CN101371902A

CN101371902A - 天然活性糖元保降血糖、降血脂的作用

Info

Publication number: CN101371902A
Application number: CNA2008101203455A
Authority: CN
Inventors: 陈爱君; 倪崖; 李钦; 张信岳
Original assignee: Zhejiang Academy of Medical Sciences
Current assignee: Zhejiang Academy of Medical Sciences
Priority date: 2008-08-22
Filing date: 2008-08-22
Publication date: 2009-02-25

Abstract

本发明属于医药技术领域，特别是用于高血糖、高血脂等疾病的天然保健药品活性糖元保的作用。该天然活性糖元保由铁皮石斛、灵芝、黄精、人参果、蜂胶为主要原料组成，采用现代工艺从天然产物中提取分离具有降血糖、降血脂作用物质成份而制成的天然药物制剂。主要含有多糖、皂苷以及黄酮类成分。经动物实验表明具有增强免疫力的保健功能，得到的混合物在糖尿病、高血脂等疾病中具有降血糖、降血脂方面的作用。

Description

天然活性糖元保降血糖、降血脂的作用

技术领域

本发明属医药技术领域，特别是用于高血糖、高血脂等疾病的天然保健药品活性糖元保降血糖、降血脂的作用。

背景技术

高血脂、糖尿病等疾病已经成为人类健康的头号杀手，其发病率越来越高，发病的年龄越来越低。从天然产物中提取有效成分是创新药物的有效途径。很多国家和制药企业把降血糖、降血脂药物开发的重点逐步转向天然产物。

研究表明从天然产物中提取有效成分的创新药品具有增强免疫力，降血糖，降血脂之功效。

药理研究表明：

石斛中的多糖类成分具有增强机体免疫力的作用。

灵芝中的多糖药理活性广泛：能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，消除自由基，抑制肿瘤，抗辐射等。同时还具有降低血糖、血脂和升高胰岛素水平的作用。

黄精多糖具有调节糖代谢和治疗实验性糖尿病的作用。

蜂胶具有抗菌消炎，抗病毒，抗氧化，抗肿瘤，增强免疫，调节血脂，调节血糖等广泛的生物学作用。

发明内容

本发明的目的是通过现代化学和药理手段，从天然产物石斛、灵芝、黄精、人参果和蜂胶中提取分离出具有降血糖、降血脂作用的保健品—活性糖元保。克服现有技术存在的问题，使工艺简单方便，质量控制标准有针对性，得到的混合物在高血脂、糖尿病等疾病中具有降血脂、降血糖方面的作用。

活性糖元保系以铁皮石斛、灵芝、黄精、人参果、蜂胶为主要原料，采用现代工艺提取其有效成分而制成的天然药物制剂，主要含有多糖、皂苷以及黄酮类成分，研究表明具有增强免疫力的保健功能，在实际应用中具有一定的降糖降脂作用。

本发明通过动物试验对活性糖元保调节血脂方面的药效作用进行了研究。在动物体内降脂试验中，在食靡性高脂大鼠模型以及腹腔注射蛋黄乳所致的高脂小鼠模型中显示出一定的降血脂作用；在糖尿病小鼠和大鼠模型中显示出一定的降血糖作用和改善糖耐量作用；研究结果表明活性糖元保可用于制备治疗降血糖、降血脂作用的保健药物。

一、活性糖元保降血糖和降血脂功能的研究实验。

(一)活性糖元保降血糖功能：

1.活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响试验。

(1)方法

雌性ICR小鼠70只，体重18—22g，随机留取10只小鼠作为正常对照，其余小鼠尾静脉注射100mg/kg四氧嘧啶造模，一周后剪尾采血测定空腹血糖，从造模小鼠中筛选空腹血糖超过15mmol/L小鼠50只，分为模型对照组、盐酸二甲双胍0.3g/kg阳性对照组、活性糖元保1、2、4g/kg三剂量组，每组10只，分别灌胃给予相应药物，每天1次，连续8周，给药体积均为0.2ml/10g体重，正常对照组以及模型对照组给予等体积的蒸馏水，每周称体重1次，每2周剪尾取血测定空腹血糖1次。所得数据用平均值±标准差表示，并用t检验法比较各组间的统计学差异。

(2)结果(见表1、表2)

表1 活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠体重的影响(X±SD)

注：*p<0.05(与模型对照组比较)，#p<0.05(与正常对照组比较)

表2 活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响(X±SD)

注：*p<0.05(与模型对照组比较)，#p<0.05(与正常对照组比较)

研究表明：四氧嘧啶静脉注射造模后小鼠体重增长缓慢，从表1结果可见，活性糖元保4g/kg剂量给药2周后开始体重增长略高于模型对照组，但没有统计学差异，而阳性对照盐酸二甲双胍0.3g/kg剂量给药4周后体重增长也略高于模型对照组。另从表2结果可见，从给药2周后开始活性糖元保各剂量组血糖均低于模型对照组，且多与模型对照组存在统计学差异(p<0.05)，说明活性糖元保对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有一定的降糖作用。

2、活性糖元保对链脲霉素合并高脂饮食诱导的II型糖尿病大鼠的影响试验。

(1)方法

雌性SD大鼠50只，体重190-210g，腹腔注射链脲霉素30mg/kg，并给予足量高脂饲料造成2型糖尿病模型，2周后剪尾采血(预先禁食12h)，测定血糖含量，并按血糖水平将大鼠分为模型对照组、降糖灵200mg/kg阳性对照组、活性糖元保0.75、1.5、3.0g/kg三剂量组，每组10只，继续给予高脂饲料的同时灌胃给予相应药物，每天1次，给药体积均为1ml/100g体重，模型对照组给予等体积蒸馏水，给药后每2周称体重并采血测定空腹血糖1次，至给药后8周。所得数据用平均值±标准差表示，并用t检验法比较各组间的统计学差异。

(2)结果(见表3、表4)

表-3 活性糖元保对II型糖尿病大鼠体重的影响(X±SD)n＝10

表-4 活性糖元保对II型糖尿病大鼠血糖(Glu)水平的影响(X±SD)

注：n＝10，*P<0.05(与模型组比较)

研究结果表明：大鼠腹腔注射链脲霉素合并高脂饲料喂养后体重增长较慢，从表3可见，阳性对照组以及活性糖元保1.5、3g/kg剂量组给药后体重增长略快于模型对照组，但没有统计学差异；从表4结果可见，从给药2周后开始阳性对照组以及活性糖元保各剂量组血糖均低于模型对照组，其中3g/kg剂量组多与模型对照组存在统计学差异(p<0.05)，提示活性糖元保较高剂量对链脲霉素合并高脂饮食所致的II型糖尿病大鼠有一定的降糖作用。

3、活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影响试验。

(1)方法

雌性ICR小鼠，体重18—22g，尾静脉注射100mg/kg四氧嘧啶造模，一个月后筛选空腹血糖超过15mmol/L小鼠40只，分为对照组、活性糖元保1.0、2.0、4.0g/kg三剂量组，每组10只，禁食约5小时后，灌胃给药，给药体积均为0.2ml/10g，给药后30min灌胃给予10％淀粉溶液0.2ml/10g，给药前及给淀粉后0.5、1.0、1.5、2、3小时剪尾采血，测定血糖含量，计算曲线下面积。所得数据用平均值±标准差表示，并用t检验法比较各组间的统计学差异。

(2)结果(见表5—6及图2)

表5 活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影响(X±SD)

注：*p<0.05(与模型对照组比较)

表6 活性糖元保对正常小鼠糖耐量的影响(X±SD)

注：*p<0.05(与对照组比较)

研究表明：活性糖元保各剂量使四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠口服淀粉后各时段血糖值有不同程度的降低，其中1g/kg剂量组给淀粉后各时段、2g/kg剂量组给淀粉后0.5、2、3h时段、4g/kg剂量组给淀粉后0.5、1、2h时段血糖值明显低于模型对照组(p<0.05)，另外，各剂量均能明显减少曲线下面积，并呈现一定的剂量关系，高剂量并能推迟血糖达峰时间；上述结果提示活性糖元保对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠糖耐量有一定的改善作用(见表5及图2)。

(二)、活性糖元保降血脂功能：

1.活性糖元保对食糜性高脂大鼠血脂水平的影响试验。

(1)方法

SD大鼠60只，雌性，体重190-210g，除随机留取10只作为正常对照组给予常规饲料外，其余50只均给予足量高脂饲料，2周后剪尾采血(预先禁食12h)，测定血清TC含量，并按TC水平将高脂模型大鼠分为高脂模型组、非诺贝特0.1g/kg阳性对照组、活性糖元保0.75、1.5、3.0g(生药)/kg三剂量组，每组10只，继续给予高脂饲料的同时灌胃给予相应药物，每天1次，给药体积均为1ml/100g体重，高脂模型组以及正常对照组给予等体积蒸馏水，给药后每2周剪尾尖采血一次，测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)，至给药后8周，结果见表7—8。所得数据用平均值±标准差表示，并用t检验法比较各组间的统计学差异。

表7 活性糖元保对食靡性高脂大鼠血脂(TC)水平的影响(X±SD)

注：n＝10，*P<0.05(与高脂模型组比较)；^▲P<0.05(与正常对照组比较)

表8 活性糖元保对食靡性高脂大鼠血脂(TG)水平的影响(X±SD)

从表7—8结果可见，SD大鼠高脂饮食喂饲2周后血脂TC即明显高于正常对照，并随时间推移而进一步升高(几乎为正常的4倍)，但TG虽然也明显高于正常对照，但升高幅度不如TC明显；活性糖元保各剂量给药后能不同程度的抑制因高脂饮食所致的血脂升高，其中高剂量组给药4周后TC、TG均明显低于高脂模型组(p<0.05)，中剂量组给药4—6周时TC也明显低于高脂模型组，说明活性糖元保对食糜性高脂大鼠有一定的降脂作用。

2.活性糖元保对腹腔注射蛋黄乳所致高脂小鼠血脂的影响试验。

(1)方法

ICR雄性小鼠60只，体重18—22g，随机分为正常对照组、高脂模型组、非诺贝特0.15g/kg阳性对照组、活性糖元保1.0、2.0、4.0g(生药)/kg三剂量组，每组10只，分别按表3中所示剂量灌胃给予相应药物，每天1次，连续7天，给药体积均为0.2ml/10g体重，正常对照组和模型对照组给予等体积的蒸馏水，第7天给药后，除正常对照组外，其余各组小鼠均腹腔注射75％新鲜鸡蛋黄生理盐水乳液0.2ml/10g体重，给予蛋黄乳后10h，各组再给相应药物1次，末次给药后2h，股动脉取血，分离血清，以试剂盒方法测定TC和TG，结果见表9。所得数据用平均值±标准差表示，并用t检验法比较各组间的统计学差异。

表9 活性糖元保对蛋黄乳致高脂小鼠血脂的影响(X±SD)

注：*P<0.05(与高脂模型组比较)；^▲P<0.05(与正常对照组比较)

从表9结果可见，ICR小鼠腹腔注射蛋黄乳后血脂TC、TG均明显高于正常对照，升高幅度分别为正常组的3倍和4倍；活性糖元保各剂量预防给药7天后能不同程度的抑制腹腔注射蛋黄乳所致的小鼠血脂升高，其中高剂量组TC明显低于高脂模型组(p<0.05)，表明活性糖元保对腹腔注射蛋黄乳所致的高脂模型小鼠有一定降脂作用。

二、对本发明中的活性糖元保粗多糖进行含量测定作进一步说明。

实验：活性糖元保粗多糖的含量测定

1.实验仪器与试剂

(1)UV-2101PC紫外可见分光光度计(日本岛津)。

(2)电子天平：Sartorius，BP211D，德国。

(3)KQ—250超声波清洗仪(昆山淀山湖仪器厂)。

(4)试剂：硫酸、葡萄糖、乙醇均为分析纯。

(5)对照品：葡萄糖为分析纯，经105℃干燥恒重。

2.含量测定方法

2.1 标准曲线的制备

精密称取1050C干燥至恒重的葡萄糖对照品约50mg于50ml量瓶中，加水溶解并加至刻度。分别精密移取该溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0ml于50ml量瓶中，加水稀释并加至刻度。各取1.0ml于25ml具塞刻度试管中，分别加入5％苯酚溶液1.0ml，摇匀，加入5.0ml浓硫酸(加入硫酸时勿沿壁加入，应将移液管口悬于试管口，使浓硫酸垂直冲入液面)，立即摇匀。沸水浴加热10min，冰水浴冷却，放至室温，以蒸馏水同法做空白参比，在485nm处测吸光度(A)。以A为横坐标，浓度为纵坐标，绘制标准曲线，如图1所示，得线性方程Y＝177.18X-1.2019，r＝0.9983。线性范围：20—120ug/ml。

2.2 供试品溶液的制备

精密称取待测样品约200mg，置100ml量瓶中。按200mg加入100ml比例，计算并加入80％乙醇溶液，超声振荡2h，放置至室温，滤过，弃去滤液，用80％乙醇溶液洗涤残渣3次，将残渣连同滤纸一同移入原100ml量瓶中，加入沸水共约80ml，超声振荡1h，放置至室温定容，摇匀，滤过，取续滤液5.0ml于50ml量瓶中，加水定容，即得。

2.3 精密度试验：

分别精密吸取供试品溶液1.0ml于25ml具塞试管中，按2.1项下方法显色，测定A值，求得其RSD分别为0.65％(n＝5)。

2.4 显色稳定性

将供试品溶液完成显色后，2h内连续测定，得其A值为一定值不变。

2.5 重现性试验

取供试样品，分别精密称取5份，制备供试品溶液并测定多糖含量，结果多糖含量为65.2％。RSD分别1.69％(n＝5)

2.6 回收率试验：

取已知含量的供试品溶液，分别加入一定量的葡萄糖对照溶液，混匀后取1.0ml于25ml具塞试管中，依2.1项下方法显色，测定吸光度，计算回收率。结果样品的平均回收率及其RSD分别为100.3％，1.25％(n＝5)。

2.7 样品的测定

按上述2.1、2.2项下方法操作，测定了4个样品的多糖，结果见表10。

表10 活性糖元保的粗多糖含量测定结果(n＝3)

本发明的特点是通过现代化学和药理手段，从天然产物石斛、灵芝、黄精、人参果和蜂胶中采用现代工艺提取分离出具有降血糖、降血脂作用物质，主要含有多糖、皂苷以及黄酮类成分，克服现有技术存在的问题，使工艺简单方便，质量控制标准有针对性，得到的混合物具有增强免疫力的保健功能，在高血脂、糖尿病等疾病中具有降血脂、降血糖的作用。

附图说明

图1为葡萄糖标准曲线

图2为活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影响

具体实施方式

以下通过实施例进一步说明本发明。

实施例1：

活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响试验。

(1)方法

(2)结果(见表11、表12)

表11 活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠体重的影响(X±SD)

注：*p<0.05(与模型对照组比较)，#p<0.05(与正常对照组比较)

表12 活性糖元保对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响(X±SD)

注：*p<0.05(与模型对照组比较)，#p<0.05(与正常对照组比较)

研究表明：四氧嘧啶静脉注射造模后小鼠体重增长缓慢，从表11结果可见，活性糖元保4g/kg剂量给药2周后开始体重增长略高于模型对照组，但没有统计学差异，而阳性对照盐酸二甲双胍0.3g/kg剂量给药4周后体重增长也略高于模型对照组。另从表12结果可见，从给药2周后开始活性糖元保各剂量组血糖均低于模型对照组，且多与模型对照组存在统计学差异(p<0.05)，说明活性糖元保对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有一定的降糖作用。

实施例2：

活性糖元保对食糜性高脂大鼠血脂水平的影响试验。

(1)方法

SD大鼠60只，雌性，体重190-210g，除随机留取10只作为正常对照组给予常规饲料外，其余50只均给予足量高脂饲料，2周后剪尾采血(预先禁食12h)，测定血清TC含量，并按TC水平将高脂模型大鼠分为高脂模型组、非诺贝特0.1g/kg阳性对照组、活性糖元保0.75、1.5、3.0g(生药)/kg三剂量组，每组10只，继续给予高脂饲料的同时灌胃给予相应药物，每天1次，给药体积均为1ml/100g体重，高脂模型组以及正常对照组给予等体积蒸馏水，给药后每2周剪尾尖采血一次，测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)，至给药后8周，结果见表13—14。所得数据用平均值±标准差表示，并用t检验法比较各组间的统计学差异。

表13 活性糖元保对食靡性高脂大鼠血脂(TC)水平的影响(X±SD)

表14 活性糖元保对食靡性高脂大鼠血脂(TG)水平的影响(X±SD)

从表13—14结果可见，SD大鼠高脂饮食喂饲2周后血脂TC即明显高于正常对照，并随时间推移而进一步升高(几乎为正常的4倍)，但TG虽然也明显高于正常对照，但升高幅度不如TC明显；活性糖元保各剂量给药后能不同程度的抑制因高脂饮食所致的血脂升高，其中高剂量组给药4周后TC、TG均明显低于高脂模型组(p<0.05)，中剂量组给药4—6周时TC也明显低于高脂模型组，说明活性糖元保对食糜性高脂大鼠有一定的降脂作用。

Claims

1.一种天然保健药品活性糖元保的作用，其特征在于以铁皮石斛、灵芝、黄精、人参果、蜂胶为主要原料，从天然产物中提取分离具有降血糖、降血脂作用物质成份，经动物实验表明具有增强免疫力的保健功能，用于降血糖、降血脂的天然活性糖元保的作用。

2.根据权利要求1所述的天然活性糖元保的作用，其特征在于主要含有多糖、皂苷及黄酮类成分。

3.根据权利要求1所述的天然活性糖元保的作用，其特征在于该天然保健药品用于糖尿病、高血脂等疾病降血糖、降血脂的作用。