发明内容
本发明的一个目的是提供新化合物-门冬氨酸氨氯地平系列盐。
本发明的一个目的是提供门冬氨酸氨氯地平系列盐的制备方法。
本发明的一个目的是提供一种用于预防或治疗缺血及高血压症的药物组合物。
本发明的一个目的是提供一种用于预防或治疗缺血及高血压症的药物制剂。
本发明的一个目的是提供一种门冬氨酸氨氯地平片剂。
为了实现上述的第一个目的,本发明采用了以下的技术方案:门冬氨酸氨氯地平系列盐,其化学结构式如下:
其中,所述的n为大于等于1的整数。
作为优选方案,所述的n为1。
为了实现上述的第二个目的,本发明采用了以下的技术方案:
上述的门冬氨酸氨氯地平系列盐的制备方法如下:在常温下,将氨氯地平溶于有机溶剂中,在搅拌条件下滴加入已溶于有机溶剂的门冬氨酸,搅拌使其完全反应,然后冷却析晶,过滤,制得门冬氨酸氨氯地平系列盐,其化学反应方程式如下:
作为优选方案,氨氯地平和门冬氨酸的投料量按摩尔比为1∶0.6~10。
作为优选方案,氨氯地平和门冬氨酸的投料量按摩尔比为1∶1~3。在制备的时候稍微将门冬氨酸过量。
作为优选方案,将过滤得到的滤饼加入有机溶剂洗涤,然后再加入有机溶剂,加热溶解,然后加入活性炭回流,热滤,滤液冷却析晶,抽滤,冰溶剂洗涤抽干,再烘干至恒重得到门冬氨酸氨氯地平系列盐。
作为优选方案,所述有机溶剂为无水甲醇、无水乙醇或者它们的混合液。
为了实现上述的第三个目的,本发明采用了以下的技术方案:一种用于预防或治疗缺血及高血压症的药物组合物,包括上述的门冬氨酸氨氯地平系列盐和其他药用辅料。
为了实现上述的第四个目的,本发明采用了以下的技术方案:一种用于预防或治疗缺血及高血压症药物制剂,包括上述的药物组合物,制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂或缓控释制剂。
为了实现上述的第五个目的,本发明采用了以下的技术方案:门冬氨酸氨氯地平片剂,制成1000片包括以下的配方量的组分:
门冬氨酸氨氯地平3.31~13.52g 微晶纤维素20~150g
羟丙甲纤维素5~50g 乳糖5~50g
硬脂酸镁0.5~5g。
作为优选方案,上述的门冬氨酸氨氯地平片剂制成1000片包括以下的配方量的组分:
门冬氨酸氨氯地平6.7626g 微晶纤维素81.9g
羟丙甲纤维素29.25g 乳糖29.25g
硬脂酸镁2g。
本发明由于采用了以上的技术方案,制备得到稳定的门冬氨酸氨氯地平系列盐化合物。本发明的门冬氨酸氨氯地平系列盐适用于具有各种合并症的高血压患者,如糖尿病,心绞痛,哮喘及外周血管疾病等,能有效的降低左室重量指数,逆转左室肥厚,逆转高血压所致的血管结构改变;无需制剂改进即具有作用持久,起效缓和,并且无药物蓄积产生;毒副作用少,患者易忍受,且能显著改善患者的顺应性之特点。并且化合物成本较低。
另外,门冬氨酸氨氯地平系列盐中的门冬氨酸是一个人体所需的氨基酸,门冬氨酸作为体内草酰乙酸的前体,在三羧酸循环中起重要作用,并参与鸟氨酸循环,使氨和二氧化碳结合生成脲素。对细胞亲和力强,可作为钾、镁离子的载体,助其进入细胞内,提高细胞内钾、镁的浓度,加速肝细胞三羧酸循环,对改善肝功能、降低血清胆红素浓度有一定作用。
具体实施方式
实施例1.
反应瓶中加入氨氯地平198g,无水乙醇1600ml搅拌溶解,然后加入门冬氨酸80g搅拌16小时,加热回流4小时,趁热过滤过量的门冬氨酸氨氯地平,冷却析晶,过滤,滤饼用少量冷的无水乙醇洗涤,然后再将其用无水乙醇2000ml,加热溶解,然后加入0.5g活性炭回流15分钟,热滤,滤液冷却析晶,抽滤,冰乙醇洗涤抽干,80℃烘至恒重得到白色结晶性粉末200g,收率76.2%,熔点:160-162℃。
上述制得的门冬氨酸氨氯地平经元素分析、红外、紫外、核磁共振、质谱等方法,确证化学结构为:
实施例2.
称取无水甲醇50kg,开搅拌,加入氨氯地平5.0kg,搅拌溶解,再加入2.60kg门冬氨酸,常温反应16小时,加热回流,溶液浑浊略变澄清即压滤,此时料温70℃左右。压入结晶罐,降温到5℃以下稳定操作3小时。抽滤用2.0kg x 3冷无水甲醇洗涤抽干。温度控制在50-55℃,稳定操作4小时,真空干燥得到白色结晶性粉末,熔点:160-162℃。
实施例3.
称取无水甲醇25kg,开搅拌,加入氨氯地平205kg,搅拌溶解,再加入1.30kg门冬氨酸,常温反应16小时,加热回流,溶液浑浊略变澄清即压滤,此时料温70℃左右。压入结晶罐,降温到5℃以下稳定操作3小时。抽滤用1.0kg x 3冷无水甲醇洗涤抽干。温度控制在50-55℃,稳定操作4小时,真空干燥得到白色结晶性粉末,熔点:160-162℃。
实施例4.
取门冬氨酸氨氯地平3.315g,微晶纤维素21g,乳糖7.5g,羟丙甲基纤维素7.5g,硬脂酸镁0.5g,制成1000片。将主药门冬氨酸氨氯地平及各种赋形剂分别过筛,按等量递增的原则将主药与微晶纤维素混合均匀,过筛,再混合及在过筛二遍,接着用同样的方法依次加入羟丙甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁混合均匀,过筛,测定含量后压片。
实施例5.
取门冬氨酸氨氯地平6.63g,微晶纤维素42g,乳糖15g,羟丙甲基纤维素15g,硬脂酸镁1g,制成1000片。将主药门冬氨酸氨氯地平及各种赋形剂分别过筛,按等量递增的原则将主药与微晶纤维素混合均匀,过筛,再混合及在过筛二遍,接着用同样的方法依次加入羟丙甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁混合均匀,过筛,测定含量后压片。
实施例6.
取门冬氨酸氨氯地平13.26g,微晶纤维素84g,乳糖30g,羟丙甲基纤维素30g,硬脂酸镁2g,制成1000片。将主药门冬氨酸氨氯地平及各种赋形剂分别过筛,按等量递增的原则将主药与微晶纤维素混合均匀,过筛,再混合及在过筛二遍,接着用同样的方法依次加入羟丙甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁混合均匀,过筛,测定含量后压片。
实施例7.
取门冬氨酸氨氯地平以及常规的辅料制成药物组合物,然后用常规方法填充到胶囊中制成胶囊剂。
试验例1.
门冬氨酸氨氯地平及其制剂的稳定性。
对上述实施例1、2制得的门冬氨酸氨氯地平进行初步的稳定性考察(2600LX光照下放置10天、高温60℃下放置10天),于第十天取样测定,结果如表1~2。
表1:实施例1稳定性考察结果
天数 |
性状 |
含量% |
降解产物 |
熔点 |
0天 |
类白色粉末 |
99.74 |
0.07 |
160.2-160.4 |
10天2600LX光照 |
类白色粉末 |
99.50 |
0.16 |
160.2-162.9 |
10天高温60℃ |
类白色粉末 |
99.89 |
0.16 |
160.3-162.5 |
表2:实施例2稳定性考察结果
天数 |
性状 |
含量 |
降解产物 |
熔点 |
0天 |
类白色粉末 |
99.84 |
0.16 |
162.3-164.0 |
10天2600LX光照 |
类白色粉末 |
99.33 |
0.16 |
162.3-163.9 |
10天高温60℃ |
类白色粉末 |
98.95 |
0.16 |
161.8-163.5 |
对上述实施例4、5、6制得的门冬氨酸氨氯地平进行初步的稳定性考察(2600LX光照下放置10天、高温60℃下放置10天),于第十天取样测定,结果如表3~6。
表3:实施例4稳定性考察结果
天数 |
外观 |
标示量% |
降解产物 |
溶出度% |
0天 |
白色片 |
103.3 |
0.21 |
95.78 |
10天2600LX光照 |
白色片 |
103.1 |
0.07 |
98.29 |
10天高温60℃ |
淡咖啡色片 |
95.68 |
2.20 |
|
表4:实施例5稳定性考察结果
天数 |
外观 |
标示量% |
降解产物 |
溶出度% |
0天 |
白色片 |
103.2 |
0.24 |
98.01 |
10天2600LX光照 |
白色片 |
103.3 |
0.07 |
98.18 |
10天高温60℃ |
淡咖啡色片 |
103.2 |
0.17 |
|
表5:实施例6稳定性考察结果
天数 |
外观 |
标示量% |
降解产物 |
溶出度% |
0天 |
白色片 |
102.4 |
0.24 |
96.04 |
10天2600LX光照 |
白色片 |
102.0 |
0.07 |
97.42 |
10天高温60℃ |
淡咖啡色片 |
95.26 |
2.47 |
|
试验例2.
门冬氨酸氨氯地平对自发性高血压大鼠的降压试验
受试药物:门冬氨酸氨氯地平
配制方法:分别精确称取氨氯地平原料药30mg,10mg,3mg,各加生理盐水100ml溶解,其药物含量为0.3mg/ml、0.1mg/ml、0.03mg/ml,受试药液均为临用前配制。
试验对照:
1、空白对照:0.9%NaCl等体积相同途径给药。
2、已知阳性药对照:苯磺酸氨氯地平。配制方法:精确称取原料药10mg,加生理盐水100ml溶解,其药物含量为0.1mg/ml,临用前配制。
试验结果:
1、对自发性高血压大鼠血压的影响试验结果请参见表12-1、表12-2。
2、对自发性高血压大鼠心率的影响试验结果请参见表12-3。
表12-1 氨氯地平对清醒自发性高血压大鼠收缩压的降压作用
X±SD,student-t检验,与生理盐水组比较*p<0.05,**p<0.01
1至32小时为Δ%值[Δ%=(0时测得值-n时测得值)/0时测得值×100%]。
苯磺酸氨氯地平与门冬氨酸氨氯地平等剂量比差异无显著性。
表12-2 氨氯地平对清醒自发性高血压大鼠舒展压的降压作用
X±SD,student-t检验,与生理盐水组比较*p<0.05,**p<0.01
1至32小时为Δ%值[Δ%=(0时测得值-n时测得值)/0时测得值×100%]。
苯磺酸氨氯地平与门冬氨酸氨氯地平等剂量比差异无显著性。
表12-3氨氯地平对清醒自发性高血压大鼠心率的作用
X±SD,student-t检验,与生理盐水组比较*p<0.05,**p<0.01
1至32小时为Δ%值[Δ%=(0时测得值-n时测得值)/0时测得值×100%]。
苯磺酸氨氯地平与门冬氨酸氨氯地平等剂量比差异无显著性。
试验结果表明,门冬氨酸氨氯地平0.3、1.0、3.0mg/kg均可降低自发性高血压大鼠的收缩压和舒张压,呈剂量依从性,0.3mg/kg即已有效,但作用时间及强度均弱于1mg/kg及3mg/kg组,3mg/kg组最大降低率收缩压达32.8%、舒张压达29.6%,单次给药作用可持续24余小时,降压峰值在给药后4~8小时,对SHR大鼠的心率无明显影响。与对照药苯磺酸氨氯地平同剂量组比各指标无差异。
试验例3.
门冬氨酸氨氯地平对麻醉犬血流动力学的影响
实验材料:门冬氨酸氨氯地平;阳性对照药为苯磺酸氨氯地平。
RM-6000型多导生理记录仪、MF-1100电磁血流量计均为日
本光电产品。
健康杂种家犬,体重10-18kg,雌雄皆用。由中国辐射防护研究院动物房提供。
实验方法:
动物以戊巴比妥纳30mg/kg IV麻醉后,仰卧固定于手术台上,腹部正中切口行十二指肠插管。然后分离右侧颈总动脉,插入充满肝素生理盐水溶液动脉插管,联接TP101-型压力换能器测定收缩压(SAP)、舒张压(DAP)及平均动脉压(MAP),分离气管行气管插管,连接人工呼吸机行正压人工呼吸,潮气量400ML,20次/min。然后于左侧第四、五肋间开胸,暴露心脏,小心纵向剪开心包,分离升主动脉根部,卡入适当的电磁血流量计探头(15min左右)测量心输出量(Co)。心尖插管连接压力换能器测左室内压(LVP)、信号输入微分器(EQ60IG)测±dp/dtmax;LVP信号同步输入Ap-60IG行直流放大10倍测其左室舒张未压(LVEDP);四肢皮下刺入针形电极记录II导联心电图(ECG)并计算心率(HR)。
手术结束后,稳定10min,待各项指标稳定后记录一段曲线为给药前值,然后出十二指肠插管给药,剂量分别为0.5、1.0及2.0mg/kg,对照组给予0.9%生理盐水。给药体积为3mg/kg,于30秒内注完。并分别在给药后0.5、1.0、2.0、3.0及6.0小时记录上述各项指标,观察记录各砌金组数值。
根据上述记录指标,计算血流动力学的二级指标,计算公式如下:
③左室作功指数(Kg.m/min/m2)=心脏指数×1.052×(平均动脉压-5mmHg)×13.6×10-3
试验结果以用药前后t检验进行统计学处理。
结果:
对照组动物各项血流动力学检测指标,均在正常范围内波动,同用药前相比,差异均无显著性意义,对照药氨氯地平在2mg/kg剂量时,对麻醉开胸犬的HR、DAP、MAP均有明显的降低作用,特别是DA下降更为明显,表明本品可明显舒张血管,从而阳氏总外周阻力。另外,对±dp/dtmax也有一定的降低作用。
门冬氨酸氨氯地平经十二指肠给予麻醉开胸犬后,30~60分钟开始显效,随着时间的推移作用逐渐加强。在0.5、1.0、2.0mg/kg剂量时,均可明显降低试验动物的DAP、MAP,具有一定的量效关系。对SAP则影响不明显。在2mg/kg剂量时,对心率有一定降低作用,同用药前相比,差异有显著性意义。表明在此剂量时,对心脏有一定负性频率作用。并可明显增加CO,表示心脏泵血功能的改善。同时减少总外周阻力。对其它各项指标则影响不大,同给药前相比,差异无显著性意义。其药效学作用均和氨氯地平相类似。
结论试验结果表明,门冬氨酸氨氯地平同氨酸地平在本试验所用剂量时,可明显降低麻醉犬的DAP、MAP及HR,同时由于血管舒张,总外周阻力明显减少,使心输出量明显增加,心脏泵血功能明显改善,且具有剂量依赖性,对血流动力学其它各项指标,则无明显影响,表明门冬氨酸氨氯地平同氨氯地平及其它1.4二氢吡啶类钙拮抗剂一样,具有类似的作用。其主要功能是可以明显舒张血管,从而降低血压,减少总外周阻力,使平均动脉压明显降低,是具起效慢,作用时间长特点的二氢吡啶类钙拮抗剂。
对照药氨氯地平在本试验品所用2mg/kg剂量时,对麻醉犬的HR、DAP、MAP及±dp/dtmax均有一定降低作用。
表12-4 门冬氨酸氨氯地平对麻醉犬血流动力学试验:对照组(生理盐水组)
n=4,X±SD,*p<0.05 **p<0.01 student-t检验,与给药前比较
表12-5 门冬氨酸氨氯地平对麻醉犬血流动力学试验:阳性对照组(苯磺酸氨氯地平2mg/kg)
n=4,X±SD,*p<0.05 **p<0.01 student-t检验,与给药前比较
表12-6 门冬氨酸氨氯地平对麻醉犬血流动力学试验:门冬氨酸氨氯地平0.5mg/kg
n=4,X±SD,*p<0.05 **p<0.01 student-t检验,与给药前比较
表12-7 门冬氨酸氨氯地平地麻醉犬血流动力学试验:门冬氨酸氨氯地平1mg/kg
n=4,X±SD,*p<0.05 **p<0.01 student-t检验,与给药前比较
表12-8 门冬氨酸氨氯地平地麻醉犬血流动力学试验:门冬氨酸氨氯地平2mg/kg
n=4,X±SD,*p<0.05 **p<0.01 student-t检验,与给药前比较
试验例4.
门冬氨酸氨氯地平原料动物急性毒性试验
材料:门冬氨酸氨氯地平;阳性对照药为苯磺酸氨氯地平。
昆明种小白鼠,中国药科大学实验动物中心提供。
实验数据如下:
表13-1门冬氨酸氨氯地平原料药对小鼠灌胃给药的LD50试验
表13-2门冬氨酸氨氯地平原料药对小鼠灌胃给药的LD50
表13-3苯磺酸氨氯地平原料药对小鼠灌胃给药的LD50试验
表13-4苯磺酸氨氯地平原料药对小鼠灌胃给药的LD50
表13-5门冬氨酸氨氯地平原料药对小鼠腹腔注射给药的LD50试验
表13-6门冬氨酸氨氯地平原料药腹腔注射对小鼠给药的LD50
小鼠急性毒性试验结果表明:门冬氨酸氨氯地平原料灌胃给药的LD50为80.2mg/kg,95%可信限为71.3~90.2mg/kg。腹腔注射的LD50为62.1mg/kg,95%可信限为55.0~70.1mg/kg。苯磺酸氨氯地平灌胃给药的LD50为84.2mg/kg,95%可信限为74.6~95.0mg/kg。门冬氨酸氨氯地平与苯磺酸氨氯地平小鼠灌胃给药急性毒性参数及毒性反应无明显差异。
临床研究.
以门冬氨酸氨氯地平片为验证药,苯磺酸氨氯地平片为对照药,采用随机盲法对照。以浙江大学医学院附属第一医院(原浙江医科大学附属第一医院)部属临床药理基地为组长单位,浙江医院、杭州第一人民医院、金华市中心医院为协作单位,对125例原发性高血压患者进行为期8周的服药观察,结果显示:治疗后验证组的总有效率为90.63%,对照组为91.80%,组间无显著性差异;不良反应发生率验证组为20.00%,对照组为24.59%,组间无显著性差异。因此门冬氨酸氨氯地平片与苯磺酸氨氯地平片比较,疗效及安全性一致,是一种安全、有效、耐受性良好的治疗原发性高血压的药物。