CN101461944A

CN101461944A - 一种磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体

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Publication number: CN101461944A
Application number: CNA2009100451607A
Authority: CN
Inventors: 杨峰; 倪泉兴; 傅德良; 金忱; 虞先浚; 龙江; 徐近; 杨东; 胡建华; 汪长春
Original assignee: Huashan Hospital of Fudan University
Current assignee: Huashan Hospital of Fudan University
Priority date: 2009-01-09
Filing date: 2009-01-09
Publication date: 2009-06-24
Anticipated expiration: 2029-01-09
Also published as: CN101461944B

Abstract

本发明属分子生物医药领域，涉及一种磁性聚丙烯酸改性碳纳米管及其制备方法。本发明将多壁碳纳米管经聚丙烯腈改性后，在酸性条件下水解得含有大量羧基的聚丙烯酸改性的水溶性碳纳米管，通过水相化学共沉淀法制成磁性四氧化三铁－聚丙烯酸改性多壁碳纳米管复合体，直径10－80nm，具有良好的淋巴趋向性能和强磁响应性，经实验证实，所述的药物载体能有效吸附化疗药物至淋巴系统内，能够在恶性肿瘤的转移淋巴结内缓慢释放化疗药物，且具有良好的磁场定位效应，能明显抑制淋巴结的肿瘤细胞的增殖和转移。为恶性肿瘤淋巴转移提供一种新的干预手段，

Description

一种磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体

技术领域

本发明属分子生物医药制造领域，涉及恶性肿瘤淋巴磁导向化疗新载体，具体涉及一种用于治疗恶性肿瘤淋巴结转移的具有磁导向功能的新载体——磁性聚丙烯酸改性碳纳米管及其制备方法。

背景技术

大量的临床研究已经证明，淋巴结转移是恶性肿瘤最重要的转移途径之一，也是影响其预后的重要因素。然而，尽管恶性肿瘤的诊断和综合治疗已取得长足进步，多数已有淋巴结转移的癌症患者生存期并未见明显延长。其主要原因包括，放疗和全身化疗对淋巴结转移的作用不理想且毒副作用大；根治性手术并不能完全阻止肿瘤早期复发，可能是因为手术时隐灶的肿瘤细胞已侵犯或转移至手术区外；外科手术中可能切断淋巴管，分破转移的淋巴结，使肿瘤细胞逸漏到周围组织；同时手术操作可能牵扯或挤压肿瘤，可使肿瘤细胞向远处播散；手术还可能遗漏含肿瘤细胞的细小淋巴结及少数跳跃式转移的淋巴结，这些因素均可造成癌症的术后复发。辅助化疗对降低恶性肿瘤术后复发具有重要意义，但静脉化疗、区域性动脉灌注化疗和局部植入化疗使药物在体内主要通过血液转运，由于血流速度是淋巴流速的200~500倍，故局部淋巴结中的药物浓度极低，可见普通的辅助化疗方式对恶性肿瘤淋巴结转移疗效有限。

淋巴化疗又称淋巴结靶向化疗、药物性淋巴结清扫，是利用淋巴系统具有吞噬大分子物质和微粒的特性，将化疗药物与载体共价结合、物理包裹或吸附，改变药物的药代动力学，保持药物活性，构成淋巴靶向给药系统；利用淋巴回流较慢的特点，通过淋巴靶向给药系统维持局部药物浓度平衡的方式缓释化疗药，使区域淋巴结内较长时间维持抗癌药物高浓度，从而有效杀伤淋巴系统内的肿瘤细胞；还可重新调整局部淋巴结内的免疫活性，恢复淋巴细胞功能，消灭残存的肿瘤细胞，达到减少肿瘤经淋巴途径转移，控制药物进入血循环，降低化疗副反应的目的。目前用于淋巴靶向的载体有活性炭、脂质体以及高分子偶联前体药物包括多糖如葡聚糖、甲壳胺和多肽类的聚谷酰胺、聚天冬酰胺等。这些载体在淋巴化疗中发挥了一定的作用，但仍有不尽人意之处，如载药量少、粒径大小难以控制、靶向性差、不能作为示踪剂以及对诊断无帮助。

研究表明，亲淋巴物质在淋巴循环中流动很快，皮下注射一般染料后5分钟即可在区域淋巴结检测到相应物质。事实上，进入毛细淋巴管的大分子物质或微粒随淋巴液在淋巴管内流动，除了少量经淋巴静脉通路直接进入血循环外，其余大部分流向区域淋巴结。这些进入淋巴结的物质，一部分在窦间隙内被摄取或被网状内皮系统主动吞噬，另一部分则经输出淋巴管行向上一站淋巴结，最后经胸导管或右侧淋巴导管进入血液。可见要提高靶向治疗效果，必须使载药的亲淋巴载体在靶淋巴结中积聚足够多，再利用载体的缓释特性，缓慢释放药物，从而达到延长药物在靶淋巴结中的滞留时间，提高局部药物浓度的目的。磁靶向给药系统是将药物与磁性物质配置在一个稳定系统中，通过外磁场作用将载体定位于靶区，其所含药物定位释放、集中在病变部位而发挥作用。它是目前国内外大力研究治疗恶性肿瘤的一种新型药物靶向系统。与常规化疗相比，磁性药物联合外磁场对肿瘤细胞的靶向性更强，不良反应小，疗效好。淋巴化疗和磁靶向治疗具有共同的优势，既提高疗效，又降低毒副反应，若将两者联合使用，其协同效应是显而易见的。

碳纳米管(Carbon nanotube，CNT)是1991年日本科学家Iijima发现的，被认为是碳原子形成的石墨片层卷成的无缝、中空的管体，分为单壁碳纳米管(Single-walled carbon nanotubes，SWCNTs)和多壁碳纳米管(Multi-walled carbon nanotubes，MWCNTs)两种。由于具有优越的力学、电磁学和化学性能，碳纳米管是目前物理、化学和材料科学最前沿的研究领域。近年来，功能化碳纳米管在生物医学领域中已被用作许多制剂，如药物、抗原、DNA、疫苗、蛋白和基因载体。由于具有强磁响应性，加之碳纳米管与许多高分子聚合物具有良好的相容性，磁性碳纳米管(Magnetic carbonnanotube，mCNT)将成为一种很有潜力的多功能材料，用途十分广泛，如制备便携式电子材料、磁力显微镜悬梁尖端、微流体装置磁力搅拌器和纳米流体装置磁力阀门。最有诱惑力的莫过于将其作为磁靶向药物载体，在磁场作用下把药物运送至体内靶器官或靶组织。

发明内容

本发明的目的是提供一种恶性肿瘤淋巴磁导向化疗新载体，具体涉及一种用于治疗恶性肿瘤淋巴结转移的具有磁导向功能的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管。

本发明将磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体用于恶性肿瘤的淋巴转移治疗，能提高抗肿瘤淋巴转移的治疗效果，为恶性肿瘤淋巴转移提供一种新的干预手段。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

通过制备具有强吸附性和良好淋巴趋向性的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体，将载体吸附化疗药物，携载进入恶性肿瘤的转移淋巴结内缓慢释放，达到杀伤肿瘤细胞的有效浓度，实现恶性肿瘤淋巴磁导向化疗的目的。

所述的多壁碳纳米管经过聚丙烯腈改性后，在酸性条件下水解得到含有大量羧基的聚丙烯酸改性的水溶性碳纳米管，然后通过水相化学共沉淀方法制成磁性四氧化三铁-聚丙烯酸改性多壁碳纳米管复合体。本发明选择长度和直径合适的碳纳米管用作淋巴化疗的药物载体，该纳米药物载体的直径10-80nm，具有良好的淋巴趋向性能。

磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体吸附化疗药物后能有效地携载至恶性肿瘤的转移淋巴结内，且缓慢释放；在外磁场作用下，其使得淋巴结内的药物浓度显著升高，而血浆内的药物浓度明显低下。

本发明的另一目的是提供所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体的制备方法。

本发明包括下述步骤：

1)采用气相共沉积法制备多壁碳纳米管，通过丙烯腈乳液聚合，在酸性条件下水解得聚丙烯酸改性的水溶性碳纳米管；所述水溶性碳纳米管直径10-80nm，优选40nm，

2)采用水相化学共沉淀方法制成磁性四氧化三铁-聚丙烯酸改性多壁碳纳米管复合体；

3)采用体内连续筛选接种法制备人恶性肿瘤淋巴道转移的裸鼠模型，通过SD大鼠和人恶性肿瘤淋巴道转移裸鼠模型检验磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体的淋巴趋向性；

4)通过超声水浴将磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体与化疗药物混合进行物理吸附，制成具特定粒径的携载有化疗药物的磁性纳米复合体，超声水浴的条件为：40kHz，30分钟；

5)检验动物体内磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体携载化疗药物磁靶向至靶淋巴结的药代动力学；

6)通过体内、外实验，检验磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体吸附化疗药物后抗恶性肿瘤细胞增殖和抗恶性肿瘤淋巴转移的效果。

本发明将磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体用于恶性肿瘤的淋巴转移治疗：

在体外试验中，磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体吸附化疗药物显现出较单用化疗药物强的肿瘤细胞抑制率，而单纯磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体的细胞毒性很小；体内实验证实，磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体吸附化疗药物能有效治疗恶性肿瘤的淋巴结转移；在外磁场作用下，这一作用更加明显。

通过体外B超、CT或超声内镜等辅助设备定位后进行肿瘤穿刺，将已吸附化疗药物的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体注入实体肿瘤内，由于肿瘤实体内存在着丰富的淋巴管，依靠其自身的淋巴系统强渗透滞留效应，磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体进入肿瘤淋巴管系统内缓慢释放药物，同时在磁场的精确定位下，携载有化疗药物的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体在转移的淋巴结内缓慢控释此药物，使化疗药物能够长时间达到杀伤肿瘤细胞的有效浓度，起到淋巴磁导向化疗的作用。

本发明经实验证实，所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体能有效吸附化疗药物至淋巴系统内，能够在恶性肿瘤的转移淋巴结内缓慢释放化疗药物，且具有良好的磁场定位效应，能明显抑制淋巴结的肿瘤细胞的增殖。

附图说明

图1是聚丙烯酸改性多壁碳纳米管的合成路径图。

图2是原始多壁碳纳米管和磁性聚丙烯酸改性的多壁碳纳米管透射电镜图。

图3是人胰腺癌淋巴道转移的裸鼠模型及转移淋巴结病理染色，

其中，A为接种5周后，爪垫部位原发瘤；B为转移的腘窝淋巴结；C为淋巴结中央区内见小团状癌细胞；D为淋巴结内见单个癌细胞。

图4是淋巴结黑染情况，

其中，A为黑染的腘窝淋巴结；B为黑染的髂动脉旁淋巴结；C为黑染淋巴结的镜下观。

图5淋巴结内吉西他滨浓度随时间变化曲线。

图6血浆内吉西他滨浓度随时间变化曲线。

图7肿瘤细胞抑制率，

其中，GEM：吉西他滨；mMWNT：磁性聚丙烯酸改性碳纳米管；mMWNT-GEM：磁性聚丙烯酸改性碳纳米管吸附吉西他滨。

图8不同时间段BxPC-3和SW1990细胞增殖指数变化情况，

其中，PI细胞增殖指数；Control对照；GEM吉西他滨；mMWNT磁性聚丙烯酸改性碳纳米管；mMWNT-GEM磁性聚丙烯酸改性碳纳米管吸附吉西他滨。

图9各组淋巴结免疫组化阳性指数比较，

其中，A组生理盐水(NS)组(对照组)；B组mMWNT组；C组GEM单药组；D组低浓度mMWNT-GEM不加磁场组；E组低浓度mMWNT-GEM加磁场组；F组高浓度mMWNT-GEM加磁场组。

图10各组淋巴结内肿瘤细胞凋亡指数比较，

具体实施方式

实施例1 制备磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体

试剂与原料

1.多壁碳纳米管(MWNTs)：通过气相共沉积法制备而成，购自深圳市纳米港有限公司，纯度95％以上，直径10～80nm；

2.四水合氯化亚铁(FeCl₂·4H₂O)：购自Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司；

3.六水合氯化铁(FeCl₃·6H₂O)：购自Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司；

4.十二烷基对苯磺酸钠(SDBS)：购自Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司；

5.丙烯腈(AN)：纯度>99％，购自Fluka试剂有限公司；

6.偶氮二异丁腈(AIBN)：纯度>98％，购自上海化学试剂厂；

7.盐酸、甲醇和NaH₂PO₄均购自上海化学试剂厂；

8.去离子水：复旦大学高分子科学系提供。

制备聚丙烯腈改性多壁碳纳米管

典型反应过程为，在50ml去离子水中分别加入1.0g SDBS和0.5g NaH₂PO₄，待SDBS和NaH₂PO₄完全溶解后，再加入0.1g MWNTs，室温下水浴超声(12W，55Hz)处理1h后，再强力搅拌分散20h。然后加入2.0g AN(其中溶解了0.25g AIBN)，并继续搅拌0.5h。通氮气除氧0.5h后升温至70℃反应0.5h。反应结束后冷却至室温，并在200ml甲醇中沉淀。沉淀物用孔径0.45μm的PVDF微孔滤膜过滤，并用甲醇和去离子水洗涤，以除去SDBS。产物在40℃真空烘箱中干燥过夜，得聚丙烯腈改性的多壁碳纳米管和聚丙烯腈均聚物的混合物。

制备聚丙烯酸改性多壁碳纳米管(PAA-g-MWNTs)

取0.5g上述产物加入到50ml浓盐酸中，加热回流8h。反应结束后，产物用孔径0.45μm的PVDF微孔滤膜过滤分离，并用甲醇和去离子水各洗涤4～5遍，以除去聚丙烯腈均聚物，然后40℃真空干燥过夜。得到黑色的聚丙烯酸改性的多壁碳纳米管粉末。具体过程如图1所示。

制备磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体

在50ml去离子水中，加入0.5g SDBS，完全溶解后，加入25mg PAA-g-MWNTs，室温下水浴超声(12W，55Hz)60min后，再强力搅拌分散20h。然后加入FeCl₂·4H₂O10.7mg、FeCl₃·6H₂O29.1mg(Fe²⁺和Fe³⁺摩尔比1:2，理论Fe₃O₄的量12.5mg)。通氮气0.5h，除去体系中的氧气，机械搅拌(约300rpm)。将体系温度升至60℃，加入氨水0.5ml，维持体系温度在60℃反应2h，然后将体系温度升至90℃反应0.5h。反应结束后，产物磁铁分离，去离子水和甲醇各洗涤5遍，产物最后用去离子水分散得到稳定分散的黑色悬浮液。

实施例2 制备人恶性肿瘤淋巴道转移裸鼠模型

细胞株和实验动物

1.BxPC-3人胰腺癌细胞株，购自中国科学院上海分院细胞研究所；

2.BALB/C-nu/nu裸小鼠，购自上海斯莱克实验动物有限公司。

细胞培养材料

1.1640培养液：购自Gibco-BRL公司；

2.胰蛋白酶：购自华美生物科技有限公司；

3.PBS液的配制；

4.小牛血清：华美生物科技有限公司产品；

5.细胞培养板及细胞培养瓶：购自Corning Costar公司；

6.细胞培养皿和细胞冻存管：购自Nunc公司。

建立人胰腺癌淋巴道转移裸鼠模型

采用常规的体内连续筛选接种法建立人胰腺癌淋巴道转移裸鼠模型

1.裸小鼠爪垫皮下部位接种：取BxPC-3细胞(5×10⁷个)接种于BALB/C-nu/nu裸小鼠左侧爪垫内侧皮下部位。无特殊病原体环境下饲养，6~7周后取同侧腘窝、腹股沟、髂动脉旁和肾门等处转移淋巴结。

2.体外原代培养扩增转移淋巴结中的肿瘤细胞。

3.传代培养和细胞纯化。

4.将上述步骤中扩增的肿瘤细胞接种于裸小鼠爪垫皮下，方法同步骤1～3，重复上述过程3轮。

5.人胰腺癌淋巴道转移裸鼠模型的建立：取经过上述3轮筛选后的人胰腺癌高淋巴道转移细胞系接种于裸小鼠左侧爪垫内侧皮下，5周后凡左侧腘窝有黄豆大小淋巴结者为合格动物模型待用。

实施例3 磁性聚丙烯酸改性碳纳米管的淋巴趋向性实验

实验动物

1.SD大鼠：雌雄各半，4～5周龄，体重100～150g，购自上海斯莱克实验动物有限公司，常规饲养。

2.人胰腺癌淋巴道转移裸鼠模型：按上述方法建立。

磁性聚丙烯酸改性碳纳米管对大鼠淋巴结的示踪性能对照实验

取大鼠分4组，每只大鼠左后肢爪垫皮下内侧注射给药0.1ml，磁性聚丙烯酸改性碳纳米管混悬液分3个浓度，以磁性活性炭为对照，分别于3个时间点观察注射局部及淋巴引流路径上不同部位淋巴结的黑染程度，并取黑染的淋巴结行病理染色。

结果显示，磁性聚丙烯酸改性碳纳米管对各站淋巴结的黑染程度与其浓度呈一定的量效关系，浓度越大，淋巴结的黑染程度越深，且黑染率也越高。磁性聚丙烯酸改性碳纳米管具有良好的淋巴结示踪性，黑染部位主要位于淋巴结边缘部分，见图4。

磁性聚丙烯酸改性碳纳米管对转移淋巴结的示踪性能实验

取磁性聚丙烯酸改性的碳纳米管混悬液0.05ml，注射于人胰腺癌淋巴道转移裸鼠模型左侧爪垫内侧皮下，观察注射局部及淋巴引流路径上不同部位淋巴结的黑染程度，并取黑染的淋巴结行病理染色。

结果显示，磁性聚丙烯酸改性碳纳米管对转移淋巴结具有良好的示踪性，即使直径只有1～2mm的微小淋巴结也能被黑染，使肉眼清晰可见。淋巴结内的转移灶并不影响磁性聚丙烯酸改性碳纳米管对下一站淋巴结的黑染。黑染的淋巴结在显微镜下表现为微粒载体聚集于转移灶周围。

实施例4 磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体携载化疗药物磁靶向至靶淋巴结的体内药代动力学实验

试剂：吉西他滨：购自江苏豪森药业股份有限公司。

实验仪器：1.高效液相色谱仪：日本岛津LC-10AD型高效液相色谱仪；

2.电子分析天平：JA-1003，上海天平仪器厂；

3.圆形铷铁硼稀土永磁铁。

实验动物：SD大鼠：购自上海斯莱克实验动物有限公司。

方法：

1.药物配制：称取30mg吉西他滨，将其加入磁性聚丙烯酸改性碳纳米管混悬液(理论上每毫升含PAA-g-MWNTs 25mg、纳米Fe₃O₄12.5mg和PVP15mg)，室温下40kHz超声混匀30min×2次。

2.大鼠分为三组，吉西他滨单药设为对照，一组于实验前1天在左侧腘窝淋巴结体表投影处缝扎永磁体，另一组不用永磁体。以吉西他滨量计算，按体重15mg/kg给药，分别注射于每只大鼠左后肢爪垫皮下。然后分8个时间点，即注射后6、12、24、48、72、120、192和240h取每只大鼠左侧腘窝淋巴结，并从股静脉取血。

3.HPLC法测定淋巴结和血浆内的吉西他滨药物浓度。

结果显示，

1.磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体同期其有良好的淋巴趋向性，携载化疗药物至淋巴结，因此淋巴结内药物浓度较高，维持时间较长；在外磁场作用下，淋巴结内的药物浓度更高，维持时间更长，见图5。

2.磁性聚丙烯酸改性碳纳米管在提高淋巴结内化疗药物浓度的同时，其血浆内的药物浓度明显低下，见图6。

实施例5 磁性聚丙烯酸改性碳纳米管体外抗肿瘤细胞效应实验

细胞株：SW1990、BxPC-3人胰腺癌细胞株，购自中国科学院上海分院细胞研究所；

细胞培养材料：

1.1640培养液：购自Gibco-BRL公司；

2.胰蛋白酶：购自华美生物科技有限公司；

3.PBS液的配制；

4.小牛血清：华美生物科技有限公司产品；

5.细胞培养板及细胞培养瓶：购自Corning Costar公司；

6.细胞培养皿和细胞冻存管：购自Nunc公司。

7.四甲基偶氮唑蓝(MTT)：Sigma公司产品；

8.碘化丙啶：Sigma公司产品。

细胞抑制实验

1.分为四组，无药组设为正常对照，吉西他滨、磁性聚丙烯酸改性碳纳米管、和磁性聚丙烯酸改性碳纳米管吸附吉西他滨组。MTT法测定细胞抑制率和细胞生长曲线。

2.流式细胞仪检测上述组别的细胞周期分布、增殖指数和凋亡率。

结果显示，磁性聚丙烯酸改性碳纳米管本身对肿瘤细胞的毒性较小，但能增强化疗药物的细胞毒作用，可能与碳纳米管对细胞膜的强穿透性有关。

实施例6 磁性聚丙烯酸改性碳纳米管作为药物载体体内抗恶性肿瘤淋巴转移的研究

实验动物：人胰腺癌淋巴道转移裸鼠模型：按上述方法建立。

1.药物配制：按实施例4的方法配制，精确称取吉西他滨，将其加入磁性聚丙烯酸改性碳纳米管混悬液(理论上每毫升含PAA-g-MWNTs 5mg、纳米Fe₃O₄ 2.5mg和PVP 3mg)，室温下40kHz超声混匀30min×2次，GEM最终浓度为3mg/ml。

2.裸鼠模型随机分为6组，A组生理盐水(NS)组(对照组)；B组mMWNT组；C组GEM单药组；D组低浓度mMWNT-GEM不加磁场组；E组低浓度mMWNT-GEM加磁场组；F组高浓度mMWNT-GEM加磁场组。每组分别于第1、8天各给药一次，每次0.05ml药物注射于裸小鼠左后肢皮下。第15天观察治疗后疗效。检测血白细胞、丙氨酸转氨酶和肌酐等指标。摘取各组左侧腘窝淋巴结，测量淋巴结大小，对淋巴结进行常规病理组织学检查，CK免疫组织化学染色，TUNEL法检测淋巴结内肿瘤细胞凋亡情况。

表1 是动物实验分组情况。

表1

结果显示，

1.治疗后淋巴结的体积和重量均减小，差异有统计学意义。

2.CK免疫组化染色结果显示磁性聚丙烯酸改性碳纳米管作为化疗药物载体后，抗转移淋巴结内肿瘤细胞的效果明显，见图9。

3.TUNEL法检测淋巴结内肿瘤细胞凋亡结果显示磁性聚丙烯酸改性碳纳米管作为化疗药物载体后，转移淋巴结内的肿瘤细胞凋亡率明显增加，外磁场作用后，效果更加显著，见图10。

表2是各组裸鼠腘窝淋巴结体积和重量比较，其中，A组生理盐水(NS)组(对照组)；B组mMWNT组；C组GEM单药组；D组低浓度mMWNT-GEM不加磁场组；E组低浓度mMWNT-GEM加磁场组；F组高浓度mMWNT-GEM加磁场组。

表2

Claims

1、一种磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体，其特征是采用磁性聚丙烯酸改性碳纳米管为载体，该载体吸附化疗药物，制成磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体。

2、按权利要求1所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体，其特征是所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管的直径为10-80nm。

3、权利要求1所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体的制备方法，其特征在于通过下述步骤，

本发明包括下述步骤：

1)采用气相共沉积法制备多壁碳纳米管，通过丙烯腈乳液聚合，在酸性条件下水解得聚丙烯酸改性的水溶性碳纳米管；

4)通过超声水浴将磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体与化疗药物混合进行物理吸附，制成具特定粒径的携载有化疗药物的磁性纳米复合体，

4、按权利要求3所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体的制备方法，其特征在于所述的纳米管药物载体为直径10-80nm。

5、按权利要求3所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体的制备方法，其特征在于所述的纳米管药物载体直径为40nm。

6、按权利要求3所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体的制备方法，其特征在于所述的超声水浴的条件为：40kHz，30分钟。

7、按权利要求3所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体的制备方法，其特征在于所述的化疗药物是吉西他滨。

8、权利要求1所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体在制备抗恶性肿瘤细胞增殖药物中的用途。

9、权利要求1所述的磁性聚丙烯酸改性碳纳米管药物载体在制备抗恶性肿瘤淋巴转移药物中的用途。