CN101352148A - 一种铁皮石斛芽的生根法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种铁皮石斛芽的生根法，依次包括以下步骤：1)将生根培养液倒入培养容器内，向培养容器内添加滤纸桥或脱脂棉，直至膨胀后的滤纸桥或脱脂棉与生根培养液齐平；然后密封培养容器，进行高温灭菌；2)割取2.5～6.0cm高的单株的铁皮石斛芽，并将高度差为0～±0.5cm的铁皮石斛芽接种到同一培养容器内进行培养；3)待上述培养容器内的每个芽上都长出每条均长于2cm的至少3条根时，得试管苗，停止培养。采用本发明的铁皮石斛芽的生根法，能降低生产成本，还能提高试管苗的移栽存活率。

Description

一种铁皮石斛芽的生根法
技术领域
本发明涉及一种铁皮石斛芽的生根法。
背景技术
利用植物组织培养技术快速繁殖铁皮石斛试管苗，是目前铁皮石斛大规模生产的普遍方法。目前在铁皮石斛试管苗的繁殖体系中，生根培养基往往采用固体培养基，琼脂或卡拉胶一般是固体培养基中最常用的凝固剂。固体培养基的应用，不但增加了生产成本(据计算培养基中琼脂的成本占50％左右)；另外，在2个月左右的生根周期中，由于是固体培养基，因此芽只能吸收局部营养成分，造成营养成分供应不充分或浪费现象，而且在取苗以及清洗根部琼脂等步骤时容易对根部苗体造成损伤，加剧病虫害的侵入，进而使移栽存活率下降，导致提高了生产成本，因此严重影响并制约着该产业的高效持续发展。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能降低生产成本并能提高移栽存活率的铁皮石斛芽的生根法。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种铁皮石斛芽的生根法，依次进行以下步骤：
1)、将生根培养液倒入培养容器内，向培养容器内添加滤纸桥或脱脂棉，直至膨胀后的滤纸桥或脱脂棉与生根培养液齐平；然后密封培养容器，进行高温灭菌；灭菌条件为：灭菌压力为0.09～0.11MPa，温度为119～123℃，灭菌时间为15min～30min；
2)、割取2.5～6.0cm高的单株的铁皮石斛芽，并将高度差为0～±0.5cm的铁皮石斛芽接种到同一培养容器内进行培养，培养条件为：16小时光照，光照强度20～40μmol m-2.s-1，温度为26～28℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养交替进行；
3)、待上述培养容器内的每个芽上都长出每条均长于2cm的至少3条根时，得试管苗；停止培养，将上述试管苗移出培养容器。
作为本发明的铁皮石斛芽的生根法的改进：步骤1)中的生根培养液为：1/2MS基本培养基+0.01～0.5mg/l NAA+15～20g/l糖，pH为5.0～5.5。
作为本发明的铁皮石斛芽的生根法的改进：步骤1)中的灭菌条件为：灭菌压力为0.1MPa，温度为121℃。
在本发明的铁皮石斛芽的生根法中：
1、步骤1)中一般选用3cm高的滤纸桥、或者选用医用脱脂棉。
滤纸桥或脱脂棉是用于固定下述步骤中的芽。
2、步骤1)中的生根培养液的制作方法具体如下：以1/2MS基本培养基(即溶液中所有物质的含量为MS基本培养基的一半)作为基础，分别加入NAA(萘乙酸)和糖，均匀混合，每1L的1/2MS基本培养基加入0.01～0.5mgNAA和15～20g糖；再利用1mol/L的KOH或1mol/L的HCl调节pH为5.0～5.5。
3、步骤2)中的培养时间(生根周期)一般为45天左右。
本发明的铁皮石斛芽的生根法，属于一种诱导铁皮石斛芽生根的组织培养方法。在本发明的方法中，将生根培养基配置成液体培养基，有助于提高芽对培养基内营养成分的充分吸收和省去将所得的试管苗移栽时清洗根部琼脂等工序；这样不但可以降低培养基的成本，而且可以保证比相应固体培养基(即为与生根培养液内的所有营养成分都相等、加了琼脂后所成的固体培养基)更快诱导出一定量的根，还可以保证试管苗出瓶时减少对其根部的伤害，提高了试管苗的移栽存活率。脱脂棉经清洗、消毒等处理后，还能重复利用；因此可以进一步降低生产成本。
为了充分证明本发明方法的创造性，发明人作了如下的对比实验：
将本发明的步骤1)改成下述内容：
在相同的培养容器内放置与生根培养液内的所有营养成分都等量的固体培养基，然后进行高温灭菌；此时固体培养基在培养容器内的高度大致＝本发明添加滤纸桥/脱脂棉后的生根培养液的高度。
固体培养基的制作方法如下：
以1/2MS基本培养基作为基础，分别加入NAA、糖和琼脂，均匀混合，每1L的1/2MS基本培养基加入0.01～0.5mg NAA、15～20g糖和6～9g琼脂；再利用1mol/L的KOH或1mol/L的HCl调节pH为5.0～5.5；得固体培养基。
其余步骤和内容完全同本发明(即所选用铁皮石斛芽的规格和数量完全等同于本发明)。
然后将对比实验所得的试管苗与本发明所得的试管苗进行相同的后期管理。
结果如下：该对比实验的生根时间比本发明要多15天(对比实验需60天)。在相同的后期管理的前提下，对比实验所得试管苗的移栽存活率比本发明要低10％。
从上述2者的对比可以看出：采用本发明的方法，铁皮石斛生根培养液的成本降低了50％左右，生根周期减少了15天左右，移栽时省去了清洗根部琼脂的工序，培育的试管苗移栽存活率比相应固体培养基提高10％。所以，本发明的铁皮石斛芽的生根法，是一种低成本、快速提供优质铁皮石斛试管苗及有助于提高试管苗移栽成活率的方法，本发明的方法能促进该产业的高效持续发展。
具体实施方式
实施例1、一种铁皮石斛芽的生根法，依次进行以下步骤：
1)、制作生根培养液：
以1/2MS基本培养基(即溶液中所有物质的含量为MS基本培养基的一半)作为基础，分别加入NAA(萘乙酸)和糖，均匀混合，每1L的1/2MS基本培养基加入0.01～0.5mg NAA和15～20g糖；再利用1mol/L的KOH或1mol/L的HCl调节pH为5.0～5.5。
2)、将上述生根培养液倒入培养容器(呈圆桶形，容积为350ml，高度为12cm)内，向培养容器内添加医用脱脂棉，直至膨胀后的医用脱脂棉与生根培养液齐平；此时带有医用脱脂棉的生根培养液的高度为3cm左右。然后，密封该培养容器，进行高温灭菌；灭菌条件为：灭菌压力为0.1MPa，温度为121℃，灭菌时间为15min～30min。
按照上述方法制作若干个培养容器，供后续步骤使用。
3)、割取2.5cm～6.0cm高的单株的铁皮石斛芽(即所得的铁皮石斛芽为单株)，并将高度差为0～±0.5cm的铁皮石斛芽接种到同一培养容器内进行培养。例如将10株高度为5±0.5cm的铁皮石斛芽接种到上述步骤2)所得的同一个培养容器内进行培养。培养条件为：16小时光照，光照强度20～40μmolm-2.s-1，温度为26～28℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养交替进行。
4)、待容器中的每个芽上都长出每条均长于2cm的至少3条根时，得试管苗；停止培养，将上述试管苗移出培养容器。
上述铁皮石斛芽所需的培养时间(即生根时间)为45天。
然后按照目前的现有技术对其进行培育即可。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的一个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

Claims (3)

1、一种铁皮石斛芽的生根法，其特征是依次包括以下步骤：
1)、将生根培养液倒入培养容器内，向培养容器内添加滤纸桥或脱脂棉，直至膨胀后的滤纸桥或脱脂棉与生根培养液齐平；然后密封培养容器，进行高温灭菌；灭菌条件为：灭菌压力为0.09～0.11MPa，温度为119～123℃，灭菌时间为15min～30min；
2)、割取2.5～6.0cm高的单株的铁皮石斛芽，并将高度差为0～±0.5cm的铁皮石斛芽接种到同一培养容器内进行培养，培养条件为：16小时光照，光照强度20～40μmol m-2.s-1，温度为26～28℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养交替进行；
3)、待上述培养容器内的每个芽上都长出每条均长于2cm的至少3条根时，得试管苗；停止培养，将上述试管苗移出培养容器。
2、根据权利要求1所述的铁皮石斛芽的生根法，其特征是：所述步骤1)中的生根培养液为：1/2MS基本培养基+0.01～0.5mg/l NAA+15～20g/l糖，pH为5.0～5.5。
3、根据权利要求1或2所述的铁皮石斛芽的生根法，其特征是：所述步骤1)中的灭菌条件为：灭菌压力为0.1MPa，温度为121℃。
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Cited By (5)

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Cited By (6)

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