CN101307043A

CN101307043A - 6,8-二羟甲基白杨素和6,8-二羟甲基醚白杨素及其制备方法与药物用途

Info

Publication number: CN101307043A
Application number: CNA200710017327XA
Authority: CN
Inventors: 李发荣; 张尊听; 陈莉莉; 吴臻; 王喆之
Original assignee: Shaanxi Normal University
Current assignee: Shaanxi Normal University
Priority date: 2007-01-31
Filing date: 2007-01-31
Publication date: 2008-11-19
Anticipated expiration: 2027-01-31
Also published as: CN101307043B

Abstract

本发明了提供了6，8－二羟甲基白杨素和6，8－二羟甲基醚白杨素及其制备方法。制备工艺包括：以白杨素为先导化合物与甲醛和氢氧化钾在甲醇中反应得到了6，8－二羟甲基白杨素。再以6，8－二羟甲基白杨素为中间体，在盐酸存在下分别与甲醇、乙醇、正丁醇反应合成了三种6，8－二羟甲基醚白杨素－5，7－二羟基－6，8－二(甲氧基甲基)黄酮、5，7－二羟基－6，8－二(乙氧基甲基)黄酮、5，7－二羟基－6，8－二(丁氧基甲基)黄酮。通过重结晶可得到本发明的化合物纯品。还提供了一种治疗心、脑血管疾病的药物和组合物，其中含有治疗有效量的6，8－二羟甲基白杨素或6，8－二羟甲基醚白杨素和药学上可接受的载体。

Description

6，8-二羟甲基白杨素和6，8-二羟甲基醚白杨素及其制备方法与药物用途

技术领域

本发明属于杂环化合物技术领域，具体涉及到杂环不氢化的含六节环，有一个氧原子作为仅有环杂原子，与其他环稠合的杂环化合物。

背景技术

黄酮类化合物是许多常用中草药的有效成分，具有广泛的药理活性，如：抗心脑缺血、抗心律失常、抗自由基、镇痛、保护肝脏、抗病毒、抗肿瘤等药理作用。它们在体内副作用较小，但作用比较弱。白杨素(Chrysin)，又名白杨黄素，广泛存在于自然界且生物活性较高，具有显著的抗氧化、抗病毒、抗菌、抗过敏、抗癌、抗高血压、抗糖尿病、解痉、舒张血管等多种药理作用。从上世纪80年代起，人们便开始了白杨素化学合成的研究。近年来，研究热点集中在白杨素衍生物合成领域，以获得疗效更好的新型药物。为此，本发明以白杨素为先导化合物与甲醛和氢氧化钾在甲醇中反应得到了白杨素羟甲基化产物：5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮即6，8-二羟甲基白杨素。再以5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮为中间体合成了6，8-二羟甲基醚白杨素——5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮、5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮、5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮。

发明内容

本发明的目的在于提供一类具有药效的新化合物：5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮、5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮、5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮和5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮。

本发明的进一步目的在于提供以白杨素为前体物质，合成6，8-二羟甲基白杨素和6，8-二羟甲基醚白杨素——5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮、5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮和5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮的方法。

本发明的第三个目的在于提供一种用于治疗心、脑血管疾病的药物和组合物。

本发明的第四个目的在于提供一种上述化合物和组合物在制备治疗心、脑血管疾病的药物中的应用。

本发明5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮、5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮、5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮和5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮化学结构分别用下述式(1)、式(2)、式(3)和式(4)表示：

式(1)：R＝H 5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮

式(2)：R＝CH₃5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮

式(3)：R＝CH₃CH₂5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮

式(4)：R＝n-C₄H₉5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮

采用化学反应制备本发明的式(1)的方法如下：

在反应釜中加入下式(5)白杨素、与白杨素等质量的固体KOH和白杨素15～30倍质量的甲醇溶剂，搅拌下使白杨素完全溶解在溶剂中，再加入甲醛，使白杨素与甲醛进行化学反应，所用白杨素与甲醛的摩尔比为1∶2～1∶10，用调温装置使反应液的温度为0～60℃，反应1小时～100小时，将反应后的混合物放置至室温，加入5％～20％的HCl酸化至pH＝2～5，倾入反应液3～8倍体积水中，有淡黄色沉淀析出，过滤得式(1)粗品，将粗品用甲醇重结晶使其纯化，得到式(1)纯品。

式(5)白杨素式(1)

以式(1)为先导化合物制备本发明式(2)的方法如下：

反应釜中加入式(1)和式(1)20～50倍质量的甲醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶2～1∶20的盐酸，用调温装置使反应液的温度为20～80℃使其反应，反应1～10小时，将反应后的混合物倾入反应液3～6倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(2)粗品，将粗品用甲醇重结晶使其纯化，得到式(2)的纯品。

式(2)

以式(1)为先导化合物制备本发明的式(3)的方法如下：

反应釜中加入式(1)和式(1)20～50倍质量的乙醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶2～1∶20的盐酸，用调温装置使反应液的温度为20～80℃使其反应，反应1～10小时，将反应后的混合物倾入反应液3～6倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(2)粗品，将粗品用乙醇重结晶使其纯化，得到式(2)的纯品。

式(3)

以式(1)为先导化合物制备本发明的式(4)的方法如下：

反应釜中加入式(1)和式(1)10～40倍质量的正丁醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶2～1∶20的盐酸，用调温装置使反应液的温度为20～120℃使其反应，反应1～10小时，将反应后的混合物倾入反应液3～6倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(4)粗品，将粗品用混合溶剂(乙醇∶氯仿＝2∶1)重结晶使其纯化，得到式(4)的纯品。

式(4)

本发明式(1)的制备方法中，化学反应所用甲醛可以是多聚甲醛或10％～37％的甲醛水溶液，化学反应的优选温度为5～30℃，化学反应的优选时间为15～50小时；本发明式(2)的制备方法中，化学反应所用的盐酸浓度为15％～38％，化学反应的优选温度为30～65℃，化学反应的优选时间为2～5小时；本发明式(3)的制备方法中，化学反应所用的盐酸浓度为15％～38％，化学反应的优选温度为40～78℃，化学反应的优选时间为2～5小时；本发明式(4)的制备方法中，化学反应所用的盐酸浓度为15％～38％，化学反应的优选温度为50～100℃，化学反应的优选时间为3～8小时。

本发明式(1)的制备方法中，化学反应的最佳温度为15℃，化学反应的最佳时间为40小时；式(2)的制备方法中，化学反应的最佳温度为40℃，化学反应的最佳时间为3小时；式(3)的制备方法中，化学反应的最佳温度为50℃，化学反应的最佳时间为4小时；式(4)的制备方法中，化学反应的最佳温度为70℃，化学反应的最佳时间为5小时。

本发明的药物组合物为含有治疗有效组分为上述式(1)或(2)或(3)或(4)以及含有一种或多种药学上可接受的载体。

本发明的化合物和药物组合物可用于制备治疗心、脑血管疾病的药物。

本发明有效成分6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素用于制备治疗心、脑血管疾病的药物，以常规药用制剂的形式来使用；所述的常规药用制剂含作为活性成分的6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素，该活性成分在制剂中与药学上可接受的载体如适宜于胃肠内和胃肠外给药的有机或无机的固体或液体赋形剂混合。该药用制剂可以是固体形式如片剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂；也可以是液体形式如糖浆剂、乳剂等。

上述制剂中可含有辅助物质、稳定剂，润湿剂和其它常用的添加剂，如乳糖、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、硬脂酸镁、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明胶、琼脂、果胶、花生油、橄榄油、乙二醇、葡萄糖等。

上述制剂可按照各种制剂常规的制备工艺制成。

本发明的药物组合物含有质量比为0.1～99.5％的活性成分，优选含有质量比为5～50％的活性成分。

本发明的活性成分6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素制成各种剂型的口服药物，成人口服，药物中6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素的剂量应为每天150mg，一日三次，每次药物中6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素的含量为50mg，14天为一个疗程，治疗2～3个疗程。儿童用药酌情减量。

发明人将本发明的活性成分6，8-二羟甲基白杨素和6，8-二羟甲基醚白杨素进行了相关的药效试验，试验结果表明本发明的活性成分6，8-二羟甲基白杨素和6，8-二羟甲基醚白杨素对小白鼠具有较好的抗缺氧作用，若将6，8-二羟甲基白杨素和6，8-二羟甲基醚白杨素用于临床试验，预期将会有较好的治疗效果。本发明的制备方法，具有工艺简便，所用的设备简单、产品的收率高和生产成本低等优点。

附图说明

图1是本发明5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮的红外光谱图。

图2是本发明5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮的氢核磁共振图。

图3是本发明5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮的红外光谱图。

图4是本发明5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮的氢核磁共振图。

图5是本发明5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮的红外光谱图。

图6是本发明5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮的氢核磁共振图。

图7是本发明5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮的红外光谱图。

图8是本发明5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮的氢核磁共振图。

图9是本发明5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮的碳核磁共振谱图。

在图1、图3、图5和图7中，横坐标为波数，纵坐标为吸收率。在图2、图4、图6、图8和图9中，横坐标为化学位移，单位为ppm，纵坐标为峰高度。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明，但本发明不限于这些实施例。

一、式(1)制备实施例

实施例1

在本实施例中，在反应釜中加入白杨素、与白杨素等质量的固体KOH和白杨素20倍质量的甲醇溶剂，搅拌下使白杨素完全溶解在溶剂中，再加入37％的甲醛水溶液，使白杨素与甲醛进行化学反应，所用白杨素与甲醛的摩尔比为1∶5，用调温装置使反应液的温度为15℃，反应40小时后，加入10％的HCl酸化至pH＝4，倾入反应液5倍体积水中，有淡黄色沉淀析出，过滤得式(1)粗品，将粗品用甲醇重结晶使其纯化，得到式(1)纯品(产率85％)。采用本实施例制备的式(1)，经测试，其理化性能如下：

淡黄色针状晶体，熔点为214℃。

参见图1，本实施例的式(1)分子结构经红外光谱仪测试结果如下：

IRv(cm^-1；KBr)：3432，2889，2272，1648，1587，1444，1367，1243，1125，1090，971，845，762，682，579。

参见图2，本实施例的5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮的H用核磁共振仪测试结果如下：

¹H NMR[DSMO/TMS，δ(ppm)]：13.46(s，1H)，10.19(s，1H)，8.10(m，2H)，7.63(m，3H)，7.05(s，1H)，4.70(s，2H)，4.50(s，2H)。

实施例2

在本实施例中，在反应釜中加入白杨素、与白杨素等质量的固体KOH和白杨素15倍质量的甲醇溶剂，搅拌下使白杨素完全溶解在溶剂中，再加入多聚甲醛，使白杨素与多聚甲醛进行化学反应，所用白杨素与多聚甲醛的摩尔比为1∶3，用调温装置使反应液的温度为50℃，反应10小时后，加入5％的HCl酸化至pH＝5，倾入反应液7倍体积水中，有淡黄色沉淀析出，其它工艺过程与实施例1相同。

实施例3

在本实施例中，在反应釜中加入白杨素、与白杨素等质量的固体KOH和白杨素25倍质量的甲醇溶剂，搅拌下使白杨素完全溶解在溶剂中，再加入15％的甲醛水溶液，使白杨素与甲醛进行化学反应，所用白杨素与甲醛的摩尔比为1∶9，用调温装置使反应液的温度为5℃，反应70小时后，加入15％的HCl酸化至pH＝3，倾入反应液5倍体积水中，有淡黄色沉淀析出，其它工艺过程与实施例1相同。

实施例4

在本实施例中，在反应釜中加入白杨素、与白杨素等质量的固体KOH和白杨素30倍质量的甲醇溶剂，搅拌下使白杨素完全溶解在溶剂中，再加入20％的甲醛水溶液，使白杨素与甲醛进行化学反应，所用白杨素与甲醛的摩尔比为1∶6，用调温装置使反应液的温度为40℃，反应20小时后，加入8％的HCl酸化至pH＝5，倾入反应液4倍体积水中，有淡黄色沉淀析出，其它工艺过程与实施例1相同。

实施例5

在本实施例中，在反应釜中加入白杨素、与白杨素等质量的固体KOH和白杨素18倍质量的甲醇溶剂，搅拌下使白杨素完全溶解在溶剂中，再加入30％的甲醛水溶液，使白杨素与甲醛进行化学反应，所用白杨素与甲醛的摩尔比为1∶7，用调温装置使反应液的温度为30℃，反应35小时后，加入12％的HCl酸化至pH＝4，倾入反应液6倍体积水中，有淡黄色沉淀析出，其它工艺过程与实施例1相同。

二、式(2)制备实施例

实施例6

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)30倍质量的甲醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶8的37％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为40℃使其反应，反应4小时后，将反应液倾入反应液4倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(2)粗品，将粗品用甲醇重结晶使其纯化，得到式(2)的纯品(产率92％)。

采用本实例制备的式(2)，经测试，其理化性能如下：

淡黄色针状晶体，熔点为186℃。

参见图3，本实施例的式(2)的分子结构经红外光谱仪测试结果如下：

IRv(cm^-1；KBr)：3437，3119，2884，1648，1588，1443，1336，1233，1090，1026，970，934，847，760，682，578。

参见图4，本实施例的5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮的H用核磁共振仪测试结果如下：

¹H NMR[CDCl₃/TMS，δ(ppm)]：13.26(s，1H)，9.32(s，1H)，7.90(m，2H)，7.55(m，3H)，6.68(s，1H)，4.90(s，2H)，4.82(s，2H)，3.51(s，3H)，3.49(s，3H)。

实施例7

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)25倍质量的甲醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶16的20％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为30℃使其反应，反应8小时后，将反应液倾入反应液6倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例6相同。

实施例8

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)35倍质量的甲醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶12的25％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为70℃使其反应，反应1小时后，将反应液倾入反应液5倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例6相同。

实施例9

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)45倍质量的甲醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶10的30％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为50℃使其反应，反应2小时后，将反应液倾入反应液3倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例6相同。

三、式(3)制备实施例

实施例10

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)25倍质量的乙醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶10的37％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为50℃使其反应，反应4小时，将反应后的混合物倾入反应液4倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(3)粗品，将粗品用乙醇重结晶使其纯化，得到式(3)的纯品(产率90％)。

采用本实例制备的式(3)，经测试，其理化性能如下：

黄色针状晶体，熔点为164℃。

参见图5，本实施例的式(3)的分子结构经红外光谱仪测试结果如下：

IRv(cm^-1；KBr)：3451，3244，2976，1647，1586，1448，1374，1305，1245，1096，1018，855，766，685，580。

参见图6，本实施例的5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮的H用核磁共振仪测试结果如下：

¹H NMR[CDCl₃/TMS，δ(ppm)]：13.23(s，1H)，9.59(s，1H)，7.90(m，2H)，7.54(m，3H)，6.68(s，1H)，4.88(m，4H)，3.70(m，4H)，1.31(m，6H)。

实施例11

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)40倍质量的乙醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶12的15％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为30℃使其反应，反应8小时，将反应后的混合物倾入反应液5倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例10相同。

实施例12

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)30倍质量的乙醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶6的32％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为40℃使其反应，反应5小时，将反应后的混合物倾入反应液6倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例10相同。

实施例13

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)50倍质量的乙醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶18的23％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为70℃使其反应，反应2小时，将反应后的混合物倾入反应液3倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例10相同。

四、式(4)制备实施例

实施例14

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)20倍质量的正丁醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶10的37％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为70℃使其反应，反应5小时，将反应后的混合物倾入反应液5倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(4)粗品，将粗品用混合溶剂(乙醇∶氯仿＝2∶1)重结晶使其纯化，得到式(4)的纯品(产率83％)。

采用本实例制备的式(4)，经测试，其理化性能如下：

黄色针状晶体，熔点为125℃。

参见图7，本实施例的式(4)的分子结构经红外光谱仪测试结果如下：

IRv(cm^-1；KBr)：3456，3283，2975，2879，1645，1584，1448，1370，1238，1101，1019，853，767，685，581。

参见图8，本实施例的式(4)的H用核磁共振仪测试结果如下：

¹H NMR[DMSO/TMS，δ(ppm)]：13.40(s，1H)，10.15(s，1H)，8.09(m，2H)，7.62(m，3H)，7.05(s，1H)，4.73(s，1H)，4.53(s，2H)，3.50(m，12H)，1.11(m，6H)。

参见图9，本实施例的式(4)的¹³C核磁共振仪测试结果如下：

¹³C NMR[CDCl₃/TMS，δ(ppm)]：182.8，163.7，162.6，158.7，131.8，131.6，129.1，126.3，105.9，105.6，104.5，103.2，77.4，77.0，76.6，71.7，71.5，70.9，65.4，61.6，58.1，29.4，29.2，28.4，28.2，22.5，14.0。

实施例15

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)30倍质量的正丁醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶6的30％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为40℃使其反应，反应8小时，将反应后的混合物倾入反应液4倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例14相同。

实施例16

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)10倍质量的正丁醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶18的20％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为110℃使其反应，反应1小时，将反应后的混合物倾入反应液6倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例14相同。

实施例17

在本实施例中，反应釜中加入式(1)和式(1)35倍质量的正丁醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶15的25％的盐酸，用调温装置使反应液的温度为90℃使其反应，反应4小时，将反应后的混合物倾入反应液3倍体积的蒸馏水中，其它工艺过程与实施例14相同。

五、6，8-二羟甲基白杨素和6，8-二羟甲基醚白杨素制剂实施例

实施例18

以制备本发明6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素片剂1000片为例所用的原料和辅料配比如下：

6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素 50g

淀粉 335g

硬脂酸镁 15g

采用常规片剂的制备工艺制成，每片重0.4g，每片6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素的含量为50mg。用法：成人一日三次，每次1片口服，儿童酌情减量。

实施例19

以制备本发明6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素颗粒剂1000袋为例所用的原料和辅料配比如下：

6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素 50g

蔗糖 2800g

淀粉 150g

采用常规散剂的制备工艺制成，每袋重3g，每片6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素的含量为50mg。用法：成人一日三次，每次1袋口服，儿童酌情减量。

实施例20

以制备本发明产品胶囊剂1000粒为例所用原料和辅料及其配比如下：

6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素 50g

玉米淀粉 40g

其制备工艺按制剂学胶囊剂的常规工艺进行，每粒胶囊含6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素50mg。每次片，一日三次，小儿酌减。

实施例21

以制备本发明产品糖浆剂1000mL为例所用原料和辅料及其配比如下：

6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素 5g

蔗糖 600g

苯甲酸 1g

蒸馏水加至1000ml

其制备工艺按制剂学糖浆剂的常规工艺进行，1mL含6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素5mg。每次10mL，一日三次，小儿酌减。

发明人将本发明的有效成分6，8-二羟甲基白杨素或6，8-二羟甲基醚白杨素进行了药效试验，例举下列试验内容及其试验结果，证明用本发明制备的药物治疗心、脑血管疾病的有效性。

1、实验动物

ICR小鼠由陕西省中医药研究院实验动物中心提供，雌雄各半，体重20～22g，鼠龄6-7周，动物合格证为医动字08-25号。

2、实验方法

2.1动物分组及处理

实验动物随机分为空白对照组，阳性药对照组，5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮(以下用A表示)、5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮(以下用B表示)、5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮(以下用C表示)及5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮(以下用D表示)各药物分别分为大剂量组和小剂量组共十组，每组12只小鼠。空白组每日灌胃给予等体积溶媒(羧甲基纤维素钠悬浊液)，A、B、C、D各给药组的大剂量和小剂量分别为90mg·kg^-1·d^-1和30mg·kg^-1·d^-1，灌胃给药，连续给药7天后处理动物。

2.2药物处理

A、B、C、D阳性药均用0.5％羧甲基纤维素钠配制成相应浓度的悬浊液或溶液。

2.2.1急性脑缺氧试验

按2.1所述方法分组，以尼莫地平为阳性药，剂量为30mg·kg^-1·d^-1，最后一次给药1h后，自小鼠耳后部迅速断头，记录小鼠从断头开始到最后一次喘气时间。

2.2.2化学性缺氧试验

按2.1所述方法分组，以尼莫地平为阳性药，剂量为30mg·kg^-1·d^-1，最后一次给药1h后，各组均腹腔注射亚硝酸钠200mg·kg^-1，立即开始记录小鼠存活时间。

2.2.3心肌特异性缺氧试验

在2.1所述方法分组基础上，再增加模型对照组，空白对照组与模型对照组皆给予等体积溶媒，以盐酸普萘洛尔为阳性药，剂量为30mg·kg^-1·d^-1，最后一次给药40min后，除空白对照组外，其余各组均腹腔注射给予10mg·kg^-1的异丙肾上腺素，给予异丙肾上腺素15min后，将各组小鼠置于体积为200mL装有10g钠石灰的广口平中，密封，记录小鼠死亡时间。

2.2.4数据处理

计量资料均以x±s表示，两样本比较采用t检验。

3、试验结果

3.1受试药物对急性脑缺血小鼠的作用

如表1所示，阳性药与各受试药物均可以延长延长小鼠断头后喘息时间，与空白对照组相比较，除受试药物D的小剂量组以外，阳性药及其他受试药物大、小剂量组均可以延长小鼠断头后喘息时间，经t检验，数据差别有显著意义。

3.2受试药物对化学性缺氧小鼠的作用

如表2所示，在腹腔注射亚硝酸钠以后，阳性药及各受试药物组小鼠的存活时间均有不同程度地延长，与空白对照组相比较，经t检验，阳性药组，受试药物A大、小剂量组，受试药物B大剂量组的数据差别有显著意义，其余各组与空白对照组相比较，数据差别无显著意义。

表1受试药物对急性脑缺血小鼠的作用(x±s，n＝12)

注：^*表示与空白对照组相比^*P＜0.05.^**P＜0.01，^#表示与空白对照组相比，p＞0.05

3.3受试药物对心肌特异性缺氧小鼠的作用

如表3所示，阳性药及各受试药物组小鼠均可以延长小鼠缺氧致死时间，与模型对照组相比较，经t检验，阳性药组、各受试药物大、小剂量组的数据差别均有显著意义。

表2受试药物对化学性缺氧小鼠的作用(x±s，n＝12)

4、试验结论

本试验可以看出，6，8-二羟甲基白杨素和6，8-二羟甲基醚白杨素对于各种缺氧导致的动物死亡时间均有不同程度地延长作用，其作用效果显示较明显的量效关系，其中5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮的抗缺氧作用效果相对较好，试验数据显示，对于化学性缺氧动物模型来说，仅5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮及5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮显示较明显的抗缺氧作用，而5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮及5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮对亚硝酸钠中毒致缺氧动物死亡时间虽然有一定程度延长，但数据经统计处理，其差异无显著意义，6，8-二羟甲基醚白杨素侧链的长度是否是该类化合物的抗缺氧效果中的活性位点尚需进一步的研究。

本试验可以看出，6，8-二羟甲基白杨素和6，8-二羟甲基醚白杨素均有一定的抗缺氧作用。

表3受试药物对心肌特异性缺氧小鼠的作用(x±s，n＝12)

注：^*表示与模型对照组相比^*P＜0.05.^**P＜0.01，

Claims

1.下述式(1)、式(2)、式(3)和式(4)的化合物。

式(1)：R＝H 5，7-二羟基-6，8-二羟甲基黄酮

式(2)：R＝CH₃ 5，7-二羟基-6，8-二(甲氧基甲基)黄酮

式(3)：R＝CH₃CH₂ 5，7-二羟基-6，8-二(乙氧基甲基)黄酮

式(4)：R＝n-C₄H₉ 5，7-二羟基-6，8-二(丁氧基甲基)黄酮

2.一种权利要求1中式(1)、式(2)、式(3)和式(4)化合物的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)在反应釜中加入下式(5)白杨素、与白杨素等质量的固体KOH和白杨素15～30倍质量的甲醇溶剂，搅拌下使白杨素完全溶解在溶剂中，再加入甲醛，使白杨素与甲醛进行化学反应，所用白杨素与甲醛的摩尔比为1∶2～1∶10，用调温装置使反应液的温度为0～60℃，反应1小时～100小时，将反应后的混合物放置至室温，加入5％～20％的HCl酸化至pH＝2～5，倾入反应液3～8倍体积水中，有淡黄色沉淀析出，过滤得式(1)粗品，将粗品用甲醇重结晶使其纯化，得到式(1)纯品；

式(5)白杨素式(1)

(2)以式(1)为原料制备本发明的式(2)方法如下：

反应釜中加入式(1)和式(1)20～50倍质量的甲醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶2～1∶20的盐酸，用调温装置使反应液的温度为20～80℃使其反应，反应1～10小时，将反应后的混合物倾入反应液3～6倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(2)粗品，将粗品用甲醇重结晶使其纯化，得到式(2)的纯品；

式(2)

(3)以式(1)为原料制备本发明的式(3)方法如下：

反应釜中加入式(1)和式(1)20～50倍质量的乙醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶2～1∶20的盐酸，用调温装置使反应液的温度为20～80℃使其反应，反应1～10小时，将反应后的混合物倒入乙醇量3～6倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(3)粗品，将粗品用乙醇重结晶使其纯化，得到式(3)的纯品；

式(3)

(4)以式(1)为先导化合物制备本发明的式(4)方法如下：

反应釜中加入式(1)和式(1)10～40倍质量的正丁醇作为溶剂和反应物，搅拌均匀后再加入与式(1)摩尔比为1∶2～1∶20的盐酸，用调温装置使反应液的温度为20～120℃使其反应，反应1～10小时，将反应后的混合物倒入正丁醇量3～6倍体积的蒸馏水中，过滤出沉淀，并用蒸馏水洗涤至中性，得到式(4)粗品，将粗品用混合溶剂(乙醇∶氯仿＝2∶1)重结晶使其纯化，得到式(4)的纯品。

式(4)

3.按照权利要求2所述的权利要求1中式(1)的制备方法中，化学反应所用甲醛可以是多聚甲醛或10％～37％的甲醛水溶液，反应温度为15℃，反应时间为40小时。

4.按照权利要求2所述的权利要求1中式(2)、式(3)和式(4)的制备方法中，化学反应所用的盐酸浓度均为15％～38％，温度分别为40℃、50℃、70℃，反应时间分别为3小时、4小时、5小时。

5.一种治疗心、脑血管疾病的药物组合物，其中以式(1)或式(2)或式(3)或式(4)为治疗有效组分的药物组合物。

6.权利要求式(1)或式(2)或式(3)或式(4)化合物在制备治疗心、脑血管疾病的药物中的应用。