CN101396484A - 一种镇静安神的复方缬草提取物及其制法 - Google Patents
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Abstract
一种镇静安神的复方缬草提取物,由1~5份缬草提取物,1~5份五味子提取物的重量份组成,通过合提法或分提法制得;合提法为将各原料药粗粉按比例混合,用提取溶剂渗漉或回流,得提取液,将其减压回收溶剂至无醇味,过滤得滤液,将滤液稀释后上大孔吸附树脂柱,用6倍柱体积60~90%乙醇洗脱,洗脱液干燥即得;分提法为分别将缬草、五味子原料粗粉用提取溶剂渗漉或回流,得各单味药提取液,再将其分别减压回收溶剂至无醇味,过滤得滤液,将滤液稀释后上大孔吸附树脂柱,用6倍柱体积60~90%乙醇洗脱,洗脱液干燥后得各单味药提取物,按比例混合即得;上述提取溶剂为45~95%乙醇水溶液。该复方缬草提取物可应用于制备镇静安神防治失眠的药物或食品。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药复方镇静安神制剂及其制备方法,更具体地说涉及以缬草类药材为主药,辅以五味子组成复方,并通过现代制剂方法制备成制剂,用于防治轻、中度失眠。
背景技术
睡眠良好是保证工作效率与生活质量的基础,也是身心健康的重要标志。长期失眠将导致焦虑、抑郁症等疾病,并进一步加重失眠症状。根据世界卫生组织统计资料表明,目前全世界约有1/4已受到不同程度的失眠困扰,我国目前失眠症的发病率也已达到了20%,中老年人睡眠质量不佳者已超过了40%。
目前用于改善睡眠的镇静催眠药多属于精神类药品,虽然可以有效延长睡眠时间,但存在一定副作用,一次大剂量服用可引起急性中毒;长期滥用可引起耐药性和依赖性而导致慢性中毒,记忆力逐渐减退,反应力下降,甚至有可能发展为老年痴呆症。而突然停药或减量则引起戒断综合征。目前临床上常用的安定类药物有如头晕、乏力、困倦、注意力不集中,甚至暂时性健忘(如安定类)和宿醉现象(如长效巴比妥类)等副作用。
中药或天然药物用于镇静催眠,具有副作用少,作用机理多种多样的特点,
因此从中寻找安全有效,可以长期服用无依赖性,不影响认知行为的新型镇静催眠药将具有明显优势,也会具有较广的应用前景。据国家食品药品监督管理局(SFDA)南方医药经济研究所统计数据表明,2005年我国镇静催眠药市场份额已达35亿元,其中以刺五加与天麻素为主的中成药占了很大份额。
我们对大量的镇静安神中药与植物药进行了镇静催眠活性的筛选,发现最具潜力的为缬草与五味子,将其组合成新组方,除有抗焦虑,促进记忆作用外,其镇静催眠活性优于单味药,产生了协同增效作用。
缬草Valeriana officinalis为败酱科缬草属植物,在古罗马时代已用作为驰缓药,可减缓神经紧张和焦虑,改善睡眠。在欧美国家广泛用于治疗轻、中度失眠,并被欧洲药典及美、英、法、德、俄等国药典收载。缬草提取物销售额在欧美连续多年位居前列,其有效成分包括挥发油,缬草三酯及黄酮类成分。目前最畅销的“天然安眠药物”就包括有欧缬草制剂。在欧洲民间喝缬草煎茶用于帮助入眠至少已有几百年历史。其中主要活性成分为“缬草酸”与芳香性挥发油(约占5%)。一般说来缬草制剂对人体无副作用,服后也不会产生“宿醉”等症状。缬草及其制剂已被收载于《美国药典》2000版,在美国或欧洲市场缬草均为进入前10位的畅销天然药物。
缬草属全世界约有250种,广布欧亚温带大陆,该属植物在中国的分布几近全国,其中以西部和西南部种类最多。根据发明者的调查,资源较丰富的种类主要有宽叶缬草,蜘蛛香,黑水缬草,中国缬草等,均可作缬草类药材使用。
缬草镇静催眠活性成分主要包括挥发油类、环烯醚萜类(主要是缬草三酯或缬草素)以及黄酮类等。实验研究表明国产缬草能延长戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间,抑制小鼠自发性活动,显示良好的镇静作用(王菊英,董德慧.湖南缬草镇静作用的实验研究.实用医药杂志,1996,9(2):17-18.)。
国外缬草也常和香蜂花等其他具有镇静安神作用的中药配合应用。但在国内未见有此类研究报道或产品。
缬草还具有神经保护及抗抑郁作用。缬草能对抗β-淀粉样蛋白Aβ(25-35)对体外培养的大鼠海马神经元的毒性。缬草乙醇提取物可能用于防止因衰老或神经退行性病变引起的神经系统疾病。(Malva,J0,santos,S,Macedo,T.Neuroprotectiveproperties of Valeriana officinalis extracts.Neurotox-Res.2004,6(2):131-140.)
值得一提的是,缬草属植物大多无毒性或毒副作用较低。詹国瑛等对缬草按卫生部《食品安全性毒理学评价程序要求》进行了毒性及致突变性测试,试验结果均为阴性,无诱变作用,说明缬草食用安全(詹国瑛,孙建琴,孙晓红,等.缬草的毒性及致突变性测试.癌变.畸变.突变,1996,8(3):180-182.)。服用Valerian超过20倍的临床治疗剂量,亦未发生任何中毒症状,病人的轻微不适,在24小时内完全解除(Willey LB,Mady SP,Cobaugh DJ,Wax PM.Valerian overdose:a case report.Vet Hum Toxicol.1995,37(4):364-365.)。缬草酯类化合物对小鼠母代和子代的外部及内部也均无异常影响(Tufik S,Fujita K,Seabra MdeL,Lobo LL.Effects of a prolonged administration of valepotriates in ratson the mothers and their offspring.J Ethnopharmacol.1994,41(1-2):39-44.)。
五味子Schisandra chinensis为木兰科植物,其干燥成熟果实习称“北五味子”。酸、甘、温。归肺、心、肾经。既能补益心肾,又能宁心安神。主要用于神经衰弱,心悸失眠。含有五味子甲素,乙素,丙素,五味子醇甲等联苯环辛烯类成分以及挥发油等。五味子提取物及五味子素被证实均具有良好的镇静催眠活性。古代名方安寐丹,天王补心丹,人参养荣汤以及现代中成药睡安胶囊,益脑胶囊,益心宁神片,安神胶囊等均重用五味子。研究表明五味子不但有镇静催眠作用,还有改善记忆的作用。华中五味子Schisandra sphenanthersRehd.et Wils的干燥成熟果实也可药用,习称“南五味子”。
研究表明华中五味子、北五味子、狭叶五味子、红花五味子等均可延长戊巴比妥钠睡眠时间(霍艳双,陈晓辉,李康,等.北五味子的镇静催眠作用.沈阳药科大学学报,2005,22(2):126-128)。五味子仁乙醇提取液可明显延长戊巴比妥钠睡眠时间,促进阈下催眠剂量的动物进入睡眠。药物作用与用药剂量有关,呈一定的依赖性。同时研究还表明其能明显减少小鼠自主活动,增强中枢安定药氯丙嗪及利血平对小鼠自主活动的抑制作用,并能对抗中枢兴奋药苯丙胺对小鼠自主活动的兴奋作用,五味子醇甲为主要有效成分之一。
在临床上经常用五味子方剂来改善睡眠,如应用丹参五味子饮、五味子汤均可治疗失眠,疗效好、副作用少,对失眠健忘症疗效显著。
五味子除具有镇静作用外,还可以通过改变某些脑区MAO及其同工酶活性,影响单胺类介质水平,以此改善神经系统功能,提高工作效率,对提高注意力、精细协调动作、灵活性和耐力活动有促进作用。
五味子毒性低,浸膏剂5g/kg给与小鼠灌胃,未见中毒或死亡。小鼠口服五仁醇的LD,为5100mg/kg。
发明者研究发现,缬草与五味子组成新组方镇静催眠活性显著提高,五味子重在滋肾生津安神抗脑疲劳,缬草长于抗焦虑镇静催眠,它们之间通过多成分多靶点协同作用发挥镇静催眠作用,同时具有抗焦虑作用,且不损害记忆与认知行为。
缬草、五味子均为常用中药,均有镇静催眠作用,各有其作用特点。《四川中药志》记载一方,用缬草五味子浸酒服治神经衰弱。但古代及现代未见以此2味药组方配伍的提取物,也未见有用于临床的报道,也未见以此二味药联用用作防治失眠的报道。
发明内容
本发明的目的在于充分利用中草药用于镇静催眠,具有副作用少,作用机理多种多样的特点,提供一种镇静安神的复方缬草提取物用于防治失眠。
本发明以缬草、五味子为原料制备提取物用于制备镇静安神、防治失眠药物。其提取物可采用二味药合提或单味药单提后混合的方法制备,其可以与药学上可接受的辅料制备成任何常用药物剂型(包括滴丸、分散片)。经动物实验证明具有显著的镇静催眠作用。本发明复方缬草提取物可采用以下两种方法制备:
方法一、合提法:
(1)配方和配比(均以重量份计):缬草1~5份,五味子1~5份;最佳配比为1:1。
(2)制备提取液:分别按比例称取各原料药粗粉,混合,将上述原料粗粉浸泡于适量提取溶剂中,提取溶剂为45~95%乙醇或甲醇水溶液,按常规渗漉至总缬草素、总木脂素类检定反应呈阴性为止,收集渗漉液,得提取液。本步骤也可采用5~10倍提取溶剂回流提取一到多次,得提取液。
本步骤所用提取溶剂优选45~95%乙醇,特别优选95%乙醇。回流提取时优选8倍提取溶剂,回流3次,每次2小时。
残渣加水煎二次,浓缩后醇沉,合并提取液。
提取液再经过大孔树脂柱精制,用60%~90%乙醇洗脱,特别优选90%乙醇,取洗脱液。
所说大孔吸附树脂可以是选自AB-8,D101,X-5等型号,特别优选AB-8型号。
(3)浓缩干燥
将上述洗脱液减压回收溶剂至无醇味,过滤得滤液。将滤液干燥后粉碎,即得本发明粉末。
(4)压片
若将所得提取物粉末与片剂常用辅料混合、压片,即得片剂,也可按常规制成丸剂、膏剂、合剂等不同剂型。
方法二、单提后混合:
(1)配方和配比(均以重量份计):缬草1~5份,五味子1~5份;
(2)制备提取液:分别按比例称取各原料药粗粉,分别将上述各原料粗粉浸泡于适量提取溶剂中,提取溶剂为45~95%乙醇或甲醇水溶液,分别按常规渗漉,缬草、五味子分别渗漉至总缬草素、总木质素成分检定反应呈阴性为止,收集各渗漉液,得各单味药提取液;本步骤也可分别采用5~10倍提取溶剂回流提取一到多次,得各单味药提取液。
本步骤提取溶剂优选45~95%乙醇。特别优选:缬草提取溶剂为95%乙醇;五味子提取溶剂为90%乙醇。
(3)浓缩精制干燥:
分别将上述缬草、五味子单味药提取液减压回收至无醇味,过滤得滤液稀释至合适浓度后上大孔树脂精制,用6倍柱体积的60-90%乙醇洗脱,特别优选90%乙醇,洗脱液分别干燥后粉碎得粉末A、B。
所说大孔吸附树脂可以是选自AB-8,D101,X-5等型号,特别优选AB-8型号。
(4)混合
将所得粉末A、B混合,即得本发明提取物;
(5)压片
将所得提取物粉末与片剂常用辅料混合、压片,可得片剂,也可按常规制成丸剂、膏剂、合剂等不同剂型。
本发明提取物经动物实验证明具有显著的防治轻中度失眠的作用,故可用于制备防治轻中度失眠的药物或食品。
具体实施方式
现结合实施例对本发明作详细描述。
实施例1 合提法制备本发明提取物
(1)制备提取液
取缬草粗粉2kg、五味子粗粉2kg,浸泡于4000ml95%乙醇中,放置过夜,按常规渗漉,控制渗漉速度3~5ml/分钟,渗漉过程中随时添加溶剂,渗漉至总缬草素、总木脂素类成分检定反应呈阴性为止,收集渗漉液,即为提取液。浓缩至小体积,蒸馏水稀释后,通过预处理的AB-8大孔吸附树脂柱,以6倍量90%乙醇洗脱。收集洗脱液。树脂的预处理:先用重蒸水洗去细小树脂及破碎树脂,湿法装柱后,用高于树脂层10cm的无水乙醇浸泡过一天,放出浸液,继续用无水乙醇冲洗至洗出液加水(1∶5)不出现浑浊,再用重蒸水洗至无醇味即可上样使用。
(2)制备提取物:将上述提取液减压回收溶剂,干燥后粉碎,即得提取物粉末132.0g,TLC检定含总缬草素、总木脂素成分,以五味子醇甲为指标,分光光度法测定总木脂素含量为12.5%,以缬草素含量为指标,用HPLC法测定总缬草素含量为23.4%。
(3)制备制剂:
配方及配比:
提取物粉末 100g
淀粉 40g
乳糖 30g
微晶纤维素 30g
7%淀粉浆 适量
硬脂酸镁 1%
按上述配比将提取物粉末、淀粉、乳糖、微晶纤维素分别过80目筛,混匀,再过40目筛3次,将上述混合粉用7%淀粉浆制软材,过24目筛粒,50℃干燥2小时,干燥颗粒过30目筛整粒,加入硬脂酸镁,混匀,压片,得片剂1000片。实施例2合提法制备本发明提取物
缬草、五味子3:2混合,粉碎成粗粉,取4000g,8倍量95%乙醇回流提取3次,每次2小时,其余同实施例1,得提取物粉末153.2g。以五味子醇甲为指标,分光光度法测定总木脂素含量为8.9%,以缬草素含量为指标,用HPLC法测定总缬草素含量28.5%。
实施例3 合提法制备本发明提取物
缬草、五味子2:3混合,粉碎成粗粉,取4000g,8倍量60%乙醇回流提取3次,每次2小时,其余同实施例1,得提取物粉末142.3g。以五味子醇甲为指标,分光光度法测定总木脂素含量为14.4%,以缬草素含量为指标,用HPLC法测定总缬草素含量为20.8%。
实施例4 分提法制备本发明提取物
分别称取缬草粗粉2kg、五味子粗粉2kg,分别将上述各原料粗粉用适量95%乙醇浸泡,按常规渗漉,缬草、五味子分别渗漉至总缬草素、总木脂素类成分检定反应呈阴性为止,收集渗漉液,得各单味药提取液;分别将各单味药提取液减压回收至无醇味,上AB-8大孔吸附树脂柱,6倍柱体积的90%乙醇洗脱,洗脱液过滤,浓缩干燥后粉碎,得粉末A62.6g;将五味子滤液干燥后粉碎,得粉末B54.30g。将A、B混合,即得本发明复方缬草提取物粉末,以五味子醇甲为指标,分光光度法测定总木脂素含量为11.1%,以缬草素含量为指标,用HPLC法测定总缬草素含量为24.5%。
实施例5 合提法制备本发明提取物
缬草、五味子5:2混合,粉碎成粗粉,取4000g,8倍量50%乙醇回流提取3次,每次2小时,合并提取液,回收乙醇,稀释至适当浓度,通过预处理的D101大孔吸附树脂柱,以70%乙醇洗脱,其余同实施例1,得提取物粉末152.3g。以五味子醇甲为指标,分光光度法测定总木脂素含量为8.1%,以缬草素含量为指标,用HPLC法测定总缬草素含量为38.3%。
实施例6 合提法制备本发明提取物
缬草、五味子1:4混合,粉碎成粗粉,取4000g,8倍量80%乙醇渗漉提取至完全,合并提取液,回收乙醇至无醇味,稀释至适当浓度,通过预处理的X-5大孔吸附树脂柱,其余同实施例1,得提取物粉末148.3g。以五味子醇甲为指标,分光光度法测定总木脂素含量为20.3%,以缬草素含量为指标,用HPLC法测定总缬草素含量为12.6%。
试验例1 药理实验
1 仪器和材料
动物:昆明种小白鼠,体重18~22g,雌雄兼用,由第二军医大学动物中心提供。
实验材料:宽叶缬草采于贵州。五味子购于上海市药材公司。按上法制得样品。
地西泮(diazepam,DZP)上海九福药业生产,批号040201。戊巴比妥钠(Pentobarbital Sodium,Serva公司)上海化学试剂公司进口分装,批号F20021216。
各提取物均以1%CMC-Na的生理盐水(Normal Saline,NS)溶液制成不同浓度的混悬液。以含1%CMC-Na液的NS为空白对照。
AB提取物即为缬草提取物A和五味子提取物B的混合物。
2 方法与结果
2.1 对小鼠自发活动的影响
小鼠60只,随机分组,每组10只,灌胃给予不同剂量的样品,以2min内小鼠活动时间和前肢上举次数为指标,观察给药后60的活动变化。结果见表1。复方缬草提取物有抑制小鼠自发活动的作用,表现为小鼠给药后单位时间内活动时间减少,前肢上举次数下降。0.5g/kg的剂量作用要强于0.25g/kg剂量的作用。
表1 提取物对小鼠自主活动的影响(x±S,n=10)
与空白对照组比较,*p<0.05**P<0.01
2.2 对戊巴比妥钠作用睡眠时间的影响
小鼠60只,随机分组,每组10只,于药物灌胃给药60min后,腹腔注射戊巴比妥钠50mg/kg,以翻正反射消失至恢复时间作为睡眠时间,结果见表2,以缬草五味子组合提取物作用优于缬草或五味子单个提取物。
表2 提取物对戊巴比妥钠睡眠时间的影响(x±S,n=10)
注:与空白对照组比较*P<0.05**P<0.01
2.3 对阈下剂量戊巴比妥钠催眠作用的影响
小鼠60只,随机分组,每组10只,于药物灌胃给药60min后,腹腔注射戊巴比妥钠32mg/kg,记录15min内入睡动物数(翻正反射消失达1min以上),结果见表3,以缬草五味子提取物的入睡率优于缬草或五味子单个提取物。
表3 对阈下剂量戊巴比妥钠催眠作用的影响
Claims (6)
1、一种镇静安神的复方缬草提取物,由下列重量份:1~5份缬草提取物,1~5份五味子提取物组成,通过合提法或分提法制得;
所述的合提法为:将各中药粗粉按比例混合,用提取溶剂渗漉或回流,得提取液,将上述提取液减压回收溶剂至无醇味,过滤得滤液,将滤液稀释后上大孔树脂柱,用6倍柱体积60~90%乙醇洗脱,洗脱液干燥后得复方缬草提取物;
所述的分提法为:分别将缬草、五味子中药粗粉用提取溶剂渗漉或回流,得各单味药提取液,再将各单味药提取液分别减压回收溶剂至无醇味,过滤得滤液,将滤液稀释后上大孔树脂柱,用6倍柱体积60~90%乙醇洗脱,洗脱液干燥后得各单味药提取物,将各单味药提取物按比例混合,即为复方缬草提取物;
所述的提取溶剂为45~95%乙醇水溶液;
所述的大孔吸附树脂选自AB-8,D101,X-5。
2、按权利要求1所述的一种镇静安神的复方缬草提取物,其特征在于由合提法制得的复方缬草提取物所用的提取溶剂为95%乙醇。
3、按权利要求1所述的一种镇静安神的复方缬草提取物,其特征在于由分提法制得的缬草提取物所用的提取溶剂为95%乙醇,五味子提取物所用的提取溶剂为90%乙醇。
4、按权利要求1或2或3所述的任何一种复方缬草提取物,其特征在于缬草、五味子重量之比为1:1。
5、按权利要求1所述的任何一种复方缬草提取物,其特征在于所述的大孔吸附树脂是指AB-8。
6、权利要求1所述的一种复方缬草提取物在制备镇静安神、防治失眠的药物或食品中的应用。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20090401 |