans中的发现(Lee,R.等,Cell 75:843-854(1993)),许多报道表明,在大的蛋白阵列的转录后调节中这些微小的分子具有非常不同的作用,从细胞增殖和分化到脂类代谢(Nairz,K.,等,Dev.Biol.291:314-324(2006);Chen,J.F.,等,Nat.Genet.38:228-233(2006);Naguibneva,I.,等,Nat.Cell Biol.8:278-284(2006);Esau,C.,等,Cell Metab.3:87-98(2006);和Gauthier,B.R.,等,Nat.Med.12:36-18(2006))。
人和小鼠中造血系的miRNA分布图显示miRNA在造血发育过程中差异表达,这表明在造血分化中可能的作用(Chen,C.Z.,等,Science 303:83-86(2004);Chen,C.Z.,等,Semin.Immunol.77:155-165(2005);和Ramkissoon,S.H.,等,Leuk.Res.30:643-647(2006))。我们已经证实了miR-15a和miR-16-1在68%的慢性淋巴细胞性白血病(CLL)病例中缺失或下调(Calin,G.A.,等,Proc.Natl Acad Sci.USA 99:15524-15529(2002);和Calin,G.A.,等,Proc.Natl Acad.Sci.USA 101:1155-11760(2004)),而且miRNA基因经常位于与癌症相关的脆性位点和基因组区域(Calin,G.A.,等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101:2999-3004(2004))。miR155和BIC(它的宿主基因)转录物已经显示在人B细胞淋巴瘤,特别是弥散性大B细胞淋巴瘤(Eis,P.S.,等,Proc.Natl Acad.Sci.USA102:3627-3632(2005)),霍奇金淋巴瘤(Kluvier,J.,等,J.Pathol 207:243-249(2006)),和某些类型的伯基特淋巴瘤(潜伏类型III埃-巴二氏病毒阳性伯基特淋巴瘤)(Kluvier,J.,等,Genes Chromosomes Cancer 45:147-153(2006))中累积。
目前,急需产生动物模型,其可用于筛选和鉴定候选试剂,该候选试剂具有治疗淋巴组织增生疾病,如B细胞恶性肿瘤(例如,B细胞白血病,B细胞淋巴瘤)的治疗潜能。
发明概述
本发明是基于携带miR155转基因的转基因小鼠,其表达靶向B细胞(例如,使用Ig重链-Eμ增强子),最初显示白血病前期前B细胞增殖,在脾和骨髓中显著,而且以后逐渐形成B细胞恶性肿瘤的发现。过表达miR155的转基因小鼠逐渐形成与人淋巴组织增生疾病类似的淋巴组织增生疾病,从而这强烈暗示miR155涉及这些疾病的起始和/或进展。Eμ-mmu-miR155转基因小鼠可用于设计新的治疗方法来治疗人中的不同形式的淋巴组织增生疾病,如B细胞恶性肿瘤(例如,急性淋巴母细胞性白血病,高度淋巴瘤)。
因此,在一个方面,这里提供了用于淋巴组织增生疾病的新的动物模型。具体地,根据一个方面,提供了用于B细胞恶性肿瘤(例如,白血病(如,急性淋巴母细胞性白血病),淋巴瘤(例如,高度淋巴瘤),和赘生物的动物模型。
在一个实施方案中,这里提供了一种转基因的非人动物(例如,小鼠),其基因组包括含有至少一个转录调节序列的核酸构建体,该转录调节序列能指导在动物的B细胞中的表达,并与编码miR155基因产物的核酸可操作连接。在一个特定的实施方案中,miR155基因产物包括与SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2具有至少90%序列同一性的核苷酸序列。在另一个实施方案中,miR155基因产物包括SEQ ID NO:1的核苷酸序列。仍然在另一个实施方案中,miR155基因产物包括SEQ IDNO:2的核苷酸序列。
根据一个实施方案,所述的至少一个转录调节序列可以是能指导在动物的B细胞中表达的任何序列。在一个实施方案中,该转录调节序列包括VH启动子(例如,来源于小鼠的VH启动子)。在另一个实施方案中,该转录调节序列包括Ig重链-Eμ增强子(例如,来源于小鼠的Ig重链-Eμ增强子)。在一个相关的实施方案中,该核酸构建体包括β-球蛋白基因(例如,来源于人或其他哺乳动物物种的β-球蛋白基因)的3’UTR和聚腺苷酸序列。
这里还提供了转基因的非人动物,其基因组包括含有VH启动子和Ig重链-Eμ增强子的核酸构建体,该VH启动子和Ig重链-Eμ增强子与编码含有SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2的miR155基因产物的核酸可操作连接。在一个特定的实施方案中,转基因非人动物的基因组包括含有VH启动子和Ig重链-Eμ增强子的核酸构建体,该VH启动子和Ig重链-Eμ增强子与编码含有与SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2具有至少90%序列同一性的核苷酸序列的miR155基因产物的核酸可操作连接。
在一个特定的实施方案中,相对于合适对照动物中的该群体,转基因非人动物在脾,骨髓或脾和骨髓二者中具有扩大的B2201ow/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43--淋巴样细胞群体。在一个相关的实施方案中,转基因非人动物显示淋巴组织增生疾病。在某个实施方案中,淋巴组织增生疾病是B细胞恶性肿瘤(例如,B细胞白血病,比如,急性淋巴母细胞性白血病;B细胞淋巴瘤,B细胞赘生物)。在一个另外的实施方案中,B细胞恶性肿瘤显示人急性淋巴母细胞性白血病,人淋巴母细胞性淋巴瘤或其组合的特征。在又一个实施方案中,淋巴组织增生疾病是白血病前期状况(例如,前B细胞增殖)。在另外的实施方案中,转基因非人动物显示增大的腹部,脾肿大,骨髓取代,淋巴细胞减少,或其组合。
这里还提供了测试试剂在治疗或预防受试者中的淋巴组织增生疾病的治疗功效的方法。根据一个实施方案,该方法包括施用试剂给转基因的非人动物(例如,小鼠),其基因组包括含有至少一个转录调节序列(例如,VH启动子,Ig重链-Eμ增强子,其组合)的核酸构建体,该转录调节序列能指导在动物的B细胞中的表达,其中该转录调节序列与编码含有与SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2具有至少90%序列同一性的核苷酸序列的miR155基因产物的核酸可操作连接。在一个特定的实施方案中,miR155基因产物包括SEQ ID NO:1的核苷酸序列。在另一个实施方案中,miR155基因产物包括SEQ ID NO:2的核苷酸序列。
试剂已经施用给转基因动物以后,将转基因动物中淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象与没有施用该试剂的相同基因型的对照动物进行比较。如果相对于对照动物,该试剂抑制,阻止和/或减轻已经施用该试剂的转基因动物中淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象,那么认为该试剂在治疗或预防淋巴组织增生疾病中具有治疗功效。在某个实施方案中,所述的淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象选自:扩大的B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样细胞群体,增大的腹部,脾肿大,骨髓取代,淋巴细胞减少和其组合。
在另一个实施方案中,这里提供了一种确定试剂是否影响受试者中的淋巴组织增生疾病的方法(例如,影响一种或多种症状和/或征象的可检测性和/或出现率的差异)。该方法包括施用试剂给这里描述的转基因非人动物,并将转基因动物中淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象与相同基因型的对照动物的进行比较,其中对照动物没有施用该试剂。相对于对照动物,检测转基因动物中淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象的可检测性和/或出现率的差异是该试剂影响淋巴组织增生疾病的指示。
在一个实施方案中,淋巴组织增生疾病是B细胞恶性肿瘤。在一个特定的实施方案中,B细胞恶性肿瘤选自急性淋巴母细胞性白血病,B细胞淋巴瘤(例如,高度淋巴瘤),B细胞赘生物和其组合。B细胞恶性肿瘤可显示人急性淋巴母细胞性白血病,人淋巴母细胞性淋巴瘤或两者的特性。在另一个实施方案中,淋巴组织增生疾病是白血病前期状况,如特征为前B细胞增殖的状况。
本发明的这些以及其他的重要方面从下列详细说明中将变得更显而易见。
附图简述
本专利或申请文件包含至少一幅以颜色制作的附图。带有颜色附图的本专利或专利申请出版物的拷贝经请求并支付必要的费用由专利局提供。
图1的示意图描述了注射到怀孕的C57/B6和FVB/N雌性小鼠的卵细胞的雄原核中的miR155转基因构建体。通过将mmu-miR155基因插入到VH启动子Eμ增强子下游的EcoRV与SalI位点之间,来制备miR155转基因构建体。
图2A的Southern印迹描述了具有C57BL/6背景的7个miR155转基因(1,3,5,6,7,10与14道)和8个野生型(2,4,8,9,11,12,13与15道)小鼠的基因型。
图2B的Southern印迹描述了具有FVB/N背景的8个miR155转基因(1,3,5,7,9,11,13与15道)和7个野生型(2,4,6,8,10,12与14道)小鼠的基因型。
图3的对总RNA的Northern印迹描述了使用mmu-miR155成熟序列作为探针,胸腺依赖性细胞中成熟miR155的表达,该胸腺依赖性细胞分离自15个转基因系中的6个系的3周龄小鼠的脾。脾细胞中成熟miR155最高表达水平的5个转基因系(1,2,5,8和9),选作进一步培养和分析。一个转基因系不表达转基因(3道)。野生型对照缺乏转基因表达(4,6与7道)。
图4A的图片显示了相对于野生型小鼠,在6月龄时,由于临床上明显的脾肿大,而具有显著增大的腹部的转基因小鼠(左边)。
图4B的图片描述了图4A中所示的小鼠的脾。转基因小鼠的脾(左边),由于白血病/淋巴瘤细胞的膨胀而增大。
图5A的显微照片描述了以200X放大倍数,3周龄转基因小鼠脾的苏木精/曙红(H & E)染色切片(小鼠50;建立者10)。切片显示非典型的淋巴增殖压缩了白髓。
图5B的显微照片描述了以100X放大倍数,来自6月龄的转基因小鼠的脾的H & E-染色切片。脾的总体结构正在被非典型的淋巴样增殖取代。只有少数胚的淋巴滤泡保留,其由于增殖而大小极大地缩小和压缩。
图5C的显微照片描述了以200X放大倍数,来自6月龄的转基因小鼠的脾的H & E-染色切片。由于成淋巴细胞的增殖,脾结构已经几乎被完全磨灭。2个小的压缩淋巴滤泡的残余物是可见的。
图5D的显微照片描述了以400X放大倍数,来自6月龄转基因小鼠(建立者8)的骨髓的H & E-染色切片,其显示了骨髓中成淋巴细胞的增殖,其导致造血中心的取代。
图5E的显微照片描述了以200X放大倍数,正常脾的H & E-染色切片。
图5F的显微照片描述了以200X放大倍数,来自3周龄转基因小鼠(72号小鼠)的脾的切片。切片已经用Ki67染色,并显示脾中增加的淋巴样增殖。
图6的显微照片以400X放大倍数,描述了3周龄转基因小鼠(50号小鼠)的脾切片中非典型的淋巴样增殖,其已经用IgM进行免疫组织化学染色。IgM存在于增殖的胸腺依赖性细胞的细胞质(cIgM)中,作为转基因小鼠中的褐色核周晕,而野生型胸腺依赖性细胞是强褐色,但是由于sIgM与cIgM的存在,没有明显的细胞核。
图7A的流式细胞术分析分布图描述了来自两个不同的建立者系(建立者8与10)的转基因小鼠的脾中,胸腺依赖性细胞的B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-群体的膨胀。显示了3周龄(74号转基因小鼠,建立者8(74TG;左上方)和68号野生型小鼠(68WT;右上方))和7周龄(156号转基因小鼠,建立者10(156TG;左下方)和157号野生型小鼠(157WT;右下方))的两个转基因小鼠与两个野生型小鼠的门控脾细胞。比较左上四分之一的图片,选通B220+IgM群体,显示了相对于野生型,转基因脾中前体B细胞数目的增加。
图7B的流式细胞术分析分布图描述了来自建立者8的转基因小鼠的骨髓中,胸腺依赖性细胞的B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-群体的膨胀。显示了6月龄的一个转基因和一个野生型小鼠(8号转基因小鼠,(8TG;左边)和24号野生型小鼠(24WT;右边)的门控骨髓白细胞。比较两个图的右上四分之一,表明相对于野生型小鼠,转基因小鼠骨髓的B200+IgM+门控成熟B细胞群体的减少。
图8A的图描述了B220-PE表达,如通过流式细胞术分析,对7周龄野生型小鼠no.223(223WT)的B220+-门控脾细胞所评估的。
图8B的图描述了CD10-FITC表达,如通过流式细胞术分析,对7周龄野生型小鼠no.223(223WT)的B220+-门控脾细胞所评估的。
图8C的图描述了B220-PE表达,如通过流式细胞术分析,对7周龄转基因小鼠no.222(222TG)的B220+-门控脾细胞所评估的,其表明相对于野生型小鼠,转基因小鼠中B220low群体的显著增加(介于B220-与B220+的两个峰值之间)。
图8D的图描述了CD10-FITC表达,如通过流式细胞术分析,对7周龄转基因小鼠no.222(222TG)的B220+-门控脾细胞所评估的,表明相对于野生型小鼠,仅仅在转基因小鼠中的B220+-门控群体中CD10+群体的百分比增加,这证明B220low增生,至少部分地,是由于CD10+群体的增加。
图8E的图描述了B220-PE表达,如通过流式细胞术分析,对7周龄转基因小鼠no.221(221TG)的B220+-门控脾细胞所评估的,其表明相对于野生型小鼠,转基因小鼠中B220low群体的显著增加(介于B220-与B220+的两个峰值之间)。
图8F的图描述了CD10-FITC表达,如通过流式细胞术分析,对7周龄转基因小鼠no.221(221TG)的B220+-门控脾细胞所评估的,表明相对于野生型小鼠,仅仅在转基因小鼠中的B220+-门控群体中CD10+群体的百分比增加,这证明B220low增生,至少部分地,是由于CD10+群体的增加。
图9是分离自转基因脾的淋巴样细胞的染色体组型,分析其染色体的缺失,易位和倒位,以及中期的数目。箭头表示9号染色体中的异常,其通过粗的额外条带的存在而鉴定。
图10是对从3到6周龄之间的5只转基因(TG)与4只野生型(WT)小鼠的脾细胞提取的DNA进行的Southern印迹。使用JH4探针和不同的消化酶进行了Southern印迹杂交,如在道顶部所标明的(StuI,BglII,BamHI,与HindIII)。高分子量的粗条带对应于种系。相对于野生型,转基因动物中没有重排的条带。
发明详述
下面是本发明的特定实施方案的描述。
如这里例示和描述的,过表达微小RNA,即miR155的转基因小鼠,逐渐形成淋巴组织增生疾病,其类似于人类中急性淋巴母细胞性白血病和高度淋巴瘤。这里提供的结果强烈地表明miR155和/或其他基因(例如,在癌症中激活的基因(例如,信号转导基因))的致癌表达涉及B细胞恶性肿瘤的起始和/或进展。因此,这里提供了一种动物模型,其可用于研究B细胞恶性肿瘤和其他淋巴组织增生疾病的起始和进展的机制。这种动物模型也可用于鉴定,开发和测试可用于治疗或预防淋巴组织增生疾病的新的治疗剂。
在一个实施方案中,这里提供了一种转基因动物,其基因组包括含有至少一个转录调节序列的核酸构建体或转基因,该转录调节序列能指导在B细胞中的表达,其中该转录调节序列与编码miR155基因产物的核酸序列可操作连接。术语“转基因”指通过人为干预,如通过这里描述的方法,引入到非人动物的一个或多个细胞中的核酸序列。引入的遗传信息可以是受体所属的动物物种外源的,仅仅是特定的单独受体外源的,或者是受体已经具有的遗传信息。在后面的情况中,相较于天然的内源基因,引入的遗传信息可以差异表达。
转基因非人动物具有包括核酸构建体/转基因的基因组,其能表达miR155基因产物。因为miR基因产物,(这里也称为微小RNA,miR和miRNA)没有翻译成蛋白,所以术语“miR基因产物”不包括蛋白。未处理的miR基因转录物也称为“miR前体”,而且一般包括长度大约为70-100个核苷酸的RNA转录物。可通过天然的处理途径(例如,使用完整细胞或细胞裂解物),或通过合成处理途径(例如,使用分离的处理酶,如分离的切酶,Argonaut或RNA酶III(如大肠杆菌RNA酶III)),将miR前体加工成活性的19-25个核苷酸的RNA分子。这种活性的19-25个核苷酸的RNA分子也称为“加工的”miR基因转录物或“成熟”miRNA。当这里通过名称提及微小RNA时,该名称相应于前体和成熟形式,除非另有说明。
如这里使用的,“miR155基因产物”指来自miR155基因的未加工的(例如,前体)或加工的(例如,成熟)RNA转录物,如,但是不局限于,来自小鼠(小家鼠)的miR155基因。来自小鼠的前体miR155基因产物通过下面的核苷酸序列表示:5′-CUGUUAAUGCUAAUUGUGAUAGGGGUUUUGGCCUCUGACUGACUCCUACCUGUUAGCAUUAACAG-3′(SEQ ID NO:1),而加工的,或成熟的,小鼠miR155基因产物通过下面的核苷酸序列表示:5′-UUAAUGCUAAUUGUGAUAGGGG-3′(SEQ ID NO:2;GenBank登录号AJ459767)。
在某些实施方案中,miR155基因产物包括与SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2的核苷酸序列具有至少70%,至少75%,至少80%,至少85%,至少90%,至少95%,至少99%,或100%的序列同一性的核苷酸序列。在一个特定的实施方案中,miR155基因产物包括SEQ ID NO:1的核苷酸序列具有100%同一性的核苷酸序列。在另一个实施方案中,miR155基因产物包括与SEQ ID NO:2的核苷酸序列具有100%同一性的核苷酸序列。
可以通过公知的方法,例如,使用数学算法,来进行两个序列的实际比较。Karlin等中描述了这种数学算法的一个优选的,非限制性的例子(Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90:5873-5877(1993))。这种算法被并入如Schaffer等(Nucleic Acids Res.,29:2994-3005(2001))所述的BLASTN和BLASTX程序(2.2版本)中。当利用BLAST和Gapped BLAST程序时,可以使用各个程序的缺省参数(例如,BLASTN;可获自NCBI的因特网站点)。在一个实施方案中,检索的数据库是非冗余(NR)数据库,并且序列比较的参数可以设置为:无筛选程序;期望值为10;字长为3;矩阵是BLOSUM62;和缺口值具有11的存在(Existence)和1的延伸(Extension)。
用于序列比较的数学算法的另一个非限制性例子是Myers和Miller,CABIOS(1989)的算法。这种算法结合到ALIGN程序(2.0版本)中,其是GCG(Accelrys,San Diego,California)序列比对软件包的部分。当利用ALIGN程序用于比较氨基酸序列时,可以使用PAM120权残基表,缺口长度罚分12,和缺口罚分4。用于序列分析的另外的算法是本领域已知的,而且包括Torellis和Robotti(Comput.Appl.Biosci.,10:3-5,1994)中描述的ADVANCE和ADAM;和Pearson和Lipman中描述的FASTA(Proc.Natl.Acad.Sci.USA,85:2444-2448,1988)。
在另一个实施方案中,可使用GCG软件包中的GAP程序(Accelrys,San Diego,California),使用Blossom 63矩阵或PAM250矩阵,和缺口权12,10,8,6或4,以及长度权2,3,或4,得到两个氨基酸序列之间的同一性百分数。在又一个实施方案中,可使用GCG软件包中的GAP程序(Accelrys,San Diego,California),使用缺口权50和长度权3,得到两个核酸序列之间的同一性百分数。
根据一个方面,转基因非人动物具有包括一种核酸构建体的基因组,该核酸构建体中编码miR155基因产物的核酸序列与能指导在动物的B细胞中表达的至少一个转录调节序列可操作连接。术语“转录调节序列”根据它的本领域公认的含义使用。它意图指任何DNA序列,依靠它的序列,其能导致连接的基因在特定的细胞中被上调或者下调。在启动子的情况中,启动子一般邻近编码区。然而,在增强子的情况中,增强子可以在离编码区一定距离处发挥功能,以便在增强子与编码区之间存在干预DNA序列。为了指导遗传信息的表达,其可包括编码特定蛋白的DNA序列(或“编码区”),目标编码区可以功能性方式与至少一个转录调节序列连接。转录调节序列可用于增强,降低,调节基因表达,或指定基因表达于某些组织或某些发育阶段。该转录调节序列不必是天然存在的序列。
因此,在这里描述的一个实施方案中,编码miR155的序列与指导在B细胞中表达的转录调节序列可操作连接,以产生重组构建体或转基因。该转录调节序列可以是能指导在B细胞中表达的任何序列。适合的转录调节序列的例子包括,但不限于,VH启动子,Ig重链-Eμ增强子及其组合。在一个特定的实施方案中,转录调节序列是小鼠的转录调节序列或来源于小鼠的转录调节序列。
如果核酸分子包括含有转录调节信息的核苷酸序列,而且这样的序列与编码微小RNA的核苷酸序列可操作连接,则该核酸分子被认为是“能表达”微小RNA或“能指导微小RNA的表达”。可操作连接是这样的连接,其中试图表达的调节核酸序列与核酸序列以容许基因表达的方式连接。
一般来说,基因表达所需的调节区包括,但不限于,转录调节序列(例如,启动子区域,增强子区域),以及当转录成RNA时,有助于基因转录物稳定的DNA序列。
术语“启动子”根据它本领域公认的含义使用。它意图指通常基因或操纵子的编码序列上游的DNA区域,其结合RNA聚合酶并指导该酶以正确转录起始位点。如果启动子能影响DNA序列的转录,则该启动子区域与DNA序列可操作连接。
术语“增强子”根据它本领域公认的含义使用。它意图指在真核生物和某些真核病毒中发现的序列,当位于离研究的基因高达几千个碱基处时(以任一方向),其能增强基因的转录。当位于所讨论的基因的5’侧(上游)时,这些序列通常充当增强子。然而,当位于基因的3’侧(下游)时,一些增强子是活性的。有时,没有(已知的)启动子时,增强子元件能激活从基因的转录。
所述的核酸构建体还可包括促进构建体和/或从该构建体表达的基因产物的表达和/或稳定性的序列。在一个特定的实施方案中,该核酸构建体包括β-球蛋白基因(例如,小鼠β-球蛋白基因)的3’UTR和聚腺苷酸序列。促进构建体和/或从该构建体表达的基因产物的表达和/或稳定性的其他序列是本领域已知的,而且包含于这里。
术语“转基因非人动物”这里用于包括所有的脊椎动物,除了人之外。在一个实施方案中,转基因的非人动物是哺乳动物类。这种转基因的非人动物包括,例如,转基因猪,转基因老鼠,转基因兔,转基因牛,转基因山羊,及其他转基因动物种类,特别是哺乳动物。另外,啮齿类动物家族的其他成员,例如,老鼠,和豚鼠,以及非人类的灵长类动物,如黑猩猩,可用于实施这里描述的实施方案。在一个特定的实施方案中,转基因非人动物是小鼠。这里描述的转基因非人动物包括处于所有发育阶段的受试者动物,包括胚胎和胎儿阶段。
“转基因动物”是包含一个或多个带有遗传信息的细胞的动物,该遗传信息直接或间接地通过考虑的遗传操作在亚细胞水平接受,如通过显微注射或用重组病毒感染。引入的核酸分子可以掺入到染色体内,或者它可以是染色体外复制DNA。这里描述的适合的转基因动物包括,但不限于,其中引入遗传信息到生殖系细胞中,从而赋予传递该信息给后代的能力的那些动物。如果这种后代实际上具有一些或者全部该信息,那么它们也是转基因动物。
为了产生转基因动物,本领域已知的用于引入重组构建体或转基因到胚胎中的任何方法,如,例如,显微注射,使用细胞枪,转染,脂质体融合,电穿孔,等等,可以使用。在一个特定的实施方案中,用于生产转基因动物的方法是显微注射,其包括注射DNA分子到受精卵的雄原核中(参见,例如,美国专利4,870,009;5,550,316;4,736,866;和4,873,191)。最初在小鼠中开发用于引入重组构建体/转基因到哺乳动物和它们的生殖细胞中方法。这种方法随后用于较大的动物,包括家畜类(参见,例如,PCT公开号WO 88/00239,WO90/05188和WO 92/11757)。显微注射DNA到接合子的细胞质中也可用于产生转基因动物。
用于评估引入的转基因以及它的表达存在的方法是很容易获得的,而且是本领域公知的。这种方法包括,但不限于,DNA(Southern)杂交以检测外源DNA,聚合酶链反应(PCR),聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和印迹以检测DNA,RNA或蛋白。
本实施方案不局限于任何一种动物,而是提供用于任何合适的非人脊椎动物。例如,如这里描述和例示的,可以产生转基因小鼠。其他非限制性的例子包括,例如,这里描述的其他非人哺乳动物,如豚鼠,兔,猪,绵羊,等等。通过显微注射产生转基因动物的成功率在小鼠中是最高的,其中大约25%的受精小鼠卵,该受精小鼠卵中已经注射DNA,而且其已经被移植到雌性中,将发育成转基因小鼠。用兔,猪,绵羊和牛获得了较低的成功率。
在一个特定的实施方案中,相对于合适对照动物中的该群体,这里描述的转基因非人动物在脾,骨髓或脾和骨髓二者中显示扩大的B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样细胞群体。如这里使用的,术语“扩大的B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-细胞群体”或“B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-细胞的增加”,指相较于对照动物,相对于其他的淋巴样细胞亚型,显示B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-细胞的数目和/或B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-细胞的比例增加的淋巴样细胞群体。
在另一个实施方案中,这里描述的转基因非人动物显示淋巴组织增生疾病。“淋巴组织增生”指其属于,或特征在于,淋巴网状内皮细胞系统细胞的增生;该术语一般用于指一群恶性赘生物。“淋巴网状内皮细胞”指淋巴样和网状内皮系统的细胞或组织。“淋巴组织增生不适”(或“淋巴组织增生疾病”或“淋巴组织增生障碍”)指由与共同的会分化成几种细胞的任何一种的,原始淋巴网状内皮细胞相关的细胞引起的一群恶性赘生物之一,该淋巴组织增生疾病包括,尤其是,淋巴细胞,组织细胞,和单核细胞性白血病,多发性骨髓瘤,浆细胞瘤,淋巴肉芽肿病,所有的淋巴细胞性淋巴瘤,和与单株丙种球蛋白病相关的免疫分泌疾病。如这里使用的,“淋巴组织增生疾病”,“淋巴组织增生障碍”或“淋巴组织增生不适”也可指一种生理状态,其中相对于正常或对照动物,淋巴网状内皮细胞系统的增生,倍增和/或累积改变,但是受影响的动物却不必然地显示如上所述的赘生物之一的症状。如这里使用的,“白血病前期”状况指在白血病的明显症状发展之前的这种淋巴组织增生疾病。
在某个实施方案中,淋巴组织增生疾病是B细胞恶性肿瘤(例如,B细胞白血病(比如,急性淋巴母细胞性白血病);B细胞淋巴瘤(例如,高级的淋巴瘤),B细胞赘生物)。在一个另外的实施方案中,B细胞恶性肿瘤显示人急性淋巴母细胞性白血病,人淋巴母细胞性淋巴瘤或其组合的特征。在又一个实施方案中,淋巴组织增生疾病是白血病前期状况(例如,前B细胞增殖)。在另外的实施方案中,转基因非人动物显示增大的腹部,脾肿大,骨髓取代,淋巴细胞减少,或其组合。
在另一个实施方案中,存在这里描述的一种方法,其将转基因非人动物用作实验模型,用于研究淋巴组织增生疾病(例如,B细胞恶性肿瘤(如,白血病(例如,急性淋巴母细胞性白血病),淋巴瘤(如,高度淋巴瘤),和赘生物)),和测试可能的致癌剂和治疗剂。
在另一个方面,这里描述了一种测试试剂在治疗或预防受试者中的淋巴组织增生疾病的治疗功效的方法。根据一个实施方案,该方法包括施用该试剂给这里描述的转基因非人动物(例如,小鼠)。在一个实施方案中,转基因非人动物具有包括一个核酸构建体的基因组,该核酸构建体含有能指导在动物的B细胞中表达的至少一个转录调节序列(例如,VH启动子,Ig重链-Eμ增强子,其组合),其中该转录调节序列与编码miR155基因产物的核酸可操作连接。在一个特定的实施方案中,该转录调节序列与这样的核苷酸序列可操作连接,该核苷酸序列与SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2具有至少90%序列同一性。在另一个实施方案中,miR155基因产物包括SEQ ID NO:1的核苷酸序列。在另一个实施方案中,miR155基因产物包括SEQ ID NO:2的核苷酸序列。
试剂已经施用给转基因动物以后,将转基因动物中淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象与没有施用该试剂的相同基因型的对照动物进行比较。如果相对于对照动物,该试剂抑制,阻止和/或减轻已经施用该试剂的转基因动物中淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象,那么认为该试剂在治疗或预防淋巴组织增生疾病中具有治疗功效。在某个实施方案中,淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象选自:扩大的B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样细胞群体,增大的腹部,脾肿大,骨髓取代,淋巴细胞减少和其组合。
适于测试试剂的治疗功效的淋巴组织增生疾病包括,例如,这里描述的那些疾病。在一个实施方案中,淋巴组织增生疾病是B细胞恶性肿瘤。在一个特定的实施方案中,B细胞恶性肿瘤选自急性淋巴母细胞性白血病,B细胞淋巴瘤(例如,高度淋巴瘤),B细胞赘生物和其组合。B细胞恶性肿瘤可显示人急性淋巴母细胞性白血病,人淋巴母细胞性淋巴瘤或两者的特性。在另一个实施方案中,淋巴组织增生疾病是白血病前期状况,如特征为前B细胞增殖的状况。
如这里描述的,这里提供了在B细胞中表达miR155的转基因非人动物。在一个实施方案中,提供了一种转基因动物,其基因组包括含有至少一个转录调节序列的核酸构建体或转基因,该转录调节序列能指导在B细胞中的表达,其中该转录调节序列与编码miR155的核酸序列可操作连接。在一个特定的实施方案中,转基因包括编码miR155的DNA序列,其已经置于VH启动子和/或Ig重链-Eμ增强子的转录调控下。在这种动物中,mir155的表达针对未成熟的和成熟的B细胞。在一个实施方案中,转基因动物是小鼠,其发展扩大的B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样细胞群体。
在另一个实施方案中,来自显示淋巴组织增生的转基因动物的白血球,可以转移到第二种动物(其可以是非转基因动物),从而在第二种“受体”动物中诱导淋巴组织增生疾病的快速发病。
根据另一个实施方案,可根据这里描述的一个或多个方面,通过测定动物中这种药征的抗淋巴组织增生活性来测试用于预防和/或治疗淋巴组织增生疾病的可能的治疗药征或试剂。可通过测定抑制,预防,和/或破坏根据一个实施方案产生的转基因动物显示的和/或根据另一个实施方案产生的“受体”动物中淋巴组织增生疾病的一种或多种症状或征象的可能的治疗药征能力来评估这种活性。
可以测试各种治疗药征或试剂,如蛋白(例如,抗体),肽,肽模拟物,小的有机分子,核酸等等,预防和/或治疗淋巴组织增生疾病。根据这里描述的方法,可以逐一地筛选试剂,或者同时测试一种或多种试剂。在测试化合物的混合物时,通过这里描述的处理选择的化合物,可以使用适合的方法分离(视情况而定)和鉴定(例如,测序,色谱法)。也可以根据这些方法确定测试样品中一种或多种化合物的存在。
可以例如,通过筛选分子文库或集合,如,国家癌症研究所的化学药品贮藏处,在测定抑制和/或预防这里描述的转基因动物显示的淋巴组织增生疾病的一种或多种症状或征象的分析中,鉴定预防和/或治疗淋巴组织增生疾病的试剂。可以测试文库,如通过组合的化学合成或其他方法生产的化合物(例如,有机化合物,重组或合成肽,“类肽”,核酸)的组合文库(参见,例如,Zuckerman,R.N.等,J.Med.Chem.,37:2678-2685(1994)和其中引用的参考文献;也参见,Ohlmeyer,M.H.J.等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:10922-10926(1993)和De Witt,S.H.等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6909-6913(1993),relating to tagged compounds;Rutter,W.J.等U.S.Patent No.5,010,175;Huebner,V.D.等,U.S.Patent No.5,182,366;和Geysen,H.M.,美国专利号4,833,092)。其中通过层析法,从携带独特标签的文库筛选化合物,鉴定单个化合物是可能的。
可以根据已知的方法另外配制鉴定的治疗药征,以产生药学上可接受的组合物。治疗药征或包含这种治疗药征的组合物可以各种标准方式施用给受试者(例如,转基因动物)。例如,试剂可以使用各种途径给药,包括,例如,口服,饮食,局部,经皮肤,直肠,肠胃外(例如,静脉内,动脉内,肌内,皮下,皮内注射),和吸入(例如,支气管内,鼻内,口服吸入,鼻内滴剂)。给药可以是如表明的局部的或全身的。给药的优选模式可以根据待施用的抗体或抗原结合片段,和被治疗的特定不适(例如,疾病)而改变,但是,口服或肠胃外给药一般是优选的。
试剂可以肠胃外给药如,例如,通过静脉内,肌内,鞘内或皮下注射。肠胃外给药可以通过将试剂掺入到溶液或悬浮液中来实现。这种溶液或混悬液也可包括无菌稀释剂,如注射用水,盐溶液,抑菌盐水(包含大约0.9%mg/ml苯甲醇的盐水),磷酸缓冲盐溶液(这里称为PBS),Hank′s溶液,Ringer′s-乳酸盐,固定油类,聚乙二醇,甘油,丙二醇,及其他合成的溶剂。肠胃外制剂还可包括抗菌剂(例如,苯甲醇,对羟基苯甲酸甲酯),抗氧化剂(例如,抗坏血酸,亚硫酸氢钠),和螯合剂(例如,EDTA)。缓冲液如醋酸盐,柠檬酸盐和磷酸盐和用于调节张力的试剂如氯化钠和葡萄糖,也可添加。肠胃外制剂可以封装到安瓿,一次性注射器,或由玻璃或塑料制成的多次剂量小瓶中。
实施例
实施例1:产生Eμ-mmu-miR155转基因小鼠
材料和方法
转基因小鼠:
通过PCR,从129SvJ小鼠(The Jackson Laboratory),扩增包含miR155的前体序列的318-bp片段,并克隆到pBSVE6BK(pEμ)质粒的EcoRV和SalT位点,该质粒包含用于Ig重链的Eμ增强子,VH启动子,和人β-球蛋白基因的3’UTR和聚腺苷酸(图1),而且以前已经用于在Eμ-TCL1转基因小鼠中逐渐形成慢性淋巴细胞性白血病(Bichi,R.,等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99:6955-6960(2002))。转基因,其通过用BssHII和PvuI切割该构建体分离,注射到怀孕的FVB/N和C57/B6小鼠的受精卵细胞的雄原核中。通过Southern印迹分析,其对用BamHI消化的尾部提取的DNA进行,使用设计用于靶向Eμ增强子序列的探针(图2A,2B)来筛选幼鼠中转基因的存在。鉴定转基因建立者,并饲养成年龄相当的野生型小鼠。转基因半合子小鼠出生,进行研究,并与它们的野生型对应物相比较。通过对尾部提取的DNA进行的PCR,对小鼠进行基因分型(数据未显示)。
Northern印迹分析:
脾离解在两个磨砂显微镜载玻片之间,并在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中洗涤裂解物,通过用氯化铵(NH4Cl)低渗裂解使红细胞耗竭,离心,并在PBS中重悬。用TRIzol试剂(GIBCO,Invitrogen)提取总RNA,在SDS/PAGE中点样和变性,并在Hybond N+膜(Amersham Pharmacia)中印迹。该膜与包含成熟的mmu-miR155序列的反义物的γ-32P放射性探针杂交,孵育过夜,洗涤,并暴露于感光成像仪筛选(MolecularDynamics)。使用Typhoon图像处理系统(Amersham Biosciences)对图像进行处理(图3)。
结果
产生转基因小鼠,其中mmu-miR155(小鼠miR155)表达在VH启动子-Ig重链Eμ增强子调控下,其在B细胞发育的晚期前B细胞阶段变得有活性。通过Southern印迹杂交鉴定了15只转基因建立者(图2A,2B),C57BL/B6背景上7只(指定为F1-F7),FVB/N背景上8只(指定为F8-F15)。将这些建立者饲养成相同品系的野生型小鼠,以产生15个独立的转基因系。
对从转基因和野生型脾提取的总RNA进行实时PCR(数据未显示)和Northern印迹分析(图3),显示在5个转基因小鼠的建立者系中高水平的miR155表达。1个转基因系完全缺乏表达,而所有其他的建立者系都表达转基因。如以前报道的,野生型小鼠在脾细胞中不表达成熟的miR155(Monticelli,S.,等,Genome Biol.6:R71(2005))。
实施例2:Eμ-mmu-miR 155转基因小鼠的表型表征揭示了脾和骨髓中前B细胞的增生,其导致B细胞恶性肿瘤
材料和方法
体测定:
杀死以后对小鼠称重,解剖它们的脾,测量和称重。
白细胞(WBC)和涂布标本:
从小鼠的眼球后血管抽取血液,涂布到磨砂显微镜载玻片上并用Giemsa染色或者离心,在PBS中洗涤,并用氯化铵处理。细胞用细胞-脉冲室计数。
流式细胞术分析:
通过低渗裂解(0.165M NH4Cl)除去脾细胞或骨髓细胞的单细胞混悬液的成熟红细胞,并用下列配合抗体染色:抗-B220-PE,抗-IgM-FITC,抗-TCR-PE cy5,抗-CD5-PE,和抗-CD-43-FITC。所有的抗体都获自BD PharMingen。在Becton Dickinson FACSCalibur上进行流式细胞术,使用Mac软件的Becton Dickinson FACS CONVERT 1.0对数据进行分析。
组织学和免疫组织化学:
从宰后检验的小鼠分离脾,股骨和胸骨,并固定于10%缓冲的福尔马林中,包埋于石蜡中,然后切成4微米的切片。切片用苏木精/曙红按照标准方案染色。对于脱蜡步骤,切片于55℃加热1小时,通过分级乙醇系列和蒸馏水再水化,浸于PBS中,然后37℃用溶于Tris缓冲液中的0.1%胰蛋白酶溶液处理30分钟。用10%正常血清阻断内源过氧化物酶。将CD43,B220,和VpreB1(CD179a)抗体(BD PharMingen)用作第一抗体。第二抗体和二氨基联苯胺按照制造商的指导添加。
结果
相对于野生型小鼠的脾,转基因小鼠的身体和脾都增大了(图4A,4B),而且转基因小鼠的脾重量/体重比例比野生型小鼠的比例大3到4倍(表1)。有趣地,该比例没有随着年龄改变很多。
表1.转基因和野生型小鼠的脾和身体测量。
小鼠 | 系(建立者) | 年龄,周 | BW,*gr | SW,**mg | WI,***mg/gr |
72tg | 8 | 3 | 22.68 | 210 | 9.25 |
69wt | 8 | 8 | 23.90 | 90 | 3.76 |
74tg | 8 | 3 | 23.98 | 270 | 11.25 |
68wt | 8 | 3 | 24.54 | 60 | 2.44 |
8gt | 8 | 24 | 38.3 | 380 | 9.92 |
24wt | N/A | 24 | 26.5 | 100 | 3.77 |
50tg | 10 | 3 | 21.7 | 200 | 9.21 |
49wt | 10 | 3 | 20.4 | 80 | 3.92 |
148wt | 8 | 6 | 26.97 | 240 | 8.89 |
149wt | 8 | 6 | 25.9 | 100 | 3.86 |
156tg | 10 | 6 | 23.44 | 280 | 11.94 |
157wt | 10 | 6 | 23.91 | 100 | 4.18 |
220wt | 8 | 7 | 23.13 | 120 | 5.2 |
221tg | 8 | 7 | 22.37 | 260 | 11.6 |
222tg | 8 | 7 | 21.67 | 250 | 11.5 |
223wt | 8 | 7 | 22.44 | 120 | 5.2 |
*BW,以克(gr)计体重;**SW,以毫克(mg)计的脾重量;***WI,以毫克每克(mg/g)计的重量指数(转基因与野生型重量的比例);tg,转基因小鼠;wt,野生型小鼠。
3月龄转基因小鼠的白血球计数(WBC)是每ml外周血10 X 106±1 X 106,相较于正常的,年龄相当的小鼠为每ml外周血40 X 106±1.5 X 106。相较于野生型年龄相当的小鼠,值没有变化,其为每ml外周血40 X 106±1.5 X 106,6月龄转基因小鼠的WBC甚至更低,其值为每ml外周血6 X 106±0.5 X 106。
3周龄转基因小鼠的脾的组织病理学(苏木精/伊红染液),特征为侵入和扩大红髓的一致的非典型淋巴样群体。胚滤泡不受影响,而且存在许多次级造血中心(图5A)。组织学地,6月龄小鼠存在大大增加的恶性淋巴样群体,其具有显著的非典型和再结晶形态,红髓的血管通道增加,而且逐渐取代白髓。胚滤泡数目减少,而且脾的总体结构被淋巴样增生破坏(图5B)。组织学类似的淋巴样群体存在于6月龄小鼠的骨髓中。增生抗原,Ki67的表达,显示转基因小鼠中显著的淋巴样增生(图5D),其在野生型小鼠中没有观察到。
转基因脾中淋巴样增生的免疫组织化学分析,显示非典型扩大的胸腺依赖性细胞是B220和VpreB1(CD179a)低阳性的,不过CD43是阴性的(数据未显示)。转基因小鼠脾的石蜡包埋切片的IgM染色,显示增殖胸腺依赖性细胞的细胞质中μ链的存在(图6)。相反,流式细胞术分析没有鉴定到这些细胞表面上IgM的表达,其表明扩大的淋巴样细胞表达细胞质的μ链,但是不表达表面IgM。
对来自3,6,或7周龄或6龄的转基因和野生型小鼠的脾和骨髓的WBC的单细胞混悬液,进行的流式细胞术分析,显示相较于它们的野生型对应物,转基因小鼠中脾和骨髓中B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样细胞的数目都增加。这种表型与在人急性淋巴母细胞性白血病或淋巴母细胞性淋巴瘤中观察到的增殖胸腺依赖性细胞的表型类似。这些发现表明,相较于在野生型小鼠的脾中仅仅1.65%,3周龄转基因小鼠的脾中B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样群体,是总的门控淋巴样群体的9%(对1只转基因小鼠和1只野生型小鼠进行评价)。6周龄时,这些百分数在转基因小鼠的脾中变成6.6±1.4%,7周龄小鼠为4.7±0.3%,而在野生型脾中保持没有变化(分析的两种转基因小鼠来自两个不同的建立者系和两个野生型小鼠)。
在6月龄转基因小鼠的骨髓中,我们发现相较于野生型,如通过B220low/IgM-表达限定的前B细胞群体增加(图7和8)。B220low/IgM-细胞群体的正向散射分析显示,这些细胞将大的海蕾细胞(数据未显示)。
根据流式细胞术,组织学和免疫组织化学分析,推断前B细胞增殖,限定为B220low/CD19low/CD10low/IgM-/TCR-/CD43-,存在于转基因小鼠的脾和骨髓中,而且在3周龄是已经是可检测的。这种增生最终导致脾肿大,骨髓取代,和显著的淋巴细胞减少,常常与高级B细胞恶性肿瘤相关的特征。相较于野生型对照,其全部都是健康的(11只野生型小鼠中的11只),与该特征一致,所有的转基因小鼠在6月龄都发展高级B细胞赘生物(7只转基因小鼠的7只)。显著地,没有过表达miR155的转基因小鼠系也是正常的。
实施例3:Eμ-mmu-miR155转基因小鼠的细胞遗传学分析
材料和方法
细胞遗传学:
股骨骨髓用RPMI培养基1640/20% FBS冲洗,并收集到带有1%肝素的5ml RPMI培养基1640/20% FBS中。细胞生长,并使用标准的细胞学技术,评价染色体的缺失,移位,倒位和中期的数目。
Ig重链重排:
使用下列寡核苷酸引物,通过扩增小鼠基因组DNA的Ig重链区域的JH4片段中序列,设计探针:正向,5′-TGAAGGATCTGCCAGAACTGAA-3′(SEQ ID NO:3),和反向,5′-TGCAATGCTCAGAAAACTCCAT-3′(SEQ ID NO:4)。
转基因和野生型小鼠的脾离解到处于PBS中的磨砂显微镜载玻片之间,用氯化铵处理以裂解红血球,离心,并重悬于PBS中。从脾的白血球提取DNA,并用EcoRI,StuI,BglII,BamHI和HindIII消化。消化的DNA印迹到Hybond N+膜上,用JH4探针杂交,该探针用γ-32p放射性标记,然后暴露于感光图像仪筛选,并使用Typhoon扫描仪进行处理。
结果
相较于来自正常同窝仔畜的脾,脾细胞的染色体组型的细胞遗传研究,没有鉴定到来自转基因小鼠的脾中一致的染色体异常。但是,偶然观察到一些基因组的改变(图9;参见箭头)。这些结果表明,扩大的前B细胞群体是二倍体和细胞遗传学拟似正常的。
为了检测克隆性,使用多酶消化酶,对来自3到6周龄之间的小鼠的脾细胞DNA进行Southern印迹分析,以评价V(D)J重排。相对于野生型小鼠,没有检测到转基因小鼠中重排条带的存在(图10),除了1只转基因小鼠外,其在用每种不同的限制性内切酶进行Southern印迹上具有一致的重排条带(数据未显示)。这些数据表明,该龄的小鼠中B细胞群体大部分是多克隆的,至少直到6周龄。因为大部分恶性肿瘤是多克隆的,这种发现表明miR155可能是癌症中激活的信号转导途径的下游靶。
有趣地,已经在实体瘤中观察到miR155的过表达,如乳房和结肠癌,以及肺癌,其中miR155的过表达是差的预后的指示(Volinia,S.,等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 103:2257-2261(2006))。
实施例4:微阵列表达分布图揭示了VpreB1 mRNA和其他靶的上调
材料和方法
RNA分离:
根据制造商的指导,用TRIzol试剂(Invitrogen)进行总的RNA分离。
miRNA表达分布图:
如所述的在miRNA微阵列芯片上进行RNA标记和杂交(Liu,C.G.,等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101:9740-9744)。简要地,使用5’生物素末端标记的随机八聚物寡核苷酸引物,通过逆转录,用生物素对来自每种样品的5μg总RNA进行标记。在miRNA微阵列芯片(OhioState University,Ver.2.0)上进行生物素标记的cDNA的杂交,该芯片含有800个miRNA探针,包括245个人和200个小鼠miRNA基因,一式四份。使用Axon扫描仪4000B(Axon Instruments,Union City,CA),通过结合链霉亲和素-Alexa647缀合物与生物素,检测杂交信号。通过GENEPIX 6.0软件(Axon Instruments)对图像进行定量。
mRNA表达分布图:
使用GeneChip小鼠基因组4302.0阵列(Affymetrix),其包含用于超过45,000个表征的基因和表达的序列标签的探针组。根据Affymetrix方案,进行样本标记和处理,GeneChip杂交,以及扫描。简要地,使用SuperScript Choice System(Invitrogen),其添加T7RNA聚合酶启动子位点到3’-末端(Genset,La Jolla,CA),从总RNA合成双链cDNA。使用BioArray T7 RNA聚合酶标记试剂盒(EnzoDiagnostics),从cDNA体外产生生物素化的cRNA并扩增。使用RNeasy微型试剂盒(Qiagen,Hilden,德国),纯化cRNA以后,20μg的cRNA于94℃破碎35min。大约12.5μg的破碎cRNA用于250μl杂交混合物中,该混合物含有鲱鱼-精子DNA(0.1mg/ml;Promega),加上细菌和噬菌体cRNA对照(1.5pM BioB,5pM BioC,25pM BioD,和100pM Cre)用作杂交效率的内部对照。混合物的等分试样(200μ1),在GeneChip杂交烘箱640(Affymetrix)中,于45℃与阵列杂交18小时。洗涤每个阵列,并用链霉亲和素-藻红蛋白(Invitrogen)染色,用生物素化的抗链霉亲和素抗体(Vector Laboratories),在GeneChip Fluidics Station 450(Affymetrix)上扩增。阵列用GeneArray G7扫描仪(Affymetrix)扫描,以获得图像和信号强度。
结果
对从5只转基因小鼠的脾的白血球提取的总RNA,进行微阵列分析,其包括不表达miR155转基因的1只小鼠,和6只野生型同窝仔畜对应物的白血球。分析显示,相对于野生型同窝对照小鼠(数据未显示),在过表达miR155的转基因小鼠中,miR155,miR194,miR224,miR217和miR151的表达增加10到20倍(表3),miR146和miR138的表达减少2到3倍。使用Affymetrix微阵列芯片,研究相同组的转基因小鼠中mRNA的差异表达,并与同窝仔畜对照中的mRNA表达进行比较。Affymetrix微阵列数据的统计分析显示,在miR155过表达小鼠中,200个增生相关的基因上调,而50个基因下调(表3)。显著地,VpreB1 mRNA是上调的,当前B细胞增殖发生时,期望其存在。这些数据补充了来自流式细胞术分析和免疫组织化学的数据。
表2.根据微阵列的预测分析(PAM),miR155转基因/野生型小鼠分类的Affymetrix微阵列数据。
名称 | 探针组ID | 基因称谓 | mir155分数 | Wt分数 |
1456609_at | 1456609_at | RIKEN cDNA 1810006K23基因 | 0.8041* | -0.5744 |
1452324_at | 1452324_at | 浆细胞瘤变体易位1 | 0.4468* | -0.3192 |
1449452_a_at | 1449452_a_at | 糖蛋白2(酶原颗粒膜) | 0.3377* | -0.2412 |
1459923_at | 1459923_at | 脑表达的,X-连锁的6 | 0.319* | -0.2279 |
1449222_at | 1449222_at | EB病毒诱导的基因3 | 0.31* | -0.2214 |
1424437_s_at | 1424437_s_at | ATP-结合表达盒,亚家族G(WHITE),成员4 | 0.2723* | -0.1945 |
1425784_a_at | 1425784_a_at | 嗅介蛋白1 | 0.2717* | -0.1941 |
1436827_at | 1436827_at | 基因模型944,(NCBI) | 0.2537* | -0.1812 |
1425677_a_at | 1425677_a_at | 锚蛋白1,红色的 | 0.2513* | -0.1795 |
1417636_at | 1417636_at | 溶质载体家族6(神经递质转运蛋白,甘氨酸)成员9 | 0.2476* | -0.1769 |
1441054_at | 1441054_at | 载脂蛋白L,2 | 0.233* | -0.1664 |
1458642_at | 1458642_at | 杀伤细胞凝集素样受体家族E,成员1 | 0.2307* | -0.1648 |
1448558_a_at | 1448558_a_at | 磷酯酶A2,IVA组,(细胞溶质的,钙依赖的) | 0.2157* | -0.154 |
1418601_at | 1418601_at | 醛脱氢酶家族1,亚家族A7 | 0.2136* | -0.1526 |
1458667_at | 1458667_at | RIKEN cDNA4930519N13基因 | 0.2084* | -0.1488 |
1436443_a_at | 1436443_a_at | 含KDEL(Lys-Aso-Glu-Leu)的1 | 0.2073* | -0.1481 |
1416740_at | 1416740_at | 前胶原,类型V,α1 | 0.2025* | -0.1447 |
1422663_at | 1422663_at | 起点识别复合体,亚基1-样(酿酒酵母) | 0.2019* | -0.1442 |
1433892_at | 1433892_at | 精子相关抗原5 | 0.1988* | -0.142 |
1435660_at | 1435660_at | 类似于RIKEN cDNA 5830484A20 | 0.1979* | -0.1413 |
1454622_at | 1454622_at | 溶质载体家族38,成员5 | 0.1847* | -0.132 |
1426802_at | 1426802_at | 隔蛋白8 | 0.1821* | -0.13 |
1449869_at | 1449869_at | 前B淋巴细胞基团1(VperB1) | 0.1798* | -0.1284 |
1426015_s_at | 1426015_s_at | 天冬氨酸-β-羟化酶 | 0.1768* | -0.1263 |
1418710_at | 1418710_at | CD59a抗原 | 0.1697* | -0.1212 |
1437244_at | 1437244_at | 生长停止特异性2样3 | 0.1662* | -0.1187 |
1429830_a_at | 1429830_a_at | CD59a抗原 | 0.1651* | -0.118 |
1422524_at | 1422524_at | ATP-结合表达盒,亚家族B(MDR/TAP),成员6 | 0.1604* | -0.1145 |
1435287_at | 1435287_at | 内收蛋白2(β) | 0.158* | -0.1129 |
1436984_at | 1436984_at | abl-相互作用物2 | 0.1554* | -0.111 |
1453226_at | 1453226_at | RIKEN cDNA 3000004C01基因 | 0.1467* | -0.1048 |
1429146_at | 1429146_at | RIKEN cDNA 662040IM08基因 | 0.139* | -0.0993 |
1454630_at | 1454630_at | cDNA序列BC034054 | 0.1385* | -0.099 |
1429089_s_at | 1429089_s_at | RIKEN cDNA 2900026A02基因 | 0.138* | -0.0986 |
1455980_a_at | 1455980_a_at | 生长停滞特异性2样3 | 0.1375* | -0.0982 |
1427677_a_at | 1427677_a_at | 含SRY-框的基因6 | 0.1363* | -0.0974 |
1419031_at | 1419031_at | 脂肪酸去饱和酶2 | 0.1338* | -0.0956 |
1422016_a_at | 1422016_a_at | 着丝粒自身抗原H | 0.1309* | -0.0935 |
1420176_x_at | 1420176_x_at | 免疫球蛋白λ样多肽1 | 0.1305* | -0.0932 |
1434501_at | 1434501_at | --- | 0.1246* | -0.089 |
1419665_a_at | 1419665_a_at | 核内蛋白1 | 0.123* | -0.0878 |
1446391_at | 1446391_at | 突触核蛋白,α | 0.1203* | -0.0859 |
1419421_at | 1419421_at | 锚蛋白1,类红细胞 | 0.1181* | -0.0844 |
1452458_s_at | 1452458_s_at | 肽基脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样5 | 0.1163* | -0.0831 |
1417939_at | 1417939_at | RAD51相关蛋白1 | 0.1149* | -0.0821 |
1436725_at | 1436725_at | RIKEN cDNA E130306D19基因 | 0.1104* | -0.0789 |
1437187_at | 1437187_at | E2F转录因子7 | 0.1103* | -0.0788 |
1453004_at | 1453004_at | RIKEN cDNA 3110004L20基因 | 0.1062* | -0.0758 |
1428105_at | 1428105_at | TPX2,微管相关蛋白同系物(光滑爪蟾) | 0.1049* | -0.0749 |
1448926_at | 1448926_at | 同源异型框A5 | 0.1047* | -0.0748 |
1437370_at | 1437370_at | Shugoshin样2(裂殖酵母) | 0.1046* | -0.0747 |
1430999_a_at | 1430999_a_at | 短卷曲螺旋蛋白 | 0.1038* | -0.0742 |
1454757_s_at | 1454757_s_at | DNA区段,Chr12,ERATO Doi647,表达的 | 0.1018* | -0.0727 |
1418026_at | 1418026_at | 核酸外切酶1 | 0.1016* | -0.0726 |
1435148_at | 1435148_at | ATP酶,Na+/K+转运,β2多肽 | 0.1012* | -0.0723 |
1434553_at | 1434553_at | RIKEN cDNA 4930577M16基因 | 0.1009* | -0.0721 |
1422967_a_at | 1422967_a_at | 转铁蛋白受体 | 0.1008* | -0.072 |
1434479_at | 1434479_at | 表达的序列AI413331 | 0.1001* | -0.0715 |
1431893_a_at | 1431893_a_at | 反-异戊烯转移酶 | 0.0994* | -0.071 |
1447655_x_at | 1447655_x_at | 含SRY-框的基因6 | 0.0959* | -0.0685 |
1434789_at | 1434789_at | 含DEP域1B | 0.095* | -0.0678 |
1421957_a_at | 1421957_a_at | 磷酸胞苷酰转移酶1,胆碱,α同工型 | 0.0946* | -0.0676 |
1455228_at | 1455228_at | Wolf-Hirschhorn综合征候选物1(人) | 0.0937* | -0.0669 |
1435663_at | 1435663_at | 雌激素受体1(α) | 0.093* | -0.0664 |
1429058_at | 1429058_at | RIKEN cDNA 1110004B13基因 | 0.0925* | -0.0661 |
1424229_at | 1424229_at | 双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶3 | 0.0919* | -0.0657 |
1422930_at | 1422930_at | 细胞间粘附分子4,Landsteiner-Wiener血型 | 0.0917* | -0.0655 |
1452591_a_at | 1452591_a_at | RIKEN cDNA 2410018G20基因 | 0.0905* | -0.0646 |
1453416_at | 1453416_at | 生长停滞特异性2样3 | 0.0886* | -0.0633 |
1433908_a_at | 1433908_a_at | 皮层肌动蛋白 | 0.0874* | -0.0624 |
1419595_a_at | 1419595_a_at | γ-谷氨酰水解酶 | 0.0872* | -0.0623 |
1421654_a_at | 1421654_a_at | 核纤层蛋白A | 0.0867* | -0.062 |
1417323_at | 1417323_at | RIKEN cDNA 5430413I02基因 | 0.085* | -0.0607 |
1450992_a_at | 1450992_a_at | 髓细胞样嗜亲性病毒整合位点1 | 0.0832* | -0.0594 |
1435773_at | 1435773_at | RIKEN cDNA 4930547N16基因 | 0.0829* | -0.0592 |
1438711_at | 1438711_at | --- | 0.0829* | -0.0592 |
1429701_at | 1429701_at | RIKEN cDNA 2410003J06基因 | 0.0827* | -0.0591 |
1433582_at | 1433582_at | RIKEN cDNA 1190002N15基因 | 0.0823* | -0.0588 |
1460192_at | 1460192_at | 氧固醇结合蛋白样1A | 0.0817* | -0.0584 |
1443870_at | 1443870_at | ATP结合盒,亚家族C(CFTR/MRP),成员4 | 0.0814* | -0.0581 |
1456020_at | 1456020_at | SH3域和tetratricopeptide重复2 | 0.0813* | -0.0581 |
1451664_x_at | 1451664_x_at | 杀伤细胞凝集素样受体亚家族A,成员12///杀伤细胞凝集素样受体亚家族A,成员4///杀伤细胞凝集素样受体亚家族A,成员7///杀伤细胞凝集素样受体亚家族A,成员20///杀伤细胞凝集素样受体亚家族A,成员18 | 0.0812* | -0.058 |
1421975_a_at | 1421975_a_at | 内收蛋白2(β) | 0.0805* | -0.0575 |
1423124_x_at | 1423124_x_at | RAD54样(酿酒酵母) | 0.0789* | -0.0563 |
1417749_a_at | 1417749_a_at | 紧密连接蛋白1 | 0.0779* | -0.0557 |
1425145_at | 1425145_at | 白细胞介素1受体样1 | 0.0768* | -0.0549 |
1424722_at | 1424722_at | RIKEN cDNA 1300017J02基因 | 0.0762* | -0.0544 |
1455409_at | 1455409_at | 螺旋体同源物1(果蝇) | 0.0739* | -0.0528 |
1453067_at | 1453067_at | RIKEN cDNA 2610040C18基因 | 0.0734* | -0.0524 |
1430839_at | 1430839_at | RIKEN cDNA 9430076G02基因 | 0.0713* | -0.0509 |
1434577_at | 1434577_at | cDNA序列BC052040 | 0.0704* | -0.0503 |
1457306_at | 1457306_at | 聚合酶(DNA指导的),ε3(p17亚基) | 0.0699* | -0.0499 |
1429734_at | 1429734_at | RIKEN cDNA 4632434I11基因 | 0.0695* | -0.0496 |
1449060_at | 1449060_at | 驱动蛋白家族成员2C | 0.0684* | -0.0489 |
1424223_at | 1424223_at | RIKEN cDNA 1700020C11基因 | 0.0676* | -0.0483 |
1428372_at | 1428372_at | 肿瘤发生抑制5 | 0.0667* | -0.0476 |
1436124_at | 1436124_at | 磷酸盐胞苷酰转移酶1,胆碱,β同工型 | 0.0663* | -0.0474 |
1417656_at | 1417656_at | 成髓细胞血症致癌基因样2 | 0.0661* | -0.0472 |
1436922_at | 1436922_at | --- | 0.0657* | -0.047 |
1455009_at | 1455009_at | 羧肽酶D | 0.065* | -0.0464 |
1434826_at | 1434826_at | 表达的序列AI256775 | 0.064* | -0.0457 |
1455746_at | 1455746_at | 驱动蛋白家族成员13A | 0.0628* | -0.0449 |
1419087_s_at | 1419087_s_at | 剪接因子3a,亚基1 | 0.0616* | -0.044 |
1418919_at | 1418919_at | shugoshin样1(裂殖酵母) | 0.0611* | -0.0436 |
1433596_at | 1433596_at | DnaJ(Hsp40)同源物,亚家族C,成员6 | 0.061* | -0.0436 |
1430538_at | 1430538_at | RIKENcDNA 2210013O21基因 | 0.0605* | -0.0432 |
1454193_at | 1454193_at | RIKEN cDNA 5430401H09基因 | 0.0605* | -0.0432 |
1450380_at | 1450380_at | 室管膜素相关蛋白2(斑马鱼) | 0.06* | -0.0428 |
1434322_at | 1434322_at | RIKEN cDNA A930021H16基因 | 0.0596* | -0.0426 |
1438650_x_at | 1438650_x_at | 间隙连接膜通道蛋白α1 | 0.0593* | -0.0424 |
1451914_a_at | 1451914_a_at | 内收蛋白2(β) | 0.0574* | -0.041 |
1436584_at | 1436584_at | Sprouty同源物2(果蝇) | 0.0555* | -0.0396 |
1455012_s_at | 1455012_s_at | 三联基序蛋白37 | 0.0551* | -0.0394 |
1452026_a_at | 1452026_a_at | 磷酯酶A2,XIIA类 | 0.0524* | -0.0374 |
1451257_at | 1451257_at | 酰基辅酶A合成酶长链家族成员6 | 0.0521* | -0.0372 |
1435792_at | 1435792_at | Sp100-rs的组分 | 0.0513* | -0.0366 |
1435029_at | 1435029_at | RIKEN cDNA B230120H23基因 | 0.0492* | -0.0351 |
1434630_at | 1434630_at | 锚蛋白重复结构域28 | 0.0491* | -0.0351 |
1426801_at | 1426801_at | 隔蛋白8 | 0.0483* | -0.0345 |
1436936_s_at | 1436936_s_at | 灭活的X特异性转录物 | 0.0458* | -0.0327 |
1418069_at | 1418069_at | 载脂蛋白C-II | 0.0456* | -0.0326 |
1425837_a_at | 1425837_a_at | CCR4碳分解代谢物阻抑4样(酿酒酵母) | 0.0456* | -0.0326 |
1441757_at | 1441757_at | RIKEN cDNA 1190002F15基因 | 0.0454* | -0.0325 |
1422906_at | 1422906_at | ATP结合盒,亚家族G(WHITE),成员2 | 0.045* | -0.0322 |
1454858_x_at | 1454858_x_at | RIKEN cDNA 3300001H21基因 | 0.045* | -0.0321 |
1443673_x_at | 1443673_x_at | --- | 0.0449* | -0.032 |
1417587_at | 1417587_at | 永久同源物(果蝇) | 0.0447* | -0.0319 |
1456022_at | 1456022_at | 同源结构域相互作用蛋白激酶2 | 0.0445* | -0.0318 |
1438202_at | 1438202_at | RIKEN cDNA C920005C14基因 | 0.0439* | -0.0314 |
1453836_a_at | 1453836_a_at | 单酸甘油酯脂肪酶 | 0.0434* | -0.031 |
1422966_a_at | 1422966_a_at | 转铁蛋白受体 | 0.0431* | -0.0308 |
1439208_at | 1439208_at | 限制点激酶1同源物,(裂殖酵母) | 0.0423* | -0.0302 |
1422944_a_at | 1422944_a_at | 透明同源物3(果蝇) | 0.0417* | -0.0298 |
1419412_at | 1419412_at | 趋化因子(C基序)配体1 | 0.0414* | -0.0296 |
1435378_at | 1435378_at | RIKEN cDNA 2210020M01基因 | 0.0414* | -0.0296 |
1422788_at | 1422788_at | 溶质载体家族43,成员3 | 0.0413* | -0.0295 |
1452763_at | 1452763_at | Prader-Willi/Angelman综合征1中非印迹同源物(人) | 0.0413* | -0.0295 |
1428369_s_at | 1428369_s_at | Rho GTP酶激活蛋白21 | 0.0409* | -0.0292 |
1453107_s_at | 1453107_s_at | 果蝇forkhead框M1///脑磷酯结合蛋白///RIKEN cDNA | 0.0404* | -0.0288 |
4933413G19基因 | ||||
1418219_at | 1418219_at | 白细胞介素15 | 0.0379* | -0.027 |
1448834_at | 1448834_at | 果蝇forkhead框M1 | 0.0372* | -0.0266 |
1435054_at | 1435054_at | 必需减数分裂核酸内切酶同源物1(裂殖酵母) | 0.0371* | -0.0265 |
1434586_a_at | 1434586_a_at | 磷脂酰丝氨酸合成酶2 | 0.0367* | -0.0262 |
1418929_at | 1418929_at | 雌激素相关受体β样1 | 0.0366* | -0.0261 |
1451469_at | 1451469_at | RIKEN cDNA B430108F07基因 | 0.0363* | -0.0259 |
1428104_at | 1428104_at | TPX2,微管相关蛋白同源物(光滑爪蟾) | 0.0339* | -0.0242 |
1427262_at | 1427262_at | 灭活的X特异性转录物 | 0.0337* | -0.0241 |
1431012_a_at | 1431012_a_at | 过氧化物酶体Δ3,Δ2-烯酰辅酶A异构酶 | 0.0336* | -0.024 |
1434850_at | 1434850_at | 假设蛋白D030034H08 | 0.033* | -0.0236 |
1441520_at | 1441520_at | 钙调蛋白结合蛋白1 | 0.0329* | -0.0235 |
1423344_at | 1423344_at | 促红细胞生成素受体 | 0.0328* | -0.0234 |
1434557_at | 1434557_at | 亨廷顿蛋白相互作用蛋白1 | 0.0325* | -0.0232 |
1424863_a_at | 1424863_a_at | 同源结构域相互作用蛋白激酶2 | 0.0321* | -0.0229 |
1457670_s_at | 1457670_s_at | 核纤层蛋白A | 0.0316* | -0.0226 |
1451417_at | 1451417_at | 乳房癌1 | 0.0305* | -0.0218 |
1428952_at | 1428952_at | 蛋白质二硫键异构酶相关2 | 0.0303* | -0.0217 |
1449514_at | 1449514_at | G蛋白偶联受体激酶5 | 0.0296* | -0.0211 |
1416273_at | 1416273_at | 肿瘤坏死因子,α-诱导的蛋白2 | 0.0292* | -0.0209 |
1460223_a_at | 1460223_a_at | 红细胞蛋白带4.9 | 0.0292* | -0.0208 |
1423902_s_at | 1423902_s_at | Rho鸟嘌呤核苷交换因子(GEF)12 | 0.0291* | -0.0208 |
1417404_at | 1417404_at | ELOVL家族成员6,长链脂肪酸的延伸(酵母) | 0.0289* | -0.0206 |
1420712_a_at | 1420712_a_at | hepsin | 0.0273* | -0.0195 |
1452924_at | 1452924_at | RIKEN cDNA 2310007D09基因 | 0.0273* | -0.0195 |
1429059_s_at | 1429059_s_at | RIKEN cDNA 1110004B13基因 | 0.0272* | -0.0194 |
1435784_at | 1435784_at | 自噬相关9样1(酵母) | 0.0264* | -0.0189 |
1449648_s_at | 1449648_s_at | RNA聚合酶1-1 | 0.0264* | -0.0188 |
1460551_at | 1460551_at | RAN,癌基因家族成员RAS | 0.0259* | -0.0185 |
1439091_at | 1439091_at | 范科尼贫血,互补群D2 | 0.0249* | -0.0178 |
1457851_at | 1457851_at | --- | 0.0245* | -0.0175 |
1416575_at | 1416575_at | 细胞分裂周期45同源物(酿酒酵母)样 | 0.0234* | -0.0167 |
1422922_at | 1422922_at | RecQ蛋白样4 | 0.0234* | -0.0167 |
1456510_x_at | 1456510_x_at | UbiE-YGHL1融合蛋白 | 0.0231* | -0.0165 |
1448871_at | 1448871_at | 促分裂原激活蛋白激酶13 | 0.0226* | -0.0161 |
1450495_a_at | 1450495_a_at | 杀伤细胞凝集素样受体亚家族K,成员1 | 0.0225* | -0.0161 |
1442000_at | 1442000_at | 类似于新蛋白 | 0.0222* | -0.0158 |
1452098_at | 1452098_at | CTF18,染色体传递保真因子18同源物(酿酒酵母) | 0.0219* | -0.0156 |
1453049_at | 1453049_at | RTKEN cDNA 662040IM08基因 | 0.0217* | -0.0155 |
1434864_at | 1434864_at | Prader-Willi/Angelman综合征1中非印迹同源物(人) | 0.0212* | -0.0152 |
1460495_s_at | 1460495_s_at | 蛋白酶,丝氨酸,25 | 0.021* | -0.015 |
1453181_x_at | 1453181_x_at | 磷脂scramblasel | 0.0209* | -0.0149 |
1420330_at | 1420330_at | C-型凝集素结构域家族4,成员e | 0.0208* | -0.0149 |
1438011_at | 1438011_at | 磷酸胞苷酰转移酶1,胆碱,α同工型 | 0.0205* | -0.0146 |
1450344_a_at | 1450344_a_at | 前列腺E受体3(EP3亚型) | 0.0204* | -0.0146 |
1424895_at | 1424895_at | G-蛋白信号调制器2(AGS3-样,线虫) | 0.0201* | -0.0144 |
1426543_x_at | 1426543_x_at | RIKEN cDNA2310067E08基因: | 0.0193* | -0.0138 |
1423878_at | 1423878_at | 血型糖蛋白C | 0.0186* | -0.0133 |
1427263_at | 1427263_at | 灭活的X特异性转录物 | 0.0186* | -0.0133 |
1434150_a_at | 1434150_a_at | RIKEN cDNA3300001H21基因:///UbiE-YGHL1融合蛋白 | 0.0185* | -0.0132 |
1453681_at | 1453681_at | ATP酶抑制因子1 | 0.0181* | -0.013 |
1450556_at | 1450556_at | 膜收缩蛋白β1 | 0.0175* | -0.0125 |
1434554_at | 1434554_at | 三联基序蛋白37 | 0.0174* | -0.0124 |
1448529_at | 1448529_at | 血栓调节蛋白 | 0.0173* | -0.0123 |
1429404_at | 1429404_at | RIKEN cDNA2010317E24基因 | 0.0168* | -0.012 |
1432886_at | 1432886_at | RIKEN cDNA5730488B01基因 | 0.0162* | -0.0116 |
1435325_at | 1435325_at | 泛素特异性蛋白酶46 | 0.016* | -0.0114 |
1434587_x_at | 1434587_x_at | 磷脂酰丝氨酸合成酶2 | 0.0157* | -0.0112 |
1418003_at | 1418003_at | RIKEN cDNA1190002H23基因 | 0.0156* | -0.0111 |
1434310_at | 1434310_at | 骨形态发生蛋白受体,II型(丝氨酸/苏氨酸激酶) | 0.0147* | -0.0105 |
1435035_at | 1435035_at | 含RNA(鸟嘌呤-9-)甲基转移酶结构域的2 | 0.0144* | -0.0103 |
1424413_at | 1424413_at | 阿片样物质生长因子受体样1 | 0.014* | -0.01 |
1436872_at | 1436872_at | 转化,含酸性卷曲螺旋蛋白3 | 0.0133* | -0.0095 |
1417878_at | 1417878_at | E2F转录因子1 | 0.013* | -0.0093 |
1428433_at | 1428433_at | 同源结构域相互作用蛋白激酶2 | 0.0125* | -0.0089 |
1429642_at | 1429642_at | AN1,泛素样,同源物(光滑爪蟾) | 0.0122* | -0.0087 |
1435786_at | 1435786_at | Kelch样12(果蝇) | 0.0119* | -0.0085 |
1428391_at | 1428391_at | RAB3A相互作用蛋白(Rab结合蛋白3)样1 | 0.0118* | -0.0085 |
1451596_a_at | 1451596_a_at | 鞘氨醇激酶1 | 0.0117* | -0.0084 |
1422619_at | 1422619_at | 磷脂酸磷酸酶2a | 0.0111* | -0.0079 |
1449708_s_at | 1449708_s_at | 限制点激酶1同源物(裂殖酵母) | 0.0106* | -0.0076 |
1429294_at | 1429294_at | 甲状腺激素受体相互作用物13 | 0.0105* | -0.0075 |
1450862_at | 1450862_at | RAD54样(酿酒酵母) | 0.0103* | -0.0074 |
1433695_at | 1433695_at | RIKEN cDNA 1500041B16基因 | 0.0097* | -0.0069 |
1451083_s_at | 1451083_s_at | 丙氨酰-tRNA合成酶 | 0.0097* | -0.0069 |
1422620_s_at | 1422620_s_at | 磷脂酸磷酸酶2a | 0.0094* | -0.0067 |
1457722_at | 1457722_at | RIKEN cDNA A630024B12基因 | 0.0091* | -0.0065 |
1455405_at | 1455405_at | 脯氨酸-丝氨酸-苏氨酸磷酸酶相互作用蛋白2 | 0.009* | -0.0064 |
1460010_a_at | 1460010_a_at | 磷脂酰丝氨酸合成酶2 | 0.0089* | -0.0063 |
1424412_at | 1424412_at | 阿片样物质生长因子受体样1 | 0.0083* | -0.0059 |
1456475_s_at | 1456475_s_at | 蛋白激酶,cAMP依赖性调节,IIβ型 | 0.0082* | -0.0058 |
1449714_at | 1449714_at | RIKEN cDNA 5730472N09基因 | 0.0077* | -0.0055 |
1434645_at | 1434645_at | RIKEN cDNA C530008M17基因 | 0.0069* | -0.005 |
1425157_x_at | 1425157_x_at | RIKEN cDNA 1300010A20基因 | 0.0067* | -0.0048 |
1432273_a_at | 1432273_a_at | 达菲血型 | 0.0063* | -0.0045 |
1417037_at | 1417037_at | 起点识别复合体亚基6样(酿酒酵母) | 0.0062* | -0.0044 |
1428402_at | 1428402_at | 锌指,含CCHC结构域的3 | 0.0062* | -0.0044 |
1416130_at | 1416130_at | 朊病毒蛋白 | 0.0061* | -0.0043 |
1455218_at | 1455218_at | RIKEN cDNA 6330503K22基因 | 0.0056* | -0.004 |
1452166_a_at | 1452166_a_at | 角蛋白复合物,酸性基团10 | 0.0049* | -0.0035 |
1437992_x_at | 1437992_x_at | 间隙连接膜通道蛋白α1 | 0.0037* | -0.0026 |
1449015_at | 1449015_at | 抵抗素样α | 0.0033* | -0.0023 |
1428713_s_at | 1428713_s_at | RIKEN cDNA 4833427B12基因 | 0.0032* | -0.0023 |
1427105_at | 1427105_at | RIKEN cDNA 2610510J17基因 | 0.0031* | -0.0022 |
1426541_a_at | 1426541_a_at | RIKEN cDNA 2310067E08基因 | 0.0028* | -0.002 |
1424293_s_at | 1424293_s_at | RIKEN cDNA 2610319K07基因 | 0.0024* | -0.0017 |
1423724_at | 1423724_at | ZW10相互作用物 | 0.002* | -0.0014 |
1451609_at | 1451609_at | RIKEN cDNA1300010A20基因 | 0.0018* | -0.0013 |
1417902_at | 1417902_at | 溶质载体家族19(硫胺转运蛋白),成员2 | 0.0016* | -0.0012 |
1424292_at | 1424292_at | 含DEP结构域的1a | 0.0015* | -0.0011 |
1455983_at | 1455983_at | 细胞分裂周期相关2 | 0.0015* | -0.0011 |
1448211_at | 1448211_at | ATP酶,H+转运,溶酶体的,V0亚基E同工型2 | 0.0013* | -9.00E-04 |
1453769_at | 1453769_at | RIKEN cDNA 2610318C08基因 | 0.0012* | -9.00E-04 |
1417892_a_at | 1417892_a_at | Sirtuin3(沉默交配型信息调节2,同源物)3(酿酒酵母) | 6.00E-04* | -4.00E-04 |
1428195_at | 1428195_at | RIKEN cDNA 4631427C17基因 | -1.00E-04# | 1.00E-04 |
1450932_s_at | 1450932_s_at | 胞质分裂9的奉献者 | -3.00E-04# | 2.00E-04 |
1417652_a_at | 1417652_a_at | 微管蛋白辅因子a | -4.00E-04# | 3.00E-04 |
1455210_at | 1455210_at | 锌指和同源异型框蛋白2 | -0.0014# | 0.001 |
1419103_a_at | 1419103_a_at | 含自水解酶结构域的6 | -0.0015# | 0.001 |
1441975_at | 1441975_at | 酸性磷酸酶,前列腺 | -0.0017# | 0.0012 |
1419119_at | 1419119_at | 造血细胞信号传感器 | -0.0019# | 0.0013 |
1449508_at | 1449508_at | 白介素27受体α | -0.0025# | 0.0018 |
1445711_at | 1445711_at | 表达的序列BB163080 | -0.0029# | 0.002 |
1426044_a_at | 1426044_a_at | 蛋白激酶C,θ | -0.0036# | 0.0026 |
1424903_at | 1424903_at | Jumonji,富含AT的相互作用结构域ID(Rbp2样) | -0.0037# | 0.0027 |
1416035_at | 1416035_at | --- | -0.0045# | 0.0032 |
1460260_s_at | 1460260_s_at | 亲核蛋白(核转运蛋白)α1 | -0.0046# | 0.0033 |
1439956_at | 1439956_at | 成人雄性主动脉和静脉cDNA,RIKEN全长富集文库,克隆:A530049N04产物:未知EST,全部插入序列 | -0.0048# | 0.0034 |
1416406_at | 1416406_at | 星形细胞中富含的磷蛋白15 | -0.0051# | 0.0036 |
1419548_at | 1419548_at | 亲核蛋白(核转运蛋白)α1 | -0.0054# | 0.0039 |
1437756_at | 1437756_at | GTP酶,IMAP家族成员9 | -0.0056# | 0.004 |
1436067_at | 1436067_at | 含锌指和BTB结构域的10 | -0.0058# | 0.0042 |
1450710_at | 1450710_at | jumonji,富含AT相互作用结构域2 | -0.0061# | 0.0044 |
1433955_at | 1433955_at | 含布罗莫结构域和WD重复结构域的1 | -0.0067# | 0.0048 |
1439343_at | 1439343_at | 3天婴儿胸腺cDNA,RIKEN全长富集文库,克隆:A630050A01产物:未分类,全部插入序列 | -0.0073# | 0.0052 |
1426771_at | 1426771_at | 表达的序列AI316828 | -0.0079# | 0.0057 |
1419722_at | 1419722_at | 蛋白酶,丝氨酸19(neuropsin) | -0.0085# | 0.0061 |
1419810_x_at | 1419810_x_at | Rho GTP酶活化蛋白9 | -0.0099# | 0.0071 |
1452322_a_at | 1452322_a_at | 含布罗莫结构域和WD重复结构域的1 | -0.0106# | 0.0076 |
1446835_at | 1446835_at | --- | -0.011# | 0.0078 |
1417371_at | 1417371_at | pellino 1 | -0.0111# | 0.0079 |
1436353_at | 1436353_at | RIKEN cDNA A230046K03基因 | -0.0114# | 0.0082 |
1420685_at | 1420685_at | GRB2相关的接头蛋白2 | -0.0115# | 0.0082 |
1456440_s_at | 1456440_s_at | 转录座位 | -0.0117# | 0.0084 |
1454742_at | 1454742_at | RasGEF域家族,成员1B | -0.0122# | 0.0087 |
1450024_at | 1450024_at | 融合同源物的阻抑基因(果蝇) | -0.0125# | 0.009 |
1433953_at | 1433953_at | 锌指蛋白277 | -0.0135# | 0.0096 |
1417210_at | 1417210_at | 真核翻译起始因子2,亚基3,结构基因Y连锁的 | -0.0137# | 0.0098 |
1444828_at | 1444828_at | 蛋白质磷酸酶2,调节亚基B(B56),同工型 | -0.0139# | 0.0099 |
1447502_at | 1447502_at | --- | -0.014# | 0.01 |
1422445_at | 1422445_at | 整联蛋白的α6 | -0.0148# | 0.0106 |
1453244_at | 1453244_at | RIKEN cDNA 5830416P10基因 | -0.0157# | 0.0112 |
1426725_s_at | 1426725_s_at | E26鸟类白血病致癌基因1,5′结构域 | -0.0175# | 0.0125 |
1438577_at | 1438577_at | 转录座位 | -0.018# | 0.0129 |
1452077_at | 1452077_at | DEAD(Asp-Glu-Ala-Asp)框多肽3,γ-连锁的 | -0.02# | 0.0143 |
1416007_at | 1416007_at | 富含特定AT序列结合蛋白1 | -0.0203# | 0.0145 |
1426438_at | 1426438at | DEAD(Asp-Glu-Ala-Asp)框多肽3,γ-连锁的 | -0.021# | 0.015 |
1422122_at | 1422122_at | Fc受体,IgE,低亲和力II,α多肽 | -0.0213# | 0.0152 |
1434260_at | 1434260_at | FCH和双SH3结构域2 | -0.0215# | 0.0153 |
1417816_s_at | 1417816_s_at | 肿瘤差异表达1 | -0.0222# | 0.0158 |
1427532_at | 1427532_at | T细胞受体相关跨膜接头1 | -0.0222# | 0.0159 |
1454947_a_at | 1454947_a_at | cDNA序列BC002236 | -0.0224# | 0.016 |
1418235_at | 1418235_at | 自噬相关5样(酵母) | -0.0243# | 0.0173 |
1418353_at | 1418353_at | CD5抗原 | -0.0258# | 0.0184 |
1450262_at | 1450262_at | Car样细胞因子1 | -0.026# | 0.0186 |
1455165_at | 1455165_at | 转录座位 | -0.0268# | 0.0191 |
1439595_at | 1439595_at | T细胞受体α链 | -0.0272# | 0.0194 |
1426620_at | 1426620_at | 碳水化合物磺基转移酶10 | -0.0278# | 0.0198 |
1454745_at | 1454745_at | Rho GTP酶活化蛋白29 | -0.029# | 0.0207 |
1439719_at | 1439719_at | RIKEN cDNA E430004N04基因 | -0.0292# | 0.0208 |
1435374_at | 1435374_at | 转录座位 | -0.0302# | 0.0216 |
1456678_at | 1456678_at | RIKEN cDNA 1700091G21基因 | -0.0306# | 0.0218 |
1423176_at | 1423176_at | ErbB-2.1的传感器 | -0.0348# | 0.0249 |
1424374_at | 1424374_at | GTP酶,IMAP家族成员4 | -0.0355# | 0.0253 |
1446614_at | 1446614_at | 二酰基甘油激酶ζ | -0.0359# | 0.0257 |
1448862_at | 1448862_at | 细胞间粘附分子2 | -0.0365# | 0.0261 |
1439036_a_at | 1439036_a_at | ATP酶,Na+/K+转运,β1多肽 | -0.0375# | 0.0268 |
1442023_at | 1442023_at | RIKEN cDNA A530030E21基因 | -0.0376# | 0.0269 |
1436182_at | 1436182_at | 富含特定AT序列结合蛋白1 | -0.0385# | 0.0275 |
1443703_at | 1443703_at | 转录座位 | -0.0385# | 0.0275 |
1422562_at | 1422562_at | 与糖尿病相关的Ras | -0.0396# | 0.0283 |
1454893_at | 1454893_at | RIKEN cDNA 1110013L07基因 | -0.0402# | 0.0287 |
1427831_s_at | 1427831_s_at | 锌指蛋白260 | -0.0404# | 0.0289 |
1452163_at | 1452163_at | E26鸟白血病致癌基因1,5′结构域 | -0.0417# | 0.0298 |
1421570_at | 1421570_at | 白介素9受体 | -0.0431# | 0.0308 |
1442998_at | 1442998_at | 胞嘧啶核苷5′-三磷酸合成酶2 | -0.0437# | 0.0312 |
1426452_a_at | 1426452_a_at | RAB30,RAS致癌基因家族成员 | -0.0473# | 0.0338 |
1431980_a_at | 1431980_a_at | 砷(+3氧化态)甲基转移酶 | -0.0478# | 0.0341 |
1456205_x_at | 1456205_x_at | 微管蛋白辅因子a | -0.048# | 0.0343 |
1441041_at | 1441041_at | RIKEN cDNA 2810407L07基因 | -0.0491# | 0.0351 |
1427418_a_at | 1427418_a_at | 低氧可诱导因子1,α亚基 | -0.0492# | 0.0351 |
1456502_at | 1456502_at | 双特异性酪氨酸-(Y)-磷酸化调节激酶2 | -0.0502# | 0.0358 |
1432229_a_at | 1432229_a_at | 染色体结构域蛋白,Y染色体样2 | -0.0516# | 0.0368 |
1453726_s_at | 1453726_s_at | RIKEN cDNA 2810407CO2基因 | -0.0517# | 0.0369 |
1440343_at | 1440343_at | 核糖体蛋白S6激酶,多肽5 | -0.0519# | 0.037 |
1435584_at | 1435584_at | 表达的序列AI662791 | -0.0522# | 0.0373 |
1419481_at | 1419481_at | 选择蛋白,淋巴细胞 | -0.0524# | 0.0374 |
1437907_a_at | 1437907_a_at | 微管蛋白辅因子a | -0.0532# | 0.038 |
1419192_at | 1419192_at | 白介素4诱导的1 | -0.0554# | 0.0395 |
1424936_a_at | 1424936_a_at | 动力蛋白,纤毛轴,重链8 | -0.0562# | 0.0402 |
1448931_at | 1448931_at | 组织凝血活酶II(凝血酶)受体样2 | -0.0571# | 0.0408 |
1423890_x_at | 1423890_x_at | ATP酶,Na+/k+转运,β1多肽 | -0.0582# | 0.0415 |
1458432_at | 1458432_at | 酪氨酸激酶接头蛋白的2-非催化区域 | -0.0588# | 0.042 |
1440217_at | 1440217_at | 类似于假定蛋白FLJ39743 | -0.0593# | 0.0424 |
1440647_at | 1440647_at | 信号诱导的增生相关1样1 | -0.0596# | 0.0426 |
1440284_at | 1440284_at | 转录座位 | -0.0598# | 0.0427 |
1457691_at | 1457691_at | 转录座位 | -0.0614# | 0.0439 |
1455256_at | 1455256_at | TRAF2和NCK相互作用激酶 | -0.0625# | 0.0447 |
1421628_at | 1421628_at | 白介素18受体1 | -0.0635# | 0.0454 |
1442045_at | 1442045_at | 16天婴儿胸腺cDNA,RIKEN全长富集文库,克隆:A130046K23产物:未知EST,全部插入序列 | -0.0635# | 0.0453 |
1452737_at | 1452737_at | RIKEN cDNA 2810008M24基因 | -0.0673# | 0.0481 |
1419480_at | 1419480_at | 选择蛋白,淋巴细胞 | -0.0683# | 0.0488 |
1459632_at | 1459632_at | 富含半胱氨酸的运动神经元 | -0.0722# | 0.0516 |
1427359_at | 1427359_at | RIKEN cDNA A630082K20基因 | -0.0757# | 0.0541 |
1426640_s_at | 1426640_s_at | tribbles同源物2(果蝇) | -0.0783# | 0.0559 |
1435754_at | 1435754_at | DNA 片段Chr6,Brigham & Women’sGenetics 1452表达的 | -0.0791# | 0.0565 |
1460204_at | 1460204_at | 细胞质酪氨酸激酶Dscr28C相关的(果蝇) | -0.0803# | 0.0574 |
1454897_at | 1454897_at | RIKEN cDNA 6330509M05基因 | -0.0804# | 0.0574 |
1449520_at | 1449520_at | 表达序列AI428795 | -0.0813# | 0.058 |
1421622_a_at | 1421622_a_at | Rap鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)4 | -0.0841# | 0.0601 |
1425245_a_at | 1425245_a_at | G蛋白信号的调节子11 | -0.0842# | 0.0602 |
1416008_at | 1416008_at | 富含特定AT序列结合蛋白1 | -0.0847# | 0.0605 |
1452009_at | 1452009_at | RIKEN cDNA 9130422G05基因 | -0.0861# | 0.0615 |
1445141_at | 1445141_at | κB激酶β的抑制子 | -0.0875# | 0.0625 |
1431169_at | 1431169_at | RIKEN cDNA D230012E17基因 | -0.0878# | 0.0627 |
1443192_at | 1443192_at | RIKEN cDNA E430004N04基因 | -0.0882# | 0.063 |
1428834_at | 1428834_at | 双特异性磷酸酶4 | -0.091# | 0.065 |
1423989_at | 1423989_at | RIKEN cDNA 2210010N04基因 | -0.0914# | 0.0653 |
1443573_at | 1443573_at | 聚(ADP-核糖)聚合酶家族,成员1 | -0.0916# | 0.0654 |
1450061_at | 1450061_at | 外胚层神经皮层1 | -0.0959# | 0.0685 |
1452503_a_at | 1452503_a_at | 含布罗莫结构域和WD重复结构域的1 | -0.0969# | 0.0692 |
1451313_a_at | 1451313_a_at | RIKEN cDNA 1110067D22基因 | -0.1008# | 0.072 |
1437253_at | 1437253_at | RIKEN cDNA A630054L15基因 | -0.1009# | 0.072 |
1428726_at | 1428726_at | 含THUMP结构域的2 | -0.1017# | 0.0727 |
1451622_at | 1451622_at | 含LMBR1结合域的1 | -0.103# | 0.0736 |
1435456_at | 1435456_at | 表达的序列AI428795 | -0.1035# | 0.0739 |
1444181_at | 1444181_at | GTP酶,IMAP家族成员5 | -0.1036# | 0.074 |
1418762_at | 1418762_at | 衰变加速因子1 | -0.1059# | 0.0757 |
1423297_at | 1423297_at | 内收蛋白3(γ) | -0.1071# | 0.0765 |
1425518_at | 1425518_at | Rap鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)4 | -0.1071# | 0.0765 |
1427322_at | 1427322_at | 含布罗莫结构域和WD重复结构域的1 | -0.1084# | 0.0775 |
1426158_at | 1426158_at | T细胞受体,变体13 | -0.1126# | 0.0804 |
1416129_at | 1416129_at | RIKEN cDNA 1300002F13基因 | -0.1139# | 0.0814 |
1426550_at | 1426550_at | SID1跨膜家族成员1 | -0.1143# | 0.0817 |
1428510_at | 1428510_at | latrophilin1 | -0.1187# | 0.0848 |
1456520_at | 1456520_at | RIKEN cDNA 9530033F24基因 | -0.1202# | 0.0859 |
1419212_at | 1419212_at | Icos配体 | -0.126# | 0.09 |
1437540_at | 1437540_at | --- | -0.1261# | 0.0901 |
1429969_at | 1429969_at | RIKEN cDNA 4833403J16基因 | -0.13# | 0.0929 |
1459722_at | 1459722_at | 含锌指、SWIM结构域的6 | -0.13# | 0.0928 |
1449642_at | 1449642_at | EB病毒诱导基因2 | -0.1319# | 0.0942 |
1444283_at | 1444283_at | GTP酶,IMAP家族成员7 | -0.1324# | 0.0945 |
1434333_a_at | 1434333_a_at | 蛋白激酶D2 | -0.1329# | 0.0949 |
1453119_at | 1453119_at | 含OUT结合域的1 | -0.1339# | 0.0957 |
1421852_at | 1421852_at | 钾通道亚家族K成员5 | -0.1385# | 0.099 |
1425186_at | 1425186_at | 含LMBR1结构域的1 | -0.1443# | 0.103 |
1433977_at | 1433977_at | 硫酸类肝素(葡萄糖胺)3-O-磺基转移酶3B1 | -0.1462# | 0.1044 |
1436491_at | 1436491_at | RIKEN cDNA 5830431A10基因 | -0.1518# | 0.1084 |
1460242_at | 1460242_at | 衰变加速因子1 | -0.1524# | 0.1088 |
1445277_at | 1445277_at | 16天婴儿胸腺cDNA,RIKEN全长富集文库,克隆:A130006J10产物:未知EST,全部插入序列 | -0.1527# | 0.1091 |
1418497_at | 1418497_at | 成纤维细胞生长因子13 | -0.1588# | 0.1134 |
1455425_at | 1455425_at | 表达序列BB001228 | -0.1632# | 0.1166 |
1418998_at | 1418998_at | 犬尿氨酸3-单加氢酶(犬尿氨酸3-羟化酶) | -0.1673# | 0.1195 |
1452167_at | 1452167_at | RIKEN cDNA2 810407C02基因 | -0.1698# | 0.1213 |
1442266_at | 1442266_at | 表达序列AI662175 | -0.1713# | 0.1223 |
1439843_at | 1439843_at | 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV | -0.1732# | 0.1237 |
1427752_a_at | 1427752_a_at | T细胞受体β,变体13///类似于TCRBV7S1///类似于TCRBV7S1 | -0.1805# | 0.1289 |
1451253_at | 1451253_at | 包含PX结构域的丝氨酸/苏氨酸激酶 | -0.1819# | 0.1299 |
1428669_at | 1428669_at | 脑表达的髓细胞组织增生致癌基因 | -0.1862# | 0.133 |
1434967_at | 1434967_at | 含锌指,SWIM结构域的6 | -0.1869# | 0.1335 |
1422231_a_at | 1422231_a_at | 肿瘤坏死因子受体超家族,成员25 | -0.1906# | 0.1361 |
1428914_at | 1428914_at | RIKEN cDNA 2310014D11基因 | -0.1917# | 0.1369 |
1434175_s_at | 1434175_s_at | RIKEN cDNA 2210010N04基因 | -0.2013# | 0.1438 |
1416268_at | 1416268_at | E26鸟白血病致癌基因2,3′域 | -0.203# | 0.145 |
1436851_at | 1436851_at | 蛋白激酶N1 | -0.2037# | 0.1455 |
1438862_at | 1438862_at | RIKEN cDNA A630005104基因 | -0.2078# | 0.1484 |
1448107_x_at | 1448107_x_at | 激肽释放酶6 | -0.2085# | 0.149 |
1424062_at | 1424062_at | 泛素缀合酶E2D,UBC4/5同源物(酵母) | -0.2114# | 0.151 |
1444003_at | 1444003_at | 肺可诱导的中和相关的C3HC4RING域蛋白 | -0.2133# | 0.1524 |
1428267_at | 1428267_at | DEAH(Asp-Glu-Ala-His)框多肽40 | -0.2217# | 0.1584 |
1443906_at | 1443906_at | 衰变加速因子1 | -0.2229# | 0.1592 |
1420583_a_at | 1420583_a_at | RAR相关的孤儿基因受体 | -0.2261# | 0.1615 |
1420965_a_at | 1420965_a_at | 外胚层神经皮层1 | -0.2282# | 0.163 |
1446244_at | 1446244_at | DNA区段,Chr6,Brigham&Women′s Genetics 1452表达的 | -0.2305# | 0.1647 |
1440900_at | 1440900_at | 成人胸腺cDNA,RIKEN全长富集文库,克隆:5830404C02产物:未知EST,全部插入序列 | -0.2324# | 0.166 |
1416958_at | 1416958_at | 核受体亚家族1,D组,成员2 | -0.2348# | 0.1677 |
1425832_a_at | 1425832_a_at | 趋化因子(C-X-C基序)受体6 | -0.2391# | 0.1708 |
1447792_x_at | 1447792_x_at | 成人胸腺cDNA,RIKEN全长富集文库,克隆:5830404C02产物:未知EST,全部插入序列 | -0.2451# | 0.1751 |
1429443at | 1429443_at | copine IV | -0.2472# | 0.1766 |
1455555_at | 1455555_at | 表达序列AV071699 | -0.251# | 0.1793 |
1415837_at | 1415837_at | 激肽释放酶6 | -0.2687# | 0.1919 |
1453568_at | 1453568_at | RIKEN cDNA2310032F03基因 | -0.2765# | 0.1975 |
1452815_at | 1452815_at | 嘌呤能受体P2Y G蛋白偶联的10 | -0.2789# | 0.1992 |
1446412_at | 1446412_at | 含WW结构域的氧化还原酶 | -0.2819# | 0.2014 |
1448575_at | 1448575_at | 白介素7受体 | -0.2862# | 0.2044 |
1431050_at | 1431050_at | 核糖体蛋白S6激酶多肽5 | -0.291# | 0.2078 |
1448576_at | 1448576_at | 白介素7受体 | -0.3125# | 0.2232 |
1422812_at | 1422812_at | 趋化因子(C-X-C基序)受体6 | -0.314# | 0.2243 |
1437356_at | 1437356_at | EB病毒诱导基因2 | -0.322# | 0.23 |
1448613_at | 1448613_at | 脑外基质蛋白1 | -0.3377# | 0.2412 |
1433779_at | 1433779_at | 癌症易感候选者4 | -0.4293# | 0.3066 |
mir155mRNA标记:*表明在小鼠mir155中过表达的基因,#表明下表达的基因。分数是PAM分数(Tibshirani,R.J.,Hastie,T.J.,Narasimhan,B.,和Chu,G.(2002),"Diagnosis of multiplecancer types by shrunken centroids of gene expression,"Proceedings of the National Academy of Sciences,99,6567-6572)。“nearest shrunken centroids”的PAM方法,鉴定了最好表征mir155转基因的基因的亚类。PAM分数不是倍数变化。
表3.根据微阵列预测分析的(PAM)分类,Affymetrix微阵列数据描述了在mir155转基因小鼠中显著过表达的微小RNA的标记(5只转基因小鼠和6只野生型小鼠)。
名称 miR155分数 wt分数
mmu-mir-151-prec 3.9218* -2.2411
mmu-mir-217-precNo2 3.1565* -1.8037mmu-mir-224-precformer175No1 1.9286* -1.1021
mmu-mir-194-prec 1.6021* -0.9155
mmu-mir-201-prec 1.5653* -0.8945
mmu-mir-155-prec 1.4967* -0.8553
mmu-mir-218-2-precNo2 0.939* -0.5365
mmu-mir-182-prec 0.4886* -0.2792
mir155微小RNA标记:*表明在Eμ-mmu-miR155转基因小鼠中显著过表达的微小RNA。
这里引用的所有出版物的相关教导,其没有明确地引入作为参考,都以其全部内容引入这里作为参考。同时本发明尤其参考其优选实施方案说明和描述,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明进行形式和细节的各种改变,而不背离附加的权利要求所包含的本发明的范围。
Claims (28)
1.一种转基因非人动物,其基因组包括含有能指导在动物的B细胞中表达的至少一个转录调节序列的核酸构建体,其中所述的转录调节序列与编码miR155基因产物的核酸可操作连接,该miR155基因产物包含与SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2具有至少90%序列同一性的核苷酸序列。
2.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中至少一个转录调节序列包括VH启动子。
3.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中至少一个转录调节序列包括Ig重链-Eμ增强子。
4.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中核酸编码包括SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2的miR155基因产物。
5.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中VH启动子来源于小鼠。
6.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中Ig重链-Eμ增强子来源于小鼠。
7.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中动物是小鼠。
8.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中相对于适合的对照,该动物的脾,骨髓或两者中具有扩大的B2201ow/CD191ow/CD101ow/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样细胞群体。
9.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中动物显示淋巴组织增生疾病。
10.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中淋巴组织增生疾病是B细胞恶性肿瘤。
11.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中B细胞恶性肿瘤是白血病,淋巴瘤或赘生物。
12.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中淋巴组织增生疾病是白血病前期状况。
13.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中该动物显示扩大的B2201ow/CD191ow/CD101ow/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样细胞群体,增大的腹部,脾肿大,骨髓取代,淋巴细胞减少和其组合。
14.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中核酸构建体包括β球蛋白基因的3’UTR和聚腺苷酸序列。
15.如前述权利要求中任一项的转基因非人动物,其中B细胞恶性肿瘤显示人急性淋巴母细胞性白血病,人淋巴母细胞性淋巴瘤或其组合的特征。
16.一种转基因非人动物,其基因组包括含有VH启动子和Ig重链-Eμ增强子的核酸构建体,该核酸构建体与编码包含SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2的miR155基因产物的核酸可操作连接。
17.一种确定试剂是否影响受试者中的淋巴组织增生疾病的方法,包括:
a)施用所述试剂给转基因的非人动物,该动物的基因组包括含有能指导在动物的B细胞中表达的至少一个转录调节序列的核酸构建体,该转录调节序列与编码miR155基因产物的核酸可操作连接,该miR155基因产物包含与SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2具有至少90%序列同一性的核苷酸序列;和
b)所述试剂已经施用给所述转基因动物以后,将所述转基因动物中的所述淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象与相同基因型的对照动物的进行比较,其中所述对照动物没有施用所述试剂,
其中相对于所述对照动物,所述转基因动物中所述淋巴组织增生疾病的所述一种或多种症状和/或征象的可检测性和/或出现率的差异是该试剂影响淋巴组织增生疾病的指示。
18.一种测试试剂在治疗或预防受试者中的淋巴组织增生疾病中的治疗功效的方法,包括:
(a)施用所述试剂给转基因的非人动物,该动物的基因组包括含有能指导在动物的B细胞中表达的至少一个转录调节序列的核酸构建体,其中该转录调节序列与编码miR155基因产物的核酸可操作连接,该miR155基因产物包含与SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2具有至少90%序列同一性的核苷酸序列;和
(b)所述试剂已经施用给所述转基因动物以后,将所述转基因动物中所述淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象与相同基因型的对照动物的进行比较,其中所述对照动物没有施用所述试剂;
其中如果相对于所述对照动物,所述试剂抑制,阻止和/或减轻所述转基因动物中所述淋巴组织增生疾病的所述一种或多种症状和/或征象,那么认为所述试剂在治疗或预防受试者中的淋巴组织增生疾病中具有治疗功效。
19.如前述权利要求中任一项的方法,其中至少一个转录调节序列包括VH启动子,Ig重链-Eμ增强子或其组合。
20.如前述权利要求中任一项的方法,其中转录调节序列来源于小鼠。
21.如前述权利要求中任一项的方法,其中核酸包括SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2的核苷酸序列。
22.如前述权利要求中任一项的方法,其中转基因动物是小鼠。
23.如前述权利要求中任一项的方法,其中淋巴组织增生疾病是B细胞恶性肿瘤。
24.如前述权利要求中任一项的方法,其中B细胞恶性肿瘤选自急性淋巴母细胞性白血病,B细胞淋巴瘤,B细胞赘生物和其组合。
25.如前述权利要求中任一项的方法,其中B细胞恶性肿瘤显示人急性淋巴母细胞性白血病,人淋巴母细胞性淋巴瘤或其组合的特征。
26.如前述权利要求中任一项的方法,其中淋巴组织增生疾病是白血病前期状况。
27.如前述权利要求中任一项的方法,其中白血病前期状况的特征在于前B细胞增殖。
28.如前述权利要求中任一项的方法,其中所述淋巴组织增生疾病的一种或多种症状和/或征象选自:扩大的B2201ow/CD191ow/CD101ow/IgM-/TCR-/CD43-淋巴样细胞群体,增大的腹部,脾肿大,骨髓取代,淋巴细胞减少和其组合。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US74545406P | 2006-04-24 | 2006-04-24 | |
US60/745,454 | 2006-04-24 | ||
PCT/US2007/009910 WO2007127190A2 (en) | 2006-04-24 | 2007-04-24 | Pre-b cell proliferation and lymphoblastic leukemia/high-grade lymphoma in mir155 transgenic mice |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101472470A true CN101472470A (zh) | 2009-07-01 |
CN101472470B CN101472470B (zh) | 2013-07-24 |
Family
ID=38656133
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2007800230938A Expired - Fee Related CN101472470B (zh) | 2006-04-24 | 2007-04-24 | miR155转基因小鼠中前B细胞增殖和淋巴母细胞性白血病/高度淋巴瘤 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7667090B2 (zh) |
EP (1) | EP2023944A4 (zh) |
JP (1) | JP5127821B2 (zh) |
CN (1) | CN101472470B (zh) |
AU (1) | AU2007243475B2 (zh) |
CA (1) | CA2650026C (zh) |
WO (1) | WO2007127190A2 (zh) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102120038A (zh) * | 2011-02-12 | 2011-07-13 | 华侨大学 | 一种可抑制转基因产物所致免疫反应的基因治疗药物及其制备方法 |
CN103109183A (zh) * | 2010-06-24 | 2013-05-15 | 俄亥俄州立大学 | 通过靶向的miR-29表达建立的慢性淋巴细胞白血病小鼠模型 |
CN106754699A (zh) * | 2016-12-22 | 2017-05-31 | 南京佰泰克生物技术有限公司 | miRNA‑155及其抑制剂在DC‑CIK细胞培养方面的应用 |
CN107760765A (zh) * | 2017-11-29 | 2018-03-06 | 河南农业大学 | 一种检测猪add2基因表达量的方法及应用 |
CN112574994A (zh) * | 2020-12-17 | 2021-03-30 | 河南牧业经济学院 | 一种筛选猪miR-155基因启动子活性区域及转录调控元件的方法 |
Families Citing this family (38)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1937845B1 (en) * | 2005-08-01 | 2015-06-10 | The Ohio State University Research Foundation | Micro-rna-based methods and compositions for the diagnosis, prognosis and treatment of breast cancer |
EP2796554A3 (en) * | 2005-09-12 | 2014-12-10 | The Ohio State University Research Foundation | Compositions for use in treating BCL2-associated cancers |
EP1940456A4 (en) * | 2005-10-05 | 2009-10-21 | Univ Ohio State Res Found | WWOX GENE, VECTORS COMPRISING THE SAME, AND USES THEREOF IN THE TREATMENT OF CANCER |
EP2586455B1 (en) | 2006-01-05 | 2014-06-25 | The Ohio State University Research Foundation | MicroRNA expressions abnormalities in pancreatic endocrine and acinar tumors |
ES2553442T3 (es) | 2006-01-05 | 2015-12-09 | The Ohio State University Research Foundation | Procedimientos basados en los microARN para el diagnóstico, pronóstico y tratamiento del cáncer de pulmón |
ES2536423T3 (es) | 2006-01-05 | 2015-05-25 | The Ohio State University Research Foundation | Métodos basados en microARN para el diagnóstico de cáncer de próstata |
US7985584B2 (en) | 2006-03-20 | 2011-07-26 | The Ohio State University Research Foundation | MicroRNA fingerprints during human megakaryocytopoiesis |
CN103589784A (zh) | 2006-07-13 | 2014-02-19 | 俄亥俄州立大学研究基金会 | 用于诊断和治疗结肠癌相关疾病的基于微小rna的方法和组合物 |
ATE534752T1 (de) * | 2006-09-19 | 2011-12-15 | Univ Ohio State Res Found | Tcl1-expression in durch mir-29 und mir-181 regulierter chronischer lymphozyten-leukämie (cll) |
AU2007314212B2 (en) | 2006-11-01 | 2014-05-29 | The Govt. Of The Usa As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | MicroRNA expression signature for predicting survival and metastases in Hepatocellular carcinoma |
CN103555825B (zh) | 2007-01-31 | 2015-09-30 | 俄亥俄州立大学研究基金会 | 用于急性髓细胞白血病(aml)的诊断、预后和治疗的基于微rna的方法和组合物 |
AU2008248319B2 (en) * | 2007-04-30 | 2013-09-05 | The Ohio State University Research Foundation | Methods for differentiating pancreatic cancer from normal pancreatic function and/or chronic pancreatitis |
EP2559772B1 (en) * | 2007-06-08 | 2015-04-15 | The Government of the United States of America as represented by the Secretary of the Department of Health and Human Services | Methods for determining a hepatocellular carcinoma subtype |
US8053186B2 (en) | 2007-06-15 | 2011-11-08 | The Ohio State University Research Foundation | Oncogenic ALL-1 fusion proteins for targeting Drosha-mediated microRNA processing |
US8367632B2 (en) | 2007-07-31 | 2013-02-05 | Ohio State University Research Foundation | Methods for reverting methylation by targeting methyltransferases |
US8465918B2 (en) * | 2007-08-03 | 2013-06-18 | The Ohio State University Research Foundation | Ultraconserved regions encoding ncRNAs |
JP5770472B2 (ja) | 2007-08-22 | 2015-08-26 | ジ・オハイオ・ステイト・ユニバーシティ・リサーチ・ファウンデイションThe Ohio State University Research Foundation | ヒト急性白血病におけるepha7及びerkリン酸化の調節解除を誘発するための方法及び組成物 |
CN101939446B (zh) * | 2007-09-06 | 2015-02-11 | 俄亥俄州立大学研究基金会 | 人类卵巢癌中的微小rna特征 |
CA2702241A1 (en) * | 2007-10-11 | 2009-04-16 | The Ohio State University Research Foundation | Methods and compositions for the diagnosis and treatment of esophageal adenocarcinomas |
JP2011504093A (ja) | 2007-10-26 | 2011-02-03 | ジ・オハイオ・ステイト・ユニバーシティ・リサーチ・ファウンデイション | 脆弱性ヒスチジン三連構造(fhit)相互作用を同定するための方法およびその使用 |
CA2707157A1 (en) * | 2007-11-30 | 2009-06-04 | The Ohio State University Research Foundation | Microrna expression profiling and targeting in peripheral blood in lung cancer |
EP3112477A1 (en) * | 2008-02-28 | 2017-01-04 | The Ohio State University Research Foundation | Microrna-based methods and compositions for the diagnosis, prognosis and treatment of prostate related disorders |
EP2254668A4 (en) * | 2008-02-28 | 2012-08-15 | Univ Ohio State Res Found | MICRORNA SIGNATURES ASSOCIATED WITH HUMAN CHRONIC LYMPHOCYTIC LEUKEMIA (CLL) AND THEIR USE |
EP2307028B1 (en) | 2008-06-11 | 2013-10-02 | The Government of the United States of America as represented by The Secretary of the Department of Health and Human Services | Use of mir-26 family as a predictive marker of hepatocellular carcinoma and responsiveness to therapy |
CN102803511A (zh) | 2009-11-23 | 2012-11-28 | 俄亥俄州立大学 | 用于影响肿瘤细胞生长、迁移和侵袭的材料和方法 |
CN103025384B (zh) * | 2010-03-26 | 2016-04-20 | 俄亥俄州立大学 | 涉及miR-155对于错配修复和基因组稳定性的调节的材料和方法 |
WO2012065049A1 (en) | 2010-11-12 | 2012-05-18 | The Ohio State University Research Foundation | Materials and methods related to microrna-21, mismatch repair, and colorectal cancer |
EP2640368B1 (en) | 2010-11-15 | 2020-12-30 | The Ohio State University Research Foundation | Controlled release mucoadhesive systems |
KR101382219B1 (ko) * | 2010-12-23 | 2014-04-08 | 경희대학교 산학협력단 | 미토콘드리아 기능 저하에 기인한 질환 동물 모델로서의 마이크로 알엔에이―24를 과발현한 형질전환 생쥐 |
AU2012225506B2 (en) | 2011-03-07 | 2016-11-17 | The Ohio State University | Mutator activity induced by microRNA-155 (miR-155) links inflammation and cancer |
JP2014530612A (ja) | 2011-10-14 | 2014-11-20 | ジ・オハイオ・ステート・ユニバーシティ | 卵巣がんに関する方法および材料 |
AU2012352265B2 (en) | 2011-12-13 | 2017-02-16 | Ohio State Innovation Foundation | Methods and compositions related to miR-21 and miR-29a, exosome inhibition, and cancer metastasis |
WO2013106662A1 (en) * | 2012-01-13 | 2013-07-18 | Advanced Genomic Technology, Llc | Transgeneic non-human animal model for accelerated aging and/or age-related symptom, and use thereof |
CA2866052A1 (en) | 2012-01-20 | 2013-07-25 | The Ohio State University | Breast cancer biomarker signatures for invasiveness and prognosis |
WO2016085876A1 (en) | 2014-11-25 | 2016-06-02 | The Broad Institute Inc. | Clonal haematopoiesis |
WO2016086197A1 (en) | 2014-11-25 | 2016-06-02 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Method of identifying and treating a person having a predisposition to or afflicted with a cardiometabolic disease |
WO2016164558A1 (en) * | 2015-04-07 | 2016-10-13 | Children's Medical Center Corporation | Methods and compositions relating to an embryonic stem cell-based tumor model |
WO2024047115A1 (en) | 2022-09-02 | 2024-03-07 | Leibniz-Institut Für Immuntherapie (Lit) | THERAPEUTIC USE OF THE miR155 SNP rs377265631 |
-
2007
- 2007-04-24 EP EP07776079A patent/EP2023944A4/en not_active Withdrawn
- 2007-04-24 CN CN2007800230938A patent/CN101472470B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-04-24 JP JP2009507755A patent/JP5127821B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2007-04-24 CA CA2650026A patent/CA2650026C/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-04-24 WO PCT/US2007/009910 patent/WO2007127190A2/en active Application Filing
- 2007-04-24 US US12/298,221 patent/US7667090B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-04-24 AU AU2007243475A patent/AU2007243475B2/en not_active Ceased
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103109183A (zh) * | 2010-06-24 | 2013-05-15 | 俄亥俄州立大学 | 通过靶向的miR-29表达建立的慢性淋巴细胞白血病小鼠模型 |
CN102120038A (zh) * | 2011-02-12 | 2011-07-13 | 华侨大学 | 一种可抑制转基因产物所致免疫反应的基因治疗药物及其制备方法 |
CN106754699A (zh) * | 2016-12-22 | 2017-05-31 | 南京佰泰克生物技术有限公司 | miRNA‑155及其抑制剂在DC‑CIK细胞培养方面的应用 |
CN106754699B (zh) * | 2016-12-22 | 2020-01-31 | 朗姿赛尔生物科技(广州)有限公司 | miRNA-155及其抑制剂在DC-CIK细胞培养方面的应用 |
CN107760765A (zh) * | 2017-11-29 | 2018-03-06 | 河南农业大学 | 一种检测猪add2基因表达量的方法及应用 |
CN112574994A (zh) * | 2020-12-17 | 2021-03-30 | 河南牧业经济学院 | 一种筛选猪miR-155基因启动子活性区域及转录调控元件的方法 |
CN112574994B (zh) * | 2020-12-17 | 2023-10-24 | 河南牧业经济学院 | 一种筛选猪miR-155基因启动子活性区域及转录调控元件的方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2007127190A3 (en) | 2008-04-17 |
EP2023944A2 (en) | 2009-02-18 |
WO2007127190A2 (en) | 2007-11-08 |
CN101472470B (zh) | 2013-07-24 |
AU2007243475A1 (en) | 2007-11-08 |
CA2650026C (en) | 2013-01-22 |
JP2009534051A (ja) | 2009-09-24 |
US20090222934A1 (en) | 2009-09-03 |
JP5127821B2 (ja) | 2013-01-23 |
AU2007243475B2 (en) | 2013-02-07 |
US7667090B2 (en) | 2010-02-23 |
CA2650026A1 (en) | 2007-11-08 |
EP2023944A4 (en) | 2011-10-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101472470B (zh) | miR155转基因小鼠中前B细胞增殖和淋巴母细胞性白血病/高度淋巴瘤 | |
Arrandale et al. | Insulin signaling in mice expressing reduced levels of Syp | |
Gwack et al. | Hair loss and defective T-and B-cell function in mice lacking ORAI1 | |
Jishage et al. | Role of Lkb1, the causative gene of Peutz–Jegher's syndrome, in embryogenesis and polyposis | |
Gimeno et al. | Targeted deletion of fatty acid transport protein-4 results in early embryonic lethality | |
Skynner et al. | Promoter transgenics reveal multiple gonadotropin-releasing hormone-I-expressing cell populations of different embryological origin in mouse brain | |
Rabenstein et al. | Impaired synaptic plasticity and learning in mice lacking β-adducin, an actin-regulating protein | |
Engelbrecht et al. | Sphingosine 1-phosphate-regulated transcriptomes in heterogenous arterial and lymphatic endothelium of the aorta | |
CN1354657A (zh) | 用egf-r拮抗剂防止气道粘液的过量产生 | |
Bartkowska et al. | Adult neurogenesis in the hedgehog (Erinaceus concolor) and mole (Talpa europaea) | |
Huang et al. | Role of H2-calponin in regulating macrophage motility and phagocytosis | |
WO2006095559A1 (ja) | 造血因子としてのFgf21の使用 | |
Xiao et al. | Intercellular adhesion molecule-1 is a regulator of blood–testis barrier function | |
Chen et al. | Downregulation of TNIP1 expression leads to increased proliferation of human keratinocytes and severer psoriasis-like conditions in an imiquimod-induced mouse model of dermatitis | |
Bagheri-Yarmand et al. | Activating transcription factor 4 overexpression inhibits proliferation and differentiation of mammary epithelium resulting in impaired lactation and accelerated involution | |
Kazenwadel et al. | A Prox1 enhancer represses haematopoiesis in the lymphatic vasculature | |
Simonian et al. | Regulation of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) gene expression during GnRH neuron migration in the mouse | |
CN101466410A (zh) | 新型治疗和诊断产品及方法 | |
Cui et al. | A functional polymorphism of inhibin alpha subunit at miR-181b-1-3p-binding site regulates proliferation and apoptosis of chicken ovarian granular cells | |
Hu et al. | Histone deacetylase 3 aggravates type 1 diabetes mellitus by inhibiting lymphocyte apoptosis through the microRNA-296-5p/Bcl-xl Axis | |
Srivatsan et al. | Cutting edge: Foxj1 protects against autoimmunity and inhibits thymocyte egress | |
Tuttle et al. | Leptin-a mediates transcription of genes that participate in central endocrine and phosphatidylinositol signaling pathways in 72-hour embryonic zebrafish (Danio rerio) | |
Di Nunzio et al. | Kupffer cells dictate hepatic responses to the atherogenic dyslipidemic insult | |
Yang et al. | Mup-knockout mice generated through CRISPR/Cas9-mediated deletion for use in urinary protein analysis | |
WO2021134842A1 (zh) | Zc3h12b基因或蛋白的用途及一种肝脏疾病动物模型的建立方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130724 Termination date: 20200424 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |