CN101299962A - 可用于诊断和治疗妊娠并发症的核酸和多肽 - Google Patents

可用于诊断和治疗妊娠并发症的核酸和多肽 Download PDF

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Abstract

本文公开了诊断或治疗妊娠相关高血压病症的方法，其包括使用选自下列的多肽或其编码核酸：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF－C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α－1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白－5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素－3，α防御素，ADAM－TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T－细胞α化学吸引剂前体，azurocidin，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，β葡萄糖苷酶，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体－可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基－δ－5－类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样－4，和细胞色素P450－家族11。

Description

可用于诊断和治疗妊娠并发症的核酸和多肽
关于联邦资助研究的声明
本研究部分地由NIH拨款R03 DK064255-02所资助。美国政府对于本发明拥有某些权利。
发明领域
在一般意义上，本发明涉及患有妊娠相关高血压病症的个体的检测和治疗。
发明背景
先兆子痫高血压，水肿，和蛋白尿的综合征，其影响5-10％的妊娠并导致实质上孕妇和胎儿的发病与死亡。在全世界范围内先兆子痫每年导致至少200,000例孕妇死亡。先兆子痫的症状一般在妊娠第20周后出现，通常由妇女的血压和尿常规检查检测出来。不过，这些诊断性方法对于该综合征早期的诊断无效，而早期诊断可以降低个体或发育中胎儿的危险，如果能够进行有效治疗的话。
目前对于先兆子痫没有已知的治疗方法。先兆子痫的严重性可以从轻度到威胁生命而有所不同。轻度形式的先兆子痫可以通过卧床休息和经常监测来进行治疗。对于中度到重度的病例，推荐住院治疗并且开出处方血压药或抗惊厥以预防颠痫发作。如果病情变得威胁到母亲或婴儿的生命，则终止妊娠并且胎儿早产。
胎儿和胎盘的正确发育由几种生长因子或血管生成因子所调节。小心调控血管生成和促有丝分裂信号途径对于维持发育中胎盘内的滋养层细胞的适当增殖、迁移和血管生成是关键的。尽管已经鉴定了几种这类因子，如VEGF和PlGF，但仍有许多蛋白在先兆子痫或惊厥发病机理中所起的作用尚未鉴定出来。
需要准确诊断有患妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的危险或患有上述疾病的个体的方法，特别是在最严重的症状出现之前。还需要挽救孕妇和胎儿生命并防止早产的治疗方法。
发明概述
我们已发现了一种诊断并有效治疗妊娠相关高血压病症，包括先兆子痫和惊厥的方法。在一些情况下诊断和治疗都可以在症状出现之前进行。这种早期诊断和治疗可以挽救孕妇和胎生命并预防早产。
我们已发现与获自正常妊娠患者的胎盘样本相比，在取自先兆子痫妇女患者的胎盘样本中，编码下列分泌型基因产物的基因(GenBank号显示于括号中)的水平显著提高：卵泡抑制素相关蛋白(U76702)，白介素8(M28130)，抑制素A(M13981)，VEGF-C(U43142)，血管生成素(M11567)，β致育素(U38805)，假想蛋白(AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白(AFO13250)，红细胞分化蛋白(J03634)，脂肪生成抑制因子(X58377)，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白(X58022)，α-1抗胰凝乳蛋白酶(X68733)，胰岛素样生长因子结合蛋白-5(L27559)，CD33L(D86368)，细胞因子受体样因子1(AF059293)，血小板衍生的内皮生长因子(NP 001953)，赖氨酰羟化酶同种型2(U84573)，stanniocalcin前体(U25997)，分泌型卷曲相关蛋白(AF056087)，和半凝乳素-3(NM 002306)。我们还发现在取自患有先兆子痫的妇女的胎盘样品中下列分泌型基因产物的基因表达水平显著降低：α防御素(L12691)，ADAM-TS3(AB002364)，缩胆囊素前体(AW043690)，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂(chemoattractant)前体(AF030514)，和azurocidin(M96326)。这些基因和由所述基因编码的多肽可以用于诊断，治疗，处理，和预防妊娠相关高血压病症。
我们还发现了在先兆子痫型胎盘中差异表达的细胞内靶标，为合适的候选物，用于筛选新的治疗性化合物。在先兆子痫型胎盘中增多的细胞内基因产物为：精胺氧化酶(UOl134)，UDP糖基转移酶2家族多肽B28(AF091582)，神经营养酪氨酸激酶受体2(X63759)，中性肽内切酶(J03779)，CDC28蛋白激酶调控亚基2(X54942)和β葡萄糖苷酶(J03060)。在先兆子痫型胎盘中降低的细胞内基因产物为：羊毛甾醇合酶(U22526)，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶(AI688589)，雌激素受体-可变剪接的转录本H(X86816)，趋化因子(CX3C基序)受体1(U27699)，酪氨酸酶相关蛋白1(M20681)，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶(AL080151)，二氢嘧啶酶样-4(J03634)，和细胞色素P450-家族11(D84361)。
为了以下说明的目的，上述所有多肽统一称为“本发明的多肽”。如上所述，所述多肽进一步分成“分泌型多肽”和“细胞内多肽”。尽管本文给出的详细说明具体涉及到与特定GenBank编号相关联的多肽，但是对于本领域技术人员显而易见的是，所述详细说明还可以应用于与特定多肽基本上相同的家族成员，同种型，同源物，和/或变体。
基于此数据，我们发现降低本发明多肽的水平或生物学活性的化合物可以用于治疗或预防个体的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，所述本发明多肽的基因在先兆子痫中上调。类似地，我们发现提高本发明多肽的水平或生物学活性的化合物可以用于治疗或预防个体的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，所述本发明多肽的基因在先兆子痫中下调。这些试剂包括，但不限于，对所述蛋白质特异性的抗体，靶向所述蛋白质的反义或RNAi的核碱寡聚物，纯化的蛋白质，纯化的天然或合成性化合物，化学化合物，和小分子。
因此，本发明介绍了一种测量任何一种或多种本发明的多肽(分泌型或细胞内)或编码本发明多肽的核酸水平的方法，作为早期诊断和处理妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的检测手段。
在一方面，本发明介绍了一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的方法，其包括测量来自个体的样品中的任何一种或多种下列分泌型或细胞内多肽，或其片段的水平：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(GenBank编号AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子I5血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β-葡萄糖苷酶。在此方法中，与正常的参照样品，标准或水平相比，以上任何一种或多种多肽，或其片段水平的提高(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高)都是妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向性的诊断性指征。该方法还可以包括测量两种、三种、四种或五种或更多种上面所列的分泌型或细胞内多肽，或其片段。在优选的实施方案中，所述多肽为卵泡抑制素相关蛋白，抑制素-A，β致育素，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，或分泌型卷曲相关蛋白。
妊娠相关高血压病症的非限制性例子包括先兆子痫，惊厥，妊娠期高血压，慢性高血压，HELLP综合征，和出生时小于妊娠年龄(SGA)。
在相关的方面，本发明介绍了一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的方法，其包括测量来自个体的样品中的任何一种或多种下列分泌型或细胞内多肽，或其片段的水平：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。在此方法中，与正常的参照样品，标准或水平相比，以上任何一种或多种多肽，或其片段水平的降低(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高)都是妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向性的诊断性指征。
对于任何包括测量多肽或其片段水平的诊断性方法来说，测量都可以利用免疫测定法(例如，ELISA或蛋白印迹)来进行。该方法还可以包括测量两种、三种、四种或五种或更多种分泌型或细胞内多肽或编码上面所列的多肽，或其片段的核酸。所述测量还可以对于一个以上的多肽同时进行，例如利用可以排列成结合性分子阵列的微阵列(例如，抗体的阵列，也称作抗体阵列)以检测本发明的多肽，或利用排列成本发明的多肽阵列的微阵列，也称作蛋白质阵列，其可以用于检测生物学样品中针对多肽的抗体水平。
在另一方面，本发明介绍了一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的方法，其包括测量来自个体的样品中的编码任何一种或多种下列分泌型或细胞内多肽，或其片段的核酸水平：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(GenBank编号AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β-葡萄糖苷酶。在此方法中，与正常的参照样品，标准或水平相比，任何一种或多种编码以上多肽，或其片段的核酸分子水平的提高(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高)都是妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向性的诊断性指征。在优选的实施方案中，所述核酸编码卵泡抑制素相关蛋白，抑制素-A，β致育素，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，或分泌型卷曲相关蛋白。
在相关方面，本发明介绍了一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的方法，其包括测量来自个体的样品中的编码任何一种或多种下列分泌型或细胞内多肽，或其片段的核酸水平：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。在此方法中，与正常的参照样品，标准或水平相比，编码任何一种或多种以上多肽，或其片段的核酸分子水平的降低(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高)都是妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向性的诊断性指征。
以上方法还可以包括测量两种、三种、四种或五种或更多种编码上面所列的分泌型或细胞内多肽，或其片段的核酸。
妊娠相关高血压病症或妊娠相关高血压病症倾向性的诊断可以缘自与正常参照样品水平相比，本发明多肽相对水平的改变(例如，提高或降低)，或缘自在正常参照水平之上或之下的发明多肽绝对水平的检测。该诊断还可以缘自与获自相同个体的在先样品的水平相比，一种多肽水平的变化。在另一种优选的实施方案中，参照标准或水平是来自这种样品的水平或数目。在另一种优选的实施方案中，在测量所述水平之前至少1周，2周，3周，4周，5周，6周，9周，12周，15周，18周或更长时间获得参照样品。参照标准或水平还可以是来自正常个体的值，该正常个体与取样个体至少在下列标准的其中之一上相匹配：胎儿的妊娠期，母亲年龄，妊娠前血压，妊娠期间血压，母亲的BMI，胎儿体重，在先诊断为妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，以及妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的家族史。在另一种优选的实施方案中，参照样品是取自非妊娠个体；未患妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的妊娠个体的样品；或在代表任何上述参照样品的已知正常浓度或水平上的纯化蛋白质。
在另一种优选的实施方案中，该方法进一步包括在来自个体的样品中测量sFlt-1，VEGF，PlGF，或可溶性endoglin多肽的至少一种的水平，如在美国专利申请公开号20040126828，20050025762，和20050170444；PCT公开号WO2004/008946和WO2005/077007；和美国专利申请系列号11/235,577中所述。该方法还可以包括在来自个体的样品中测量sFlt-1，VEGF，PlGF，或可溶性endoglin多肽的至少两种的水平，并利用度量标准计算sFlt-1，VEGF，PlGF，或可溶性endoglin的水平之间的关系，其中相对于参照样品在个体样品中水平之间关系的改变诊断妊娠相关高血压病症或妊娠相关高血压病症倾向性。在优选的实施方案中，该方法还包括测定体质指标(BMI)，胎儿的妊娠期(GA)或二者，并包括在度量标准中的BMI或GA或二者。例如，度量标准可以是先兆子痫抗血管生成指数(PAAI)：[sFlt-1/VEGF+PlGF]，可溶性endoglin抗血管生成指数：(sFlt-1+0.25(可溶性endoglin多肽))/PlGF，sFltl/PLGF，(sFltl+可溶性endoglin)/PlGF，(sFltl+可溶性endoglin+卵泡抑制素相关蛋白)/PlGF，或其任意组合。
在另一方面，本发明提供了一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的方法，其包括测定编码选自下列多肽的基因的核酸序列：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β葡萄糖苷酶。提高个体体内所述基因的表达水平或生物学活性的个体核酸序列的改变诊断个体患有妊娠相关高血压病症，或对于妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的倾向，或发展成这种病症的倾向性。
在另一相关方面，本发明介绍了一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的方法，其包括测定编码选自下列多肽的基因的核酸序列：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，dihydropyramidinase-样-4，和细胞色素P450-家族11。降低个体体内所述基因的表达水平或生物学活性的个体核酸序列的改变诊断个体患有妊娠相关高血压病症，或对于妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的倾向，或发展成这种病症的倾向性。
在以上任何方面的优选的实施方案中，所述多肽或编码所述多肽的核酸是卵泡抑制素相关蛋白，抑制素-A，β致育素，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，或分泌型卷曲相关蛋白。
在以上任何方面的另外的实施方案中，对所述水平进行两次或多次测量并且测量之间水平的变化是妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的诊断性指征。在优选的实施方案中，从第一次测量到下一次测量，任何本发明的多肽或编码本发明多肽的的核酸水平的改变(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的提高或降低)是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的诊断性指征。有利地，将所述诊断性方法用于在症状出现之前(例如，至少4，5，6，7，8，9，或10周前)诊断妊娠相关高血压病症。
在以上任何诊断性方面的多个实施方案中，所述妊娠相关高血压病症是先兆子痫，惊厥，妊娠高血压，慢性高血压，HELLP综合征，或出生时小于妊娠年龄。
在以上方面的多个实施方案中，所述样品是个体的体液(例如，尿，血液，羊水，血清，唾液，血浆，或脑脊液)，其中其中多肽或编码本发明多肽的核酸在正常情况下是可以检测的。在另外的实施方案中，所述样品是组织或细胞(例如，胎盘组织或胎盘细胞，内皮细胞，白细胞，和单核细胞)。在以上方面的其它实施方案中，个体是妊娠的人，产后人，或非妊娠人。在以上方面的其它实施方案中，个体是非人动物(例如，牛，马，绵羊，猪，山羊，狗，或猫)。在一个实施方案中，所述个体是未妊娠的人并且将所述方法用于在妊娠之前诊断发展成妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的倾向性。在另外的实施方案中，还测量BMI或GA或二者。
在另一方面，本发明提供一种试剂盒，用于诊断个体的妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向，其包括至少一种核酸序列，或其互补序列，它选自编码下列多肽的核酸：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，β葡萄糖苷酶，α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。该试剂盒还包括对于核酸序列，或其互补序列的使用说明，用于诊断妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向。在优选的实施方案中，该试剂盒包括至少两种，至少三种，至少四种，或至少五种或更多核酸序列。
在另一方面，本发明提供一种试剂盒，用于诊断个体的妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向，其包含一种组分或试剂，用于检测选自下列多肽的多肽：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，β葡萄糖苷酶，α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。该试剂盒还包括使用所述组分的说明，以检测多肽来诊断妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。在优选的实施方案中，该试剂盒包括组分或试剂，用于检测至少两种，至少三种，至少四种，或至少五种或更多本发明的多肽。优选的多肽或核酸包括卵泡抑制素相关蛋白，抑制素-A，β致育素，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，或分泌型卷曲相关蛋白。在优选的实施方案中，用于检测多肽的组分或试剂包括结合性分子，如对于所述多肽特异性的抗体或抗原结合片段，并且通过下列测定法之一来检测所述多肽：免疫测定法，酶学测定法，或比色测定法。所述组分或试剂还可以是多肽，或其片段，它可以结合特异性结合所述多肽的抗体。这种试剂盒可以用于检测来自个体的体液样品中的抗体，其是个体中蛋白质水平的指征。
在本发明的任何以上试剂盒方面的其它优选的实施方案中，该试剂盒还还包括参照样品，标准，或水平。所述参照样品，标准，或水平可以是取自未患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的个体，或未妊娠的个体的正常参照样品，标准或水平。所述参照样品还可以是以已知正常浓度存在的纯化多肽。
在优选的实施方案中，所述诊断试剂盒进行标签或包括说明书用于诊断个体妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或妊娠相关高血压病症倾向。在又一个实施方案中，所述诊断试剂盒进行标签或包括说明书用于治疗性诊断性或治疗性剂量确定。有利地，所述诊断试剂盒包括试剂盒使用的标签或说明书以测定个体样品的本发明多肽的水平，并将那些个体样品水平与参照样品值或参照样品值的标准曲线相比，其中所述标准曲线显示妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的指征值，以及正常值。将会理解的是参照样品值将取决于试剂盒的希望用途。例如，在用于诊断性目的的试剂盒中，可以将个体样品与参照值或参照样品比较本发明的多肽，所述参照样品未患妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或未妊娠。在另一个实施例中，用于治疗性监测的试剂盒可以具有参照值或参照样品，其是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的阳性参照指征，其中相对于参照样品个体样品值的改变(提高或降低)可以用于表示妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的改善，或有效剂量的治疗性化合物。
在相关方面，本发明介绍了一种装置，其诊断个体为患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥或有此倾向。该装置包括一种组分，可用于比较发明的多肽或编码本发明多肽的核酸，其中个体体内本发明多肽水平的改变(提高或降低)是妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的诊断性指征。在优选的实施方案中，该装置包括以侧向流动或量尺形式存在的膜，用于测量和比较尿样品中的多肽水平。该装置还可以包括组分，用于相对于参照样品，来比较来自个体的样品中一种或多种本发明的多肽或编码本发明多肽的核酸分子以及可溶性endoglinsFlt-1，VEGF，和PlGF核酸分子或多肽中至少一种的水平，其中改变(提高或降低)诊断个体中妊娠相关高血压病症或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向。在优选的实施方案中该装置包括一种组分或多种组分与度量标准一起使用来比较一种或多种本发明的多肽，与可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF，和PlGF多肽中的至少一种，优选两种的水平。
在另一方面，本发明介绍了一种核酸阵列，其包含一种或多种基质支持物，它与一种多核苷酸探针稳定相联，其中所述多核苷酸探针能够在高严格条件下与编码任何本发明的多肽的核酸的RNA转录本，或其互补体杂交。在另一方面，本发明介绍了一种多肽阵列，其包含一种或多种基质支持物，它与本发明的多肽；多肽变体，对多肽或变体特异性的抗体；或多肽、变体或抗体的任何组合相联。
上述每种阵列还可以包括阵列的使用说明书，用于诊断妊娠相关高血压病症或其倾向。
本文所述的任何诊断方法，试剂盒，或阵列还可以用于监测个体中的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。在优选的实施方案中，利用诊断性方法在治疗期间监测个体或确定有效治疗剂量。单独测量本发明的多肽或编码本发明多肽的的核酸的水平或结合可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF，或PlGF蛋白或核酸，或其任意组合的水平进行测量。在优选的实施方案中分两次或多次测量所述水平，水平的改变(提高或降低)是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的诊断性指征。在另一种优选的实施方案中，将所述水平与参照样品相比较，相对于参照样品来说任何多肽水平的改变(提高或降低)是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的诊断性指征。在一个实施方案中，在实施治疗期间或之后测量至少一种下列多肽或编码下列分泌型或细胞内多肽或其片段的核酸，并与治疗前的值相比较：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β-葡萄糖苷酶。在此实施方案中，与治疗前的值相比，任何一种或多种以上多肽，或其片段水平的降低都表示妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的改善。
在另一个实施方案中，在实施治疗期间或之后测量至少一种下列多肽或编码下列分泌型或细胞内多肽或其片段的核酸，并与治疗前的值相比较：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，calcmm/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。在此实施方案中，与治疗前的值相比，任何一种或多种以上多肽，或其片段水平的提高都表示妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的改善。
在本发明的包括测量sFlt-1，VEGF，或PlGF的诊断性监测方法的优选实施方案中，该方法可以包括利用度量标准计算sFlt-1，VEGF，或PlGF水平之间的关系，其中相对于参照样品，个体样品中所述水平之间关系的改变是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的诊断性指征。这种度量标准的一个实例是PAAI。在此例中，个体PAAI值的降低(例如小于20，优选小于10)表示妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的改善。PAAI的降低(例如，小于20，优选小于10)还可以表示治疗性化合物的有效剂量。在涉及诊断或治疗处理监测的方法的优选实施方案中，利用免疫测定法，如ELISA或蛋白印迹测量多肽，或蛋白阵列或抗体阵列来测量一种以上多肽的表达水平。对于任何监测方法来说，水平的测量可以分两次或多次进行，测量之间水平的变化是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的诊断性指征。
在另一方面，本发明提供了一种通过向个体施用能够降低选自下列分泌型多肽的多肽或编码多肽的核酸分子的生物学活性或表达水平的化合物，来治疗或预防个体的妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的方法：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3，其中施用的时间以及量足以治疗或预防个体的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。在优选的实施方案中，所述化合物核碱寡聚物，其与编码任何上面所列多肽的核酸序列的至少一部分至少90％，95％，96％，97％，98％，99％或100％互补。所述核碱寡聚物可以是反义核碱寡聚物，优选与所需核酸序列的至少8-30个核苷酸至少90％，95％，96％，97％，98％，99％或100％互补。所述核碱寡聚物还可以是双链RNA(dsRNA)，优选小干涉性RNA(siRNA)，其优选与所需核酸序列的至少18，19，20，21，22，23，24，25，35，45，或50个核苷酸至少90％，95％，96％，97％，98％，99％，或100％互补。
在此方面的另一种优选的实施方案中，所述化合物是抗体或抗原-结合片段，优选特异性结合下列多肽或其片段的任何一种的单克隆抗体：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3。在优选的实施方案中，所述抗体或其抗原-结合片段是人或人源化抗体。
在另一方面，本发明提供了一种通过向个体施用能够提高选自下列分泌型多肽的多肽或编码多肽的核酸分子的生物学活性或表达水平的化合物，来治疗或预防个体的妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥倾向的方法：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin，其中施用的时间以及量足以治疗或预防个体的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。在优选的实施方案中，所述化合物是选自α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin的纯化多肽。在任何以上各方面的各种实施方案中，所述方法进一步包括向个体施用抗高血压化合物(例如，腺苷，nifedipine，minoxidil，和硫酸镁)的步骤。在以上各方面的其它实施方案中，个体是妊娠的人，产后的人，非妊娠的人，或非人动物(例如，牛，马，绵羊，猪，山羊，狗，或猫)。本发明的治疗性方法可以用于治疗或预防妊娠相关高血压病症，其包括先兆子痫，惊厥，妊娠高血压，慢性高血压，HELLP综合征，和出生时小于妊娠年龄。优选的疾病是先兆子痫和惊厥。在以上各方面的各种实施方案中，所述方法可以结合下面所述的本发明的诊断性方法，以便在治疗期间监测个体或确定有效治疗剂量。
本发明的任何治疗性方面还可以包括施用一种或多种其它化合物，如纯化的sFlt-1抗体，sFlt-1抗原-结合片段，烟碱，荼碱，腺苷，nifedipine，minoxidil，硫酸镁，血管内皮生长因子(VEGF)，包括所有同种型如VEGF189，VEGF121，或VEGF165，或其片段；胎盘生长因子(PlGF)，包括所有同种型及其片段；纯化的可溶性endoglin抗体或可溶性endoglin抗原-结合片段；其中施用的时间以及量足以治疗或预防个体的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。这些化合物的优选的实例在美国专利申请公开号20040126828，20050025762，和20050170444；PCT公开号WO2004/008946和WO2005/077007；和美国专利申请系列号11/235,577中描述。有利地，所述化合物将是能够结合sFlt-1或降低sFlt-1表达的化合物。
可以单独或结合本发明的一种或多种其它方法(诊断或治疗)来使用本发明的任何治疗性方面。
在另一方面，本发明提供一种鉴定改善妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的化合物的方法，其包括将表达本发明的多肽或编码本发明多肽的的核酸分子的细胞与候选化合物相接触，并将与候选化合物接触的细胞中的本发明的多肽或编码本发明多肽的核酸分子的表达水平或生物学活性与未接触候选化合物的对照细胞中的表达水平或生物学活性相比较，其中本发明的多肽或编码本发明多肽的核酸分子的表达或生物学活性的改变将候选化合物鉴定为改善妊娠相关高血压病症的物。
在一个实施方案中，该方法用于鉴定降低多肽，或其片段，或编码多肽，或其片段的核酸分子的表达的化合物，所述多肽选自下列多肽：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β-葡萄糖苷酶。在另一个实施方案中，该方法用于鉴定促进多肽，或其片段，或编码多肽，或其片段的核酸分子的表达提高的化合物，所述多肽选自下列多肽：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin，或提高来自个体的样品中任何一种下列细胞内多肽，或其片段的水平：羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。所述改变可以在，例如，转录，翻译，蛋白质稳定性，生产，或生物学活性中。
为了本发明的目的，下面定义下列缩写和术语
“改变”意指通过如下所述的本领域已知的标准方法检测的基因或多肽的表达水平的变化(提高或降低)。本文所用的改变包括表达水平10％的变化，优选25％的变化，更加优选40％的变化，最优选a50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更大的表达水平的变化。“改变”还可以表示任何本发明的多肽的生物学活性的变化(提高或降低)。生物学活性的例子包括配体结合，酶学活性，细胞迁移，细胞增殖，内皮功能紊乱的诱导，或抗血管生成状态的诱导。生物学活性可以通过，例如，配体结合测定法；细胞迁移测定法；酶学活性(例如，激酶活性)测定法；Scatchard曲线图分析；免疫测定法；细胞增殖测定法如BrdU标记，细胞计数实验，或DNA合成定量测定法如H胸苷并入；和本领域标准的或本文所述的血管生成测定法进行测量。如本文所用的，改变包括10％的生物学活性的变化，优选25％的变化，更加优选40％的变化，最优选50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更大的生物学活性的变化。
“反义核碱寡聚物”意指一种核碱寡聚物，无论其长度如何，其与编码本发明多肽的核酸的编码链或mRNA相互补。反义核碱寡聚物还可以靶向翻译起始和终止位点。优选所述反义核碱寡聚物包含大约8-30个核苷酸。反义核碱寡聚物还可以包含至少40，60，85，120，或更多个连续的核苷酸，其与编码本发明多肽的mRNA或DNA互补，并且可以长达全长mRNA或基因。
“体质指标”意指一种利用身高和体重测量衍生的数字，其对于体重是否落入健康范围给出一般性的指示。一般用于测定体质指标的公式是人体体重(千克)除以人体身高(米)的平方，或体重(kg)/(身高(m))2。
“化合物”意指任何小分子化学化合物，抗体，核酸分子，多肽，或其片段。
“嵌合抗体”意指一种多肽，其至少包含抗体分子的抗原结合部分，所述抗原结合部分连接到另一种蛋白质的至少一部分上(一般是免疫球蛋白的恒定结构域)。
“降低”意指与参照样品相比，引发由由本文所述的测定法(见″表达″)所检测的多肽或核酸水平，或由本文所述的测定法(见″生物学活性″)所检测的多肽生物学活性的整体减少的能力，优选减少10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更多。
“双链RNA(dsRNA)”意指由有义和反义链组成的核酸分子。dsRNAs可以用于介导RNA干涉。
“表达”意指通过本领域已知的标准方法进行的基因或多肽的检测。例如，经常通过免疫测定法(例如，ELISA或蛋白质印迹)来检测多肽表达，经常通过DNA印迹或多聚酶链式反应(PCR)来检测DNA表达，经常通过RNA印变，PCR，或RNA酶保护测定法来检测RNA表达。
“片段”多肽或核酸分子的一部分。此部分优选包含至少10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，或90％的全长相关核酸分子或多肽。片段可以包含10，20，30，40，50，60，70，80，90，或100，200，300，400，500，600，700，800，900，1000或更多个氨基酸或核苷酸直到高达全长的多肽或核酸分子。
“妊娠龄”意指胎儿的年龄参考量，从母亲的最后一次月经期的第一天起计数，通过以周表示。
“妊娠高血压”意指妊娠20周后形成无蛋白尿的高血压。
“先兆子痫或惊厥病史”意指在个体本人或在相关家族成员身上先前诊断出先兆子痫或惊厥或妊娠诱导的高血压。
“同源性的”意指任何基因或多肽序列，其在比较序列的长度上与已知基因或多肽序列具有至少30％同源性，更加优选40％，50％，60％，70％，80％，最优选90％或更高同源性。“同源性”多肽还可以具有比较多肽的至少一种生物学活性。对于多肽来说，比较序列的长度一般将为至少6个氨基酸，优选至少10或20个氨基酸，更加优选至少25个氨基酸，最优选50，100，150，200个氨基酸或更多，直到所述多肽的全长。对于核酸来说，比较序列的长度一般将为至少18个核苷酸，优选至少25或50个核苷酸，更加优选至少75个核苷酸，最优选从至少100，150，200，250，300个核苷酸或更多个直到所述核酸的全长。″同源性″还可以指用于生成抗体的表位与所述抗体所针对的多肽或其片段之间的基本上的相似性。在这种情况下，同源性指足以引发抗体产生的相似性，所述抗体特异性地识别目标多肽。
“人源化抗体”意指能够结合预定抗原的免疫球蛋白氨基酸序列变体或其片段。通常，所述抗体将包含轻链以及至少重链的可变结构域。所述抗体还可以包括重链的CH1，铰链，CH2，CH3，或CH4区域。人源化抗体包括基本上具有人免疫球蛋白氨基酸序列的框架区(FR)和基本上具有非人免疫球蛋白(“引入”序列)氨基酸序列的互补决定区(CDR)。
一般，人源化抗体具有来自非人来源的一个或多个氨基酸残基导入其中。一般地，人源化抗体将包含基本上全部的至少一种，典型地两种，可变结构域(Fab，Fab′，F(ab′)2，Fabc，Fv)，其中全部或基本上全部的CDR区域对应于非人免疫球蛋白的CDR区域，并且全部或基本上全部的FR区域是人免疫球蛋白共同序列的FR区域。人源化抗体优选将包括至少一部分的免疫球蛋白恒定区域(Fc)，一般是人免疫球蛋白的Fc。“互补决定区(CDR)”意指每一个免疫球蛋白轻和重链内可变区中的三种高变序列。“框架区(FR)”意指位于免疫球蛋白轻和重链的三个高变序列(CDR)的每一侧的氨基酸序列。
人源化抗体的FR和CDR区不需要精确地对应于亲本序列，例如，引入CDR或共同FR可以通过取代、插入或删除至少一个残基进行诱变，从而使该位点上的CDR或FR残基不对应于共有或引入的抗体。不过，这些突变，将不会是广泛性的。通常，人源化抗体残基的至少75％，优选90％，最优选至少95％，96％，97％，98％，99％或100％将对应于亲本FR和CDR序列的残基。
“杂交”意指配对以便在各种严格条件下在互补多核苷酸序列，或其部分之间形成双链分子。(见，例如，Wahl and Berger(1987)MethodsEnzymol.152：399；Kimmel，Methods Enzymol.152：507，1987.)。例如，严格的盐浓度一般将小于大约750mM NaCl和75mM柠檬酸钠，优选小于大约500mM NaCl和50mM柠檬酸钠，最优选小于大约250mM NaCl和25mM柠檬酸钠。低严格度杂交可以在有机溶剂，如甲酰胺缺失的情况下获得，而高严格度杂交可以在至少大约35％的甲酰胺存在时获得，最优选至少大约50％甲酰胺。严格温度条件一般将包括至少大约30℃的温度，更加优选至少大约37℃，最优选至少大约42℃。改变其它参数，如杂交时间，去污剂例如十二烷基磺酸钠(SDS)浓度，以及加入或排除载体DNA，是本领域技术人员公知的。根据需要通过组合这些不同的条件来实现各种水平的严格度。在优选的实施方案中，杂交将发生于30℃在750mMNaCl，75mM柠檬酸钠，和1％SDS中。在更加优选的实施方案中，杂交将发生于37℃在500mM NaCl，50mM柠檬酸钠，1％SDS，35％甲酰胺，和100μg/ml变性鲑鱼精DNA(ssDNA)中。在最优选的实施方案中，杂交将发生于42℃在250mM NaCl，25mM柠檬酸钠，1％SDS，50％甲酰胺，和200μg/ml ssDNA中。对于本领域技术人员来说，对这些条件进行有用的变化是显而易见的。
对于大多数应用来说，杂交后的洗涤步骤也将变化严格度。洗涤严格度条件可以通过盐浓度进行定义。如上，可以通过降低盐浓度或通过提高温度来提高洗涤严格度。例如，洗涤步骤的严格盐浓度将优选小于大约30mM NaCl和3mM柠檬酸钠，最优选小于大约15mMNaCl和1.5mM柠檬酸钠。洗涤步骤的严格温度条件一般将包括至少大约25℃的温度，更加优选至少大约42℃，最优选至少大约68℃。在优选的实施方案中，洗涤步骤将发生于25℃在30mM NaCl，3mM柠檬酸钠，和0.1％SDS中。在更加优选的实施方案中，洗涤步骤将发生于42℃在15mM NaCl，1.5mM柠檬酸钠，和0.1％SDS。在最优选的实施方案中，洗涤步骤将发生于68℃在15mM NaCl，1.5mM柠檬酸钠，和0.1％SDS中。对于本领域技术人员来说，对这些条件进行其它改变是显而易见的。杂交技术是本领域技术人员公知的，并且描述于，例如，Benton和Davis (Science 196：180，1977)；Grunstein和Hogness(Proc.Natl.Acad.Sci，USA 72：3961，1975)；Ausubel等(Current Protocols in Molecular Biology，Wiley Interscience，New York，2001)；Berger和Kimtnel{Guide to Molecular Cloning techniques，1987，Academic Press，New York)；和Sambrook等，Molecular Cloning：ALaboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory Press，New York。
“提高”意指与参照样品相比，引发由前述的测定法(见“表达”)所检测的多肽或核酸水平，或由前述的测定法(见“生物学活性”)所检测的多肽生物学活性的整体提高的能力，优选提高10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更多。
“子宫内的生长迟缓(IUGR)”意指一种综合征，其导致出生重量比妊娠期胎儿的预计胎重小10％。当前世界卫生组织对于低出生重量的标准是小于2,500gm(5lbs.8oz.)的体重，或低于根据美国妊娠期出生重量表的妊娠期的10％，这随着种族、产次和婴儿性别而有所不同(Zhang笔Bowes，Obstet.Gynecol.86：200-208，1995)。这些低出生重量婴儿也称作“出生时小于妊娠年龄(SGA)”。先兆子痫已知与IUGR或SGA相关的病症。
“计量标准”意指一种测量。可以利用计量标准来，例如，比较本发明的多肽或核酸分子的水平。例示性计量标准包括，但不限于，数学公式或运算法则，如比率。根据所用的计量标准，惊厥或先兆子痫的诊断性指征可以显著地高于或低于利用与参照样品或水平(例如，来自未患妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的对照个体)相同的计量标准的值。要使用的计量标准可以最佳区分患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的个体中本发明的多肽或核酸分子，和/或可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF，PlGF，或其任意组合，与参照样品或标准之间的水平。例如，计量标准可以是先兆子痫抗血管生成指标(PAAI)：[sFlt-1/VEGF+PlGF]，可溶性endoglin抗血管生成指标：(sFlt-1+0.25(可溶性endoglin多肽))/PlGF，sFlt1/PLGF，(sFltl+可溶性endoglin)/PlGF5(sFlt1+可溶性endoglin+卵泡抑制素相关蛋白)/PlGF，或其任意组合。一些有用的计量标准的实例在美国专利申请公开号20040126828，20050025762，和20050170444；PCT公开号WO2004/008946和WO2005/077007；以及美国专利申请系列号11/235,577中得以描述。
“核碱寡聚物”意指包括至少八个通过键连接在一起的核碱的化合物，优选至少十二个，最优选至少十六个。此定义中包括天然和非天然的寡核苷酸，经修饰和未经修饰，以及寡核苷酸模仿物，如蛋白核酸，锁定核酸，和阿糖核酸。许多可用于本发明的核碱寡聚物中的核碱和键基团的例子，可以见于美国专利申请公开号20030114412，段落[0030]至[0046]和20030114407，段落[0036]至[0055]，和20030190659，段落[0083]至[0106]，并入本文作为参考。
“可操作性地连接的”意指连接的基因和调控序列，其连接方式允许当合适的分子(例如，转录激活蛋白)结合到调控序列上时基因表达。
“可药用的载体”意指一种载体，其对于被处理的哺乳动物来说在病理生理学上是可接受的，同时保留其所施用的化合物的治疗特性。一种例示性的可药用的载体是生理盐水。其它可药用的载体及其制剂是本领域技术人员已知的，并在，例如，Remington′s PharmaceuticalSciences，(20th edition)，ed.A.Gennaro，2000，Lippincott，Williams&Wilkins，Philadelphia，PA中得以描述。
“多态性”意指编码本发明多肽的核酸分子中的遗传变异，突变，删除或添加，其是发展成妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的倾向的指征。多态性可以存在于基因的启动子序列，开放阅读框，内含子序列，或3’非翻译区。
“妊娠相关高血压病症”意指任何与血压升高相关或特征是血压升高的病症或疾病或妊娠。这些病症包括先兆子痫(包括早产儿先兆子痫，重症先兆子痫)，惊厥，妊娠高血压，HELLP综合征，(溶血，肝酶升高，低血小板)，胎盘分离，慢性高血压，子宫内生长限制型妊娠，和出生时小于妊娠年龄(SGA)。应当注意尽管SGA婴儿妊娠并非经常与高血压相关联，在此定义中也包括它。
“先兆子痫”意指一种多发性病症，其特征是由于妊娠或近期妊娠的影响而伴有蛋白尿或水肿，或二者的高血压，肾小球失调，脑水肿，肝水肿，或凝结异常。先兆子痫一般被定义为下列症状的一些组合：(1)妊娠20周后心脏收缩压(BP)＞140mmHg和心脏舒张BP＞90mmHg(一般分两次测量，间隔4-168小时)，(2)新出现的蛋白尿(1+by dipstik尿液分析，在24小时尿收集物中＞300mg蛋白，或单一随机样品具有蛋白/肌氨酸酐比例＞0.3)，和(3)产后12周高血压和蛋白尿消失。重症先兆子痫一般被定义为(1)心脏舒张BP＞110mmHg(般分两次测量，间隔4-168小时)或(2)蛋白尿，特征是在24小时尿收集物或两份随机尿样本中测量值为3.5g或更多蛋白，至少3+蛋白bydipstick。在先兆子痫中，高血压和蛋白尿一般发生在彼此七天之内。在重症先兆子痫中，重症高血压，重症蛋白尿和HELLP综合征(溶血，肝酶升高，低血小板)或惊厥可以同时发生或一个时间内只发生一种病症。偶而地，重症先兆子痫可以导致发展成痉挛。这种综合征的严重形式称作“惊厥”。惊厥还可以包括几种器官或组织如肝失调或损害(例如，肝细胞损伤，心包坏死)和中枢神经系统失调或损害(例如，脑水肿和脑出血)。痉挛的病因学据认为是形成脑水肿后次发的，以及肾小血管的病灶痉挛。
“先兆子痫抗血管生成指标(PAAI)”意指sFlt-1/VEGF+PlGF的比率，用作抗血管生成活性的指征。大于10的PAAI，更加优选大于20，据认为是先兆子痫或先兆子痫危险的指征。
“早熟先兆子痫”意指症状出现＜37周或＜34周的先兆子痫。
“蛋白”或“多肽”或“多肽片段”意指任何超过两个氨基酸的链，不考虑翻译后修饰(例如，糖基化作用或磷酸化作用)，构成天然发生多肽或肽的全部或部分，或构成非天然发生的多肽或肽。
“本发明的多肽”意指任何下列分泌型多肽，其中括号中的数字表示多肽的GenBank编号：卵泡抑制素相关蛋白(FLRG，U76702)，白介素8(IL-8，M28130)，抑制素A(M13981)，VEGF-C(U43142)，血管生成素(Ml 1567)，β致育素(U38805)，假想蛋白(AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白(LAIR-2，AF013250)，红细胞分化蛋白(J03634)，脂肪生成抑制因子(X58377)，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白(CRF-BP，X58022)，α-1抗胰凝乳蛋白酶(X68733)，胰岛素样生长因子结合蛋白-5(IGFBP-5，L27559)，CD33L(D86358)，细胞因子受体样因子1(CRLFl，AF059293)，血小板衍生的内皮生长因子(ECGF-I，NP 001953)，赖氨酰羟化酶同种型2(PLOD2，U84573)，stanniocalcin前体(U25997)，分泌型卷曲相关蛋白(AF056087)，半凝乳素-3(NM 002306)，α防御素(L12691)，ADAM-TS3(AB002364)，缩胆囊素前体(AW043690)，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体(AF030514)，and azurocidin(M96326)；或任何of下列细胞内多肽精胺氧化酶(UOl 134)，UDP糖基转移酶2家族多肽B28(AF091582)，神经营养酪氨酸激酶受体2(X63759)，中性肽内切酶(J03779)，CDC28蛋白激酶调控亚基2(X54942)和β葡萄糖苷酶(J03060)，羊毛甾醇合酶(U22526)，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶(AI688589)，雌激素受体-可变剪接的转录本H(X86816)，趋化因子(CX3C基序)受体1(U27699)，酪氨酸酶相关蛋白1(M20681)，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶(AL080151)，二氢嘧啶酶样-4(J03634)和细胞色素P450-家族11(D84361)。此定义中包括剪接变体，同种型，同系物，降解产物，以及上述多肽的任何片段。
“参照样品”意指用于比较目的的任何样品，标准，或水平。“正常的参照样品”可以是先前取自同一个体的样品，来自未患任何妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的妊娠个体的样品，来自妊娠个体的样品，但样品在妊娠早期取(例如，在妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥之前的第一个或第二个三月期)，来自妊娠但无妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥病史的个体的样品，未妊娠的个体的样品，正常浓度的纯化参照样品(即，不是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的指征)。“参照标准或水平”意指来自参照样品的值或数字。正常参照标准或水平可以是来自正常个体的值或数字，所述正常个体与样品个体通过下列标准来匹配：胎儿的妊娠期，孕妇年龄，妊娠前孕妇血压，妊娠期间孕妇血压，母亲的BMI，胎儿体重，先兆子痫或惊厥的在先诊断，和妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的家族病史。“阳性参照”样品，标准或值是来自已知患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的个体的样品或值或数字，其与样品个体通过下列标准来匹配：胎儿的妊娠期，孕妇年龄，妊娠前孕妇血压，妊娠期间孕妇血压，母亲的BMI，胎儿体重，先兆子痫或惊厥的在先诊断，和妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的家族病史。
“减少或抑制”意指与参照样品或未用反义核碱寡聚物，dsRNA，或用于RNA干涉的siRNA处理的样品相比，优选引起多肽或核酸水平或多肽生物学活性10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更多总体降低的能力，所述多肽或核酸水平通过前述测定法检测(见“表达”)，而所述生物学活性通过前述测定法检测(见“生物学活性”)。
“样品”意指活检组织，细胞，体液(例如，血液，血清，血浆，尿，唾液，羊水，或脑脊液)或其它获自个体的样本。有利地，所述生物学样品包括本发明的多肽或编码本发明多肽的核酸分子或二者。
“小干涉性RNAs(siRNAs)”意指一种核碱寡聚物，优选dsRNA分子，优选长度大于10个核苷酸(nt)，更加优选长度大于15个核苷酸h，最优选长度大于19个核苷酸，用于识别待降解的靶基因或mRNA。有利地，siRNA与所需核酸序列的18，19，20，21，22，23，24，25，35，45，50个核苷酸至少90％，95％，96％，97％，98％，99％，100％互补。19-25个核苷酸的范围是优选的siRNA大小。siRNA还可以包括短发夹RNA(shRNA)其中siRNA双螺旋双链都包括在单一RNA分子中。siRNA包括任何形式的dsRNA (较大dsRNA的蛋白水解产物，部分纯化的RNA，基本上纯的RNA，合成性RNA，重组生产的RNA)以及变化的RNA，其通过一种或多个核酸的添加、删了、取代，和/或变化而有别于天然发生的RNA。这种改变可以包括加入非核苷酸物质，如向21-23nt RNA的末端添加或从内部添加(在RNA的一个或多个核苷酸上)。在优选的实施方案中，RNA分子包含3′羟基基团。在本发明的RNA分子中的核苷酸还可以包含非标准核苷酸，包括非天然发生的核苷酸或脱氧核糖核苷酸。总之，所有这类变化的RNA都称作RNA类似物。本发明的siRNAs只需要与天然RNA足够相似，使得它具有介导RNA干涉(RNAi)的能力。如本文所用的RNAi指通过导入小干涉性RNAs或dsRNAs至细胞或生物中来进行的ATP依赖型的靶向剪切以及特异性mRNA分子的降解。本文所用的“介导RNAi”指分辨或鉴定哪种RNAs要被降解的能力。
“特异性结合”意指识别并结合本发明的多肽但基本上不识别和结合样品，例如天然包括本发明多肽的生物学样品中的其它分子的化合物或抗体。
“个体”意指哺乳动物，包括，但不限于，人或非人哺乳动物，如牛、马、犬、绵羊，或猫。此定义中包括妊娠，产后，和未妊娠哺乳动物。
“基本上相同的”意指当例如利用下面所述的方法进行优化比对时，核酸或氨基酸序列与第二种核酸或氨基酸序列，例如，endoglin或可溶性endoglin序列共有至少60％，65％，70％，75％，80％，85％，90％，95％，96％，97％，98％，99％，或100％序列同一性。“基本上的同一性”可以用来指各种类型和长度的序列，如全长序列，表位或免疫原性肽，功能性结构域，编码和/或调控序列，外显子，内含子，启动子，和基因组序列。以本领域已知的各种技术，例如，利用公众可获得的计算机软件如Smith Waterman Alignment(Smith，T.F.and M.S.Waterman(1981)J.MoI Biol 147：195-7)；并入GeneMatcherPlus(TM)，Schwarz and Dayhof(1979)的“Best Fit”(Smith andWaterman，Advances in Applied Mathematics，482-489(1981))；Atlas ofProtein Sequence and Structure，Dayhof，M.O.，Ed pp 353-358；BLAST程序(Basic Local Alignment Search Tool；(Altschul，S.F，W.Gish，等(1990)J.MoI.Biol 215：403-10)，BLAST-2，BLAST-P，BLAST-N，BLAST-X，WU-BLAST-2，ALIGN，ALIGN-2，CLUSTAL，或Megalign(DNASTAR)软件来测定两种多肽或核酸序列之间的百分比同一性。此外，本领域技术人员可以确定合适的参数用于测量比对，包括实现比较序列长度上最大比对所需要的任何算法。通常，对于蛋白质来说，比较序列的长度将为至少6个氨基酸，优选10，20，30，40，50，60，70，80，90，100，110，120，130，140，150，200，250，300，350，400，或500个氨基酸或更多，直到全长蛋白。对于核酸，比较序列的长度将为至少18，25，50，100，125，150，200，250，300，350，400，450，500，550，600，650，700，800，900，1000，1100，1200，或至少1500个核苷酸或更多，直到全长核酸分子。要理解的是当将DNA序列与RNA序列相比时，为了测定序列同一性的目的，胸腺嘧啶核苷酸等同于尿嘧啶核苷酸。保守性取代一般包括下列组内的取代：甘氨酸，丙氨酸；缬氨酸，异亮氨酸，亮氨酸；天冬氨酸，谷氨酸，天冬酰胺，谷氨酰胺；丝氨酸，苏氨酸；赖氨酸，精氨酸；和苯丙氨酸，酪氨酸。
“基质”或“固体支持物”意指可以经修饰来包含分离的个别位点的任何材料，适于附着或关联本发明的核酸探针，多肽，或多肽结合分子，并且可实施至少一种检测方法。本领域技术人员将会理解的是，可能的底物数目是非常大的，包括，但不限于，玻璃和经修饰或功能化的玻璃，塑料(包括丙烯酸树脂，聚苯乙烯和苯乙烯与其它材料的共聚物，聚丙烯，聚乙烯，聚丁烯，聚亚安酯，特氟纶，等)，多糖，尼龙或硝化纤维素，树脂，硅土或基于硅土的材料包括硅和经修饰的硅，碳，金属等。一般，底物允许光学检测并具有低背景荧光。
“先兆子痫的症状”意指任何下列：(1)妊娠20周后心脏收缩压(BP)＞140mmHg和心脏舒张BP＞90mmHg，(2)新出现的蛋白尿(1+by dipstik尿液分析，在24小时尿收集物中＞300mg蛋白，或随机尿蛋白/肌氨酸酐比例＞0.3)，和(3)产后12周高血压和蛋白尿消失。先兆子痫的症状还可以包括肾失调和肾小球内皮增生或肥大。“惊厥的症状”意指由于妊娠或近期妊娠的影响而导致形成任何下列症状：痉挛，昏迷，血小板减少症，肝水肿，肺水肿，和脑水肿。
“治疗性的量”意指当施用给患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的患者时，施用的量足以引起本文所述的妊娠相关高血压病症的症状的质或量上的减弱。治疗性的量还可以意指当施用给患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的患者时，施用的量足以引起任何一种或多种下列蛋白表达水平降低：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β葡萄糖苷酶。治疗性的量还可以意指当施用给患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的患者时，施用的量足以引起任何一种或多种下列蛋白表达水平提高：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关的蛋白I5羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。测量多肽或编码上述多肽的核酸的表达水平的测定法是本领域已知的，其中一些在本文进行了介绍。
“治疗”意指施用化合物或药物组合物用于预防和/或治疗性目的。“治疗疾病”或用作“治疗性处理”指向已经患疾病的个体实施治疗以改善个体的善。优选地，基于下面所述的任何特征性症状的鉴定或本文所述的诊断性方法的使用，个体被诊断为患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。“预防疾病”指尚未发病，但其易感，或有发展成特定疾病的危险的个体的预防性治疗。优选利用本文所述的诊断性方法，确定个体有发展成妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的危险。因而，在权利要求书和实施方案中，治疗是为了治疗性或预防性的目的来对哺乳动物实施的处理。
“滋养层”意指覆盖囊胚泡的mesectodermal细胞层，其侵蚀子宫粘膜并且通过它，胚胎接收来自母亲的营养；所述细胞有助于胎盘的形成。
“载体”意指一种DNA分子，通常衍生自质粒或噬菌体，可以将DNA片段插入或克隆入其中。重组载体将包含一个或多个独特的限制性位点，并且可能能够在指定的宿主或中介生物中自主复制，从而使得克隆的序列可以复制。载体包含可操作性连接到基因或编码区上的启动子，从而在转染入受体细胞中后，RNA得以表达。
由下列本发明的优选实施方案的介绍以及由权利要求书，本发明的其它特征和优点将是显而易见的。
附图简述
图1是显示大于1.0的表达率的累积分布函数(CDF)的图。软件BADGE(Bayesian Anasysis of Gene Expression)v1.0实施Bayesian法以鉴定不同实验条件下差异表达的基因。以给予表达数据的提高倍增表达的条件概率顺序排列基因；零概率值为0.5。理想的CDF具有在零概率值附近的大多数基因，少数基因具有高或低的概率。对于0.5％的假阳性率，我们选择了78个基因，42个上调而36个下调。
图2是显示利用BADGE程序基于mRNA表达在正常对先兆子痫胎盘中的预测性基因组的彩图。行代表先兆子痫的预测性基因而列代表相对于平均基因表达对于给定患者的表达水平。预计的1.0％假阳性率生成127个基因的预测性基因组，分别是65个上调而62个下调。显著上调的基因包括可溶性fms样酪氨酸激酶1和卵泡抑制素-相关蛋白。来自3个前期胎盘的mRNA表达模式也显示为其它对照。
图3显示利用Cluster和Treeview分级聚类affymetrix患者数据(通过Michael Eisen，Stanford University)。标记为P的样品是先兆子痫患者而标记为N的患者是正常的妊娠患者。利用存在和表达标准从12625到3564个基因中过滤出数据组，得到的组是集中于中间的并且对于基因和阵列进行标准化。我们使用分级聚类来分析基因中可能的分类。聚类包括sFlt1以及在文献中确认的其它基因。
图4是显示在先兆子痫中FIt-1和sFlt-1的mRNA表达的放射自显影照片。通过RNA印迹分析来测定来自3位患有先兆子痫的患者(Pl，P2，P3)和3位正常孕妇(Nl，N2，N3)的胎盘sFlt-1的mRNA表达。较高的条带(7.5kb)是全长FIt-I mRNA，而较低的更丰富的条带(3.4kb)是可变剪接的sFlt-1mRNA。肌动蛋白被包括为对照而28S显示为箭头。
图5是一组显示在正常和先兆子痫胎盘中FIt-I表达的免疫组织化学的图。在这些实验中使用针对人FIt-I的单克隆抗体。这里显示的数据通过先兆子痫胎盘的syncitiotrophoblasts证明FIt-I的表达提高。
图6A显示卵泡抑制素相关蛋白(FLRG)的氨基酸序列(SEQ IDNO：1)。图6B显示卵泡抑制素相关蛋白的DNA序列(FLRG)(SEQ IDNO：2)。
图7A显示白介素8的氨基酸序列(SEQ ID NO：3)。图7B显示白介素8的DNA序列(SEQ ID NO：4)。
图8A显示抑制素A的氨基酸序列(SEQ ID NO：5)。图8B显示抑制素A的DNA序列(SEQ ID NO：6)。图9A显示VEGF-C的氨基酸序列(SEQ ID NO：7)。图9B显示VEGF-C的DNA序列(SEQ IDNO：8)。图10A显示血管生成素的氨基酸序列(SEQ ID NO：9)。图10B显示血管生成素的DNA序列(SEQ ID NO：10)。
图11A显示β致育素的氨基酸序列(SEQ ID NO：11)。图1IB显示β致育素的DNA序列(SEQ ID NO：12).。
图12显示假想蛋白的DNA序列(SEQ ID NO：13)。
图13A显示白细胞相关的Ig-样受体分泌型蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO：14)。图13B显示白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白的DNA序列(SEQ ID NO：15)。
图14A显示红细胞分化蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO：16)。图14B显示红细胞分化蛋白的DNA序列(SEQ ID NO：17)。
图15A显示脂肪生成抑制因子的氨基酸序列(SEQ ID NO：18)。图15B显示脂肪生成抑制因子的DNA序列(SEQ ID NO：19)。
图16A显示促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO：20)。图16B显示促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白的DNA序列(SEQ ID NO：21)。
图17A显示α-1抗胰凝乳蛋白酶的氨基酸序列(SEQ ID NO：22)。图17B显示α-1抗胰凝乳蛋白酶的DNA序列(SEQ ID NO：23)。
图18A显示胰岛素样生长因子结合蛋白的氨基酸序列-5(SEQ IDNO：24)。图18B显示胰岛素样生长因子结合蛋白的DNA序列-5(SEQID NO：25)。
图19显示CD33L的氨基酸序列(SEQ ID NO：26)。
图20A显示细胞因子受体样因子1的氨基酸序列(SEQ ID NO：27).图20B显示细胞因子受体样因子1的DNA序列(SEQ ID NO：28)。
图21显示血小板衍生的内皮生长因子的氨基酸序列(SEQ IDNO：29)。
图22A显示赖氨酰羟化酶同种型2的氨基酸序列(SEQ ID NO：30)。图22B显示赖氨酰羟化酶同种型2的DNA序列(SEQ ID NO：31)。
图23A显示stanniocalcin前体的氨基酸序列(SEQ ID NO：32)。图23B显示stanniocalcin前体的DNA序列(SEQ ID NO：33)。
图24A显示分泌型卷曲相关蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO：34)。图24B显示分泌型卷曲相关蛋白的DNA序列(SEQ ID NO：35)。
图25A显示半凝乳素-3的氨基酸序列(SEQ ID NO：36)。图25B显示半凝乳素-3的DNA序列(SEQ ID NO：37)。
图26A显示α防御素的氨基酸序列(SEQ ID NO：38)。图26B显示α防御素的DNA序列(SEQ ID NO：39)。
图27A显示ADAM-TS3的氨基酸序列(SEQ ID NO：40)。图27B显示ADAM-TS3的DNA序列(SEQ ID NO：41)。
图28显示缩胆囊素前体的DNA序列(SEQ ID NO：42)。
图29A显示干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体的氨基酸序列(SEQ ID NO：43)。图29B显示干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体的DNA序列(SEQ ID NO：44)。
图30A显示azurocidin的氨基酸序列(SEQ ID NO：45)。图30B显示azurocidin的DNA序列(SEQ ID NO：46)。
图31A显示精胺氧化酶的氨基酸序列(SEQ ID NO：47)。图31B显示精胺氧化酶的DNA序列(SEQ ID NO：48)。
图32A显示UDP糖基转移酶2家族多肽B28的氨基酸序列(SEQID NO：49)。图32B显示UDP糖基转移酶2家族多肽B28的DNA序列(SEQ ID NO：50)。
图33A显示神经营养酪氨酸激酶受体2的氨基酸序列(SEQ IDNO：51)。
图33B显示神经营养酪氨酸激酶受体2的DNA序列(SEQ IDNO：52)。
图34A显示中性肽内切酶的氨基酸序列(SEQ ID NO：53)。图34B显示中性肽内切酶的DNA序列(SEQ ID NO：54)。
图35A显示CDC28蛋白激酶调控亚基2的氨基酸序列(SEQ IDNO：55)。图35B显示CDC28蛋白激酶调控亚基2的DNA序列(SEQID NO：56)。
图36显示β葡萄糖苷酶的DNA序列(SEQ ID NO：57)。
图37A显示羊毛甾醇合酶的氨基酸序列(SEQ ID NO：58)。图37B显示羊毛甾醇合酶的DNA序列(SEQ ID NO：59)。
图38显示钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶的DNA序列(SEQID NO：60)。
图39显示雌激素受体-可变剪接的转录本H的DNA序列(SEQ IDNO：61)。
图40A显示趋化因子(CX3C基序)受体1的氨基酸序列(SEQ IDNO：62)。图40B显示趋化因子(CX3C基序)受体1的DNA序列(SEQID NO：63)。
图41A显示酪氨酸酶相关蛋白1的氨基酸序列(SEQ ID NO：64)。图41B显示酪氨酸酶-相关蛋白1的DNA序列(SEQ ID NO：65)。
图42显示羟基-δ-5-类固醇脱氢酶的DNA序列(SEQ ID NO：66)。
图43A显示二氢嘧啶酶样-4的氨基酸序列(SEQ ID NO：67)。图43B显示二氢嘧啶酶样-4的DNA序列(SEQ ID NO：68)。
图44显示细胞色素P450家族11的氨基酸序列(SEQ ID NO：69)。
发明详述
为了鉴定涉及妊娠相关高血压病症，如先兆子痫的发病机理的分泌型因子，我们利用Affymetrix U95A微阵列芯片对来自19位患有先兆子痫的妇女和15位正常妊娠妇女的胎盘组织的基因表达模式进行了检测。利用计算机程序BADGE(Bayesian Analysis of DifferentialGene Expression version 1.0)(http://genomethods.org/badge)(见Ramoniand Sebastiani，in Berthold and Hand eds.Intelligent Data Analysis：AnIntroduction，Springer，New York，NY(1999))和分级聚类分析(Eisen等，Proc.Natl.Acad.Sd.，95：14863-8(1998))分析数据以在不同实验条件下差异表达的基因。我们发现在取自患有先兆子痫的妇女的血液样品中，编码下列分泌型多肽的基因显示表达提高：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3。我们还发现在取自患有先兆子痫的妇女的血液样品中，编码下列分泌型多肽的基因显示表达降低：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin。此外，我们还发现在来自患有先兆子痫的妇女的胎盘中编码下列细胞内多肽或酶的基因显示表达提高：精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β葡萄糖苷酶。在来自患有先兆子痫的妇女的胎盘中编码下列细胞内基因多肽的基因显示表达降低：羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。
为了以下说明的目的，上述所有多肽统一称为“本发明的多肽”。尽管本文给出的详细说明具体涉及到与特定GenBank编号相关联的多肽，但是对于本领域技术人员显而易见的是，所述详细说明还可以应用于特定多肽的家族成员，同种型，同源物，和/或变体。
我们还发现降低下列多肽的任何一种或多种的表达或生物学活性的治疗剂：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3，或提高任何一种或多种下列多肽的表达或生物学活性的试剂：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，或azurocidin，可以用于治疗或预防个体中的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。这些试剂包括，但不限于，抗体，用于反义或RNAi的核碱寡聚物，纯化的天然或合成性化合物，化学化合物，和小分子。
本发明还特别涉及测量任何一种或多种本发明的多肽或编码本发明多肽的核酸的水平的方法，作为妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的早期诊断和处理的检测工具。
诊断学
本发明特别涉及基于本发明至少一种多肽的检测的测定法，以诊断妊娠相关高血压病症，如先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向性。本发明还特别涉及基于本发明的至少两种，至少三种，至少四种，或至少五种或更多种多肽的检测的诊断性测定法，以诊断妊娠相关高血压病症，如先兆子痫，惊厥，或患这些病症的倾向。在个体样品中测量任何一种或多种本发明的多肽(游离的，结合的，或总水平、)的水平，并用作妊娠相关高血压病症，如先兆子痫，惊厥，或患这些病症的倾向的指征。诊断性方法还可以结合检测妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的任何其它标记的水平的方法，所述标记如可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF，或PlGF。在一个实施方案中，利用度量标准并入任何一种或多种本发明的多肽，可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF，或PlGF，或其任意组合的水平，来检测所述多肽的至少两种的水平之间关系是否是先兆子痫或惊厥的指征。
可以利用标准方法来测量任何体液中任何一种或多种本发明多肽的水平，所述体液包括，但不限于，尿，血液，血清，血浆，唾液，羊水，或脑脊液。这些方法包括利用针对本发明多肽的抗体的免疫测定法，ELISA，蛋白质印迹，和定量酶免疫测定法技术如在Ong等(Obstet.Gynecol.98：608-611，2001)和Su等(Obstet.Gynecol.，97：898-904，2001)中所述的那些。对于测量本发明的多肽的水平来说，ELISA测定法是优选的方法。在优选的实施方案中，测量卵泡抑制素相关蛋白，抑制素-A，β致育素，或胰岛素样生长因子结合蛋白-5的水平。在另一种优选的实施方案中，还测量体质指标(BMI)和胎儿的妊娠时间，并包括诊断性度量标准。例如，如果任何下列多肽的水平相对于参照样品提高：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％或更高)，这被认为是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的指征。在另一个实施例中，如果下列蛋白质的任何一种的水平相对于参照样品降低：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高)，这被认为是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的指征。
还可以结合本发明的任何诊断性方法来利用测量sFlt-1，VEGF，PlGF，和/或可溶性endoglin的度量标准。例如，结合任一种或多种本发明的多肽的测量，利用PAAI(sFlt-1/VEGF+PlGF)，作为抗血管生成指标，这是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向性的诊断。PAAI(sFlt-1/VEGF+PlGF)仅仅是有用的度量标准的一个实例，其可以用作诊断性指征。它并不意在限制本发明。另一个实例是下列可溶性endoglin抗血管生成指标：(sFlt-1+0.25(可溶性endoglin多肽))/PlGF。事实上任何相对于参照样品检测个体中任何本发明的多肽，可溶性endoglin，sFlt-1，PlGF，或VEGF，或其任意组合的水平变化的度量标准都可以用作诊断性指征。可以用在本发明的诊断方法中的度量标准的一个实例是(sFlt1+可溶性endoglin+卵泡抑制素相关蛋白)/PlGF。
特定核酸或多肽的表达水平可以与特定疾病状态(例如，妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥)相关联，因而可用于诊断。衍生自编码本发明多肽的核酸序列的寡核苷酸或更长片段可以用作探针不仅监测表达，还鉴定在编码本发明多肽的核酸分子中具有遗传变异，突变，或多态性的个体，它是发展成所述病症的倾向的指征。这些多态性可以影响核酸或多肽表达水平或生物学活性。相对于正常的参照样品，遗传变异，突变，或多态性的检测可以用作妊娠相关高血压病症，如先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向的诊断性指征。
这些遗传改变可以存在于启动子序列，开放阅读框，内含子序列，或基因的非翻译3’区。与遗传改变相关的信息可以用于诊断个体为患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向。如通篇所注，任何本发明的多肽或其任意组合的生物学活性水平的特定改变，都可以与发展成妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或形成这些病症的倾向的概率相关联。作为结果，检测出给定突变的本领域技术人员，随后可以测定多肽的一种或多种生物学活性以确定突变是否引起或增强先兆子痫或惊厥的概率。
在一个实施方案中，患有先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向性的个体将显示编码本发明多肽的核酸表达的改变。检测核酸中这些改变的方法是本领域标准性的，并且描述于Ausubel等，同上中。在一个实施例中利用RNA印迹法或实时PCR来检测编码任何本发明多肽的核酸的mRNA水平。
在另一个实施方案中，能够检测编码本发明多肽的核酸分子，包括基因组序列，或密切相关分子的PCR探针杂交，可以用于杂交衍生自个体的核酸序列，所述个体患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或具有形成这些病症的危险。无论它制自高特异性区域，例如，5′调控区，或制自低特异性区域，例如，保守性基序，探针的特异性，以及杂交或扩增的严格度(最大，高，中等，或低)，决定了探针是否杂交到天然发生的序列，等位基因变体，或其它相关序列上。杂交技术可以用于鉴定妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的指征性突变，或可以用于监测编码本发明多肽的基因的表达水平(例如，通过RNA印迹分析，Ausubel等，同上)。
患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向性的个体相对于参照样品或水平将显示下列分泌型或细胞内多肽或编码选自下列分泌型或细胞内多肽的核酸的表达升高(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高)：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β葡萄糖苷酶，相对于参照样品。患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向性的个体相对于参照样品或水平将显示下列分泌型或细胞内多肽或编码选自下列分泌型或细胞内多肽的核酸的表达升高(例如，10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高)：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11，相对于参照样品。
已知多种方案测量这些多肽表达的变化，包括免疫方法(如ELISAs和RIAs)，并提供诊断妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或形成这些病症的危险的基础。
在一个实施方案中，结合可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF，或PlGF多肽或核酸，或其任意组合的水平来测量至少一种多肽或编码本发明多肽的核酸的水平。测量sFlt-1，VEGF，PlGF，和可溶性endoglin的方法描述于美国专利申请公开号美国专利申请公开号20040126828，20050025762，和20050170444；PCT公开号WO 2004/008946和WO2005/077007；和美国专利申请系列号11/235,577中，特此将上述文献全部并入本文作为参考。
在一个实施例中，优选至少分两次测量本文所述的任何核酸或多肽以及随着时间的水平变化被用作妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或形成这些病症的倾向性的指征。在另一个实施例中，将本文所述的任何核酸或多肽的测量与参照样品相比较并将与正常参照水平相比的改变用作妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或形成这些病症的倾向性的指征。
相对于参照样品相同多肽的水平，在患有先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向性的个体体液中任何本发明的多肽水平可以变化少至10％，20％，30％，或40％，或多达50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高。随着时间从一次测量到下一次测量，在患有先兆子痫，惊厥，或形成这些病症的倾向性的个体体液中任何本发明的多肽水平可以变化少至10％，20％，30％，或40％，或多达50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高。
在一个实施方案中，在妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的症状出现之前于妊娠早期收集体液的个体样品(例如，尿，血浆，血清，羊水，或脑脊液)。在另一个实施例中，样品可以在妊娠相关高血压病症症状出现之前于妊娠早期收集体液组织或细胞。非限制性的例子包括胎盘组织，胎盘细胞，内皮细胞，和白细胞如单核细胞。在人类中，例如，在妊娠的第一、第二或第三个三月期期间，从孕妇的肘前静脉采集孕妇血清样品。优选地，在第个三月期期间，例如，第4，6，8，10，或12周，或第二个三月期期间，例如第14，16，18，20，22，或24周进行测定。这类测定还可以在第二个三月期或第三个三月期末期，例如第26，28，30，32，34，36，38，或40周进行。优选在此期间对一种或多种本发明的多肽水平测量两次。对于产后先兆子痫或惊厥的诊断，在产物进行测定。对于妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的诊断，可以在妊娠出现之间进行测定。在一个实施例中，对于疗法的监测和管理，在先兆子痫的诊断之后但是在妊娠期间进行测定。
在一个特定的实施例中，在妊娠期间采集体液样品(例如，血液，血清，血浆，尿，羊水，和脑脊液)并通过ELISA测定至少一种本发明多肽的水平。在另一个实施例中，在第二个三月期期间和第三个三月期早期采集样品，从第一次取样到下一次取样的本发明多肽的水平提高或降低是先兆子痫或惊厥，或形成这些病症的倾向的指征。在另一个特定实施例中，在妊娠期间可以收集系列血液样品并通过ELISA测定任何一种或多种本发明多肽的水平。在另一个实施例中，在第二个三月期期间和第三个三月期早期采集样品，从第一次取样到下一次取样的任何一种或多种本发明多肽的水平变化是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或形成这些病症的倾向的指征。
在兽医学实践中，可以在妊娠期间任何时间进行测定，但优选在妊娠早期进行，在妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的症状出现之间。已知物种之间的妊娠期相差很大，由兽医确定测定的时间，但一般将对应于人妊娠期间的测定时间。
本文所述的诊断性方法可以单独使用或结合本文所述的任何其它诊断性方法使用，以便更加精确地诊断妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的存在、严重性，或评估其发病时间。例如，最初可以利用使用编码本发明多肽的核酸的诊断性方法，随后可以利用标准免疫学方法(例如，蛋白质印迹或ELISA)来确认多肽的表达增多。此外，可以结合任何其它诊断性方法来使用本文所述的诊断性方法，所述其它诊断性方法被确定可以用于精确诊断妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的存在、严重性，或评估其发病时间。本文所述的诊断性方法还可以用于监测和管理个体中的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。
可以单独考虑每一种多肽或编码本发明多肽核酸的表达水平，尽管提供两种或多种本发明多肽或编码本发明多肽的核酸的组合用于本发明的方法中以及本发明的组合物中以提高分析可信度是在本发明的范围之内。一组包含两种或多种本发明的多肽，或其片段，两种或多种，2-5，5-10，10-15，15-20，20-25或25种以上的核酸分子，或其片段或互补核酸分子，或两种或多种结合分子，如识别本发明多肽的抗体。在一个实施方案中，选择这些组的本发明的多肽，从而使任何一种内的本发明多肽都共有某些特征，如本文所示在来自先兆子痫妇女的样品中增多的多肽。类似地，不同组的本发明的多肽可以由代表不同阶段的妊娠相关高血压病症的本发明的多肽组成，例如对于中度先兆子痫的分离组，来服务于先兆子痫，惊厥。本发明的多肽还可以包括特异性结合sFlt-1，VEGF，PlGF，和可溶性endoglin的结合分子(例如，抗体)，并且可以进一步提供在生物芯片上，如下面所讨论的。
诊断试剂盒
本发明还提供诊断性检验试剂盒。所述诊断性检验试剂盒包括实施任上述诊断性测定法所必需的组分或试剂，和使用所述组分或试剂的说明书，以诊断妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的倾向。例如，诊断性检验试剂盒可以包括针对任何本发明多肽的抗体，和检测，更加优选评估抗体和本发明多肽之间结合所必需的组分。可用于本发明的诊断性方法和试剂盒中的抗体的非限定性实例包括人FLRG抗体，目录号AF1288，R&D系统，Minneapolis，MN和人分泌型卷曲相关蛋白抗体，目录号AF 1384，R&D系统，Minneapolis，MN。对于检测，将抗体或本发明多肽进行标记，并将抗体或本发明多肽进行底物结合，从而可以通过测定抗体和本发明多肽之间结合后附于底物上的标记量来确证本发明的多肽-抗体的相互作用。常规ELISA是用于检测抗体-底物相互作用的通用的本领域已知的方法，并且可以与本发明的试剂盒一起提供。本发明的多肽可以在实际上任何体液中进行检测，包括，但不限于尿，血清，血浆，唾液，羊水，或脑脊液。本发明还提供包括编码本发明多肽的核酸的诊断性检验试剂盒，其可以用于检测和测定编码本发明多肽的核酸的水平。相对于参照，如存在于正常对照中的水平，测定本发明多肽水平变化的试剂盒，可用作本发明的方法中的诊断试剂盒。
本发明的诊断试剂盒还可以包括抗体或核酸，以检测可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF，或PlGF多肽或核酸，如美国专利申请公开号20040126828，20050025762，和20050170444；PCT公开号WO2004/008946 and WO 2005/077007；和美国专利申请系列号11/235,577中所述。
有利地，试剂盒包括任何实施上述任何诊断性方法所需的组分。在本发明的一个实施方案中，这种试剂盒包括涂布以初始试剂(例如，识别抗原的抗体或蛋白)的固体支持物(例如，膜或微量滴定板)，用于制备标准曲线的纯化蛋白标准溶液，用于分析运行的质检的体液(例如血清或尿)对照，缀合标记或酶如辣根过氧化酶或其它标记的次级试剂(例如，与待检测抗原中的第二个表位反应的二抗，或识别一抗的抗体或蛋白)，底物溶液，终止溶液，洗涤缓冲液和说明书手册。膜可以支持在标尺结构上，在那里通过将标尺结构置入样品中而将样品沉积于膜上，或者可以将膜支持在侧流盒中，在那里通过盒中的开口将样品沉积在膜上。试剂盒还可以是阵列的格式并且可以包括排列在生物芯片，如，例如，GeneChipTM上的本发明的多肽或特异性结合本发明多肽的结合分子的阵列。
所述诊断试剂盒一般还包括标记或使用试剂盒组分和用于建立标准曲线的参照样品或纯化蛋白的说明书。在一个实施例中，所述试剂盒包含使用试剂盒来诊断妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或发展成先兆子痫或惊厥的倾向的说明书。在又一个实施例中，该试剂盒包含使用试剂盒来监测治疗性处理或剂量方案用于治疗妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的说明书。将会理解的是参照样品值将取决于试剂盒所希望的用途。例如，样品可以与正常的参照值相比，其中一种或多种本发明多肽水平的变化或利用一种或多种本发明多肽水平的度量标准是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或先兆子痫或惊厥倾向的指征。在另一个实施例中，用于治疗性监测的试剂盒可以具有参照值，其是妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的指征，其中相对于参照样品一种或多种本发明多肽水平的变化或利用一种或多种本发明多肽水平的度量标准可以用于指示治疗效力或治疗性化合物的有效剂量。
阵列和生物芯片
本发明还包括包含一组本发明多肽的阵列。该阵列可以用于测定阵列中一种或多种基因或多肽的表达。
本领域技术人员将会理解的是可以将本发明多肽组提供在固体支持物，如生物芯片上。例如，可以将多核苷酸偶联到阵列(例如，利用Gene芯片TM进行杂交分析的生物芯片)，树脂(例如，可以填塞到柱中进行柱层析的树脂)，或基质(例如，用于RNA印迹分析的硝化纤维素基质)。与编码任何本发明多肽的核酸分子互补的核酸分子的固定，不管是共价的抑或是非共价的，可以进行样品中每一种编码本发明多肽的核酸分子的存在或活性的离散分析。在阵列中，例如，与一组编码本发明多肽的核酸分子的每个成员互补的多核苷酸可以单独附着到阵列上不同的，已知的位置上。该阵列可以与，例如，提取自个体体液，组织，或细胞样品的多核苷酸相杂交。来自样品的多核苷酸与阵列在阵列的任意位置上的杂交都可以检测到，因而可以确定样品中编码本发明多肽折核酸或转录本的存在或量。在一个实施方案中，采用基于生物芯片的阵列。类似地，可以利用蛋白阵列或抗体阵列进行免疫分析，所述蛋白阵列或抗体阵列包括对本发明多肽特异性的免疫抗体或其它结合分子。这些蛋白阵列可以与体液，组织，或细胞样品杂交，所述样品包含来自个体的本发明多肽或针对本发明多肽的抗体。阵列和生物芯片的实例的其它细节可以见于，例如，美国专利申请公开号20050266409，将所述公开号并入本文作为参考。例示性结合分子和抗体
下面介绍可以用在本发明的诊断性方法和试剂盒中的抗体和结合蛋白的例子。下面介绍的抗体还可以用在本发明的治疗性方法中，并可以进行修饰以提高效能或稳定性或减弱对抗体的反应性。这些例子意在举例说明本发明而非以任何方式限制本发明。
卵泡抑制素相关蛋白
卵泡抑制素相关蛋白，也称作FLRG，FSRP，FRP，FLS-I，和FSTL1，是与卵泡抑制素相关的蛋白质。卵泡抑制素一种分泌型糖蛋白，它在体外和体内结合活化素并抑制活化素的生物学功能。卵泡抑制素相关蛋白还以高亲和力结合活化素并在真皮和表皮之间的基膜中和血管周围表达。编码卵泡抑制素相关蛋白的基因，FLRG，在伤口愈合过程中得以诱导(Wankell等，J.Endocrin.171：385-395(2001)和Tortoriello等，Endocrinology U2-3A26-3434(2001))。
活化素和其它TGFβ超家族成员，或其片段，可以用作特异性结合分子以检测生物学样品中的卵泡抑制素相关蛋白。还可以用于检测生物学样品中的卵泡抑制素相关蛋白的特异性结合卵泡抑制素相关蛋白的例示性抗体包括在Tortorielle等，同上中描述的多克隆FSRP抗体，和可获自Abnova Corporation(例如，目录号H00010468-A01)的抗体，以及人FLRG抗体，R&D系统(例如，目录号AF1288和AF1694)。
抑制素A
抑制素是二硫键连接的二聚体糖蛋白，其由α-亚基和两个β-亚基其中之一组成。抑制素是TGFβ超家族的成员，在肾上腺皮质中表达。一种假说认为抑制素的作用是抑制素结合膜结合型丝氨酸-苏氨酸激酶ActRII亚基，并阻抑信号产生亚基(ActRI)的磷酸化作用，由此对抗活化素的激活。特异性结合抑制素A的蛋白的一个实例是β多糖(Vale等，Ann.N.Y Acad.Sci.1038：142-147(2004)。β)多糖，或其片段，可以用作特异性结合分子以检测生物学样品中的卵泡抑制素相关蛋白。特异性结合抑制素A的抗体，或其抗原结合片段的例子包括可获自Abnova Corp.(例如，目录号H00003624-A01)的抗体，Abeam(例如，目录号AblO599，Ab724)，和Genetex(例如，目录号GTX10599和GTX20724)，以及在Rishi等，Am.J.Surg.Pathol.21：583-589(1997)中描述的抗体，其还可以用于检测生物学样品中的抑制素A。
β致育素
β致育素，也称作致育素β，是一种精蛋白，它是介导精子和卵子原生质膜结合与融合的候选分子。致育素是一种异二聚体，具有一个与整合素配体的解聚素家族有同源性区域的β亚基，和一个与病毒融合肽有同源性区域的α亚基。致育素α和β还显示与热激蛋白cahnegin相互作用(Ikawa等，Dev.Biol 240：254-261(2001)和Evans等，Dev.Biol.187：94-106(1997))。
Calmegin，或其片段，可以用作特异性结合分子以检测生物学样品中的β致育素。还可以用于检测生物学样品中的β致育素的特异性结合β致育素的抗体，或其抗原结合片段的实例包括在Ikawa等，同上中所述的抗体，以及可由Chemicon(例如，目录号MAB 19292和19030)和United States Biological(例如，目录号A0858-070)商购的抗体。
胰岛素样生长因子结合蛋白-5
胰岛素样生长因子结合蛋白-5，也称作IGFBP-5或ILGFBP-5，是胰岛素样生长因子结合蛋白超家族的成员，它是富含半胱氨酸的蛋白，保守性半胱氨酸残基聚集在分子的氨基末端和羧基末端区域。IGFBP-5与IGF-I相互作用并作用来抑制IGF-I的存活作用(Tonner等，Development 129：4547-4557(2002))并调节IGF-I配体-受体相互作用(Tonner等，Adv.Exp.Med.Biol.480：45-53(2000))。其它IGFBP-5结合蛋白包括血纤维蛋白溶酶原激活剂抑制剂-1(Tonner等，J.Endocrinol.167：265-73(2000))和αs2-酪蛋白(Tonner等，Adv.Exp.Med.Biol.480：45-53(2000))。
IGF，血纤维蛋白溶酶原激活剂抑制剂-1，αs2-酪蛋白，或其任意片段，可以用作特异性结合分子以检测生物学样品中的IGFBP-5。还可以用于检测生物学样品中的IGFBP-5的特异性结合IGFBP-5的抗体，或其抗原结合片段的实例包括来自Diagnostic Systems LaboratoriesInc.(例如，目录号R00737)，Alpha Diagnostic International(例如，目录号IGFBP5-1s)和Abeam(例如，目录号Ab4257)的抗体。
分泌型卷曲相关蛋白
分泌型卷曲相关蛋白是分泌型蛋白家族，其包含N-末端信号肽，卷曲相关的CRD，和与netrins具有某种同源性的C-末端亲水性区域，但是没有任何跨膜结构域的证据。
分泌型卷曲相关蛋白似乎充当Wnt信号的可溶性调节剂，可能是通过与膜卷曲受体竞争结合分泌型Wnt配体。
任何Wnt家族成员蛋白，或其任意片段，可以用作特异性结合分子以检测生物学样品中的分泌型卷曲相关蛋白。特异性结合分泌型卷曲相关蛋白并且可以用于检测生物学样品中的分泌型卷曲相关蛋白的抗体实例是来自R&D系统的人分泌型卷曲相关蛋白抗体(目录号AF 1384)。
筛选测定法
如上面所讨论的，一种或多种本发明的多肽或编码本发明多肽的核酸的表达水平在患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或形成这些病症的倾向性的个体中有所改变。基于这些发现，本发明的多肽(细胞内型和分泌型)可用于高通量低成本筛选候选化合物以鉴定调节本发明的多肽或编码本发明多肽的核苷酸的那些化合物，本发明多肽的表达在患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的个体中有所改变。
可以使用任何方法来实施筛选测定以鉴定改变编码本发明多肽的核酸分子的表达的新候选化合物。在一个实施例中，向表达编码本发明多肽的核酸序列的培养细胞的培养基中加入不同浓度的候选化合物。例示性的细胞培养物包括任何哺乳动物，酵母，昆虫，或细菌性细胞培养物。优选的细胞培养物包括哺乳动物细胞培养物如滋养层(例如，BEWO，JAR，和JEG细胞)和HUVECs。这些细胞随后可以用来，筛选新候选化合物。随后测量基因表达，例如，通过微阵列分析，RNA印迹分析(Ausubel等，同上)，或RT-PCR，利用制备自所述核酸分子的任何合适片段作为杂交探针。将存在候选化合物时的基因表达水平与缺失候选化合物时在对照培养基中测量的水平相比较。被认为可用于本发明的化合物是这样的，其促进选自下列多肽组的多肽，或其片段，或编码所述多肽，或其片段的核酸分子的表达下降：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β-葡萄糖苷酶。其它有用的化合物是促进选自下列多肽组的多肽，或其片段，或编码所述多肽，或其片段的核酸分子的表达提高：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin，或促进来自个体的样品中下列细胞内多肽，或其片段的任一种的水平提高：羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。这些化合物可以用作，例如，治疗剂以治疗个体中的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。
在另一个实施例中，利用相同的通用方法和标准免疫技术，如使用对于本发明多肽特异性的抗体的蛋白质印迹或免疫沉淀，可以在多肽生产的水平上测量候选化合物的影响。例如，免疫测定法可以用于检测或监测生物中本发明多肽的至少一种的表达。能够结合这种多肽的多克隆或单克隆抗体(如上所述产生)可以以任何标准免疫测定方式(例如，ELISA，蛋白印迹，或RIA测定法)用来测量所述多肽的水平。在一些实施方案中，认为促进本发明多肽的表达或生物学活性降低的化合物特别有用。再者，这种分子可以用作，例如，治疗剂以延缓，改善，或治疗个体中妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或妊娠相关高血压病症的症状。
在又一个实施例中，可以筛选候选化合物以鉴定特异性结合本发明多肽的化合物。这种候选化合物的效力依赖于其与这种多肽或春功能等同物相互作用的能力。这种相互作用可以艇任何标准结合技术和功能测定法(例如，在Ausubel等，同上中描述的那些)轻易地测定。在一个实施方案中，可以在体外检测候选化合物特异性结合本发明多肽的能力。
在另一个实施例中，编码本发明多肽的核酸与可检测的报告物表达为转录或翻译融合蛋白，并在异源启动子，如可诱导启动子的控制下在分离的细胞(例如，哺乳动物或昆虫细胞)中表达。随后将表达融合蛋白的细胞接触候选化合物，并将该细胞中可检测报告物的表达与未经处理的对照细胞中可检测报告物的表达相比较。改变了(例如，提高或降低)融合到可检测报告物上的本发明多肽的表达的候选化合物是可用于治疗妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的化合物。
在一个特定实施例中，可以利用基于层析的技术来鉴定结合本发明多肽的候选化合物。例如，可以通过标准技术从工程改造表达所述多肽(例如，上述那些)的细胞中纯化出本发明的重组多肽，并可以固定在柱上。随后将候选化合物溶液穿过柱，在其结合所述多肽能力的基础上鉴定对于固定的本发明多肽特异性的化合物，并将其固定于柱上。为了分离化合物，洗涤柱以除去非特异性结合的分子，随后从柱上释放并收集目标化合物。可以使用类似的方分离结合到多肽微阵列上的化合物。如果需要，可以将通过这种方法(或任何其它合适的方法)分离的化合物作进一步纯化(例如，通过高效液相层析)。此外，可以测试候选化合物改变(例如，提高或降低)本发明多肽活性的能力。还可以将通过这种方法分离的化合物用作，例如，治疗剂来治疗个体中的妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。被鉴定为以小于或等于10mM的亲和力常数结合本发明多肽的化合物据认为在本发明中特别有用。或者，可以利用任何体内蛋白质相互作用检测系统，例如，任何双杂交测定法来鉴定结合本发明多肽的化合物或蛋白。
潜在拮抗剂包括结合本发明的多肽或编码本发明多肽的核酸序列的有机分子，肽，肽模拟物，多肽，核酸，和抗体。
编码本发明多肽的DNA序列还可以用于发现和开发治疗性化合物来妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。在表达后，编码的多肽可以用作靶标来筛选药物。此外，可以通过标准技术分离编码多肽氨基末端区域的DNA序列或Shine-Delgarno或其它翻译促进序列(Ausubel等，同上)。
任选地，利用如本文所述的那些标准测定法，可以确认在上述任何测定法中鉴定的化合物可用于化合物测定，所述化合物改变(例如，提高或降低)本发明多肽的生物学活性。
本发明的小分子优选具有低于2,000道尔顿的分子量，更加优选在300和1,000道尔顿之间，最优选在400和700道尔顿之间。优选这些小分子是有机分子。
测试化合物和提取物
通常，根据本领域已知的方法，由天然产物或合成性(或半合成性)提取物大型文库或化学品文库或由多肽或核酸文库来鉴定能够改变(例如，提高或降低)本发明多肽活性的化合物。药物发现和开发领域的技术人员将会理解，测定提取物或化合物的精确来源对于本发明的筛选方法并非关键性的。用在筛选中的化合物包括已知的化合物(例如，用于其它疾病或病症的已知的治疗剂)。或者，实际上任何数目的未知化学提取物或化合物都可以利用本文所述的方法进行筛选。这些提取物或化合物的实例包括，但不限于，基于植物，真菌，原核生物或动物的提取物，发酵肉汤，和合成性化合物，以及现有化合物的修饰。现有多种方法来生成任何数目的化学化合物的随机或导向性合成(例如，半合成或全合成)物，所述化合物包括，但不限于，基于糖，脂，肽和核酸的化合物。合成性化合物文库可以由BrandonAssociates(Merrimack，NH)和Aldrich Chemical(Milwaukee，WI)商购。或者，以细菌、真菌、植物和动物提取物形式存在的天然化合物文库可以由多种来源，包括Biotics(Sussex，UK)，Xenova(Slough，UK)，Harbor Branch Oceangraphics Institute(Ft.Pierce，FL)，和PharmaMar，U.S.A.(Cambridge，MA)商购。此外，如果需要，根据本领域已知的方法来生产天然和合成性产生的文库，例如，通过标准提取和分馏方法。另外，如果需要，利用标准化学、物理或生化方法轻易修饰任何文库或化合物。
此外，药物发现和开发领域的技术人员容易理解无论何时只要可能就应当采用去重复(例如，分类学去重复，生物学去重复，和化学去重复，或其任意组合)方法，或消除已知其molt-disrupting活性的材料的重复。
当发现粗制提取物改变(例如，提高或降低)本发明多肽的活性至少10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，或更高，或结合本发明的多肽时，进一步对阳性主要提取物进行分馏以分离对观察到的作用负责的化学成分。因而，提取、分馏和纯化过程的目的是仔细表征和鉴定粗制提取物中的化学实体，其改变(例如，提高或降低)本发明多肽的活性。这些异质提取物的分馏和纯化方法是本领域已知的。如果需要，根据本领域已知的方法对显可用作治疗剂来治疗人类妊娠相关高血压病症的化合物进行化学修饰。
治疗剂
本发明特别涉及治疗或预防个体中妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的方法和组合物。我们发现卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3的水平在患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或其倾向的个体中提高。所以，本发明包括降低这些多肽或核酸分子中任何一种或多种的表达水平或生物学活性的方法和试剂。这些试剂包括下调或抑制以上多肽中任何一种或多种的生物学活性的化合物；特异性结合以上多肽中任何一种的纯化抗体或抗原结合片段；反义核碱寡聚物；和靶向任何以上多肽的dsRNAs。下面详细描述这些方法。
我们还发现α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin的水平在患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或形成这些病症的倾向的个体中下降。所以，本发明还包括提高这些多肽或核酸分子中任何一种或多种的表达水平或生物学活性的任何方法和试剂。这些试剂包括上调或提高任何一种或多种以上多肽或多肽本身纯化形式的生物学活性的化合物。
这些方法和试剂可以结合任何其它妊娠相关高血压病症的疗法，如有助于降低sFlt-1或可溶性endoglin水平或提高VEGF或PlGF水平的治疗，如在美国专利申请公开号20040126828，20050025762，和20050170444；PCT公开号WO 2004/008946和WO 2005/077007；和美国专利申请系列号11/235,577中所述。
除了可以提高个体样品中任何一种以上多肽水平的化合物的用途之外，本发明还提供与本文所述治疗性方法结合使用的任何慢性高血压药药物的用途。用于治疗妊娠期间高血压的药物包括甲基多巴，盐酸肼苯哒嗪，或labetalol。对于这些药物的每一种来说，给药方式和剂量都由医生和生产商的说明书来确定。
纯化的蛋白质
在本发明的优选实施方案中，对个体施用任何一种或多种下列多肽的纯化形式：α防御素，AD AM-T S3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin来治疗或预防妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥。
纯化的α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin多肽包括具有与α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin的氨基酸序列同源，更加有利地，基本上相同的氨基酸序列的，其能够诱导血管生成或能够促进血管内皮细胞或脐静脉内皮细胞的选择性生长。
治疗性核酸
最近的工作显示向血管损伤位点递送能够表达内皮细胞有丝分裂原如VEGF的核酸分子(例如，DNA或RNA)将会诱导损伤血管的增生和重新内皮化。尽管本发明并不涉及血管损伤，但这些向内皮细胞递送核酸的通用技术可以用在本发明中以递送编码α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，或azurocidin的核酸。这些通用技术在美国专利号5,830,879和6,258,787中描述，将这些专利号并入本文作为参考。
在本发明中，核酸分子可以是编码任何下列多肽的任何核酸(例如，DNA或RNA)，包括基因组DNA，cDNA，和mRNA，：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，或azurocidin。可以利用本领域常规方法，例如，重组DNA，PCR扩增来获得编码所需蛋白的核酸。
递送核酸的模式
对于本文所述的任何核酸应用来说，可以使用施用核酸的标准方法。例如，为了简化编码任何下列多肽的核酸的操作和处理：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，或azurocidin；优选将核酸插入到一种盒中，在那里核酸被可操作性地连接到启动子上。所述启动子必须能够驱动多肽在所需的靶宿主细胞中表达。可以轻易地实现合适启动子的选择。优选地，将会使用高表达启动子。合适启动子的例子是763个碱基对的巨细胞病毒(CMV)启动子。还可以使用劳氏肉瘤病毒(RSV)(Davis，等，Hum.Gene.Ther.4：151-159，1993)和小鼠哺乳动物肿瘤病毒(MMTV)启动子。某些蛋白可以利用它们的天然启动子进行表达。还可以包括能够增强表达的其它元件(例如，增强子或导致高水平表达的系统如tat基因和tar元件)。重组载体可以是质粒载体如pUC 118，pBR322，或其它已知的包括，例如，大肠杆菌复制起点的质粒载体(见，Sambrook，等，Molecular Cloning：A Laboratory Manual，Cold Spring HarborLaboratory press，1989)。质粒载体还可以包括可选择的标记如带来氨苄抗性的β内酰胺酶基因，条件是标记多肽不会反面影响被治疗生物的新陈代谢。还可以将盒结合到合成性递送系统中的核酸结合部分上，如在PCT公开号WO95/22618中公开的系统。
可以通过任何适于所用载体的方法将核酸导入细胞中。许多这些方法是本领域公知的(Sambrook等，同上，和Watson等，“重组DNA”，Chapter 12，2d edition，Scientific American Books，1992)。重组载体可以通过诸如磷酸钙沉淀，电穿孔，脂质体介导的转染，基因枪，微注射，病毒衣壳介导的传递，polybrene介导的传递，或原生质体融合的方法进行传递。关于脂质体制备、成分的靶向和递送的方法，见Mannino和Gould-Fogerite，(Biotechniques，6：682-690，1988)，Feigner和Holm，(Bethesda Res.Lab.Focus，11：21，1989)和Maurer(Bethesda Res.Lab.Focus，11：25，1989)。
通过直接注射入跨羊水中或静脉内递送可以实现重组载体(质粒载体或病毒载体)的传递。
还可以利用使用腺病毒载体或腺病毒相关载体(AAV)的基因递送。腺病毒存在于大量动物物种中，并不是非常致病性的，并且可以在分裂细胞和静止细胞中充分等同地复制。作为通用规则，用于基因递送的腺病毒缺少病毒复制所需的一种或多种基因。可以根据本领域已知的技术来生产用于用于递送编码所需蛋白的核酸的复制缺陷型重组腺病毒载体(见Quantin等，Proc.Natl.Acad.ScL USA，89：2581-2584，1992；Stratford-Perricadet等，J.Clin.Invest.，90：626-630，1992；和Rosenfeld等，Cell，68：143-155，1992)。基因治疗在子宫中应用的例子见美国专利号6,399,585。
一旦转移，核酸由损伤位点上的细胞表达一段时期，足以提高所需蛋白质的血清水平。因为包含核酸的载体在正常情况下并不并入细胞的基因组中，所以目标蛋白的表达只发生有限的时间。一般，蛋白质在治疗水平上表达两天到几周，优选大约一至两周。可以利用DNA的重复应用以提供治疗性蛋白表达的额外时期。
抑制蛋白质表达的核碱寡聚物
本发明还特别涉及核碱寡聚物下调任何下列蛋白表达的用途：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3。
在一个实施例中，所述核碱寡聚物是反义核碱寡聚物。通过结合到互补核酸序列(有义或编码链)，反义核碱寡聚物能够抑制蛋白表达，可能是通过RNA酶H酶学剪切RNA链。优选反义核碱寡聚物能够在该蛋白表达水平提高的细胞中减少一种或多种上述多肽或编码一种或多种上述多肽的核酸的。相对于用对照核碱寡聚物处理的细胞，优选蛋白表达降低至少10％，更加优选25％，最优选50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高。选择和制备反义核碱寡聚物的方法是本领域公知的。使用反义核碱寡聚物下调VEGF表达的例子见美国专利号6,410,322。测定蛋白表达水平的方法也是本领域公知的，包括蛋白质印迹，免疫沉淀，和ELISA。
本发明还特别涉及利用RNA干涉(RNAi)来抑制下列蛋白中的任何一种或多种的表达：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3。RNA干涉(RNAi)是转录后基因沉默(PTGS)的一种机制，其中将对应于目标基因或mRNA的双链RNA(dsRNA)导入到生物中，导致相应mRNA的降解。在RNAi反应中，将dsRNA分子的有义和反义链都加工成小RNA片段或节段，长度为18-25个核苷酸，优选21-23个核苷酸(nt)，具有2个核苷酸的3′尾巴。或者，可以合成长度为21-23nt并且具有2个核苷酸的3′尾巴的合成性dsRNAs，纯化并用在反应中。这些21-23nt dsRNAs称作“向导RNA”或“短干涉性RNAs”(siRNAs)。可用于本发明的dsRNAs或siRNAs基本上与编码任何一种或多种下列多肽的基因的至少18，19，20，21，22，23，24，或25个连续核苷酸互补(例如，至少85％，90％，95％，96％，97％，98％，99％，或更高)：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3。
siRNA双螺旋随后结合核酸酶复合物，所述复合物由靶向和破坏与复合物内siRNA具有同源性的内源性mRNAs的蛋白质组成。尽管复合物内的蛋白质的特性尚不清楚，复合物的功能是通过siRNA链其中之一与内源性mRNA之间的碱基配对相互作用来靶向同源性的mRNA分子。随后在距离siRNA 3’末端12nt处剪切所述mRNA并进行降解。以此方式，可以靶向和降解特定基因，由此导致由靶向基因的蛋白表达的降低。siRNAs还可以进行化学合成或获自化学合成siRNAs的公司(例如，Dharmacon Research Inc.，Pharmacia，或ABI)。
DsRNA的具体要求和修饰的一般性描述在PCT公开号WOO1/75164中进行了介绍。尽管dsRNA分子长度可以变化，但最优选使用作为21-23个核苷酸的dsRNA的siRNA分子，其特征是2-3个核苷酸的突出末端一般是(2′-脱氧)胸腺嘧啶或尿嘧啶。siRNA一般包含一个3′羟基基团。还可以使用单链siRNA以及饨末端形式的dsRNA和shRNA。为了进一步增强RNA的稳定性，可以稳定3′突起防止降解。在一个这样的实施方案中，通过包括嘌呤核苷酸如腺嘌呤或鸟嘌呤来稳定RNA。或者，通过经修饰的类似物来取代嘧啶核苷酸，例如由(2′脱氧)胸腺嘧啶取代尿嘧啶2-核苷酸突起是稳定的并且不影响RNAi的效力。缺少2′羟基基团显著提高了组织培养基中突起的核酸酶耐受性。
或者siRNA可以利用在PCT公开号WO01/75164中给出的任何方法或利用标准的RNA体外转录方法和在Elbashir等(Genes &Dev.，15：188-200，2001)中所述的dsRNA退火方法来进行制备。如在Elbashir等中所述通过在来自合胞体囊胚层果蝇胚胎的无细胞果蝇裂解物中于一定条件下孵育对应于靶基因序列的dsRNA来获得siRNA，在所述条件下处理dsRNA以生成大约21到大约23个核苷酸的siRNA，随后利用本领域技术人员已知的技术将其分离。例如，可以利用凝胶电泳来分离21-23nt RNA并且随后可以将RNA从凝胶切片中洗脱出来。此外，可以利用层析(例如，大小排除层析)，甘油梯度离心，和使用抗体的亲和性纯化来分离21到23nt的RNAs。
可以使用多种方法将dsRNA或寡核苷酸转染，或导入哺乳动物细胞中。例如，有几种可商购的转染试剂，包括但不限于：TransIT-TKOTM(Mirus，Cat.# MIR 2150)，TransmessengerTM(Qiagen，Cat.#301525)，和OligofectamineTM(Invitrogen，Cat.# MIR 12252-011)。每一种转染剂的方案可以获自生产商。
在本发明中，dsRNA，或siRNA，与下列蛋白中的任何一种的mRNA序列的至少一部分相互补(例如，85％，90％，95％，96％，97％，98％，99％，或更高)：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3，并且可以减少或抑制所述蛋白的表达。优选地，相对于用对照dsRNA或siRNA处理的细胞，蛋白表达降低至少10％，更加优选25％，最优选至少50％。测定蛋白表达水平的方法也是本领域公知的，包括蛋白质印迹，免疫沉淀，和ELISA。
在本发明中，所用的核碱寡聚物包括以任何途径提高核酸稳定性或功能的任何修饰。实例包括对磷酸主链、核苷酸间键，或对糖部分的修饰。可以用于本发明的核碱寡聚物中的修饰的例子可见于美国专利申请公开号20030114412中，段落[0030]至[0046]和20030114407，段落[0036]至[0055]，和20030190659，段落[0083]至[0106]。
基因和蛋白质表达的测定
下列方法可以用于评估蛋白或基因表达并测定任何上述方法的效力以提高或降低任何一种或多种本发明多肽的表达。
利用诸如ELISA，蛋白质印迹，或使用特异性抗体的免疫测定法的方法，对来自个体的样品(例如，体液如血液，血清，血浆，尿，羊水，和脑脊液，细胞，或组织)测量所需多肽的水平。与参照样品相比，据认为阳性结果是本发明多肽血清水平的至少20％，优选30％，更加优选至少50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更多的改变。
此外，可以实施体外血管生成测定法以确定个体的血液是否从抗血管生成状态转变到血管生成前的状态。这种对于血管生成的体外测定法的一个实例是内皮管测定法。在此测定法中，将生长因子减少型Matrigel(7mg/mL，Collaborative Biomedical Products，Bedford，MA)放置在预冷的48孔细胞培养板的孔中(100μl/孔)并于37℃孵育25-30分钟让其聚合。用10％的患者血清处理第3-5代的人脐带静脉内皮细胞(30,000+在300μl无血清的内皮基本培养基中，Clonetics，Walkersville，MD)，将其接种到Matrigel涂布的孔中，并于37℃孵育12-16小时。随后通过4X的反相对比显微镜(Nikon Corporation，Tokyo，日本)来评估管形成并利用Simple PCI成像分析软件进行分析。利用体外血管生成测定法可以认为阳性结果是从从抗血管生成状态转变到血管生成前的状态。
还可以对来自个体的体液样品测量编码本发明多肽的核酸水。有几种本领域已知的方法来测定基因表达。一些实例包括由个体的血液样品制备RNA，使用RNA进行RNA印迹分析，基于PCR的扩增，或RNA酶保护测定法。
使用抗体进行治疗性处理
化合物，如抗体，结合和压制任何一种或多种下列多肽：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3的活性的用途，可以用预防或治疗先兆子痫或惊厥。
本发明提供特异性结合任何上述蛋白的抗体。使用所述抗体抑制任何一种或多种上述蛋白的活性。制备方法和抗体的治疗性目的的应用在几个专利中描述，包括美国专利号6,054,297；5,821,337；6,365,157；和6,165,464，将所述专利并入本文作为参考。抗体可以是多克隆的或单克隆的；优选单克隆抗体。上面在“例示性结合分子和抗体”标题下描述了针对本发明多肽的抗体。
单克隆抗体，特别是衍生自啮齿动物包括小鼠的单克隆抗体，已经用于治疗各种疾病；不过，对于它们的应用有限制，包括诱导人抗小鼠免疫球蛋白反应，其引起快速清除和治疗效力的减弱。例如，在啮齿动物单克隆抗体的临床应用的主要限制是治疗期间的抗球蛋白反应(Miller等，血液，62：988-9951983；Schroff等，Cancer Res.，45：879-885，1985)。
本领域曾尝试通过构建“嵌合”抗体克服这一问题，其中将结合动物抗原的结构域结合到人恒定结构域上(美国专利号4,816,567；Morrison等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，81：6851-6855，1984；Boulianne等，Nature，312：643-646，1984；Neuberger等，Nature，314：268-270，1985)。这些嵌合性抗体的生产和应用在下面进行描述。
本发明的单克隆抗体的混合物可以用于对于妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥的有效治疗。所述混合物可以包括少至两种，三种，或四种不同的抗体或多达六种、八种或十种不同的抗体。此外，本发明的抗体可以结合抗高血压药物(例如，甲基多巴，盐酸肼苯哒嗪，或labetalol)或任何用于治疗妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或与妊娠相关高血压病症相关联的症状的其它药物。
可用于本发明的方法的抗体的非限制性实例如下：抗白介素8(见Leong等，Cytokine 16：106-119，2001和Mian等，Clin.Cancer Res.9：3167-3175，2003)；抗抑制素A(Verotec目录号MCA951S，见Rishi等Am.J.Surg.Pathol.21：582-589，1997)；和抗VEFG-C(例如，Alitalo等，美国专利号6,361,946)。
抗体的制备
可以通过本领域已知的方法来生产特异性结合任何本发明多肽的单克隆抗体。这些方法包括Kohler和Milstein(Nature，256：495-497，1975)和Campbell(“Monoclonal Antibody Technology，The Productionand Characterization of Rodent and Human杂交omas”，Burdon等，Eds.，Laboratory technique in Biochemistry and Molecular Biology，Volume 13，Elsevier Science Publishers，Amsterdam，1985)介绍的免疫方法，以及由Huse等(Science，246，1275-1281，1989)介绍的重组DNA方法。
单克隆抗体可以培养杂交瘤细胞的上清液或由腹膜内接种杂交瘤细胞至小鼠体内诱导的腹水。最初由Kohler和Milstein(Eur.J.Immunol，6，511-519，1976)描述的杂交瘤技术已经广泛应用来产生杂交细胞系，其分泌高水平的针对任何特异性抗原的单克隆抗体。
宿主动物的免疫途径和程序或来自所述动物的培养的产抗体细胞一般与抗体刺激和生产的已确证的和常规的技术相一致。一般地，将小鼠用作试验模型，不过，任何哺乳动物个体包括人个体或来自该个体的产抗体细胞都可以根据本发明的方法来操作，以充当哺乳动物，包括人的杂交细胞系生产的基础。
免疫化后，将免疫淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合以生成杂交细胞系，其可以无限地进行培养或亚幅度，以产生大量的单克隆抗体。为了本发明的这一目的，选择用于融合的免疫淋巴细胞是淋巴球细胞及其正常分化的后代，取自经免疫动物的淋巴结组织或脾组织。对于小鼠系统来说，优选使用脾细胞，因为它们提供更浓和更方便的产抗体细胞来源。骨髓瘤细胞提供融合杂交子的持续增殖。骨髓瘤细胞是衍生自浆细胞的肿瘤细胞。鼠骨髓瘤细胞系，可以获自，例如，美国典型培养物保藏中心(ATCC；Manassas，VA)。人骨髓瘤和小鼠-人异质骨髓瘤细胞系已经得以描述(Kozbor等，J.Immunol，133：3001-3005，1984；Brodeur等，Monoclonal Antibody Production Technology andApplications，Marcel Dekker，Inc.，New York，pp.51-63，1987)。
杂交细胞系可以在体外于细胞培养基中维持。一旦建立了杂交瘤细胞系，它主可以在多种营养充分培养基如次黄嘌呤-氨基蝶呤-胸腺嘧啶(HAT)培养基中维持。另外，杂交细胞系可以任何常规方式贮藏并保存，包括冷冻和在液氮下贮藏。冷冻细胞系可以复苏并无限制培养，恢复单克隆抗体的合成和分泌。通过常规方法如沉淀，离子交换层析，亲和力层析等等来从组织培养物中回收分泌型抗体。
可以在任何哺乳动物中制备抗体，包括小鼠，大鼠，兔，山羊和人。所述抗体可以是下列免疫球蛋白类别中的任何一个成员：IgG，IgM，IgA，IgD，或IgE，及其亚类，优选IgG抗体。
尽管优选的生产单克隆抗体的动物是小鼠，但本发明并不限于此；事实上，可以使用人抗体并可以证明是优选的。这种抗体可以通过人杂交瘤获得(Cole等，“Monoclonal Antibody and CancerTherapy”，Alan R.Liss Inc.，p.77-96，1985)。在本发明中，可以利用为生产嵌合性抗体而发展的技术，此方法通过将来自合适抗原特异性的小鼠抗体分子中的基因与来自人抗体分子的基因接合在一起(Morrison等，Proc.Natl.Acad.Sd.81，6851-6855，1984；Neuberger等，Nature 312，604-608，1984；Takeda等，Nature 314，452-454，1985)；这类抗体在本发明的范围中并在下面进行介绍。
作为细胞融合技术的备选，Epstein-Barr病毒(EBV)永生化B细胞用于生产本发明的单克隆抗体(Crawford D.等，J.of Gen.Virol，64：697-700，1983；Kozbor and Roder，J.Immunol.，4：1275-1280，1981；Kozbor等，Methods in Enzymology，121：120-140，1986)。通常，该方法包括从合适的来源分离Epstein-Barr病毒，一般是从感染的细胞系，并将分泌靶抗体的细胞接触包含该病毒的上清液。洗涤所述细胞，并培养在合适的细胞培养基中。随后，可以通过Epstein-Barr病毒核抗原的存在鉴定存在于细胞培养物中的病毒转化细胞，利用本领域已知的标准方法可以鉴定转化的抗体分泌细胞。用于生产单克隆抗体的其它方法，如重组DNA，也包括在本发明的范围之内。
免疫原的制备
任何本发明的多肽都可以单独用作免疫原，或可以附着于载体蛋白上或其它物体上，如琼脂糖珠上。本发明的任何蛋白都可以由已知表达内源蛋白的细胞如人脐静脉内皮细胞中纯化出来(滋养层或HUVEC；Burrows等，CHn.Cancer Res.1：1623-1634，1995；Fonsatti等，Clin.Cancer Res.6：2037-2043，2000)。此外，编码任何本发明多肽的核酸分子，或其部分，可以利用标准重组DNA技术插入到已知载体中以便在宿主细胞中表达。用于蛋白表达的合适宿主细胞包括baculo病毒细胞(例如，Sf9细胞)，细菌细胞(例如，大肠杆菌)，和哺乳动物细胞(例如，NIH3T3细胞)。
此外，由任何本发明的肽衍生的肽都可以合成并用作免疫原。制备针对肽的抗体的方法是本领域公知的，一般需要将肽偶联到合适的载体分子，如血清白蛋白上。肽可以是任何长度，优选10个氨基酸或更长，更加优选25个氨基酸或更长，最优选40，50，60，70，80，或100个氨基酸或更长。优选地，氨基酸序列与编码本发明多肽的核酸序列的任何序列具有至少60％，更加优选85％，和，最优选90％，95％，96％，97％，98％，99％，或100％同一性。所述肽可以商购获得或利用本领域公知的技术制备，如，例如，Merrifield固相方法(Science，232：341-347，1985)。该方法可以使用商购合成仪如Biosearth9500自动肽机器，封闭氨基酸的剪切用氟化氢实现，利用Waters DeltaPrep 3000仪器在15-20μm Vydac C4 PrepPAK柱上通过制备型HPLC来纯化肽。
抗体的功能等同物
本发明还包括本说明书中所述的抗体的功能等同物。功能等同物包括这样的多肽，其具有与本发明的抗体的可变或高变区氨基酸序列基本上相同的氨基酸序列。功能等同物具有与这些抗体可比较的结合特性，并且包括，例如，嵌合的，人源化的和单链抗体及其片段。生产这类功能等同物的方法在，例如，PCT公开号WO93/21319；欧洲专利申请号239,400；PCT公开号WO89/09622；欧洲专利申请号338,745；欧洲专利申请号332424；和美国专利号4,816,567中进行介绍；将上述专利文献并入本文作为参考。
嵌合抗体优选具有基本上或完全衍生自人抗体恒定区的恒定区，和基本上或完全衍生自除人之外哺乳动物的可变区序列的可变区。这类人源化抗体是嵌合的免疫球蛋白，免疫球蛋白链或其片段(如Fv，Fab，Fab′，F(ab′)2或抗体的其它抗原-结合亚序列)，其包含衍生自非人免疫球蛋白的最小序列。人源化非人抗体的方法是本领域公知的(综述见Vaswani and Hamilton，Ann Allergy Asthma Immunol.，81：105-119，1998和Carter，Nature Reviews Cancer，1：118-129，2001)。一般地，人源化抗体具有一个或多个氨基酸残基从非人来源导入其中。这些非人氨基酸残基通常称作引入残基，它一般取自引入可变结构域。人源化基本上可以按照本领域已知的方法来实施(Jones等，Nature，321：522-525，1986；Riechmann等，Nature，332：323-329，1988；和Verhoeyen等，Science，239：1534-1536 1988)，通过将啮齿类CDR或其它CDR序列取代为人抗体的相应序列。因此，这类人源化抗体是嵌合性抗体，其中基本上小于完整人可变结构域已被来自非人物种的相应序列所取代(见例如，美国专利号4,816,567)。在实践中，人源化抗体一般是人抗体，其中一些CDR残基并且有可能一些FR残基被来自啮齿类抗体类似位点的残基所取代(Presta，Curr.Op.Struct.Biol，2：593-596，1992)。
制备人源化抗体的其它方法可以见于美国专利号5,821,337，6,054,297，6,639,055，和Carter，(同上)，将所有这些文献都并入本文作为参考。人源化抗体选自任何类别的免疫球蛋白，包括IgM，IgG，IgD，IgA和IgE，以及任何同种型，包括IgG1，IgG2，IgG3，和IgG4。当不需要细胞毒性活性时，如在本发明中，恒定结构域优选是IgG2类的。人源化抗体可以包含来自一种以上类别或同种型的序列，选择特定恒定结构域以优化所需效应剂功能是本领域普通技术人员已知的。
人抗体还可以利用各种本领域已知的技术来生产，包括噬菌体展示文库(Marks等，J.MoI Biol，222：581-597，1991和Winter等Annu.Rev.Immunol，12：433-455，1994)。Cole等和Boerner等的技术也可用于制备人单克隆抗体(Cole等，同上；Boerner等，J.Immunol，Ul：86-95，1991)。
除人之外合适的哺乳动物包括可以制备单克隆抗体的任何哺乳动物。除人之外的哺乳动物的例子包括，例如兔、大鼠、小鼠、马、山羊，或灵长类；优选小鼠。
抗体的功能等同片段还包括单链抗体片段，也称作单链抗体(scFvs)。单链抗体片段是重组多肽，其一般结合抗原或受体；这些片段包含抗体可变重链氨基酸序列(VH)的至少一个片段，其用或不用一个或多个互连接头连接到抗体可变轻链序列(VL)的至少一个片段上。这种接头可以是短的，柔韧性的肽，选择来确保一旦连接则VL和VH结构域正确进行三维折叠，从而保持完整抗体的靶分子结合特异性，从所述抗体上衍生出单链抗体片段。一般，VL或VH序列的羧基末端通过这种肽接头共价连接到VL和VH序列的氨基末端。单链抗体片段可以通过分子克隆、抗体噬菌体展示文库或类似技术生成。这些蛋白可以在真核细胞或原核细胞，包括细菌中生产。
单链抗体片段包含这样的氨基酸序列，其具有本说明书中所述完整抗体的至少一个可变区或CDR，但缺少这些抗体的一些或全部的恒定结构域。这些恒定结构域对于抗原结合并非必需，但构成完整抗体结构的主要部分。所以单链抗体片段可以克服一些与包含部分或全部恒定结构域的抗体使用相关的问题。例如，单链抗体片段趋于无生物学分子和重链恒定区之间的不利相互作用，或其它有害的生物学活性。此外，单链抗体片段比完全抗体小得多并且因此可以比完整抗体具有更大的毛细管渗透性，允许单链抗体片段更加有效地定位和结合到靶抗原结合位点上。另外，抗体片段可以在原核细胞中以相对大的规模生产，因而有利于它们的生产。另外，相对小的单链抗体片段使得它们与完整抗体比不太可能引起受体中的免疫反应。
功能性等同物进一步包括抗体片段，它与那些完整抗体相比具有相同的或相当的结合特性。这些片段可以包含一个或两个Fab片段或F(ab′)2片段。优选抗体片段包含完整抗体的所有六个CDR，尽管包含少于全部这些区，如三个、四个或五个CDR的片段也具有功能。
另外，功能性等同物可以是或可以结合下列免疫球蛋白类别中任何一种的成员：IgG，IgM，IgA，IgD，或IgE，及其亚类。
抗体功能性等同物的制备
通过本领域已知的方法制备抗体等同物。例如，可以由完整抗体酶学制备抗体的片段。优选地，由编码这些等同物的DNA制备抗体等同物。抗体的DNA编码片段可以通过删除除了所需部分之外的全部编码全长抗体的DNA来制备。
编码嵌合型抗体的DNA可以通过重组基本上或完全编码人恒定区的DNA，和编码基本上或完全衍生自除人之外哺乳动物的可变区序列的DNA来制备。嵌合型抗体可以通过重组基本上或完全编码人恒定区的DNA，和编码基本上或完全衍生自除人之外哺乳动物的可变区序列的DNA来制备。编码人源化抗体的DNA可以通过重组编码除了基本上或完全衍生自相应的人抗体区域的CDR的恒定区和可变区的DNA，与编码基本上或完全衍生自除人之外的哺乳动物的CDR的DNA来制备。
编码抗体片段的DNA分子的合适来源包括细胞，如杂交瘤，其表达全长抗体。所述片段本身可以用作抗体等同物，或可以重组成等同物，如上所述。
在本节中描述的DNA删除和重组可以通过已知的方法来实施，如上面所列的公开专利申请中所述的那些。
抗体筛选和选择
利用标准的本领域已知方法分离和纯化单克隆抗体。例如，可以利用标准的本领域已知方法来筛选抗体，如ELISA或蛋白质印迹分析。这类技术的非限制性实例描述于美国专利号6,365,157的实施例II和III中，将其并入本文作为参考。
抗体的治疗用途
当在体内用于治疗或预防妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥时，将治疗有效量的本发明的抗体施用给个体。优选地，通过胃肠外或通过持续灌注静脉内施用抗体。剂量和剂量方案取决于疾病的严重性，以及个体的整体健康。施用抗体的量一般为大约0.001到大约10mg/kg的个体体重，优选0.01到大约5mg/kg个体体重。
对于胃肠外给药，将抗体与可药用的胃肠外媒介物相关联配制成单位剂量可注射形式(溶液、悬浮液，乳液)。这些媒介物是天然无毒的，并且是非治疗性的。这些媒介物的例子是水，盐水，林格溶液，葡萄糖溶液，和5％人血清白蛋白。还可以使用非水媒介物如混合的油和乙基油酸盐。可以将脂质体用作载体。媒介物可以包含小量的添加剂如增强等渗性和化学稳定性的物质，例如，缓冲剂和防腐剂。抗体一般在大约1mg/ml到10mg/ml浓度的媒介物中进行配剂。
组合疗法
任选地，本发明的治疗剂可以结合任何其它标准的妊娠相关高血压病症治疗剂；这些方法是熟练技术人员已知的。
给药剂量和模式
优选地，在妊娠期间施用本发明的治疗性化合物以治疗或预防妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或在妊娠之后治疗产后先兆子痫或惊厥。给药的技术和剂量取决于化合物的类型(例如，化学化合物，抗体，反义，或核酸载体)并且是本领域技术人员公知的或易于确定的。
本发明的治疗性化合物可以以单位剂量形式，与可药用的稀释剂、载体，或赋形剂一起施用。给药可以是胃肠外，静脉内，皮下，品服或局部通过直接注射入羊水中。通过持续灌注的静脉内递送是施用本发明的治疗性化合物的优选方法。
所述组合物对于口服可以是九剂、片剂、胶囊、液体，或缓释片剂；或对于静脉内、皮下或胃肠外给药是液体；或对于局部给药是聚合物或其它缓释媒介物。
本领域公知的制剂方法见于，例如，“Remington：The Science andPractice of Pharmacy”(20th ed.，ed.A.R.Gennaro AR.，2000，LippincottWilliams & Wilkins，Philadelphia，PA)。用于胃肠外给药的制型可以，例如，包含赋形剂，无菌水，生理盐水，聚二醇如聚乙二醇，植物油，或氢化的萘。生物相容性，可以生物降解的丙交酯聚合物，聚交酯/乙交酯共聚物，或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物可以用于控制化合物的释放。纳米颗粒制剂(例如，以生物降解的纳米颗粒，固体液体纳米颗粒，脂质体)可以用于控制化合物的生物分布。其它潜在有用的胃肠外递送系统包括乙烯-醋酸乙烯共聚物颗粒，渗透泵，可植入的灌注系统，和脂质体。制剂中的化合物浓度根据许多因素而变化，包括待施用的药物剂量，以及给药途径。
化合物可以任选地作为可药用的盐施用，如药品工业中通常所用的无毒的酸加成盐或金属复合物。酸加成盐的实例包括有机酸如醋酸，乳酸，扑酸，马来酸，柠檬酸，苹果酸，抗坏血酸，琥珀酸，苯甲酸，棕榈酸，辛二酸，水杨酸，酒石酸，甲磺酸，甲苯磺酸，或三氟乙醇等等；多聚酸如鞣酸，羧基甲基纤维素，等等；无机酸如盐酸，硫酸，磷酸，等等。金属复合物包括锌、铁，等等。
口服用的剂型包括含有与无毒可药用赋形剂混合的活性成分的片剂。这些赋形剂可以是，例如，惰性稀释剂或填充剂(例如，蔗糖和山梨醇)，润滑剂，助流剂，和抗粘剂(例如，硬脂酸镁，硬脂酸锌，硬脂酸，硅石，氢化植物油，或滑石)。
可以将口服用的片剂提供为拒绝片剂，或硬胶囊，其中将活性成分与惰性固体稀释剂相混合，或软胶囊，其中将活性成分与水或油介质相混合。
施用化合物的剂量和时间取决于各种临床因素，包括个体的整体健康情况，以及妊娠相关高血压病症，如先兆子痫症状的严重性。通常，一旦检测到妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或形成先兆子痫的倾向，则利用持续灌注纯化蛋白来治疗或预防进一步病症的进一步发展。治疗可以持续1-100天，更加优选1到60天，最优选1到20天，或直到妊娠结束。剂量随着每一种化合物以及病症的严重性而不同，并进行滴定以达到稳定状态的血清浓度。
个体监测
本文所述的诊断性方法还可以用于在治疗期间监测妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或确定治疗性化合物的剂量。在一个实施例中，在治疗期间施用治疗性化合物并确定本发明多肽的表达水平。
调节任何一种或多种本发明的核酸或多肽的治疗剂被视为在本发明中特别有用。
在一个实施例中，在治疗期间，将下列多肽或编码多肽的核酸的水平降低10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的治疗剂或方法：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β葡萄糖苷酶，被认为是有效的治疗剂或有效剂量的治疗剂。在另一个实施例中，在治疗期间，将下列多肽或编码多肽的核酸的水平提高10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的治疗剂或方法：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11，被认为是有效的治疗剂或有效剂量的治疗剂。
可以利用本发明的方法和组合物来监测个体的疾病状态或治疗，所述个体患有妊娠相关高血压病症，如先兆子痫或惊厥，或发展成这种病症的倾向性。在一个实施方案中，对存在于体液，如尿，血浆，羊水，或CSF中的本发明多肽的表达进行监测。例如，在评估特定药物对个体的效力或在评估疾病进展中，这类监测可能是有用的。
实施例
实施例1.来自先兆子痫和血压正常妇女胎盘组织的基因表达模式
为了鉴定涉及先兆子痫发病机理的新分泌型因子，我们利用Affymetrix U95A微阵列芯片对来自19位患有先兆子痫妇女和15位血压正常妇女的胎盘组织进行了基因表达模式分析(见表1)。
表1：研究患者的临床特征
 正常(n＝15)  先兆子痫(n＝19)
  母亲年龄(岁)   35.2   31.9
  妊娠期(周)   39.0   31.1*
  初产(％)   19   81*
  心脏收缩BP(mm Hg)   107   167.2**
  心脏舒张BP(mm Hg)   83   101.8**
  蛋白尿(g蛋白质/g creat)   ＜0.3   5.2**
  血清尿酸(mg/dl)   NA   6.8
  血球比率(％)   35.7   33.9
  血小板计数(K/μl)   217   198
  血清肌氨酸酐(mg/dl)   0.5   0.6
显示的数据是平均值*p＜0.05，**p＜0.005
利用计算机程序BADGE(Bayesian Analysis of Differential GeneExpression version 1.0)(http://genomethods.orgfoadge)(见Ramoni andSebastiani，in Berthold and Hand eds.Intelligent Data Analysis：AnIntroduction，Springer，New York，NY(1999))和分级聚类分析(Eisen等，Proc.Natl.Acad.Sci.，95：14863-8(1998))来分析数据以鉴定在不同实验条件下差异表达的基因(图1)。软件BADGE(BayesianAnalysis of Gene Expressi0n)v1.0执行Bayesian方法以鉴定在不同实验条件下差异表达的基因。
表达比率的累积分布函数(CDF)大于1.0。根据表达数据，以表达提高倍数的条件概率序列来排列基因；零概率值为0.5。
利用BADGE程序发现在正常对先兆子痫胎盘mRNA表达中的预测基因集。在图2中显示预测基因集的彩图。行代表先兆子痫的预测性基因而列代表相对于平均基因表达对于给定患者的表达水平。预计的1.0％假阳性率生成127个基因的预测性基因集，分别是65个上调而62个下调(表2)。(本发明多肽的氨基酸和核酸序列见图6A-44)。
表2.预测基因的总结
Figure A20058004838300721
Figure A20058004838300731
Figure A20058004838300751
Figure A20058004838300761
*总共选择了127种基因，其中65种上调，1.0％的假阳性误差率。
无Locuslink分类的基因用Genbank编号标记。
利用Cluster和Treeview(Michael Eisen，Stanford University)进行Affymetrix患者数据的分级聚类。标记为P的样品是先兆子痫患者，而标记为N的样品是正常妊娠患者。利用存在和表达标准将数据组从12625过滤至3564，得到的数据组是中间值集中的并对基因和阵列进行规范化。我们利用分级聚类来分析在基因中可能的分类。以上聚类包括sFlt1以及文献中确认的其它基因。
由预测基因集，我们发现在取自患有先兆子痫的妇女的血液样品中下列分泌型多肽基因的表达上调：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白(#AL039458)，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，和半凝乳素-3。我们还发现发现在取自患有先兆子痫的妇女的血液样品中下列分泌型多肽基因的表达降低：α防御素，ADAM-TS3，cholecystokmin前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，和azurocidin。此外我们还发现下列细胞内多肽或酶在先兆子痫胎盘中提高：精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2和β葡萄糖苷酶。下列细胞内基因产物/酶在先兆子痫胎盘中降低：羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。
实施例2.先兆子痫中FIt-1和sFlt-1的mRNA表达
由于以上聚类鉴定了sFlt1以及其它在文献中确证的基因，我们选择利用sFlt1确证阵列鉴定先兆子痫的预测性标记的能力。对于这些实验，通过RNA印迹分析测定来自3位患有先兆子痫的患者(P1，P2，P3)和3位血压正常的孕妇(N1，N2，N3)的胎盘sFlt-1的mRNA表达(图4)。较高的条带(7.5kb)是全长FIt-1mRNA，而较低的更加丰量的条带(3.4kb)是可变剪接的sFlt-1mRNA。包括肌动蛋白作为对照而28S显示为箭头。这些结果显示对于先兆子痫患者来说sFlt-1基因表达提高，并确证了使用阵列鉴定的预测基因集作为先兆子痫或惊厥或形成先兆子痫或惊厥的倾向性的标记。
实施例3.在正常的和先兆子痫患者中FIt-1表达的免疫组织化学分析
为了观察来自正常的和先兆子痫患者的胎盘样品中的FIt-1表达，利用针对FIt-1的单克隆抗体进行免疫组织化学分析。检测到先兆子痫胎盘的合体滋养细胞FIt-1表达的提高(图5)，进一步确证了阵列鉴定基因的能力，所述基因可以用作先兆子痫或惊厥或形成先兆子痫或惊厥的倾向性的标记。
其它实施方案
为了阐释的目的给出了本发明的具体实施方案的描述。并非意在穷举或限制本发明的范围至本文所述的具体形式。尽管本发明是参照几个实施方案进行介绍的，本领域普通技术人员将会理解的是可以进行各种改进而不背离如权利要求书所示的本发明的精神和范围。将此将本文引用的所有专利、专利申请和公开出版物并入作为参考。其它的实施方案在权利要求书中。

Claims (40)

1.一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症倾向的方法，所述方法包括测量来自所述个体的样品中的至少一种多肽或其片段的水平，其中所述至少一种多肽或其片段选自：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β葡萄糖苷酶，并且其中与正常参照中的水平相比，所述至少一种多肽或其片段的水平提高是所述妊娠相关高血压病症或所述妊娠相关高血压病症倾向的诊断性指征。
2.权利要求1的方法，其中所述提高至少为20％。
3.权利要求1的方法，其中所述多肽选自卵泡抑制素相关蛋白，抑制素-A，β致育素，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，和分泌型卷曲相关蛋白。
4.一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症倾向的方法，所述方法包括测量来自所述个体的样品中的至少一种多肽或其片段的水平，其中所述至少一种多肽或其片段选自：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11，并且其中与正常参照中的水平相比，所述至少一种多肽或其片段的水平降低是所述妊娠相关高血压病症或所述妊娠相关高血压病症倾向的诊断性指征。
5.权利要求4的方法，其中所述降低至少为20％。
6.权利要求1或4的方法，其中所述妊娠相关高血压病症选自先兆子痫，惊厥，妊娠高血压，慢性高血压，HELLP综合征，和出生时小于妊娠年龄(SGA)。
7.权利要求6的方法，其中所述妊娠相关高血压病症是先兆子痫或惊厥。
8.权利要求1或4的方法，其中正常参照是先前从所述个体中取的样品。
9.权利要求1或4的方法，其进一步包括测量来自所述个体的样品中选自可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF和PlGF的至少一种多肽，或其片段的水平。
10.权利要求9的方法，其进一步包括利用度量标准计算可溶性endoglin，sFlt-1，VEGF或PlGF的所述水平之间的关系，其中相对于参照样品中的所述水平在个体样品中所述水平之间的关系变化是所述个体中妊娠相关高血压病症或妊娠相关高血压病症倾向的诊断性指征。
11.权利要求1或4的方法，其中利用免疫测定法进行所述测量。
12.权利要求11的方法，其中所述免疫测定法为ELISA。
13.权利要求1的方法，其中所述方法包括测量至少两种多肽或其片段的水平。
14.一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症倾向的方法，所述方法包括测量来自所述个体的样品中的核酸分子的水平，所述核酸分子选自编码下列蛋白质的核酸：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β葡萄糖苷酶，其中与正常对照中的水平相比，所述核酸分子水平的提高是所述妊娠相关高血压病症或所述妊娠相关高血压病症倾向的诊断性指征。
15.一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症倾向的方法，所述方法包括测量来自所述个体的样品中的核酸分子的水平，所述核酸分子选自编码下列蛋白质的核酸：α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11，其中与正常对照中的水平相比，所述核酸分子水平的降低是所述妊娠相关高血压病症或所述妊娠相关高血压病症倾向的诊断性指征。
16.权利要求14或15的方法，其中正常对照是先前从所述个体中取的样品。
17.权利要求14或15的方法，其中所述妊娠相关高血压病症选自先兆子痫，惊厥，妊娠高血压，慢性高血压，HELLP综合征，和出生时小于妊娠年龄(SGA)。
18.权利要求17的方法，其中所述妊娠相关高血压病症是先兆子痫或惊厥。
19.权利要求14或15的方法，进一步包括测量来自所述个体的样品中编码选自endoglin，sFlt-1，VEGF或PlGF的多肽的核酸分子的水平。
20.权利要求1，4，14或15的方法，其中所述个体是未妊娠的人，妊娠的人，产后的人或非人。
21.权利要求20的方法，其中所述非人选自牛、马、绵羊、猪、山羊、狗或猫。
22.权利要求1，4，14或15的方法，其中所述方法用于在症状出现至少4周之前诊断妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症倾向。
23.权利要求1，4，14或15的方法，其中所述样品是体液，组织或细胞，其中所述多肽或核酸分子在正常情况下是可检测的。
24.权利要求23的方法，其中所述体液选自血液，尿，羊水，唾液，血清，血浆和脑脊液。
25.一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症倾向的方法，所述方法包括测量编码选自下列多肽的基因的核酸序列：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，和β葡萄糖苷酶，其中个体核酸序列的变化诊断个体患有所述妊娠相关高血压病症或所述妊娠相关高血压病症倾向，所述变化是提高所述个体中基因产物的表达水平或生物学活性。
26.一种诊断个体患有或具有妊娠相关高血压病症倾向的方法，所述方法包括测量编码选自下列多肽的基因的核酸序列：防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α趋化剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11，其中个体核酸序列的变化诊断个体患有所述妊娠相关高血压病症或所述妊娠相关高血压病症倾向，所述变化降低所述个体中基因产物的表达水平或生物学活性。
27.权利要求25或26的方法，其中所述妊娠相关高血压病症选自先兆子痫，惊厥，妊娠高血压，慢性高血压，HELLP综合征，和出生时小于妊娠年龄(SGA)。
28.权利要求27的方法，其中所述妊娠相关高血压病症是先兆子痫或惊厥。
29.一种试剂盒，用于诊断个体中妊娠相关高血压病症，或妊娠相关高血压病症倾向，其包括下列：
(a)编码任何下列多肽的核酸序列或与其互补的序列：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，β葡萄糖苷酶，α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α化学吸引剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11；和
(b)使用所述核酸序列或与其互补序列的说明书，用于诊断个体中的妊娠相关高血压病症。
30.权利要求29的试剂盒，其进一步包括参照样品，标准，或水平。
31.权利要求30的试剂盒，其中所述参照样品是来自未患妊娠相关疾病的个体或未妊娠的个体个体的样品。
32.一种试剂盒，用于诊断个体中的妊娠相关高血压病症，其包括下列：
(a)可用于检测选自下列的多肽的组分：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，β葡萄糖苷酶，α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α化学吸引剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11；和
(b)使用所述组分的说明书，用于诊断所述个体中的妊娠相关高血压病症。
33.权利要求32的试剂盒，其中所述组分是特异性结合所述多肽的结合分子。
34.权利要求33的试剂盒，其中所述结合分子是特异性结合所述多肽的抗体，或其抗原结合片段。
35.权利要求32的试剂盒，其进一步包括参照样品，标准，或水平。
36.权利要求35的试剂盒，其中所述参照样品是来自未患妊娠相关疾病的个体或未妊娠的个体的样品。
37.权利要求32的试剂盒，其中通过选自免疫测定法，酶学测定法和比色测定法的测定法来检测所述多肽。
38.包含一种或多种基底支持物的核酸阵列，所述支持物与多种多核苷酸探针稳定关联，其中所述多核苷酸探针能够在高严格条件下杂交编码选自下列蛋白的基因的RNA转录本，或其互补体：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，β葡萄糖苷酶，α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α化学吸引剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11。
39.包括一种或多种基底支持物的多肽阵列，所述支持物与多种选自下列的多肽稳定地关联：卵泡抑制素相关蛋白，白介素8，抑制素A，VEGF-C，血管生成素，β致育素，假想蛋白，白细胞相关的Ig样受体分泌型蛋白，红细胞分化蛋白，脂肪生成抑制因子，促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白，α-1抗胰凝乳蛋白酶，胰岛素样生长因子结合蛋白-5，CD33L，细胞因子受体样因子1，血小板衍生的内皮生长因子，赖氨酰羟化酶同种型2，stanniocalcin前体，分泌型卷曲相关蛋白，半凝乳素-3，精胺氧化酶，UDP糖基转移酶2家族多肽B28，神经营养酪氨酸激酶受体2，中性肽内切酶，CDC28蛋白激酶调控亚基2，β葡萄糖苷酶，α防御素，ADAM-TS3，缩胆囊素前体，干扰素刺激型T-细胞α化学吸引剂前体，azurocidin，羊毛甾醇合酶，钙/钙调蛋白依赖型丝氨酸蛋白激酶，雌激素受体-可变剪接的转录本H，趋化因子(CX3C基序)受体1，酪氨酸酶相关蛋白1，羟基-δ-5-类固醇脱氢酶，二氢嘧啶酶样-4，和细胞色素P450-家族11；所述多肽的变体；对所述多肽或变体特异性的抗体；或所述多肽，变体，或抗体的任意组合。
40.权利要求38或39的阵列，其进一步包括使用所述阵列的说明书，用于诊断所述个体中的妊娠相关高血压病症。
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Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102192987A (zh) * 2011-02-25 2011-09-21 复旦大学附属上海市第五人民医院 一种用于妊娠高血压疾病诊断的试剂盒
CN103760340A (zh) * 2014-01-28 2014-04-30 成都创宜生物科技有限公司 以flrg作为标志物制备检测工具的应用及检测工具
CN104634982A (zh) * 2013-11-06 2015-05-20 中国科学院上海生命科学研究院 Vegf-c在制备败血症及重症细菌感染诊断试剂中的用途
CN111929133A (zh) * 2011-11-30 2020-11-13 新加坡科技研究局 用于生物学检测的gm1神经节苷脂与膜联蛋白v的微粒多肽比例
CN111951969A (zh) * 2020-08-05 2020-11-17 中翰盛泰生物技术股份有限公司 Hbp在高危妊娠预测中的应用
CN114075281A (zh) * 2021-11-16 2022-02-22 福州迈新生物技术开发有限公司 抗Inhibin-α蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060067937A1 (en) 2004-09-24 2006-03-30 Karumanchi S A Methods of diagnosing and treating complications of pregnancy
ES2371084T3 (es) * 2004-12-21 2011-12-27 Yale University Diagnóstico de la preeclampsia.
US7230561B2 (en) * 2005-01-27 2007-06-12 Micron Technology, Inc. Programmable integrating ramp generator and method of operating the same
CA2602963A1 (en) * 2005-03-24 2006-09-28 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods of diagnosing fetal trisomy 13 or a risk of fetal trisomy 13 during pregnancy
EP2102228A4 (en) * 2005-09-15 2011-06-01 Limited Dia-Mab METHOD FOR DIAGNOSIS OF PREECLAMPSIA
US20090286271A1 (en) * 2006-05-31 2009-11-19 Karumanchi Ananth S Methods of Diagnosing and Treating Complications of Pregnancy
EP2126564B1 (en) * 2007-01-25 2012-10-03 Crc For Asthma And Airways Ltd Method of diagnosis
US20110129845A1 (en) * 2007-01-29 2011-06-02 Crc For Asthma And Airways Ltd. Method of diagnosis
EP2037278A1 (en) * 2007-09-11 2009-03-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Vascular markers in the remodelling of cardiac injury
WO2010033553A2 (en) * 2008-09-16 2010-03-25 University Of Florida Research Foundation Inc. Gene expression related to preeclampsia
US9229009B2 (en) * 2008-10-31 2016-01-05 Yale University Methods and kits for detecting misfolded proteins
BRPI1007483B1 (pt) * 2009-01-28 2021-11-30 Bio Preventive Medicine Corporation Método de diagnóstico de nefropatia in vitro, método in vitro para o monitoramento de progresso de nefropatia, método in vitro para o monitoramento da eficácia de um tratamento de nefropatia, método in vitro de avaliação de toxicidade renal de um agente e kit para diagnóstico de nefropatia
IN2013MN00441A (zh) * 2010-10-07 2015-05-29 Astute Medical Inc
HUE037181T2 (hu) 2010-11-29 2018-08-28 Mote Marine Laboratory Inc Halak szexuális jellemzõjének meghatározása peptid hormonok alkalmazásával
KR101114446B1 (ko) * 2011-02-25 2012-02-24 건국대학교 산학협력단 프로테오믹스기법을 이용한 임신중독 특이 표지 단백질 및 진단방법
ES2614059T3 (es) 2011-03-17 2017-05-29 Cedars-Sinai Medical Center Biomarcador de diagnóstico para predecir las mujeres en riesgo de parto prematuro
WO2013103984A2 (en) * 2012-01-06 2013-07-11 Bg Medicine, Inc. Use of galectin-3 for risk assessment and detection of preeclampsia and related conditions
JP6697394B2 (ja) 2014-04-10 2020-05-20 イェール ユニバーシティーＹａｌｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ 異常折り畳みタンパク質を検出するための方法および組成物
PL3311158T3 (pl) 2015-06-19 2023-11-27 Sera Prognostics, Inc. Pary biomarkerów do przewidywania przedwczesnego porodu
CN106771266A (zh) * 2017-01-12 2017-05-31 广州市丰华生物工程有限公司 抑制素a定量检测试剂盒及其制备方法
JP6895165B2 (ja) * 2017-06-06 2021-06-30 知和 松浦 α１−アンチキモトリプシンを含むバイオマーカー
US20210325400A1 (en) * 2020-04-16 2021-10-21 Denali K. Dahl Preeclampsia diagnostic devices, systems and methods

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5079171A (en) 1988-09-15 1992-01-07 Adeza Biomedical Corporation Determining pregnancy induced hypertension and eclampsia by immunoassay of cellular fibronectin
US5240848A (en) * 1988-11-21 1993-08-31 Monsanto Company Dna sequences encoding human vascular permeability factor having 189 amino acids
US5238819A (en) * 1988-12-14 1993-08-24 The Regents Of The University Of California Diagnostic assay for the detection of preeclampsia
US5332671A (en) * 1989-05-12 1994-07-26 Genetech, Inc. Production of vascular endothelial cell growth factor and DNA encoding same
US5194596A (en) * 1989-07-27 1993-03-16 California Biotechnology Inc. Production of vascular endothelial cell growth factor
US5219739A (en) * 1989-07-27 1993-06-15 Scios Nova Inc. DNA sequences encoding bVEGF120 and hVEGF121 and methods for the production of bovine and human vascular endothelial cell growth factors, bVEGF120 and hVEGF121
US5660827A (en) * 1992-03-05 1997-08-26 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibodies that bind to endoglin
AU4025193A (en) 1992-04-08 1993-11-18 Cetus Oncology Corporation Humanized C-erbB-2 specific antibodies
US5712395A (en) * 1992-11-13 1998-01-27 Yissum Research Development Corp. Compounds for the treatment of disorders related to vasculogenesis and/or angiogenesis
US5763441A (en) * 1992-11-13 1998-06-09 Sugen, Inc. Compounds for the treatment of disorders related to vasculogenesis and/or angiogenesis
US6410322B1 (en) * 1993-07-27 2002-06-25 Hybridon Inc Antisense oligonucleotide inhibition of vascular endothelial growth factor expression
US5861499A (en) 1994-02-10 1999-01-19 Imclone Systems Incorporated Nucleic acid molecules encoding the variable or hypervariable region of a monoclonal antibody that binds to an extracellular domain
US5543138A (en) * 1994-03-10 1996-08-06 Genetics Institute, Inc. Methods of diagnosing and treating preeclampsia
GB9512994D0 (en) * 1995-06-26 1995-08-30 Brf International Method for quantitative measurement of an enzyme linked immunosorbent assay
US6361946B1 (en) * 1997-02-05 2002-03-26 Licentia Ltd Vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) protein and gene, mutants thereof, and uses thereof
US5830879A (en) * 1995-10-02 1998-11-03 St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. Treatment of vascular injury using vascular endothelial growth factor
US6100071A (en) * 1996-05-07 2000-08-08 Genentech, Inc. Receptors as novel inhibitors of vascular endothelial growth factor activity and processes for their production
US6399585B1 (en) * 1996-05-15 2002-06-04 Janet E. Larson In Utero treatment of CFTR-related deficiencies
ES2169864T3 (es) * 1996-05-31 2002-07-16 Health Research Inc Anticuerpos monoclonales anti-endoglina y su uso en terapia anti-angiogenesis.
US6620590B2 (en) * 1996-07-11 2003-09-16 Isis Innovation Limited Diagnosis of pre-eclampsia
WO1998028006A1 (en) 1996-12-23 1998-07-02 Cambridge University Technical Services Limited Diagnosis and treatment of pathological pregnancies
EP0968430A1 (en) * 1997-03-07 2000-01-05 Mount Sinai Hospital Corporation Methods to diagnose a required regulation of trophoblast invasion
US7030083B2 (en) * 1998-09-09 2006-04-18 University Of Washington Treatment of eclampsia and preeclampsia
US6677300B1 (en) * 1998-09-09 2004-01-13 Scios, Inc. Treatment of microvascular angiopathies
EP1417971A3 (en) 1998-09-09 2004-06-30 Scios Inc. Use of an angiogenic factor for the treatment of microvascular angiopathies
US6245577B1 (en) * 1998-09-11 2001-06-12 Midland Bioproducts Corporation IgG antibody testing method
EP1016726A1 (en) * 1998-12-30 2000-07-05 Introgene B.V. Gene therapy to promote angiogenesis
GB0008269D0 (en) * 2000-04-05 2000-05-24 Astrazeneca Ab Combination chemotherapy
GB0026823D0 (en) * 2000-11-02 2000-12-20 King S College London Diagnosis of pre-eclampsia
WO2002070535A1 (en) * 2001-03-01 2002-09-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of recql5 expression
EP1953244A1 (en) * 2002-01-09 2008-08-06 Nakamura, Yusuke Cancer profiles
BRPI0312818B8 (pt) * 2002-07-19 2021-05-25 Beth Israel Deaconess Medical Ct Inc uso de uma medida do nível do polipeptídeo sflt-1 em uma amostra de uma paciente e uso de uma medida dos níveis de pelo menos dois dos peptídeos sflt1, vegf livre ou polipeptídio pigf livre em uma amostra de um paciente usando um métrico
US7335362B2 (en) 2002-07-19 2008-02-26 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods of treating pre-eclampsia or eclampsia
US7435419B2 (en) 2002-07-19 2008-10-14 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods of diagnosing and treating pre-eclampsia or eclampsia
TW200413725A (en) * 2002-09-30 2004-08-01 Oncotherapy Science Inc Method for diagnosing non-small cell lung cancers
CN101245376A (zh) * 2003-01-17 2008-08-20 香港中文大学 作为妊娠相关病症的诊断标志物的循环mRNA
WO2004070062A2 (en) 2003-02-04 2004-08-19 Wyeth Compositions and methods for diagnosing and treating cancers
US7191068B2 (en) * 2003-03-25 2007-03-13 Proteogenix, Inc. Proteomic analysis of biological fluids
DE10333105B3 (de) * 2003-07-21 2005-05-25 OCé PRINTING SYSTEMS GMBH Einrichtung zur Einstellung der Spannung einer Materialbahn, die durch eine die Materialbahn bearbeitende Prozessstation bewegt wird
WO2005017192A2 (en) * 2003-08-14 2005-02-24 The General Hospital Corporation Screening for gestational disorders
ES2556164T3 (es) * 2003-09-23 2016-01-13 The General Hospital Corporation Cribado de la preeclampsia
US7740849B2 (en) * 2004-09-24 2010-06-22 Beth Israel Deaconess Medical Center Use of compounds that bind soluble endoglin and SFLT-1 for the treatment of pregnancy related hypertensive disorders
US20060067937A1 (en) * 2004-09-24 2006-03-30 Karumanchi S A Methods of diagnosing and treating complications of pregnancy
ES2371084T3 (es) 2004-12-21 2011-12-27 Yale University Diagnóstico de la preeclampsia.
CA2654283A1 (en) 2006-05-31 2008-03-13 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Methods of diagnosing and treating complications of pregnancy

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102192987A (zh) * 2011-02-25 2011-09-21 复旦大学附属上海市第五人民医院 一种用于妊娠高血压疾病诊断的试剂盒
CN102192987B (zh) * 2011-02-25 2014-04-02 复旦大学附属上海市第五人民医院 一种用于妊娠高血压疾病诊断的试剂盒
CN111929133A (zh) * 2011-11-30 2020-11-13 新加坡科技研究局 用于生物学检测的gm1神经节苷脂与膜联蛋白v的微粒多肽比例
CN104634982A (zh) * 2013-11-06 2015-05-20 中国科学院上海生命科学研究院 Vegf-c在制备败血症及重症细菌感染诊断试剂中的用途
CN103760340A (zh) * 2014-01-28 2014-04-30 成都创宜生物科技有限公司 以flrg作为标志物制备检测工具的应用及检测工具
CN103760340B (zh) * 2014-01-28 2016-11-23 成都创宜生物科技有限公司 以flrg作为标志物制备检测工具的应用及检测工具
CN111951969A (zh) * 2020-08-05 2020-11-17 中翰盛泰生物技术股份有限公司 Hbp在高危妊娠预测中的应用
WO2022027808A1 (zh) * 2020-08-05 2022-02-10 中翰盛泰生物技术股份有限公司 Hbp在高危妊娠预测中的应用
CN114075281A (zh) * 2021-11-16 2022-02-22 福州迈新生物技术开发有限公司 抗Inhibin-α蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
EP1839057A4 (en) 2008-12-31
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