CN101182286A

CN101182286A - 一种芪族化合物及含有其的葡萄植物提取物及提取方法

Info

Publication number: CN101182286A
Application number: CNA2007103020045A
Authority: CN
Inventors: 孙步祥; 汤凌志; 王智慧; 胡厚才; 易永基
Original assignee: GUILIN LAIYIN BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Current assignee: GUILIN LAIYIN BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Priority date: 2007-12-19
Filing date: 2007-12-19
Publication date: 2008-05-21

Abstract

本发明公开了一种以3，4’，5－三羟基芪为单体进行聚合的芪族化合物及含有其的葡萄植物提取物及提取物制备方法，提取物为茶褐色、褐色或者类白色、白色，粉末状，味苦涩，含有白藜芦醇和/或葡萄素和/或3，4’，5－三羟基芪的三聚体和/或3，4’，5－三羟基芪的四聚体，其中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为1％以上。所述制备方法，以葡萄植物为原料，以水、甲醇、乙醇或丙酮作为提取溶媒，经提取、浓缩、柱层析、重结晶、干燥，得到含有芪族化合物的葡萄植物提取物。本发明制备方法工艺简单，而且，以葡萄藤和/或叶和/或根茎为原料，是对葡萄种植业的产物的废物利用。

Description

一种芪族化合物及含有其的葡萄植物提取物及提取方法

技术领域

本发明涉及一种从葡萄植物中提取的芪族化合物及其制备方法。

背景技术

白藜芦醇(resveratrol)，化学结构为3，4’，5-三羟基芪，为反式二苯乙烯类(即芪，stilbene)化合物，其结构如下：

葡萄素(viniferin)，是两分子的白藜芦醇自由结合而形成，其结构如下：

将白藜芦醇、葡萄素及3，4’，5-三羟基芪的低聚体定义为芪族化合物，它们具有多样的生物学活性，例如抗氧化、抑制肿瘤的形成和发展、改善微循环以及对休克的治疗作用等，具有防止血栓形成、保护肝脏和清除自由基等功效，对老年人的退化疾病如帕金森症、痴呆症、早老性痴呆、风湿性疾病等都有较好的预防和治疗作用；在化妆品方面，它们具有祛除黄褐斑和增白的功效；对脂类代谢和血小板的凝固亦有影响，可以防治冠心病和动脉粥样硬化等疾病。

近年来，人们发现天然植物虎杖中含有大量的白藜芦醇，从中提取白黎芦醇并且取得了可喜的进展，如公开号为CN 1341587A、名称为“一种从虎杖中制备白黎芦醇的方法”的专利申请中便公开了一种将虎杖作为原料来提取白黎芦醇的方法，但由于其原料虎杖为中药，原料来源较少，从中提取白黎芦醇存在与药争源。据报道花生根中也含有白黎芦醇，虽然含量比虎杖中要低，但原料来源丰富，价格低廉。在公开号为CN1709846A，名称为“花生根提取白黎芦醇的生产方法”的专利申请中便公开了将花生根经有机溶剂提取浓缩后经高压层析洗脱、精制得白黎芦醇产品的工艺流程。

上述专利文献中的白黎芦醇提取工艺主要是经过有机溶剂直接浸泡萃取后经高压硅胶柱层析等步骤提取而成，其分离效果远远不如大孔吸附树脂处理的效果。

而且，目前也没有从葡萄植物中提取芪族化合物的报道。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种从葡萄植物中提取的芪(stilbene)族化合物。

本发明所述的芪族化合物，是以化学结构为3，4’，5-三羟基芪为单体的聚合物，即以反式二苯乙烯为单体的聚合物，其结构如下：

n＝1，2，3，……

当n＝1时，化学结构为3，4’，5-三羟基芪，为反式二苯乙烯，即白藜芦醇(resveratrol)，其结构如下：

当n＝2时，是两分子的3，4’，5-三羟基芪自由结合而形成，即葡萄素(viniferin)，其结构如下：

当n＝3时，是三分子的3，4’，5-三羟基芪自由结合而形成，为3，4’，5-三羟基芪的三聚体。

当n＝4时，是四分子的3，4’，5-三羟基芪自由结合而形成，为3，4’，5-三羟基芪的四聚体。

n＝5，6，……依此类推。

本发明所述的芪族化合物，从葡萄植物中提取得到，提取物为茶褐色、褐色或类白色、白色，粉末状，味苦涩，含有白藜芦醇、葡萄素、3，4’，5-三羟基芪的三聚体和/或3，4’，5-三羟基芪的四聚体，其中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为1％以上

本发明的一个优选方案为葡萄植物提取物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为10％以上

本发明进一步优选的方案为葡萄植物提取物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为90％以上。

本发明同时提供了一种从葡萄植物中提取芪族化合物的方法。

其工艺步骤为：

前处理：将干制后的原料粉碎，过筛；

提取：将处理后的原料置于提取溶媒中加热回流提取2次，体积配比分别为原料的8-10倍、5-7倍，提取时间为一个小时以上，提取温度为50-60℃，合并提取液，浓缩、离心过滤得稠膏，备用，干燥后，产物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为1％以上；

纯化：1)、向膏状的稠膏中加入1-2倍重量的50％乙醇，稀释、混匀；2)、将稀释后的溶液通过柱层析，用大孔吸附树脂进行吸附；3)、层析洗脱：采用浓度递增的乙醇-水系统作为流动相层析洗脱；4)、收集或分别收集含有白藜芦醇和/或葡萄素和/或其它聚体洗脱部分，干燥后，产物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为10％以上；

精制：将所收集到的洗脱液，采用氧化铝脱色、静置、浓缩、反复重结晶，干燥，产物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为90％以上。

采用本发明方法提取纯化芪族化合物，原料为植物葡萄(VitisVinifera)的新鲜或干制后的葡萄藤和/或叶和/或根茎。

本发明方法中所述提取溶媒为水、甲醇、乙醇或丙酮，所述甲醇或乙醇的重量浓度为50％～95％；优化选择，所述甲醇或乙醇的重量浓度为60％～80％。

本发明所述柱层析树脂选自型号为D101、D102、AB-8或HP-20型的大孔吸附树脂。

本发明方法中所述递增浓度梯度的乙醇-水系统中所指的梯度浓度依次为：20-30％，30-60％，60-95％。

本发明的优点：

从葡萄藤植物中提取出了芪族化合物，分离出单体、二聚体、三聚体等等；

以葡萄植物为原料，是对葡萄种植业的产物的废物利用；

工艺简单，适于工业化生产。

附图说明

图1为纯度为98％的白藜芦醇的HPLC图谱。

图2为白藜芦醇和葡萄素的HPLC图谱。

具体实施方式

实施例1

1)前处理：将阴干或晒干后的原料粉碎，过筛；

2)提取：将处理后的原料置于纯净水中加热回流提取2次，体积配比分别为原料的8倍、5倍，提取时间比分别为3∶2，提取温度为50℃，合并提取液，浓缩、离心过滤得稠膏；

3)将稠膏干燥后，产物中白藜芦醇含量为0.66％，葡萄素的重量含量为0.45％；

实施例2

1)前处理：将阴干或晒干后的原料粉碎，过筛；

2)提取：将处理后的原料置于50％甲醇中加热回流提取2次，体积配比分别为原料的8倍、5倍，提取时间比分别为3∶2，提取温度为50℃，合并提取液，浓缩、离心过滤得稠膏，备用；

3)纯化：①向膏状的稠膏中加入1倍重量的50％乙醇，稀释、混匀；②将稀释后的溶液通过柱层析，用D101树脂进行吸附；③层析洗脱：采用浓度递增的乙醇-水系统作为流动相层析洗脱，浓度分别为20％，30％，60％；④收集60％的洗脱部分，干燥后，产物中白藜芦醇含量为5.6％，葡萄素的重量含量为6.1％；

4)精制：将所收集到的60％洗脱液，采用氧化铝脱色、静置、浓缩、反复重结晶，干燥后，白藜芦醇含量为41.5％，葡萄素含量为51.1％。

实施例3

1)前处理：将干制后的原料粉碎，过筛；

2)提取：将处理后的原料置于70％乙醇中加热回流提取2次，体积配比分别为原料的10倍、7倍，提取时间比分别为3∶2，提取温度为55℃，合并提取液，浓缩、离心过滤得稠膏，备用；

3)纯化：①向膏状的稠膏中加入2倍重量的50％乙醇，稀释、混匀；②将稀释后的溶液通过柱层析，用D101树脂进行吸附；③层析洗脱：采用浓度递增的乙醇-水系统作为流动相层析洗脱，浓度分别为30％，60％，95％；④收集60％的洗脱部分，干燥后，产品中葡萄素含量为15.5％；

4)精制：将所收集到的60％洗脱液，采用氧化铝脱色、静置、浓缩、反复重结晶，干燥后，葡萄素含量为95.5％。

实施例4

1)前处理：将阴干或晒干后的原料粉碎，过筛；

2)提取：将处理后的原料置于95％乙醇中加热回流提取2次，体积配比分别为原料的8倍、7倍，提取时间比分别为3∶2，提取温度为55℃，合并提取液，浓缩、离心过滤得稠膏，备用；

3)纯化：①向膏状的稠膏中加入2倍重量的50％乙醇，稀释、混匀；②将稀释后的溶液通过柱层析，用D102树脂进行吸附；③层析洗脱：采用浓度递增的乙醇-水系统作为流动相层析洗脱，浓度分别为25％，50％，80％；④收集80％的洗脱部分，干燥后，产品中三聚体的芪族化合物含量为13.5％；

4)精制：将所收集到的80％洗脱液，采用氧化铝脱色、静置、浓缩、反复重结晶，干燥后，产品中三聚体的芪族化合物含量93.1％。

实施例5

1)前处理：将晒干后的原料粉碎，过筛；

2)提取：将处理后的原料置于丙酮中加热回流提取2次，体积配比分别为原料的8倍、7倍，提取时间比分别为3∶2，提取温度为60℃，合并提取液，浓缩、离心过滤得稠膏，备用；

3)纯化：①向膏状的稠膏中加入2倍重量的50％乙醇，稀释、混匀；②将稀释后的溶液通过柱层析，用AB-8型树脂进行吸附；③层析洗脱：采用浓度递增的乙醇-水系统作为流动相层析洗脱，浓度分别为30％，60％，90％；④收集三次的洗脱部分，干燥后，产物中白藜芦醇的含量为5.3％、葡萄素的含量为6.7％、四聚体芪族化合物的含量为10.3％；

4)精制：将所收集到的洗脱液，采用氧化铝脱色、静置、浓缩、反复重结晶，干燥后，产物中白藜芦醇的含量为31.3％、葡萄素的含量为44.7％、四聚体芪族化合物的含量为20.3％。

纯度为98％的白藜芦醇的HPLC图谱如图1所示。

白藜芦醇和葡萄素混合的HPLC图谱如图2所示。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明而并非限制本发明所描述的技术方案；因此，尽管本说明书参照上述的各个实施例对本发明已进行了详细的说明，但是，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换；而一切不脱离本发明的精神和范围的技术方案及其改进，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。

Claims

1.一种芪族化合物，其特征在于它具有下列分子结构：

其中，n＝1，2，3，……。

2.一种含有权利要求1所述的芪族化合物的葡萄植物提取物，其特征在于：所述提取物为茶褐色、褐色或类白色、白色，粉末状，味苦涩，含有白藜芦醇和/或葡萄素和/或3，4’，5-三羟基芪的三聚体和/或3，4’，5-三羟基芪的四聚体，其中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为1％以上。

3.如权利要求2所述的含有芪族化合物的葡萄植物提取物，其特征在于：所述提取物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为10％以上。

4.如权利要求2所述的含有芪族化合物的葡萄植物提取物，其特征在于：所述提取物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为90％以上。

5.一种如权利要求2-4之任一所述的含有芪族化合物的葡萄植物提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)前处理：将干制后的葡萄植物原料粉碎，过筛；

(2)提取：将处理后的原料置于提取溶媒中加热回流提取2次，体积配比分别为原料的8-10倍、5-7倍，提取时间比分别为3∶2，时间为一个小时或更多，提取温度为50-60℃，合并提取液，浓缩、离心过滤得稠膏，备用，干燥后，产物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为1％以上；

(3)纯化：1)、向膏状的稠膏中加入1-2倍重量的50％乙醇，稀释、混匀；2)、将稀释后的溶液通过柱层析，用大孔吸附树脂进行吸附；3)、层析洗脱：采用浓度递增的乙醇-水系统作为流动相层析洗脱；4)、收集或分别收集含有白藜芦醇和/或葡萄素和/或其它聚体的洗脱部分，干燥后，产物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为10％以上；

(4)精制：将所收集到的洗脱液，采用氧化铝脱色、静置、浓缩、反复重结晶，干燥，产物中白藜芦醇和/或葡萄素的重量含量为90％以上。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述的原料为新鲜或干制后的葡萄藤和/或叶和/或根茎。

7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述提取溶媒为水、甲醇、乙醇或丙酮。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述甲醇或乙醇的重量浓度为50％～95％。

9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述甲醇或乙醇的重量浓度为60％～80％。

10.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述柱层析树脂型号为D101、D102、AB-8或HP-20型的大孔吸附树脂。

11.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述递增浓度梯度的乙醇-水系统中的梯度浓度依次为：20-30％，30-60％，60-95％。