CN101237783B - 提供谷氨酰胺的组合物和方法 - Google Patents

Abstract

一种制备补充了谷氨酰胺的食物产品的方法，所述方法为使水分和主要包含肉和碳水化合物的营养基质与谷氨酰胺的肽源接触形成湿混合物，并在约50℃到约105℃的温度加热此湿混合物足够的时间以煮熟营养基质。所述方法形成按重量计含有约60％到约85％的水分的熟食物组合物。所述食物产品用于喂食动物以提高谷氨酰胺吸收或加强免疫功能。

Description

提供谷氨酰胺的组合物和方法

相关申请的交叉引用

本申请要求保护2005年6月9日提交的美国临时申请序号60/689,126的优先权，其公开内容通过引用结合到本文中。

发明领域

本发明大体上涉及营养组合物，尤其是包含补充的谷氨酰胺的营养食物组合物以及此组合物的制备和使用方法。

发明背景

谷氨酰胺可由不同的组织，例如骨骼肌、肝脏和脂肪组织合成。但是，研究表明当新陈代谢所需要的谷氨酰胺超过游离谷氨酰胺池中可用的量和通过从头合成所能提供的量时，谷氨酰胺是条件必需的。例如在锻炼或其它代谢应激时(例如禁食、严重受伤、疾病等)，血浆谷氨酰胺的需求显著升高。例如，淋巴细胞和巨噬细胞等各种免疫系统细胞，都依赖谷氨酰胺作为主要的能量源，因此当免疫反应增强时，对谷氨酰胺的需求也增长。

使用谷氨酰胺的方法在本领域中已有描述。欧洲专利第672352号描述了多种富含谷氨酰胺肽的溶液。美国专利第5,849,335号提出一种利用角豆胚芽蛋白水解物给人类或动物提供谷氨酰胺的组合物及方法。

尽管能够利用游离谷氨酰胺(L-谷氨酰胺)，但是用游离谷氨酰胺来补充食物仍具有许多局限性。例如在高温或在与食物加工相关的某些条件下游离谷氨酰胺并不稳定。含有游离谷氨酰胺的组合物不能以罐装食物等形式在高温和/或高压下灭菌或进一步加工，而不破坏游离谷氨酰胺。因此就需要提供补充谷氨酰胺的营养食物组合物。

发明概述

本发明提供了一种耐蒸煮(retortable)的食物组合物，其按重量计含有约60％到约85％的水分、主要包含肉和碳水化合物的营养基质及谷氨酰胺的肽源。

本发明还提供一种补充了谷氨酰胺的食物产品，其包含容纳有此食物组合物的密封的耐蒸煮容器。

本发明还进一步提供一种制备这种补充了谷氨酰胺的食物产品的方法。该方法包括(a)使水分和主要包含肉和碳水化合物的营养基质与谷氨酰胺的肽源接触形成湿混合物；(b)在约50℃到约105℃的温度加热此湿混合物足够的时间煮熟营养基质，形成按重量计含有约60％到约85％的水分的熟食物组合物；(c)用密封的耐蒸煮容器包装该煮熟的食物组合物；和(d)用蒸煮法高压灭菌包装的组合物制成该食物产品。

本发明还提供了一种提高动物的谷氨酰胺吸收的方法。该方法包括给动物喂食煮熟的食物组合物，所述组合物含有按重量计约60％到约85％的水分、主要包含肉和碳水化合物的营养基质及谷氨酰胺的肽源。

本发明又提供了一种加强有需要的动物的免疫功能的方法。该方法包括在免疫功能加强有效期用含有至少一种煮熟的包含有按重量计约60％到约85％的水分、主要包含肉和碳水化合物的营养基质及谷氨酰胺的肽源的食物组合物的规定饮食口粮供养这些动物。

本发明的其它及更进一步的目的、特征及优势对于本领域的技术人员是显而易见的。

发明详述

一方面，本发明提供了食物组合物，其含有在制备罐装食物组合物中常见的高温和/或高压等加工条件下仍稳定的谷氨酰胺源。本发明部分基于这一发现，即在高温和/或高压加工煮熟和/或高压灭菌食物前，向高含水量的以肉和碳水化合物为基质的食物组合物中加入谷氨酰胺的肽源生成的谷氨酰胺比用游离谷氨酰胺代替肽源的组合物更为稳定，对食用该食物的动物仍保持生物可利用性。在加热时，游离谷氨酰胺降解为谷氨酸盐，释放出可能有毒的氨。本文所描述的更稳定的谷氨酰胺源最少解决了煮熟的食物产品的两个问题：谷氨酰胺的损失和可能的氨聚集。

本文所描述的该食物组合物是“耐蒸煮”的。“耐蒸煮”的食物组合物是准备放置在密封容器中或已经放置在这样的容器中的食物组合物，该组合物适合高压灭菌，例如，对组合物进行蒸煮法中的高温和/或高压处理，或者也可以是已经进行了这种通常用来灭菌罐装食物产品的高压灭菌等过程的组合物。“耐蒸煮”的容器是指适合加热或加热加压，如高压灭菌过程的容器，通常大多数是可密封的或密封的金属罐或金属箔袋。

采用其它方式灭菌食物组合物，包括高温或非高温灭菌、无菌处理、超高温处理(UHT)和/或高压并不自行从本范畴内排除一种组合物，只要该组合物在需要时能够通过蒸煮法灭菌，而实质上不损失物理或化学的完整性或动物的食用可接受性。

本文中进一步描述该食物组合物为“煮熟的”。蒸煮对于以肉和碳水化合物为基质的食物有各种不同的效果，包括对肉类组分的嫩化(例如通过蛋白质变性)和/或使其变成棕色，及对碳水化合物组分的软化、膨胀和/或凝胶作用，这些在对组合物的简单检查中显而易见。对于本组合物的煮熟方法和条件并不严格，但是可以如本文所述按照本发明的加工实施方案说明性地描述。但是，应该理解本文所描述的包括肽源组分的完整组合物是“煮熟的”组合物，即在向营养基质中补充谷氨酰胺肽源后再进行蒸煮。

该食物组合物为在动物营养学领域中已知的“湿”或“潮湿”食物，通常含有按重量计约60％到约85％的水分，即含有干燥物质(DM)的重量约为15％到约40％。在一个实施方案中，混合物含有按重量计约65％到约80％的水分，例如约75％重量的水分。

本发明中的食物组合物中的干燥物质主要是“营养基质”，其含有给动物提供，至少部分提供，饮食所需要的代谢能(ME)和蛋白质，任选的其它必需营养成分，如必需氨基酸、必需的脂肪酸、维生素和矿物质的主食成分。该营养基质主要包含(即重量超过50％)肉类组分和碳水化合物组分。在一个特定实施方案中，肉类和碳水化合物组分可以包含超过约75％重量的营养基质。

肉类组分可以从任何一种或多种包括肌肉组织和/或内脏在内的动物(例如哺乳动物、鸟类、鱼类或海产品)的蛋白质组织获得；可以是任何物理形式，例如容易确认的片或块，或者是切碎、研磨或再造的形式。

该碳水化合物组分可以包括淀粉、糖和/或纤维素，通常主要是从谷物(例如小麦、玉米、水稻等)、豆类(例如大豆)、块茎(例如马铃薯)和/或其它富含碳水化合物的植物部分(例如甜菜粕、西米、木薯等)中获得。碳水化合物组分可以为完整的形式(例如完整的谷粒)或研磨或粉碎的形式(例如面粉，粉碎的燕麦麸)。

该营养基质任选包含脂肪或油类组分和/或纤维组分。在一个实施方案中，营养基质给动物提供了基本上营养全面的规定饮食口粮(ration)。“营养全面的”规定饮食口粮包含有足够维持用规定饮食口粮喂养的健康动物的正常健康状态的营养成分。在另一个实施方案中，营养基质需要补充额外的营养成分如必需的氨基酸、必需的脂肪酸、维生素和矿物质来提供营养全面的饮食。

该食物组合物包含至少一种谷氨酰胺的肽源。本发明所采用的谷氨酰胺的一种肽源含有各种长度的氨基酸链的多肽片段，包括寡肽、三肽、二肽和在某些情况下的游离氨基酸。在一个实施方案中，谷氨酰胺的肽源包括含有稳定的谷氨酰胺的蛋白质水解产物。该水解产物可以作为普通蛋白质营养源，也可以作为包括谷氨酰胺在内的特定的氨基酸源。本文所用“水解产物”是指蛋白质源的水解产物或这类产物的合成等价物，不论其用何种具体方式制成。该水解产物可以为相对均匀或非均匀的氨基酸链长度。

该肽源中的多肽和其片段，包括游离氨基酸可以有一个分子量的范围，例如按重量计至少有约99％的此多肽和片段的分子量小于约50kd(千道尔顿)。在一个实施方案中，按重量计不到约10％的具有约10kd或更大的分子量。在不同的实施方案中，肽源中多肽和其片段的重量平均分子量不大于约18kd，不大于约12kd，不大于约10kd，不大于约8kd，不大于约6kd，不大于约4kd，或者不大于2kd。

该肽源的一种成分的分子量，包括平均分子量，如重量平均分子量可以用熟练的技术人员已知的任何方法测定。例如蛋白质水解产物中的多肽和其片段的分子量分布能够在介质如葡聚糖凝胶

(Sephadex)(Pharmacia)中用分子筛析色谱法，或用凝胶电泳法，例如用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定。

该肽源除了多肽、氨基酸链片段和游离氨基酸外还可以进一步包含有其它化学物质，例如脂质、脂肪、油脂、维生素和碳水化合物。肽源可包含从生物原料中得到的用来产生肽源的组分，和/或由肽源制造商添加的化学物质。这些物质可以为，例如碳水化合物如蔗糖、木薯淀粉、玉米甜味料、玉米淀粉、部分水解的淀粉、纤维素或部分水解的纤维素。其它的可以出现在肽源中的组分的非限定性实例包括有机油脂，例如大豆油、红花油、棕榈油、椰子油、葵花子油、花生油或芸苔油。

在特定的实施方案中，谷氨酰胺的肽源可以包括从植物(即植物蛋白水解物)或动物(即动物蛋白水解物)中获得的蛋白水解物。

对植物蛋白水解物没有限制，可以为从例如农作物、谷类、水果、根、块茎、茎、叶、蔬菜或它们的任何组合的可食用组织中获得的蛋白质的水解产物。在一个实施方案中，蛋白质水解产物至少部分是从农作物如大麦、燕麦、黑麦、小黑麦、小麦(包括普通小麦、硬粒小麦、Kamut

小麦和斯佩耳特小麦)、大豆的种子或谷粒和它们的组合中获得的。有用的植物蛋白质水解物的具体实例包括大豆谷蛋白水解产物、小麦谷蛋白水解产物和它们的组合。

对动物蛋白质水解产物没有限制，可以为从哺乳动物、鸟类、爬行动物、两栖动物、鱼类、无脊椎动物或它们的任何组合的组织中获得的蛋白质的水解产物。哺乳动物蛋白质源的实例包括牛、绵羊、猪、山羊、鹿、兔子、马和袋鼠，尤其是它们的乳汁、凝乳、乳清、血液和内部组织及器官如平滑肌、横纹肌、肝脏、肾脏、肠及心脏。鸟类蛋白质源的实例包括鸡、火鸡、鹅、鸭、鸵鸟、鹌鹑和鸽子，尤其是它们的蛋和内部组织及器官如平滑肌、横纹肌、肝脏、肾脏、肠及心脏。爬行动物蛋白质源的实例包括鳄鱼、蜥蜴、海龟和蛇。两栖动物蛋白质源的实例包括青蛙和蝾螈。鱼类蛋白质源的实例包括鲶鱼、青鱼、鲑鱼、鲔鱼、竹荚鱼、鳕鱼、大比目鱼、鳟鱼、旗鱼及它们的卵。无脊椎动物蛋白质源的实例包括龙虾、螃蟹、蛤、蚌、牡蛎及它们的组合。

蛋白质水解产物是市售的或者可以是用本领域技术人员通常已知的方法制备的。例如，适合的蛋白质水解产物可以通过用一种或多种酶如蛋白酶，例如胰蛋白酶或糜蛋白酶；一种或多种非酶的化学制剂如酸，例如乙酸；或一些它们的组合，来处理蛋白质的生物源而制备。由此，蛋白质水解产物可以通过已知的化学的或酶的方法生产，例如下面的专利和公布说明书中公开的方法：美国专利第5,589,357号；美国专利第4,879,131号；美国专利第5,039,532号；美国专利第6,403,142号；美国专利第6,589,574号；美国专利第6,455,273号；美国专利申请公布说明书第2003/0035882号和欧洲专利公布说明EP1 236 405。

针对本发明的目的的肽源可以为天然产生的或可以通过化学合成制备，例如通过用游离氨基酸和偶合试剂如1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳化二亚胺来合成随机的肽聚合物。

在一个实施方案中，肽源表现为组合物，其量在干物质基础上按重量计提供约0.5％到约5％的补充剂量的谷氨酰胺。可以理解食物组合物中的谷氨酰胺不仅来自于肽源组分，也来自于肉类组分，因为谷氨酰胺大体上在所有蛋白质中是一种天然产生的氨基酸。但是，本文所确定的谷氨酰胺在组合物中的量只包括肽源提供的补充性谷氨酰胺。在不同的实施方案中，组合物中补充性的谷氨酰胺含量约从1％到约4％，例如在干物质基础上按重量计约从1％到约3％。

不受理论的约束，相信任何出现在肽源中的游离谷氨酰胺都几乎不会有助于食用本发明食物组合物的动物的谷氨酰胺吸收，因为游离谷氨酰胺的不稳定性，尤其是在对该组合物进行烹饪(cooking)和/或蒸煮(retort)的过程中。相应地，在一个实施方案中，只有一小部分，例如在肽源中按重量计不到10％，不到5％，不到2％，或不到1％的谷氨酰胺是游离形式的谷氨酰胺。

除其它因素外，食物组合物中所含的肽源的量还取决于肽源中谷氨酰胺的含量。含有相对较高含量的稳定谷氨酰胺的肽源可以比含有较低含量的稳定谷氨酰胺的肽源的含量少。通常最有效的是选取谷氨酰胺含量高的肽源，例如从小麦谷蛋白中获得的或富含谷氨酰胺的肽源，条件是只有一小部分的谷氨酰胺是游离形式。在不同的实施方案中，肽源含有按重量计至少约10％，至少约15％，至少约20％，或者至少约25％，例如约30％的总谷氨酰胺。

该食物组合物除水分、营养基质和谷氨酰胺的肽源外任选包含一种或多种补充成分。在某些配方中，这些补充成分能够改变食物的物理特征，例如食物的硬度或质地，提高食物的可口性和/或作为一种营养补充剂。营养补充剂的实例包括维生素如维生素A、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、维生素B1、维生素B2、维生素PP、维生素B₆、叶酸、维生素B₁₂、生物素和泛酸；牛磺酸、DL-蛋氨酸、氯化胆碱、和矿物质如碳酸钙、氯化钠、氯化钾、磷酸二钙、氯化钠(碘化)、硫酸钙二水合物、氧化镁、氧化锌、硫酸亚铁、氧化锰、硫酸铜、碘酸钙和硒。

另一方面，本发明提供一种补充谷氨酰胺的食物产品，其包括容纳有本文所描述的食物组合物的密封耐蒸煮容器。在本文中，术语“补充了谷氨酰胺”是指具有的谷氨酰胺源不是食物中肉类组分天然含有的谷氨酰胺。术语“食物产品”在本文中是指包括容器和容器中的食物组合物的生产或销售的一种物品。

任何密封耐蒸煮容器都能够使用，包括但不仅限于金属罐、耐蒸煮的袋子或盘子、瓶子、坛子或耐蒸煮的叠合纸盒(例如TetraRecart^TM耐蒸煮纸盒)。封口应使容器气密。

又一方面，本发明还提供制备补充了谷氨酰胺的食物产品的方法。

在该方法的一个步骤中，水和主要包含肉和碳水化合物的营养基质与谷氨酰胺的肽源接触形成湿混合物。在制成品中，水的含量足以使食物组合物中按重量计含有约60％到约85％的水。在一个实施方案中，该组合物按重量计含有约65％到约80％的水，例如按重量计约75％的水。营养基质和谷氨酰胺的肽源的详细信息和选项如本文所述。本文中术语“接触”或“被接触”包括任何将所述的成分进行接触的过程，例如混合或表面应用的过程。

不受理论约束，相信湿混合物的pH值可以影响肽源提供的谷氨酰胺的生物利用度。湿混合物通常pH值约在2到8之间，但在特定情况下更低或更高的pH值是可接受的。在一个实施方案中，湿混合物的pH值约在4到7之间，例如约5.5到约6.5。

该方法的另一步骤，在约50℃到约105℃的温度加热此湿混合物足够的时间煮熟营养基质，形成煮熟的食物组合物。在一个实施方案中，蒸煮温度约从65℃到约90℃，例如约从80℃到约85℃。足够的时间通常约从5分钟到约30分钟。可以理解，除其它因素外，煮熟所需的时间视营养基质的性质和组成、所需的含水量、嫩化程度、变褐色程度和其它烹饪效果及蒸煮的温度而定。当采用较低的蒸煮温度时可能需要较长的蒸煮时间，当采用较高的蒸煮温度时可能需要较短的蒸煮时间。

混合和蒸煮的步骤可以分批或连续进行。在说明性的分批加工过程中，组合物的所有成分都在混合和蒸煮装置，例如搅拌锅，中接触形成湿混合物。然后升高搅拌锅中湿混合物的温度到一定水平并维持一段有效时间煮熟肉和碳水化合物组分。在说明性的连续加工方法中，有或没有受控的温度带，成分在连续的蒸煮装置中接触形成湿混合物。湿混合物在需要的温度下煮熟，有或没有循环周期(反转、前进、暂停)，搅拌系统以约从1到约65rmp的速率运动。

该方法的又一步骤中，煮熟的食物组合物包装在耐蒸煮的容器中，例如本文所提到的任何这样类型的容器，并且密封该容器。可以在组合物还在高温时进行包装。在一个实施方案中，蒸煮至少一部分是在密封的容器中进行的。在另一个实施方案中，组合物在蒸煮后放置入容器前已冷却或可以冷却。

在本方法的另一步骤中，得到的包装好的组合物用蒸煮的方法灭菌形成食物产品。任何蒸煮的方法，或有实质上等同效果的方法都能够采用。在一个实施方案中，填满和密封的耐蒸煮容器是放置在连续或分批的蒸煮装置中并暴露于约90℃到约120℃的温度下持续约3分钟到约80分钟。过高的温度或过长的暴露时间可能会有害地过分蒸煮该食物，低于约90℃的温度或暴露少于约三分钟可能导致灭菌不完全和产品不合格的过短贮藏期。本领域的技术人员能够针对特定产品容易地确定适合的温度和暴露时间组合。

在一个实施方案中，该食物产品的贮藏期至少为一个月。本文中“贮藏期”是指密封的产品在贮藏环境条件下保持其预期使用价值的适合性的时间段。在不同的实施方案中，食物产品至少有约6个月，至少有约1年，至少有约2年的贮藏期。

再一方面，本发明提供了一种提高动物对谷氨酰胺的吸收的方法。该方法包括如本文所述喂食动物煮熟的食物组合物。动物能够，但不必须，需要提高谷氨酰胺的吸收。例如，升高的谷氨酰胺吸收可能不能给动物的健康或良好状态带来立即或确定的益处，但在某些情况下可能是良好的预防措施。

又一方面，本发明提供了一种加强有需要的动物的免疫功能的方法。该方法包括在免疫功能加强有效期用包含至少一种本发明的煮熟的食物组合物的规定饮食口粮供养这些动物。

“需要”加强免疫功能的动物可以是因任何疾病、紊乱或损伤导致免疫系统缺乏免疫力的动物。在不同的实施方案中，该动物是正患有、经历或已经历选自腹泻、肠炎、术后消化道功能减退、化疗、烧伤、疲劳、癌症、恶病质和败血症中至少一种情况的一种或多种症状。该方法的实施可以包括用基本上由本文所描述的一种或多种谷氨酰胺补充组合物组成的规定饮食口粮来供养动物。除此之外，本文所描述的谷氨酰胺补充组合物能够补充动物的常规食物，或部分置换动物的常规食物。

“免疫功能加强有效期”的构成取决于与免疫功能减弱相关的特定的情况，该情况的严重性及其他因素。通常动物应该用本文所述的含有谷氨酰胺补充剂的规定饮食口粮喂食至少一周。在不同的实施方案中，这样的喂养持续至少约1个月，至少约6个月，至少约1年或至少约2年。在一个实施方案中，动物剩下的生命大体上靠补充了谷氨酰胺的规定饮食口粮来维持。

该动物可以为人类或非人类。在不同的实施方案中，该动物为脊椎动物，例如鱼、鸟、爬行动物或哺乳动物。用作说明的哺乳动物中，该动物可以为食肉目中的一种，包括但不仅限于犬科和猫科动物。

在一个特定的实施方案中，该动物为陪伴动物。本文中“陪伴动物”是被人类当作宠物饲养的任何种类的个体动物，或被作为宠物广泛驯养的动物中的多个种类的任何个体动物，包括狗(家犬)和猫(家猫)，无论个体动物是否完全或部分用作陪伴。因此本文中的“陪伴动物”包括工作犬，饲养用来控制鼠类的农场的猫等，以及宠物狗和猫。

尽管这些说明性的实施方案，可以理解本发明的方法通常也适合其它哺乳动物，包括非人类的哺乳动物，如非人类的灵长类(例如，猴子、黑猩猩等)，陪伴和工作动物(例如马等)，农畜(例如山羊、绵羊、猪、牛等)，和野生或动物园的动物(例如狼、熊、鹿等)。本发明的方法通常也适合用于非哺乳动物，如陪伴、农场、动物园和野生的鸟类(包括，例如燕雀、鹦鹉、鸭、鹅、鸡、火鸡、鸵鸟等)。

再一方面，本发明提供了一种提高在蒸煮和/或高压灭菌耐蒸煮(例如罐装的)的食物组合物前加入的补充的谷氨酰胺的稳定性的方法。该方法包括本文描述的以谷氨酰胺的肽源的形式加入补充的谷氨酰胺。

又一方面，本发明提供了一种传达信息或用法说明的工具，该信息或说明是关于本文所描述的喂食煮熟的食物组合物。该工具包括含有该信息和说明的标签、手册、广告、包装插页、计算机可读的数字或光学存储介质、音频介绍、可视播放、网站上的一或多个页面。

本发明并不局限于本文所描述的特定的方法、方案和试剂，因其可能会改变。此外，本文所用的术语只是为了描述特定的实施方案，而不是用来限制本发明的范围。本文及所附的权利要求中，单数形式“一”及“该”除非上下文清楚说明，否则包括复数关系，例如关于“一种方法”或“一种食物”包括多种方法和食物。同样，词汇“包含”应该理解为开放式的而不是封闭式的。

除非另有说明，本文使用的所有技术及科学术语及任何缩写都与本领域的普通技术人员通常的理解有相同的含义。虽然任何与本文所描述的类似或者相当的组合物、方法、生产的物品、或其它工具或原料能够用于实践本发明，但是优选本文描述的组合物、方法、生产的物品、或其它工具或原料。

本文所采用的所有百分比，包括实施例中的，除非另有说明，都是在干物质基础上的重量百分比。

本文所引用或提及的所有专利、专利申请、公布说明书及其它参考文献都在法律允许的范围内通过引用结合到本文。关于这些参考文献的讨论只是用来概述本文所的主张。并不承认这些专利、专利申请、公布说明书或参考文献，或它们的任何部分是相对早于本发明的文献，并明确保留对这些专利、专利申请、公布说明书及其它参考文献的准确性和恰当性表示质疑的权利。

实施例

本发明可以用下面的实施例进一步说明，虽然可以理解这些实施例包括在此只是为了说明的目的，而非用来限制本发明的范围，除非另外特别说明。

实施例1

本实施例说明了从加入罐装宠物食物产品的小麦谷蛋白水解产物获得的稳定谷氨酰胺源的生物利用度。

将24只狗随机分配到对照组、A组、B组和C组四组中的一组。将配制成按干物质计含有0％、1％、2％和4％的补充的谷氨酰胺(从含有30％谷氨酰胺的小麦谷蛋白水解产物)的罐装宠物食物组合物分别喂食给对照组、A组、B组和C组。该组合物约含有75％的水和按干物质计约50％的碳水化合物、22％的蛋白质和14％的脂肪。组合物的pH值约从5.5到6.5，加热到华氏180度(摄氏82度)进行蒸煮。罐装食物进行蒸煮法处理。

罐装和蒸煮灭菌后，在打开罐头将内容物给狗喂食前贮藏10天。此后，给四组狗喂食维持水平的恰当的食物组合物21天。在第1天和第21天，在喂食后0(基线)、30、60、120和180分钟后测定血浆谷氨酰胺水平。

通过高效液相色谱法分离、鉴定并定量血浆中的谷氨酰胺。分析用的样品的制备方法是：使样品达到室温，然后用去蛋白质溶液(13.5％w/v 5-磺酸基水杨酸水合物)、内标溶液(葡萄糖胺酸)以及通常使用的起始洗脱剂锂缓冲液(often a starting eluent Lithium buffer)稀释一部分样品。然后涡旋，微量离心并用0.2微米的过滤器通过注射器过滤该混合物。然后在放置在自动装填器/采样器上等待进样前冷冻保存样品。

用专用的高效液相色谱法氨基酸分析仪Beckman 6300和7300型仪器进行氨基酸分析。这些仪器包括了10cm的阳离子交换柱、四元梯度锂基洗脱剂和氢氧化锂再生柱。在131摄氏度用茚三酮试剂柱后显色后，测定在440和570nm处的吸光率。数据的获得和处理通过计算机运行Beckman System Gold 8.10色谱法软件完成。Beckman的参考溶液满足标准化的要求。

如表1所示，第一天A、B、C三组狗的血浆谷氨酰胺水平在喂食30分钟后都有所升高，但是在喂食对照食物的狗中没有发现升高。喂食含有4％谷氨酰胺补充剂的食物的组(C组)中的升高比喂食含有1％或2％谷氨酰胺补充剂的组更显著。喂食对照食物的组中在120分钟和180分钟时的血浆谷氨酰胺比空腹(在喂食前测定的基线)时低。

在第21天，A到C组中30分钟时血浆谷氨酰胺水平的升高比第1天时更显显著。所有的组中，30分钟时血浆谷氨酰胺比空腹时要高。对照组中血浆谷氨酰胺的小幅升高显示喂食的食物有足够的谷氨酰胺，喂食补充谷氨酰胺的组中的显著升高显示补充的谷氨酰胺能够被吸收。此外，在第21天A到C组30分钟时相似的血浆谷氨酰胺升高说明可能已经达到平衡，并且长期补充1％谷氨酰胺足以维持健康的谷氨酰胺状况。

表1

血浆谷氨酰胺水平相对基线的变化

这些数据表明从水解产物中获得的稳定的谷氨酰胺源可以加入到罐装的宠物食物产品中，并且能够被食用该食物的动物生物利用，即使该食物已在高温和高压的蒸煮和灭菌等条件下进行了处理。

实施例2

本实施例说明了从不同谷蛋白水解产物源中获得的谷氨酰胺的生物利用度。

将三种不同的小麦谷蛋白水解产物(指定为H1、H2和H3组)和一种大豆谷蛋白水解产物(H4组)加入干燥的宠物食物中来测定它们在谷氨酰胺的吸收中的可利用性是否有所不同。给五只狗分别喂食含有H1到H4的食物并测定血浆谷氨酰胺水平。给对照组的狗喂食未补充谷蛋白水解产物源的干燥宠物食物。所有的狗在清晨喂食前，喂食后30、60和120分钟后采血。

如表2所示，所有四种谷蛋白水解产物源组(H1到H4组)都显示出在喂食30和60分钟后的谷氨酰胺的吸收。

三个小麦谷蛋白水解产物源组(H1到H3组)显示出相当的谷氨酰胺吸收的可利用性，但是大豆谷蛋白水解产物源组(H4)显示出稍低的谷氨酰胺吸收。不过，从H1到H4每个组中狗的血浆谷氨酰胺都比对照组高。

表2

血浆谷氨酰胺水平相对基线的变化

实施例3

本实施例举例说明了在制备宠物食物时采用的可能破坏游离谷氨酰胺的条件。

为了测定游离谷氨酰胺是否能够同样给动物提供谷氨酰胺，将游离L-谷氨酰胺按照1％和2％(分别为罐头1和罐头2)加入罐装宠物食物中。将食物加热到华氏180度(

)(摄氏82度(℃))煮熟并且将罐装的食物进行蒸煮法加工。

基于L-谷氨酸盐与NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)反应生成甲

，用比色法测定最终食物产品中得到的游离谷氨酰胺。在492nm的可见光谱区测定甲

。该反应用来测定在最初的反应中L-谷氨酸用尽后的L-谷氨酰胺。然后在食物样品中加入谷氨酰胺酶，使谷氨酰胺转化为谷氨酸盐，并重复该反应，此次只测定由谷氨酰胺转化来的谷氨酸盐。

如表3所示，在罐装宠物食物(罐头1和罐头2)中未检测到游离谷氨酰胺。相反，当将游离谷氨酰胺加入干燥的宠物食物(表中所示干燥1-4)中，游离谷氨酰胺的回收率约为62％到约86％，通过对比显示罐装的过程对游离谷氨酰胺有很高的破坏性。

表3

游离谷氨酰胺在干燥和罐装食物中的稳定性

在本说明书中，公开了本发明优选的典型实施方案，虽然采用了特定的术语，但是这仅是用于一般描述性而非为了限制的目的，本发明的范畴在下面的权利要求中列出。显然根据前面的教导，本发明的很多修改和变化是可能的。因此可以理解，在所附的权利要求书的范围内，本发明的实践可以不按照具体描述的方式进行，而是以其它方式进行。

Claims (33)

1.一种耐蒸煮的煮熟的食物组合物，其包括(a)按重量计含量为60％到85％的水分，(b)主要包含肉和碳水化合物的营养基质，和(c)谷氨酰胺的肽源，其肽源所提供的补充的谷氨酰胺含量在干燥物质的基础上按重量计占组合物的0.5％到5％。

2.权利要求1中的组合物，其中补充的谷氨酰胺含量在干燥物质的基础上按重量计占组合物的1％到4％。

3.权利要求1中的组合物，其中水的含量按重量计为65％到80％。

4.权利要求1中的组合物，其pH值为2到8。

5.权利要求1中的组合物，其pH值为4到7。

6.权利要求1中的组合物，其pH值为5.5到6.5。

7.权利要求1中的组合物，其中谷氨酰胺的肽源包含蛋白质水解产物。

8.权利要求7中的组合物，其中蛋白质水解产物至少部分从植物源中获得。

9.权利要求8中的组合物，其中植物源选自大麦、燕麦、黑麦、黑小麦、小麦、大豆及它们的组合。

10.权利要求7中的组合物，其中蛋白质水解产物至少部分从小麦谷蛋白、大豆谷蛋白及它们的组合中获得。

11.一种补充了谷氨酰胺的食物产品，其含有容纳了权利要求1中的组合物的密封的耐蒸煮容器。

12.权利要求11中的食物产品，其中容器选自金属罐、耐蒸煮的袋子、耐蒸煮的盘子、瓶子、坛子和耐蒸煮的叠合纸盒。

13.一种制备如权利要求11所述的补充了谷氨酰胺的食物产品的方法，所述方法包括(a)使水分和主要包含肉和碳水化合物的营养基质与谷氨酰胺的肽源接触形成湿混合物；(b)在50℃到105℃的温度加热此湿混合物足够的时间以煮熟营养基质，形成按重量计含有60％到85％的水分的熟食物组合物；(c)用密封的耐蒸煮容器包装该煮熟的食物组合物；和(d)用蒸煮法高压灭菌包装的组合物制成该食物产品。

14.权利要求13中的方法，其中加入的谷氨酰胺的肽源的量足以提供在干燥物质的基础上按重量计占组合物0.5％到5％的补充谷氨酰胺。

15.权利要求14中的方法，其中补充的谷氨酰胺含量在干燥物质的基础上按重量计占组合物的1％到4％。

16.权利要求13中的方法，其中水的含量按重量计为65％到80％。

17.权利要求13中的方法，其中湿混合物的pH值为2到8。

18.权利要求13中的方法，其中湿混合物的pH值为4到7。

19.权利要求13中的方法，其中湿混合物的pH值为5.5到6.5。

20.权利要求13中的方法，其中谷氨酰胺的肽源含有蛋白质水解产物。

21.权利要求20中的方法，其中蛋白质水解产物至少部分从植物源中获得。

22.权利要求21中的方法，其中植物源选自大麦、燕麦、黑麦、黑小麦、小麦、大豆及它们的组合物。

23.权利要求21中的方法，其中蛋白质水解产物至少部分从小麦谷蛋白、大豆谷蛋白及它们的组合物中获得。

24.权利要求13中的方法，其中湿混合物加热到65℃到90℃的温度。

25.权利要求13中的方法，其中湿混合物加热到80℃到85℃的温度。

26.权利要求13中的方法，其中容器选自金属罐、耐蒸煮的袋子、耐蒸煮的盘子、瓶子、坛子和耐蒸煮的叠合纸盒。

27.一种提高动物对谷氨酰胺的吸收的方法，所述方法包括给动物喂食煮熟的食物组合物，其含有按重量计60％到85％的水分、主要包含肉和碳水化合物的营养基质及谷氨酰胺的肽源，其肽源所提供的补充的谷氨酰胺含量在干燥物质的基础上按重量计占组合物的0.5％到5％。

28.权利要求27中的方法，其中动物为犬科或猫科动物。

29.权利要求27中的方法，其中动物为陪伴动物。

30.下述的食物组合物在制备用于下述方法的饮食口粮中的应用，其中，该方法为加强有需要的动物的免疫功能的方法，所述方法包括在免疫功能加强有效期用含有至少一种煮熟的包含有按重量计60％到85％的水分、主要包含肉和碳水化合物的营养基质及谷氨酰胺的肽源的食物组合物的规定饮食口粮供养这些动物，其肽源所提供的补充的谷氨酰胺含量在干燥物质的基础上按重量计占组合物的0.5％到5％。

31.权利要求30中的应用，其中所述动物是正患有、经历或已经历选自腹泻、肠炎、术后消化道功能减退、化疗、烧伤、疲劳、癌症、恶病质和败血症中至少一种情况的症状。

32.权利要求30中的应用，其中动物为犬科或猫科动物。

33.权利要求30中的应用，其中动物为陪伴动物。