CN101204362B - 含有源自天然橡胶胶乳提取物的皮肤美白成分 - Google Patents
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Abstract
一种含有源自天然橡胶浆的提取物的皮肤美白成分，其中天然橡胶浆含有蛋白酶抑制剂及其活性肽片断。提取方法包括酸和热处理、超滤和溶剂分馏。已经显示该提取物具有诱导去除哺乳动物皮肤色素的效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种含有源自天然橡胶胶乳提取物和任选的额外的去除皮肤色素的美容活性剂的成分，其中胶乳中含有蛋白酶抑制剂。
背景技术
不同肤色仅仅是简单的由于构成大多数皮肤表皮的角质形成细胞中黑色素浓度和分布的不同而形成的。黑色素含量越高，肤色越黑。黑色素是在位于表皮基底膜的黑素细胞内部黑素体中合成的色素的混合物。黑素体含有将色素前体氨基酸酪氨酸转化成黑色素必需的酶酪氨酸酶。含有黑色素的黑素体转移到树突梢并移位进入角质形成细胞中，形成角质形成细胞细胞核的帽。黑素体转移机制包括释放黑素体、角质形成细胞-黑素细胞的膜融合和吞噬作用。建议由蛋白酶-激活受体-2(PAR-2)来控制角质形成细胞的黑素体摄食和吞噬作用并发挥调节皮肤色素沉着的作用(1-4)。因此，一种有效的皮肤美白产品应包括酪氨酸酶抑制剂或PAR-2抑制剂或两者的组合。
a)酪氨酸酶抑制剂。
在过去，通常用对苯二酚来局部提亮皮肤。其通过抑制酪氨酸转化成黑色素所需的酪氨酸酶来去除皮肤色素。然而，由于其潜在的毒性，浓度大于2％即被视为毒品(drug)。延长使用它对黑素细胞是有毒的并可加重黑斑病。残余的对苯二酚在光和空气存在与分子氧时发生反应(自氧化作用)并变成暗褐色。目前用于化妆品工业的数种天然酪氨酸酶抑制剂是来自熊果的熊果苷、来自甘草的光甘草定和来自fungus Aspergilline oryzae的曲酸。
b)蛋白酶-激活受体-2(PAR-2)抑制剂。
调节色素沉着的机制通过激活或抑制角质形成细胞受体PAR-2来调节。需要胰蛋白酶的蛋白水解活性来激活PAR-2受体，以将黑素体从黑素细胞有效转移到角质形成细胞中。大豆胰蛋白酶抑制剂对角质形成细胞PAR-2通路的抑制已经显示：通过减少黑素体的吞噬作用或黑色素传递(1-4)来诱导去除色素。
本发明的一个目的是提供一种新的成分，其源自当地充裕的天然橡胶胶乳的非橡胶成分并可自然的作用于皮肤使之褪色。
发明内容
一种可去除哺乳动物皮肤色素的成分，包括分子量小于10kD的从橡胶树(Hevea brasiliensis)的胶乳浆液、根、嫩枝、叶或果实提取获得的橡胶胶乳提取物，所述该橡胶胶乳提取物是从橡胶胶乳中采用酸使橡胶胶乳凝结并通过压榨从凝结的胶乳中分离出酸化浆液获得的。
该成分的提取方法，包括以下步骤：
a、用包括＜10kD的不同分子量的截流膜超滤所述酸化浆液；
b、喷雾干燥所述超滤液；
c、所述超滤液进行＞40％饱和度的丙酮分馏。
其中，本发明的成分包含小蛋白和肽的组合。
本发明的成分包含具有以下整个氨基酸序列或一部分的天然或片断的蛋白：
ASQCPVKDAWPELVGTNGDIAAGIIQTENANVKAIVVKEGLPITQDLNFNR VRVFVDENRVVTQVPAIG。
其中，所述成分中所述提取物含有至少一种蛋白酶抑制活性剂，并且蛋白酶抑制活性剂是丝氨酸蛋白酶抑制剂。
所述的成分中所述至少一种丝氨酸蛋白酶抑制剂的存在的量是局部活性成分总量的大约.001％(w/v)至30％(w/v)。
所述成分有美白哺乳动物皮肤的效果。
所述成分用于皮肤美白产品中。
从橡胶树(Hevea brasiliensis)穿刺获得的胶乳由悬浮在水性胞浆中的橡胶和非橡胶颗粒组成。非橡胶残余物通常作为废物弃去。在本发明中，发现一种小蛋白的非橡胶成分可抑制蛋白酶活性。本发明还公开了蛋白酶抑制剂的适宜的提取方法及其在去除皮肤色素方面的应用。
附图说明
图1：通过在黑色猪皮上局部应用源自天然橡胶胶乳的提取物进行的褪色实验(A和B)。在9周内一天两次应用提取物(斑点1和斑点2)和对苯二酚(斑点3)的30％甘油溶液。
图2：源自天然橡胶胶乳的提取物的胰蛋白酶抑制活性。
具体实施方式
新鲜胶乳是一种通过穿刺橡胶树(Hevea brasiliensis)获得的乳状液体。在其悬浮液中不仅仅含有橡胶颗粒(30-35克％)还含有其它非橡胶颗粒。已经提取并发现在除去橡胶颗粒后的水性胶乳浆液中的一种活性化合物可诱导去除皮肤色素。
提取方法
加入甲酸使新鲜胶乳凝结。通过滚筒之间的压榨从橡胶凝结物中收集胶乳浆液。通过一系列包括那些具有MWCO≤10kD的膜对其进行超滤以及喷雾干燥。随后通过丙酮分馏从喷雾干燥的粉末中纯化胶乳蛋白酶抑制剂。
源自天然橡胶胶乳的提取物在体内去除皮肤色素上的功效
通过在天然黑色皮肤的猪上局部应用源自天然橡胶胶乳的蛋白酶抑制剂来进行体内褪色实验。在猪的背部一天两次局部应用含有提取物或5％对苯二酚的30％甘油溶液，持续9周。黑色皮肤上的类似的有记号的褪色显示了提取物或对苯二酚的应用点(图1)。
源自天然橡胶乳浆液的提取物的蛋白酶抑制作用
已经发现源自天然橡胶乳浆液的提取物可抑制丝氨酸蛋白酶、胰蛋白酶的活性。需要胰蛋白酶来激活PAR-2，以在接受者的角质形成细胞中摄取和分布黑色素。提取物可以剂量依赖性的方式抑制胰蛋白酶活性(图2)。
Claims (5)
1.一种可去除哺乳动物皮肤色素的成分，包括分子量小于10kD的从橡胶树的胶乳浆液、根、嫩枝、叶或果实提取获得的橡胶胶乳提取物，所述该橡胶胶乳提取物是从橡胶胶乳中采用酸使橡胶胶乳凝结并通过压榨从凝结的胶乳中分离出酸化浆液获得的，用包括＜10kD的不同分子量的截流膜超滤所述酸化浆液以及喷雾干燥，随后通过丙酮分馏从喷雾干燥的粉末中纯化胶乳蛋白酶抑制剂。
2.依据权利要求1的成分，其中所述提取物含有至少一种蛋白酶抑制活性剂，并且蛋白酶抑制活性剂是丝氨酸蛋白酶抑制剂。
3.依据权利要求1-2任一的成分，其中所述成分有美白哺乳动物皮肤的效果。
4.依据权利要求1-2任一的成分，其中所述成分用于皮肤美白产品中。
5.权利要求1的成分的提取方法，包括以下步骤：
a从橡胶胶乳中采用酸使橡胶胶乳凝结并通过压榨从凝结的胶乳中分离出酸化浆液；
b、用包括＜10kD的不同分子量的截流膜超滤所述酸化浆液；
c、喷雾干燥所述超滤液；
d、所述步骤c得到的粉末进行＞40％饱和度的丙酮分馏。
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