CN101382500A - 光照射方法、光照射装置以及微粒分析装置 - Google Patents

光照射方法、光照射装置以及微粒分析装置 Download PDF

Info

Publication number
CN101382500A
CN101382500A CNA2008102118002A CN200810211800A CN101382500A CN 101382500 A CN101382500 A CN 101382500A CN A2008102118002 A CNA2008102118002 A CN A2008102118002A CN 200810211800 A CN200810211800 A CN 200810211800A CN 101382500 A CN101382500 A CN 101382500A
Authority
CN
China
Prior art keywords
light
irradiation
runner
sample
point
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA2008102118002A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101382500B (zh
Inventor
篠田昌孝
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sony Corp
Original Assignee
Sony Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sony Corp filed Critical Sony Corp
Publication of CN101382500A publication Critical patent/CN101382500A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101382500B publication Critical patent/CN101382500B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01JMEASUREMENT OF INTENSITY, VELOCITY, SPECTRAL CONTENT, POLARISATION, PHASE OR PULSE CHARACTERISTICS OF INFRARED, VISIBLE OR ULTRAVIOLET LIGHT; COLORIMETRY; RADIATION PYROMETRY
    • G01J1/00Photometry, e.g. photographic exposure meter
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1456Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals
    • G01N15/1459Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals the analysis being performed on a sample stream
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1429Signal processing
    • G01N15/1433Signal processing using image recognition
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1434Optical arrangements
    • G01N2015/144Imaging characterised by its optical setup
    • G01N2015/1445Three-dimensional imaging, imaging in different image planes, e.g. under different angles or at different depths, e.g. by a relative motion of sample and detector, for instance by tomography
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1434Optical arrangements
    • G01N2015/1447Spatial selection
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10Investigating individual particles
    • G01N15/14Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1434Optical arrangements
    • G01N2015/1452Adjustment of focus; Alignment

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)

Abstract

本发明公开了一种光照射方法、光照射装置以及微粒分析装置。该光照射方法使用定向光来照射流道中的样本,其包括以下步骤:当使用定向光在流道的宽度方向上执行扫描时,使用该定向光照射样本。该定向光具有小于流道的宽度的照射点。因此,可在不增加光源的输出功率的情况下,增加照射点的能量密度。

Description

光照射方法、光照射装置以及微粒分析装置
相关申请的交叉参考
本发明包含于2007年9月4日向日本专利局提交的日本专利申请JP 2007-228932的主题,其全部内容结合于此作为参考。
技术领域
本发明涉及一种光照射方法、光照射装置以及微粒分析装置。更具体地,本发明涉及一种使用定向光来照射流道中的样本的技术。
背景技术
使用诸如激光的定向光的照射技术被广泛应用于例如谱测量或处理技术中。定向光具有均一的波长和相位。因此,当使用例如透镜聚集定向光时,能够将定向光聚集在一个小点处,使得在定向光的照射点处的能量密度较高。
激光光谱法可分为例如线性激光光谱法以及非线性激光光谱法。测量吸收光谱或激发光谱的线性激光光谱法相比于使用光源的相关光谱法还可提供高灵敏度和高分辨率。非线性光谱法可提供更高的灵敏度和分辨率。激光光谱法的实例包括:激光诱导荧光光谱法、激光拉曼光谱法、相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)、偏光光谱法、共振电离光谱法以及光声光谱法。特别地,具有高时间分辨率的光谱法被称作皮秒光谱法或飞秒光谱法。
例如,还将激光照射技术用于流动细胞计量术(参考“CellTechnology Supplementary Volume:Experiment Protocol Series,FlowCytometry With Flexibility,”作者Hiromitsu Nakauchi,2006年8月31日由Shujunsha,Second Edition出版,12~13页)。“流动细胞计量术”涉及一种当细胞(将被测量的测量对象)活着时对其进行分类、从而分析例如该细胞的功能的测量方法。使该细胞流进层流,从而使用激光来照射通过流动单元的细胞。测量通过照射而产生的荧光或散射光。在脉冲检测系统中,当细胞穿过激光时所产生的荧光或散射光被作为电脉冲而进行检测。然后,例如,分析脉冲高度、脉冲宽度或者脉冲面积,从而分析例如该细胞的功能。这使得能够通过检测从每个细胞产生的散射光或荧光,来分析每个活细胞的特性。
发明内容
当例如由于流道内的样本的位置改变,导致不能充分而可靠地执行照射时,使照射光的照射点的直径大于流道的宽度。然而,这会引起由于照射点的能量密度的减小而必须提高光源的输出功率的问题。
因此,希望提供一种能够在不增加光源的输出功率的情况下,相对地增加照射点的能量密度的光照射方法。
根据本发明的实施例,提供了一种使用光来照射流道中的样本的光照射方法。该方法包括以下步骤:当使用光在流道的宽度方向上执行扫描时,使用该光照射样本。该光具有小于流道宽度的照射点。
使用照射光的照射点在流道的宽度方向上进行扫描使得能够至少相对地增加该照射光的照射点的能量密度。因此,可减小光源的输出功率,并增加该照射光的光聚集效率。
在光照射方法中,可以在至少使用检流计反射镜、电光元件、多面反射镜和MEMS元件中的任何一种执行扫描的同时执行光照射。
在该光照射方法中,在满足以下的表达式(1)的条件下,可以执行使用定向光的扫描:
D 2 v 1 > D 1 v 2 - - - ( 1 )
其中,v1是样本在流道内部的移动速度,v2是定向光的扫描速度,D1是流道的宽度,而D2是照射点的直径。
在这样的条件下进行扫描使得在扫描点通过流道的宽度的时间内,该样本至少能够穿过扫描点一次。因此,能够使用该扫描点来检测流道内部的样本。
根据本发明的另一个实施例,提供了一种使用光来照射流道中的样本的光照射装置。该装置至少包括光源和扫描器。光源用于使用具有小于流道宽度的照射点的光来执行照射。扫描器使用光在流道的宽度方向上执行扫描。当该光照射装置包括扫描器时,该光照射装置是一种减小光源输出功率,并增加照射光的光聚集效率的装置。
根据本发明的又一个实施例,提供了一种包括上述光照射装置的微粒分析装置。
根据本发明的实施例,能够在不增加光源的输出功率的情况下,相对地增加光照射的照射点的能量密度。
附图说明
图1是根据本发明的实施例的光照射方法和光照射装置的示意图;
图2是根据本发明的另一个实施例的光照射方法和光照射装置的示意图;
图3是根据本发明的又一个实施例的光照射方法和光照射装置的示意图;
图4是根据本发明的又一个实施例的光照射方法和光照射装置的示意图;以及
图5是根据本发明的又一个实施例的光照射方法和光照射装置的示意图。
具体实施方式
在下文中,将参考附图来描述光照射方法、光照射装置以及微粒分析设备的优选实施例。在附图中所示出的实施例仅仅是根据本发明的示例性实施例,而并不意为缩小本发明的范围。
图1是根据本发明的实施例的光照射方法和光照射装置的示意图。
在图1中,参考数字1表示光照射装置。光照射装置1包括流道11和光源12。参考字符A表示作为照射对象的样本。参考字符S表示用于照射的照射光的照射点。样本A存在于流道11的内部,并以速度v1移动。使用定向光L12以速度v2执行的扫描提供了多个照射点S12。
在本发明的实施例中,不限制存在于流道11内部的样本A的类型。例如,样本A可以是细胞或诸如珠的微粒。流道11内部的介质是流体,从而例如可采用多种溶液或气体。可以考虑例如照射条件或样本A的类型来选择合适的介质。
形成作为光扫描结果的多个照射点S12使得能够在流道11的预定位置处执行扫描。因此,无论样本A存在于流道11内部中的何处,都能够使用光来高速照射以及扫描流道11的内部。
从光源发射的定向光L12的类型并没有具体限制,从而例如,可以使用激光器或发光二极管(LED)。
当将激光用作定向光L12时,其介质可以是例如半导体激光器、液体激光器、气体激光器或固体激光器。
半导体激光器的实例包括GaAs激光器以及InGaAsP激光器。气体激光器的实例包括He-Ne激光器(红)、Ar激光器(可见,蓝、绿)、CO2激光器(红外线)以及受激准分子激光器(紫色等)。液体激光器的实例是染料激光器。固体激光器的实例包括红宝石激光器、YAG激光器以及玻璃激光器。还可以使用二极管泵浦固体激光器(DPSS),其为对诸如Nd:YAG的固态介质进行充能并振荡的激光二极管(LD)。
在本发明的实施例中执行的光照射的目的不受限制,从而能够适当地依照该目的来选择合适的光源12。例如,可以为例如各种分析、测量、加热操作或处理而执行光照射。
例如,当将要执行分析或测量时,可以使用检测器13来检测通过使用定向光L12照射样本A所获得的测量光L12′。虽然未示出,检测器13包括模数转换器(ADC),从而将所检测的测量光L12′转换成数字信号,并使用例如中央处理单元(CPU)(未示出)来执行计算。
测量光L12′的类型不受限制。可以适当考虑样本A的类型或测量条件来使用合适的检测方法。测量光的实例包括从样本A发射的散射光和荧光。例如,在检测方法中,预先用特殊的荧光材料标记样本A,并使用作为激发光的光L12从光源12照射样本A。由于照射而发射的荧光被作为测量光L12′而进行检测。
当使用荧光染料时,将从光源12发射的光L12用作定向光,以及可以使用对应于光L12的波长(例如,激光波长)的荧光染料。
例如,当使用Ar离子激光器(488nm)时,可以将异硫氰酸荧光素(FITC)、藻红蛋白(PE)、多甲藻叶绿素蛋白(PerCP)用于荧光染料。例如,当使用He-Ne激光器(633nm)时,可以将别藻蓝蛋白(APC)或APC-Cy7用于荧光染料。例如,当使用染料激光器(598nm)时,可以将德克萨斯红(Texas Red)(TR)用于荧光染料。例如,当使用Cr激光器(407nm)或半导体激光器时,可以将喀斯喀特蓝(Cascade Blue)用于荧光染料。
在使用测量光的不同检测方法中,能够在例如不标记的情况下,检测到来自样本A的散射光(前向散射光或侧向散射光)。例如,可以检测当照射点S12通过样本A时发射的散射光。在该情况下,当光L12是定向光时,还能够以更高的精度检测位置信息。
当样本A在流道11的内部移动时,样本A在流道11内部的位置发生改变。特别地,当样本A的尺寸远小于流道11的流路宽度D1时,样本A以一定的自由度在流道11的内部移动。因此,可发生例如显著的照射不均衡、照射的位置偏移或者聚焦的位置偏移。这些因素是定向光L12的照射效率减小的部分原因。因此,例如,在过去,使照射时间变长,或使照射点的直径D2大于流道宽度D1(参考在图1中的R状态)。虽然在例如R状态(作为相关实例)中,基本上能够照射样本AR的全部区域,但是照射点SR变大。因此,增加了光束的输出。另外,例如,使照射点SR形成为预定的椭圆形。
相反,在本发明的实施例中,当使用定向光L12执行扫描(参考在图1中的v2)时,执行照射。通过在流道11的内部形成多个照射点S12,样本A至少通过多个照射点S12中的任一个。因此,即使没有使照射点S12的照射点直径D2变大,也能够使用该光充分并精确地照射在流道11的内部移动的样本A。
使用定向光L12的扫描并不局限于恒定速度,从而考虑到例如使用的目的或照射条件,可适当地以变速执行扫描。然而,希望以高速执行扫描。这使得能够使用光来更可靠地照射移动通过流道11的样本A,并执行多次光照射。特别地,希望在以下表达式(1)的条件下执行光照射:
D 2 v 1 > D 1 v 2 - - - ( 1 )
其中,v1是样本在流道内部的移动速度,v2是定向光的扫描速度,D1是流道的宽度,而D2是照射点的直径。
在表达式(1)的左侧,“照射点直径D2”除以“样本A在流道11的内部的移动速度v1”。这近似为样本A通过照射点的直径的时间。虽然照射点的直径D2没有具体的限制,但是希望它位于1μm~100μm的范围内。虽然样本A通过流道11的移动速度v1没有具体的限制,但希望它在0.1m/s~10m/s的范围内。
在表达式(1)的右侧,“流道宽度D1”除以“定向光的扫描速度v2”。这近似为使用定向光扫描流道宽度的扫描时间。虽然流道宽度D1没有具体的限制,但希望它在10μm~1mm范围内。虽然定向光的扫描速度v2没有具体的限制,但希望它在1m/s~50m/s的范围内。
即,当样本A通过照射点直径时,流道的整个宽度至少被光照射一次。因此,为执行更多次数的扫描,希望(D2/v1)足够大于(D1/v2)。更具体地,希望(D2/v1)是(D1/v2)的2~10倍。这样,当样本A通过照射点S12时,能够执行2~10次扫描。这使得能够提高使用定向光L12的效率。通过整合基于多个扫描操作的检测信号,可进一步增加定向光L12的S/N比。例如,当将诸如荧光的光用于处理较暗的事物时,在增加荧光信号的同时能够减少噪声。因此,这正是所希望的。
除了以高速执行扫描之外,甚至可以通过进一步减小流道宽度D1来获得类似的效果。减小流道宽度D1使得能够减少扫描点S12的扫描时间(即D1/v2)。设置这样的扫描条件和流道结构使得能够对样本执行多次光照射。例如,如果能够执行N次光照射,则整合其信号使得检测光信号的S/N比能够增加(N)1/2倍。
用于光照射中的扫描器并没有具体的限制。然而,希望使用例如检流计反射镜、电光元件、多面反射镜或MEMS元件来扫描照射点S12。特别地,由于电光元件不包括可动部,所以特别考虑到高的稳定性和可靠性,希望使用电光元件。也可以使用多个扫描器。
根据本发明实施例的光照射装置1可以是一个至少包括光源12和扫描器的装置。光源12用于使用具有小于流道11的流道宽度D1的照射点直径D2的定向光L12进行照射。扫描器使用定向光L12在流道的宽度方向上执行扫描。光照射装置1可以进一步包括检测在照射点S12产生的测量光L12′的光检测系统。
图2是根据本发明另一个实施例的光照射方法和光照射装置的示意图。在图2中,参考数字2表示光照射装置。
在图2中所示的光照射方法和光照射装置中,运送到流道21中的样本A被从光源22发射并用于获得位置信息的光L22照射。下文中的描述将着重于在图2中所示的光照射方法和装置与在图1中所示的光照射方法和装置之间的差异。
样本A在流道21的内部中以速度v1移动。用来自光源22的用于获得位置信息的光L22照射样本A。使用照射点S22执行扫描使得通过照射位置的样本A可靠地被光所照射。当检测器23检测通过照射生成的测量光L22′时,可获得样本A的位置信息。
在该位置信息的基础上,来自以下光源24的定向光L24照明照射点S24。照射点S24如在图1中所示的光照射方法中一样用于进行扫描,但是其允许基于位置信息开始样本A的扫描。即,可以确定样本A在照射点S22处的位置(参考图2中的相应的阴影区域),并且能够从该位置信息预测样本A在照射点S24中的位置(参考图2中的相应的阴影区域)。
获得该位置信息使得能够控制在照射点S24处使用定向光L24照射样本A的时刻。即,能够预计样本从照射点S22到达照射点S24的时间。例如,能够设置该时间,使得在用于检测位置信息的光L22的照射以之后经过(D3/v1)之后执行来自光源24的光照射。
在本发明的实施例中,可以控制时刻,使得当样本A到达照射点S24时,使用定向光L24进行照射。在该情况下,由于未使用来自光源24的定向光L24进行长时间的或持续的照射,所以能够有助于例如增加光源24的寿命或者减少装置的负荷。
使用用于获得位置信息的光L24照射多个照射点S24使得不仅能够检测样本A在该位置处经过的时间,还能够检测位置信息。因此,可使用以下定向光L24执行更高精度的照射。另外,可选择用于照射时刻和照射扫描开始位置的最佳条件,使得能够有效地执行光照射。
另外,当在除了流道内部之外的区域处执行诸如样本的加工、处理或分类等的工序时,所获得的位置信息或速度信息能可被用作该工序的触发信号。即,能够将通过光照射所获得的样本的位置信息作为信号输出至用于执行分离操作的装置部分,从而可将位置信息用作该装置部分的触发信号。
以这种方式获得样本A在流道21内部的位置信息使得能够调整以及优化例如来自光源24的定向光L24的照射位置、照射时间或者照射强度。因此,可以进一步减轻例如在照射点S24处的散焦、照射移动或不均衡照射。
使用用于获得位置信息的光L22照射多个照射点S22的方法不受限制,从而可以提供对应于各个照射点S22的多个光源22。然而,希望执行使用从一个光源22发射的光L22的扫描。当使用扫描机构时,只使用一个光源22,使得能够简化装置的结构。
样本A的位置信息是指关于例如存在于流道21内部的样本的位置或流速的信息,并包括关于在流道21内部的样本A的向量的多项信息。在本发明的实施例中,只检测将用作位置信息的信息,从而使位置信息不受限制。
虽然未示出,但作为检测位置信息的检测器,可以单独提供控制器,其基于通过用检测器23检测测量光L22′所获得的位置信息来控制使用定向光的照射。例如,可以使用例如模数转换器(ADC)将由检测器23所检测的测量光L22′的测量数据转换成数字信号,使用计算机对该信号进行计算,并反馈该信号作为用于控制光源24的照射的信息。
测量光L22′的类型不受限制。可适当考虑例如样本A的类型或测量条件来使用合适的检测方法。测量光的实例包括从样本A发射的散射光和荧光。在检测方法中,如上所述,预先用特殊的荧光材料标记样本A,并用来自光源22的作为激发光的光L22照射样本A。由于照射所发射的荧光被作为测量光L22′进行检测。另外,在不需要执行标记的情况下就可以将从样本A发射的散射光作为位置信息进行检测。
反映位置信息的系统不局限于执行光照射的光学系统。例如,可以设置考虑样本的位置信息(尤其是,例如移动速度)来控制流道21内部的介质的流速(即,样本A的移动速度v1)的控制器。基于位置信息调整流道21内部的介质的流速使得能够使用定向光L24来精确照射样本A。
当在使用用于获得位置信息的光L22执行扫描的同时照射介质时,扫描条件没有具体的限制。然而,希望以高速执行扫描。这使得能够可靠地使用光来照射在流道11的内部移动的样本A。由于如在表达式(1)中相同的原因,特别希望能够在以下表达式(2)的条件下执行光照射:
D 4 v 1 > D 1 v 3 - - - ( 2 )
其中,v1是样本在流道内部的移动速度,v3是用于获得位置信息的光的扫描速度,D1是流道的宽度,而D4是用于获得位置信息的照射点S22的直径。
因此,根据本发明实施例的光照射装置可以是一个进一步包括光源22、扫描器以及光学检测系统的装置。光源22被用于使用光L22(用于获得样本A的位置信息)在流道21中执行照射。扫描器使用用于获得位置信息的光L22执行扫描。光学检测系统检测作为使用光L22(用于获得位置信息)对样本A进行照射的结果而发射的测量光L22′。
可以进一步设置计算处理器和照射控制器。计算处理器对使用光学检测系统所获得的测量数据执行计算处理操作,从而获得作为位置信息的测量数据。照射控制器基于位置信息使用定向光L24来控制照射。此外,希望用于获得位置信息的光L22的照射点的直径D4小于流道22的流道宽度D1。这使得能够简化装置的结构,并减少光源的数目,使得装置变成一个经济型装置,并可减少对装置的维护。
图3是根据本发明又一个实施例的光照射方法和光照射装置的示意图。在图3中,参考数字3表示光照射装置。
在图3中所示的光照射方法和光照射装置的一个特征是关于运送到流道31的内部中的样本A,使用用于获得位置信息的光的照射点S32来照射在流道方向上和宽度方向上的不同位置。下文中的描述将着重于在图3中所示的光照射方法和装置与在图1和图2中所示的光照射方法和装置之间的差异。
样本A以速度v1在流道31的内部移动。相对于样本A,从光源32发射用于获得位置信息的光L32。照射点S32用于在流道方向(X方向)和宽度方向(Y方向)上执行扫描。当检测器33检测从通过照射点S32的样本A发射的测量光L32′时,可获得样本A的位置信息。另外,基于位置信息,来自光源34的定向光L34照明照射点S34。
特别地,使用照射点S32在流道方向(X方向)和宽度方向(Y方向)上执行扫描使得能够获得样本A具有时间差的位置信息。因此,可以更精确地知道样本A在流路方向和宽度方向上存在于流道31中的哪个位置。显然,光的检测并不局限于二维检测(即,在流道方向上和宽度方向上),从而可以执行扫描以检测三维位置信息(包括深度方向(Z方向)的位置信息)。
图4是根据本发明又一个实施例的光照射方法和光照射装置的示意图。在图4中,参考数字4表示光照射装置。
在图4中所示的光照射方法和光照射装置4的一个特征是将用于获得位置信息的光L42和光L45的照射点S42和照射点S45设置在定向光L44的照射点S44的前侧和后侧。下文中的描述将着重于在图4中所示的光照射方法和装置与在图1~图3中所示的光照射方法和装置之间的差异。
样本A以速度v1在流道41内移动。相对于样本A,从光源42发射用于获得位置信息的光L42,从而使用检测器43来检测测量光L42′。然后,当使用定向光L44在流道的宽度方向上执行扫描时,来自光源44的定向光L44照亮样本A。此后,从以下光源45发射用于再次获得位置信息的光L45,从而使用检测器46检测测量光L45′。
当在用定向光L44对照射点S44进行照射之后,用于获得位置信息的光L45照明照射点S45时,例如,可以知道样本A存在于流道41后部区域处的哪个位置。即使没有充分地检测前部的照射点S42处的测量光L42′,但还可以检测位于后部的照射点S45处的测量光L45′,从而能够获得更详细的位置信息。因此,样本A在流道41后部区域处的位置信息能够反映例如使用定向光L44的照射。
在多个位置处设置用于获得位置信息的光的照射点使得能够获得更高精度的样本A的位置信息。特别地,当样本A能够以一定的自由度在流道41的内部移动时,能够执行作为在用定向光L44照射之前所获得的位置信息和在用定向光L44照射之后所获得的位置信息的结果的高级的光照射。
图5是根据本发明的又一个实施例的光照射方法和光照射装置的示意图。在图5中,参考数字5表示光照射装置。
在图5中所示的光照射方法和光照射装置5的一个特征是将用于获得位置信息的光照射的照射点设置在定向光的照射点的前部和后部。下文中的描述将着重于在图5中所示的光照射方法和装置与在图1~图4中所示的光照射方法和装置之间的差异。
流道51具有基本上为Y形的流道结构。即,从流道511和流道512所运送的样本A相遇,并被运送到照射位置。用于获得位置信息并从光源52发射的光L52在9个位置处照明照射点S52。使用检测器53检测由于照射而发射的测量光L52′,从而获得位置信息。基于所获得的位置信息,从光源54发射的定向光L54照明照射点S54。
当用于获得位置信息的光的照射点S52照明流道51的内部中的多个位置时,可检测到更详细的样本A的位置信息。特别地,当相对于流道51中的各个基本上为方形的划分区域执行使用用于获得位置信息的光L52的照射时,可以获得更精确的位置信息。
例如,当流道51有分叉时,在由于例如在流道51中的汇合区域处的碰撞而引起猛烈移动的同时,样本A被运送至照射点S52。通过设置用于获得位置信息的光L52的大量的照射点S52并且照射样本A,从而包括流道51的内部中的空间,使得能够获得样本A关于时间的详细的位置信息。因此,能够检测到更精确的位置信息。
虽然未示出,但例如当在流道51的后部处对样本A进行分类时,可将位置信息用于例如确定样本存在于流道51中的哪个位置以及样本以何种速度移动到以下分类预定位置。
例如,当使不同的样本通过流道511和流道512从而被用作微反应器时,该实施例是合适的。当由于流道511和流道512的汇合而发生某种反应时,可执行该实施例,并使用定向光54照射后来的反应物以执行光谱检测,以及根据光谱检测的结果执行取样。
根据本发明实施例的光照射方法和光照射装置可应用于多种技术领域。例如,可以将它们应用于使用定向光的测量装置/分析装置,诸如,颗粒直径分布测量装置、流体图像分析装置、三维测量装置以及激光显微镜。对于照射流道中的样本的技术,它们适合于用在这些测量装置/分析装置之中的例如测量很小的颗粒的微粒分析装置中。
微粒分析装置的实例包括流动细胞计量分析装置以及珠化验(流动水珠化验)装置。即,根据本发明实施例的光照射方法和光照射装置可应用于例如作为使用光来照射微粒并检测所获得的诸如荧光或散射光的测量光的结果而对微粒进行分类的技术。
流动细胞计量分析装置的实例包括用于测量例如微粒的结构和尺寸的装置,以及用于基于例如所测量的尺寸和结构对预定微粒进行分类所形成的装置。在这些装置中,将对细胞进行取样的装置用作细胞分类器。细胞分类器能够以每秒几万~十万个细胞的高速度进行取样以及测量。特别地,可以用光精确地照射即使是细微的颗粒。
当将要对微粒进行分类时,可将根据本发明实施例的光照射装置用作光检测机构。也就是说,由于可使用激光照射流道中的微粒(诸如活细胞)的精确位置,所以可以精确、有效地对例如存在于活细胞中的即使是很少数的干细胞进行分类。
由于可对流道中的微粒(诸如细胞或水珠)执行例如极少疏漏的适当的激光照射,所以能够以更高精度来执行检测。另外,可将光照射装置形成为能够执行实时检测的微粒分析装置。
本领域的技术人员应理解,根据设计要求和其他因素,可以有多种修改、组合、子组合和变化,均应包含在本发明的权利要求或等同物的范围之内。

Claims (6)

1.一种使用定向光来照射流道中的样本的光照射方法,所述方法包括以下步骤:
当使用所述定向光在所述流道的宽度方向上执行扫描时,使用所述定向光照射所述样本,所述定向光具有小于所述流道的宽度的照射点。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,至少使用检流计反射镜、电光元件、多面反射镜以及MEMS元件中的任何一种来执行使用所述定向光的扫描。
3.根据权利要求1所述的方法,其中,在满足以下表达式(1)的条件下执行使用所述定向光的扫描:
D 2 v 1 > D 1 v 2 - - - ( 1 )
其中,v1是所述样本在所述流道内部的移动速度,v2是所述定向光的扫描速度,D1是所述流道的宽度,以及D2是所述照射点的直径。
4.一种使用定向光照射流道中的样本的光照射装置,所述装置至少包括:
光源,用于使用具有小于所述流道的宽度的照射点的光来执行照射;以及
扫描装置,用于使用所述光在所述流道的宽度方向上执行扫描。
5.一种微粒分析设备,包括:
根据权利要求4所述的光照射装置。
6.一种使用定向光来照射流道中的样本的光照射装置,所述装置至少包括:
光源,用于使用具有小于所述流道的宽度的照射点的光来执行照射;以及
扫描器,使用所述光在所述流道的宽度方向上执行扫描。
CN2008102118002A 2007-09-04 2008-09-03 光照射方法、光照射装置以及微粒分析装置 Active CN101382500B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2007-228932 2007-09-04
JP2007228932A JP4556975B2 (ja) 2007-09-04 2007-09-04 光照射方法、光照射装置及び微粒子解析装置
JP2007228932 2007-09-04

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101382500A true CN101382500A (zh) 2009-03-11
CN101382500B CN101382500B (zh) 2012-05-09

Family

ID=39798251

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2008102118002A Active CN101382500B (zh) 2007-09-04 2008-09-03 光照射方法、光照射装置以及微粒分析装置

Country Status (6)

Country Link
US (1) US8203711B2 (zh)
EP (1) EP2034292B1 (zh)
JP (1) JP4556975B2 (zh)
KR (1) KR101507041B1 (zh)
CN (1) CN101382500B (zh)
AT (1) ATE545013T1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102331396A (zh) * 2010-07-01 2012-01-25 索尼公司 微粒分析装置和方法
CN105182804A (zh) * 2014-06-03 2015-12-23 Ap系统股份有限公司 光照射方法和设备

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4509154B2 (ja) * 2007-09-04 2010-07-21 ソニー株式会社 光照射装置、微粒子解析装置及び光照射方法
US9372143B2 (en) * 2013-05-15 2016-06-21 Captl Llc Scanning image flow cytometer
US9528925B2 (en) 2014-02-14 2016-12-27 Palo Alto Research Center Incorporated Spatial modulation of light to determine object position
US9207066B2 (en) 2014-02-14 2015-12-08 Palo Alto Research Center Incorporated Spatial modulation of light to determine dimensional characteristics of objects in a flow path
US9952033B2 (en) 2014-02-14 2018-04-24 Palo Alto Research Center Incorporated Spatial modulation of light to determine object length
US10451482B2 (en) 2014-02-14 2019-10-22 Palo Alto Research Center Incorporated Determination of color characteristics of objects using spatially modulated light
US9400174B2 (en) 2014-04-07 2016-07-26 Palo Alto Research Center Incorporated Monitor for particle injector
US9114606B1 (en) 2014-04-07 2015-08-25 Palo Alto Research Center Incorporated Spatial light modulation method for determining droplet motion characteristics
US10900885B2 (en) 2014-12-19 2021-01-26 Captl Llc Flow cytometry using hydrodynamically planar flow
US10036698B2 (en) 2015-06-19 2018-07-31 Captl Llc Time-sequential cytometry
EP4230995A1 (en) * 2020-10-15 2023-08-23 ThinkCyte K.K. Flow cytometer, cell sorter, optical information generation method, and program

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4786165A (en) * 1986-07-10 1988-11-22 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Flow cytometry and apparatus therefor
US4906094A (en) * 1987-04-23 1990-03-06 Sumitomo Chemical Co. Ltd. Fine particle measuring method and system and a flow cell for use in the system
JPH01270644A (ja) * 1988-04-22 1989-10-27 Canon Inc 粒子解析装置
US4885473A (en) * 1988-04-29 1989-12-05 Shofner Engineering Associates, Inc. Method and apparatus for detecting particles in a fluid using a scanning beam
US4920275A (en) * 1988-12-30 1990-04-24 Canon Kabushiki Kaisha Particle measuring device with elliptically-shaped scanning beam
JPH02221843A (ja) * 1989-02-22 1990-09-04 Fuji Electric Co Ltd 微粒子測定装置
JPH03172736A (ja) * 1989-12-01 1991-07-26 Canon Inc 粒子解析装置
JPH06186155A (ja) * 1992-10-21 1994-07-08 Toa Medical Electronics Co Ltd 粒子分析装置
US5547849A (en) * 1993-02-17 1996-08-20 Biometric Imaging, Inc. Apparatus and method for volumetric capillary cytometry
US5684583A (en) * 1994-06-27 1997-11-04 The Furukawa Electric Co., Ltd. Apparatus for detecting foreign matter in a fluid
US5793485A (en) * 1995-03-20 1998-08-11 Sandia Corporation Resonant-cavity apparatus for cytometry or particle analysis
US7420659B1 (en) * 2000-06-02 2008-09-02 Honeywell Interantional Inc. Flow control system of a cartridge
US7064827B2 (en) * 2002-05-20 2006-06-20 Brown University Research Foundation Optical tracking and detection of particles by solid state energy sources
JP2004287939A (ja) * 2003-03-24 2004-10-14 Matsushita Electric Ind Co Ltd 分析装置
JP4756948B2 (ja) 2005-08-08 2011-08-24 ベイバイオサイエンス株式会社 フローサイトメータおよびフローサイトメトリ方法
US7804594B2 (en) * 2006-12-29 2010-09-28 Abbott Laboratories, Inc. Method and apparatus for rapidly counting and identifying biological particles in a flow stream

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102331396A (zh) * 2010-07-01 2012-01-25 索尼公司 微粒分析装置和方法
CN102331396B (zh) * 2010-07-01 2015-04-29 索尼公司 微粒分析装置和方法
CN105182804A (zh) * 2014-06-03 2015-12-23 Ap系统股份有限公司 光照射方法和设备

Also Published As

Publication number Publication date
EP2034292A1 (en) 2009-03-11
JP2009063308A (ja) 2009-03-26
US8203711B2 (en) 2012-06-19
EP2034292B1 (en) 2012-02-08
US20090059223A1 (en) 2009-03-05
CN101382500B (zh) 2012-05-09
JP4556975B2 (ja) 2010-10-06
KR20090024619A (ko) 2009-03-09
ATE545013T1 (de) 2012-02-15
KR101507041B1 (ko) 2015-03-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101382500B (zh) 光照射方法、光照射装置以及微粒分析装置
JP4509154B2 (ja) 光照射装置、微粒子解析装置及び光照射方法
AU2012265822B2 (en) Method and apparatus for quantitative analysis of samples by laser induced plasma (LIP)
EP2056090B1 (en) Fine particle measuring method, substrate for measurement, and measuring apparatus
EP1855102B1 (en) Fluorescence detecting device and fluorescence detecting method
US9372143B2 (en) Scanning image flow cytometer
US7767444B2 (en) Cell analysis using laser with external cavity
CA2701176C (en) Method and system to measure the concentration of constituent elements in an inhomogeneous material using libs
JP4384064B2 (ja) 強度変調したレーザ光による蛍光検出装置
JP2017535764A5 (zh)
JP2006266905A (ja) クロロフィル分析装置及びクロロフィルの分析方法
JP2009063462A (ja) 光学測定装置及び微粒子解析装置
EP3343204A1 (en) Spectrum inspecting apparatus
Huang et al. Confocal controlled LIBS microscopy with high spatial resolution and stability
CN108195824B (zh) 一种激光诱导击穿光谱检测系统
Streubel et al. Rapid Analysis of Geological Drill‐Cores with LIBS: On the use of laser‐induced breakdown spectroscopy
JP2022516217A (ja) 液滴中の不純物を検出および/または測定するための方法および装置
US20230221251A1 (en) Apparatus and method for fluorescence excitation and detection

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant