CN101397330B

CN101397330B - 具有抗炎活性的一种新型含氮药物

Info

Publication number: CN101397330B
Application number: CN 200710059791
Authority: CN
Inventors: 卢彦昌; 张乐; 孙亮
Original assignee: TIANJIN PHARMACEUTICALS GROUP CORP
Current assignee: Tianjin Pharmaceutical Research Institute Co., Ltd
Priority date: 2007-09-27
Filing date: 2007-09-27
Publication date: 2013-03-06
Anticipated expiration: 2027-09-27
Also published as: CN101397330A

Abstract

本发明涉及一种雄甾烷类含氮糖皮质激素受体激动剂化合物和它们的制备方法。本发明也涉及含有该化合物的药用制剂以及该化合物的治疗用途，特别是对炎性疾病、变应性疾病或过敏性疾病的治疗。

Description

具有抗炎活性的一种新型含氮药物

发明领域

本发明涉及一种雄甾烷类糖皮质激素受体激动剂化合物和它们的制备方法。本发明也涉及含有该化合物的药用制剂以及该化合物的治疗用途，特别是对炎性疾病、变应性疾病或过敏性疾病的治疗。

背景技术：

糖皮质激素具有抗炎性质是众所周知的，且被广泛用于炎症性紊乱或炎症性疾病如哮喘和鼻炎的治疗。国外上世纪五、六十年代对16，17双羟基缩醛(酮)工艺进行了大量的研究，先后合成了以氟轻松、曲安奈德、哈西奈德等为代表的多种16，17双羟基缩酮药物，进入上世纪七十年代后以布地奈德为代表的16，17双羟基缩醛药物取得了非常大的成功，2004年与布地奈德相关的药物销售额已经接近20亿美元，进入21世纪后以22R-布地奈德、环索奈德为代表的16，17双羟基缩醛手性药物在国际上所看好。

醛(酮)的羰基与醇的羟基进行缩合反应是一种亲核加成反应，常在质子酸存在下形成。这是由于ROH亲核性很弱，质子酸催化可以增加羰基碳的正电性，以提高羰基的活性。以醛与醇的缩合为例其机理为在质子酸的催化下先形成半缩醛，再形成缩醛。酮形成缩酮反应机理类似于醛，但比醛困难，环状缩酮比较容易形成。

孕甾激素的16，17双羟基缩醛(酮)工艺的研究在上世纪五十年代就开始了。1955年Cooley等人首次报道(JCS1955，4373)孕酮16，17α-缩丙酮物的活性是孕酮的1-2倍。1957年Gordon等人报道(US2831003)利用16α-羟基泼尼松龙在B₂O₂、甲醇条件下回流可以得到16，17α-环硼物。1958年Bernstein等人报道(US2990401)同样的工艺，并且还说明类似的1，4双烯、9(11)双键或环氧物都以丙酮为溶媒在盐酸催化下可以也得到16，17双羟基缩酮物，还提到用EtCOMe进行缩酮反应后，得到手性化合物。他们还发表了两篇文章(JACS1959，81，1689、4573)，说明曲安西龙以丙酮为溶媒在盐酸催化下可以得到曲安奈德，底物类似的条件下高氯酸催化效果好于盐酸。1960年Smith等人报道(J Chromatog3 1960，381)用醋酸代替丙酮没有成功。1960至1961年期间Josef Fried等人先后合成了大量16，17双羟基缩醛(酮)，申请了3篇专利(US3048581、3053836、3197469)，同时催化剂除了使用高氯酸、盐酸外还使用了对甲苯磺酸，也取得了成功。由此可见在当时16，17双羟基缩醛(酮)物是被高度关注的。他们还在1961年申请了两篇专利(US3069420、3069439)，生成以下两类16，17衍生物。

发明内容：

我们通过不断的研究得到一种新的糖皮质激素式(I)化合物及其盐或溶剂合物，较原有激素具有更大的疗效，对于治疗疾病，优选治疗炎症性疾病，尤其是治疗哮喘具有更好的疗效。

其中

X＝O，S

R2＝H，含有1-8个碳的碳氢化合物或含有1-2个杂原子的1-8个碳的碳氢化合物

R3＝H，含有1-8个碳的碳氢化合物或含有1-2个杂原子的1-8个碳的碳氢化合物

R4＝H，卤素；

R5＝H，卤素或1-2个碳的碳氢化合物；

1，2位

表示可以为单键或双键，R2或R3可以相同或不同。

优选

X＝O

R4＝H，F；

R5＝H，F或1-2个碳的碳氢化合物；

1，2位

表示可以为单键或双键，R2或R3可以相同或不同

其中

R2可以优选为含有1-6个碳的碳氢化合物

R3可以优选为含有1-6个碳的碳氢化合物

R2或R3可以优选其中之一是H，另一个是含有1-8个碳的碳氢化合物，优选是烷基；更优选是直链烷基或取代的环烷基；

R2或R3也可以是相同1-8个碳的烷基，优选R2或R3均是甲基

R4可以优选是F

R5可以优选是F或α-甲基

还可以优选X是O，R2或R3其中之一是H，另一个是含有1-8个碳的碳氢化合物，R4是H或α-F，R5是H、α-F或α-甲基

还可以优选X是O，R2或R3是相同1-8个碳的烷基，R4是α-F，R5是α-F或α-甲基。还可以优选X是O，R2或R3其中之一是H，另一个是含有1-8个碳的碳氢化合物，R4是F，

R5是F或α-甲基

还可以优选X是O，R2或R3是相同1-8个碳的烷基，R4是F，R5是F或α-甲基。

优选化合物，可以是

6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

及其盐或溶剂合物

优选化合物可以是

6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯及其盐或溶剂合物

以上任一项定义的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐或溶剂合物作为治疗哺乳动物疾病的药物中的应用，哺乳动物优选是人类。疾病是指皮肤疾病如湿疹、牛皮癣、过敏性皮炎、神经性皮炎、疹痒和超敏性反应；鼻子、咽喉或肺部的炎性疾病如哮喘(包括过敏引起的哮喘反应)、鼻炎(包括枯草热)、鼻息肉、慢性阻塞性肺病、间质性肺部疾病和纤维变性；眼部炎症包括结膜和结膜炎；炎性肠疾病如溃疡性结肠炎和节段性回肠炎；或自体免疫性疾病如风湿性关节炎。

以上任一项定义的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐或溶剂合物在生产治疗炎性、变应性或过敏性疾病的药物中应用。而炎性、变应性或过敏性疾病是指呼吸道的疾病。

一种药用组合物，包含上述任一项定义的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐或溶剂合物，还可以与一种或多种生理学上可接受的稀释剂或载体混合。该组合物还可以包含另一种治疗活性剂。另一种治疗活性剂优选为β2肾上腺素受体激动剂。

该药物组合物可以配制成吸入、口服、口腔、舌下、非肠道、注射、埋植、局部用药或直肠给药的制剂。

一种药用气雾剂制剂，该制剂含有以上任一项定义的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐或溶剂合物，以及作为抛射剂的氟化碳或含氢的氯氟化碳，还可以与表面活性剂和/或共溶剂结合。

一种药用组合物，该组合物包含以上任一项定义的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐或溶剂合物以及PDE4抑制剂

一种式(V)化合物及其盐或溶剂合物。

其中

X＝O，S

R4＝H，卤素；

R5＝H，卤素或1-2个碳的碳氢化合物；

1，2位

表示可以为单键或双键。

所述的化合物，其特征在于

优选

其中

X＝O

R4＝H，F

R5＝H，F或1-2个碳的碳氢化合物；

1，2位

表示可以为单键或双键。

R4可以优选是F

R5可以优选是F或α-甲基

优选化合物，可以是

6α，9α-二氟-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

优选化合物，可以是

6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸

16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸

一种式(V)化合物及其盐或溶剂合物在制备式(I)化合物中的应用

其中

X＝O，S

R4＝H，卤素；

R5＝H，卤素或1-2个碳的碳氢化合物；

1，2位

表示可以为单键或双键。

一种式(V)化合物及其盐或溶剂合物在制备式(I)化合物及其盐或溶剂合物中的应用

其中

X＝O，S

R4＝H；

R5＝H或1-2个碳的碳氢化合物；

1，2位

表示可以为单键或双键。

一种由式(V)化合物制备式(I)化合物的方法

一种由式(V)化合物制备式(I)化合物的方法是将式(V)化合物和R2COR3与路易斯酸混合，反应毕，稀释或浓缩得到式(I)化合物。路易斯酸是指有机或无机酸。

路易斯酸可以是醋酸、对甲苯磺酸。路易斯酸还可以是氢卤酸、硫酸、磷酸、高氯酸。所述的氢卤酸，优选氢氟酸、盐酸。

由式(V)化合物制备式(I)化合物的方法还可以加入有机溶媒，有机溶媒是烷、卤代烷、苯、卤代苯、烷基取代苯。

式(V)化合物同样也可以具有与式(I)化合物类似的药学上的应用

本领域技术人员将意识到，这里所涉及的治疗包括所确认病症的预防以及治疗。

本领域技术人员将意识到，这里所涉及的溶剂化物包括水合物及有机溶媒的溶剂化物。

如上所述，式(I)的化合物可用于人或兽药，特别是可用作抗炎药、抗变应疾病、抗过敏药，尤其是可用于每天一次的治疗。因此，本发明另一方面提供了用于人或兽药，特别是用于对患有炎性疾病和/或变应性疾病的患者进行治疗的式(I)化合物或其生理学上可接受的溶剂化物。特别感兴趣的是用于每天一次给药的药物组合物。根据本发明的另一个方面，其提供了式(I)的化合物或其生理学上可接受的溶剂化物用于制备对患有炎性疾病和/或变应性疾病的患者进行治疗，尤其是用于进行每天一次的治疗的药物中的应用。

在另一个或供选择的方面，其提供了一种用于对患有炎性疾病和/或变应性疾病的人或动物个体进行治疗的方法，该方法包括给予所说的人或动物个体有效量的式(I)化合物或其生理学上可接受的溶剂化物，尤其是每天一次地进行给药。可以将本发明的化合物进行制备成任何方便的方式进行给药，因此。本发明在其范围内还包括包含式(I)的化合物或其生理学上可接受的溶剂化物的药物组合物，并又如果需要的话，该药物组合还包括一种或多种生理学上可接受的稀释剂或载体。

此外，其还提供了一种制备该类药物组合物的方法，其包括将各成分进行混合。

本发明的化合物例如可以被制备成用于进行口服给药、颊给药、舌下给药、胃肠外给药、局部给药或直肠给药的形式，尤其是局部给药，这里所用的局部给药包括通过皮肤外用、吹入和吸入进行给药。用于局部给药的各种类型的制剂的实例包括软膏、洗剂、霜、凝胶、泡沫、用于通过经皮贴片进行传递的制剂、粉剂、喷雾、气雾剂、用于吸入器或吹入器的胶囊或药筒或滴剂(例如滴眼剂或滴鼻剂)、用于喷雾的溶液/混悬液、栓剂、阴道栓、滞留灌肠剂和可咀嚼或可吮吸的片剂或小丸(例如用于口疮溃疡的治疗)或脂质体或微囊包封制剂。

用于局部给药到肺部的制剂可以包括干粉组合物和喷雾组合物。

用于局部传递到肺的干粉组合物可以存在于用于例如吸入器或吹入器的胶囊和药筒中。制剂一般包含用于将本发明化合物进行吸入的粉末混合物和适宜的粉状基质如乳糖、衍生化糖或氨基酸。衍生化糖主要包括单糖和双糖的固态结晶衍生物。优选使用乳糖。各胶囊或药筒一般可包含20μg-10mg式(I)的化合物，其可包含或不包含其它活性成分。或者，本发明的化合物可以没有赋形剂。该制剂的包装可适于单位剂量或多剂量的传递。

特别感兴趣的是未增压的并适于以通过口腔局部给药于肺的干粉形式进行给药的药物制剂(尤其是这些不含赋形剂的制剂或可以用稀释剂或载体如乳糖或淀粉，最优选地是用乳糖进行制备的这些制剂)。喷雾组合物例如可以被制备成水性溶液或混悬液的形式或被制备成被包装于加压包装如计量了剂量的吸入器中的使用了适宜液化推进剂的气雾剂形式。适于吸入的气雾剂组合物可以是混悬液或溶液形式，并又一般包含式(I)的化合物和适宜的推进剂如碳氟化合物或包含氢的氯氟烃或其混合物，特别是氢氟烷烃，尤其是1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟-正丙烷或其混合物。该气雾剂组合物可以不包合或包含现有技术中众所周知的附加制剂赋形剂如表面活性剂如油酸或卵磷脂和助溶剂例如乙醇。制剂的一个实例是不含赋形剂并基本由(例如由)式(I)的化合物(优选未溶剂化的形式例如1型)和选自1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟-正丙烷及其混合物的推进剂所组成(其可包含或不包合其它治疗活性成分)。制剂的另一个实例包含颗粒状的式(I)的化合物、选自1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟-正丙烷及其混合物的推进剂和可溶解于该推进剂的悬浮剂例如WO94/21229所述的低聚乳酸(oligolactic acid)或其衍生物。优选的推进剂是1，1，1，2-四氟乙烷。正如在本说明书中其它地方所示的那样，看起来式(I)的化合物并没有与1，1，1，2-四氟乙烷形成溶剂化物。增压的制剂一般被保留在一种用阀(例如计量阀)闭合并被安装于一种配有接口管的驱动器上的容器(例如铝容器)。用于通过吸入给药的药物理想地具有受控的粒度。用于吸入到支气管系统中的最佳粒度通常为1μm-10μm，优选地为2-5μm。当被吸入时，粒度高于20μm的颗粒一般太大从而难以到达小气管。为了获得这些粒度，可以通过常规方法例如用微粉化来减少所制造的式(I)化合物的粒度。可以通过风筛或筛分来将所需部分分离出来。优选地，该颗粒是结晶性的，其例如是常规的方法来进行制备的。当使用赋形剂如乳糖时，赋形剂的粒度一般远远高于本发明中被吸入药物的粒度。当该赋形剂是乳糖时，其一般以进行了研磨的乳糖的形式存在，其中至多85％的乳糖颗粒的粒径在60μm-90μm的并又至少15％的乳糖颗粒的粒径小于15μm的MMD。

MMD是指质量中位直径(mass median diameter)。

局部给药于鼻的制剂(例如用于治疗鼻炎的制剂)包括通过加压泵给药于鼻的加压气雾剂和水性制剂。特别感兴趣的是未加压并适于局部给药于鼻腔的制剂。该制剂优选地包含用于此目的的作为稀释剂或载体的水。用于给药于肺或鼻的水性制剂可以用常规赋形剂如缓冲剂、张力调节剂等等来进行制备。水性制剂还可以通过雾化被给药于鼻。其它可能的存在形式如下：软膏、霜和凝胶例如可以用水性或油性基质通过加入适宜的增稠剂和/或胶凝剂和/或溶剂来进行制备。因此，该类基质例如包括水和/或油，如液体石蜡或植物油如花生油或蓖麻油；或溶剂如聚乙二醇。可以根据基质的性质使用的增稠剂和胶凝剂包括软石蜡、硬脂酸铝、十六醇十八醇混合物、聚乙二醇、羊毛脂、蜂蜡、羧聚亚甲基(carboxypolymethylene)和纤维素衍生物、和/或甘油单硬脂酸酯和/或非离子乳化剂。洗剂可以用水性或油性基质未进行制备，并且一般还包合一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、混悬剂或增稠剂。用于外部应用的粉末可以借助于任何适宜的粉末基质来形成，其中所说的适宜粉末例如滑石粉、乳糖或淀粉。滴剂可以用水性或非水性基质来进行制备，并又还包合一种或多种分散剂、增溶剂、悬浮剂或防腐剂。有利地，可以通过加入适宜缓冲剂未对本发明的制剂进行缓冲。在本发明局部组合物中活性的式(I)化合物的比例取决于被制备制剂的确切类型，但是一般在0.001％至15％重量的范围内。但是，一般而言，对于大多数制剂类型而言，所用比例有利地为0.005％至5％并且优选地为0.01％至1％。但是，对于用于吸入或吹入的粉末而言，所用比例在0.1％至5％的范围内。优选地将气雾剂制剂如喷雾剂的单次剂量为包含20μg-2000μg，优选约20μg-500μg的式(I)的化合物。可以一天给药一次或一天给药几次，例如2、3、4或8次，各次给药例如1、2或3个剂量。该气雾剂总的日剂量将在100μg-10mg之间，优选地在200μg-2000μg之间。由吸入器或吹入器中的胶囊和药筒所传递的总的日剂量和计量剂量一般是用气雾剂传递的这些剂量的一至两倍。

可以通过每天一次或几次地将其应用到患病部位上来将局部制剂进行给药；在皮肤部位上可以有利地使用封闭敷裹。可以通过粘附的储库系统来进行连续或长期传递。

对于内部给药而言，本发明的化合物可以以常规规方式被制备成用于口服、胃肠外或直肠给药的形式。用于口服给药的制剂包括糖浆剂、粉剂、颗粒剂、片剂和胶囊剂，其一般根据所需情况包含常规赋形剂如粘合剂、填充剂、润滑剂、崩解剂、润湿剂、混悬剂、乳化剂、防腐剂、缓冲盐、矫味剂、着色剂和/或甜味剂。但是，剂量单位形式优选地如下所述。

用于内部给药的优选制剂形式是剂量单位形式，即片剂和胶囊剂。该类剂量单位形式包含0.1mg至20mg，优选1mg至10mg本发明的化合物。

在需要进行全身性的肾上腺-皮层治疗的病症中，一般可以通过内部给药来给予本发明的化合物。一般而言，用于内部给药的术语“制剂”可以根据所使用的制剂类型包合0.05％至10％的活性成分。根据所治疗的病症和所需治疗的持续作用时间，日剂量可以在0.1mg至60mg之间变化，例如为5mg至30mg。

缓释或肠衣制剂可能是有利的，特别是对于炎症性肠病症而言更为有利。本发明的药物组合物还可以包括其它治疗活性剂，例如β2肾上腺素受体激动剂、抗组胺药或抗过敏药。因此，本发明还提供了一种包含式(I)的化合物或其生理上可接受的溶剂化物以及其它治疗活性物质，例如β2-肾上腺素受体激动剂、抗组胺药、抗过敏药或抗胆碱能药的组合。

β2-肾上腺素受体激动剂的实例包括沙美特罗(例如为硫酸盐形式)、沙丁胺醇(例如为硫酸盐形式)、福莫特罗(例如为富马酸盐形式)、非诺特罗或特布他林(例如为硫酸盐形式)。优选长效β2-肾上腺素受体激动剂，尤其是这些在24小时的时间内具有治疗作用的物质。

抗组胺药的实例包括美沙吡林或氯雷他定。抗过敏药的实例包括色甘酸盐(例如色甘酸钠)、酮替芬和奈多罗米(如其钠盐形式)。抗胆碱能药的实例包括异丙托铵(例如异丙托溴铵)、噻托铵(tiotropium)、阿托品或氧托品(oxitropium)。任何上述物质都可以以其供选择的盐或溶剂化物的形式被应用。其它适宜的组合包括例如其它抗炎剂，例如NSAID(例如PDE4抑制剂、白三烯拮抗剂、iNOS抑制剂、类胰蛋白酶和弹性蛋白酶抑制剂、β2整合蛋白拮抗剂和腺苷2a激动剂))或抗感染药(例如抗生素、抗病毒药)。特别感兴趣的是式(I)的化合物与磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂的联合应用。用于本发明这一方面的特异性PDE4抑制剂可以是已知可以抑制PDE4酶的任何化合物或发现其可作为PDE4抑制剂的任何物质，其仅是PDE4抑制剂，不是抑制PDE家族其它成员以及PDE4的化合物。其一般优选地使用具有约0.1或更高的IC50比率的PDE4抑制剂。NSAID是指非甾体抗炎药。

一种由式(II)化合物制备式(I)化合物的方法，

本发明中

柱层析方法：

层析柱的长度最少70cm，柱内90％装填254-硅胶，并将需要分离的有机物全溶于最少量的氯仿∶甲醇＝1∶1中，用最少量254-硅胶将该溶液吸收后置于层析柱内硅胶的上部，使用流动相洗脱，层析柱下用若干个10ml试管接经过柱层析得到的溶液，控制流速为10ml/3min，将每个试管的溶液用HPLC进行分析，将保留时间相同的试管溶液合并，取主点的化合物进行重结晶，得到相应的产物。

确定主点的方法：将需要分离的有机物用HPLC进行分析，除原料外峰面积最大的点确定为主点，其保留时间为主点的保留时间。

HPLC的条件：

设备：HP 1084B液相色谱仪，HP 79850 BLC终端和UV检测器

柱材料：Hypersil C18，5um，125×4.6mm

检测波长：242nm

流动相：乙醇∶水＝6.5∶3.5

柱温：45℃

流速：约1.2ml/分

其中式(II)化合物至式(V)化合物中的X，R1-5同式(I)化合物的定义式(II)化合物的取得：

(II)-1：1，2位是双键：R4＝H，R5＝H，CAS：1391-70-7(专利：GB824351)

(II)-2：1，2位是双键：R4＝H，R5＝甲基，CAS：6723-81-5(专利：DE1087599)

(II)-3：1，2位是双键：R4＝F，R5＝H，CAS：124-94-7(专利：GB887748，US2993042)

(II)-4：1，2位是双键：R4＝F，R5＝F，CAS：807-38-5(专利：NL6607610)

(II)-5：1，2位是单键：R4＝H，R5＝H，CAS：1171-81-9(专利：BE620272)

(II)-6：1，2位是单键：R4＝H，R5＝甲基，CAS：6724-22-7(专利：US3105083，FR1334912)

以上这些化合物也可以通过市场购得。

中间体的制备：

中间体式(III)化合物的取得：

(III)-1：1，2位是双键：R4＝H，R5＝H的制备

方法1：保持温度在25-30℃，用45分钟的时间，将高碘酸(50％w/w纯度，12mmol(1.2摩尔当量))的水溶液滴加入(II)-1的化合物(10mmol)的二噁烷(30ml)和水(5ml)悬浮液中。在室温下搅拌悬浮液2小时。2小时后用45分钟的时间滴加水(70ml)。加完后，在20℃下搅拌混合物1小时，将产物过滤出来，干燥后，用甲醇重结晶两次得到(III)-1固体(7.01mmol)。

方法2：保持温度在25-30℃，用45分钟的时间，将高碘酸(50％w/w纯度，12mmol)的水溶液滴加入(II)-1的化合物(10mmol)的二甘醇二甲醚(20ml)和实验室级水(5ml)悬浮液中。在室温下搅拌悬浮液6小时，后用45分钟的时间滴加水(68ml)。加完后，在20℃下搅拌混合物1小时，将产物过滤出来，干燥后，用甲醇重结晶两次得到(III)-1固体(6.79mmol)。

方法3：保持温度在25-30℃，用45分钟的时间，将高碘酸钠(12mmol)和盐酸(12M，1.4ml)和水(8ml)的溶液滴加入(II)-1的化合物(10mmol)的四氢呋喃(20ml)和实验室级水(4ml)悬浮液中。在室温下搅拌悬浮液，2小时后用25分钟的时间滴加水(63ml)。加完后，在10℃下搅拌混合物2小时，将产物过滤出来，干燥后，用甲醇重结晶两次得到(III)-1固体(7.03mmol)。

方法4：在25℃下，搅拌(II)-1的化合物(10mmol)的四氢呋喃(15ml)和水(4ml)悬浮液，直到得到一种澄清的溶液。用大约45分钟的时间，以足以把反应温度保持在20-25℃的速率加入高碘酸(50％w/w，12mmol)的水溶液。在20-25℃下搅拌混合物2小时后，保持反应温度在20-25℃，用至少30分钟的时间向悬浮液中加入水(65ml)。把混合物冷却到大约10℃，在该温度下搅拌至少1小时。把固体过滤出来，干燥后，用甲醇重结晶两次得到(III)-1固体(7.13mmol)

(III)-2：1，2位是双键：R4＝H，R5＝甲基的制备

以(II)-2的化合物(10mmol)为原料，按照(III)-1的制备方法也可以得到(III)-2，按照其中的方法3可得到6.89mmol。

(III)-3：1，2位是双键：R4＝F，R5＝H的制备

以(II)-3的化合物(10mmol)为原料，按照(III)-1的制备方法也可以得到(III)-3，按照其中的方法4可得到7.05mmol。

(III)-4：1，2位是双键：R4＝F，R5＝F的制备

以(II)-4的化合物(10mmol)为原料，按照(III)-1的制备方法也可以得到(III)-4，按照其中的方法2可得到6.75mmol。

(III)-5：1，2位是单键：R4＝H，R5＝H的制备

以(II)-5的化合物(10mmol)为原料，按照(III)-1的制备方法也可以得到(III)-5，按照其中的方法1可得到6.98mmol。

(III)-6：1，2位是单键：R4＝H，R5＝甲基的制备

以(II)-6的化合物(10mmol)为原料，按照(III)-1的制备方法也可以得到(III)-6，按照其中的方法3可得到7.12mmol。

中间体式(IV)化合物的取得：

(IV)-1：1，2位是双键：R4＝H，R5＝H的制备

在氮气保护和室温下，将(III)-1化合物1(10.0g)加入无水的二甲基甲酰胺(200ml)中，溶液搅拌，并加入N，N’-碳酰二咪唑(8.50g)。4小时后，向溶液中通入硫化氢0.5小时。把反应混合物倒入0℃的2M盐酸(1000ml)中。过滤，用水洗涤，干燥，用甲醇重结晶两次得到(IV)-1白色固体7.23g。

(IV)-2：1，2位是双键：R4＝H，R5＝甲基，

以(III)-2的化合物10g为原料，按照(IV)-1的制备方法也可以得到(IV)-2，可得到7.14g。

(IV)-3：1，2位是双键：R4＝F，R5＝H

以(III)-3的化合物10g为原料，按照(IV)-1的制备方法也可以得到(IV)-3，可得到7.47g。

(IV)-4：1，2位是双键：R4＝F，R5＝F

以(III)-4的化合物10g为原料，按照(IV)-1的制备方法也可以得到(IV)-4，可得到7.52g。

(IV)-5：1，2位是单键：R4＝H，R5＝H

以(III)-5的化合物10g为原料，按照(IV)-1的制备方法也可以得到(IV)-5，可得到6.93 g。

(IV)-6：1，2位是单键：R4＝H，R5＝甲基

以(III)-5的化合物10g为原料，按照(IV)-1的制备方法也可以得到(IV)-5，可得到6.83g。

中间体式(V)化合物的取得：

(V)-1：1，2位是双键：X＝O，R4＝H，R5＝H的制备

通氮气条件下，将溴乙腈(6mmol)加入到(III)-1的化合物(2mmol)和碳酸氢钠(2.5mmol)的DMF(30ml)的搅拌的冷却(冰)溶液中，并在室温下搅拌混合液18h，加入二乙胺(2.9mmol)，再搅拌该混合物15min，此时加入2M HCI(40ml)，然后加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)。依次用碳酸氢钠水溶液(50ml)、饱和盐水(50ml)洗涤分离得到的有机相，再经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液蒸发至近干，再用硅胶254进行柱层析，以环己烷∶乙酸乙酯＝1∶1为流动相冲洗，得到主点物质即为(V)-1化合物286mg。

(V)-2：1，2位是双键：X＝0，R4＝H，R5＝甲基，

以(III)-2的化合物2mmol为原料，按照(V)-1的制备方法也可以得到(V)-2，可得到292mg。

(V)-3：1，2位是双键：X＝O，R4＝F，R5＝H

以(III)-3的化合物2mmol为原料，按照(V)-1的制备方法也可以得到(V)-3，可得到323mg。

(V)-4：1，2位是双键：X＝O，R4＝F，R5＝F

以(III)-4的化合物2mmol为原料，按照(V)-1的制备方法也可以得到(V)-4，可得到342mg。

(V)-5：1，2位是单键：X＝O，R4＝H，R5＝H

以(III)-5的化合物2mmol为原料，按照(V)-1的制备方法也可以得到(V)-5，可得到274mg。

(V)-6：1，2位是单键：X＝O，R4＝H，R5＝甲基

以(III)-6的化合物2mmol为原料，按照(V)-1的制备方法也可以得到(V)-6，可得到248mg。

(V)-7：1，2位是双键：X＝S，R4＝H，R5＝H的制备

通氮气条件下，将溴乙腈(6mmol)加入到(IV)-1的化合物(2mmol)和碳酸氢钠(2.5mmol)的DMF(30ml)的搅拌的冷却(冰)溶液中，并在室温下搅拌混合液18h，加入二乙胺(2.9mmol)，再搅拌该混合物15min，此时加入2M HCI(40ml)，然后加入水(50ml)和二氯甲烷(50ml)。依次用碳酸氢钠水溶液(50ml)、饱和盐水(50ml)洗涤分离得到的有机相，再经无水硫酸钠干燥，过滤，滤液蒸发至近干，再用硅胶254进行柱层析，以环己烷∶乙酸乙酯＝1∶1为流动相冲洗，得到主点物质即为(V)-7化合物286mg。

(V)-8：1，2位是双键：X＝S R4＝H，R5＝甲基，

以(IV)-2的化合物2mmol为原料，按照(V)-7的制备方法也可以得到(V)-8，可得到292mg。

(V)-9：1，2位是双键：X＝S R4＝F，R5＝H

以(IV)-3的化合物2mmol为原料，按照(V)-7的制备方法也可以得到(V)-9，可得到323mg。

(V)-10：1，2位是双键：X＝S R4＝F，R5＝F

以(IV)-4的化合物2mmol为原料，按照(V)-7的制备方法也可以得到(V)-10，可得到342mg。

(V)-11：1，2位是单键：X＝S R4＝H，R5＝H

以(IV)-5的化合物2mmol为原料，按照(V)-7的制备方法也可以得到(V)-11，可得到274mg。

(V)-12：1，2位是单键：X＝S R4＝H，R5＝甲基

以(IV)-6的化合物2mmol为原料，按照(V)-7的制备方法也可以得到(V)-12，可得到248mg。

实施例：

本发明中化合物中碳原子的位置按下图确定：

21位是杂原子，所以无数值

式(I)化合物的制备：

21位为X，X＝O，S，21位在1H-NMR、13C-NMR都没有没有21位的数据。

实施例1：6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

将6α，9α-二氟-16α，17 α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol，70％HF50ml投入塑料瓶中，冰盐浴降温至-5℃左右，搅拌10~20分钟，再缓慢滴加14mmol环己基甲醛，滴毕，保持-5℃搅拌1小时。用10％NH₄OH/H₂O约500ml中和稀释至pH＝7，过滤，干燥，得白色粉末状固体6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22-R，S环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯8.04mmol，使用硅胶254进行柱层析，以丙酮/石油醚＝4/3为流动相冲洗，取主点物质即为6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯5.62mmol，仅次于主点的物质即为6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22-S环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯1.41mmol。

元素分析计算值(％)：C29H35F2NO6 C，65.52；H，6.64；F，7.15；N，2.63；O，18.06元素分析实测值(％)：C 65.69，H 6.68，N，2.56；O，18.01

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至23位碳的数值

152.0，128.5，185.9，121.4，167.7，87.7，33.9，32.1，101.1，47.9，，70.9，37.1，38.2，43.2，33.2，86.5，102.9，18.2，22.9，172.1，101.4，49.5，115.2(CN，C)，36.7(22-环戊烷，1位，C)，24.3(22-环戊烷，2，6位，C)，27.4(22-环戊烷，3，5位，C)，26.8(22-环戊烷，4位，C)。

二维核欧沃豪斯效应波谱(NOESY)，据此确定了质子和取代基的立体构型。其中18甲基的H与16位的H具有NOE效应，而22位H与16位的H具有NOE效应，证明R2为H。

实施例2：6α，9 α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

将6α，9α-二氟-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol，盐冰浴下溶于50ml二氯甲烷，0.7ml 70％HClO₄中，降温至-5℃，缓慢滴加14mmol正丁醛，保温搅拌1h，，20％NH₃/H₂O中和至中性，分层，取有机层，减压浓缩，冲入甲醇重结晶，得标题化合物7.43mmol，22R∶S＝84∶16。

元素分析计算值(％)：C26H31F2NO6 C，63.53；H，6.36；F，7.73；N，2.85；O，19.53

元素分析实测值(％)：C 63.76，H 6.41，N 2.79，O 19.38

¹³C-NMR：1位至23位碳的数值

152.0，128.5，185.9，121.4，167.7，87.7，33.9，32.1，101.1，47.9，，70.9，37.1，38.2，43.2，33.2，86.2，102.6，18.2，22.9，172.3，97.9，49.5，115.7(CN，C)，37.1，13.9，14.8(22-CH₂CH₂CH₃，按C的顺序)

实施例3：6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

将实施例2得到的化合物5mmol，使用硅胶254进行柱层析，以丙酮/石油醚＝4/3为流动相冲洗，得到主点物质即为标题化合物3.43mmol。

实施例4：6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

将6α，9α-二氟-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol，盐冰浴下溶于50ml丙酮中，降温至-5℃，缓慢滴加0.5ml70％HClO₄，保温搅拌1h，，约500ml冰水中稀释，用氨水中和，过滤干燥，甲醇重结晶，得标题化合物8.19mmol。

元素分析计算值(％)：C25H29F2NO6 C，62.88；H，6.12；F，7.96；N，2.93；O，20.10

元素分析实测值(％)：C 62.77，H 6.11，N 2.98，O 20.07

¹³C-NMR：1位至23位碳的数值：

152.0，128.5，185.9，121.4，167.7，87.7，33.9，32.1，101.1，47.9，，70.9，37.1，38.2，43.2，33.2，84.1，99.8，18.2，22.9，99.5，112.3，49.5，115.7(CN，C)，26.3(22-CH₃，)

实施例5：9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以9α-氟-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例1中的方法，得到标题化合物5.04mmol。

元素分析计算值(％)：C29H36FNO6 C，67.82；H，7.07；F，3.70；N，2.73；O，18.69

元素分析实测值(％)：C 67.71，H 7.02，N 2.82，O 18.77

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至23位碳的数值

152.0，128.5，185.9，124.4，166.7，31.2，27.1，34.1，100.9，48.4，70.9，37.1，38.2，43.2，33.2，86.5，102.9，18.2，22.9，172.1，101.4，49.5，115.2(CN，C)，36.7(22-环戊烷，1位，C)，24.3(22-环戊烷，2，6位，C)，27.4(22-环戊烷，3，5位，C)，26.8(22-环戊烷，4位，C)。二维核欧沃豪斯效应波谱(NOESY)，据此确定了质子和取代基的立体构型。其中18甲基的H与16位的H具有NOE效应，而22位H与16位的H具有NOE效应，证明R2为H。

实施例6：9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以9α-氟-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例2中的方法，得到标题化合物8.71mmol。

元素分析计算值(％)：C26H32FNO6 C，65.95；H，6.81；F，4.01；N，2.96；O，20.27

元素分析实测值(％)：C 65.88，H 6.53，N 3.01％，O 20.29％

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至23位碳的数值

152.0，128.5，185.9，121.4，166.7，31.2，27.1，34.1，100.9，46.3，70.9，41.9，46.3，49.1，33.2，86.2，102.6，18.2，22.9，172.3，97.9，49.5，115.7(CN，C)，37.1，13.9，14.8(22-CH₂CH₂CH₃，按C的顺序)

实施例7：9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以实施例6得到的化合物5mmol为原料按照实施例3中的方法，得到标题化合物3.42mmol。二维核欧沃豪斯效应波谱(NOESY)，据此确定了质子和取代基的立体构型。其中18甲基的H与16位的H具有NOE效应，而22位H与16位的H具有NOE效应，证明R2为H。

实施例8：9α-氟-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以9α-氟-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例4中的方法，得到标题化合物8.22mmol。

元素分析计算值(％)：C25H3OFNO6 C，65.35；H，6.58；F，4.13；N，3.05；O，20.89

元素分析实测值(％)：C 65.41，H 6.60，N 3.08，O 20.91

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至23位碳的数值

152.0，128.5，185.9，121.4，166.7，31.2，27.1，34.1，100.9，46.3，70.9，41.9，46.3，49.1，33.2，84.1，99.8，18.2，22.9，99.5，112.3，49.5，115.7(CN，C)，26.3(22-CH₃，)

实施例9：6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17 β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例1中的方法，得到标题化合物4.95mmol。

元素分析计算值(％)：C30H39NO6 C，70.70；H，7.71；N，2.75；O，18.84

元素分析实测值(％)：C 70.59，H 7.64，N 2.84，

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至23位碳的数值

152.0，128.5，185.9，121.4，166.7，33.7，27.1，34.1，55.4，46.3，70.9，41.9，46.3，49.1，33.2，86.5，102.9，18.2，22.9，172.1，101.4，49.5，115.2(CN，C)，36.7(22-环戊烷，1位，C)，24.3(22-环戊烷，2，6位，C)，27.4(22-环戊烷，3，5位，C)，26.8(22-环戊烷，4位，C)。20.4(6-CH₃，C)

实施例10：6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例2中的方法，得到标题化合物7.67mmol。

元素分析计算值(％)：C27H35NO6 C，69.06；H，7.51；N，2.98；O，20.44

元素分析实测值(％)：C 68.97，H 7.48，N 3.02％

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至22位碳的数值152.0，128.5，185.9，

121.4，166.7，33.7，27.1，34.1，55.4，46.3，70.9，41.9，46.3，49.1，33.2，86.2，102.6，18.2，22.9，172.3，97.9，49.5，115.7(CN，C)，37.1，13.9，14.8(22-CH₂CH₂CH₃，按C的顺序)20.4(6-CH₃，C)

实施例11：6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以实施例10得到的化合物5mmol为原料按照实施例3中的方法，得到标题化合物4.77mmol。二维核欧沃豪斯效应波谱(NOESY)，据此确定了质子和取代基的立体构型。其中18甲基的H与16位的H具有NOE效应，而22位H与16位的H具有NOE效应，证明R2为H。

实施例12：6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例4中的方法，得到标题化合物8.41mmol。

元素分析计算值(％)：C26H33NO6 C，68.55；H，7.30；N，3.07；O，21.07

元素分析实测值(％)：C 68.37，H 7.26，N 3.10％

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至23位碳的数值152.0，128.5，185.9，

121.4，166.7，33.7，27.1，34.1，55.4，46.3，70.9，41.9，46.3，49.1，33.2，84.1，99.8，18.2，22.9，99.5，112.3，49.5，115.7(CN，C)，26.3(22-CH₃，C)，20.4(6-CH₃，C)

实施例13：11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例1中的方法，得到标题化合物5.31mmol。

元素分析计算值(％)：C29H37NO6 C，70.28；H，7.52；N，2.83；O，19.37

元素分析实测值(％)：C 70.21，H 7.50，N 2.90％

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至22位碳的数值

152.0，128.5，185.9，121.4，169.7，31.2，33.7，30.4，55.4，46.3，70.9，41.9，46.3，49.1，33.2，86.5，102.9，18.2，22.9，172.1，101.4，49.5，115.2(CN，C)，36.7(22-环戊烷，1位，C)，24.3(22-环戊烷，2，6位，C)，27.4(22-环戊烷，3，5位，C)，26.8(22-环戊烷，4位，C)。二维核欧沃豪斯效应波谱(NOESY)，据此确定了质子和取代基的立体构型。其中18甲基的H与16位的H具有NOE效应，而22位H与16位的H具有NOE效应，证明R2为H。

实施例14：11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例2中的方法，得到标题化合物8.21mmol。

元素分析实测值(％)：C 68.47％，H 7.26％，N 3.11％

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至22位碳的数值

152.0，128.5，185.9，121.4，169.7，31.2，33.7，30.4，55.4，46.3，70.9，41.9，46.3，49.1，33.2，86.2，102.6，18.2，22.9，172.3，97.9，49.5，1 15.7(CN，C)，37.1，13.9，14.8(22-CH₂CH₂CH₃，按C的顺序)

实施例15：11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以实施例14得到的化合物5mmol为原料按照实施例3中的方法，得到标题化合物3.19mmol。二维核欧沃豪斯效应波谱(NOESY)，据此确定了质子和取代基的立体构型。其中18甲基的H与16位的H具有NOE效应，而22位H与16位的H具有NOE效应，证明R2为H。

实施例16：11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例4中的方法，得到标题化合物8.51mmol。

元素分析计算值(％)：C25H31NO6 C，68.01；H，7.08；N，3.17；O，21.74

元素分析实测值(％)：C 67.31，H 6.79，N 3.30

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至22位碳的数值152.0，128.5，185.9，

121.4，169.7，31.2，33.7，30.4，55.4，46.3，70.9，41.9，46.3，49.1，33.2，84.1，99.8，18.2，22.9，99.5，112.3，49.5，115.7(CN，C)，26.3(22-CH₃，C)，

实施例17：6α，9α-二氟-11β-羟基-16α，17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸[S-腈甲酯]的制备

以6α，9α-二氟-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸10mmol为原料按照实施例1中的方法，得到标题化合物5.23mmol。

元素分析计算值(％)：C29H35F2NO5S C，63.60；H，6.44；F，6.94；N，2.56；O，14.61；S，5.85

元素分析实测值(％)：C 63.70，H 6.44％，F 7.01％，N 2.59％，O 14.53％

¹³C-NMR(CDCl₃)：1位至23位碳的数值

154.4，128.5，185.9，124.2，163.1，87.7，33.9，32.1，100.1，47.9，70.9，40.9，46.3，49.1，33.2，87.8，112.9，18.3，22.9，194.1，98.7，21.7，118.2(CN，C)，36.7(22-环戊烷，1位，C)，24.3(22-环戊烷，2，6位，C)，27.4(22-环戊烷，3，5位，C)，26.8(22-环戊烷，4位，C)。二维核欧沃豪斯效应波谱(NOESY)，据此确定了质子和取代基的立体构型。其中18甲基的H与16位的H具有NOE效应，而22位H与16位的H具有NOE效应，证明R2为H。

实施例18：11β-羟基-16α，17α-[(22R，S-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-4-烯-17β-硫代羟酸[S-腈甲酯]的制备

以16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1-烯-17β-硫代羟酸10mmol为原料按照实施例2中的方法，得到标题化合物8.23mmol。

元素分析计算值(％)：C26H33F2NO5S C，61.28；H，6.53；F，7.46；N，2.75；O，15.70；S，6.29

元素分析实测值(％)：C 61.36％，H 6.53％，N 2.72％，O 15.77％

¹³C-NMR：1位至23位碳的数值(21位是硫所以无数值)

35.5，34.2，198.5，124.0，170.3，33.2，36.1，27.8，59.1，28.6，66.8，47.9，，70.9，40.9，46.3，49.1，33.2，87.8，112.9，18.3，22.9，194.1，98.7，21.7，118.2(CN，C)，37.3，13.5，14.6(22-CH₂CH₂CH₃，按C的顺序)

实施例19：11β-羟基-16α，17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧-]-3-氧代雄甾-4-烯-17β-硫代羟酸[S-腈甲酯]的制备

以实施例18中得到的化合物5mmol为原料按照实施例3中的方法，得到标题化合物3.67mmol。

实施例20：6α-甲基-11β-羟基-16α，17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-4-二烯-17β-羧酸腈甲酯的制备

以6α-甲基-16α，17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯10mmol为原料按照实施例4中的方法，得到标题化合物8.13mmol。

元素分析计算值(％)：C26H35NO5S C，65.93；H，7.45；N，2.96；O，16.89；S，6.77

元素分析实测值(％)：C 65.85，H 7.41，N 3.00％，O 17.01

¹³C-NMR：1位至23位碳的数值(21位是硫所以无数值)

35.5，34.2，198.5，124.0，170.3，33.2，36.1，27.8，59.1，28.6，66.8，47.9，，70.9，40.9，46.3，49.1，33.2，84.1，99.8，18.2，22.9，99.5，112.3，49.5，115.7(CN，C)，26.3(22-CH₃，C)，，20.4(6-CH₃，C)

药理活性：

1药理活性可以采用糖皮质激素激动剂活性的功能体外试验进行评价。

依据K.P.Ray等(Biochem J.(1997)，328，707-715)描述的功能试验，给出一种糖皮质激素激动剂的反式抑制活性测试方法。在37℃下，用适当剂量的受试化合物处理稳定转染有报告基因的A549细胞1小时，该报告基因含来自ELAM启动子连接sPAP(分泌性磷酸脂酶)基因的响应NFkB元件。然后用肿瘤坏死因子(TNF，10ng/ml)刺激该细胞16小时，并用标准的比色法测试此时产生的碱性磷酸酶含量。构建剂量响应曲线，并可通过曲线估算EC₅₀值。

实施例1到20的化合物的EC₅₀值小于10nM。

实施例1、2、3，5、7的EC50值小于1nM。

依据R.J.H.Austin等(Eur Resp J.(2002)，20，1386-1392)描述的功能试验，测试化合物立接反式激活基因表达的能力。在37℃下，用适当剂量的受试化合物处理稳定转染有报告基因的A549细胞6个小时，该报告基因含小鼠乳腺瘤病毒长末端重复系列(MMTV-LTR)的糖皮质激素响应区连接renilla荧光素酶基因。通过将细胞酶与适合的底物一起孵育后，通过测量所发出的光来测定荧光素酶活性。构建剂量响应曲线，并通过曲线估算EC₅₀值，其中最大响应值是相对于地塞米松值(100％)来计算的。

实施例1到20的化合物在该试验中的最大响应值小于50％。

实施例1、3，5、7的化合物在该试验中的最大响应值小于20％。

实施例1、5的化合物在该试验中的最大响应值小于10％。

孕酮受体活性的筛选

已经有报道称人乳癌细胞系T47D对孕酮有上调内源性碱性磷酸酯酶的反应(Di Lorenzo等人，Cancer Research(1991)51，4470-4475。将T47D细胞以每孔1×10⁵个细胞的密度接种到96孔板中并使其在37℃下生长一夜。将甾族化合物溶解于DMSO中，将其加入到细胞中(最终DMSO浓度为0.7％)，然后将其在37℃下培养24小时。然后将该细胞用PBS洗涤并用RIPA缓冲剂(在磷酸盐缓冲液中包含1％IGEPAL，0.5％脱氧胆酸钠，0.1％SDS)进行溶解。用溶解于1M二乙醇胺、0.28M NaCl、0.5m MMgCl₂中的作为底物的对-硝基苯磷酸酯(1.5mg/ml)用分光光度法(405nm)来对碱性磷酸酯酶的活性进行测定。剂量响应曲线是由所评估的EC₅₀值得出的。

实施例1、5的化合物在该试验中的EC₅₀值大于100nM。

2单独用对组织胺诱导大鼠哮喘发作的影响

一、实验目的：了解治疗哮喘的药物的疗效。

二、实验材料

1实验动物：选取SD大鼠，体重180-200g。

2实验仪器：空气压缩机、气雾喷头、水银检压计、底座、4L的玻璃钟罩

3实验药品：2％氯化乙酰胆碱、0.1％磷酸组织胺、使用实施例1-20的化合物、布地奈德为活性成分，制作气雾剂：自制(按下列配方质量比配制)。

活性成分 3.5g

乙醇 200g

丙三醇 19.5g

HFA227 750g

HFA134a 750g

抗坏血酸 7.5g

制备工艺：将处方量的活性成分加入搅拌均匀的维生素C、乙醇和丙二醇内，搅拌，在温水浴中加热，使原料溶解，砂芯漏斗过滤，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压HFA134a和HFA227，即得，理论罐装1000瓶，灌装收率在85％以上。经45-50℃水浴检漏30分钟，无泄漏。每瓶50揿，每揿含活性成分70μg。

4数据处理：采用SPSS进行分析，进行两两比较t检验。

三、实验方法

选取SD大鼠，雄性，体重为180-200g，放入4升左右的玻璃罩中，以400mmHg的压力喷入2％氯化乙酰胆碱和0.1％磷酸组织胺容积混合液15秒钟。喷雾停止后，观察大鼠的引喘潜伏期(即发生哮喘、呼吸极度困难，直至抽搐跌倒的时间)，引喘潜期大于120秒的大鼠不予选用。采用布地奈德位对照药品取经测定引喘潜伏期合格的大鼠210只，按引喘潜伏期随机分为21组，每组10只，即布地奈德组和上述方法制备的实验药品20组。次日给予受试药物，给药剂量：7μg/kg；。给药30分钟后同上喷雾给予0.25％二盐酸组织胺，观察给药物前后引喘潜伏期及抽搐发生率的变化(引喘时动物6分钟内不出现跌倒者以引喘伏期为360秒计算)。

四、实验结果：动物发生哮喘、直至抽搐跌倒的时间都有不同，见表1：

表1对磷酸组织胺喷雾吸入诱导哮喘发作的影响(n＝10，mean±SD)

由表1可见，实施例1-20的化合物喷雾吸入可明显延长磷酸组织胺诱导的豚鼠哮喘发作潜伏期，减少其抽搐发生率，与药前比较差异显著，与布地奈德相比疗效类似或更强。

Claims

1.一种式(I)化合物及其盐

所述式(I)化合物为

6α，9α-二氟-11β-羟基-16α、17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α，9α-二氟-11β-羟基-16α、17α-[(22R、S-丙基亚甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α，9α-二氟-11β-羟基-16α、17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α，9α-二氟-11β-羟基-16α、17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-11β-羟基-16α、17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-11β-羟基-16α、17α-[(22R、S-丙基亚甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-11β-羟基-16α、17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-11β-羟基-16α、17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-11β-羟基-16α、17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-11β-羟基-16α、17α-[(22R、S-丙基亚甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-11β-羟基-16α、17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-11β-羟基-16α、17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

11β-羟基-16α、17α-[(22-R环己基次甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

11β-羟基-16α、17α-[(22R、S-丙基亚甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

11β-羟基-16α、17α-[(22R-丙基亚甲基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

11β-羟基-16α、17α-[(1-甲基亚乙基)双氧]-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯。

2.权利要求1所述的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐在制备治疗哺乳动物皮肤疾病，鼻子、咽喉或肺部的炎性疾病，眼部炎症，炎性肠疾病，自体免疫性疾病的药物中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于哺乳动物是人类。

4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于皮肤疾病为湿疹、牛皮癣、过敏性皮炎、神经性皮炎、疹痒和超敏性反应；鼻子、咽喉或肺部的炎性疾病为哮喘、鼻炎、鼻息肉、慢性阻塞性肺病、间质性肺部疾病和纤维变性；眼部炎症为结膜和结膜炎；炎性肠疾病为溃疡性结肠炎和节段性回肠炎；自体免疫性疾病为风湿性关节炎。

5.权利要求1所述的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐在生产治疗炎性、变应性或过敏性疾病的药物中应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于炎性、变应性或过敏性疾病是指呼吸道的疾病。

7.一种药用组合物，该组合物包含权利要求1所述的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐，其与一种或多种生理学上可接受的稀释剂或载体混合。

8.如权利要求7的药用组合物，其特征在于配制成吸入、口服、口腔、舌下、非肠道、注射、埋植、局部用药或直肠给药的制剂。

9.一种药用气雾剂制剂，该制剂含有权利要求1所述的式(I)化合物或其生理学上可接受的盐，以及作为抛射剂的氟化碳或含氢的氯氟化碳。

10.如权利要求9的药用气雾剂制剂，还含有表面活性剂。

11.一种式(V)化合物及其盐，所述化合物为

6α，9α-二氟-16α、17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

9α-氟-16α、17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

6α-甲基-16α、17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯

16α、17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸腈甲酯。

12.一种如权利要求11所述的式(V)化合物及其盐在制备如权利要求1所述的式(I)化合物及其盐中的应用。

13.化合物6α-甲基-16α、17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸或16α、17α，11β-三羟基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-羧酸在制备如权利要求1所述的式(I)化合物及其盐中的应用。