CN101170899A - 含有新型淀粉的小麦及其生产方法 - Google Patents

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Abstract

本发明的目的在于提供一种通过抑制上述酶的表达而蓄积新型特性的淀粉的小麦。本发明提供一种下述蛋白质全部不表达的小麦:(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。

Description

含有新型淀粉的小麦及其生产方法
技术领域
本发明涉及一种在小麦的胚乳中不表达颗粒性淀粉合成酶及淀粉合成酶II型蛋白质的小麦。
背景技术
淀粉是葡萄糖通过α-1,4键连接形成的直链状的直链淀粉和具有通过α-1,6键形成的分支结构的支链淀粉这2种成分的混合物。上述成分在各种酶的作用下被合成,在谷物中蓄积在种子的胚乳部分。已知直链淀粉通过颗粒性淀粉合成酶基因编码的颗粒结合型淀粉合成酶被合成。另一方面,支链淀粉通过多个酶的作用被合成。上述酶为(可溶性)淀粉合成酶I型、(可溶性)淀粉合成酶II型、(可溶性)淀粉合成酶III型、分支酶、脱支酶等。
另外,淀粉以高度结晶化颗粒的形式储藏在植物中。通过向其中加入水进行加热,使得淀粉颗粒逐渐膨胀,在某一温度(糊化峰温度)下,结晶结构同时崩溃,成为糊状(糊化)。之后,通过冷却,糊化淀粉的粘性逐渐增大,发生凝胶化(老化)。上述特性以及直链淀粉和支链淀粉的含量比因植物种类的不同而有较大差异已经是公知的。
淀粉是植物中的储藏物质,同时对于动物也是重要的能源之一。摄取淀粉时,不仅可以加工含有淀粉的谷粒,将其制成食品加以利用,而且,可以利用上述特性,将其用作增稠剂、保水剂、凝胶形成剂等添加剂。另一方面,在工业上也从很早开始就将其用作糊或膜的原料。另外,对实施化学或物理修饰的加工淀粉等也存在大量的需求。淀粉占据储藏器官(种子或块茎)重量的大部分,淀粉特性变化时,对利用上述器官得到的上述制品的食感、或加工性等产生较大影响,因此,对开发具有多种特性的淀粉的需要很高。
上述淀粉的特性因植物种类的不同而差异较大。但是,同一植物品种内的淀粉的多样性,通常由于直链淀粉含量不同而导致物性变化。例如,在小麦中,如果是通常类型的淀粉,直链淀粉含量大约为30%左右,已知有含量20%左右的低直链淀粉系统。低直链淀粉类小麦淀粉与通常类型相比优选用作面条等面用粉,商业上也广泛栽培。另外,已知水稻或玉米中蓄积直链淀粉含量极低的粘性淀粉的类型,中村等人(专利文献1)首次培育了糯小麦(glutinous wheat),与通常类型相比具有独特的加工性和食感。直链淀粉含量作为表示淀粉特性的特征之一,经常被讨论,但在同一植物品种内,直链淀粉含量之外的多样性低。因此,来自小麦的淀粉或含有该淀粉的小麦粉为多样性低的物质,由于商品品种单一,所以市场已经成熟。因此只要能够开发出蓄积具有新型特性的淀粉的小麦,就能够开发出具有与现有不同的特征的改良制品或新型用途,因此人们迫切期待开发出上述小麦。
已有报道指出,作为具有新型特性的小麦的制作例,山守等人开发出淀粉合成酶II型缺失的小麦系统,所述淀粉合成酶II型是合成支链淀粉支链的酶之一(参见非专利文献1)。也有报道指出上述小麦中以高含量蓄积直链淀粉,但关于其他特性的研究几乎没有进行,也未实现实用化。
在小麦中,直链淀粉通过颗粒性淀粉合成酶基因编码的颗粒性淀粉合成酶蛋白质合成。作为异源六倍体的小麦染色体中存在同源染色体A、B、D3个基因组。通常情况下,存在3种颗粒性淀粉合成酶基因,由上述基因表达颗粒性淀粉合成酶(颗粒性淀粉合成酶-A1、颗粒性淀粉合成酶-B1、颗粒性淀粉合成酶-D1)。但是,也存在因基因组DNA上产生的变异而使得蛋白质未被表达的类型,其表达的组合包含野生型共有8种。与此相应在直链淀粉含量方面存在显著差异也是已知的,缺失1至2种的小麦系统为低直链淀粉系统,3种全部缺失的类型为糯小麦。作为简便地识别上述缺失类型的方法,已经确立了直接解析在胚乳中表达的蛋白质的方法和以基因组DNA序列为基础进行调查的方法(例如参见专利文献1及非专利文献2)。
另一方面,作为参与支链淀粉的支链合成的酶之一,已知有淀粉合成酶II型蛋白质,由存在于7A、7B、7D染色体上的3种淀粉合成酶II型基因编码(淀粉合成酶II型-A1、淀粉合成酶II型-B1、淀粉合成酶II型-D1)。对于淀粉合成酶II型蛋白质,本发明人等也已经开发出了识别缺失类型的方法。使用此方法,淀粉合成酶II型蛋白质的表达类型也可以分为8类,但没有充分研究各个类型中淀粉特性的多样性。
专利文献1:特开平6-125669号公报
非专利文献1:Yamamori et.al.,Theor.Appl.Genet(2000)101:21-29
非专利文献2:Nakamura et.Al.,(2002)Genome 45:1150-1156
发明内容
鉴于此,本发明的目的在于通过控制上述酶的表达,提供蓄积新型特性的淀粉的小麦。
为了得到具有新型特性的小麦,进行了潜心的研究,结果发现,通过使特定的基因变异,并且控制特定的蛋白质的表达,能够得到生淀粉分解率非常高的小麦及糊化淀粉粘度非常低的小麦。即,本发明提供一种下述蛋白质全部不表达的小麦:(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
本发明提供一种小麦,所述小麦不具有上述蛋白质(1)~(6)具有的酶活性的全部。
本发明提供一种小麦,所述小麦中蓄积的淀粉的30重量%以上不形成粒径10μm以上的淀粉颗粒。
本发明提供一种小麦,其中,在支链淀粉的支链中,聚合度70以下的支链中,聚合度为3~5的支链的数量的比例为1.5%以上。
本发明提供一种小麦,生淀粉通过淀粉酶的分解率为80%以上。
另外,本发明提供一种小麦,其中上述蛋白质(1)至(3)中的1个以上不表达,并且上述蛋白质(4)至(6)中的1个以上不表达(但不包括只有蛋白质(2)、(4)及(5)同时不表达的小麦。)。
本发明提供一种小麦,所述小麦不具有上述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的1种以上酶活性,并且不具有上述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的1种以上酶活性(但,不包括仅不具有蛋白质(2)、(4)及(5)所具有的酶活性的小麦)。
本发明提供一种小麦,其中上述蛋白质(1)至(3)中的任意2种不表达,并且上述蛋白质(4)至(6)中的1种以上不表达。
本发明提供一种小麦,所述小麦不具有上述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2种酶活性,并且不具有上述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的1种以上酶活性。
本发明提供一种小麦,其中上述蛋白质(1)至(3)中的2种以上不表达,并且上述蛋白质(4)至(6)中的2种以上不表达。
本发明提供一种小麦,所述小麦不具有上述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的2种以上酶活性,并且不具有上述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的2种以上酶活性。
本发明提供一种小麦,其中上述蛋白质(1)至(3)中的任意2种不表达,并且上述蛋白质(4)至(6)全部不表达。
本发明提供一种小麦,所述小麦不具有上述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2种酶活性,并且不具有上述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的酶活性的全部。
本发明提供一种小麦,所述小麦中上述蛋白质(1)至(3)中的2种以上不表达,并且相比颗粒性淀粉合成酶蛋白质表达的组合与上述小麦相同、蛋白质(1)至(3)全部表达的小麦,淀粉糊化后的粘度较小。
本发明提供一种小麦,所述小麦中上述蛋白质(1)至(3)中的2种以上不表达,并且相比颗粒性淀粉合成酶蛋白质表达的组合与所述小麦相同、蛋白质(1)至(3)全部表达的小麦,淀粉糊化后的耐老化性提高。
另外,本发明提供一种特定小麦的筛选方法,其特征在于包括以下步骤,
检测下述基因变异体(7)至(9)中的1种以上的步骤:(7)在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因中,至少在位置124~412的碱基缺失及/或取代的淀粉合成酶II型-A1基因变异体;(8)在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因中,至少在位置6145~6146之间插入1个以上碱基的淀粉合成酶II型-B1基因变异体;及(9)在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因中,至少在位置2590~2652的碱基缺失的淀粉合成酶II型-D1基因变异体;及
检测以下蛋白质(4)至(6)中的1种以上的步骤:(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
本发明提供一种小麦,其在除去胚的成熟种子中含有0.1重量%以上葡萄糖。
本发明提供一种小麦,其在除去胚的成熟种子中含有0.1重量%以上麦芽糖。
本发明提供一种小麦,其在除去胚的成熟种子中含有1重量%以上蔗糖。
此处,所谓成熟种子是指“穗头黄化,麦粒达到蜡状的硬度”(转作全书第1卷麦(农文协编)88页)时期的种子,并且没有发芽征兆。
本发明提供一种小麦,在支链淀粉的葡萄糖支链中,聚合度60以下的支链中,聚合度2~5的支链的数量的比例为3%以上。
本发明提供一种食品,所述食品含有上述小麦或来自上述小麦的淀粉。
本发明提供一种工业制品,所述工业制品含有上述小麦或来自上述小麦的淀粉。
本发明提供一种制品,所述制品利用上述小麦或来自上述小麦的淀粉加工而成。
具体实施方式
本发明的小麦不表达下述的全部蛋白质:(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
作为序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质(1)的例子,可以举出序列号2记载的序列表示的淀粉合成酶II型-A1蛋白质或与序列号2记载的序列的同源性为90%以上的淀粉合成酶II型-A1蛋白质。此处,使用Genetyx(Genetyx社)进行同源性计算。
作为序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质(2)的例子,可以举出序列号4记载的序列表示的淀粉合成酶II型-B1蛋白质或与序列号4记载的序列的同源性为90%以上的淀粉合成酶II型-B1蛋白质。
作为序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质(3)的例子,可以举出序列号6记载的序列表示的淀粉合成酶II型-D1蛋白质或与序列号6记载的序列的同源性为90%以上的淀粉合成酶II型-D1蛋白质。
作为由序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质(4)的例子,可以举出序列号8记载的序列表示的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质或与序列号8记载的序列的同源性为90%以上的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质。
作为由序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质(5)的例子,可以举出序列号10记载的序列表示的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质或与序列号10记载的序列的同源性为90%以上的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质。
作为由序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质(6)的例子,可以举出序列号12记载的序列表示的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质或与序列号12记载的序列的同源性为90%以上的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
通过检测编码上述蛋白质(1)~(6)的基因的有无及变异,能够确认上述蛋白质(1)~(6)未表达。作为确认上述蛋白质(1)~(6)未表达的方法,只要是能够检测基因序列的变异的方法即可,可以为本领域技术人员所知的任何方法,例如可以举出PCR法等。
对PCR法没有特别限制,可以使用公知的各种改良方法,如果举例的话,可以举出除一对引物、模板(被检)DNA之外还混合Tris-HCl、KCl、MgCl2、各dNTP、TaqDNA聚合酶等试剂类而形成的PCR反应液。PCR的1次循环由热变性、引物的退火、DNA聚合酶作用下的DNA合成反应3个步骤构成。各步骤由于需要各不相同的反应温度和反应时间,所以要根据需要增幅的DNA区域的碱基序列和其长度,设定适当的范围。用于上述操作的热循环仪(thermal cycler)在市场上有售。如果对TaqDNA聚合酶、MgCl2浓度或反应循环数等优选的PCR条件进行研究、或使用嵌套式PCR(nested PCR),则能够进一步提高检测灵敏度。
PCR反应物可以使用免疫反应进行鉴定,也可以采用任意方法进行鉴定,使其进行电泳,必要时使用阳性对照或阴性对照,电泳像中能够确认清楚的条带时,就可以确认在被检物中存在检测物质(颗粒性淀粉合成酶基因及淀粉合成酶II型基因变异的小麦)。
作为PCR中使用的引物,只要能够检测出编码上述蛋白质(1)~(6)的基因的变异即可,可以使用任意引物。
作为淀粉合成酶II型基因变异体,本发明人等发现了(7)在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因中,至少位置124~412的碱基缺失及/或取代的淀粉合成酶II型-A1基因变异体(序列号27);(8)在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因中,至少在位置6145~6146之间插入1个以上碱基的淀粉合成酶II型-B1基因变异体(序列号28);及(9)在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因中,至少位置2590~2652的碱基缺失的淀粉合成酶II型-D1基因变异体(序列号29)。
因此,作为能够检测序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因变异的引物,例如可以举出:
(i)其3′末端在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因区域的位置124的上游进行杂交的引物、和其5′末端在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因区域的位置412的下游进行杂交的引物的组合;
(ii)其3′末端在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因区域的位置412的下游跨越缺失部分124~412进行杂交的引物、和其5′末端在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因区域的位置412的下游进行杂交的引物的组合;及
(iii)其3′末端在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因区域的位置124的上游进行杂交的引物、和其5′末端在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因区域的位置124的上游跨越缺失部分124~412进行杂交的引物的组合。
并且,上述(i)、(ii)、(iii)引物优选设计成能够特异性地检出淀粉合成酶II型-A1基因区域。具体而言,是设计成与来自其他基因组的淀粉合成酶II型基因区域(淀粉合成酶II型-B1、淀粉合成酶II型-D1)完全不匹配的区域的引物。
具体而言,可以举出含有序列号13或14中任一个所记载的序列的引物、和含有序列号15至17中任一个所记载的序列的引物的组合。
另外,作为能够检测出序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因的变异的引物,例如可以举出:
(i)其3′末端在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因区域的位置6145的上游进行杂交的引物、和其5′末端在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因区域的位置6146的下游进行杂交的引物的组合;
(ii)其3′末端与在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因区域的位置6145~6146之间插入的碱基进行杂交的引物、和其5′末端在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因区域的位置6146的下游进行杂交的引物的组合;
(iii)其3′末端在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因区域的位置6145的上游进行杂交的引物、和其5′末端与在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因区域的位置6145~6146之间插入的碱基进行杂交的引物的组合;及
(iv)其3′末端与在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因区域的位置6145~6146之间插入的碱基进行杂交的引物、和其5′末端在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因区域的位置6145~6146之间插入的碱基进行杂交的引物的组合。
并且,上述(i)、(ii)、(iii)、(iv)引物优选设计成能够特异性地检出淀粉合成酶II型-B1基因区域。具体而言,是设计成与来自其他基因组的淀粉合成酶II型基因区域(淀粉合成酶II型-A1、淀粉合成酶II型-D1)完全不匹配的区域的引物。
具体而言,可以举出含有序列号18或20中任一个所记载的序列的引物、和含有序列号21至23中任一个所记载的序列的引物的组合。
另外,作为能够检测序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因变异的引物,例如可以举出:
(i)其3′末端在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因区域的位置2590的上游进行杂交的引物、和其5′末端在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因区域的位置2652的下游进行杂交的引物的组合;
(ii)其3′末端在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因区域的位置2652下游跨越缺失部分2590~2652进行杂交的引物、和其5′末端在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因区域的位置2652的下游进行杂交的引物的组合;
(iii)其3′末端在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因区域的位置2590的上游进行杂交的引物、和其5′末端在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因区域的位置2590的上游跨越缺失部分2590~2652进行杂交的引物的组合;
并且,上述(i)、(ii)、(iii)引物优选设计成能够特异性地检测淀粉合成酶II型-D1基因区域。具体而言,是设计成与来自其他基因组的淀粉合成酶II型基因区域(淀粉合成酶II型-A1、淀粉合成酶II型-B1)完全不匹配的区域的引物。
具体而言,可以举出含有序列号24或25中任一个所记载的序列的引物、和含有序列号26中的任一个所记载的序列的引物的组合。
另外,作为检测出编码上述蛋白质(4)~(6)的基因的变异的方法,可以使用Nakamura et.Al.,(2002)Genome 45:1150-1156记载的方法。
并且,作为检测编码上述蛋白质(1)~(6)的基因的变异的方法,除PCR法之外,还可以举出LAMP法、NASBA法、LCR法、SDA法、RCR法、TMA法、通过RT-PCR进行的mRNA的定性或定量法等。只要为能够检测该基因序列的变异的方法即可,可以使用任意方法,作为一例,可以举出LAMP法,以Notomi等人的报告(Notomi et.al.,Nucleic Acids Research(2000).28,No.12,e63)中给出的方法为参考,设计引物。此时,希望检测出的序列是(1)的序列时,可以将包括序列号13的位置124至412的区域作为检测区域,设计引物。另外,希望检测的序列是(2)的序列时,可以将序列号14的位置6145至6146的序列的一部分作为检测区域,设计引物。另外,希望检测的序列是(3)的序列时,可以将包括序列号15的2590至2652的区域作为检测区域,设计引物。除了设计的引物之外,还加入反应必需的模板DNA溶液、dNTP、BstDNA聚合酶、及其他反应所必需的试剂,在65℃下进行反应,采用适当的方法检测产物,由此能够进行淀粉合成酶II型基因变异小麦的检测、或淀粉合成酶II型基因类型小麦的判定。即使采用其他的方法,也可同样地按照操作手册来制备检测系统,进行相同的检测、判定。
另外,作为确认上述蛋白质(1)~(3)未表达的方法,可以举出山守等的报告(Yamamori et.al.,Theor.Appl.Genet(2000)101:21-29)中记载的方法。
作为确认上述蛋白质(4)~(6)不表达的方法,也可以使用特开平6-125669号中记载的方法。
上述本发明的小麦中,蓄积的淀粉的30重量%以上不形成粒径为10μm以上的淀粉颗粒。使用电子显微镜或光学显微镜,观察小麦种子胚乳的剖面,计算一定面积内10μm以上粒子占一定面积的比例,由此,可以计算出形成粒径为10μm以上的淀粉颗粒比例。或者,通过在淀粉精制过程中,分离不形成淀粉颗粒的级分和淀粉颗粒级分,测定其干燥重量,进行计算。通过降低形成粒径为10μm以上的淀粉颗粒的比例,可以使其容易被淀粉酶、支链淀粉酶等淀粉分解酶消化,成为易消化性淀粉。使用上述淀粉时,能够提供易于被消化、容易被体内吸收的食品。另外,由于淀粉形成淀粉颗粒之类高级结构(结晶化),所以即使在沸水中加热,也不完全糊化,但为本发明类型的淀粉时,由于不形成高级结构,因此,能够在较短时间、较低温度下实现糊化,是适合在更低温度下、短时间内进行处理的材料。如果能够在低温、短时间内进行加热处理,则具有能够显著地降低加热对其他材料的影响、或者实现节能等优点。并且,由于不形成粒子,所以优选作为膜等的原材料使用。
并且,上述本发明的小麦,在支链淀粉支链中,聚合度70以下的链中聚合度3~5的葡萄糖支链的数量的比例为1.5%以上。优选为3%以上。另外,上述本发明的小麦,聚合度60以下的链中,聚合度2~5的葡萄糖支链的数量的比例为3%以上。优选为5%以上。通过具有上述链长分布,能够使淀粉的结构发生较大变化。实际上,本发明通过制成上述类型的淀粉,能够不形成淀粉颗粒,并且使结构上的特性较大地改变。实际上,不能形成淀粉颗粒的糖成分作为由平滑连续层构成的基底物质蓄积,在淀粉精制过程中,形成凝胶样层等,对物性给与多方面影响。在通常淀粉精制过程中几乎未见凝胶样物质蓄积,可以将其用作例如膜之类工业制品的原料。
另外,由于上述凝胶样物质保水力非常高,所以也能够期待用作保水剂等。
或者,也可以用作表面的涂布剂。
需要说明的是,支链淀粉是由α-1,4键连接成直链的葡萄糖链通过用α-1,6键形成分支后键合而构成的巨大分子,支链淀粉分子之间,其分子量、分支的数量、长度均呈现多样性。所以,本发明所示的支链淀粉的葡萄糖支链的链长分布,表示蓄积在种子中的所有支链淀粉的平均分布。
并且,上述本发明的小麦的生淀粉在淀粉酶作用下的分解率为80%以上。优选为90%以上。热作用下不糊化的生淀粉状态下的分解性提高,使上述淀粉即使不进行加热处理也能高效且容易地被消化吸收。或者也可以用作生物分解性塑料的原料。
另外,本发明的其他小麦不具有下述蛋白质所具有的酶活性的全部,即(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
如上所述,上述(1)~(3)的蛋白质通常参与支链淀粉的支链(通过α-1,6键形成分支的葡萄糖聚合物)的合成、特别是参与聚合度为中等程度的链(聚合度为15~25左右的链)的合成。因此,一般认为该蛋白质的酶活性为:识别基质ADP-葡萄糖和支链淀粉,并与其结合,使葡萄糖从ADP-葡萄糖键合到支链淀粉的支链的末端。另一方面,认为上述(4)~(6)的蛋白质基本上参与直链淀粉的合成。因此,一般认为酶活性为:识别基质ADP-葡萄糖和直链淀粉,并与其结合,使葡萄糖从ADP-葡萄糖附加到延长中的直链淀粉的末端。
为了确认上述(1)~(6)蛋白质的酶活性,可以使用常用的任何方法。举出一例,从种子中精制上述酶,加入为基质的[U-14C]ADP-葡萄糖或糖原或者支链淀粉,再加入用于调整反应条件的成分,进行反应。一定时间的反应完成时,通过加热至100度使酶失活,使用阴离子交换柱除去未反应的[U-14C]ADP-葡萄糖后,使用液态闪烁计数管计测糖原或支链淀粉中含有的[U-14C]ADP-葡萄糖的量。作为其他方法,也可以使用下述方法,即,将从种子中粗精制得到的蛋白质级分或淀粉级分(蛋白质含量5-10μg)在从常用的SDS-PAGE中除去SDS和β-巯基乙醇的条件下进行丙烯酰胺凝胶电泳。将分离结束的凝胶浸渍在由50mM甘氨酸、100mM硫酸铵、5nMβ-巯基乙醇、5mMMgCl2、0.5mg/ml牛血清白蛋白、0.01mg/ml糖原或直链淀粉、4mMADP-葡萄糖构成的溶液中,放置4小时至12小时。之后,加入由0.2%碘、0.02%碘化钾构成的溶液,进行染色,判定酶活性。
另外,也可以使用如上所述确认蛋白质自身表达的方法、或识别使酶失活的基因组DNA上的变异的方法。在(1)至(3)的蛋白质中,所谓使酶失活的基因组DNA上的变异,可以举出在为酶基质的ADP-葡萄糖或支链淀粉的识别、键合部位上的变异、或在将葡萄糖转移至支链淀粉非还原末端的活性中心部位的变异、或存在于N末端的信号序列部位的变异等。在(4)~(6)的蛋白质中,所谓使酶失活的基因组DNA的变异,可以举出为酶基质的ADP-葡萄糖或直链淀粉的识别、键合部位的变异、或在将葡萄糖转移至直链淀粉非还原末端的活性中心部位的变异等。特别是,在通过放射线照射或给与变异原性化学物质进行变异诱导处理时,可能产生伴有仅1个残基氨基酸取代的变异。上述情况下通过SDS-PAGE确认时,通常难于识别,因此适用确认DNA上的变异的方法。确认DNA序列上的变异的方法如上所述。
另外,本发明的其他小麦不表达上述蛋白质(1)至(3)中的1个以上,并且不表达上述蛋白质(4)至(5)中的1个以上(但是不包括只有蛋白质(2)、(4)及(5)同时不表达的小麦。)。上述小麦,与现有小麦中蓄积的淀粉相比较,蓄积了被赋予新型特性的淀粉。作为新型特性,例如可以举出糊化液的粘度、糊化峰温度、耐老化性、冻结融解耐性、消化酶的分解性等的改变。特别是,在本发明中,发现通过缺失1个以上淀粉合成酶II型蛋白质,与不缺失类型相比糊化度升高,糊化液的粘度降低,老化度降低。另外发现,通过同时使1个以上颗粒性淀粉合成酶缺失,能够显著地改变上述效果。上述小麦中蓄积的淀粉,在糊化后冷却的时间点,可蓄积与现有相比糊化度高的淀粉或粘度低的淀粉、或耐老化性提高的淀粉。特别是,上述蛋白质(1)至(3)中的1个不表达,且上述蛋白质(4)至(6)中的2个不表达的小麦,与(1)至(3)全部表达、(4)至(6)中的2个不表达的小麦的淀粉相比,糊化后的耐老化性、冻结融解耐性显著改善。或者,上述(1)至(3)蛋白质中的2个不表达、且上述蛋白质(4)至(6)全部不表达的小麦,糊化液的粘度非常低。为了确认上述小麦,可以使用检测编码上述蛋白质(1)至(6)的基因的有无及变异,进行确认的方法,也可以使用确认蛋白质自身表达的方法。或者也可以使用将由序列号1至11记载的基因序列表达的RNA进行精制、定性或定量的方法。
优选上述蛋白质(1)至(3)中的任意2个不表达,并且上述蛋白质(4)至(6)中的1个以上不表达的小麦。上述小麦,特别是糊化后的粘度与现有小麦相比显著降低。此特征,在(1)至(3)蛋白质中的2个不表达、且上述蛋白质(4)至(6)全部不表达的小麦中特别显著。
另外,优选上述蛋白质(1)至(3)中的2个以上不表达,并且上述蛋白质(4)至(6)中的2个以上不表达的小麦。上述小麦,特别是糊化后的耐老化性与现有小麦相比有所提高。此特征,在上述蛋白质(1)至(3)中的任意2个不表达、且上述蛋白质(4)至(6)全部不表达的小麦中特别显著。
本发明的其他小麦不具有上述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的1种以上酶活性,并且不具有上述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的1种以上酶活性(但,不包含只不显示蛋白质(2)、(4)及(5)所具有的酶活性的小麦。)。
较优选不具有上述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的2种以上酶活性,并且不具有上述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的2种以上酶活性的小麦。
进一步优选不具有上述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2种酶活性,并且不具有上述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的1个以上酶活性的小麦。
更优选不具有上述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2种酶活性,并且不具有上述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性的全部的小麦。
另外,通过使小麦的上述蛋白质(1)至(3)中的2个以上不表达,与颗粒性淀粉合成酶蛋白质的表达组合与上述小麦相同、蛋白质(1)至(3)全部表达的小麦相比较,使淀粉糊化后的粘度降低。
另外,通过使小麦的上述蛋白质(1)至(3)中的2个以上不表达,与颗粒性淀粉合成酶蛋白质的表达组合与上述小麦相同、蛋白质(1)至(3)全部表达的小麦相比较,使淀粉糊化后的耐老化性提高。
由此可知,可以通过使用下述步骤来筛选特定的小麦,即检测上述基因变异体(7)至(9)中的1个以上的步骤、及检测上述蛋白质(4)至(6)中的1个以上的步骤。此处,作为特定小麦,可以举出生淀粉的分解率为80%以上的小麦,即完全不具有上述(1)至(6)蛋白质的小麦。或者,可以举出糊化液的粘度非常低的小麦,即上述(1)至(3)蛋白质中的(1)及(2)未表达、且(4)至(6)蛋白质均未表达的小麦。
本发明的小麦或来自本发明小麦的淀粉可以用于食品中。作为上述食品,可以举出使用普通小麦粉(包含全粒粉)或淀粉的食品等。例如可以举出用作焙烤食品(Bakery foods)、面条类、糕点类、油炸食品、烧烤食品、豆沙点心、汉堡等的材料。由该小麦得到的面粉或淀粉可以直接使用,也可以与其他粉类混合使用。另外,也可以用作酒精饮料等的发酵原料、用于氨基酸或多糖等的微生物生产的原料。
作为利用本发明的小麦制作的焙烤食品,例如可以举出主食面包、法式面包、面包卷、带馅面包等面包类,酵母油炸甜圈饼等油炸面包类、馒头类、披萨饼等意大利馅饼类、松糕等蛋糕类,小甜饼、饼干等烘焙食品类等。制作上述焙烤食品时使用的来自本发明小麦的面粉,可以使用经过通常的制粉步骤除去麦麸等成分的面粉,也可以使用未分开的全粒粉。作为用于制作上述焙烤食品的焙烤食品用面粉,可以直接使用从本发明小麦得到的上述面粉,优选与其他面粉混合使用。所谓其他面粉,可以举出强力粉、中力粉、薄力粉等小麦粉,或者不分类的来自小麦的面粉、黑麦粉、米粉、淀粉等。本发明的焙烤食品可以如下制作,即,在由本发明的小麦得到的面粉或与其他面粉的混合面粉中配合酵母、碳酸氢钠等化学膨胀剂、酵母食品、食盐、糖类、油脂类、鸡蛋、乳制品、水等通常焙烤食品制作中使用的各种副原料,将所得物混炼做成生面团,通过发酵等使其膨化,或直接焙烤或油炸制作焙烤食品。制作本发明的焙烤食品时,可以使用通常采用的生产方法、制作装置、冻结方法、冻结装置中的任意一种。另外,必要时可以加入维生素、矿物营养素等添加剂。
如上所述制作的含有来自本发明小麦的面粉的焙烤食品,甘甜、风味独特、香气十足、有咬劲儿。上述特征在只使用来自本发明小麦的面粉时也能获得,可以与其他面粉混合使用获得该特征,优选含有0.1~60质量份、更优选含有0.5~50质量份来自本发明小麦的面粉。
另外,本发明的小麦或来自本发明小麦的淀粉可以用于工业制品。作为上述工业制品,可以举出粘度稳定剂、保水剂、胶体稳定剂、糊、粘合剂等。
另外,本发明的小麦或来自本发明小麦的淀粉可以加工利用。例如可以举出通过酸或碱、或者酶处理生成糊精,将此糊精用于粘合剂、纤维、膜等的方法。另外,该糊精中的水溶性级分可以作为难消化性糊精用作整肠作用等优异的功能性食品。或者使其与各种无机、有机酸反应,形成淀粉酯加以利用。特别是与磷酸反应得到的磷酸淀粉作为增稠剂是有用的。
另外,蛋白质(1)~(6)都不表达的小麦,与普通小麦相比,糖含量增加。具体而言,除去胚的成熟种子中含有0.1重量%以上的葡萄糖。优选除去胚的成熟种子中含有0.3重量%以上的葡萄糖。更优选除去胚的成熟种子中含有0.5重量%以上的葡萄糖。另外,除去胚的成熟种子中含有0.1重量%以上的麦芽糖。优选除去胚的成熟种子中含有0.3重量%以上的麦芽糖。更优选除去胚的成熟种子中含有0.5重量%以上的麦芽糖。另外,除去胚的成熟种子中含有1重量%以上的蔗糖。优选除去胚的成熟种子中含有3重量%以上的蔗糖。更优选除去胚的成熟种子中含有5重量%以上的蔗糖。
作为种子中葡萄糖、麦芽糖及蔗糖含量的测定方法,只要为用于从种子中提取低分子糖进行分析的方法即可,可以使用任意方法。作为从种子中回收低分子糖的方法,可以将种子粉碎后,用水提取、用80%乙醇提取、用DMSO提取等,但操作中为了明确地区分淀粉或多糖与在淀粉酶等酶的作用下分解生成的糖,优选在淀粉酶不发挥作用的条件下进行提取、测定。另外,本发明为小麦胚乳部分以高含量蓄积糖的小麦,所以其测定中优选使用从种子颗粒中除去胚的部分作为样品。作为提取的样品所含的低分子糖的鉴定、定量的方法,可以使用下述方法中的任意一种,即,使用毛细管电泳的方法、或者使用HPLC的方法、利用酶、化学反应进行的测定方法等。
本发明的小麦中还包括下述小麦,即,通过使上述小麦与其他品种杂交得到的F1子代进一步进行自身受精或者与一方的亲代系统进行回交,导入其它有用的形质而得到的小麦。例如,可以使通常所知的耐病性高的品种和上述小麦杂交,所得的F1子代与亲代系统中耐病性高的品种进行回交。对于所得子代的个体,根据上述方法,筛选出颗粒性淀粉合成酶和淀粉合成酶II型的各蛋白质以所期望的组合表达的个体。对于筛选出的个体,通过进一步反复回交和筛选,能够赋予耐病性高的品种所期望的淀粉特性。或者,以进行回交的亲代系统作为上述小麦,使用适当的方法进行筛选,由此也能够赋予上述小麦耐病性。作为其它有用形质,可以举出面筋特性、耐倒伏性、秋播性、春播性、多收性、耐低温性、耐穗发芽性、制粉适应性等,但并不限定于此。
实施例
1、样品
本发明开发的小麦系统的颗粒性淀粉合成酶及淀粉合成酶II型蛋白质的类型,与作为比较对照的标准系统(类型(i))或者亲代系统(类型(ii)及类型(iii))一同示于表1。本发明中作为亲代系统使用的小麦系统是将东北农业研究中心培育的小麦品种乙女糯(颗粒性淀粉合成酶缺失型、淀粉合成酶II型蛋白质为野生型)和外来品种杂交,用其F5子代的种子筛选颗粒性淀粉合成酶缺失的系统(类型(ii))。另一方的亲代系统,使用该所培育的淀粉合成酶II型蛋白质缺失系统。此系统顺次杂交作为通常所知系统的关东79号(淀粉合成酶II型-B1缺失型)和作为外国品种的Turkey116(淀粉合成酶II型-D1缺失型)、Chosen57(淀粉合成酶II型-A1缺失型)3品种,筛选淀粉合成酶II型完全缺失的系统(类型(iii))。
小麦的栽培、杂交按照规定方法进行。杂交为亲代系统的2品种,得到F1子代。使其自身受精得到F2或者得到之后的子代,通过二维电泳确认颗粒性淀粉合成酶的有无,并通过PCR法分辨淀粉合成酶II型基因的基因型(野生型或变异型),由此从其中筛选出所期望的小麦系统。作为比较对照使用的小麦系统,使用作为一般栽培流通的品种的农林61号(类型(i))。
[表1]
表1通过杂交获得的各种子系统的基因类型
  颗粒性淀粉合成酶-A1   颗粒性淀粉合成酶-B1   颗粒性淀粉合成酶-D1   淀粉合成酶II型-A1   淀粉合成酶II型-B1   淀粉合成酶II型-D1   备注
  (i)   ○   ○   ○   ○   ○   ○  野生型
  (ii)   ×   ×   ×   ○   ○   ○  (iv)~(x)的亲代系统
  (iii)   ○   ○   ○   ×   ×   ×  (iv)~(x)的亲代系统
  (iv)   ×   ×   ○   ○   ○   ○
  (v)   ×   ○   ×   ○   ×   ○
  (vi)   ×   ×   ×   ×   ×   ○
  (vii)   ×   ×   ×   ×   ×   ×
  (viii)   ×   ○   ×   ○   ×   ×
  (ix)   ×   ×   ○   ○   ×   ×
  (x)   ×   ×   ×   ○   ×   ×
颗粒性淀粉合成酶的野生型、缺失型通过淀粉键合蛋白质的二维电泳进行确认。方法如下所示。
从成熟种子中除去胚,粉碎后通过60μm的筛子得到粉末,备用。以每20mg粉1mL的比例加入冷却的SDS缓冲液(0.1M Tris-HCl(pH6.8)、2.3%SDS、5%β-巯基乙醇、10%甘油),均化2分钟。过滤此悬浊液后,将滤液以15000rpm离心5分钟,除去上清液,再加入SDS缓冲液使其悬浊,进行离心。将此操作重复3次后,加入蒸馏水,将相同的操作重复2次,除去上清液,将回收的淀粉层自然干燥,制成精制淀粉。
为通常类型的淀粉时,在上述淀粉的精制中,加入SDS缓冲液,过滤后,在离心阶段大部分淀粉沉淀,由此形成淀粉颗粒层,与上层的水层明显分开。本发明的类型(vii)小麦在此阶段认为是淀粉颗粒层的部分仅极少量沉淀,在其上层大量地蓄积了由白浊不定形的凝胶样物质构成的层,并且在其上层形成水层。除去水层后,混合为糖成分的此凝胶样层和最下层的淀粉颗粒层,之后的操作与上述精制方法相同。
每10mg此精制淀粉,加入300μl的Lysis缓冲液(8M Ura、2%Nonidet P-40、2%ampholine(pH3.5-10)、5%β-巯基乙醇、5%聚乙烯吡咯烷酮),在100度的热水中加热处理2分钟。用冰冷却10分钟后,将淀粉凝胶化液在4度下以15000转离心10分钟,将200μl其上清液用于二维电泳。一维电泳进行3.5%丙烯酰胺凝胶构成的IEF,二维电泳进行15%双丙烯酰胺凝胶构成的SDS-PAGE。
颗粒性淀粉合成酶检测结果如图1所示。在图1A所示位置分别检测出颗粒性淀粉合成酶-A1、B1、D1,类型(vii)小麦系统中全部条带都未检出(图1B)。因此,类型(vii)的小麦完全缺失颗粒性淀粉合成酶。
淀粉合成酶II型的确认,使用已经由本发明人等开发(特愿2004-153904)的方法。方法如下所示。使种子发芽,使用Qiagen社制DNeasy plant mini试剂盒,对来自幼叶的基因组DNA进行处理。取100mg发芽种子的幼叶,在液氮中磨碎成粉末状。将磨碎的样品移至1.5ml试管中,之后加入试剂盒中附带的缓冲液AP1和RNase溶液,在65度下加热10分钟。然后加入缓冲液AP2,在冰上放置5分钟后,通过离心操作除去析出的沉淀物。在上清液中加入缓冲液AP3混合,之后全部用于mini spin column,进行离心操作,使DNA吸附在膜上。用缓冲液AW洗涤2次后,加入缓冲液AE,放置5分钟,通过离心回收DNA溶液。
采用PCR法确认编码3个淀粉合成酶II型的基因序列上产生的序列变异。所用引物序列如下所示。
淀粉合成酶II型-A1 SSIIAF1:GCGTTTACCCCACAGAGC
                                         (序列号13)
SSIIAR1:ACGCGCCATACAGCAAGTCATA
                                          (序列号17)
淀粉合成酶II型-B1:SSIIBF1:ATTTCTTCGGTACACCATTGGCTA
                                           (序列号20)
SSIIBR1:TGCCGCAGCATGCC(序列号23)
淀粉合成酶II型-D1 SSIIBF1:
GGGAGCTGAAATTTTATTGCTTATTG(序列号24)
SSIIBR1:TCGCGGTGAAGAGAACATGG(序列号26)
PCR反应液如下进行调制。反应中使用LA Taq(TACARA Bio公司)。引物使用FASMAC社制引物。
  10×LA Taq缓冲液   2μl
  dNTP   0.2mM
  Mg(Cl)2   2.25mM
  引物1   0.25μM
  引物2   0.25μM
  基因组DNA   1ng/μl
  LA Taq   0.025U/μl
  总计   20μl
PCR扩增装置使用GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems公司),反应条件如下设定。
  第1步   98℃   5min
  第2步   98℃   30sec
  (40次循环)   65℃   30sec
  74℃   1min
  第3步   74℃   5min
  第4步   4℃
将PCR扩增反应液供给到3%琼脂糖凝胶电泳后,进行溴化乙锭染色,通过确认由各引物产生的最适大小的DNA扩增条带,判定样品中有无野生型及变异型基因。类型(i)的对照品种及类型(vii)小麦的基因型判定的结果如图2所示。类型(vii)中,3个淀粉合成酶II型基因全部为变异型。由此可知,类型(vii)的小麦完全缺失颗粒性淀粉合成酶及淀粉合成酶II型。
(通过SDS-PAGE确认淀粉合成酶II型和颗粒性淀粉合成酶缺失)
通过SDS-PAGE确认各样品中的淀粉合成酶II型蛋白质和颗粒性淀粉合成酶蛋白质的表达。每1mg由类型(i)、类型(ii)、类型(iii)及类型(vii)精制的淀粉中加入14μl SDS缓冲液,煮沸5分钟后,冰浴冷却2分钟。4℃下以15,000rpm离心5分钟后,回收上清液,作为SDS-PAGE用样品。SDS-PAGE中,使用丙烯酰胺溶液终浓度为12.5%的丙烯酰胺凝胶,丙烯酰胺溶液是丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺以30∶0.135的比率混合得到的混合物,除此之外根据规定方法进行电泳。泳动后蛋白质的检测使用银染色试剂盒(第一化学药品)。
根据上述结果,也可以确认类型(vii)中不具有淀粉合成酶II型及颗粒性淀粉合成酶蛋白质(图13)。
2、蓄积的淀粉中未形成粒径10μm以上的淀粉颗粒的淀粉的比例
计算蓄积的淀粉中未形成粒径10μm以上的淀粉颗粒的淀粉的比例时,在上述淀粉的精制中,用SDS缓冲液洗涤和用水洗涤后,用刮刀分离凝胶样层和最下层的淀粉颗粒层。将各级分移至预先称重的1.5ml试管中,测定湿重。通过自然干燥使样品干燥后,测定干燥重量。为通常类型的淀粉时,淀粉颗粒层约100%,几乎不形成凝胶样层。与此相反,来自本发明的类型(vii)小麦的淀粉颗粒层的干燥重量为22mg,相对于此,凝胶样层的干燥重量为13mg。因此,回收的淀粉级分的总重量中所含的凝胶样层的重量为约37%。
3、电子显微镜观察
用类型(vii)小麦系统生产的种子的电子显微镜照片如图3所示。将成熟小麦种子粗粉碎,用电子显微镜(Keyence社)观察其断裂面。与类型(i)的野生型淀粉比较,类型(vii)的淀粉颗粒为扁圆形,数量也少,大部分由平滑的基底物质构成。
4、链长分布解析
4.1
构成类型(i)、类型(ii)、类型(iii)及类型(vii)淀粉中所含支链淀粉的葡萄糖支链的链长分布解析结果如图4~6所示。方法如下所示。秤量精制淀粉,每1mg淀粉加入60μL的250mM NaOH,煮沸20分钟,使其完全糊化。冷却后,加入乙酸1.9μL、50mM乙酸钠缓冲液(pH4.0)240μL、2%叠氮化钠3.75μL后,加入1μL异淀粉酶(Nacalai社),在37℃下边搅拌边反应16小时。反应结束后,煮沸20分钟,酶失活后,在20℃下以14000rpm离心2分钟,取得上清液,加入树脂(Bio-Rad社制),进行脱离子。离心使树脂沉淀后,将上清液移至新的试管中,采用Park-Johnson法的改良法(生物化学实验法19“淀粉·相关糖质实验法”中村道德·贝沼圭二编学会出版中心,P123)对通过酶处理生成的寡糖的浓度进行定量。适当地稀释试样溶液,向50μl稀释溶液中,加入25μl的0.1%铁氰化钾和25μl氰化钾溶液(将0.48g Na2CO3、0.92g NaHCO3、0.065g KCN溶解于水中,配成100ml的溶液),加栓密封,在沸水中加热15分钟。之后,冰上冷却10分钟,加入125μl的0.3%铁明矾溶液(将1.5gFe·NH4(SO4)2·H2O溶解于500ml的50mM硫酸中所得的溶液),在室温下放置20分钟后,测定715nm处的吸光度。对浓度在0至10mM之间改变的葡萄糖溶液进行相同的处理,根据测定值制作标准曲线,使用该标准曲线,对试样溶液中的还原末端基团进行定量。分别量取各样品大约5nmol,进行真空离心干燥,作为链长分布解析用试样。链长分布解析中使用Beckman社制PA糖链解析试剂盒。向干燥的样品中加入2μl麦芽糖质量控制/迁移率标记物(maltose quantitativecontrol/mobility marker),再进行真空离心干燥。向干燥的样品中加入1M氰基硼氢化钠溶液2μL,再加入APTS标记试剂。在37℃下于暗处反应4小时,加入46μL蒸馏水,停止反应。进而,从此样品中取出5μL,用蒸馏水稀释至40倍,制成测定用样品。葡萄糖聚合度不同的寡糖的分离定量,使用Beckman社毛细管电泳装置PACEsystem5000。分离用毛细管使用eCAP N-CHO毛细管,在高压下经5秒钟注入样品后,使用eCAP糖分析凝胶缓冲液,在30kV下进行电泳30分钟。根据所得的峰图谱,计算葡萄糖聚合度3以上70以下的寡糖的各峰面积,以峰面积的总和为100%,求出各峰所占面积的比例。以由类型(i)的小麦系统得到的图案为标准,将从各样品对应的峰的比例中减去相当于类型(i)的峰的比例得到的值,制成图表。类型(vii)与为标准系统的类型(i)相比,聚合度3至10的葡萄糖侧链的比例显著增加,相反聚合度11至24的葡萄糖侧链的比例降低(图4)。
显然不同于为亲代系统的类型(ii)(图5)或者类型(iii)(图6)的图。认为特别是直链淀粉含量为1%以下且聚合度为3至5的葡萄糖侧链的比例降低使得不能得到淀粉颗粒结构的糖成分构成平滑的基底物质。
4.2
从种子中除去胚,用乳棒和乳钵粉碎后,移至1.5ml试管中。每1mg粉碎的种子重量加入50μl的100%DMSO。加栓密封,煮沸30分钟,使其完全糊化,经离心除去不溶性成分。向20μl所得样品溶液中加入0.5M乙酸钠缓冲液(pH4.0)2μl、7单位异淀粉酶(Nacalai社),用水混合至100μl(反应1)。
同时,此反应液中使用经预先煮沸而失活的异淀粉酶,对该样品进行处理,作为用于测定样品中预先含有的游离状态寡糖的样品(反应2)。在37℃下反应16小时以上,之后煮沸5分钟,使异淀粉酶失活,对于反应1,通过反应生成的葡萄糖支链的浓度,可以根据Park-Johnson法的改良法(上述)进行计算,将相当于10hmol寡糖的溶液量进行真空离心干燥。对于反应2,将与反应1中所求出的溶液量相等量的溶液进行干燥。之后,加入1M氰基硼氢化钠(THF中)溶液2μl,再加入2μl的APTS标记试剂,在暗处于60℃下反应90分钟。加入46μl水,停止反应,再用水稀释至40倍,制成测定用样品。按照与上述相同的方法进行使用PACE system 5000的解析。从由反应1得到的各葡萄糖支链的峰面积值中减去由反应2得到的对应峰的面积值,由此计算出通过异淀粉酶处理生成的葡萄糖支链的值。计算出聚合度1以上、60以下的支链的面积值,以总和为100%,求出各峰所占的面积的比例。
与类型(i)相比,类型(vii)中聚合度2至5的支链的比例明显增加(图7及8)。实施例的图4是对聚合度3以上的支链的解析,本实施例中,不使用与聚合度2的峰重叠的麦芽糖质量控制/迁移率标记物进行解析,聚合度2的支链的峰面积也变得清楚。结果为类型(vii)中聚合度2的峰也比类型(i)显著增高。
另外,类型(ii)的支链淀粉具有与类型(i)几乎相同的结构(图5),支链淀粉的链长结构几乎没有变化。与此相反,与类型(ii)粘性相同的类型(vi)、(x)(图12)与类型(ii)相比聚合度约为2至10的支链的比例增加,聚合度为11至25的链减少。表明在支链淀粉结构中存在变化,结果DSC中的糊化峰温度降低,糊化后溶液粘度下降。
5、直链淀粉含量的测定方法
测定各小麦系统的淀粉中直链淀粉含量。测定方法如下所示。每1mg精制淀粉,加入25μl乙醇,再加入1M氢氧化钠溶液225μl,在沸水中加热10分钟,使淀粉糊化。用水将此糊化液稀释10倍,分取50μl用于测定。向其中加入1M乙酸10μl、碘液20μl、水920μl,充分混合,在27度下放置20分钟后,测定620nm处的吸光度。另外,将来自马铃薯的直链淀粉作为制作标准曲线用试样,来自糯玉米(Waxycorn)的淀粉(不含直链淀粉的淀粉)作为空白,将上述淀粉进行相同的处理。从各试样的吸光度中减去由糯玉米求出的吸光度的值,套用到标准曲线的数据中,由此测定各试样的直链淀粉含量。
6、生淀粉在α-淀粉酶作用下的分解
对生淀粉经α-淀粉酶处理而消化产生的分解性进行如下研究。实施的方法,按照以“淀粉·相关糖质实验法、P189~P192”为参考经改良的方法进行。秤量来自类型(i)、(ii)、(iii)、(vii)小麦系统的生淀粉,用水调制成为1%悬浊液。将平均20μL此悬浊液分为3瓶(I、II、III),I和II中加入0.8M乙酸缓冲液(pH6.0)230μL。III中加入10μL的2M NaOH后,在50℃下加热5分钟,制成完全糊化的淀粉样品。用20μL的1M乙酸中和后,加入0.8M乙酸缓冲液(pH6.0)200μL。之后,向I、III中加入α-淀粉酶(Megazyme社制)10U。向II中等量加入将相同的α-淀粉酶煮沸20分钟失活的溶液。全部样品在40℃下边搅拌边进行反应。12小时后,将反应液用水稀释5倍,保存在4℃下使反应停止。经α-淀粉酶处理生成的寡糖采用上述Park-Johnson法的改良法进行定量。根据下式计算生淀粉的分解率。
(I-II)/(III-II)*100
7、糊化度
对加热糊化后,冷却至室温时的溶液白浊程度及糊化度进行调查。方法采用以“淀粉·相关糖质实验法、P189~P192”为参考改良的方法如下进行。秤量类型(i)、(iii)、(iv)、(v)的精制淀粉,用水调制成为1%的悬浊液。将平均20μL此悬浊液分成3瓶(I、II、III)、I和II煮沸20分钟,冷却至室温。通过目测确认此时各样品的白浊程度。然后,在4℃下保存2小时后,加入0.8M乙酸缓冲液(pH6.0)230μL。III中加入10μL的2M NaOH后,煮沸5分钟,冷却至室温后,用1M乙酸20μL中和,之后加入200μL的0.8M乙酸缓冲液(pH6.0)。然后,向I、III中各加入β-淀粉酶(SIGMA社制)及支链淀粉酶(Pullulanase)(林原生物化学研究所制)5μL。向II中等量加入将同种酶煮沸20分钟使其失活的溶液。全部样品在40℃下边搅拌边进行反应。30分后,将反应液用水稀释5倍,在4℃下进行保存,使反应停止。经酶处理生成的寡糖根据上述Park-Johnson法的改良法进行定量。计算各样品的寡糖浓度后、根据下式计算糊化度。
(1-II)/(III-II)*100
8、粘度
来自各小麦系统的淀粉糊化后,测定冷却至60度时的溶液的粘度。测定方法如下所示。秤量精制淀粉,用蒸馏水配制成4%淀粉悬浊液。在沸水中煮沸20分钟,保存在60℃下。将100μL此糊液移至垂直竖立的内径1mm的玻璃管中,测定液面前端落下5cm的距离所需要的时间。另一方面,将糯玉米(丰年社制)调制成由2%起间隔0.5%直至7.5%的各种浓度的淀粉溶液,将上述淀粉溶液相同地进行糊化、保温,与上述相同地测定落下速度,制作标准曲线。另一方面,使糯玉米以相同的浓度,通过快速粘度分析仪(Rapid Visco Analyser)测定糊化后60℃下的粘度,使用其制作标准曲线。通过在使用糯玉米制作的标准曲线中套用来自各种小麦的淀粉溶液在60℃下的落下速度,计算相对粘度。
9、糊化后的冻结融解耐性
如下进行冻结融解耐性的研究。在各试样的精制淀粉中加入水,制成5%的淀粉悬浊液。煮沸20分钟,将淀粉悬浊液糊化后,冷却至室温,首先观察此时糊化液的状态。冷却至室温,白浊化,得到凝胶化样品,根据其程度评价为“高”、“中”、“低”。另外,未见白浊和凝胶化的样品评价为“未白浊”。将上述糊液或者凝胶化的样品在-80℃下冷冻1小时后,在25度下融解30分钟,将此操作重复10次后,观察样品状态。在第10次的融解结束时凝胶化的样品评价为“×”,凝胶化程度低的样品评价为“△”,几乎未见凝胶化的样品评价为“○”。
各类型小麦的淀粉的上述特性评价结果汇总于下表2中。
[表2]
Figure A20068001522000351
对于类型(vii)进行阐述,如上所述由于糖成分不能取得淀粉颗粒结构,所以一般认为易于受到α-淀粉酶之类分解酶的影响,生淀粉的分解性显著增加。以上述糖成分为主要成分的类型(vii)小麦系统在作为食品使用时的加工性、或者消化性方面,可以提供与现有完全不同的应用方法。具体而言,可以举出易消化性面包、面条、或者点心类等。另外,优选用作饲料用作物。另外,与形成淀粉颗粒的系统相比,加工时的糊化能量非常少即可。即,可以在低温下烹调,将加热给与其它食物成分的影响抑制在最小限度。总之由于糊化后的冻结融解耐性也十分优异,所以特别适用于冷藏、冷冻保存用食品。进而,类型(vii)淀粉在淀粉精制时吸水性与其他淀粉相比非常高。吸水量高时,作为凝胶化剂使用时,用少量即可吸收大量水分。或者用于果冻状食品时也可以用少量进行调制。另外,还可以用于难消化性淀粉的制作。
已知直链淀粉的含量因合成其的颗粒性淀粉合成酶基因的组合不同而不同。另一方面,如上所述使淀粉合成酶II型全部缺失时,与野生型相比直链淀粉含量显著增加(类型(iii))。由此可知,颗粒性淀粉合成酶的组合相同时,同时使淀粉合成酶II型缺失1至2个时,表观直链淀粉含量增加,但实际上表观直链淀粉含量为几乎相同程度的值(比较类型(iv)和类型(ix)、类型(v)和类型(viii)),或虽然少数但有降低倾向(未给出数据)。
耐老化性(“白浊程度”高的类型耐性差)的研究中,即使颗粒性淀粉合成酶的类型相同,同时使淀粉合成酶II型缺失时,耐性也将提高(比较类型(iv)和类型(ix)、类型(v)和类型(vii))、糊化后的糊液的相对粘度降低(比较类型(ii)和类型(vi)、(vii))。
由此可知,通过不仅使颗粒性淀粉合成酶缺失,而且同时使1个以上的淀粉合成酶II型缺失,能够制作直链淀粉含量与现有各种低直链淀粉含量小麦程度相同且耐老化性提高的小麦,或者糊化后的糊液粘度降低的小麦。另外,在使淀粉合成酶II型缺失2个以上时具有更大的效果。低直链淀粉小麦作为面条用粉广为使用,糊化、老化特性的改良可以给上述用途带来改善效果。另外,也可以用于饺子、馒头等的皮等。
另外,本发明的类型(vi)小麦是颗粒性淀粉合成酶全部缺失、淀粉合成酶II型只表达1个的类型,与类型(ii)小麦相比,粘度显著降低。已知类型(ii)小麦糊化后冷却时的糊液的粘度低,类型(vi)具有粘度低于上述粘度水平的新型特性。
以上数据表明,可以筛选出蓄积下述类型的淀粉的小麦系统,即目前根据有无颗粒性淀粉合成酶的表达进行的小麦系统的筛选无法筛选出的类型。
本发明提供一种含有新型淀粉的六倍体小麦,应用本发明可以制作具有相同效果的四倍体小麦。很早以前人们就已经知道由六倍体小麦和四倍体小麦的杂交后代可以得到四倍体小麦。因此颗粒性淀粉合成酶和淀粉合成酶II型以所期望的组合表达的本发明小麦和四倍体小麦杂交,通过组合上述筛选方法,可以从其后代中,筛选出以所期望组合具有颗粒性淀粉合成酶和淀粉合成酶II型的四倍体小麦。四倍体小麦可以举出硬质小麦等。
10、麦芽糖及葡萄糖含量的测定
测定使用的种子样品,与糖含量测定用样品不同,事先轻度粉碎,135℃下干燥2小时,由干燥前后的重量变化事先计算出水分含量。
将类型(i)及类型(vii)小麦的除去了胚的成熟种子在液氮中磨碎,每10mg重量的磨碎的粉加入1ml的DMSO充分混合,一边经常搅拌一边静置于室温下。1.5小时后以13,000rpm离心5分钟,将上清液移至新试管中。煮沸10分钟后,准确量取一定量,进行真空干燥(DMSO提取样品)。
另外,将类型(i)及类型(vii)小麦的除去了胚的干燥种子在液氮中磨碎后,每10mg重量的粉加入1ml的80%乙醇,密闭煮沸20分钟。冷却后,以10,000rpm离心5分钟,准确量取一定量,进行真空干燥(乙醇提取样品)。
与链长分布解析中所述方法相同地在上述样品中加入1M氰基硼氢化钠溶液2μl、APTS标记试剂2μl,在37℃下于暗处反应4小时后,加入46μl蒸馏水,使反应停止。进而用蒸馏水稀释至40倍,作为测定用样品。在分析装置及条件与链长分布解析中所述方法相同的条件下测定。以预先使用标准物质制成的标准曲线为基础,根据葡萄糖及麦芽糖的峰面积计算浓度,计算每单位种子干燥重量的各糖浓度,进行样品间的比较。
11、蔗糖含量的测定
将类型(i)及类型(vii)小麦的除去了胚的成熟种子在液氮中磨碎后,每10mg重量的粉加入1ml的80%乙醇,加盖密闭,煮沸20分钟。冷却后,以10,000rpm离心5分钟,准确量取一定量上清液,进行真空干燥。加入与干燥前的体积相同的量的灭菌水,溶解样品后,通过0.45μm的过滤器过滤,进而将用截留分子量10,000的超滤膜过滤得到的样品作为蔗糖测定溶液。样品中的蔗糖含量的分析使用HewlettPackard社制HP毛细管电泳装置,使用市售的缓冲液(用于HPCE的碱性阴离子缓冲液(Agilent社))及毛细管(CE标准毛细管(50μm、104cm)(Agilent社))进行分离。参照预先使用市售蔗糖制作的标准曲线,计算样品中的蔗糖含量,进行样品间的比较。
(糖含量测定的结果)
与作为与商业上广为使用的小麦类型相同的类型(i)相比,类型(vii)中葡萄糖的含量至少为5倍以上、麦芽糖的含量至少为10倍以上、蔗糖的含量至少为2倍以上。另外,类型(vii)的种子含有上述糖至吃起来感觉甘甜的水平,是现有类型中没有的新型特征。通过增加糖含量,将本发明小麦加工成食品时不仅不需要添加新的糖成分,而且也可以用作供给糖自身的原材料。
12、糊化特性(DSC)
将从各小麦中精制的淀粉分别称量约3mg,加入3倍量的水,加水半日以上。将此样品封入密封盒中,采用示差扫描热量测定计,以5℃/min的速度从30℃升温至105℃,测定糊化开始温度(T0)、糊化峰温度(Tp)、糊化终止温度(Tc)、及焓。
结果,为类型(vii)的亲代系统的类型(ii)与为野生型的类型(i)相比,T0升高,为另一方亲代系统的类型(iii)的T0降低。与其相对,类型(vii)显示比为亲代系统的类型(iii)更低的糊化峰温度。尽管如此,焓值与类型(iii)相比仍变大,是非常特征性的特性。另外,众所周知3个颗粒性淀粉合成酶全部缺失的粘型淀粉(类型(ii)),与3个颗粒性淀粉合成酶都存在的类型(i)相比,糊化峰温度升高。与其相对,类型(vi)虽然是无直链淀粉的类型,但与类型(i)相比糊化峰温度仍然降低。通过不仅使颗粒性淀粉合成酶缺失,而且同时使2个淀粉合成酶II型缺失,能够使糊化峰温度或焓降低。
DSC测定时的糊化峰温度降低时,在较低温度下就可以糊化,不仅对加工性产生较大影响,而且可以进行与不适于加热的材料等的加工。并且在较低温度下进行糊化时,更易被淀粉酶等分解,由此,使游离的糖感觉更加甘甜,也给与食物味道较大影响。
[表3]
  样品   糊化开始温度(T0)   糊化峰温度(Tp)   糊化终止温度(Tc)   焓(ΔH)
  (i)   54   60.1   65.7   -6.672
  (ii)   57.3   62.7   70.7   -9.047
  (iii)   46.1   49.7   54.9   -3.238
  (vi)   52.6   58.3   70.1   -8.192
  (vii)   43.7   47.3   52.3   -6.47
13、可溶性聚葡萄糖(water soluble polyglucan,WSP)含量的测定将除去胚的成熟种子破碎,使用通过65μm尼龙网的级分。将回收的级分在甲醇中煮沸15分钟后,离心回收沉淀部分。再用90%甲醇洗涤此沉淀,离心回收后,干燥测定重量。秤量约50mg的样品,每1mg加入20μl水,边在室温下搅拌20分钟,边提取可溶性聚葡萄糖。600×g离心20分钟,分别回收可溶性级分和不溶性级分。其中不溶性级分再次用水提取,回收可溶性级分和不溶性级分。将第1次和第2次的可溶性级分混合,用于之后的操作。
为了除去蛋白质,向混合的可溶性级分中加入三氯乙酸(TCA)使终浓度为5%,在冰上静置3.5小时。经2,400×g离心10分钟除去沉淀的蛋白质层,向上清液中加入3倍量的甲醇,使WSP沉淀,离心回收后,干燥,测定重量。
在上述水不溶性级分中加入1050μl水,悬浊后,加入150μl甲苯,搅拌1小时,进行除蛋白质处理。700×g离心10分钟,回收沉淀。再将除蛋白质处理重复2次,最后回收的沉淀用水洗涤3次,用甲醇洗涤1次后,真空干燥,测定重量。各样品均通过将水不溶性级分的重量和WSP重量的总和作为总糖量的重量,计算WSP重量相对于此的比率(图14)。相对于类型(i)、(ii)、(iii),类型(vii)中WSP的含量明显地增加。
14、焙烤食品
制造焙烤食品时,使用本发明小麦中的类型(vii)。每100g收获的成熟种子,加入1.5ml水充分混合,混料30分钟后,使用Brabender社制Testmill Quadrumat Jr.制粉,得到小麦粉。此时的有效利用率为46重量%。以下,按照表4及表5给出的比例和下述制作步骤制作主食面包。混合表4中除起酥油(shortening)以外的原料,用混合机低速混合1分钟、高速混合2分钟(27℃)。停止混合加入起酥油后,再低速混合1分钟、高速混合3分钟,使揉捏后的生面团在27℃、湿度75%下发酵90分钟。翻揉面团后,再于相同条件下发酵30分钟,分割成100g,制成圆形,放置20分钟。用模整形后,在38℃、湿度85%的发酵室中进行40分钟焙烘而制成(205℃、20分钟)。
上述条件下制作的主食面包的味道及食感由10名评价人员(panelists)进行评价。根据表6给出的项目和评价标准,按5阶段进行评价,计算各项目的平均值。合计此平均值,作为各试验区的综合评价(表7)。根据上述结果可以确认,使用由本发明小麦得到的面粉,能够制作出甘甜、香气、味道等风味很强的焙烤食品。另外,制作焙烤食品时,优选使用0.1~60质量份,更优选使用0.5~50质量份。
[表4]
表4
  面粉(表5所示面粉)   600质量份
  酵母   12质量份
  砂糖   30质量份
  食盐   12质量份
  脱脂奶粉   12质量份
  激酵母活性剂(Yeast Food)   0.2质量份
  起酥油   30质量份
  水   420质量份
[表5]
表5
Figure A20068001522000411
*数值单位为质量份。
*来自本发明小麦的面粉,使用通过Brabender公司制Testmill粉碎得到的粉。
*强力粉使用Eagle(日本制粉(株))、薄力粉使用Heart(日本制粉(株))。
[表6]
表6主食面包的官能评价标准表
  香气   5.有芳香的浓郁的香气。4.有较浓的香气。3.能够闻到香气。2.无香气。1.有难闻气味。
  食感   5.口感非常好。4.口感好。3.口感一般。2.口感稍差。1.口感差,残留在嘴中。
  味道   5.味道强、有风味。4.味道稍强。3.味道淡。2.无味道。1.无味道、有酸味。
  甘甜   5.感觉非常甜。4.感觉较强的甜味。3.感觉稍稍有点甜。2.感觉很微弱的甜味。1.完全没甜味。
[表7]
附图说明
[图1A]类型(i)的通过二维电泳得到的电泳结果的模式图。
[图1B]类型(vii)的二维电泳结果。
[图2]进行类型(i)的对照品种及类型(vii)小麦的基因型判定的结果。
[图3]用类型(vii)的小麦系统生产的种子的电子显微镜照片。
[图4]构成来自类型(vii)系统的淀粉中的支链淀粉的葡萄糖侧链链长分布解析结果((vii)-(i))。
[图5]构成来自类型(ii)系统的淀粉中的支链淀粉的葡萄糖侧链链长分布解析结果((ii)-(i))。
[图6]构成来自类型(iii)系统的淀粉中的支链淀粉的葡萄糖侧链链长分布解析结果((iii)-(i))。
[图7]构成来自类型(i)系统的淀粉中的支链淀粉的葡萄糖侧链链长分布解析结果。
[图8]构成来自类型(vii)系统的淀粉中的支链淀粉的葡萄糖侧链的链长分布解析结果。
[图9]为表示成熟种子中葡萄糖含量的图。
[图10]为表示成熟种子中麦芽糖含量的图。
[图11]为表示成熟种子中蔗糖含量的图。
[图12]构成来自类型(x)系统的淀粉中的支链淀粉的葡萄糖侧链链长分布解析结果。
[图13]为通过SDS-PAGE进行的电泳结果。
[图14]为表示成熟种子中可溶性聚葡萄糖含量的图。
序列表
<110>日本制粉株式会社
<120>含有新型淀粉的小麦及其生产方法
<130>Y1N-0284
<160>29
<170>PatentIn version 3.1
<210>1
<211>6898
<212>DNA
<213>小麦
<400>1
gggggccgtt cgtacgtacc cgcccctcgt gtaaagccgc cgccgtcgtc gccgtccccc     60
gctcgcggcc atttccccgg cctgaccccg tgcgtttacc ccacagagca cactccagtc    120
cagtccagcc cactgccgcc gcgctactcc ccactcccgc tgccaccacc tccgcctgcg    180
ccgcgctctg ggcggaggac caacccgcgc atcgtaccat cgcccgcccc gatcccggcc    240
gccgccatgt cgtcggcggt cgcgtccgcc gcgtccttcc tcgcgctcgc ctccgcctcc    300
cccgggagat cacgcaggcg ggcgagggtg agcgcgccgc caccccacgc cggggccggc    360
aggctgcact ggccgccgtg gccgccgcag cgcacggctc gcgacggagg tgtggccgcg    420
cgcgccgccg ggaagaagga cgcgagggtc gacgacgacg ccgcgtccgc gaggcagccc    480
cgcgcacgcc gcggtggcgc cgccaccaag gtagttggtt cgttatgact tgctgtatgg    540
cgcgtgcgcc tcgagatcag ctcacgaatt gtttctacaa aacgcacgcg ctcgtgtgca    600
ggtcgcggag cggagggatc ccgtcaagac gctcgatcgc gacgccgcgg aaggtggcgc    660
gccggcaccg ccggcaccga ggcaggacgc cgcccgtcca ccgagtatga acggcacgcc    720
ggtgaacggt gagaacaaat ctaccggcgg cggcggcgcg accaaagaca gcgggctgcc    780
cgcacccgca cgcgcgcccc atccgtcgac ccagaacaga gtaccagtga acggtgaaaa    840
caaagctaac gtcgcctcgc cgccgacgag catagccgag gtcgtggctc cggattccgc    900
agctaccatt tccatcagtg acaaggcgcc ggagtccgtt gtcccagccg agaagccgcc    960
gccgtcgtcc ggctcaaatt tcgtggtctc ggcttctgct cccaggctgg acattgacag   1020
cgatgttgaa cctgaactga agaagggtgc ggtcatcgtc gaagaagctc caaacccaaa   1080
ggctctttcg ccgcctgcag cccccgctgt acaagaagac ctttgggact tcaagaaata   1140
cattggcttc gaggagcccg tggaggccaa ggatgatggc tgggctgttg cagatgatgc   1200
gggctccttt gaacatcacc agaaccatga ttccggacct ttggcagggg agaacgtcat   1260
gaacgtggtc gtcgtggctg ctgaatgttc tccctggtgc aaaacaggca tggacattac   1320
ctcttcagtc tctcttcccg ttgttcataa aactttgctc gaatcactca taagaacaaa   1380
cattgtgttg cataggtggt cttggagatg ttgcgggtgc tctgcccaag gctttggcaa   1440
agagaggaca tcgtgttatg gtactgcagg ctttcactta actctgttga gtccatatgt   1500
tcgaataata tcagtgattg gcataatgtt attaagtgca agacatgaaa gtgttcttct   1560
gttagagtat ttcatagcca accctggagg ttaggttgtt ggggcctact gggtgcggga   1620
gggggtttgc aaaaagtggt ggttagcagt cggatttcac aaataaggag gctgataacc   1680
acgccatcag tgaagggaat gagtgtcggg tacccgatcg accgttttgc ccgacgtcag   1740
gtttacctgc cctgtagatc cgaataagta gttcctatcc tcagttaagt accaaatatc    1800
gccagcaccc gtgtgtgtat ttatagtact ggatgatcaa tttatcaaca tttccggtta    1860
atggttgcta tcatattcac tgtaattgtt agtaaacagt ggatgtttgt aatgtagatg    1920
atggctaaat gtatgttgtc aagctttcat tttaaagaaa attttattgg gagctagttt    1980
tcgggtttgg ttagagccac caaaacccca gaatttttgg gagttggctt gtgacagagg    2040
gttttgggga gttaactttc gggattcagt tagagacgct cttactagtt ccagtaaaga    2100
gtaaactatt ttctgcagtc atcccaattg ttctgtagaa attaaaagta gaaaatagtt    2160
gtggtatcat ataaaccata tattattcaa aatctagaat catggacttg gctagacttt    2220
gatgatctga aattttaaat ttgatgataa ttgagaaatg atcctttcta tcttaggttg    2280
tggtaccaag gtatggggac tatgaggaag cctacgatgt cggagtccga aaatactaca    2340
aggctgctgg acaggtaagc gaaaatgcaa tcaaagggga gctgaaattt caatgcttac    2400
tatcataata aatcaatttt aagtaaaaaa atttgtcctg caggatatgg aagtgaatta    2460
tttccatgct tatatcgatg gagttgattt tgtgttcatt gacgctccta tcttccgaca    2520
ccgtcaggaa gacatttatg ggggcagcag acaggttaat tttctatatg ttggtgtttg    2580
attgcactga taaactgaga ataagccaag gcctactgac tggcatatga ttacacattt    2640
tattttttca ggaaattatg aagcgcatga ttttgttctg caaggccgct gtcgaggtat    2700
cctctccaac tcaattgaca acctattacc actatacaat tatgtgtatg catgtatttc    2760
aacagatacg taatctccct tgtgaagtgt atatatacta ataacatttc aatacctcac    2820
atgcacattt ggtcaagcgt tatgatttaa cttctgataa tctattgcac tgatgaacaa    2880
taatattgat gatccttgtt acttcatcgt tatgtttatg ttctcttcac cggcgcattg    2940
attttggaaa tagcatttcc acctgccaca aacaataata tatactccta ctttcatcca    3000
atgtagatat tttcgcactt ggcatatcat cccattaaat attattggtc catcattttt    3060
attcctctat aatttgcagg ttccttggca cgttccatgc ggcggtgtcc cttatgggga    3120
tggaaatctg gtgtttattg caaatgattg gcacacggca ctcctgcctg tctatctgaa    3180
agcatattac agggaccatg gtttgatgca gtacactcgg tccattatgg tgatacataa    3240
catcgcgcac caggttcctt ttctcctaat cttgtttttt ctctagtctc tactattcac    3300
tccacattgt ttgaggaaac taaaggggtt gcaaaattat gatggcttat gaaagttatg    3360
gaggtaaatg catcagtggt gcttgaactt gtcacgcatg ttcactttgg tgcttacagt    3420
tgtagactac ggaaaactgg tgcaaaaact tggctattgt gtgcaatacg gtgtattttc    3480
cgtatgtagg gtcaaatgtt gcctatgtgg cattgtattc ccgtctatag atgttagacc    3540
gtgcctacat cgccattggg cccacacact ccctattaca tgtgggaccc acttgtcagc    3600
ctatgacata aataaaatgg aaatttataa taaaaatgat ggcctggggt cttgaaaatg    3660
ggacctcgca ggtatgccgc tagccagcac gccctaatca ttaatcccct atgcacttca    3720
gtatgtgtgt gtctgtgtgt ggagtcgggg gggggggggg tatgtattct tatatccttt    3780
gctctaaggc tatcattggc gtgctagcac cgccgggtct ccatcaacac cgacatcatc    3840
cacgacccca tccagctctt cctcaacaag cccacctcca gcctcaactc gggcagcacc    3900
ttcatggtgg cctaggtgct ctgcaccatc gctcgaagtg gcaacgtcgt tgtcatgacc    3960
atccaccaac ccaacacgca aaatcctcaa catcatttga cagtgagcat gcccctcttg    4020
tcatttcccc ctcataccca aacctgtctc gataaccctt ggagctgcac aagttgtgac    4080
catcgcctgc gtcgctgcac aacgcctgac ctagccggac cattatagaa gcctgccttg    4140
ggagcccata cctccctgca catcctcctc tttccccata gaccgtgccg ccatcgcaaa    4200
tcgacttctc ctctcctcct tctcctgctc tggccgtttt ccccgccgcg aagctgcaat    4260
ccatggcgag ttggccatgg ccctattccc caattgctcg cactaggagg tcctccttga    4320
agcctagcac ctttccccct cactaattgc aagttgggga gcccctcacg agctccctac    4380
attggccgta gtcgcctgcc gcctcaactc tggtccagac ctcgttcccg tggcctcgac    4440
gacatctcct cgacctccca ttccacacgc ggcctggaga ggatcaccgc atgttcatcc    4500
atccgacccg aatcatcata gaaccaacgc cagagaggtc atcccgacga cgtcgcactg    4560
ttcctctatt tcccccaagc tgtgtcgcgt cataatataa gacgggcttg tttgtatctc    4620
taggggtcat cgggttcaat ggctagctca tgcatggacc tgactttagg tcccaggttc    4680
gaacccccgc gtgcacataa tttatttgct atttatttct cctatctact aataagtggg    4740
acccacacat catactaagc cctttttgtc tcttgcctgc tgataagtgg gacccacacg    4800
caatacttag ccagagagag aacatgagct tgttggtgcc gcgttggcaa gccacgccag    4860
cagtcttaac ggctacaaac agaggatatg gtgtcacatc aacgtgcaga gcgtttacga    4920
atggaaagtg tactatatgc acacaagagc cagagccagg tttttgcacc agttttttgt    4980
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ttcttttctg gtacgatggg tggctcaaag acaccccaat agaagctatc acctcggaca    5100
ttgccaattg ggtgccgaac tacattaaag tggcaaggtc agttgattgc gctatgtgtt    5160
ggatcaggga cataaacgat tccataaata ttgcaatgtt cattcaaatt cttaacattt    5220
gcgaggcgct tcatgatttc catctccctc atatcagaga catttggtcg tgtacactaa    5280
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gcaccggatc acggcgggcg ccgacgcgct cctcatgccc tcccggttcg agccgtgcgg    6600
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<210>2
<211>799
<212>PRT
<213>小麦
<400>2
Met Ser Ser Ala Val Ala Ser Ala Ala Ser Phe Leu Ala Leu Ala Ser
1               5                   10                  15
Ala Ser Pro Gly Arg Ser Arg Arg Arg Ala Arg Val Ser Ala Pro Pro
            20                  25                  30
Pro His Ala Gly Ala Gly Arg Leu His Trp Pro Pro Trp Pro Pro Gln
        35                  40                  45
Arg Thr Ala Arg Asp Gly Gly Val Ala Ala Arg Ala Ala Gly Lys Lys
    50                  55                  60
Asp Ala Arg Val Asp Asp Asp Ala Ala Ser Ala Arg Gln Pro Arg Ala
65                  70                  75                  80
Arg Arg Gly Gly Ala Ala Thr Lys Val Ala Glu Arg Arg Asp Pro Val
                85                  90                  95
Lys Thr Leu Asp Arg Asp Ala Ala Glu Gly Gly Ala Pro Ala Pro Pro
            100                 105                 110
Ala Pro Arg Gln Asp Ala Ala Arg Pro Pro Ser Met Asn Gly Thr Pro
        115                 120                 125
Val Asn Gly Glu Asn Lys Ser Thr Gly Gly Gly Gly Ala Thr Lys Asp
   130                  135                 140
Ser Gly Leu Pro Ala Pro Ala Arg Ala Pro His Pro Ser Thr Gln Asn
145                 150                 155                 160
Arg Val Pro Val Asn Gly Glu Asn Lys Ala Asn Val Ala Ser Pro Pro
                165                 170                 175
Thr Ser Ile Ala Glu Val Val Ala Pro Asp Ser Ala Ala Thr Ile Ser
            180                 185                 190
Ile Ser Asp Lys Ala Pro Glu Ser Val Val Pro Ala Glu Lys Pro Pro
        195                 200                 205
Pro Ser Ser Gly Ser Asn Phe Val Val Ser Ala Ser Ala Pro Arg Leu
    210                 215                 220
Asp Ile Asp Ser Asp Val Glu Pro Glu Leu Lys Lys Gly Ala Val Ile
225                 230                 235                 240
Val Glu Glu Ala Pro Asn Pro Lys Ala Leu Ser Pro Pro Ala Ala Pro
                245                 250                 255
Ala Val Gln Glu Asp Leu Trp Asp Phe Lys Lys Tyr Ile Gly Phe Glu
            260                 265                 270
Glu Pro Val Glu Ala Lys Asp Asp Gly Trp Ala Val Ala Asp Asp Ala
        275                 280                 285
Gly Ser Phe Glu His His Gln Asn His Asp Ser Gly Pro Leu Ala Gly
    290                 295                 300
Glu Asn Val Met Asn Val Val Val Val Ala Ala Glu Cys Ser Pro Trp
305                 310                 315                 320
Cys Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp Val Ala Gly Ala Leu Pro Lys Ala
                325                 330                 335
Leu Ala Lys Arg Gly His Arg Val Met Val Val Val Pro Arg Tyr Gly
            340                 345                 350
Asp Tyr Glu Glu Ala Tyr Asp Val Gly Val Arg Lys Tyr Tyr Lys Ala
        355                 360                 365
Ala Gly Gln Asp Met Glu Val Asn Tyr Phe His Ala Tyr Ile Asp Gly
    370                 375                 380
Val Asp Phe Val Phe Ile Asp Ala Pro Ile Phe Arg His Arg Gln Glu
385                 390                 395                 400
Asp Ile Tyr Gly Gly Ser Arg Gln Glu Ile Met Lys Arg Met Ile Leu
                405                 410                 415
Phe Cys Lys Ala Ala Val Glu Val Pro Trp His Val Pro Cys Gly Gly
            420                 425                 430
Val Pro Tyr Gly Asp Gly Asn Leu Val Phe Ile Ala Asn Asp Trp His
        435                 440                 445
Thr Ala Leu Leu Pro Val Tyr Leu Lys Ala Tyr Tyr Arg Asp His Gly
    450                 455                 460
Leu Met Gln Tyr Thr Arg Ser Ile Met Val Ile His Asn Ile Ala His
465                 470                 475                 480
Gln Gly Arg Gly Pro Val Asp Glu Phe Pro Phe Thr Glu Leu Pro Glu
                485                 490                 495
His Tyr Leu Glu His Phe Arg Leu Tyr Asp Pro Val Gly Gly Glu His
            500                 505                 510
Ala Asn Tyr Phe Ala Ala Gly Leu Lys Met Ala Asp Gln Val Val Val
        515                 520                 525
Val Ser Pro Gly Tyr Leu Trp Glu Leu Lys Thr Val Glu Gly Gly Trp
    530                 535                 540
Gly Leu His Asp Ile Ile Arg Gln Asn Asp Trp Lys Thr Arg Gly Ile
545                 550                 555                 560
Val Asn Gly Ile Asp Asn Met Glu Trp Asn Pro Glu Val Asp Val His
                565                 570                 575
Leu Gln Ser Asp Gly Tyr Thr Asn Phe Ser Leu Ser Thr Leu Asp Ser
            580                 585                 590
Gly Lys Arg Gln Cys Lys Glu Ala Leu Gln Arg Glu Leu Gly Leu Gln
        595                 600                 605
Val Arg Ala Asp Val Pro Leu Leu Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp Gly
    610                 615                 620
Gln Lys Gly Val Glu Ile Ile Ala Asp Ala Met Pro Trp Ile Val Ser
625                 630                 635                 640
Gln Asp Val Gln Leu Val Met Leu Gly Thr Gly Arg His Asp Leu Glu
                645                 650                 655
Ser Met Leu Arg His Phe Glu Arg Glu His His Asp Lys Val Arg Gly
            660                 665                 670
Trp Val Gly Phe Ser Val Arg Leu Ala His Arg Ile Thr Ala Gly Ala
        675                 680                 685
Asp Ala Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln
    690                 695                 700
Leu Tyr Ala Met Ala Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Ala Val Gly
705                 710                 715                 720
Gly Leu Arg Asp Thr Val Pro Pro Phe Asp Pro Phe Asn His Ser Gly
                725                 730                 735
Leu Gly Trp Thr Phe Asp Arg Ala Glu Ala His Lys Leu Ile Glu Ala
            740                 745                 750
Leu Gly His Cys Leu Arg Thr Tyr Arg Asp Tyr Lys Glu Ser Trp Arg
        755                 760                 765
Gly Leu Gln Glu Arg Gly Met Ser Gln Asp Phe Ser Trp Glu His Ala
    770                 775                 780
Ala Lys Leu Tyr Glu Asp Val Leu Leu Lys Ala Lys Tyr Gln Trp
785                 790                 795
<210>3
<211>6811
<212>DNA
<213>小麦
<400>3
gggggccgtt cgtacgtacc cacccctcgt gtaaagccgc cgccgtcgtc gccgtccccc      60
gctcgcggcc atttcctcgg cctgaccccg tgcgtttacc ccacacagag cacactccag     120
tccagtccag cccactgccg cgctactccc cactcccact gccaccacct ccgcctgcgc     180
cgcgctctgg gcggaccaac ccgcgcatcg tatcacgatc acccaccccg atcccggccg     240
ccgccatgtc gtcggcggtc gcgtccgccg cgtccttcct cgcgctcgcg tccgcctccc     300
ccgggagatc acggaggagg acgagggtga gcgcgtcgcc accccacacc ggggctggca     360
ggttgcactg gccgccgtcg ccgccgcagc gcacggctcg cgacggagca gtggccgcgc     420
gcgccgccgg gaagaaggac gcggggatcg acgacgccgc gcccgcgagg cagccccgcg     480
cactccgcgg tggcgccgcc accaaggtag ttagttatga ccaagttatg acgcgtgcgc     540
gcgccttgag atcatcgtcg tctcgctgac aaattgttta tacaaaacgc acgcgcgcgc     600
gtgtgtgcag gttgcggagc ggagggatcc cgtcaagacg ctcgatcgcg acgccgcgga     660
aggtggcgcg ccgtccccgc cggcaccgag gcaggaggac gcccgtctgc cgagcatgaa     720
cggcatgccg gtgaacggtg aaaacaaatc taccggcggc ggcggcgcga ctaaagacag     780
cgggctgccc gcacccgcac gcgcgcccca gccgtcgagc cagaacagag taccggtgaa     840
tggtgaaaac aaagctaacg tcgcctcgcc gccgacgagc atagccgagg tcgcggctcc     900
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agatgatgcg ggctccttcg aacaccacca gaatcacgat tccgggcctt tggcagggga    1260
gaacgtcatg aacgtggtcg tcgtggctgc tgaatgttct ccctggtgca aaacaggcat    1320
ggacattacc tcttcagtgt cttttttctc tctgttcata aaacctggct tgaattactc    1380
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agtgttcttc tgttatagag tatttcatag ccaaccctgg aggttaggtt gttggggcct    1620
actgggtgtg ggagggggtt tgaaaaaagt gttggttagc agtcggattt cacaaagaac    1680
gctgataacc acgccatcag tgaagggaat gaatgtcggg tacccgatcg accgttttgc    1740
ccgacgtcag gtttacccgc cctgtaggtc cgaataagta gttcctatcc tcagttaagt    1800
accaaatatc ggcagcgccc gtgtgtgtat ttatagtact ggatgatcaa tttatcaaca    1860
ttttcagtta atggttgcta tcatattcac tgtaattgtt agtaaacagt ggatgtttgt    1920
aatgtagatg atggctaaat gtatgttgtc aagctttcat ttcaatgcaa tttttattgg    1980
gagctagttt tggggttcgg ttagagccac caaaacccca gaatttctgg gagttggctt    2040
gtgagagagg gttttggcga gttgactttc gggattcagt tagagacgct cttactagtt    2100
ccagtaaaga agtaaactat tttctgcaga catcccaatt attctgtaga aattagaagt    2160
agaaaatagt tatggtatca tataaccata tattattcaa aatctagaat catggacttg    2220
gctagacttt gatgatctga aattttaaat ttgatgataa ttgagaaatg atcctttcta    2280
tcttaggttg tggtaccaag gtatggggac tatgaggaag cctacgatgt cggagtccga    2340
aaatactaca aggctgctgg acaggtaagc gaaaatgcaa tcaaagggga gctgaaattt    2400
caatgcttac tatcataata aatcaatttt aagtgttttt ttttgtcctg caggatatgg    2460
aagtgaatta tttccatgct tatatcgatg gagttgattt tgtgttcatt gacgctcctc    2520
tcttccgaca ccgccaggaa gacatttatg ggggcagcag acaggttaat cttctatatg    2580
ttggtgtttg attgcactga taaactgaga acaagccaag gcctactgac cggcatatga    2640
ttacacattt tattttttca ggaaattatg aagcgcatga ttttgttctg caaggccgct    2700
gtcgaggtat cctctccaac tcaattgaca acctattaca actatacaat tatgtgtatg    2760
catgtatttc aacagatacg taatctcttg tgaagtgcat atatactaac aacatttcaa    2820
taccttacat gcacatttgg tcaagcgtta tgatttaact tctaataatc tattgcactg    2880
atgaacaatt atcttgatga tccttggtac ttcatcgtta tgtttccatg ttctcttcac    2940
cgattgattt ggaaatagca tttccacctg ccacaaacaa taatatacac tcctactttc    3000
atccaatgta gatattttcg cacttggcat atcatcccat taaatattat tggtccatca    3060
tttttattcc tctataattt gcaggttcca tggcacgttc catgcggcgg tgtcccttat    3120
ggggatggaa atctggtgtt tattgcaaat gattggcaca cggcactcct gcctgtctat    3180
ctgaaagcat attacaggga ccatggtttg atgcagtaca ctcggtccat tatggtgata    3240
cataacatcg ctcaccaggt tccttttctc caaatcttga tttttctcta gtctctacta    3300
tttactccac attgtttgag gaaactaaac gggttgcaaa attatgatgg cttatgaaag    3360
ttatagtctt atataggtaa atgcaccagt ggtgcttgca cttgtcacgc gtgttcactt    3420
tggtgcttac agttgtagac aataaaaaac tagtgcaaaa acttggctgt tgtgtgcaat    3480
acggtgcatt ttccgtatgt aggagtcaaa tattgcctgt gtggcattgt attcccgtct    3540
atagctgtta gaccatgcct acgtcgccat tgggcccaca caccctctat tacatgtggg    3600
ccccacttgt cagcctatga cataaataaa tggaaattta taatgaaaat gatggcctgg    3660
ggtcttgaaa atgggccgtc gcaggtatgc tggtagccag catgccctaa tcattaatcc    3720
ccctatgcac ttcatgtctt gtgtatgtgt gtgtgggaaa gggggggggt atgtatgctt    3780
atgcttatat cctttgctcc aaggctgcca tcctcaacaa gcccacctcc agcttcaaca    3840
cggccagcgc cttcatgatg gcccaggtgc tccgcaccat cgatcgaagc ggcaacgtcg    3900
tcgtcacgac catccaccaa cccaacgcac aaaatcctca ggctccgttc ggtacggagg    3960
aagagaaaat gcaggaaaaa acaacttcat gggaacaagg tttggtgaac agtaaaaaca    4020
tgtggaatct gaaaatgtag gtaccagaaa aaccggcctg ttcggtttgc aggaaaaagc    4080
atacttgcag cagcactgtt tggccctttc cagtgtaagg ctaaccatag tgggagtaac    4140
ataactaata ttatgtactt ggaactcaca aacatgctta tgtggcaggc aattaaagaa    4200
gagagagaga gtcatagtaa catagttaga taccgtatca taataaatat tatgttacta    4260
tgtgtcatgc atgacaataa atgagaccat ctgtgatact acgttatgat attatgcact    4320
atagatgtag tatcatacac tagtatcata tgcatgatac tagtgtatgt tactccccac    4380
tatgaccagc ctaacgaggg gatgggcatc agtagtgatt accagttttt attatttttt    4440
attcggctgg acgccctact cttgtggtgc gtagcggaaa aaggcagtgc tagcttcggg    4500
actccgcgag cacatgaggt tctaccggat tttagatttc ctataaaaag tacaggctca    4560
cgcaactttt caatggaaca gaccatcaag attcctttga accgaacgca ctgcatgcaa    4620
gaattccaat gaaaaacgag ccgtcaaatg ttcctgcgaa tttcctctat accgaacaga    4680
ccctcaacat cctcaaatag tgagcatgcc cctcttgtcc tttccccctc gtacccaaac    4740
gccatttggc gctcttggtg ttggatcatt tgcctcgggc atttgccaat ttggcgccga    4800
accatattaa agctatgact acttggtgtt ggatcaggga cgcaaagaat cccataaata    4860
ttgcaacgtt cattcaaatt cttaacattt gcgaggcgct tcatgatttc catctccgtc    4920
aggtctgaga catttggtcg tgtacactaa atttctcagg tcacttctcg tctaaatccg    4980
catatgtagc tcacttcaat gacttgcctt tggtctagct aacgccattt ggcgctcttg    5040
ggcccccttg cttagcaaat ttttcatatg gctcgcactg cgcaagagga tttagatcac    5100
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atcaaatgtg atgtattcta ctggtacaag gccggggcta tttgctttga gtcacttttt    5460
agctaaggcc gcttgggcta agcgcttggg gtcgtttttg ctcaactgta gcctgaactt    5520
tctggacttt gtaatttttt ttatcctcta taatgatcac atacagctct cctgcatggt    5580
tcgaaaagga aaaatgtgaa catgtgtggc aagtttaagc acaacccgtg catttacctc    5640
aaagttatac aacactgaca tgctgaatta catttttttt gaggatctga catgccgaat    5700
tacatgcttt ggacagttat tcatttcttc ggtacaccat tggctaatta tttctcttga    5760
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cggcaccgtc cccgtcgtgc atgccgtcgg cggcctgagg gacaccgtgc cgccgttcga    6600
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ccaggagcgc ggcatgtcgc aggacttcag ctgggagcat gccgccaagc tctacgagga    6780
cgtcctcgtc aaggccaagt accagtggtg a                                   6811
<210>4
<211>798
<212>PRT
<213>小麦
<400>4
Met Ser Ser Ala Val Ala Ser Ala Ala Ser Phe Leu Ala Leu Ala Ser
1               5                   10                  15
Ala Ser Pro Gly Arg Ser Arg Arg Arg Thr Arg Val Ser Ala Ser Pro
            20                  25                  30
Pro His Thr Gly Ala Gly Arg Leu His Trp Pro Pro Ser Pro Pro Gln
        35                  40                  45
Arg Thr Ala Arg Asp Gly Ala Val Ala Ala Arg Ala Ala Gly Lys Lys
    50                  55                  60
Asp Ala Gly Ile Asp Asp Ala Ala Pro Ala Arg Gln Pro Arg Ala Leu
65                  70                  75                  80
Arg Gly Gly Ala Ala Thr Lys Val Ala Glu Arg Arg Asp Pro Val Lys
                85                  90                  95
Thr Leu Asp Arg Asp Ala Ala Glu Gly Gly Ala Pro Ser Pro Pro Ala
            100                 105                 110
Pro Arg Gln Glu Asp Ala Arg Leu Pro Ser Met Asn Gly Met Pro Val
        115                 120                 125
Asn Gly Glu Asn Lys Ser Thr Gly Gly Gly Gly Ala Thr Lys Asp Ser
    130                 135                 140
Gly Leu Pro Ala Pro Ala Arg Ala Pro Gln Pro Ser Ser Gln Asn Arg
145                 150                 155                 160
Val Pro Val Asn Gly Glu Asn Lys Ala Asn Val Ala Ser Pro Pro Thr
                165                 170                 175
Ser Ile Ala Glu Val Ala Ala Pro Asp Pro Ala Ala Thr Ile Ser Ile
            180                 185                 190
Ser Asp Lys Ala Pro Glu Ser Val Val Pro Ala Glu Lys Ala Pro Pro
        195                 200                 205
Ser Ser Gly Ser Asn Phe Val Pro Ser Ala Ser Ala Pro Gly Ser Asp
    210                 215                 220
Thr Val Ser Asp Val Glu Leu Glu Leu Lys Lys Gly Ala Val Ile Val
225                 230                 235                 240
Lys Glu Ala Pro Asn Pro Lys Ala Leu Ser Pro Pro Ala Ala Pro Ala
                245                 250                 255
Val Gln Gln Asp Leu Trp Asp Phe Lys Lys Tyr Ile Gly Phe Glu Glu
            260                 265                 270
Pro Val Glu Ala Lys Asp Asp Gly Arg Ala Val Ala Asp Asp Ala Gly
        275                 280                 285
Ser Phe Glu His His Gln Asn His Asp Ser Gly Pro Leu Ala Gly Glu
    290                 295                 300
Asn Val Met Asn Val Val Val Val Ala Ala Glu Cys Ser Pro Trp Cys
305                 310                 315                 320
Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp Val Ala Gly Ala Leu Pro Lys Ala Leu
                325                 330                 335
Ala Lys Arg Gly His Arg Val Met Val Val Val Pro Arg Tyr Gly Asp
            340                 345                 350
Tyr Glu Glu Ala Tyr Asp Val Gly Val Arg Lys Tyr Tyr Lys Ala Ala
        355                 360                 365
Gly Gln Asp Met Glu Val Asn Tyr Phe His Ala Tyr Ile Asp Gly Val
    370                 375                 380
Asp Phe Val Phe Ile Asp Ala Pro Leu Phe Arg His Arg Gln Glu Asp
385                390                  395                 400
Ile Tyr Gly Gly Ser Arg Gln Glu Ile Met Lys Arg Met Ile Leu Phe
                405                 410                 415
Cys Lys Ala Ala Val Glu Val Pro Trp His Val Pro Cys Gly Gly Val
            420                 425                 430
Pro Tyr Gly Asp Gly Asn Leu Val Phe Ile Ala Asn Asp Trp His Thr
        435                 440                 445
Ala Leu Leu Pro Val Tyr Leu Lys Ala Tyr Tyr Arg Asp His Gly Leu
    450                 455                 460
Met Gln Tyr Thr Arg Ser Ile Met Val Ile His Ash Ile Ala His Gln
465                 470                 475                 480
Gly Arg Gly Pro Val Asp Glu Phe Pro Phe Thr Glu Leu Pro Glu His
                485                 490                 495
Tyr Leu Glu His Phe Arg Leu Tyr Asp Pro Val Gly Gly Glu His Ala
            500                 505                 510
Asn Tyr Phe Ala Ala Gly Leu Lys Met Ala Asp Gln Val Val Val Val
        515                 520                 525
Ser Pro Gly Tyr Leu Trp Glu Leu Lys Thr Val Glu Gly Gly Trp Gly
    530                 535                 540
Leu His Asp Ile Ile Arg Gln Asn Asp Trp Lys Thr Arg Gly Ile Val
545                 550                 555                 560
Asn Gly Ile Asp Asn Met Glu Trp Asn Pro Glu Val Asp Val His Leu
                565                 570                 575
Lys Ser Asp Gly Tyr Thr Asn Phe Ser Leu Gly Thr Leu Asp Ser Gly
            580                 585                 590
Lys Arg Gln Cys Lys Glu Ala Leu Gln Arg Glu Leu Gly Leu Gln Val
        595                 600                 605
Arg Gly Asp Val Pro Leu Leu Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp Gly Gln
    610                 615                 620
Lys Gly Val Glu Ile Ile Ala Asp Ala Met Pro Trp Ile Val Ser Gln
625                 630                 635                 640
Asp Val Gln Leu Val Met Leu Gly Thr Gly Arg His Asp Leu Glu Gly
                645                 650                 655
Met Leu Arg His Phe Glu Arg Glu His His Asp Lys Val Arg Gly Trp
            660                 665                 670
Val Gly Phe Ser Val Arg Leu Ala His Arg Ile Thr Ala Gly Ala Asp
        675                 680                 685
Ala Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu
    690                 695                 700
Tyr Ala Met Ala Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Ala Val Gly Gly
705                 710                 715                 720
Leu Arg Asp Thr Val Pro Pro Phe Asp Pro Phe Asn His Ser Gly Leu
                725                 730                 735
Gly Trp Thr Phe Asp Arg Ala Glu Ala Gln Lys Leu Ile Glu Ala Leu
            740                 745                 750
Gly His Cys Leu Arg Thr Tyr Arg Asp Tyr Lys Glu Ser Trp Arg Gly
        755                 760                 765
Leu Gln Glu Arg Gly Met Ser Gln Asp Phe Ser Trp Glu His Ala Ala
    770                 775                 780
Lys Leu Tyr Glu Asp Val Leu Val Lys Ala Lys Tyr Gln Trp
785                 790                 795
<210>5
<211>7010
<212>DNA
<213>小麦
<400>5
gggggccgtt cgtacgtacc cgcccctcgt gtaaagccgc cgccgtcgtc gccgtccccc     60
gctcgcggcc atttcttcgg cctgaccccg ttcgtttacc cccacacaga gcacactcca    120
gtccagtcca gcccactgcc accgcgctac tctccactcc cactgccacc acctccgcct    180
gcgccgcgct ctgggcggac caacccgcga accgtaccat ctcccgcccc gatccatgtc    240
gtcggcggtc gcgtccgccg catccttcct cgcgctcgcg tcagcctccc ccgggagatc     300
acgcaggcgg gcgagggtga gcgcgcagcc accccacgcc ggggccggca ggttgcactg     360
gccgccgtgg ccgccgcagc gcacggctcg cgacggagct gtggcggcgc tcgccgccgg     420
gaagaaggac gcggggatcg acgacgccgc cgcgtccgtg aggcagcccc gcgcactccg     480
cggtggcgcc gccaccaagg tagttagtta tgaccaagtt atgacgcgtg cgcgcgcctc     540
gagatcatcg tcgtctcgct cacgaattgt ttatttatac aaaacgcacg cccgcgtgtg     600
caggtcgcgg agcgaaggga tcccgtcaag acgctcgacc gcgacgccgc ggaaggcggc     660
gggccgtccc cgccggcagc gaggcaggac gccgcccgtc cgccgagtat gaacggcatg     720
ccggtgaacg gcgagaacaa atctaccggc ggcggcggcg cgactaaaga cagcgggctg     780
cccacgcccg cacgcgcgcc ccatccgtcg acccagaaca gagcaccggt gaacggtgaa     840
aacaaagcta acgtcgcctc gccgccgacg agcatagccg aggccgcggc ttcggattcc     900
gcagctacca tttccatcag cgacaaggcg ccggagtccg ttgtcccagc tgagaagacg     960
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agcgacgtgg aacaagaact gaagaagggt gcggtcgttg tcgaagaagc tccaaagcca    1080
aaggctcttt cgccgcctgc agcccccgct gtacaagaag acctttggga tttcaagaaa    1140
tacattggtt tcgaggagcc cgtggaggcc aaggatgatg gccgggctgt cgcagatgat    1200
gcgggctcct ttgaacacca ccagaatcac gactccggac ctttggcagg ggagaatgtc    1260
atgaacgtgg tcgtcgtggc tgctgagtgt tctccctggt gcaaaacagg catggacatt    1320
acctcttcag tctctcttcc tgttgttcat aaaactttgc tcgaattact cataagaaca    1380
aacattgtgt tgcataggtg gtctgggaga tgttgcgggt gctctgccca aggctttggc    1440
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ggttgctgag gcctactggg tgggggaggg ggtttgaaac aagtggtggt tagcagccag    1740
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cgatcgaccg ttttgcccaa cgtcgggttt acccgcccta tagatccgaa taagtagttc    1860
ctatcttcaa ttaggtacca aatatcgcca gcgcccgtgt gtgtatttat actactggat    1920
gatcaattta tcaacatttc cggttaatgg tttctatcat attcactgta attgttagta    1980
aacagtagat gtttgtaatg tagatgatgg ataaatgtat gttgtcgagc tttcatttca    2040
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ttttgggagt tggcttgtga gagagggttt tggggagtta actttcggga ttcagttaga    2160
gacgctctta ctagttccag taaagagtaa actattttct gcaggcatcc caattattct    2220
gtagaaatta gaagtggaaa atagttatgg tatcatataa accatatatt attcaaaatc    2280
tagaatcatg gacttggcta gactttgata atctgaaatt ttaaatttga tgataattga    2340
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gttaatcttc tatatgttgg tgtttgattg cactgataaa ctgagaacaa gccaaggcct    2700
actgactggc atatgattac acattttatt ttttcaggaa attatgaagc gcatgatttt    2760
gttctgcaag gccgctgttg aggtatctct ccaactcaat tgacaaccta ttaccactat    2820
acaattatgt gtatgcatgt atttcaacag atacataatc tcttgtgaag tgcatatata    2880
ctaataacat ttcaatacct tacatgcaca tttggtcaag cgttatgatt taacttctga    2940
taatctattg cactgatgaa caattatctt gatgatcctt gttacttcat cgttatgttt    3000
ccatgttctc ttcaccgcga attgatttgg aaatagcatt tccacctgcc acaaacaata    3060
atatacactc ctactttcat ccaatttaga tattttcgta cttggcatat catcccatta    3120
aatattattg gtccatcatt tttattcctc tataatttgc aggttccatg gcacgttcca    3180
tgcggcggtg tcccttatgg ggatggaaat ctggtgttta ttgcaaatga ttggcacacg    3240
gcactcctgc ctgtctatct gaaagcatat tacagggacc atggtttgat gcagtacact    3300
cggtccatta tggtgataca taacatcgct caccaggttc cttttctcct aatcttgatt    3360
tttctctagt ctctactatt tactccacat tgtttgagga aactaaacgg gttgcaaaat    3420
tatgatggct tatgaaagtt atagtcttat agaggtaaat gcaccagtgg tgcttgaact    3480
tgtcacgcgt gttcactttg gtgcttacag ttgtagacta tgaaaaacgg gtgcaaaaac    3540
ttgctgttgt gtgccatacg gtgcattttc cgtatgtagg agtcaaacgt tgcctatgtg    3600
ggcattgtat tcccgtctat agctgttaga ccgtgcctac gtcgccattg ggcccacaca    3660
ctctctattt acatgtgggc cccacttgtc aacctatgac ataaataaat ggaaatttat    3720
aataaaaatg atggcctggg gtcttgaaaa tgggacctcg caggtatgct ggtagccagc    3780
acgccctaaa cattaatccc ctatgcactt catgtcttgt gtatgtgtgt gtctgtgtgg    3840
ggaggggggg ggtatgtatg cttatatcct ttgctccaag gctaccatcc tcaacaagcc    3900
cacctccgct tcaacacggc cagcgccttc atgatggccc aggtgctccg caccatcgct    3960
caaagcggca acgtcgttgt catgaccatc caccaaccca acacacaaaa tcctcaacat    4020
ccgcaaatag tgagcatgcc cctcttgtcc tttcccctcg tacccaaaca tgtcttgata    4080
acccttggag ctgcacaagt tgtgaccatc gcctgcgtcg cctcatagag cccgacctag    4140
ccggaccgtt atagaagcct acttgggagc ccatacctcc ctgcacatcc tcctctttcc    4200
ccatagatcg tgccgccatc gcaaaccaac ttctcctctc cttctcccac tctggccgtt    4260
tcccccgccg cgaagctgca atacatgccg agttggccat ggccctattc cccaattgct    4320
cgcactagga ggtcctcctc taagcctagc accttttccc ctcaccaatt gcaagttggg    4380
gagcccctcg cgagctccct acgtcggctg cagttgcctg ccgcctcaac tctgatccag    4440
acctcgttcc cgtggcctcg gcgacatctc ctcgacctcc cattccacac gtggcctggc    4500
gaggatcacc gcatgttcat ccatgtgaac cgaatcatca tagaactaac accggagagg    4560
tcatcccgac ggcgtcgcac tgttcctcta ttccccccaa gccgtgtcgc gtcataatat    4620
aagacggact tatttgtatc ccttgggtca tcggttcaat ggctatttct ttctcctgtc    4680
tactgataag tgggacccac acgccacact aagccctttc tttctcctac ccgttgataa    4740
gtgggaccca cacacagtac ttagccagag agagaacatg agcttgttgg tgccacgtcg    4800
gcaagccatg tcagcagtct taacggctac aaacaacgga tatggtgtca cgtgagcgtt    4860
tacgaatgga aagtgcatca tactgcatgc gagagccaga gccaggtttt tgcaccagtt    4920
ttctgtattt tacaactgcg agcatcaaag tgtacatatg ccgaaccaaa gtgaacatgg    4980
tgagtccatt cttttctggt gcggtgggtg gctcaaagac accccaatag aagctattgc    5040
ctccgacatt gccaattcgg tgccgaacca tattgaagtg gtgaggtcag ttgcttgtgc    5100
tatgactact aggtattgga tgagggacat aaaggatctc ataaatattg caatgttcat    5160
tcaaattctt aacatttgcg aagcgcttca tgatttccat ctcccctaga tcagagacac    5220
ttggtcgtgt acactgaatt tctcaggtcg cttctcgtct aaatccgcat atgtagctca    5280
cttcaatgac ttgcctttgg tccagctaac gccatttgcg tagcaaattt ttcatatggc    5340
tcgctctgcg caagaggatt tggatcacgg gcagacgcgc tagacaaggt cttccgcaca    5400
atgaacattg agttttttga tccgctcttc ccgaagacac ttgtgatctt attacgagtt    5460
gtgccatttc aaacatctgt ctctccatgg tcgccccagc catagatgcc ttgttctctg    5520
aatggtgggt ttcagctagg aacagggtgc caccttcgga caagaagttg cgtagtttgg    5580
tcgtcttaac tgcttggttg atttggaagg aacacaacaa cagtctttga aggcaaagct    5640
aattccttcg atcaagttat tagacggatc aagtgtgatg aatcctactg gtacaatgcc    5700
gttgctagtt gcttggagtc actatttggc taggtcgctt gccatcccgc tctgtgctaa    5760
gcgcttgggg tcgcttttgc tcaatttgta ttttgttgtt atgtgttttt agtaatgtaa    5820
cctgaacttt ctggactaag tagaaaaaaa ttctcctcca taatgatcac atacagttct    5880
cctgcatggt tcgaaaaaaa aatgagaaca tccgtggcaa gtttaagcac caccggtgca    5940
tttttacctc aaagttatat acaacactga catgccgaat tacatgcttt ggtcagttat    6000
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ccgccaagct ctacgaggac gtcctcgtca aggccaagta ccagtggtga               7010
<210>6
<211>799
<212>PRT
<213>小麦
<400>6
Met Ser Ser Ala Val Ala Ser Ala Ala Ser Phe Leu Ala Leu Ala Ser
1               5                   10                  15
Ala Ser Pro Gly Arg Ser Arg Arg Arg Ala Arg Val Ser Ala Gln Pro
            20                  25                  30
Pro His Ala Gly Ala Gly Arg Leu His Trp Pro Pro Trp Pro Pro Gln
        35                  40                  45
Arg Thr Ala Arg Asp Gly Ala Val Ala Ala Leu Ala Ala Gly Lys Lys
    50                  55                  60
Asp Ala Gly Ile Asp Asp Ala Ala Ala Ser Val Arg Gln Pro Arg Ala
65                  70                  75                  80
Leu Arg Gly Gly Ala Ala Thr Lys Val Ala Glu Arg Arg Asp Pro Val
                85                  90                  95
Lys Thr Leu Asp Arg Asp Ala Ala Glu Gly Gly Gly Pro Ser Pro Pro
            100                 105                 110
Ala Ala Arg Gln Asp Ala Ala Arg Pro Pro Ser Met Asn Gly Met Pro
        115                 120                 125
Val Asn Gly Glu Asn Lys Ser Thr Gly Gly Gly Gly Ala Thr Lys Asp
    130                 135                 140
Ser Gly Leu Pro Thr Pro Ala Arg Ala Pro His Pro Ser Thr Gln Asn
145                 150                 155                 160
Arg Ala Pro Val Asn Gly Glu Asn Lys Ala Asn Val Ala Ser Pro Pro
                165                 170                 175
Thr Ser Ile Ala Glu Ala Ala Ala Ser Asp Ser Ala Ala Thr Ile Ser
            180                 185                 190
Ile Ser Asp Lys Ala Pro Glu Ser Val Val Pro Ala Glu Lys Thr Pro
        195                 200                 205
Pro Ser Ser Gly Ser Asn Phe Glu Ser Ser Ala Ser Ala Pro Gly Ser
    210                 215                 220
Asp Thr Val Ser Asp Val Glu Gln Glu Leu Lys Lys Gly Ala Val Val
225                 230                 235                 240
Val Glu Glu Ala Pro Lys Pro Lys Ala Leu Ser Pro Pro Ala Ala Pro
                245                 250                 255
Ala Val Gln Glu Asp Leu Trp Asp Phe Lys Lys Tyr Ile Gly Phe Glu
            260                 265                 270
Glu Pro Val Glu Ala Lys Asp Asp Gly Arg Ala Val Ala Asp Asp Ala
        275                 280                 285
Gly Ser Phe Glu His His Gln Asn His Asp Ser Gly Pro Leu Ala Gly
    290                 295                 300
Glu Asn Val Met Asn Val Val Val Val Ala Ala Glu Cys Ser Pro Trp
305                 310                 315                 320
Cys Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp Val Ala Gly Ala Leu Pro Lys Ala
                325                 330                 335
Leu Ala Lys Arg Gly His Arg Val Met Val Val Val Pro Arg Tyr Gly
            340                 345                 350
Asp Tyr Glu Glu Ala Tyr Asp Val Gly Val Arg Lys Tyr Tyr Lys Ala
        355                 360                 365
Ala Gly Gln Asp Met Glu Val Asn Tyr Phe His Ala Tyr Ile Asp Gly
    370                 375                 380
Val Asp Phe Val Phe Ile Asp Ala Pro Leu Phe Arg His Arg Gln Glu
385                 390                 395                 400
Asp Ile Tyr Gly Gly Ser Arg Gln Glu Ile Met Lys Arg Met Ile Leu
                405                 410                 415
Phe Cys Lys Ala Ala Val Glu Val Pro Trp His Val Pro Cys Gly Gly
           420                  425                 430
Val Pro Tyr Gly Asp Gly Asn Leu Val Phe Ile Ala Asn Asp Trp His
        435                 440                 445
Thr Ala Leu Leu Pro Val Tyr Leu Lys Ala Tyr Tyr Arg Asp His Gly
    450                 455                 460
Leu Met Gln Tyr Thr Arg Ser Ile Met Val Ile His Asn Ile Ala His
465                 470                 475                 480
Gln Gly Arg Gly Pro Val Asp Glu Phe Pro Phe Thr Glu Leu Pro Glu
                485                 490                 495
His Tyr Leu Glu His Phe Arg Leu Tyr Asp Pro Val Gly Gly Glu His
            500                 505                 510
Ala Asn Tyr Phe Ala Ala Gly Leu Lys Met Ala Asp Gln Val Val Val
        515                 520                 525
Val Ser Pro Gly Tyr Leu Trp Glu Leu Lys Thr Val Glu Gly Gly Trp
    530                 535                 540
Gly Leu His Asp Ile Ile Arg Gln Asn Asp Trp Lys Thr Arg Gly Ile
545                 550                 555                 560
Val Asn Gly Ile Asp Asn Met Glu Trp Asn Pro Glu Val Asp Ala His
                565                 570                 575
Leu Lys Ser Asp Gly Tyr Thr Asn Phe Ser Leu Arg Thr Leu Asp Ser
            580                 585                 590
Gly Lys Arg Gln Cys Lys Glu Ala Leu Gln Arg Glu Leu Gly Leu Gln
        595                 600                 605
Val Arg Ala Asp Val Pro Leu Leu Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp Gly
    610                 615                 620
Gln Lys Gly Val Glu Ile Ile Ala Asp Ala Met Pro Trp Ile Val Ser
625                 630                 635                 640
Gln Asp Val Gln Leu Val Met Leu Gly Thr Gly Arg His Asp Leu Glu
                645                 650                 655
Ser Met Leu Gln His Phe Glu Arg Glu His His Asp Lys Val Arg Gly
            660                 665                 670
Trp Val Gly Phe Ser Val Arg Leu Ala His Arg Ile Thr Ala Gly Ala
        675                 680                 685
Asp Ala Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln
    690                 695                 700
Leu Tyr Ala Met Ala Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Ala Val Gly
705                 710                 715                 720
Gly Leu Arg Asp Thr Val Pro Pro Phe Asp Pro Phe Asn His Ser Gly
                725                 730                 735
Leu Gly Trp Thr Phe Asp Arg Ala Glu Ala His Lys Leu Ile Glu Ala
            740                 745                 750
Leu Gly His Cys Leu Arg Thr Tyr Arg Asp Phe Lys Glu Ser Trp Arg
        755                 760                 765
Ala Leu Gln Glu Arg Gly Met Ser Gln Asp Phe Ser Trp Glu His Ala
    770                 775                 780
Ala Lys Leu Tyr Glu Asp Val Leu Val Lys Ala Lys Tyr Gln Trp
785                 790                 795
<210>7
<211>2805
<212>DNA
<213>小麦
<400>7
cctgcgcgcg ccatggcggc tctggtcacg tcccagctcg ccacctccgg caccgtcctc     60
agcgtcaccg acagattccg gcgtccaggt tttcagggcc tgaggccccg gaacccggcg    120
gatgcggcgc tcggcatgag gactgtcgga gcgagcgccg ccccaaagca aagcaggaaa    180
ccgcaccgat tcgaccggcg gtgcctctcc atggtggtgc gcgccacggg cagcggcggc    240
0
atgaacctcg tgttcgtcgg cgccgagatg gcgccctgga gcaagactgg cggcctcggc    300
gacgtcctcg ggggcctccc cgccgccatg gccgtaagct tgcgccactg ccttcttata    360
aatgtttctt cctgcagcca tgcctgccgt tacaacgggt gccgtgtccg tgcaggccaa    420
cggtcaccgg gtcatggtca tctccccgcg ctacgaccag tacaaggacg cctgggacac    480
cagcgtcatc tccgaggtat atatccgcca catgaattat cacaattcac atgctcctgc     540
acatttctgc aagactttac tgactggctg gatctcgcag atcaaggtcg ttgacaggta     600
cgagagggtg aggtacttcc actgctacaa gcgcggggtg gaccgcgtgt tcgtcgacca     660
cccgtgcttc ctggagaagg tgaccgatcg ctcgccgtcg atcgatcaag ctagctcctc     720
gtcgtctcaa cccgcatggt gtttgataat ttcagtgagt ctttgcgtct gctggttaca     780
atttccaggt ccggggcaag accaaggaga agatctatgg acccgacgcc ggcaccgact     840
acgaggacaa ccagcagcgc ttcagccttc tctgccaggc agcacttgag gtgcccagga     900
tcctcgacct caacaacaac ccacactttt ctggacccta cggtaagatc aagaacaact     960
agagtgtatc tgaagaactt gatttctact tgagagcact ggatgattat catcttcctt    1020
gtatcttggt gctgccatgc tatgccgtgc cgtgccgcgc cgcgcagggg aagacgtggt    1080
gtttgtgtgc aacgactggc acacgggcct tctggcctgc tacctcaaga gcaactacca    1140
gtccaatggc atctatagga cggccaaggt tttgcatctt ctgaaacttt atattcgctc    1200
tgcatatcaa ttttgcggtt cattctggca gcctgaattt tacattgcaa ctccatttca    1260
tggctaggtg gcattctgca tccacaacat ctcgtaccag ggccgcttct ccttcgacga    1320
cttcgcgcag ctcaacctgc ctgacaggtt caagtcgtcc ttcgacttca tcgacggcta    1380
cgacaagccg gtggaggggc gcaagatcaa ctggatgaag gccgggatcc tgcaggccga    1440
caaggtgctg actgtgagcc cctactatgc tgaggagcta atctctggcg aagccagggg    1500
ctgcgagctc gacaacatca tgcgcctcac tgggatcacc ggcatcgtca acggcatgga    1560
cgtcagcgag tgggacccca tcaaggacaa gttcctcacc gtcaactacg acgtcaccac    1620
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tctgagttct gacaaacgag gcaaagtgac aggcgttgga ggggaaggcg ctgaacaagg    1740
aggcgctgca ggccgaggtg gggctgccgg tggaccggaa ggtgcccctg gtggcgttca    1800
tcggcaggct ggaggagcag aagggccccg acgtgatgat cgccgccatc ccggagatcg    1860
tgaaggagga ggacgtccag atcgttctcc tggtacgatc gaccgacatt gctgacccgt    1920
tcaggaaaat ctcctgatag ctcgccgtgg ggatgggtgg gtgactgact gatcgaatgc    1980
attgcagggc accgggaaga agaagtttga gcggctgctc aagagcgtgg aggagaagtt    2040
cccgaccaag gtgtgggccg tggtcaggtt caacgcgccg ctggctcacc agatgatggc    2100
cggcgccgac gtgctggcgg tcaccagccg cttcgagccc tgcggcctca tccagctcca    2160
gggaatgcgc tacggaacgg taaacgcatc ctccttcagt ccttcttgcc agttcctcac    2220
ctcctttgca tatccatggc catgaccgaa gtttctttca aattttcagc cgtgcgcctg    2280
cgcgtcgaca ggcgggctcg tcgacactat cgtggaaggc aagaccgggt tccacatggg    2340
ccgcctcagc gttgacgtat gctcatcgat cctcttgtat acattcattc atcttgttca    2400
tcatggcagc tcagacagat catgaagtgg tgcacttttc ttgttggtgg ccagtgcaac    2460
gtggtggagc cggccgacgt gaagaaggtg gtcaccaccc tgaagcgcgc cgtcaaggtc    2520
gtcggcacgc cggcgtacca tgagatggtc aagaactgca tgatacagga tctctcctgg    2580
aaggtaagtc gtctctggtt cagtatgcac ttcctggaac aactaagagt gaagggccga    2640
tgtatccatt aatggtggct tgcgcatatg atgcaggggc ctgccaagaa ctgggaggac    2700
gtgcttctgg aactgggggt ggaggggagc gagccgggca tcgtcggcga ggagatcgcg    2760
ccgctcgccc tggagaacgt cgccgctccc tgaagagaga aagaa    2805
<210>8
<211>604
<212>PRT
<213>小麦
<400>8
Met Ala Ala Leu Val Thr Ser Gln Leu Ala Thr Ser Gly Thr Val Leu
1               5                   10                  15
Ser Val Thr Asp Arg Phe Arg Arg Pro Gly Phe Gln Gly Leu Arg Pro
            20                  25                  30
Arg Asn Pro Ala Asp Ala Ala Leu Gly Met Arg Thr Val Gly Ala Ser
        35                  40                  45
Ala Ala Pro Lys Gln Ser Arg Lys Pro His Arg Phe Asp Arg Arg Cys
    50                  55                  60
Leu Ser Met Val Val Arg Ala Thr Gly Ser Gly Gly Met Asn Leu Val
65                  70                  75                  80
Phe Val Gly Ala Glu Met Ala Pro Trp Ser Lys Thr Gly Gly Leu Gly
                85                  90                  95
Asp Val Leu Gly Gly Leu Pro Ala Ala Met Ala Ala Asn Gly His Arg
            100                 105                 110
Val Met Val Ile Ser Pro Arg Tyr Asp Gln Tyr Lys Asp Ala Trp Asp
        115                 120                 125
Thr Ser Val Ile Ser Glu Ile Lys Val Val Asp Arg Tyr Glu Arg Val
    130                 135                 140
Arg Tyr Phe His Cys Tyr Lys Arg Gly Val Asp Arg Val Phe Val Asp
145                 150                 155                 160
His Pro Cys Phe Leu Glu Lys Val Arg Gly Lys Thr Lys Glu Lys Ile
                165                 170                 175
Tyr Gly Pro Asp Ala Gly Thr Asp Tyr Glu Asp Asn Gln Gln Arg Phe
            180                 185                 190
Ser Leu Leu Cys Gln Ala Ala Leu Glu Val Pro Arg Ile Leu Asp Leu
        195                 200                 205
Asn Asn Asn Pro His Phe Ser Gly Pro Tyr Gly Glu Asp Val Val Phe
    210                 215                 220
Val Cys Asn Asp Trp His Thr Gly Leu Leu Ala Cys Tyr Leu Lys Ser
225                 230                 235                 240
Asn Tyr Gln Ser Asn Gly Ile Tyr Arg Thr Ala Lys Val Ala Phe Cys
                245                 250                 255
Ile His Asn Ile Ser Tyr Gln Gly Arg Phe Ser Phe Asp Asp Phe Ala
            260                 265                 270
Gln Leu Asn Leu Pro Asp Arg Phe Lys Ser Ser Phe Asp Phe Ile Asp
        275                 280                 285
Gly Tyr Asp Lys Pro Val Glu Gly Arg Lys Ile Asn Trp Met Lys Ala
    290                 295                 300
Gly Ile Leu Gln Ala Asp Lys Val Leu Thr Val Ser Pro Tyr Tyr Ala
305                 310                 315                 320
Glu Glu Leu Ile Ser Gly Glu Ala Arg Gly Cys Glu Leu Asp Asn Ile
                325                 330                 335
Met Arg Leu Thr Gly Ile Thr Gly Ile Val Asn Gly Met Asp Val Ser
            340                 345                 350
Glu Trp Asp Pro Ile Lys Asp Lys Phe Leu Thr Val Asn Tyr Asp Val
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Thr Thr Ala Leu Glu Gly Lys Ala Leu Asn Lys Glu Ala Leu Gln Ala
    370                 375                 380
Glu Val Gly Leu Pro Val Asp Arg Lys Val Pro Leu Val Ala Phe Ile
385                 390                 395                 400
Gly Arg Leu Glu Glu Gln Lys Gly Pro Asp Val Met Ile Ala Ala Ile
                405                 410                 415
Pro Glu Ile Val Lys Glu Glu Asp Val Gln Ile Val Leu Leu Gly Thr
            420                 425                 430
Gly Lys Lys Lys Phe Glu Arg Leu Leu Lys Ser Val Glu Glu Lys Phe
        435                 440                 445
Pro Thr Lys Val Trp Ala Val Val Arg Phe Asn Ala Pro Leu Ala His
    450                 455                 460
Gln Met Met Ala Gly Ala Asp Val Leu Ala Val Thr Ser Arg Phe Glu
465                 470                 475                 480
Pro Cys Gly Leu Ile Gln Leu Gln Gly Met Arg Tyr Gly Thr Pro Cys
                485                 490                 495
Ala Cys Ala Ser Thr Gly Gly Leu Val Asp Thr Ile Val Glu Gly Lys
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Thr Gly Phe His Met Gly Arg Leu Ser Val Asp Cys Asn Val Val Glu
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Pro Ala Asp Val Lys Lys Val Val Thr Thr Leu Lys Arg Ala Val Lys
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Val Val Gly Thr Pro Ala Tyr His Glu Met Val Lys Asn Cys Met Ile
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Gln Asp Leu Ser Trp Lys Gly Pro Ala Lys Asn Trp Glu Asp Val Leu
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Leu Glu Leu Gly Val Glu Gly Ser Glu Pro Gly Ile Val Gly Glu Glu
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Ile Ala Pro Leu Ala Leu Glu Asn Val Ala Ala Pro
        595                 600
<210>9
<211>2818
<212>DNA
<213>小麦
<400>9
cctgcgcgcg cgatggcggc tctggtcacg tcgcagctcg ccacctccgg caccgtcctc      60
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aaagcgcacc gcgggacccg gcggtgcctc tccatggtgg tgcgcgccac gggcagcgcc     240
ggcatgaacc tcgtgttcgt cggcgccgag atggcgccct ggagcaagac cggcggcctc     300
ggcgacgtcc tcgggggcct ccccccagcc atggccgtaa gctagctagc tagcaccact     360
gtcttctgat aatgtttctt cttgcagcca gccatgcctg ccattacaag tttacaactg     420
atgctgtgtc tgcaggccaa cggtcaccgg gtcatggtca tctccccgcg ctacgaccag     480
tacaaggacg cctgggacac cagcgtcgtc tccgaggtac acatatatcc gccacatgaa     540
ttatcacagt tcacatgctc ctgcacattt ctgcaaggtt ccactcaccg actggatttc     600
acagatcaag gtcgcggacg agtacgagag ggtgaggtac ttccactgct acaagcgcgg     660
ggtggaccgc gtgttcgtcg accacccgtg cttcctggag aaggtgacca atcgtcgtcg     720
tcgatcgatc aatcgatcaa gctatctttt cgtcgtctca acattcatgg tgattgattt     780
gggtgagtct ttgtttctgc tggttgcaat ttccaggtcc ggggcaagac caaggagaag     840
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ggaccctacg gtaagatcaa caacacccag cagctactag agtgtctgaa gaacttgatt    1020
tcttcttgag agcactggat gattatcatc ttccctgtgt cttggtgctg ccacgccatg    1080
ctatgccgcg ccacgccgcg caggggaaga cgtggtgttc gtgtgcaacg actggcacac    1140
gggccttctg gcctgctacc tcaagagcaa ctaccagtcc agtggcatct ataggacggc    1200
caaggttttg catcttctca aactttatat tctctctgca gaattttaca ttgcaacttc    1260
atttcatgtc caggtagcgt tctgcatcca caacatctcg tatcagggcc gcttctcctt    1320
cgacgacttc gcgcagctca acctgcccga caggttcaag tcgtccttcg acttcatcga    1380
cggctacgac aagccggtgg aggggcgcaa gatcaactgg atgaaggccg ggatcctgca    1440
ggccgacaag gtgctcacgg tgagccccta ctacgcggag gagctcatct ccggcgaagc    1500
caggggctgc gagctcgaca acatcatgcg cctcacgggc atcaccggca tcgtcaacgg    1560
catggacgtc agcgagtggg accccgccaa ggacaagttc ctcgccgcca actacgacgt    1620
caccaccgtg agcacccgcc cacccacaca cccacacaaa gatttcttcc ggtgattgct    1680
ggttctgggt gggttctgac ggacgaggca aagtgacagg cgttggaggg gaaggcgctg    1740
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gagatcttga aggaggagga cgtccagatc gttctcctgg tacgtcatcg accccaaccg    1920
caacccgacc gccattgctg aagcttcaat caagcagacc taaggaatga tcggatgcat    1980
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cgagcaaggt gagggccgtg gtcaggttca acgcgccgct ggctcaccag atgatggccg    2100
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ggatgcgcta cggaacggta aacgccgcct cctccttcct gccgattcct tatctccccg    2220
cgtatccatg gccatgaccg aagtttcttt caaatttgca gccgtgcgcg tgcgcgtcca    2280
ccggcgggct cgtcgacacg atcatggagg gcaagaccgg gttccacatg ggccgcctca    2340
gcgtcgacgt aggctcgtcg atcccttgtg taaattcttc attttgttca tcctgggagc    2400
tcaggcagat catgaaatgg tttccttttt cctcttggtg gccagtgcaa cgtggtggag    2460
ccggccgacg tgaagaaggt ggtgaccacc ctgaagcgcg ccgtcaaggt cgtcggcacg    2520
ccagcctacc atgagatggt caagaactgc atgatccagg atctctcctg gaaggtaagt    2580
cgtctctggt ctggtttagg atgcattttc cagaacaact aagagttgag actacaatgg    2640
tgctcgtgct cgatgcatcc attaatggtg gcttgcgcat atggtgcagg ggccagccaa    2700
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<210>10
<211>605
<212>PRT
<213>小麦
<400>10
Met Ala Ala Leu Val Thr Ser Gln Leu Ala Thr Ser Gly Thr Val Leu
1               5                   10                  15
Gly Ile Thr Asp Arg Phe Arg Arg Ala Gly Phe Gln Gly Val Arg Pro
            20                  25                  30
Arg Ser Pro Ala Asp Ala Pro Leu Gly Met Arg Thr Thr Gly Ala Ser
        35                  40                  45
Ala Ala Pro Lys Gln Gln Ser Arg Lys Ala His Arg Gly Thr Arg Arg
    50                  55                  60
Cys Leu Ser Met Val Val Arg Ala Thr Gly Ser Ala Gly Met Asn Leu
65                  70                  75                  80
Val Phe Val Gly Ala Glu Met Ala Pro Trp Ser Lys Thr Gly Gly Leu
                85                  90                  95
Gly Asp Val Leu Gly Gly Leu Pro Pro Ala Met Ala Ala Asn Gly His
            100                 105                 110
Arg Val Met Val Ile Ser Pro Arg Tyr Asp Gln Tyr Lys Asp Ala Trp
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Asp Thr Ser Val Val Ser Glu Ile Lys Val Ala Asp Glu Tyr Glu Arg
    130                 135                 140
Val Arg Tyr Phe His Cys Tyr Lys Arg Gly Val Asp Arg Val Phe Val
145                 150                 155                 160
Asp His Pro Cys Phe Leu Glu Lys Val Arg Gly Lys Thr Lys Glu Lys
                165                 170                 175
Ile Tyr Gly Pro Asp Ala Gly Thr Asp Tyr Glu Asp Asn Gln Leu Arg
            180                 185                 190
Phe Ser Leu Leu Cys Gln Ala Ala Leu Glu Ala Pro Arg Ile Leu Asp
        195                 200                 205
Leu Asn Asn Asn Pro Tyr Phe Ser Gly Pro Tyr Gly Glu Asp Val Val
    210                 215                 220
Phe Val Cys Asn Asp Trp His Thr Gly Leu Leu Ala Cys Tyr Leu Lys
225                 230                 235                 240
Ser Asn Tyr Gln Ser Ser Gly Ile Tyr Arg Thr Ala Lys Val Ala Phe
                245                 250                 255
Cys Ile His Asn Ile Ser Tyr Gln Gly Arg Phe Ser Phe Asp Asp Phe
            260                 265                 270
Ala Gln Leu Asn Leu Pro Asp Arg Phe Lys Ser Ser Phe Asp Phe Ile
        275                 280                 285
Asp Gly Tyr Asp Lys Pro Val Glu Gly Arg Lys Ile Asn Trp Met Lys
    290                 295                 300
Ala Gly Ile Leu Gln Ala Asp Lys Val Leu Thr Val Ser Pro Tyr Tyr
305                 310                 315                 320
Ala Glu Glu Leu Ile Ser Gly Glu Ala Arg Gly Cys Glu Leu Asp Asn
                325                 330                 335
Ile Met Arg Leu Thr Gly Ile Thr Gly Ile Val Asn Gly Met Asp Val
            340                 345                 350
Ser Glu Trp Asp Pro Ala Lys Asp Lys Phe Leu Ala Ala Asn Tyr Asp
        355                 360                 365
Val Thr Thr Ala Leu Glu Gly Lys Ala Leu Asn Lys Glu Ala Leu Gln
    370                 375                 380
Ala Glu Val Gly Leu Pro Val Asp Arg Lys Val Pro Leu Val Ala Phe
385                 390                 395                 400
Ile Gly Arg Leu Glu Glu Gln Lys Gly Pro Asp Val Met Ile Ala Ala
                405                 410                 415
Ile Pro Glu Ile Leu Lys Glu Glu Asp Val Gln Ile Val Leu Leu Gly
            420                 425                 430
Thr Gly Lys Lys Lys Phe Glu Arg Leu Leu Lys Ser Val Glu Glu Lys
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Phe Pro Ser Lys Val Arg Ala Val Val Arg Phe Asn Ala Pro Leu Ala
    450                 455                 460
His Gln Met Met Ala Gly Ala Asp Val Leu Ala Val Thr Ser Arg Phe
465                 470                 475                 480
Glu Pro Cys Gly Leu Ile Gln Leu Gln Gly Met Arg Tyr Gly Thr Pro
                485                 490                 495
Cys Ala Cys Ala Ser Thr Gly Gly Leu Val Asp Thr Ile Met Glu Gly
            500                 505                 510
Lys Thr Gly Phe His Met Gly Arg Leu Ser Val Asp Cys Asn Val Val
        515                 520                 525
Glu Pro Ala Asp Val Lys Lys Val Val Thr Thr Leu Lys Arg Ala Val
    530                 535                 540
Lys Val Val Gly Thr Pro Ala Tyr His Glu Met Val Lys Asn Cys Met
545                 550                 555                 560
Ile Gln Asp Leu Ser Trp Lys Gly Pro Ala Lys Asn Trp Glu Asp Val
                565                 570                 575
Leu Leu Glu Leu Gly Val Glu Gly Ser Glu Pro Gly Val Ile Gly Glu
            580                 585                 590
Glu Ile Ala Pro Leu Ala Met Glu Asn Val Ala Ala Pro
        595                 600                 605
<210>11
<211>2886
<212>DNA
<213>小麦
<400>11
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catatcttgc tcttcattct gaaacaggca tatcaatttt gcggttcatt ctggcctgaa    1320
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tccaggggat gcgctacgga acggtaaact tttccttctt gccaagtcct tacttcctga    2280
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aaagaa                                                               2886
<210>12
<211>604
<212>PRT
<213>小麦
<400>12
Met Ala Ala Leu Val Thr Ser Gln Leu Ala Thr Ser Gly Thr Val Leu
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Gly Ile Thr Asp Arg Phe Arg Arg Ala Gly Phe Gln Gly Val Arg Pro
            20                  25                  30
Arg Ser Pro Ala Asp Ala Ala Leu Gly Met Arg Thr Val Gly Ala Ser
        35                  40                  45
Ala Ala Pro Thr Gln Ser Arg Lys Ala His Arg Gly Thr Arg Arg Cys
    50                  55                  60
Leu Ser Met Val Val Arg Ala Thr Gly Ser Gly Gly Met Asn Leu Val
65                  70                  75                  80
Phe Val Gly Ala Glu Met Ala Pro Trp Ser Lys Thr Gly Gly Leu Gly
                85                  90                  95
Asp Val Leu Gly Gly Leu Pro Pro Ala Met Ala Ala Asn Gly His Arg
            100                 105                 110
Val Met Val Ile Ser Pro Arg Tyr Asp Gln Tyr Lys Asp Ala Trp Asp
        115                 120                 125
Thr Ser Val Val Ser Glu Ile Lys Val Val Asp Lys Tyr Glu Arg Val
    130                 135                 140
Arg Tyr Phe His Cys Tyr Lys Arg Gly Val Asp Arg Val Phe Val Asp
145                 150                 155                 160
His Pro Cys Phe Leu Glu Lys Val Arg Gly Lys Thr Lys Glu Lys Ile
                165                 170                 175
Tyr Gly Pro Asp Ala Gly Thr Asp Tyr Glu Asp Asn Gln Gln Arg Phe
            180                 185                 190
Ser Leu Leu Cys Gln Ala Ala Leu Glu Val Pro Arg Ile Leu Asn Leu
        195                 200                 205
Asp Asn Asn Pro Tyr Phe Ser Gly Pro Tyr Gly Glu Asp Val Val Phe
    210                 215                 220
Val Cys Asn Asp Trp His Thr Gly Leu Leu Ala Cys Tyr Leu Lys Ser
225                 230                 235                 240
Asn Tyr Gln Ser Asn Gly Ile Tyr Arg Ala Ala Lys Val Ala Phe Cys
                245                 250                 255
Ile His Asn Ile Ser Tyr Gln Gly Arg Phe Ser Phe Asp Asp Phe Ala
            260                 265                 270
Gln Leu Asn Leu Pro Asp Arg Phe Lys Ser Ser Phe Asp Phe Ile Asp
        275                 280                 285
Gly Tyr Asp Lys Pro Val Glu Gly Arg Lys Ile Asn Trp Met Lys Ala
    290                 295                 300
Gly Ile Leu Gln Ala Asp Lys Val Leu Thr Val Ser Pro Tyr Tyr Ala
305                 310                 315                 320
Glu Glu Leu Ile Ser Gly Glu Ala Arg Gly Cys Glu Leu Asp Asn Ile
                325                 330                 335
Met Arg Leu Thr Gly Ile Thr Gly Ile Val Asn Gly Met Asp Val Ser
            340                 345                 350
Glu Trp Asp Pro Thr Lys Asp Lys Phe Leu Ala Val Asn Tyr Asp Ile
        355                 360                 365
Thr Thr Ala Leu Glu Gly Lys Ala Leu Asn Lys Glu Ala Leu Gln Ala
    370                 375                 380
Glu Val Gly Leu Pro Val Asp Arg Lys Val Pro Leu Val Ala Phe Ile
385                 390                 395                 400
Gly Arg Leu Glu Glu Gln Lys Gly Pro Asp Val Met Ile Ala Ala Ile
                405                 410                 415
Pro Glu Ile Leu Lys Glu Glu Asp Val Gln Ile Val Leu Leu Gly Thr
            420                 425                 430
Gly Lys Lys Lys Phe Glu Arg Leu Leu Lys Ser Ile Glu Glu Lys Phe
        435                 440                 445
Pro Ser Lys Val Arg Ala Val Val Arg Phe Asn Ala Pro Leu Ala His
    450                 455                 460
Gln Met Met Ala Gly Ala Asp Val Leu Ala Val Thr Ser Arg Phe Glu
465                 470                 475                 480
Pro Cys Gly Leu Ile Gln Leu Gln Gly Met Arg Tyr Gly Thr Pro Cys
                485                 490                 495
Ala Cys Ala Ser Thr Gly Gly Leu Val Asp Thr Ile Val Glu Gly Lys
            500                 505                 510
Thr Gly Phe His Met Gly Arg Leu Ser Val Asp Cys Asn Val Val Glu
        515                 520                 525
Pro Ala Asp Val Lys Lys Val Val Thr Thr Leu Lys Arg Ala Val Lys
    530                 535                 540
Val Val Gly Thr Pro Ala Tyr His Glu Met Val Lys Asn Cys Met Ile
545                 550                 555                 560
Gln Asp Leu Ser Trp Lys Gly Pro Ala Lys Asn Trp Glu Asp Val Leu
                565                 570                 575
Leu Glu Leu Gly Val Glu Gly Ser Glu Pro Gly Val Ile Gly Glu Glu
            580                 585                 590
Ile Ala Pro Leu Ala Met Glu Asn Val Ala Ala Pro
        595                 600
<210>13
<211>18
<212>DNA
<213>引物
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gcgtttaccc cacagagc                                18
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<211>21
<212>DNA
<213>引物
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tttaccccac agagcacact c                            21
<210>15
<211>20
<212>DNA
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gcgccataca gcaagtcata                              20
<210>16
<211>20
<212>DNA
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gttttcaccg ttcactggta                              20
<210>17
<211>22
<212>DNA
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acgcgccata cagcaagtca ta                           22
<210>18
<211>21
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<213>引物
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gttattcatt tcttcggtac a                            21
<210>19
<211>21
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tcttcggtac accattggct a                            21
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atttcttcgg tacaccattg gcta                         24
<210>21
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gcgtattgga ttggctac                                                   18
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<211>16
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tgccctccag gtcgtg                                                     16
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<211>14
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tgccgcagca tgcc                                                       14
<210>24
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gggagctgaa attttattgc ttattg                                          26
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<211>27
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tgattttgtg ttcattgact atgttgg                                         27
<210>26
<211>20
<212>DNA
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tcgcggtgaa gagaacatgg                                                 20
<210>27
<211>6619
<212>DNA
<213>小麦
<400>27
gggggccgtt cgtacgtacc cgcccctcgt gtaaagccgc cgccgtcgtc gccgtccccc     60
gctcgcggcc atttccccgg cctgaccccg tgcgtttacc ccacagagca cactccagtc    120
cagcgcagca ctggccgcgc gcgccgccgg gaagaaggac gcgagggtcg acgacgacgc    180
cgcgtccgcg aggcagcccc gcgcacgccg cggtggcgcc gccaccaagg tagttggttc    240
gttatgactt gctgtatggc gcgtgcgcct cgagatcagc tcacgaattg tttctacaaa    300
acgcacgcgc tcgtgtgcag gtcgcggagc ggagggatcc cgtcaagacg ctcgatcgcg    360
acgccgcgga aggtggcgcg ccggcaccgc cggcaccgag gcaggacgcc gcccgtccac    420
cgagtatgaa cggcacgccg gtgaacggtg agaacaaatc taccggcggc ggcggcgcga    480
ccaaagacag cgggctgccc gcacccgcac gcgcgcccca tccgtcgacc cagaacagag    540
taccagtgaa cggtgaaaac aaagctaacg tcgcctcgcc gccgacgagc atagccgagg     600
tcgtggctcc ggattccgca gctaccattt ccatcagtga caaggcgccg gagtccgttg     660
tcccagccga gaagccgccg ccgtcgtccg gctcaaattt cgtggtctcg gcttctgctc     720
ccaggctgga cattgacagc gatgttgaac ctgaactgaa gaagggtgcg gtcatcgtcg     780
aagaagctcc aaacccaaag gctctttcgc cgcctgcagc ccccgctgta caagaagacc     840
tttgggactt caagaaatac attggcttcg aggagcccgt ggaggccaag gatgatggct     900
gggctgttgc agatgatgcg ggctcctttg aacatcacca gaaccatgat tccggacctt     960
tggcagggga gaacgtcatg aacgtggtcg tcgtggctgc tgaatgttct ccctggtgca    1020
aaacaggcat ggacattacc tcttcagtct ctcttcccgt tgttcataaa actttgctcg    1080
aatcactcat aagaacaaac attgtgttgc ataggtggtc ttggagatgt tgcgggtgct    1140
ctgcccaagg ctttggcaaa gagaggacat cgtgttatgg tactgcaggc tttcacttaa    1200
ctctgttgag tccatatgtt cgaataatat cagtgattgg cataatgtta ttaagtgcaa    1260
gacatgaaag tgttcttctg ttagagtatt tcatagccaa ccctggaggt taggttgttg    1320
gggcctactg ggtgcgggag ggggtttgca aaaagtggtg gttagcagtc ggatttcaca    1380
aataaggagg ctgataacca cgccatcagt gaagggaatg agtgtcgggt acccgatcga    1440
ccgttttgcc cgacgtcagg tttacctgcc ctgtagatcc gaataagtag ttcctatcct    1500
cagttaagta ccaaatatcg ccagcacccg tgtgtgtatt tatagtactg gatgatcaat    1560
ttatcaacat ttccggttaa tggttgctat catattcact gtaattgtta gtaaacagtg    1620
gatgtttgta atgtagatga tggctaaatg tatgttgtca agctttcatt ttaaagaaaa    1680
ttttattggg agctagtttt cgggtttggt tagagccacc aaaaccccag aatttttggg    1740
agttggcttg tgacagaggg ttttggggag ttaactttcg ggattcagtt agagacgctc    1800
ttactagttc cagtaaagag taaactattt tctgcagtca tcccaattgt tctgtagaaa    1860
ttaaaagtag aaaatagttg tggtatcata taaaccatat attattcaaa atctagaatc    1920
atggacttgg ctagactttg atgatctgaa attttaaatt tgatgataat tgagaaatga    1980
tcctttctat cttaggttgt ggtaccaagg tatggggact atgaggaagc ctacgatgtc    2040
ggagtccgaa aatactacaa ggctgctgga caggtaagcg aaaatgcaat caaaggggag    2100
ctgaaatttc aatgcttact atcataataa atcaatttta agtaaaaaaa tttgtcctgc    2160
aggatatgga agtgaattat ttccatgctt atatcgatgg agttgatttt gtgttcattg    2220
acgctcctat cttccgacac cgtcaggaag acatttatgg gggcagcaga caggttaatt    2280
ttctatatgt tggtgtttga ttgcactgat aaactgagaa taagccaagg cctactgact    2340
ggcatatgat tacacatttt attttttcag gaaattatga agcgcatgat tttgttctgc    2400
aaggccgctg tcgaggtatc ctctccaact caattgacaa cctattacca ctatacaatt    2460
atgtgtatgc atgtatttca acagatacgt aatctccctt gtgaagtgta tatatactaa    2520
taacatttca atacctcaca tgcacatttg gtcaagcgtt atgatttaac ttctgataat    2580
ctattgcact gatgaacaat aatattgatg atccttgtta cttcatcgtt atgtttatgt    2640
tctcttcacc ggcgcattga ttttggaaat agcatttcca cctgccacaa acaataatat    2700
atactcctac tttcatccaa tgtagatatt ttcgcacttg gcatatcatc ccattaaata    2760
ttattggtcc atcattttta ttcctctata atttgcaggt tccttggcac gttccatgcg    2820
gcggtgtccc ttatggggat ggaaatctgg tgtttattgc aaatgattgg cacacggcac    2880
tcctgcctgt ctatctgaaa gcatattaca gggaccatgg tttgatgcag tacactcggt    2940
ccattatggt gatacataac atcgcgcacc aggttccttt tctcctaatc ttgttttttc    3000
tctagtctct actattcact ccacattgtt tgaggaaact aaaggggttg caaaattatg    3060
atggcttatg aaagttatgg aggtaaatgc atcagtggtg cttgaacttg tcacgcatgt    3120
tcactttggt gcttacagtt gtagactacg gaaaactggt gcaaaaactt ggctattgtg    3180
tgcaatacgg tgtattttcc gtatgtaggg tcaaatgttg cctatgtggc attgtattcc    3240
cgtctataga tgttagaccg tgcctacatc gccattgggc ccacacactc cctattacat    3300
gtgggaccca cttgtcagcc tatgacataa ataaaatgga aatttataat aaaaatgatg    3360
gcctggggtc ttgaaaatgg gacctcgcag gtatgccgct agccagcacg ccctaatcat    3420
taatccccta tgcacttcag tatgtgtgtg tctgtgtgtg gagtcggggg gggggggggg    3480
gtatgtattc ttatatcctt tgctctaagg ctatcattgg cgtgctagca ccgccgggtc    3540
tccatcaaca ccgacatcat ccacgacccc atccagctct tcctcaacaa gcccacctcc    3600
agcctcaact cgggcagcac cttcatggtg gcctaggtgc tctgcaccat cgctcgaagt    3660
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ccattataga agcctgcctt gggagcccat acctccctgc acatcctcct ctttccccat    3900
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tccccgccgc gaagctgcaa tccatggcga gttggccatg gccctattcc ccaattgctc    4020
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aggatcaccg catgttcatc catccgaccc gaatcatcat agaaccaacg ccagagaggt    4260
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ctgactttag gtcccaggtt cgaacccccg cgtgcacata atttatttgc tatttatttc    4440
tcctatctac taataagtgg gacccacaca tcatactaag ccctttttgt ctcttgcctg    4500
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caacgtgcag agcgtttacg aatggaaagt gtactatatg cacacaagag ccagagccag    4680
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tcattcaaat tcttaacatt tgcgaggcgc ttcatgattt ccatctccct catatcagag    4980
acatttggtc gtgtacacta aatttctcag gtcacttctc gtctaaatcc gcatatgtag    5040
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cgctagatga ggtcttccac acaatgaaca ttgcgttctt tgctctgctc ttccagaaga    5220
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gatcacatgc tttggtcagt tattcctttc ttgggtactc cgttgggcta attctttctc    5640
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ggccaagtac cagtggtga                                                 6619
<210>28
<211>6986
<212>DNA
<213>小麦
<400>28
gggggccgtt cgtacgtacc cacccctcgt gtaaagccgc cgccgtcgtc gccgtccccc     60
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cgcgctctgg gcggaccaac ccgcgcatcg tatcacgatc acccaccccg atcccggccg    240
ccgccatgtc gtcggcggtc gcgtccgccg cgtccttcct cgcgctcgcg tccgcctccc    300
ccgggagatc acggaggagg acgagggtga gcgcgtcgcc accccacacc ggggctggca    360
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gtgtgtgcag gttgcggagc ggagggatcc cgtcaagacg ctcgatcgcg acgccgcgga     660
aggtggcgcg ccgtccccgc cggcaccgag gcaggaggac gcccgtctgc cgagcatgaa     720
cggcatgccg gtgaacggtg aaaacaaatc taccggcggc ggcggcgcga ctaaagacag     780
cgggctgccc gcacccgcac gcgcgcccca gccgtcgagc cagaacagag taccggtgaa     840
tggtgaaaac aaagctaacg tcgcctcgcc gccgacgagc atagccgagg tcgcggctcc     900
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gcaccacgac aaggtgcgcg ggtgggtggg gttctccgtg cgcctggcgc accggatcac    6600
ggcgggggcg gacgcgctcc tcatgccctc ccggttcgag ccgtgcgggc tgaaccagct    6660
ctacgccatg gcctacggca ccgtccccgt cgtgcacgcc gtcggcggcc tcagggacac    6720
cgtgccgccg ttcgacccct tcaaccactc cgggctcggg tggacgttcg accgcgccga    6780
ggcgcacaag ctgatcgagg cgctcgggca ctgcctccgc acctaccgag acttcaagga    6840
gagctggagg gccctccagg agcgcggcat gtcgcaggac ttcagctggg agcacgccgc    6900
caagctctac gaggacgtcc tcgtcaaggc caagtaccag tggtga                   6946

Claims (24)

1.一种小麦,其不表达下述全部蛋白质:
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
2.一种小麦,其中不具有下述蛋白质所具有的酶活性的全部:
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
3.一种小麦,其中蓄积的淀粉的30重量%以上不形成粒径10μm以上的淀粉颗粒。
4.一种小麦,在支链淀粉的葡萄糖支链中,聚合度70以下的支链中,聚合度为3~5的支链的数量的比例为1.5%以上。
5.一种小麦,生淀粉在淀粉酶作用下的分解率为80%以上。
6.一种小麦,其中,下述蛋白质(1)至(3)中的1种以上不表达,并且下述蛋白质(4)至(6)中的1种以上不表达,但不包括只有蛋白质(2)、(4)及(5)同时不表达的小麦,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
7.一种小麦,所述小麦不具有下述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的1种以上酶活性,并且不具有下述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的1种以上酶活性,但不包括只不具有蛋白质(2)、(4)及(5)所具有的酶活性的小麦,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
8.一种小麦,其中下述蛋白质(1)至(3)中的任意2种不表达,并且下述蛋白质(4)至(6)中的1种以上不表达,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
9.一种小麦,不具有下述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2种酶活性,并且不具有下述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的1种以上酶活性,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
10.一种小麦,其中下述蛋白质(1)至(3)中的任意2种不表达,并且下述蛋白质(4)至(6)都不表达,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
11.一种小麦,不具有下述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的任意2种酶活性,并且不具有下述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性的全部,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
12.一种小麦,其中下述蛋白质(1)至(3)中的2种以上不表达,并且下述蛋白质(4)至(6)中的2种以上不表达,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
13.一种小麦,不具有下述蛋白质(1)至(3)所具有的酶活性中的2种以上酶活性,并且不具有下述蛋白质(4)至(6)所具有的酶活性中的2种以上酶活性,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质;
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
14.一种小麦,是下述蛋白质(1)至(3)中的2种以上不表达的小麦,相比颗粒性淀粉合成酶蛋白质的表达组合与所述小麦相同、蛋白质(1)至(3)全部表达的小麦,其淀粉糊化后的粘度较小,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质。
15.一种小麦,是下述蛋白质(1)至(3)中的2种以上不表达的小麦,相比颗粒性淀粉合成酶蛋白质的表达组合与所述小麦相同、蛋白质(1)至(3)全部表达的小麦,其淀粉糊化后的耐老化性提高,
(1)序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因编码的淀粉合成酶II型-A1蛋白质;
(2)序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因编码的淀粉合成酶II型-B1蛋白质;
(3)序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因编码的淀粉合成酶II型-D1蛋白质。
16.一种小麦,其除去胚的成熟种子中含有0.1重量%以上葡萄糖。
17.一种小麦,其除去胚的成熟种子中含有0.1重量%以上麦芽糖。
18.一种小麦,其除去胚的成熟种子中含有1重量%以上蔗糖。
19.一种小麦,在支链淀粉的葡萄糖支链中,聚合度60以下的支链中,聚合度2~5的支链的数量的比例为3%以上。
20.一种食品,所述食品含有权利要求1~19中任一项所述的小麦或来自所述小麦的淀粉。
21.如权利要求20所述的食品,所述食品为焙烤食品。
22.一种工业制品,所述工业制品含有权利要求1~19中任一项所述的小麦或来自所述小麦的淀粉。
23.一种制品,所述制品利用权利要求1~19中任一项所述的小麦或来自所述小麦的淀粉进行加工。
24.一种特定小麦的筛选方法,其特征在于包括以下步骤,
检测下述基因变异体(7)至(9)中的1种以上的步骤:
(7)在序列号1的淀粉合成酶II型-A1基因中,至少位置124~412的碱基缺失及/或取代的淀粉合成酶II型-A1基因变异体;
(8)在序列号3的淀粉合成酶II型-B1基因中,至少在位置6145~6146之间插入1个以上碱基的淀粉合成酶II型-B1基因变异体;及
(9)在序列号5的淀粉合成酶II型-D1基因中,至少位置2590~2652的碱基缺失的淀粉合成酶II型-D1基因变异体;以及
检测以下蛋白质(4)至(6)中的1种以上的步骤:
(4)序列号7的颗粒性淀粉合成酶-A1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-A1蛋白质;
(5)序列号9的颗粒性淀粉合成酶-B1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-B1蛋白质;及
(6)序列号11的颗粒性淀粉合成酶-D1基因编码的颗粒性淀粉合成酶-D1蛋白质。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104099331A (zh) * 2013-04-12 2014-10-15 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种通过胚乳特异性沉默小麦脂肪氧化酶基因表达提高储藏小麦发芽率和面粉白度的方法
CN107266595A (zh) * 2016-04-05 2017-10-20 玉米产品开发公司 用于生产具有新功能的淀粉的组合物和方法
CN106714561B (zh) * 2014-09-26 2018-10-19 松谷化学工业株式会社 甜甜圈类及其制作方法
CN109384854A (zh) * 2018-09-29 2019-02-26 安徽华明太合生物工程有限公司 一种甘薯淀粉

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5294059B2 (ja) * 2006-11-01 2013-09-18 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 低温糊化性コムギ由来の小麦粉を含む穀粉組成物及びこれを使用した食品
AU2007314969B2 (en) 2006-11-01 2012-06-14 National Agriculture And Food Research Organization Cereal flour composition containing sweet wheat-derived flour and food using the same
JP4925941B2 (ja) * 2007-06-26 2012-05-09 日本製粉株式会社 Pcr法を利用した小麦の検出方法並びにこれに使用するプライマー対及び核酸プローブ
JP5625211B2 (ja) 2009-12-21 2014-11-19 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 普通系コムギを定性的及び定量的に検出する方法
JP6226165B2 (ja) * 2012-02-13 2017-11-08 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 2つのGBSSIと2つのSSIIaの酵素活性を欠損したコムギから調製された小麦粉
JP6347475B2 (ja) * 2013-08-09 2018-06-27 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 少なくとも2つのGBSSIと2つのSSIIaの酵素活性を欠損したコムギから調製された小麦粉を使用したマルトース高含有生地の製造方法
JP6274486B2 (ja) * 2013-08-09 2018-02-07 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 少なくとも2つのGBSSIと2つのSSIIaの酵素活性を欠損したコムギから調製された小麦粉を使用した糖を添加しない食品の製造方法
JP6292654B2 (ja) * 2013-08-09 2018-03-14 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 2つのGBSSIと2つのSSIIaの酵素活性を欠損したコムギから調製された小麦粉を使用した冷凍食品
JP6274487B2 (ja) * 2013-08-09 2018-02-07 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 2つのGBSSIと2つのSSIIaの酵素活性を欠損したコムギから調製された小麦粉を使用した品質劣化が抑制された食品
CN110295208B (zh) * 2019-06-28 2023-04-18 山东省食品发酵工业研究设计院 一种提升抗性糊精抗性和产量的方法
MX2022011717A (es) 2020-03-23 2022-12-07 Bay State Milling Company Prueba rapida de pureza de semilla de trigo con alta amilosa.
WO2022107265A1 (ja) * 2020-11-19 2022-05-27 株式会社ニップン イースト含有冷凍生地用小麦粉組成物及びイースト含有冷凍生地
JPWO2023032968A1 (zh) * 2021-08-30 2023-03-09

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3170595B2 (ja) 1992-10-15 2001-05-28 農林水産省東北農業試験場長 Wx遺伝子発現の確認方法およびモチコムギの作出方法
JP3079251B2 (ja) 1997-03-12 2000-08-21 農林水産省農業研究センター所長 新規特性をもつ小麦澱粉
FR2791686A1 (fr) 1999-03-30 2000-10-06 Ulice Produits issus d'un ble a tres haute teneur en amylopectine et ses applications.
CA2273673A1 (en) * 1999-06-04 2000-12-04 Makoto Yamamori High amylose wheat starch and wheat containing the same
JP2004015390A (ja) 2002-06-06 2004-01-15 Matsushita Electric Ind Co Ltd 歪補償回路

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104099331A (zh) * 2013-04-12 2014-10-15 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种通过胚乳特异性沉默小麦脂肪氧化酶基因表达提高储藏小麦发芽率和面粉白度的方法
CN104099331B (zh) * 2013-04-12 2017-04-26 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种通过胚乳特异性沉默小麦脂肪氧化酶基因表达提高储藏小麦发芽率和面粉白度的方法
CN106714561B (zh) * 2014-09-26 2018-10-19 松谷化学工业株式会社 甜甜圈类及其制作方法
CN107266595A (zh) * 2016-04-05 2017-10-20 玉米产品开发公司 用于生产具有新功能的淀粉的组合物和方法
CN107266595B (zh) * 2016-04-05 2021-02-05 玉米产品开发公司 用于生产具有新功能的淀粉的组合物和方法
CN109384854A (zh) * 2018-09-29 2019-02-26 安徽华明太合生物工程有限公司 一种甘薯淀粉

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