CN101437464A - 非合成低蛋白质橡胶胶乳产品及其测试方法 - Google Patents
非合成低蛋白质橡胶胶乳产品及其测试方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101437464A CN101437464A CNA2006800545454A CN200680054545A CN101437464A CN 101437464 A CN101437464 A CN 101437464A CN A2006800545454 A CNA2006800545454 A CN A2006800545454A CN 200680054545 A CN200680054545 A CN 200680054545A CN 101437464 A CN101437464 A CN 101437464A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- latex
- hev
- rubber
- guayule
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Manufacture Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
Abstract
本发明揭示了一种符合美国试验与材料协会(ASTM)发布的针对橡胶树胶乳产品的标准的非橡胶树的、非合成的、低致敏性的、低蛋白质的胶乳产品,以及一种确定这类产品的量和质的特性的新方法和标准,包括对橡胶树的和合成的胶乳产品的可替代性和相对于这些胶乳产品的优越性。
Description
技术领域
在此描述的本发明涉及一种得自植物原料的天然胶乳产品。更具体地说,本发明涉及一种非橡胶树(non-Hevea)的、非合成的、低蛋白质的且低致敏性的胶乳产品,该产品由原产于美国西南部和墨西哥的包括银胶菊(银胶菊属银胶菊)沙漠植物制成;还涉及测试这类产品特性的方法,以确定橡胶树(Hevea)的和合成的胶乳产品在数量和质量上的替代品或更优品,用于医疗器械,工业用途和消费性产品。
背景技术
得自巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)植物的天然橡胶,是很多工业产品的核心成分,例如在涂料,胶片和包装中。天然橡胶也被广泛应用于医疗器械和消费品中。更具体地说,胶乳被用于医疗产品中,包括:手套,导管,实验室测试设备,测定,一次性套件,药物容器,注射器,瓣膜,密封件,端口,柱塞,镊子,滴管,塞子,绷带,辅料,检查床单,包裹物,覆盖物,端头,遮护物,内腔器械的护鞘,溶液袋,气球,温度计,条板(spatulas),管子,粘结剂,输液和储存系统,针冒,止血带,胶带,口罩,听诊器,医用黏合剂,胶乳伤口护理品。
术后病人使用天然橡胶包括:压紧带,系结件,缚紧带,充气系统,箍带,夹板,颈环和其他的支持器械,带子,衣物,以及轮椅和拐杖上的衬垫物。天然胶乳也被用于很多别的普通家用产品,诸如假奶嘴,橡胶带,黏合剂,避孕套,一次性尿布,艺术品,玩具,奶瓶,口香糖和电子器件,这里仅列出一些。
然而,天然橡胶的广泛使用由于以下原因是有问题的。首先,绝大多数得自橡胶树的天然橡胶,都是由印度尼西亚、马来群岛和泰国的为数有限的品种生长出来的,并且都采用劳动密集型的收采做法。用橡胶树制成的橡胶及其产品,进口至包括美国在内的世界其他部分是相当昂贵的,而且供应链会限制原料的可获得性。此外,因为受限的生长区域和这些作物的基因相似性,植物的疫病、疾病或者自然灾害,都有可能在短时间内彻底摧毁全世界的大部分产量。
第二,尤其在医疗和病人护理领域,估计有两千万美国人对在东南亚的得自橡胶树的天然橡胶的作物中发现的蛋白质过敏。如同许多其他植物一样,橡胶树会产生蛋白质,用于结构支撑以及在响应于环境条件时用于跟防御有关的目的。然而,有至少62种已知的橡胶树抗原与I型胶乳过敏有关,而且在这些得自橡胶树的胶乳蛋白质中,有12个以上是常见的人类致敏原,包括:Hev b1,和用于橡胶生物合成的Hev b3,防御相关的蛋白质Hev b2,Hev b4,Hev b6.01,Hev b6.02,Hev b6.03,Hev b7.01,Hev b7.02,Hev b11,以及Hev b12,和其他蛋白质,例如Hev b5,Hev b8,Hev b9和Hev b10.
当胶乳过敏个体暴露于这些蛋白质时,对橡胶树的过敏反应就开始了,引发免疫球蛋白E(“IgE”)抗体的产生。根据过敏的严重程度,IgE抗体会产生各种反应。典型地,胶乳过敏只限于皮肤发炎,但是,可能在某些个体中出现严重的反应,甚至死亡。另外,这些蛋白质的结构在进化中也被保留在很多植物中,而不仅仅是在橡胶树中,这就使得对橡胶树过敏的个体也受其他植物中的相似蛋白质的影响(交叉反应)。也可能是人类在橡胶树的培育中,已经无意间选择了这些致敏蛋白质的存在,而这些致敏蛋白质起着普通抗原表位(蛋白质上的抗原位点)的作用,使免疫球蛋白质E抗体在对胶乳过敏的个体中产生,使得有效的除去这些蛋白质非常困难。
通常,胶乳产品的潜在致敏性是通过测量已知的IgE抗原蛋白质、总蛋白质含量和确定在特定植物种类中对已知IgE抗原蛋白质的交叉反应来确定的。含IgE抗原蛋白质含量较低的产品,较小可能在对胶乳过敏的人中引发免疫球蛋白抗体的产生。因此,具有低数量和低含量的已知IgE抗原蛋白质的产品,其致敏性大大降低。
而且,存在于胶乳中的蛋白质越多,暴露在一种或多种这些蛋白质中的人类被致敏的可能性越大,因此发展成对它的过敏症。因此,减少胶乳产品中的蛋白质含量,尤其是减少那些是常见人致敏原的蛋白质的含量,是减少随后过敏反应的总数量的第一步。
特定蛋白质的敏感性在对胶乳过敏的各个人中是不同的。因此,要降低过敏反应的整体风险,希望有低总蛋白质含量。总蛋白质含量低的产品引起过敏反应的可能性较小,因而比蛋白质含量较高的产品其致敏性大大减小。橡胶树胶乳产品是由每克干重胶乳的总蛋白质含量一般大于9000微克的胶乳制成的,包括上述抗原蛋白质;而且每克干重胶乳的总蛋白质含量越高,过敏反应的可能性越大。
已知道也有一些非橡胶树植物会与对橡胶树过敏的个体发生交叉反应。这些植物含有相似类型的结构支持和防御相关的植物蛋白质,可在人类中产生相似的过敏反应。这些类型的植物作为橡胶树的低致敏性天然橡胶的替代品的来源的可能性非常小。
总的来说,在美国人群中广泛且普遍的胶乳过敏症的代价是很大的,尤其是在医疗领域。为了避免医疗过程中不必要的过敏反应,供应者必须确保只有替代的胶乳产品与一个对胶乳过敏的病人接触。而且,本身对胶乳过敏反应的从业人员,必须确保他们不接触到基于天然胶乳的产品。最后,合成橡胶替代物往往要比非橡胶树胶乳形式的产品贵得多,而且难以获得。因此,存在着一种对非合成的、低蛋白质的天然橡胶胶乳产品的需求,这些产品在质量和数量上应可适合于替代或者优于现有的橡胶树的或合成的胶乳产品。
一般而言,为工业或医疗用途而提取的胶乳都要依照包括美国试验和材料协会(ASTM)在内的各种立法机构的标准规范进行测试。对每一类型的胶乳产品都赋予一个ASTM“类型”。例如,I型胶乳包括仅用氨或甲醛保存的离心的橡胶树胶乳。II型胶乳是已被乳酯化的、且仅用氨或先用甲醛后用氨保存的橡胶树胶乳,而III型胶乳是用低氨或其他保存剂保存的离心的橡胶树胶乳。I型、II型和III型胶乳产品根据各自的ASTM D1076-02标准进行测试。参见表1。
表1
ASTM D1076-02特性标准 | I型胶乳产品 | II型胶乳产品 | III型胶乳产品 |
颜色和气味 | 不明显 | 不明显 | 不明显 |
总固体含量(最小%) | 63.1 | 66.0 | 61.3 |
干橡胶含量(最小%) | 59.8 | 64.0 | 59.8 |
总固体含量减去干橡胶含量(最大%) | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
总碱度(氨对胶乳%) | 最小0.60 | 最小0.55 | 最大0.29 |
在55%总固体含量下的机械稳定性,秒 | 650 | 650 | 650 |
铜(总固体的最大%) | 0.0008 | 0.0008 | 0.0008 |
锰(总固体的最大%) | 0.0008 | 0.0008 | 0.0008 |
淤浆含量,最大% | 0.10 | 0.10 | 0.10 |
凝块含量,最大% | 0.050 | 0.050 | 0.050 |
氢氧化钾量,最大 | 0.80 | 0.80 | 0.80 |
ASTM的D1076-02标准提供了一个标准表,列出了如表1中所示的I型、II型和III型胶乳产品的若干物理或化学的特性。这些特性的每一项都与一个标准数值或标准书面值(written value)相联系,标示出某一种胶乳产品符合其类型的要求所允许的标准最小值或最大值。在通过标准数值很难或不可能测量时,标准书面值提供了一种量化方法(例如,词语“不存在”或者“存在”即是书面值)。每个特性都是根据标准方法进行测量的,即按照ASTM的D1076-02标准并基于试验结果赋予一个检测到的数值或者检测到的书面值。然后,针对每一个特性,将这些检测到的书面值或者检测到的数值与标准数值和标准书面值进行比较。在所有特性都经过测定之后,就可以确定与ASTM的D1076-02标准的符合情况;如果所有特性都符合标准书面值或者标准数值,则该胶乳就符合ASTM的D1076-02标准。
然而,即使是能符合这些标准的合成的或橡胶树的胶乳产品,当用于医疗产品或者医疗器械工业时,也有不顺从的问题。如上详细讨论,橡胶树胶乳会引起致敏作用和过敏反应。在许多这些终端应用中,利用合成聚合物来进一步取代橡胶树胶乳是一种不够的解决方案,因为这些合成聚合物往往不能按需要进行工作。
因此,ASTM的D1076-02标准对确定非橡胶树的天然胶乳的物理或化学特性是不够的,因为它仅仅针对橡胶树胶乳。因此,还需要一种确定高质量的、低蛋白质的、低致敏性的、无交叉反应的、本国内的天然橡胶源的化学或物理特性的方法和标准,可用来在数量上和质量上评价非橡胶树天然橡胶胶乳替代品的可替代性和优越性,以用于医疗、工业和消费产品及应用。
附图说明
图1是比较橡胶树胶乳蛋白质和非橡胶树胶乳蛋白质的免疫印迹照片。
图2是描绘具有变化的含硫量的橡胶树胶乳手套和银胶菊胶乳手套薄膜的拉伸强度的曲线图。
图3是描绘具有变化的含硫量的橡胶树胶乳手套和银胶菊胶乳薄膜的断裂伸长率水平的曲线图。
图4是描绘用粘度计在多个每分钟转速(RPM)下测得的银胶菊胶乳和橡胶树胶乳的粘度的曲线图,
图5是描绘在存在不同数量的两种起稳定作用的化合物时银胶菊胶乳的机械稳定性的曲线图。
图6是描绘不同含硫量的、未老化的和已老化的银菊胶胶乳薄膜的断裂伸长率的曲线图,与具有可比的含硫量的、未老化的和已老化的橡胶树胶乳薄膜进行对比。
图7是描绘具有不同含硫量的、未老化的和已老化的银菊胶胶乳薄膜的模量特性的曲线图,与时未老化的和已老化的具有相当含硫量的橡胶树胶乳薄膜进行对比。
图8是参照橡胶外科手套的ASTM的D3577-02标准规范,描绘了未老化的和已老化的银菊胶胶乳薄膜的各种特性的条形图,与已老化的和未老化的橡胶树胶乳薄膜进行对比。
图9是对比胶银菊胶乳薄膜和橡胶树胶乳薄膜物理特性的曲线图。
图10A和10B是对比银胶菊胶乳薄膜和橡胶树胶乳薄膜的伸展-松弛特性的曲线图。
图11显示为银胶菊胶乳手套进行水凝胶涂层的三种可选方案的流程图。
具体实施方式
这里揭示的内容是针对符合美国试验与材料协会(ASTM)的I型、II型或III型胶乳产品的规范的非橡胶树的、非合成的、低蛋白质的胶乳产品的。这里揭示的内容还提供了非橡胶树天然胶乳产品特性的确定方法,以评估非橡胶树天然胶乳产品对现有橡胶树胶乳的和合成的胶乳产品的可替代性,同时显示了这里揭示的非橡胶树的、非合成的、低蛋白质的且低致敏性的胶乳产品的优越性和优点。这里揭示的方法提供了非橡胶树天然橡胶胶乳的新标准(为便于参考,这里称为“银胶菊标准”)。银胶菊标准的概要内容列于表2。而且,根据如以下表2所示的新近形成并在此揭示的银胶菊标准,在此揭示的产品是符合或者超过针对非橡胶树天然橡胶产品中化学和物理组成的标准的产品。
表2
特性标准 | 银胶菊胶乳标准 |
颜色和气味 | 米白色至浅褐色/轻微的氨味 |
总固体含量(商业生存能力的%)(见实施例5) | 40-62 |
干橡胶含量(商业生存能力的%)(见实施例5) | 38-62 |
总固体含量减去干橡胶含量(%) | 0-2 |
总碱度(氢氧化钾对胶乳的%)(见例子8) | 0-0.8 |
按D5712标准的总蛋白质(毫克/克干重胶乳) | 0-200 |
(见例子4和例子7) | |
按D6499标准的橡胶树抗原蛋白质(毫克/克干重胶乳)(见例子4) | 无 |
pH%(见例子13) | 7.0-13.0 |
在43%总固体含量下的机械稳定性,秒(见例子14) | 90-400 |
铜(总固体的%)(见例子15) | 0-0.0008 |
锰(总固体的%)(见例子15) | 0-0.0008 |
淤浆含量(%)(见例子10) | 0-0.10 |
凝块含量(%)(见例子11) | 0-0.050 |
氢氧化钾值,最大值(见例子12) | 0-0.80 |
非橡胶树天然橡胶源的例子包括但不限于:银胶菊(银胶菊属银胶菊)、续随子(大戟属续随子)、马里奥拉(mariola)(银胶菊属)、银鲛(橡胶草属nauseosus)、乳草属植物(马利筋属)、秋麒麟草属植物(一枝黄花属)、白印度车前草(蟹甲草属atripilcifolia)、树胶蔓藤(Crypstogeia grandiflora)、俄罗斯蒲公英(蒲公英属和鸦葱属)、山薄荷(密花薄荷属incanum)、美州石蚕属植物(Teucreum canadense)、高吊钟花(风铃草属亚美利加)。所有这些非橡胶树天然橡胶源都能根据所揭示的方法进行评估,以确定其是否适合用于所揭示的非合成的、低蛋白质的、低致敏性的胶乳产品。
特别地,银胶菊(银胶菊属银胶菊)是一种原产于美国西南部和墨西哥北部的沙漠植物,与橡胶树胶乳相比较,它可生产出胶乳质量基本相同或更好的多聚异戊二烯。因此,非橡胶树天然橡胶胶乳和银胶菊胶乳这两个术语在本文中可交替使用。另外,经处理的银胶菊胶乳没有会引起橡胶树胶乳的致敏特性的蛋白质。在银胶菊胶乳中的天然橡胶聚合物具有高的分子量,因此用这种材料制成的产品可用于高性能应用中。
在天然状态下,产自银胶菊植物的树液其蛋白质并不低。可是,通过几个处理步骤,可从银胶菊中提取低蛋白质的天然橡胶胶乳。低蛋白质银胶菊胶乳是通过在水悬浮液中从银胶菊植物的完整薄壁组织细胞中除去橡胶颗粒而获得的。在处理之前,该植物保持在水合状态,在碱性水溶液萃取介质中均质化。然后,将特定比重略小于1的橡胶颗粒采用一系列离心步骤和/或乳化剂浮选从均匀混合浆中进行纯化。这一过程所产生的天然橡胶胶乳其残余细胞质或可溶性蛋白质成分非常少。
另外,根据所希望的用途,还可以使用各种稳定剂和添加剂来改变物理特性、储存时间或质量。例如,采用加硫的方法,通过在现有的胶乳聚合物链之间形成硫交联,可改变该材料的柔韧性或“松弛性”。根据所希望的用途,还可以在银胶菊胶乳中添加其他的化学品或者稳定剂等添加剂。总之,经纯化的银胶菊胶乳可长期保持稳定,还可用来制造很多种产品,包括医疗用的低致敏性产品。
银胶菊胶乳因其具有低致敏的特性而在医疗产品市场中有很多潜在的应用。这些特性包括:(1)蛋白质非常少,每克(g)干重胶乳含蛋白质总量低于200微克(μg);(2)没有可检出量的任何已知的橡胶树IgE抗原蛋白质;(3)有限量的残留蛋白质是疏水性的,并且结合在橡胶相中,限制了被吸收到人体皮肤中、组织中或者被抽提到体液中的可能性;(4)在银胶菊胶乳中的蛋白质中,没有和对橡胶树胶乳(I型胶乳)产品的胶乳过敏是交叉反应的。
由于种种原因,随着时间的推移,银胶菊胶乳也不太可能引起长期的胶乳敏感性或者广泛的过敏反应。在历史上,充分渗滤的橡胶树胶乳产品在医疗产业中广泛应用了好几十年,用来防止疾病的传播而不引起I型胶乳过敏,而且这些产品含有的蛋白质多很多,比银胶菊胶乳产品蛋白质含量的45倍还多。当人类更多地暴露到这类产品时,尤其是暴露到可溶性蛋白质含量高的渗滤很差的产品时,会在很大比例的人口开始引发过敏。而这不太可能发生在不含可溶性胶乳蛋白质的银胶菊。银胶菊胶乳产品,正如在此所揭示的,也具有只有天然橡胶材料才拥有的物理优点,并且由其制成的医疗产品可达到或超过适用于橡胶树产品的ASTM的D3577-01的物理特性标准,而这是合成的聚合材料达不到的。这些性质也与产品的安全性有关,因为它们提高了胶乳薄膜的强度和弹性,还提高了产品的适配度和触感,比如外科手套。
首先,根据本文的揭示内容,银胶菊胶乳产品含有非常少量的可溶性蛋白质,因为它们是由植物均匀混合浆中的橡胶颗粒纯化而制得的。与橡胶树胶乳不同,银胶菊胶乳在可使用之前必须经过纯化。这个过程除去了非橡胶植物成分,包括可溶性蛋白质和水溶性植物色素。还未经充分纯化的银胶菊胶乳含有高含量的绿色和棕色色素。这些色素可为胶乳的质量和可溶性蛋白质含量提供视觉线索。有颜色的胶乳质量较低,不足以产生高性能的胶乳,并会有较高含量的可溶性蛋白质。
第二,根据本文所揭示的内容,在相同的干重下,银胶菊胶乳产品其总蛋白质含量比橡胶树胶乳低约90倍。第三,银胶菊胶乳产品的处理无需经过减少蛋白质的渗滤步骤,因为银胶菊胶乳产品的可溶性蛋白质含量非常低。任何残留蛋白质的大部分都是不可溶的或疏水性的,这意味着该产品不会被吸收到人体皮肤内,而这在未经过渗滤或渗滤很差的橡胶树产品中是成问题的,其总蛋白质的高达50%或以上是亲水性的或高可溶性的。这种高可溶性是促进敏感性的主要因素,并最终引发过敏反应。
相比较之下,存在于银胶菊胶乳中的可溶性蛋白质的含量比即使是渗滤最好的橡胶树胶乳产品也低约45倍。总之,即使在充分进行随后的橡胶树胶乳洗涤后只有与橡胶颗粒结合的蛋白质被留下来,橡胶树胶乳也依然比所揭示的银胶菊胶乳产品中所含总蛋白质数量约多22倍。总的来说,临床和性能试验表明,银胶菊的处理提供了一种安全的、高性能的、低致敏性的天然橡胶胶乳,对人类使用是安全的。
在此揭示的产品是一种天然的、低致敏性的胶乳产品,其总体的纯度和组成一般符合橡胶树胶乳的ASTM的D1076-02的标准性能值,并且满足或超过在此揭示的并示于表2中的银胶菊标准特性。而且,所揭示的银胶菊胶乳产品其干橡胶含量(DRC)在水中的浓度在约30%-65%的范围。用于非橡胶树胶乳的银胶菊标准性能值包括:总碱度、胶乳中氢氧化钾的百分含量、铜、锰、氢氧化钾值、总固体含量、干橡胶含量、粘度、淤浆含量、凝块含量、机械稳定性、密度、颜色、气味、蛋白质含量、以及易挥发脂肪酸。
在至少一个实施例中,所揭示的产品符合现在所揭示的银胶菊标准的所有要求。而且,所揭示的产品有非常低的致敏性,适用于有胶乳过敏的人。另外,这种产品可以防止过敏原的致敏作用,因为甚至那些没有胶乳过敏的人也不太可能对该产品中存在的任何少量蛋白质变得敏感-因此较少可能发展成任何新的过敏。换句话说,根据采用标准检测方法的测定,该产品没有可检出量的橡胶树抗原蛋白质,而且总体蛋白质含量较低。
例如,这些标准的检测测定可以包括:使用ASTM的D6499标准方案的抗原蛋白质含量的免疫学测量,使用ASTM的D6499标准方案的酶联免疫吸附剂测定(ELISA)的抑制力测定,使用ASTM的D5712标准方案并使用修改的劳里测定法的总共的整体蛋白质含量,以及使用ASTM的D5712标准方案的背景减除技术。更具体地说,符合现在所揭示的银胶菊标准的胶乳要求包括:通过对水性洗涤剂的可萃取蛋白质的分析来测量,产品的每克干重胶乳的总蛋白质含量小于200微克(μg)。所揭示的适用于非橡胶树胶乳的银胶菊标准也包括低的可检出含量的可溶性蛋白质,以及不存在会与可引发I型胶乳过敏的IgE抗体发生交叉反应的已知抗原蛋白质。
在各种实施例中,产品可用于多种医疗产品、消费者产品和工业产品。例如,在一个实施例中,产品是一种制成薄膜的非合成的、低致敏性的、非橡胶树的胶乳产品。一般而言,形成一个胶乳薄膜需要在特定的温度下通过对胶乳材料的连续相(水相)进行蒸发,来聚结单独的胶乳颗粒。在结构上,在蒸发期间,当带电的聚合物链末端基团或者表面活性剂被去除的时候,将胶乳颗粒保持分开的静电力或者原子空间力便被克服了。所得到的薄膜是由聚合物的晶格形成的,根据各种蒸发条件而具有各种物理特性。例子1提供了一种生产薄膜的方法,该薄膜是符合现在所揭示的银胶菊标准的产品的一个例子。
例子1.干的薄膜
没有空气的、干的均质薄膜是由浓缩的银胶菊之类的非橡胶树晶格制备的。通过在一块平玻璃板上胶接一些6毫米(mm)宽,1.5毫米厚的刚性塑料条以形成一个最好为125到150平方毫米的空腔表面,来制作一个模具。当模具用含62%总固体含量(TSC)的胶乳充填时,得到1毫米厚的干的薄膜,而用48%总固体含量的胶乳充填时,则得到约0.7毫米。然后依照标准技术,根据ASTM的D1418和D1566标准,进行测试以对非橡胶树的和橡胶树的胶乳薄膜进行对比。
在一个薄膜制备的实施例中,模具通过将塑料条用环氧树脂粘合剂或者溶解于甲基乙基酮中的聚醋酸乙烯酯胶接到玻璃板上来制成。使用一木头的或不锈钢的直边,刮擦在模具中的胶乳表面,去除气泡。用薄的透明纤维素薄膜来覆盖和保护干橡胶薄膜。
如果总固体含量为约62%或者更少,则制备薄膜时不需要稀释。如果总固体含量大于62%,则胶乳用蒸馏水稀释而降低到此值。胶乳在制样瓶中充分混合,并放置5分钟。然后,将胶乳小心地挤过标称孔径为0.180±0.009毫米(0.0070±0.0004英寸)的180毫升的不锈钢筛,进入到一个50毫升的玻璃烧杯里,盖住,在倒入模具之前让其放置5分钟。将模具放在薄膜将要留在那里干燥的位置。就在把胶乳倒入模具之前,将盖子从烧杯移走,胶乳表面用滤纸刮去泡沫。保持烧杯靠近板,让胶乳以连续流的方式倒入模具,将胶乳均匀分布在模腔内,以完全充填模具。让胶乳在模具中放置一分钟,然后用干净的木头或不锈钢的直边刮过模具。
在这一薄膜制备的实施例中,模型可以首先在室温下干燥,然后放在一个温度不超过35℃的炉里。当充分干燥以将薄膜从模具中移走而不变形时,把薄膜从模具剥离,注意尽可能少地动到薄膜的表面,翻转过来,放在一块薄的透明纤维素板上。让薄膜在不超过35℃的温度下干燥至少24小时,然后用另一块纤维素板覆盖。薄膜的干燥程度根据其清澈度来判断,薄膜越干燥,清澈度越高。如果经肉眼检查对干燥度有任何怀疑,薄膜可在不超过35℃的干燥空气中干燥至恒定重量。薄膜需要一直存放在气密容器或干燥器内的凉快而黑暗的地方,以防止吸收水份,直到需要用于测试。
在另一个实施例中,该方法用来生产具有高伸长特性的非橡胶树的、非合成的、低蛋白质的胶乳手套。例如,在这一实施例中,手套具有的扩展性能可制造有限数量的尺寸号码而不会牺牲对使用者的手的适配度。在这一实施例中,手套可伸展以适合很大范围的手型和大小,而只需制造较小数量的尺寸号码。在这一实施例的一个例子中,手套的尺寸号码是根据手的体积而不是手的长度来决定的。
根据现在的揭示内容,胶乳手套产品包括检查手套和外科手套。外科手套在很多方面不同于检查手套。尽管它们在设计上相似,但是最终用途大不相同。检查手套用于要求不高的例行治疗过程(换绷带、静脉穿刺、处理标本等),而外科手套用于可能会持续几个小时的长时间的外科治疗过程。因此,外科手套必须经久耐用以保持遮挡特性,还要保持柔韧和柔软而感觉舒服。在外科治疗过程中触觉敏感性是非常重要的。弹性复原的特性因为一些精细的治疗过程而也很关键,如缝合或其他操作。许多合成材料(例如腈)在指尖处会保留折痕,这种折痕会降低触觉敏感性。因此,包括合成聚合物的外科手套缺乏所希望有的触觉特性,这些触觉特性对考虑高质量或证明最佳性能时是需要的。
然而,包含这里所揭示的非合成胶乳的外科手套,其所显示的触觉和弹性复原的特性均远远超过包含合成聚合物制的外科手套。如图10A和10B所示,测量银胶菊胶乳相对于橡胶树胶乳的拉伸关系,测量从0到1分钟(图10A),然后测量从0-15分钟(图10B),结果表明,当拉伸时间长时,松弛和移动比橡胶树的少。另外,结果还表明,当手套用了很长一段时间而被磨损的时候,银胶菊胶乳更少对人的手带来疲劳感。而且,如下所示,当测量胶乳薄膜的模量(待后讨论)时,包含这里所揭示的的非合成胶乳的检查手套和外科手套都比橡胶树的或者合成的胶乳手套更柔软。
而且,外科手套应该是无粉末的。无粉末的银胶菊胶乳手套薄膜可以采取包括(1)在线/离线氯化和(2)备选的离线氯化的不同方法从粉末产品制成。
对于在线/离线氯化来说,当手套薄膜刚退出固化炉后还处于模型上时,薄膜就进行后固化渗滤(水温摄氏40度-60度),轻度干燥以除去表面水分。将薄膜首先浸入到稀盐酸溶液浴(pH值保持在2-5之间)内,然后浸入到漂白液(次氯酸钠,3%-6%溶液)的溶液浴中。随后,将薄膜浸入到水浴或者稀碱内,以中和氯化过程的反应物。保持参数在以上所述的范围之内,氯的浓度应在500ppm到4000ppm之间。降低酸性溶液的pH值,将会提高氯水溶液的浓度,反之亦然。
做为替选,氯化氢(HCl)浴和漂白液浴也可以用由氯注入水中以配成浓度在500ppm到4000ppm的单一溶液浴来代替。在该溶液浴之后,接着是水浴/中和剂浴。然后薄膜应是完全地并从模型脱模。薄膜的后脱模(post-stripping)应使其“抓握侧”(grip-side)出来。在离线氯化装置中,薄膜然后在抓握的那侧上被氯化,生产出完全无粉的手套。氯化过程是通过将氯气注入到水蒸气中生成浓度范围在200ppm到2000ppm的氯来完成的。
作为离线氯化的替换方法,当手套薄膜在预固化渗滤(pre-cure leaching)后仍在模型上时,将薄膜浸入到碳酸钙浆液中,该浆液在固化过程中被干燥后将变成粉末状,便于薄膜从模型脱模。手套薄膜从模型脱出并被倒转至穿戴侧出来,以首先氯化这一侧。
在一个离线氯化装置中,薄膜然后在穿戴侧首先被氯化。氯化过程是通过将氯气注入到水蒸气中生成浓度范围在200ppm到2000ppm的氯来完成的。根据其应用,薄膜也可以回复到让其抓握侧出来,并在这一侧进行第二次氯化。氯的浓度范围应在100ppm到1500ppm。在中和并用水冲洗之后,薄膜被干燥了,从而生产出完全无粉的手套。
而且,手套可涂有水凝胶。如图11所示,在此揭示了银胶菊胶乳产品的水凝胶涂层的至少三种可供选择的方法。如图11所示,可选方法1是水凝胶涂层应用的基本处理过程;可选方法2显示了一种替代的处理过程,此方法可省略活性的接合表面调节剂;而可选方法3包括附加的在线渗滤。包括这个渗滤处理过程则要求将硅胶浸渍移动到该附加的渗滤过程后的某点。
在另一实施例中,该方法还包括了对橡胶树的或合成的胶乳产品加涂层的步骤。例如,在这个实施例中,其方法包括用一层或者多层来覆盖橡胶树的或合成的胶乳产品的全部或一部分。在另一个例子中,其方法包括用一层或者多层来覆盖由复合物而不是非橡胶树的天然橡胶源制成的任何物品的全部或一部分,这些复合物例如是塑料、金属、木头、陶瓷、合金之类。在这种方法的至少一个实施例中,物品用银胶菊胶乳涂液浸渍、喷涂或涂布,以在物品和使用者皮肤之间提供隔障。在其他实施例中,其方法还包括将物品夹在非橡胶树胶乳的最上涂层和最下涂层之间。在另外一个具体的实施例中,其方法包括最后一个步骤,即用非橡胶树胶乳来浸渍或涂布橡胶树胶乳或合成胶乳薄膜(比如手套)。
在另一个实施例中,产品是指用于医疗器械中的非橡胶树的、非合成的、低蛋白质的胶乳产品,这些医疗器械例如导管,医用黏合剂,胶乳伤口护理品,实验室测试装置,测定,一次性套件,药物容器,注射器,瓣膜,密封件,端口,柱塞,镊子,滴管,塞头,绷带,医用敷料,检查床单,包裹物,覆盖物,端头,遮护物,内腔器械的护鞘,溶液袋,球蘘,温度计,条板,管子,粘结剂,输液和储存系统,针冒,止血带,胶带,罩,以及听诊器,压紧带,系结件,以及束缚带,吹气系统,箍带,夹板,颈圈,以及其他支持装置,带子,衣物,以及轮椅和拐杖中的垫衬物。
虽然如硅橡胶、聚氨酯和合成聚异戊二烯之类的合成材料被用于导管(尤其是球蘘形导管)的几百种特定产品应用中的一些,这些材料中的一些在需要的时候不能保持恒定的压力。另外,一些合成剂不具有结构上的完整性以在长时间的情形下保持刚性。在外科治疗过程中发生球蘘导管爆炸会带来生命危险。包括所揭示的非合成胶乳的医疗器械具有优秀的结构完整性,避免了这些威胁生命安全的问题。
在另一个实施例中,产品是指牙科器械和产品,例如牙齿护障(dentaldam)。当前牙齿护障的最大问题就是它们都是由橡胶树胶乳制成。由于制造牙齿护齿障的特定生产过程,橡胶树胶乳不能得到适当的渗滤,导致胶乳产品的可溶性蛋白质含量高。这对牙齿护障是非常危险的,因为牙齿护障在口腔治疗过程中被用作遮挡物,因而和粘膜组织密切接触。这种与渗滤很差,高敏感性且高致敏性胶乳的接触会引起快速敏化和/或严重的过敏反映。因为所揭示的包含银胶菊胶乳的牙齿护障具有低致敏性,避免了这种危险。
在另外一个实施例中,产品是针对计划生育的屏障器械,诸如男性和女性的避孕套,隔膜,宫颈帽和避孕海绵。用根据现在所揭示的银胶菊胶乳制成的避孕套较不容易引起常见的破裂问题,而那是合成聚合物制成的避孕套常常碰到的问题。图9图示了银胶菊胶乳和橡胶树胶乳的物理特性的对比。如图9显示,虽然银胶菊胶乳和橡胶树胶乳有相似的张力特性,银胶菊胶乳有较橡胶树胶乳更高的伸长性且更有弹性,因此表现了其在断裂前具有更优的伸展能力。另外,通过测量其胶乳模量(下面将讨论),这里所揭示的包含非合成胶乳的避孕套较合成的避孕套更柔软,从而在使用过程中更舒适。
在还有一个实施例中,产品是指用在非居民环境下的产品和工艺,如护理院,治疗中心,浴室,医院,护理站,诊所,医生和牙医办公室,托儿所,以及学校。在这个实施例中,产品可包括针对所服务的行业和人群的具体医疗器械或物品。
在还有一个实施例中,产品是指工业产品和工艺,诸如挤压制品,油漆,薄膜,涂料,薄板,建筑材料,密封剂,包装,生产设备,传送设备和集装箱。在还有一个实施例中,产品是针对家用的,例如儿童用品,办公用品以及健康和美容用品,比如避孕套,涂抹件,化妆品和牙齿护理用品。在其他的实施例中,产品是针对储存容器,食物,饮料,以及电器。最后,该产品是替代目前包含橡胶树的或合成的胶乳的任何现有产品的非橡胶树的、非合成的、低蛋白质的产品。
如例子2中所描述,在此揭示的银胶菊胶乳产品中的蛋白质含量比充分渗滤的橡胶树胶乳产品中的蛋白质含量低得多。低蛋白质含量是胶乳洗涤过程的结果,该洗涤过程去除了所有不与橡胶颗粒结合的可溶性的和疏水性的蛋白质,低蛋白质含量与剩余蛋白质的疏水性相结合,降低了在易于胶乳过敏的个体中引发过敏反应的可能性。留下的疏水性蛋白质与橡胶颗粒膜相联系,因此引发过敏反应的可能性小得多。另外,正如下面的例子所表明,与橡胶树胶乳相比,在此揭示的银胶菊胶乳产品包含相似分子量的橡胶聚合物。而且,因其是较少支化的聚合物,银胶菊胶乳形成了极少量的不溶性凝胶。最后,正如在此揭示的那样,银胶菊胶乳产品比在任何干橡胶含量(“DRC”)比例相当的橡胶树胶乳都更粘稠。不过,在可看到的任何在粘度上的差异可以通过诸如表面活性剂之类的添加剂来克服。银胶菊胶乳产品还具有很低的蛋白质含量,并具有相似的强度和柔性。
例子2.银胶菊胶乳和橡胶树胶乳的手套薄膜的物理特性比较
银胶菊胶乳手套薄膜用下述方案制成。将手套模具预热到75℃并浸渍在由17%的CaNO3、4%的CaCO3和0.2%的表面活性剂组成的45℃凝结剂中,没有停留时间。将凝结剂在75℃下干燥1分钟。然后将模具浸渍在复合的胶乳(33%的总固体含量,室温)中,停留十个计数时间,以形成薄膜。有薄膜涂层的模具在75℃下干燥6分钟,翻边以形成套口,然后在50℃下渗滤两分钟。然后将薄膜在110℃下固化15分钟,从模具取出并进行氯化处理。然后测量如上制作的银胶菊胶乳手套薄膜中的物理成分和含量。采用标准技术测量膨胀度、模量、拉伸强度和断裂伸长率,来对银胶菊胶乳薄膜进行与商业上可获得的氯化橡胶树胶乳手套薄膜相比较的测量。机械稳定性和粘稠度先前已对银胶菊胶乳本身测量过。
1.拉伸强度:将具有不同硫浓度比例的橡胶树胶乳手套的八次重复测试与银胶菊胶乳手套的八次重复测试进行对比。在垂直于其在模型上的方向,将拉伸样品切成10毫米宽,并依据下面揭示的标准技术进行测试。如图2所示,橡胶树胶乳手套具有22-30兆帕(Mpa)的极限拉伸强度,而银胶菊胶乳手套显示出拉伸强度值随硫含量的增加而增加。
2.膨胀度:膨胀试验也是采用标准技术进行的,来测量包含不同硫含量的银胶菊胶乳手套的线性膨胀度。然后将银胶菊胶乳薄膜的膨胀度与已公布的适用于不同硫化水平的橡胶树胶乳的标准进行比较。如表3和表4所示,完全固化状态可以利用根据所希望的银胶菊胶乳特性进行调整的橡胶化学方法来获得。结果表明,未老化的银胶菊胶乳薄膜不用附加的处理工序就能达到完全的固化状态。银胶菊胶乳手套的膨胀度与橡胶树胶乳产品标准相当。如表3和表4所示,用于橡胶树胶乳薄膜的线性膨胀度试验,其数值高于未硫化薄膜的160%,高于轻度硫化薄膜的100-159%,高于中度硫化薄膜的80-99%,而低于完全硫化材料的80%。
表3
表4
3.粘度:橡胶树胶乳与银胶菊胶乳之间粘度比较是采用板对板流变仪技术和粘度计来进行的。板对板流变仪技术是采用本技术领域已知的的标准技术来进行的。粘度计测试是采用布鲁克菲尔德(Brookfield)LVDV-II+型粘度计(布鲁克菲尔德工程公司,斯道顿市,马萨诸塞州)进行的,其中,粘度通过对旋转轴的阻力来测量。由粘度计测定的结果表明,在任何特定百分比的干橡胶含量(DRC)下,银胶菊胶乳的粘度均大于橡胶树胶乳,以厘泊(cps)为单位测得的结果,如图4所示。较高的粘度可归因于胶乳的颗粒粒径较大,从改善的捡拾(pick-up),低的驻留时间和更快的线速度来看,可改善浸渍过程。然而,如果需要的话,也可能通过添加合适的添加剂,如表面活性剂之类,来减小银胶菊胶乳的粘度。
4.机械稳定性:银胶菊胶乳颗粒的平均直径约为1.4μm,相比之下,橡胶树颗粒直径约为1.0μm。与橡胶树胶乳相比,颗粒尺寸的不同,归因于在银胶菊胶乳中的较高的胶乳粘度和较低的总固体含量。胶乳膜晶格的机械稳定性可以采用ASTM的D1076-02标准步骤来测量,其中总固体含量超过55%。然而,为了对此进行补偿,总固体含量少于55%的银胶菊胶乳采用以下揭示的技术来测量。在相似总固体含量下,两种晶格的机械稳定性具有相似的结果,如图5所示。在总固体含量为43%的条件下测试的银胶菊胶乳样品具有高达370秒的机械稳定性时间(MST)。相比较而言,总固体含量为62%的橡胶树胶乳样本,具有的机械稳定性时间值约为1175秒,而总固体含量为46%的橡胶树胶乳具有的机械稳定性时间值约为130秒。
5.断裂伸长率:采用标准的断裂伸长率技术,将不同硫含量的未老化的银胶菊(Unaged NRLG)和已老化的银胶菊(Aged NRLG)的胶乳的断裂伸长率与硫含量相当的已老化的橡胶树(Aged NRLH)和未老化的橡胶树(UnagedNRLH)的胶乳相比较,如图6所示。
在一个试验中,将具有不同含硫量的橡胶树胶乳手套的八次重复测试与银胶菊胶乳手套的八次重复测试进行对比。如图3所示,橡胶树胶乳手套的断裂伸长率为700-800%,而银胶菊胶乳的断裂伸长率数值与硫含量有关。在另一组采用标准断裂伸长率技术的试验中,如图6所示,银胶菊胶乳薄膜甚至在最高硫含量水平3phr(含硫量)下超过ASTM的D3577外科手套标准,并且与橡胶树胶乳相比具有更优的断裂伸长率。银胶菊胶乳薄膜的高断裂伸长率表明这些薄膜具有高的伸展能力。相比较,合成胶乳手套具有的拉伸强度约为25-35MPa,其断裂伸长率约为550-675%。
6.模量:连续薄膜的特性取决于成型温度和影响其弹性模量或抵抗颗粒变形能力的添加剂。薄膜的弹性模量影响其应用,一般来说,一个中等的模量水平适合用作做诸如胶乳手套之类(如ASTM的D3577标准所示)。模量反映了与柔软性和触感相结合的薄膜强度。模量高的薄膜具有开裂和产生裂缝的趋势,而模量非常低的薄膜是发粘的,适合于做粘胶剂。
将不同硫含量的未老化的银胶菊(Unaged-NRLG)和已老化的银胶菊(Aged-NRLG)的胶乳,与硫含量相当的已老化的橡胶树(Aged--NRLH)和未老化的橡胶树(Unaged-NRLH)胶乳,采用标准技术进行模量特性的比较。如图7所示,未老化的银胶菊乳胶薄膜在硫含量为2phr时达到最大值,表明该化合物对硫的最佳比值。如表5所示,这些未老化的银胶菊胶乳薄膜具有几乎跟硫含量为3phr的薄膜一样高的交联密度。如图7所示,在硫含量为2phr的最大模量表明与硫含量为3phr的未老化橡胶树胶乳薄膜相比的单硫键交联(mono-sulfidic links)的最大值化。附加的硫含量可在胶乳聚合物链之间有更多的多硫键交联,从而产生较低的模量。除硫含量最高的情况之外,已老化的银胶菊胶乳薄膜甚至比未老化的橡胶树胶乳薄膜还要柔软。在所有硫含量水平中,橡胶树薄膜都不如银胶菊薄膜柔软。在硫含量最高的情况下,橡胶树胶乳薄膜达不到ASTM的D3577标准,而银胶菊胶乳薄模却仍然符合或超过ASTM标准。
总之,结果表明,银胶菊胶乳产品胜过合成材料,并且具有至少和橡胶树胶乳相当的物理特性,如图8所示。而且,银胶菊胶乳产品符合或者超过适用于外科手套的ASTM的D3577标准,如表5所示。
表5
ASTM D3577 | 未老化薄膜 | 已老化薄膜 |
最小拉伸强度(MPa) | 24 | 18 |
最小断裂伸长率(%) | 750 | 560 |
最大500%模量 | 5.5 | N/A |
例子3.确定银胶菊胶乳产品特性的方法
在另一个实施例中,该方法是一个确定非合成的、低致敏性的、非橡胶树的胶乳产品特性的方法。在此方法中,基于蛋白质的存在和其他物理化学特性,确定了从天然非橡胶树胶乳源加工而得的非合成胶乳产品的低致敏性的物理或化学特性。更具体地说,这种方法用来测量通过离心或离心与乳状液分层相结合的方法,进行处理和浓缩的天然非橡胶树橡胶。在各种实施例中,在此揭示的方法用于在生产、储存、传送和制造过程中的一个或多个阶段对胶乳产品的物理特性和组成进行监测。
一般来说,用于工业或医疗用途的提取的胶乳,包括本文揭示的那些,都是依照包括ASTM的D1076-02标准值的各监管机构的标准规范进行测试的。如在此揭示的银胶菊标准,提供了一份标准表格,列出了一些物理或化学特性。每一个这些特性都与一个数值或者书面值相关联,表示符合那一种类要求的胶乳产品所允许的标准最小量或最大量值。书面值提供一种在靠数值测量很难或不可能的情况下的量化方法(例如,词语“不存在”或“存在”即是书面值)。每一特性都是按照如银胶菊标准中所要求的标准方法来测量的。更具体地说,在此所揭示的方法是针对按照银胶菊标准方案对非橡胶树胶乳产品测试下述化学和物理的特性,包括:总固体含量(%)(例5);干橡胶含量(%)(例6);总碱度(例8);粘度;淤浆含量(例10);凝块含量(例11);KOH值(例12);pH值;机械稳定性(例14);铜(ppm)(例15);锰(ppm)(例15);及密度(mg/m3)
处理阶段或最终银胶菊胶乳产品的纯度是通过以下揭示的方法测定在该胶乳的水相中的蛋白质浓度来进行测试的,包括胶乳蛋白质分析和橡胶树抗原蛋白质分析。整体纯度或成分的要求取决于最终胶乳产品的用途;然而,一般来说,对于干橡胶含量百分比超过40wt%的水中胶乳橡胶浓度,最终产品的基准标准包括一般符合针对非橡胶树的银胶菊标准。
如下所述,在此揭示的方法给出了测试每一种低致敏性的非橡胶树胶乳的方法。在该方法的各种实施例中,样本可从开口桶、封口桶、槽罐车或其他容器准备好,且最好用高速搅拌机搅动大约10分钟。在一个实施例中,通过慢慢将一根干净的、干燥的、内径为10-15毫米且两端开口的玻璃管,插入直到容器的底部,然后内容物可被转移到一个干净且干燥的样本瓶中,而可将样本从储存容器中取走。在另一个实施例中,样本可以用金属采样管、真空装置、遥控采样收集器、或者其他收集方法来取走。在一个实施例中,样本从容器的各个部分采集,并在测试前合在一起。
例子4.银胶菊胶乳薄膜的蛋白质存在和交叉反应
对银胶菊胶乳,蛋白质组成和含量可以这样测定:采用老鼠或兔子模本以及在人体做临床试验中,使用测定标准技术,并与橡胶树胶乳做对比。在各种实施例中,致敏性的Hev-b蛋白质测定可以用酶联免疫吸附剂测定、1-D和2-D免疫印迹、皮肤穿刺试验、放射变应原吸附血液过敏反应试验测定,免疫CAP系统(”CAP”,发马系阿公司,卡拉玛诸市,密执安州)测定,或者这些方法的修改后方法来进行,以检测普通致敏性的Hev-b蛋白质的存在和数量。
例如,如图1所示,免疫印迹是这样来制备的,即针对来自包括三种橡胶树胶乳样本和三种银胶菊胶乳样本的不同胶乳样本的蛋白质,使用抗银胶菊橡胶颗粒总蛋白质多克隆的兔IgG抗体。用老鼠和兔抗体进行双向试验表明,针对提取和浓缩的银胶菊胶乳蛋白质精心增加的抗体不和橡胶树胶乳蛋白质发生交叉反应。
在另一个例子中,将银胶菊胶乳的蛋白质含量与两个橡胶树胶乳样本进行比较,重复三次。晶格中的总蛋白质利用如ASTM的D5712标准方案所描述的修改的劳里试验法(Modified Lowry test)进行了定量测定。如表6所示,与橡胶树胶乳相比,银胶菊胶乳总体含有非常少的蛋白质(<2%)。
表6
样本 | 蛋白质(μg/g干橡胶) |
橡胶树,样本1 | 9,636 |
橡胶树,样本2 | 9,196 |
银胶菊样本 | 106 |
在另一个例子中,CAP(发马系阿公司,卡拉玛诸市,密执安州)测定可以用于测定银胶菊胶乳手套中Hev-b蛋白质的存在和含量,并和两种牌子的橡胶树胶乳手套进行对比,即Redline手套(红线医疗供应公司,金谷市,明尼苏达州)和Triflex外科手套(阿勒吉安斯健康护理/心脏健康公司,马克高园区,伊利诺斯州),以及合成手套。
对CAP测定,首先,利用人类血清库制备人类血清。人类血清库的例子包括:(1)儿科的:人类IgE抗Hev-b血清库是从那些参加巴西橡胶树C-血清皮肤测试研究的人中制备的。这个库和53个脊柱裂儿童的血清相结合,这些儿童有阳性胶乳过敏史,阳性皮肤试验和/或IgE抗胶乳血清学(汉密尔顿等,1999)。两种人类血清库结合而成儿科的IgE抗胶乳库。(2)成人:从参加巴西橡胶树C-血清皮肤试验研究的人群中制备人类IgE抗Hev-b血清库。这个库和180个成人健康护理工人的血清相结合,这些工人已知有阳性史的Hev-b胶乳过敏症,阳性皮肤测试和IgE抗胶乳血清学。这些被结合以形成成人IgE抗胶乳血清库。
更具体地说,在这个例子中,使用上面所揭示的血清库,儿科的和成人的血清库分别含有19kIU/L(每升的致敏原测量单位)和63kIU/L的IgE抗胶乳(按CAP测定法测定)。然后进行CAP测定法以检测IgE抗Hev-b胶乳对三种银胶菊胶乳制剂及其适当防治剂的抑制作用,同时使用防治剂Hev-bE8作为非氨化的胶乳参照。为了可检测的Hev-b交叉反应致敏原,对所有提取物进行测试。反应物的例子包括用Hev-b蛋白质最优化的Hev-b胶乳血清学反应物(如,K82胶乳CAPs,免疫CAP系统),如上所述,Hev-b蛋白质最通常被识别为过敏原。
更具体地说,在这个实施例中,0.1ml的试验银胶菊的、合成的或者已知的Hev-b阳性手套材料用0.1ml含有IgE抗胶乳的人类血清进行培养。每一人类IgE抗胶乳血清库都在单独的测定中进行分析。12种E8非氨化的Hev-b胶乳的稀释物用缓冲液(一式两份)培养,以构成一胶乳致敏原剂量反应曲线,用试验制剂自该反应曲线得到的免疫CAP结果进行插值处理。随着第一次培养(23℃下4小时),每一种混合物都一式两份地用移液管移取到其自身的胶乳致敏原吸附剂中内(K82胶乳-免疫CAP,发马系阿公司,卡拉玛诸市,密执安州)。然后,按制造商的规定完成CAP测定,通过添加带标记的抗人类IgE来检测结合的IgE数量。测定法被设计成如果橡胶树胶乳交叉反应材料存在于任一测试制剂中,它都将结合IgE抗橡胶树胶乳抗体,并努力阻止其随后与固体相胶乳致敏原结合。由测试制剂得到的IgE抗-胶乳抑制力水平的差异与阴性氯丁橡胶和乙烯基塑料手套的提取物进行对比。然后针对IgE抗Hev-b胶乳抑制力分析结果。
以前面提到的人类血清库为例,在氨化的银胶菊胶乳,两种胶乳手套防治剂和一种氯丁合成手套中的Hev-b交叉反应致敏蛋白质含量、分别使用成人血清库和儿童血清库按照免疫CAP抑制力测定法进行测定。非Hev-b交叉反应致敏原在氨化银胶菊胶乳制剂(含有来源于胶乳的可溶性橡胶颗粒相结合的蛋白质)中被检测。另外,使用成人和儿科IgE抗橡胶树胶乳血清库,按照CAP抑制力测定法,在已氨化的银胶菊胶乳中没有检出橡胶树交叉反应蛋白质。还做了一个基础的t-试验,抑制力程度与氯丁橡胶阴性防治剂提取物无明显差异(<1AUml-1)。两种牌子的橡胶树胶乳手套则分别产生1812和1283900 AUml-1的可检测致敏原。这说明在已氨化的银胶菊制剂中不存在可检测的交叉反应致敏蛋白质。
总之,银胶菊胶乳不含有任何已知的引发橡胶树型过敏反应的交叉反应抗原表位。如上面以及图1A和1B所示,银胶菊胶乳蛋白质在至少1000倍于足以引发过敏病人对橡胶树蛋白质响应的蛋白质含量的情况下,不会与抗橡胶树胶乳蛋白质抗体发生交叉反应。
下述例子5-15阐述如何按照本文揭示的方法来测定非橡胶树胶乳产品的物理和化学的特性的具体例子。
例子5.非橡胶树胶乳产品中总固体的测量方法
为了测定银胶菊胶乳中的总固体含量(TSC),采用了下述步骤。在一个例子中,在直径约为60毫米(2.5英寸)的带盖的称量皿中称取大约2.5±0.5克的银胶菊胶乳,通过轻轻旋动称量皿,往胶乳中加入1立方厘米的蒸馏水。胶乳分布在称量皿底部的约32平方厘米(5平方英寸)的面积上。试样在不加盖的称量皿内置于通风式炉内,在70±2℃下干燥16小时,或者在100±2℃下干燥2小时。加上盖子,将样本置于干燥器内冷却至室温,然后称重。重复进行干燥和称重,直到其重量恒定至1毫克或者更少。试验重复进行,检查在0.15%之内。取两次测定的平均值作为结果。总固体的百分含量按下式计算:总固体,%=[(C-A)/(B-A)]x100,式中,A=称量皿质量;B=称量皿加原始样本的质量;C=称定皿加干燥后的样本的质量。
例子6.非橡胶树胶乳产品中干橡胶含量的测量方法
为了测定银胶菊胶乳的干橡胶含量(DRC),可采用下述步骤。在一个例子中,称取大约10克银胶菊胶乳,放入一个直径大约100毫米、深50毫米的瓷蒸发皿中,将蒸馏水加入醋酸水溶液(20Mg/m3)直到总固体含量约为25%。然后添加醋酸(2%),连续搅拌5分钟,使胶乳完全凝固(约80立方厘米)。可以另外加入达20ml的盐酸(2%)来改善凝固。然后将称量皿置于蒸汽浴中15-30分钟,直到血清结果清晰。然后,将凝固的胶乳颗粒与凝块的主体一起拾起,用流水冲洗。重复此过程,直到凝固的橡胶薄片达到2mm的最大厚度。
然后,将橡胶薄片置于通风式炉的环境中,在70±2℃下干燥。如果出现氧化现象,试验可选用另一方案进行,即,使用在55±2℃的干燥温度,或者在凝固之前往胶乳中添加抗氧化剂。薄片最后放在干燥器内冷却至室温并称重。重复进行干燥和称重,直到重量恒定至1毫克或者更少。为了测量干橡胶含量,测试多个样本,检查在0.2%内。取样本的平均值作为结果,而干橡胶含量根据下述公式进行计算:干橡胶含量,%=干凝块质量/样本质量x100。
例子7.非橡胶树胶乳产品蛋白质含量的测量方法
通过将胶乳蛋白质溶解到1%SDS和50mM磷酸钠缓冲液(最终浓度)中,然后根据ASTM的D5712标准方案采用修改的劳里试验进行定量,来测量总蛋白质含量。在此溶解方法中,将胶乳样本(500μl)和450μl的100mM磷酸钠缓冲液(1:1)混合,将每个样本分装于三个微型离心管中;而且每管中加入50μl的20%SDS,混合;在25℃,200rpm的摇动器上培育2小时。在培育之后,将样本旋转5分钟,再将水相转移到新管并再旋转以澄清胶乳。然后,对每个样本,将样本分到3×0.6ml的管内(这些可储存在4℃下过夜)。同样,将牛血清白蛋白质(BSA)的标准液在提取缓冲液中配制成0,5,10,15,25,50,100,200,300,400μg/ml。另外,将60μl的1.5mg/ml的脱氧胆酸钠加入样本和标准液中,混合,停留10分钟。然后将120μl的72%的刚混合的三氯乙酸和磷钨酸(1:1)的混合液混入每个样本和标准液中,在室温下培育30分钟,旋转15分钟去除上清液。将每个蛋白质小球晾干,悬浮在250μl、0.2M的氢氧化钠中,在4℃下保存直到被测定。根据ASTM的D5712标准,利用修改的劳里试验法在24小时内进行测定。通过将胶乳蛋白质溶解于1%SDS和50mM磷酸钠缓冲液(最终浓度)中,再根据ASTM的D6499标准方案利用抗原蛋白质测定来量化,也可测定橡胶树抗原蛋白质。
例子8.非橡胶树胶乳产品中总碱度的测量方法
在一个实施例中,银胶菊胶乳总碱度是用一个玻璃电极pH计和0.1M(摩尔)标准的HCl测量的。样本首先通过如下方法制备:称取5克胶乳于一个容积约10立方厘米、带有磨砂玻璃塞的玻璃称量瓶中,称重精确到1毫克。试样注入盛有大约300立方厘米蒸馏水的一个烧杯中,塞住以防止氨的散失,放在一旁再称重。试样的质量等于两次称重之差值。然后将样本以最少的胶乳损失转移到烧杯中。
将电极从经校准的玻璃电极pH计插入到液体中测量pH。然后,对pH计进行校准,按生产厂家的操作指南,依照测试方法E70进行pH测量。在搅拌的同时,慢慢加入0.1M盐酸(HCl),直到溶液pH值达到6.0。对碱度未知的样本,以1立方厘米的增量加入HCl,并每10秒钟读pH值一次。在另一个实施例中,样本按如上所述方法制备,并加入6滴0.1%的甲基红酒精溶液。该溶液然后用大约0.1摩尔(M)的HCl滴定,直到指示剂变成粉红色。终点出现在完全凝固发生之前,指示剂的颜色变化可以对着轻微凝固的胶乳的白色背景而探测到。
总碱度可按本方法的各种实施例计算。在一个实施例中,总碱度以NH3计算,按照每100克胶乳含NH3的克数来计算,其方法如下:总碱度(以NH3计)%=(1.7×Mxn)/W,式中,M=标准溶液HCl的摩尔数;n=所需的标准HCl溶液的容积,立方米,以及;W=胶乳的原始质量。在另一个实施例中,总碱度以KOH计算,按如下公式计算:总碱度(以KOH计)%=(5.61×Mxn)/W,式中,M=标准溶液HCl的摩尔数,n=所需标准HCl溶液的容积,立方厘米;W=胶乳的原始质量。在还有另一实施例中,总碱度是基于胶乳中的水相计算的,即使用下述计算方法:总碱度,以水的%计=(1.7×Mxn)/W(1-TS/100),式中TS=总固体百分含量;M=HCl标准溶液的摩尔数;n=所需标准盐酸溶液的容积,立方厘米;W=胶乳的原始质量。在另一个实施例中,总碱度可以以氢氧化钾计,并基于胶乳的水相来计算,使用下述公式:总碱度(以KOH)对%水计=(5.61×Mxn)/W(1-TS/100)(6),式中,TS=总固体百分含量;M=标准HCl溶液的摩尔数;n=所需标准HCl溶液的容积,立方厘米,以及;W=胶乳的原始质量。
例子9.非橡胶树胶乳产品粘度的测量方法
样本粘度使用一种布鲁克菲尔德粘度计来测量,型号为LVF或LVT(布鲁克菲尔德工程公司,斯道顿,马萨诸塞州)。该装置包括一同步感应式马达,行星轮系和铍铜弹簧,该马达可在0.63和6.3rad/s(6和60rpm)的恒定转速下,驱动一轴,不同形状和尺寸的转轴可连接在此轴上,该行星轮系控制转轴的转速。转轴在其旋转的时候是通过铍铜弹簧驱动的,该弹簧一受到拉力就会卷起来。拉力的大小由粘度计标度盘上的指针指示。对任何给定的速度和转轴来说,这个读数都与其粘度成比例。粘度计是用±0.02℃的新鲜的校准油(国际标准局)或硅油来校准的。
为测量粘度,首先将样本挤过180nm的标准筛来过滤,该标准筛具有为0.180±0.0009毫米(0.0070±0.0004英寸)的开孔和直径为0.131±0.01毫米(0.0052±0.0005英寸)的线,以将胶乳调节到60±0.1%的总固体。然后,将试样置于水浴中,调整到所需测试温度25±2℃,保持2个小时以消除胶乳中的空气。
然后将胶乳试样慢慢沿着杯壁注入600cm3的烧杯,(冷却到25℃),以阻止空气混入。在一个实施例中,粘度计的转轴浸没到样本内,直到胶乳的表面处在转轴轴上的刻度之内。作为替代,转轴按以上方法在将其接到粘度计之前,浸入到胶乳中。使用1号转轴在0.63和6.3rad/s(6和60rpm)转速下时,粘度计在100刻度上的提供了一个读数。如果粘度比1号转轴的限制值更大,可以换成2号转轴。
为了计算粘度,读数依照取决于所用转轴及其速度的以下各值进行乘法运算:1号轴,0.63rad/s(6rpm)=10;1号轴,6.3rad/s(6rpm)=1;2号轴,0.63rad/s(6rpm)=50;2号轴,6.3rad/s(6rpm)=5。然后用每秒毫帕(MPa/s)来记录粘度,等同于厘泊。
例子10.非橡胶树胶乳产品淤浆含量的测量方法
为了测量淤浆含量,量取45-50克银胶菊胶乳于两个50立方厘米的离心管的每一个之中,在大约240rad/s(2300rpm)的速度下离心20分钟。每个管都用帽或者膜固定,以防止胶乳蒸发或者表面膜形成。任何表面形成的一些乳状物用小勺取出或弃除,浮在表面胶乳用2mm的移液管尖抽出,直到在淤浆在残余顶部还有大约10mm以上。然后将管用氨水-酒精溶液(含28立方厘米的氢氧化铵、946立方厘米最小纯度95%的乙醇和2810立方厘米的水)充满其顶部,并再次离心25分钟,然后重复该过程直到浮在表面的溶液澄清。在最后离心之后,离心管子被排空到1厘米的标记处,剩余残留物转移到200立方厘米的称量烧杯中,根据需要使用一些氨水-酒精混合液。然后将残留物置于电热板上蒸发,并在70±2℃下干燥,称重。对干燥的残留物进行重复操作,质量应该容许在1mg之内。
例子11.非橡胶树胶乳产品中凝块含量的测量方法
为了以重量百分含量(wt%)计算凝固物含量,将200克充分搅拌的银胶菊胶乳样本,用等体积的5%的碱皂溶液稀释,并且通过其开口为180±0.009毫米(0.007±0.0004英寸),线的直径为0.131±0.01毫米(0.0052±0.0005英寸)的180nm网孔筛进行过滤。在经过筛网之后,将筛网用5%的肥皂溶液冲洗,接着用蒸馏水冲洗。然后将筛网在100±2℃下干燥30分钟,再在干燥器中冷却,最后称重。干燥,冷却和称重过程每间隔15分钟重复一次,直到两次连续称重之间的质量丢失少于1毫克。在筛网的原始质量与筛网加保留在其上的凝固物的质量之间的差值,就是干燥凝固物的质量。凝固物的百分含量计算方法如下:凝固物含量,%=(mi/mo)×100,式中mo=测试部分的质量;而mi=凝固物的质量。
例子12.非橡胶树胶乳产品中KOH量的测量方法
使用依赖电测测量的pH计和用来测定8-14范围内的pH值的玻璃电极流动的甘汞装置,来测量KOH值。首先称50克银胶菊胶乳样本放入400立方厘米的烧杯中,搅拌时通过加入5%甲醛(1cm3=0.0189gNH3)将水里的氨含量调整到0.5%。(甲醛溶液(5%),立方厘米=W(100-TS)(%水相中NH3-0.50)/189,式中,W=湿胶乳样本的克数g,而TS=总固体百分数。甲醛用达5.0%的稀释储备USP级甲醛和蒸馏水制成,再用0.1摩尔氢氧化钾(KOH)溶液中和,以酚酞为指示剂,滴定至淡粉红色。
加入足够的蒸馏水以稀释胶乳到含有约30%的固体,滴定电极插入胶乳样本来测定其pH值。搅拌时,加入5立方厘米的0.5摩尔的KOH溶液,10秒后再记录pH值。搅拌时,0.5摩尔的KOH溶液以1立方厘米增值加入,且在每次加入的10秒钟后测一次pH值,直到确定终点。
滴定的终点确定是在pH值的曲线与KOH液立方厘米为单位的容积对比而形成一弯曲的位置做出的。在这一点,曲线斜率,也就是一阶微分,达到了最大值,二阶微分是0。假设从正到负的通过1立方厘米的增值是线性的,终点从二阶微分计算。表7显示了弯曲点确定的一个例子。在表7中,读数仅仅在临近弯曲的区域显示。从6.0到12.0立方厘米的值被标出了,但是与终点无关。如表7所示,线的斜率从+0.07到-0.04,截距为零,得出在KOH的15.0和16.0立方厘米之间的距离的比值为7/11。因此,弯曲点是15,7/11或者15.64。这个比值能通过所形成的三角形的几何原理得到证明。
表7
一阶微分 | 二阶微分 | ||
KOH溶液,立方厘米 | pH值 | pH值/立方厘米 | pH值/立方厘米 |
13.0 | 10.47 | ||
13.5 | ... | 0.18 | ... |
14.0 | 10.65 | ... | 0.03 |
14.5 | ... | 0.21 | ... |
15.0 | 10.86 | ..... | 0.07 |
15.5 | ... | 0.28 | ..... |
16.0 | 11.14 | ... | -0.04 |
16.5 | ... | 0.24 | ..... |
17.0 | 11.38 | ... | -0.09 |
17.5 | .... | 0.15 | ... |
18.0 | 11.53 | ... |
KOH值,是指中和胶乳中100克固体中的酸所需要的KOH的克数值,其计算方法如下:KOH值=(cm3KOH x Mx561)/(TSx样本质量),其中:TS=总固体百分数,M=标准KOH溶液的摩尔数。
例子13.非橡胶树胶乳产品pH值的测量方法
使用依赖电测测量的标准仪器和可用于8-14范围内的pH值的用来确定pH值的玻璃电极甘汞装置,可以计算pH值。在一个实施例中,pH计按其制造商的要求根据E70方法校准。在这个实施例中,通过在适温的水浴中稍微搅拌样本容器,使胶乳样本的温度范围调整到23±1℃。然后确定pH值并记录。
例子14.非橡胶树胶乳产品的机械稳定性的测量方法
浓缩的银胶菊胶乳的机械稳定性通过高速搅拌技术完成,这些技术包括搅拌器,搅动器和测试瓶。在一个实施例中,搅拌装置是一垂直轴的高速搅拌器,在测试期间能维持在1470±22rad/s(14000±200rpm)的速度。在搅拌盘的连接点处,搅拌轴的直径在其低端大约是6.3毫米(0.25英寸),且可以直径向上减小达到更大的强度,当保持相对恒定的速度时,搅拌轴伸到测试瓶的底部,在特定的速度下偏差在0.25毫米(0.010英寸)内。
在一个实施例中,搅拌器是一个磨光的不锈钢盘,直径约20.83±0.03毫米(0.820±0.001英寸),厚度约1.57±0.05毫米(0.062±0.902英寸),在它的正中心有一个螺丝钉,用来连接到搅拌轴下端的中心处。在一个实施例中,测试瓶是一个平底圆柱状玻璃容器,其内径约为57.8±1毫米(2.28±0.04英寸),高度约为127毫米(5英寸),厚度约为2.3毫米(0.09英寸)。在这个实施例中,瓶子能升降到与轴和搅拌器相对的特定位置。
测量机械稳定性之前,胶乳存放在室温下,最好在暴露在空气中的24小时内测量。在一个实施例中,银胶菊橡胶用氨水溶液(0.6%NH3)稀释至总固体浓度正好为43.0±0.2%,同时通过轻柔搅拌加温至36-37℃。然后将胶乳挤过一个180毫米的不锈钢滤网,该滤网开口约为0.180±0.009毫米(0.0070±0.0004英寸),线的直径约为0.131±0.013毫米(0.0052±0.0005英寸)。然后,重约80.0±0.5克的挤过的胶乳称入测试瓶中并带到35±1℃的温度下。
在这个实施例中,然后将胶乳在14000±200rpm中搅拌,直到达到终点,如以下条件所示:胶乳凹面的下降,湍流度丢失,或者搅拌动作声音的改变。在这个实施例中,由频繁往胶乳中浸入一玻璃棒并且轻轻拉过使用者的手掌一次,来确定终点。薄膜中的小块凝固胶乳沉淀在手掌上,这意味着测试结束。在另外搅拌15秒后沉淀在薄膜上凝固橡胶数量的增加,或通过上述180nm的不锈钢筛挤过胶乳,都能核实这个终点。
银胶菊胶乳的机械稳定性值由测试开始到终点所经历时间的秒数来表示。通过多次重复测试来确定精确度,所有值均在5%之内。
例子15.非橡胶树胶乳产品中铜和锰的测量方法
百万分之几的数量级的铜和锰的含量按照ASTM的D1278标准中所述的方法来测定。
例子16.非橡胶树胶乳产品密度的测量方法
当胶乳处于不可能直接测重的位置时,该测定方法用来计算所测得的一定体积的胶乳的重量。为此,密度测量必须对这样的胶乳样本进行,即该胶乳样本所含有的空气数量与当测量容积时所含有的胶乳数量是相等的。在制样之前,将胶乳放置至少24小时,以确保气泡分散。这里所描述的密度计算方法的两个实施例,包括直接“裁判”法和间接法。在第一实施例中,密度和容积在同一温度下测量(如果温度略有不同,也可作校正)。在第二实施例中,胶乳的密度是在任意温度下,通过对在已知容积的烧瓶内的已知数量的胶乳和已知数量的蒸馏水进行称重来测量的。基于胶乳的这一测量过程和已知的膨胀特性,可推测出其他温度下的密度(如,在测量容积时的环境温度)。
在直接“裁判”的实施例中,将盛有银胶菊胶乳的第一烧瓶用水浴加热至一恒定温度,并搅拌。将装有蒸馏水的第二烧瓶在相同水浴中加热至一恒定的温度。将容积为50立方厘米的密度瓶,连同带有毛细管穿孔的磨砂玻璃塞和磨砂玻璃帽一起称重,精确到0.001克,且在同一水浴中,浸没至其颈部,玻璃塞在其位置上,但玻璃帽不在。将这三个容器都加热到一恒定的温度,保持约20分钟。然后将银胶菊吹入密度瓶并以充填它,从水浴中移出,立即用玻璃帽盖住。然后将瓶干燥并称重,精确至0.001克。在胶乳废弃后,对密度瓶重新校准,这个过程根据上述方法用蒸馏水重复进行。多次重复试验可用来确保测量的准确性。
然后,根据下面的公式计算胶乳的密度:D=(MLx DW)/MW,式中,D=恒温水浴温度下胶乳的密度,mg/cm3;ML=密度瓶中胶乳的质量,g;MW=密度瓶中水的质量,g;DW=浴温下水的密度,mg/cm3。密度是在规定温度下质量除以容积,其单位在适当时可以转换。胶乳的密度以每立方米兆克为单位进行测定。在第二间接密度计算实施例中,将一个容量烧瓶通过称重精确到1毫克进行校准。烧瓶在室温下用蒸馏水充填,并用一条线来作为标记来指明水位。然后,对装水的烧瓶称重,精确至1毫克。对于这个温度t,烧瓶的容积根据标记按下式计算:V=(Bt-A)/dt,式中,V=实验室温度下烧瓶以立方厘米表示的容积;t=烧瓶中的水温;Bt=在温度t下烧瓶加水的质量;A=空烧瓶的质量,dt=在温度t时以mg/cm3表示的蒸馏水的密度。表8显示了25℃下的样本计算。
表8
特性 | 测量值 |
Bt(25.0C) | 156.0018g |
A | 52.997g |
水的质量(25.0C) | 103.004g |
水的密度(25.0C) | 0.99707Mg/m3 |
V=103.004/0.99707=103.307cm3 | V是指室温下烧瓶至校准标记的容积 |
在这个实施例中,计算密度首先要对干净、干燥、经校准的烧瓶进行称重,精确至1毫克。然后,将银胶菊胶乳导入烧瓶,至烧瓶约半满,然后用塞子塞住并且重新称重,精确到1毫克。接着,拿开塞子,添加蒸馏水至校准标记。在添加水到烧瓶期间,反复摇动烧瓶以释放积留在胶乳中的气泡。在液位到达标记时,塞住烧瓶,再次称重,精确至1毫克。在充分混合内容物之后,测量温度,使用下式计算密度:Dt=(B-A)/[V-(C-B)/dt],式中,Dt=胶乳在温度t时,以mg/cm3为单位表示的密度;t=在容量瓶中混合的胶乳和水的温度;B=烧瓶加胶乳的质量;A=空烧瓶的质量;V=烧瓶至其颈部的校准标记处的容积;C=烧瓶至其颈部的校准标记处的烧瓶、胶乳和水的质量;dt=在温度t时,蒸馏水以g/cm3为单位表示的密度。表9显示了样本的密度计算。
表9
特性 | 测量值 |
B | 101.426g |
A | 52.997g |
胶乳质量 | 48.429g |
C | 153.187g |
B | 101.426g |
水的质量 | 51.761g |
混合温度 | 23.3℃ |
水的密度(23.3℃) | 0.99749Mg/m3 |
水的容积(23.3℃) | 51.761/0.99749=51.1/91cm3 |
烧瓶容积 | 103.307cm3 |
水的容积(23.3℃) | 51.891cm3 |
胶乳的容积(23.3℃) | 51.416cm3 |
胶乳的计算密度(23.3℃) | D23.3=48.429/51.416=0.9419Mg/m3 |
胶乳的体积膨胀系数(23.3℃) | 0.00055Mg/m3 |
计算 | 25.0-23.3=1.7-C变化 |
计算 | 1.7x0.00055=0.0009Mg/m3 |
最终计算结果 | D26=0.9419-0.0009=0.9410Mg/m3 |
例子17非橡胶树胶乳产品挥发性脂肪酸的测量方法
脂肪酸值,或中和含100克总固体的胶乳样本中的挥发性脂肪所需氢氧化钾(KOH)的克数值,是用小蒸馏器方法测定的。在一个实施例中,马氏蒸馏器(Markham sem-micro still)或修改的马氏蒸馏器(爱司玻璃公司,维兰市,新泽西州),微量滴定管(如,10cm3的微量滴定管)和蒸汽发生器(例如:由2到3cm3的烧瓶,带温度控制的电热板,合适的玻璃管和橡胶管连接件构成,金刚砂晶体或者类似材料应该用于防止暴沸)被用于测量银胶菊胶乳中的挥发性脂肪酸。
在一个实施例中,称取50±0.2克浓缩胶乳,置于一个250cm3烧杯中,加入50cm3(NH4)2SO4溶液,同时用玻璃棒搅拌。将烧杯浸于70℃的水浴中3-5分钟,以凝固胶乳。然后,将胶乳通过低灰分,中等质地的干滤纸过滤,去除乳浆,进入50cm3埃伦迈尔烧瓶中。凝固物放进烧杯里,用玻璃棒挤压,以除去乳浆残留物。用移液管将25cm3过滤后的乳浆以及5cm3的H2SO4(2+5)吸取到另一50cm3的烧瓶中,用塞子塞住,摇动以混和。在开始一系列测试之前,蒸馏器通蒸汽以对其清洗15分钟或者更长时间。用对蒸汽发生器的排气产生的虹吸作用,放空内室,然后关闭对蒸馏器的蒸汽供应,并打开底部放泄口。这种从底部放泄口水的过程,产生了负压,使内室放空,然后,内室用蒸馏水冲洗。
为了开始蒸馏,将供应给蒸馏器蒸汽排放掉,并用移液管吸取10cm3发酵乳浆,连同一滴硅酮消泡剂,一起加入内室。将一个100cm3刻度量筒,置于冷凝器下收集馏出物,蒸汽直穿内室中的样本。调接蒸汽流以产出速率为3-6cm/分钟的馏出物。收集100cm3馏出物,并打入无CO2的空气。加入一滴溴百里酚蓝色指示剂,然后用0.01摩尔Ba(OH)2溶液快速滴定样本至蓝色,该蓝色持续大约10-20秒后再转变成绿色。
挥发性脂肪酸值,计算方法如下:挥发性脂肪酸值=(AM×561)/W×TS),式中,A=滴定样本所需的Ba(OH)2溶液的立方厘米数,M=Ba(OH)2溶液的摩尔浓度,W=对应于10cm3发酵乳浆的胶乳质量,以及TS=胶乳中的总固体百分含量。W因子计算方法如下:W=(50×25)/[(50+S)×3],式中,50=称出胶乳的克数;25=所用乳浆的立方厘米数;50+S=(NH4)2SO4溶液的立方厘米数加上50g胶乳中的乳浆的立方厘米数;3=比值30/10,其中,30等于25cm3经过滤的乳浆加5cm的3H2SO4;10等于10cm3等份。W值取决于胶乳中的总固体和干橡胶含量,但是仅为了这些数值上显著差异需要对其重新计算。表10显示几个典型的W值。乳浆容积S的计算方法如下:S=(100-DRC)/(1.02×2),式中,DRC=胶乳中的干橡胶含量的百分数,而1.02是乳浆的比重。
表10
TS | DRC | W | |
经离心的胶乳 | 62.5 | 61.0 | 6.03 |
经乳化的胶乳 | 68.0 | 66.5 | 6.28 |
普通胶乳 | 40.0 | 36.0 | 5.12 |
例子18.含有硼酸保护剂的非橡胶树胶乳产品晶格中的硼酸测量方法
为了测定银胶菊胶乳中的硼酸含量,将含有大约0.02克硼酸的一定量的胶乳的pH值调整到7.5,其中的硼酸基本上是以未离解的形式存在。然后,过量加入甘露醇,以形成强酸性硼酸-甘露醇络合物。因此,与存在于胶乳中的硼酸等当量的H离子得以释放,使pH值下降。硼酸是由使胶乳的pH值恢复到其原值所需的碱量来测定的。胶乳中硼酸的百分含量(质量基)的计算方法如下:硼酸(H3O3)=6.18×M×V/M,式中,M=氢氧化钠溶液的摩尔浓度,V=恢复胶乳的pH值至7.5所需的氢氧化钠溶液的体积,cm3,M=所述胶乳试样以克表示的质量。
例子19.在测试非橡胶树胶乳产品中测量精密度和偏差的方法
所述每种试验方法的精密度都是根据对源于巴西橡胶树的三种不同天然橡胶晶格进行实验室内部研究的结果来估算的,然后外推到银胶菊胶乳。银胶菊胶乳测试报告将包括附加的精密度和偏差信息,如果可获得的话。
例子20.非橡胶树胶乳的银胶菊标准测试结果
测试是根据ASTM的D1076-02标准所描述的方法,针对市场上可买到的1型和2型橡胶树胶乳的标准规范值进行。测试还根据在此揭示的针对银胶菊的试验方法,就以下项目的测定来进行的,包括:总固体含量(%);干橡胶含量(%);总碱度,KOH按胶乳的%计;粘度;淤浆含量;凝块含量;KOH值;pH;机械稳定性;铜(ppm)和锰(ppm);密度(Mg/m3);蛋白质含量;以及挥发性脂肪酸。表11和表13示出了根据所揭示的方法对银胶菊胶乳样本进行测试所得到的真实的具体数据。在表11中,测试的银胶菊样本已经过离心和乳化处理。然而,表12显示了银胶菊样本的试验结果,其中(1)仅是离心处理,(2)是离心和乳油化处理结果。表12还示出了(1)经氢氧化钾缓冲和(2)经氨化的结果。
如表11所示,银胶菊橡胶展示了在以下项目可与1型和2型橡胶树胶乳差不多的结果,包括:总固体含量(%);干橡胶含量(%);总碱度,KOH按胶乳的%计;粘度;淤浆含量;凝块含量;氢氧化钾值;pH;机械稳定性;铜和锰;密度(mg/m3);颜色和气味。如表12所示,具有不同缓冲液和氨成分的银胶菊,也展示了可与1型和2型橡胶树胶乳差不多的结果。
表11
橡胶树 | 橡胶树 | 银胶菊 | |
ASTM规范D1076-02,1型经离心的NRL | ASTM规范D1076-02,2型乳化的NRL | 经离心和乳化的(氨化) | |
总固体含量(%) | 61.3%最小 | 66.0%最小 | 50.0 |
干橡胶含量(%) | 59.8%最小 | 64.0%最小 | 48.8 |
总碱度,KOH银胶菊的%计 | 0.6%最小作为NH3 | 0.55%最小作为NH3 | 0.14 |
粘度,在43%的总固体含量,厘泊 | 没有要求 | 没有要求 | 27.7 |
淤浆,重量% | 0.10%最大 | 0.10%最大 | 0.004 |
凝块,重量% | 0.05%最大 | 0.05%最大 | 0.002 |
KOH值 | 0.80最大 | 0.80最大 | ND |
pH | 没有要求 | 没有要求 | 11.5 |
机械稳定性 | 650最小,在55%的总固体含量下 | 650最小,在55%的总固体含量下 | 149sec.,在43%的总固体含量下 |
铜(ppm) | 8ppm最大(dw橡胶) | 8ppm最大(dw橡胶) | 4.3 |
锰(ppm) | 8ppm最大(dw橡胶) | 8ppm最大(dw橡胶) | 0.7 |
镁(ppm) | 没有要求 | 没有要求 | 24 |
密度(Mg/m3) | 没有要求 | 没有要求 | 0.95 |
颜色 | 无显著的蓝色或者灰色 | 无显著的蓝色或者灰色 | 米白色 |
气味 | 无腐败气味 | 无腐败气味 | 氨味 |
表12
ASTM的D1076-02特性 | 银胶菊KOH缓冲的胶乳产品 | 银胶菊KOH缓冲的胶乳产品 | 银胶菊氨化的胶乳产品 | 银胶菊氨化的胶乳产品 |
最后的处理步骤 | 离心 | 离心和乳状 | 离心 | 离心和乳状 |
总固体含量(%) | 48.0 | 54.0 | 48.0 | 54.0 |
干橡胶含量(%) | 47.0 | 53.0 | 47.0 | 53.0 |
总碱度,KOH作为胶乳的% | 0.10 | 0.40 | 0.10 | 0.40 |
粘度,在43%的总固体含量下,cps | 20.0 | 150.0 | 20.0 | 150.0 |
淤浆,重量% | - | 0.07 | - | 0.07 |
凝块,重量% | - | 0.02 | - | 0.02 |
pH | 11.0 | 13.0 | 11.0 | 13.0 |
机械稳定性,在43%的总固体含量,秒 | 100.0 | 600.0 | 100.0 | 600.0 |
铜(ppm) | - | 6.0 | - | 6.0 |
锰(ppm) | - | 6.0 | - | 6.0 |
密度(Mg/m3) | 0.940 | 0.960 | 0.940 | 0.960 |
颜色 | 米白色,浅褐色 | 米白色,浅褐色 | 米白色,浅褐色 | 米白色,浅褐色 |
气味 | 无味 | 无味 | 轻度氨味 | 轻度氨味 |
例子21.非橡胶树胶乳用酶联免疫剂测定D6499和修改的劳里测定D5712测试法的结果
由银胶菊胶乳制成的胶乳手套样本被称重和测量,然后切下,使缓冲液与所有表面接触。在一个pH值为7.4,温度为25±5℃的100mM的平衡盐缓冲液中不停搅拌,以此来提取2小时,提取率为5:1(ml缓冲液/g样本)。胶乳提取物被离心以去除颗粒,然后通过采用ASTM D6499标准方案的ELISA抑制测定法,采用ASTM的D5712标准方案的修改的劳里测定法,以及采用ASTM的D5712标准方案的背景减除技术来测定。
对ELISA抑制测定法来说,样本分别用7个2倍的系列稀释液以一式两份系列进行测定,然后根据ASTM的D6499标准方案执行。产生的数据利用从非化合的氨化胶乳中提取的胶乳蛋白质做为参考来计算,数据以样本中抗原胶乳蛋白质含量的mg/g和mg/dm2来表示。
对修改的劳里测定法来说,三种提取物用脱氧胆酸/三氯乙酸/磷钨酸,再悬浮于NaOH中,然后用ASTM的D5712标准方案测试。样本用4个2倍的系列稀释液以一式两份测定,结果用卵清白蛋白质作为结果数据的参照标准来计算,用mg/dm2表示,如表13所示。
表13
重复次数 | 样本重量 | 提取容积(ml PBS) | 劳力测定浓度(μg/ml) | 表面积 | 总蛋白质浓度(μg/gm)平均 | 总蛋白质浓度(μg/gm)平均 |
试验1 | 12.2 | 61 | 8 | 11.9 | <41 | <41 |
试验2 | 12.5 | 63 | 探测不到 | 11.9 | <41 | <41 |
试验3 | 10.9 | 55 | 探测不到 | 11.7 | <41 | <41 |
以上将该发明的各种实施例都做了详细的描述。虽然这些内容直接描述了上面的实施例,可以理解在本领域中的那些熟练人员可以对这里所示出的和所描述的具体实施例构想出更改和/或变化方案。任何这些落入这里描述内容的范围内的更改或者变化也应包括在其中。除非特别提到,发明人的意图是,在说明书和权利要求书中的词语对那些本应用领域中的普通熟练人员来说具有普通的和惯常的含义。
已经给出了对本发明的优选实施例和申请人在提出申请时已知最佳模式的上述描述,该描述的目的是为了阐述和说明的。它不是详尽的,也不将发明限制在已示出的精确形式,在上面教导下许多种更改和变化都是可能的。选择和说明实实施例是为了更好地解释发明的原理和它的实际应用,且能使其他本领域熟练人员最好地利用在不同的实实施例中的本发明以及与设想的具体应用合适的各种修改。因此,本发明并不局限于为了实施发明而揭示的具体实施例。
Claims (28)
1.胶乳产品,包括:
弹性材料,包括得自非橡胶树植物的橡胶,所述弹性材料的特征包括:根据ASTM D6499测量,没有可检测数量的橡胶树抗原蛋白质;根据ASTM D5712测量,每克干重胶乳中总蛋白质含量小于或等于约两百毫克;以及对水蒸气和水基液体的基本不渗透性。
2.如权利要求1所述的胶乳产品,其中所述的非橡胶树植物是银胶菊。
3.如权利要求1所述的胶乳产品,其中所述的橡胶树抗原蛋白质选自由Hevb1,Hev b3,Hev b2,Hev b4,Hev b6.01,Hev b6.02,Hev b6.03,Hev b7.01,Hev b7.02,Hev b11,Hev b12,Hev b5,Hev b8,Hev b9和Hevb10组成的组.
4.如权利要求1所述的胶乳产品,还包括具有这样的特征,即根据ASTMD6499测量,没有可检出量的任何橡胶树抗原蛋白质。
5.如权利要求4所述的胶乳产品,其中所述的橡胶树抗原蛋白质包括Hev b1,Hev b3,Hev b2,Hev b4,Hev b6.01,Hev b6.02,Hev b6.03,Hev b7.01,Hevb7.02,Hev b11,Hev b12,Hev b5,Hev b8,Hev b9和Hev b10.
6.如权利要求1所述的胶乳产品,所述的弹性材料还包括具有这样的特征,即总碱度等于或者大于约千分之一。
7.如权利要求1所述的胶乳产品,所述的弹性材料还包括这样的特征,即没有可检出的气味。
8.如权利要求1所述的胶乳产品,还包括具有这样的特征,即疏水蛋白质与亲水蛋白质的比值等于或者大于约9比1.
9.如权利要求所述1的胶乳产品,还包括至少一层所述的弹性材料。
10.如权利要求9所述的胶乳产品,其中所述层的弹性材料包括用于第二种胶乳产品的涂料,其中所述第二种胶乳产品选自由橡胶树胶乳产品和合成胶乳产品组成的组。
11.如权利要求10所述的胶乳产品,其中所述的非橡胶树的非银胶菊的胶乳产品得自产生橡胶的种,并选自由续随子,马里奥拉,银鲛,乳草属植物,一枝黄属植物,白印度车前草,俄罗斯蒲公英,山薄荷,美州石蚕属植物,马达加斯加橡胶藤,和高吊钟花组成的组。
12.如权利要求9所述的胶乳产品,所述层的弹性材料还包括这样的结构,即它包括四个手指接受部,一个拇指接受部,并能盖住人的一只手。
13.如权利要求1所述的胶乳产品,其中所述的弹性材料构成医疗器械的一部分。
14.如权利要求13所述的胶乳产品,其中所述的医疗器械选自由手套,导管,医用黏合剂,伤口护理产品,试验室测试设备,测定,一次性套件,药物容器,注射器,瓣膜,密封件,端口,柱塞,镊子,滴管,塞头,绷带,医用敷料,检查床单,内腔器械的护鞘,溶液袋,球蘘,温度计,条板,管子,粘结剂,针冒,止血带,胶带,罩,听诊器,压紧带,缚紧带,充气系统,绷带,箍套,夹板,颈环,拐杖组成的组。
15.鉴定具有低致敏性的胶乳产品的方法,包括:从所述胶乳产品中获得样本以用于鉴定;根据ASTM D6499,检测所述样本中存在或不存在橡胶树抗原蛋白质;根据ASTM D5712测量所述样本中所述总蛋白质含量;当没有橡胶树抗原蛋白质被检出且每克干重胶乳中所述总蛋白质含数量小于或等于约200毫克时,确定所述样本具有低致敏性。
16.如权利要求15所述的方法,其中所述的橡胶树抗原蛋白质选自由Hev b1,Hev b3,Hev b2,Hev b4,Hev b6.01,Hev b6.02,Hevb6.03,Hev b7.01,Hev b7.02,Hev b11,Hev b12,Hev b5,Hev b8,Hev b9和Hev b10组成的组.
17.如权利要求15所述的方法,还包括,根据ASTM D6499测量,检测一组橡胶树抗原蛋白质的所述存在或不存在。
18.如权利要求17所述的方法,其中所述组的橡胶树抗原蛋白质包括两种或者更多的抗原蛋白质,这些蛋白质选自由Hev b1,Hev b3,Hev b2,Hevb4,Hev b6.01,Hev b6.02,Hev b6.03,Hev b7.01,Hev b7.02,Hev b11,Hevb12,Hev b5,Hev b8,Hev b9和Hev b10组成的组.
19.如权利要求15所述的方法,还包括测量所述样本中疏水蛋白质与亲水蛋白质的比值;并且当所述疏水蛋白质与所述亲水蛋白质的比值等于或大于约9比1的时候,确定所述样本具有低的致敏性。
20.如权利要求15所述的方法,还包括确定所述样本的总碱度;以及当所述总碱度大于或等于约千分之一时,确定所述样本具有低的致敏性。
21.如权利要求15所述的方法,还包括检测从所述样本中发出的气味的所述存在或不存在;以及当从所述样本中没有发出可以检测到的气味时,确定所述样本具有低的致敏性。
22.胶乳产品,包括:
干的薄膜,包括得自银胶菊植物的橡胶,所述干的薄膜有以下特征,包括:根据ASTM D6499测量,没有可检出量的橡胶树抗原蛋白质;根据ASTM D5712测量,每克干重胶乳的总蛋白质含量小于或等于约200微克;以及对水蒸汽和水基溶液的基本不渗透性。
23.手套,包括:
弹性材料,具有这样的构型,即包括四个手指接受部;一个拇指接受部;并能盖住人的一只手;并且其中所述弹性材料包括得自银胶菊植物的橡胶,所述弹性材料有如下特征:根据ASTM D6499测量,没有可检出量的橡胶树抗原蛋白质;根据ASTM D5712测量,每克干重胶乳的总蛋白质含量为小于或等于约200毫克;且对致病的人类病毒具有不渗透性。
24.导管,包括:
弹性材料,包括得自银胶菊植物的橡胶,所述弹性材料有以下特征,包括:根据ASTM D6499测量,没有可出量的橡胶树抗原蛋白质;根据ASTM D5712测量,每克干重胶乳的总蛋白质含量为小于或等于约200毫克;以及对水蒸汽和水基溶液的基本不渗透性。
25.能够阻止哺乳动物的精子使卵子受精的器械,包括:
包括弹性材料的障碍物,所述弹性材料包括得自银胶菊植物的橡胶,所述弹性材料具有以下特征,包括:根据ASTM D6499测量,没有可出数量的橡胶树抗原蛋白质;根据ASTM D5712测量,每克干重胶乳的总蛋白质含量为小于或等于约200毫克;以及对哺乳动物精子的不渗透性。
26.如权利要求25所述的器械,其中所述的障碍物选自由男性避孕套,女性避孕套,海绵球,子宫帽以及隔膜组成的组。
27.牙齿护障,包括:
弹性材料,包括得自银胶菊植物的橡胶,所述弹性材料有如下的特征,包括:根据ASTM D6499测量,没有可检出量的橡胶树抗原蛋白质;根据ASTM D5712测量,每克干重胶乳的总蛋白质含量为小于或等于约200毫克;以及对水蒸汽和水基溶液的基本不渗透性。
28.避孕套,包括:
本体,具有壁、封闭端和开口端,所述壁限定了包括内表面和外表面的突出部,其中所述本体包括含有得自银胶菊植物的橡胶的弹性材料,所述弹性材料有以下特征,包括:根据ASTM D6499测量,没有可检出量的橡胶树抗原蛋白质;根据ASTM D5712测量,每克干重胶乳的总蛋白质含量为小于或等于约200毫克;以及对致病的人类病毒的不渗透性。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2006018906 | 2006-05-11 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101437464A true CN101437464A (zh) | 2009-05-20 |
Family
ID=40711549
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNA2006800545454A Pending CN101437464A (zh) | 2006-05-11 | 2006-05-11 | 非合成低蛋白质橡胶胶乳产品及其测试方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101437464A (zh) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102893148A (zh) * | 2011-05-19 | 2013-01-23 | 马来西亚橡胶局 | 用于定量测量乳胶悬浮体机械稳定性时间(mst)的方法及在所述方法中使用的设备 |
CN109161059A (zh) * | 2018-09-14 | 2019-01-08 | 蚌埠创特新材料科技有限公司 | 一种全生物可控降解多功能农用除草保墒地膜 |
CN109765105A (zh) * | 2017-11-09 | 2019-05-17 | 东莞前沿技术研究院 | 球体耐压测试方法 |
CN110628043A (zh) * | 2018-06-22 | 2019-12-31 | 北京化工大学 | 一种蒲公英橡胶水基提取方法 |
CN116933102A (zh) * | 2023-09-15 | 2023-10-24 | 成都数之联科技股份有限公司 | 一种橡胶质量检验方法、装置、介质、设备及程序产品 |
-
2006
- 2006-05-11 CN CNA2006800545454A patent/CN101437464A/zh active Pending
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102893148A (zh) * | 2011-05-19 | 2013-01-23 | 马来西亚橡胶局 | 用于定量测量乳胶悬浮体机械稳定性时间(mst)的方法及在所述方法中使用的设备 |
CN102893148B (zh) * | 2011-05-19 | 2015-11-25 | 马来西亚橡胶局 | 用于定量测量乳胶悬浮体机械稳定性时间(mst)的方法及在所述方法中使用的设备 |
CN109765105A (zh) * | 2017-11-09 | 2019-05-17 | 东莞前沿技术研究院 | 球体耐压测试方法 |
CN109765105B (zh) * | 2017-11-09 | 2023-07-11 | 东莞前沿技术研究院 | 球体耐压测试方法 |
CN110628043A (zh) * | 2018-06-22 | 2019-12-31 | 北京化工大学 | 一种蒲公英橡胶水基提取方法 |
CN109161059A (zh) * | 2018-09-14 | 2019-01-08 | 蚌埠创特新材料科技有限公司 | 一种全生物可控降解多功能农用除草保墒地膜 |
CN116933102A (zh) * | 2023-09-15 | 2023-10-24 | 成都数之联科技股份有限公司 | 一种橡胶质量检验方法、装置、介质、设备及程序产品 |
CN116933102B (zh) * | 2023-09-15 | 2023-12-19 | 成都数之联科技股份有限公司 | 一种橡胶质量检验方法、装置、介质、设备及程序产品 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20070265408A1 (en) | Non-synthetic low-protein rubber latex product and method of testing | |
MX2008013076A (es) | Producto de latex de hule de baja proteina no sintetico y metodo de prueba. | |
US4268639A (en) | Self-curing composition based upon polymethylmethacrylate and process for manufacturing said self-curing composition | |
Rubel | Impression materials: a comparative review of impression materials most commonly used in restorative dentistry | |
Montesinos-Herrero et al. | Partial replacement of fat by functional fibre in imitation cheese: Effects on rheology and microstructure | |
CN101437464A (zh) | 非合成低蛋白质橡胶胶乳产品及其测试方法 | |
CN103228688A (zh) | 不使用硫化助剂和硫的弹性体橡胶、和弹性体橡胶产品 | |
EP0891763A2 (de) | Abformmaterial auf Silikonbasis | |
WO2009025675A1 (en) | Compounding formulations for producing articles from guayule natural rubber | |
Rosales-Leal et al. | Influence of cavity preparation technique (rotary vs. ultrasonic) on microleakage and marginal fit of six end-root filling materials | |
CN107158452A (zh) | 一种骨创面止血组合物及其制备方法和应用 | |
EP0897304A1 (en) | Compressed absorbent aggregate | |
CN109251452A (zh) | 用于口腔实训模型的凝胶系复合材料及制备方法以及成形工艺 | |
DE10058846B4 (de) | Dentalmassen mit verringerter Temperatursensibilität | |
Sharma et al. | Alginate-based bionanocomposites in dental applications | |
EP3410112A1 (en) | Method for evaluating deodorization ability of super absorbent polymer and of product comprising same | |
WO2011016977A1 (en) | Cationically hardenable dental composition, process of production and use thereof | |
Nichols | An investigation of the dimensional stability of dental alginates | |
JP4132809B2 (ja) | 根管充填用グラスアイオノマー系シーラー組成物 | |
Shergill et al. | Evaluation of Elastomeric Impression Materials’ Hydrophilicity: An in vitro Study | |
Jacob et al. | Comparison of the dimensional accuracy and surface detail reproduction of different impression materials under dry and moist conditions-An Invitro study. | |
US20230169889A1 (en) | Soft tissue surgical task trainer | |
RU2323012C2 (ru) | Способ изготовления эластичных чехлов в приемные гильзы протезов | |
TR2021008992A2 (tr) | Cam i̇yonomer si̇manin örtülenmesi̇nde kullanilan bi̇r bi̇leşi̇m | |
Solomon | Flexible Impression Materials |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 1131026 Country of ref document: HK |
|
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20090520 |
|
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: WD Ref document number: 1131026 Country of ref document: HK |