CN101265452A - 一种北冬虫夏草子实体的培养基及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于人工培养北冬虫夏草子实体的培养基及制备方法。本发明的技术方案是小麦85－90g、蚕虫粉3－4g、葡萄糖1－3g、蛋白胨1－3g、硫酸镁0.1－0.2g、磷酸二氢钾0.1－0.25g、柠檬酸三氨0.1－0.25g、维生素B10.01－0.03g、纯净水40－50ml；将上述物质按重量比在纯净水中充分溶解，倒入栽培瓶中；将小麦、蚕虫粉按重量比放入上述栽培瓶中，搅拌均匀后封口；将上述栽培瓶放入高压灭菌锅，在121℃、1.05MPa条件下，灭菌3～4个小时。解决了野生冬虫夏草产量低，以及生产成本过高，且生物转化率较低等缺陷。本发明具有使菌体早期发育成长速度快，子实体长势均匀、颜色较深、成本低，主要活性成分虫草菌素的产量提高，虫草酸和虫草多糖的产量也有较大提高等效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种培养基，特别涉及一种用于人工培养北冬虫夏草子实体的培养基，属于真菌人工栽培技术领域。
背景技术
北冬虫夏草(简称北虫草)，又名蛹虫草[C.militarise (L)Link]，属子囊菌亚门(Asco mycotina)核菌纲(pyreno mycetes)球壳目(Sphaerinels)麦角菌科(claviticpitaceae)虫草属(Coedyceps)。
做为虫草属的模式种，北冬虫夏草是我国的一种兼具食用和药用珍贵价值的优质大型真菌，其化学成分和药理活性研究结果表明，北冬虫夏草子实体中除了富含蛋白质、氨基酸、维生素及钙、锰、锌、硒等微量元素外，还含有虫草菌素、虫草酸、虫草多糖、SOD酶等主要活性成分，具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗辐射、降血糖、降血脂、抗疲劳、延缓衰老等多种生理功效。
由于野生冬虫夏草对生长环境要求较高，所以产量受到极大限制，加之近年来人们对冬虫夏草的需求不断增长，有限的天然资源日趋枯竭，无法满足人类需求。而做为与天然冬虫夏草同属的北冬虫夏草，具有与天然冬虫夏草有相似的成份和医疗保健功效，可代替野生冬虫夏草入药和用于食疗，效果显著。
在本发明之前，目前对北冬虫夏草子实体培养的研究仍处于实验室小规模培养阶段，没有进入实用阶段。同时，大多数对北冬虫夏草子实体培养的研究采用的培养基主要成分为大米，相对于其他菌类，生产成本过高，且生物转化率较低，不具备经济意义。
发明内容
本发明的目的就在于克服上述缺陷，研制一种具有经济实用价值的北冬虫夏草子实体的培养基及制备方法。
本发明的技术方案是：
一种北冬虫夏草子实体的培养基，其主要技术特征在于由下列成份按重量比组成：
小麦85-90g、蚕虫粉3-4g、葡萄糖1-3g、蛋白胨1-3g、硫酸镁0.1-0.2g、磷酸二氢钾0.1-0.25g、柠檬酸三氨0.1-0.25g、维生素B10.01-0.03g、纯净水40-50ml。
本发明的另一技术方案是：
一种北冬虫夏草子实体的培养基的制备方法，其主要技术步骤如下：
(1)将葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、磷酸二氢钾、柠檬酸三氨、维生素B1按重量比在纯净水中充分溶解，倒入栽培瓶中；
(2)将小麦、蚕虫粉按重量比放入上述栽培瓶中，搅拌均匀后封口；
(3)将上述栽培瓶放入高压灭菌锅，在121℃、1.05MPa条件下，灭菌3～4个小时；
(4)得北冬虫夏草子实体的培养基。
本发明的优点在于：采用了小麦代替大米作为主要碳源，因为小麦的蛋白含量高于大米，有利于菌种转化培养基；加入蚕虫粉可以起到协同作用，由于蚕虫粉丝肽类蛋白含量高，是菌体合成虫草菌素和核苷类物质的主要来源，可促进核苷类物质的转化；使用小麦还可以增加培养基的透气性，利于菌丝生长，使菌体早期发育成长速度快，子实体长势均匀，颜色较深；并且有效降低了生产成本，可进行大规模产业化生产。
本发明的效果还在于：北冬虫夏草菌种性状表达更加稳定，发菌速度快，抗病防杂菌污染能力强，发菌率提高；子实体高度平均增长幅度较大；主要活性成分虫草菌素的产量提高，虫草酸和虫草多糖的产量也有较大提高。
本发明的其它优点和效果将在下面继续描述。
具体实施方式
实施例1：
1.称取葡萄糖2g、蛋白胨2g、硫酸镁0.2g、磷酸二氢钾0.1g、柠檬酸三氨0.2g、维生素B1 0.02g，在40ml纯净水中充分溶解，放入栽培瓶中；
2.称取90g小麦、4g蚕虫粉放入上述栽培瓶中，搅拌均匀；
3.选用耐高温高压的聚丙烯薄膜和橡皮筋封住栽培瓶口；
4.将上述栽培瓶放入高压灭菌锅，在121℃、1.05MPa条件下，灭菌3～4个小时；
5.得北冬虫夏草子实体的培养基(在栽培瓶中)。
6.在无菌条件下，将北冬虫夏草菌种接种在培养基上；
7.将接种后的北冬虫夏草栽培瓶密封后移入经消毒处理的培养室内，将温度保持在18-20℃；
8.10天左右待北冬虫夏草子实体产生后适当升温至21-24℃。在菌丝体和子实体生长过程中需要严格控制培养室的光照、温度和湿度等条件。
9.子实体采收后测量其虫草菌素含量为0.237％。
实施例2：
1.称取葡萄糖1.5g、蛋白胨3g、硫酸镁0.1g、磷酸二氢钾0.15g、柠檬酸三氨0.25g、维生素B10.01g，在50ml纯净水中充分溶解，放入栽培瓶中；
2.称取85g小麦、3g蚕虫粉放入上述栽培瓶中，搅拌均匀；
3.选用耐高温高压的聚丙烯薄膜和橡皮筋封住栽培瓶口；
4.将上述栽培瓶放入高压灭菌锅，在121℃、1.05MPa条件下，灭菌3～4个小时；
5.得北冬虫夏草子实体的培养基。
6.在无菌条件下，将北冬虫夏草菌种接种在培养基上；
7.将接种后的北冬虫夏草栽培瓶密封后移入经消毒处理的培养室内，将温度保持在18-20℃；
8.10天左右待北冬虫夏草子实体产生后适当升温至21-24℃。在菌丝体和子实体生长过程中需要严格控制培养室的光照、温度和湿度等条件。
9.子实体采收后测量其虫草菌素含量为0.219％。
实施例3：
1.称取葡萄糖3g、蛋白胨2g、硫酸镁0.15g、磷酸二氢钾0.2g、柠檬酸三氨0.15g、维生素B10.03g，在50ml纯净水中充分溶解，放入栽培瓶中；
2.称取90g小麦、3.5g蚕虫粉放入上述栽培瓶中，搅拌均匀；
3.选用耐高温高压的聚丙烯薄膜和橡皮筋封住栽培瓶口；
4.将上述栽培瓶放入高压灭菌锅，在121℃、1.05MPa条件下，灭菌3～4个小时；
5.得北冬虫夏草子实体的培养基；
6.在无菌条件下，将北冬虫夏草菌种接种在培养基上；
7.将接种后的北冬虫夏草栽培瓶密封后移入经消毒处理的培养室内，将温度保持在18-20℃；
8.10天左右待北冬虫夏草子实体产生后适当升温至21-24℃。在菌丝体和子实体生长过程中需要严格控制培养室的光照、温度和湿度等条件。
9.子实体采收后测量其虫草菌素含量为0.230％。
应用本发明的结果显示：
发菌率提高到99％；
子实体高度平均增长10％，颜色较深，长势整齐；
北冬虫夏草内核苷含量提升20％左右，虫草菌素含量提升15-25％，达到0.22-0.24％。
本发明请求保护的范围并不仅仅局限于本具体实施方式的描述。
Claims (4)
1.一种北冬虫夏草子实体的培养基，其特征在于由下列成份按重量比组成：
小麦85-90g、蚕虫粉3-4g、葡萄糖1-3g、蛋白胨1-3g、硫酸镁0.1-0.2g、磷酸二氢钾0.1-0.25g、柠檬酸三氨0.1-0.25g、维生素B10.01-0.03g、纯净水40-50ml。
2.一种北冬虫夏草子实体的培养基的制备方法，其步骤如下：
(1)将葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、磷酸二氢钾、柠檬酸三氨、维生素B1按重量比在纯净水中充分溶解，倒入栽培瓶中；
(2)将小麦、蚕虫粉按重量比放入上述栽培瓶中，搅拌均匀后封口；
(3)将上述栽培瓶放入高压灭菌锅，在121℃、1.05MPa条件下，灭菌3～4个小时；
(4)得北冬虫夏草子实体的培养基。
3.根据权利要求2所述的一种北冬虫夏草子实体的培养基的制备方法，其特征在于小麦经清水洗涤后在常压下蒸20分钟。
4.根据权利要求2所述的一种北冬虫夏草子实体的培养基的制备方法，其特征在于蚕虫粉采用活体四龄仓虫粉，细度为100目。
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