CN101254242A - 一种中药组合物在制备抑制血管紧张素ⅱ受体的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物的新用途，具体地是该中药组合物在制备抑制血管紧张素II受体表达的药物中的应用。本发明药物能不同程度抑制糖尿病患者血浆、肾组织Ang I、Ang II水平的升高，逆转糖尿病患者肾组织AT1aR的mRNA、AT2R的mRNA表达的上调和AT1aR/AT2R比值的增加，并能逆转糖尿病患者肾重/体重比的增加，而血糖并无明显改变，本发明药物能抑制糖尿病患者肾素－血管紧张素系统激活，起到延缓和改善糖尿病肾病的作用，且这种作用不依赖于血糖的改变。

Description

一种中药组合物在制备抑制血管紧张素Ⅱ受体的药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地，涉及一种中药组合物在制备抑制血管紧张素II受体的药物中的应用。

背景技术

肾素-血管紧张素系统(Renin-angiotensin system，RAS)是人生理的主要调节因子。它通过对心脏、血管和肾脏的调节作用控制了血压、体液和电解质平衡。近来研究证实，RAS还广泛存在于局部组织，包括肾组织，以自分泌、旁分泌和胞内分泌的形式，调节局部组织的血流和细胞的生长、增殖和代谢，其效应不依赖于循环的RAS系统。肾素将血管紧张素原转化为十肽的血管紧张素I(angiotensin I，Ang I)，Ang I在体内存留时间短且生物活性较弱，它在血管紧张素转化酶(ACE)作用下转化成具有生物活性的血管紧张素II(angiotensin II，Ang II)。现在Ang II被认为是一个影响细胞功能的调节包括细胞的增殖，凋亡，迁徙，炎症和纤维化在内的多效应激素，是RAS系统的主要活性成分，它的升高预示RAS系统的激活。在糖尿病高糖的病理条件下，局部的RAS激活，升高的AT II造成内皮功能紊乱，结构重塑，血管炎症，并与糖尿病肾病，左心室肥大，动脉粥样硬化的发生、发展密切相关[Touyz RM & Schiffrin EL.Signal transduction mechanismsmediating the physiological and pathophysiological actions ofangiotensin II in vascular smooth muscle cells(血管平滑肌细胞中调节血管紧张素II生理学和病理学行为的信号转导机制).PharmacologicalReviews(药理学评论)，2000，52：639-672.]。

血管紧张素II主要通过其1型受体(angiotensin II receptors，AT1R)和2型受体(AT2R)发挥生物学作用[Shanmugam S and Sandberg K.Ontogenyof angiotensin II receptors(血管紧张素II受体的个体发生学).Cell BiolInt(国际细胞生物学)，1996，20(3)：169-176]。

目前临床和实验室的研究均提示在糖尿病肾病发病机理中RAS系统的重要的作用。高糖导致Ang II增加使肾脏的血流动力学恶化并导致一系列的细胞因子、生长因子和细胞内信号的改变，是糖尿病肾病的重要的病理机制之一[Wolf G，Ziyadeh FN.The role of angiotensin II in diabeticnephropathy：emphasis on nonhemodynamic mechanisms(血管紧张素II在糖尿病肾病中的角色：强调非血流动力学机制).Am J Kidney Dis(美国肾脏病杂志)，1997，29(1)：153-163]。

本发明是在第01131203.3号中国专利和第200410048292.2号专利申请的基础上进行的改进发明，在此全文引用该两专利文件记载的内容。本发明提供了一种中药组合物在制备治疗糖尿病肾病的药物中的新应用，通过对本发明药物干预前后血浆和肾脏血管紧张素水平及其受体mRNA的表达的测定，确定其对糖尿病RAS系统的影响及糖尿病肾脏保护作用。

发明内容

本发明目的是提供一种中药组合物在制备抑制血管紧张素II受体的药物中的应用，其中，该血管紧张素II受体包括受体1和受体2。该中药组合物还降低血管紧张素II受体1/血管紧张素II受体2的比值。

所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参3-10  水蛭3-11  土鳖虫5-10  乳香(制)1-5  赤芍3-9  降香1-5

檀香1-5   全蝎3-9   蝉蜕3-12    蜈蚣1-3      冰片1-7  酸枣仁(炒)3-10；

优选地，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参6  水蛭10  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2  全蝎7   蝉蜕7    蜈蚣1      冰片5  酸枣仁(炒)5；或：

人参10  水蛭8  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2   全蝎9  蝉蜕7    蜈蚣1      冰片5  酸枣仁(炒)5；或：

人参6  水蛭11  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2  全蝎3  蝉蜕7  蜈蚣1  冰片5  酸枣仁(炒)5；

更优选地，上述中药组合物的活性成分由下列成分组成：

a平均粒径小于100μm的全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫、蝉蜕及制乳香药粉；

b冰片药粉；

c由降香和檀香提取的挥发油；

d人参用乙醇提取后的醇提液经浓缩后的醇提浸膏；

e提取成分c后的降香和檀香药渣的水提液、赤芍和炒酸枣仁加水煎煮后的水提液以及提取成分d后的人参药渣的水提液过滤、混匀后浓缩成的水提浸膏。

本发明还公开了含有上述中药组合物作为活性组分的药物制剂为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、软胶囊或滴丸剂。

本发明的另一目的是提供上述中药组合物在制备抑制糖尿病肾病患者血管紧张素II作用的药物中的应用。

本发明的另一目的是提供上述中药组合物在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用。

本发明中药组合物中，作为活性组分的原料药的拉丁名及其加工方法来自《中药大辞典》(1977年7月，第一版，上海科学技术出版社)和《中国药典》(2005年版，化学工业出版社)。

本发明中药组合物还可以按常规的制剂工艺，例如，范碧亭《中药药剂学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺，制成药剂学可接受的任意常规剂型，例如胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、软胶囊、滴丸等。

本发明的应用中，所述中药组合物为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、软胶囊、滴丸制剂中的一种，为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记载的辅料)。

本发明制剂优选通过以下制备方法制成：将上述配比的水蛭、全蝎、蝉蜕、土鳖虫、蜈蚣等五味药洗净，低温烘干，备用；檀香、降香提取挥发油，药渣及水溶液备用；人参用70％乙醇加热回流提取二次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味；人参药渣与檀香、降香的药渣以水溶液合并，加入赤芍、酸枣仁(炒)，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)的清膏，加入上述人参醇提液，混匀，低温干燥，粉碎成细粉；乳香(制)与水蛭等五味共粉碎成细粉；冰片研细，分别与上述细粉配研，混匀，喷入挥发油，混匀，装入胶囊，即得。

或者，本发明制剂优选通过以下制备方法制成：

a)原料药的重量比为：人参3-10份、水蛭3-11份、土鳖虫5-10份、制乳香1-5份、赤芍3-9份、降香1-5份、檀香1-5份、全蝎3-9份、蝉蜕3-12份、蜈蚣1-3份、冰片1-7份、炒酸枣仁3-10份；

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加水煎煮，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，浓缩成醇提浸膏，水提液过滤与所有的水提液混匀后浓缩成水提浸膏；

d)制剂工艺：

在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c)所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成胶囊。

或者，本发明制剂优选通过以下制备方法制成：

a)原料药的重量比为：人参3-10份、水蛭3-11份、土鳖虫5-10份、乳香(制)1-5份、赤芍3-9份、降香1-5份、檀香1-5份、全蝎3-9份、蝉蜕3-12份、蜈蚣1-3份、冰片1-7份、炒酸枣仁3-10份；

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加水煎煮，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，浓缩成醇提浸膏，水提液过滤与所有的水提液混匀后浓缩成水提浸膏，将浸膏直接喷雾干燥成喷雾粉；

d)制剂工艺：

将超微粉碎粉与步骤c)所得喷雾干燥粉一起加到沸腾制粒干燥机中，再喷溶媒制成颗粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成胶囊。

本发明药物的用量，按原料药总重量计，为每次0.8-3克，每日服用2-4次，优选为每次1.11-2.22克，每日服用三次。

具体实施方式

实施例1：本发明药物的制备

a)原料药配方为：

人参  39.6g    水蛭  72.6g   土鳖虫  46.2g    乳香(制)    13.2g

赤芍  33g      降香  13.2g   檀香    13.2g    全蝎        19.8g

蝉蜕  46.2g    蜈蚣  6.6g    冰片    33g      酸枣仁(炒)  33g

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于30-40μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水煎液，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70％的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成相对密度为0.9～1.1(60℃)醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至相对密度为0.9～1.1(60℃)的清膏，备用；

d)制剂工艺：

在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c)所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成1000粒胶囊。

本发明药物的用量，为每次2-4粒，每日服用三次。

实验例本发明药物对糖尿病大鼠肾组织血管紧张素水平及其受体的影响

1材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物健康雄性SD大鼠(中国人民解放军第二军医大学实验动物中心提供)，重190～215g，大鼠自由进水和摄食，清洁级适应性饲养5天。

1.1.2实验仪器强生稳豪血糖仪，购自美国强生公司；实时荧光定量PCR仪(DNA Engine Opticon^TM)，购自美国MJ Research公司。

1.1.3主要试剂(1)本发明药物：河北以岭医药股份有限公司提供；(2)AI、AII放免试剂盒：北京北方生物技术研究所生产；(3)肾组织血管紧张素II受体1型(AT1aR)mRNA和2型(AT2R)PCR引物：由上海生工生物工程技术服务有限公司合成；(4)链脲佐菌霉素(STZ)：美国Sigma公司生产，产品批号046K1206；(5)诺和灵N胰岛素：丹麦诺和诺德有限公司生产，产品批号RVG0462。

1.2方法

1.2.1糖尿病动物模型的建立及分组

大鼠46只随机分为二组：糖尿病模型组(n＝35)和正常对照组(NC组，n＝11)。糖尿病模型组以链脲佐菌霉素(STZ，购自Sigma公司，10mg/ml，溶于PH＝4.5，0.1mmol/L柠檬酸缓冲液)一次性腹腔注射(60mg/kg)诱发，3天后尾静脉采血测定末梢血糖，以血糖＞16.7mmol/L者定为糖尿病造模成功。NC组腹腔注射相同体积的0.1mmol/L柠檬酸缓冲液。将造模成功的大鼠适应性饲养3天后，再随机分组：(1)糖尿病本发明药物小剂量治疗组(DM+TL1组，n＝11)：本发明药物直接溶于蒸馏水，0.5g/kg/d，每天早上9:00AM-10:00AM一次性灌胃。(2)糖尿病本发明药物大剂量治疗组(DM+TL2组，n＝11)：本发明药物直接溶于蒸馏水，1.0g/kg/d，每天早上9:00AM-10:00AM一次性灌胃。(3)糖尿病未治疗组(DM组，n＝13)，在饲养过程中死亡2只，与(4)正常对照组(NC组，n＝11)均以同一时间同等剂量蒸馏水一次灌胃。为避免糖尿病大鼠血糖过高发生酮症死亡，根据每周2次尾静脉采血测血糖注射2-4U诺和灵N，自由饮水和摄食。所有组每周2次尾静脉采血糖，每周1次测体重。糖尿病成模后治疗10周后处死。在饲养过程中，DM+TL2组因灌胃不当死亡1只。DM组死亡2只，1只为相互撕咬致死，另外1只为处死时可能麻醉剂过量。

1.2.2组织及血浆标本处理

大鼠处死前一天禁水禁食一天，称取体重后按300mg/kg腹腔注射10％水合氯醛麻醉，麻醉后大鼠腹主动脉取尽动脉血处死大鼠，用4℃等渗盐水灌注双肾后迅速取出肾脏，0.4％DEPC水冲洗干净后滤纸吸干水分，去肾包膜后分别称重并记录。取血后每ml血用0.3M EDTA 20ul，0.32M二巯基丙醇10ul，8-羟基喹林硫酸盐20ul抗凝摇匀。4℃冰箱保存1-2小时取出后2500转/分，离心7分钟(4℃)，取上清放入低温冰箱保存(-20℃)。(按北京北方生物技术研究所AI和AII试剂盒要求处理)。取左肾组织去掉包膜及肾门部血管，切成100mg大小分管快速液氮冷冻后-70℃冰箱保存。取冻存肾组织约100mg滤纸吸干水分后称重后加入0.1mmol/L的醋酸煮沸10分钟冰浴迅速冷却，匀浆(14000rpm×10秒3次)，4℃离心(10000rpm×20分钟)，方法同温绍君、汪家瑞、何士大等《大鼠老化过程中心肌局部血管紧张素的研究》(中华心血管病杂志，1990，18(2)：91-93)所述，取上清液置于-20℃冰箱保存备用。

1.2.3血浆和肾组织Ang I和Ang II检测

取冻存全部血浆标本及组织均浆标本严格按照北京北方生物技术研究所AI、AII放免试剂盒说明书冰浴下检测血浆和肾组织匀浆Ang I和Ang II水平。所有标本均同批检测。

1.2.4 AT1aRmRNA和AT2RmRNA引物设计与合成

设定GAPDH为内标，从Genbank中检索出大鼠GAPDH、AT1aR、AT2R基因cDNA序列，并设计各基因引物。

大鼠GAPDH上游引物：5’-GTTCAACGGCACAGTCAAGG-3’；

下游引物：5’-CACCAGTGGATGCAGGGAT-3’；扩增产物473bp。

大鼠AT1aR上游引物：5’-ATTCGTGGCTTGAGTCCTGTTC-3’；

下游引物：5’-TCTTGGATTCTTTTGATACCATCTTC-3’；扩增产物286bp。

大鼠AT2R上游引物：5’-GGAAGAACAGAATTACCCGTGAC-3’；

下游引物：5’-AACCATTGCTAGGCTGATTACA-3’；扩增产物399bp。

1.2.5RNA的抽提：将组织样品从液氮中取出，迅速加入1ml总RNA提取试剂(trizol)，匀浆使组织裂解，转移到1.5ml焦碳酸二乙脂(DEPC)处理的无菌离心管中，加入400ul氯仿，剧烈震荡混匀，低温12000rpm离心10min转移上清至另一离心管中，加入等体积氯仿∶异戊醇(24∶1)，剧烈震荡混匀，低温12000rpm离心10min转移上清至另一离心管中，加入等体积氯仿∶异戊醇(24∶1)，剧烈震荡混匀，室低温12000rpm离心10min转移上清至另一离心管中，加入等体积异丙醇，震荡混匀，室温放置2min，低温12000rpm离心10min轻轻移弃上清，防止吸去沉淀，加入1ml 70％乙醇，悬浮沉淀，低温12000rpm离心10min并重复1次--轻轻移弃上清，防止吸去沉淀，低温12000rpm离心1min，用移液器吸干残余酒精，使酒精挥发，加入100ul DEPC处理的灭菌水，溶解RNA--电泳察看RNA的浓度和完整性。

1.2.6RNA的逆转录

2μg RNA，1μl寡核苷酸引物，0.5μl核糖核酸抑制剂，补灭菌水至终体积10μl，72℃水浴2min，迅速冰浴2min，离心收集混合液至管底，每个反应管中顺序加入以下试剂2μl 10X缓冲液，1μl三磷酸脱氧核苷(dNTP)混合物(10mM each)，0.5μl核糖核酸酶抑制剂，5.5μl无菌水，1μl MMLV反转录酶(100U/l)，42℃空气浴孵育1.5hr，95℃5min。

1.2.7荧光定量PCR：

PCR扩增30μl体系：1μl第一链产物，3μl 10X缓冲液，1μl dNTP，0.6μl，引物血管紧张素II受体1型(AT1aR)(25pmol/μl)，0.6μl引物血管紧张素II受体2型(AT2R)(25pmol/μl)，0.3μl荧光染料探计(SYBR)，1μl栖热水生菌(Taq)，22.5μl无菌水，置实时荧光定量PCR仪进行反应。反应参数为94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共40个循环，72℃延伸10min。产物16℃保存。PCR结果以测定样本基因及内标基因的CT值表示，CT值为目标扩增产物达到设定阈值所经历的循环数。以ΔCT表示目标基因和内标基因CT值的差异，以2^-ΔCT表示AT1aR mRNA和AT2R mRNA的基因表达量。

1.2.8统计学方法

采用SPSS12.0软件系统进行统计学分析。各指标以x±s表示，显著性分析采用单因素方差分析和组间均数比较t检验。方差不齐参数比较采用卡方检验。

2结果

2.1大鼠肾重/体重的改变

所有糖尿病大鼠体重均较NC组明显减轻，血糖明显升高(与NC组比较P＜0.001)。这种体重的减轻在DM+TL2组较DM组稍有改善(DM组比较P＜0.05)，而DM+TL1组与DM组间体重无显著差异；本发明药物各治疗组与DM组血糖水平无明显差异。在DM组肾重相对增加，其肾重/体重比在糖尿病大鼠均较NC组有不同程度的增加(与NC组比较P＜0.001)，经本发明药物干预后DM+TL1组和DM+TL2组肾重/体重比均较DM组有不同程度的降低(与DM组比较P＜0.001)，这种改善在DM+TL2组更为明显，但各治疗组间并无明显差异(见表1)。

表1：糖尿病大鼠肾脏和肾重/体重改变(x±s)

DM+TL1为本发明药物小剂量治疗组，DM+TL2为本发明药物大剂量治疗组，NC为正常组，DM为糖尿病肾病模型组，***P＜0.001，**P＜0.0)1，*P＜0.05与DM组比较；###P＜0.001，##P＜0.01，#P＜0.05与NC组比较

2.1大鼠血浆和肾组织Ang I、Ang II水平变化

在所有糖尿病大鼠可见血浆和肾组织Ang I和Ang II水平均明显升高(与NC组比较P＜0.001)，经本发明药物干预后在DM+TL1组和DM+TL2组血浆和肾组织Ang I和AngII水平均较DM组有不同程度的下降，这种下降在DM+TL2组更显著(组间差异P＜0.001)，但DM+TL1组和DM+TL1组血浆和肾组织AngI和Ang II水平均未降低到正常水平(见表2)。

表2大鼠血浆和肾组织血管紧张素水平改变(x±s)

DM+TL1为本发明药物小剂量治疗组，DM+TL2为本发明药物大剂量治疗组，NC为正常组，DM为糖尿病肾病模型组，***P＜0.001，**P＜0.01，*P＜0.05与DM组比较；###P＜0.001，##P＜0.01，#P＜0.05与NC组比较

2.2大鼠肾组织AT1aR mRNA、AT2R mRNA表达及AT1aR/AT2R改变

DM组大鼠肾组织AT1aR mRNA、AT2R mRNA表达均较NC组显著增加(分别较NC组增加约39.0倍和4.4倍，P值均＜0.001)；AT1aR/AT2R比值在DM组较NC组明显升高(P＜0.001)。DM+TL1组和DM+TL2组肾组织AT1aR mRNA、AT2R mRNA表达较DM组显著降低(P值均＜0.001)，且DM+TL2组较DM+TL1组肾组织AT1aR mRNA、AT2R mRNA水平降低更显著(组间差异P＜0.001)。DM+TL1组和DM+TL2组肾组织AT1aR/AT2R比值较DM组降低(分别P＜0.001，P＜0.05)，这种下降在DM+TL1组较DM+TL2组明显，但组间差异无统计学意义(见表3)。

表3：大鼠肾组织AT1aR mRNA、AT2R mRNA表达改变及AT1aR/AT2R改变(x±s)

DM+TL1为本发明药物小剂量治疗组，DM+TL2为本发明药物大剂量治疗组，NC为正常组，DM为糖尿病肾病模型组，***P＜0.001，**P＜0.01，*P＜0.05与DM组比较；###P＜0.001，##P＜0.01，#P＜0.05与NC组比较

3结论

本研究显示在DM组大鼠肾脏AT1aR mRNA、AT2R mRNA表达均明显上调，在糖尿病肾脏虽然显示局部组织AT2R mRNA表达增加，但远不及AT1aR mRNA增加明显(AT1aR mRNA和AT2R mRNA分别较NC组增加39.0倍和4.4倍)，提示在糖尿病大鼠肾脏RAS激活，肾脏局部组织Ang II增加，AT1R和AT2R表达失衡，AT1R上调，并可能部分通过上调AT2R来对抗一部分因AT1R上调所引起的病理作用，这或许是糖尿病病理状态下的一种保护性机制，但AT1aR/AT2R比值在糖尿病的明显升高，提示增加的Ang II主要通过其1型受体上调导致糖尿病肾损伤。

我们的研究显示本发明药物能不同程度抑制实验性糖尿病大鼠血浆、肾组织Ang I、Ang II水平的升高，逆转实验性糖尿病大鼠肾组织AT1aR的mRNA、AT2R的mRNA表达的上调和AT1aR/AT2R比值的增加，并能逆转肾重/体重比在糖尿病大鼠的增加，而血糖并无明显改变，提示本发明药物能抑制实验性糖尿病大鼠肾素-血管紧张素系统激活，起到延缓和改善糖尿病肾病的作用，且这种作用不依赖于血糖的改变。

Claims (9)

1. 一种中药组合物在制备抑制血管紧张素II受体表达药物中的应用，其特征在于所述血管紧张素II受体包括受体1和受体2，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参3-10  水蛭3-11  土鳖虫5-10  乳香(制)1-5  赤芍3-9  降香1-5

檀香1-5  全蝎3-9  蝉蜕3-12  蜈蚣1-3  冰片1-7  酸枣仁(炒)3-10。

2. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物降低血管紧张素II受体1/血管紧张素II受体2的比值。

3. 如权利要求1所述的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参6  水蛭10  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2  全蝎7  蝉蜕7  蜈蚣1  冰片5  酸枣仁(炒)5；

或：

人参10 水蛭8  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2  全蝎9  蝉蜕7  蜈蚣1  冰片5  酸枣仁(炒)5；

或：

人参6  水蛭11  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2  全蝎3  蝉蜕7  蜈蚣1  冰片5  酸枣仁(炒)5。

4. 如权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于所述中药组合物的活性成分由下列成分组成：

a平均粒径小于100μm的全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫、蝉蜕及制乳香药粉；

b冰片药粉；

c由降香和檀香提取的挥发油；

d人参用乙醇提取后的醇提液经浓缩后的醇提浸膏；

e提取成分c后的降香和檀香药渣的水提液、赤芍和炒酸枣仁加水煎煮后的水提液以及提取成分d后的人参药渣的水提液过滤、混匀后浓缩成的水提浸膏。

5. 如权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于，含有所述中药组合物作为活性成分的药物制剂为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、软胶囊剂或滴丸剂。

6. 如权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征是所述中药组合物在制备抑制糖尿病肾病患者血管紧张素II受体表达药物中的应用。

7. 如权利要求4所述的应用，其特征是所述中药组合物在制备抑制糖尿病肾病患者血管紧张素II受体表达药物中的应用。

8. 如权利要求5所述的应用，其特征是所述中药组合物在制备抑制糖尿病肾病患者血管紧张素II受体表达药物中的应用。

9. 如权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于，所述中药组合物在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用。