CN101161112A - 一种香菇多糖分离纯化的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种香菇多糖分离纯化的方法,其特征在于,将传统层析柱的圆柱型柱改为异型柱后,香菇多糖粗品经预处理,使之能适应该异型柱条件的吸附,改香菇多糖分离纯化变为香菇多糖动态高效分离纯化,产品在经洗涤、洗脱、透析、沉淀、冻干等一系列处理后,即得到单一香菇多糖。本发明的有点是适应大批量工业化生产,在方法简便、质量保证的前提下能获得高效率、低成本的产品。

Description

一种香菇多糖分离纯化的方法
技术领域
本发明涉及一种香菇多糖分离纯化的方法,可用做消化系统等恶性肿瘤的治疗,属于香菇多糖分离纯化技术领域。
背景技术
香菇多糖是从人工培植的真菌类香菇子实体中提取、分离、纯化所得到的单一多糖。作为抗肿瘤药物有其特殊的优点:能调节免疫功能,而且使用剂量低、疗效较好、毒副作用小等。主要做消化系统等恶性肿瘤的治疗。常常与化疗药物配合使用,免除化疗所产生的不良反应。特别适合不能手术或复发的胃癌病人,提高患者的生活质量,延长患者的生命。
香菇多糖的提取分离、纯化非常复杂,而且效率低、成本高、不易批量生产。原有方法是香菇多糖粗糖溶液经圆柱型层析柱中的DEAE-纤维素吸附、洗脱分离后,冷冻干燥所得到的香菇多糖单一组份。原有方法所遇困难是:由于香菇多糖不易溶解,溶液的粘度大,而传统的层析柱由柱接口1和圆柱体2连接而成,如图1所示,在>0.25%溶解含量时,通过量只能达到500mg/cm2,过之则易堵塞,因粗品溶液中,如溶解含量大时,香菇多糖的粘稠溶液逐步聚积在DEAE-纤维素临界表面,无法流通,形成堵塞达不到吸附分离的效果。
发明内容
本发明的目的是提供一种在层析柱中不易堵塞,可批量生产的香菇多糖分离纯化的方法。
为实现以上目的,本发明的技术方案是提供一种香菇多糖分离纯化的方法,其特征在于,香菇多糖粗品经预处理后,通过经改变异型柱中DEAE-纤维素吸附、洗涤、各种浓度的NaOH溶液洗脱、中和、透析、沉淀、冻干而得到单一香菇多糖,其方法为:
步骤1.香菇多糖粗品经预处理,
将香菇多糖粗糖按2.5%以下溶解含量的范围加热至50℃-99℃,溶解在水中后冷却,在常温下扎透析袋,用自来水透析≥60H后,透析液浓缩至原体积的1/6-1/9范围内,在常温搅拌的条件下按1∶1.1加入药用乙醇沉淀,沉淀物分离出后,经2倍沉淀物体积的药用乙醇洗涤,再次分离出沉淀物,在≤60℃条件下真空干燥,得到经预处理的香菇多糖;
步骤2.香菇粗糖按2.5%以下的比例范围内,加热至50℃-99℃,全部溶解在水中,溶液自然冷却至常温,装在异型柱中,通过DEAE-纤维素吸附、洗涤、浓度为0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脱、中和、透析、浓缩、冻干方法,得到香菇多糖单一组份。
所述的异型层析柱由柱接口连接上大下小漏斗体和圆柱体组成,其漏斗体最大直径为圆柱体直径的1-10倍。
本发明将原层析柱从柱接口以下分成二部分,上半部分为坛大通过面积,将原来的直柱形改成上大下小漏斗形,下半部分保持原有几何形状,使得效果不变,采取逐步过渡的形式上下结合,在DEAE-纤维素与香菇多糖溶液临界接触面增加了1~10倍以上接触面积,另外再配以香菇多糖的预处理,使之能适应该异型柱条件的吸附,改香菇多糖分离纯化变为香菇多糖动态高效分离纯化,产品在经洗涤、洗脱、透析、沉淀、冻干等一系列处理后,即得到单一香菇多糖。
本发明的优点是适应大批量工业化生产,在方法简便、质量保证的前提下能获得高效率、低成本的产品。
附图说明
图1为原层析柱结构示意图;
图2为本发明层析柱结构示意图。
具体实施方式
以下结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
实施例
如图2所示,为本发明层析柱结构示意图,所述的异型层析柱由柱接口1连接上大下漏斗体2和圆柱体2组成,其漏斗体最大直径为圆柱体直径的3倍。一种香菇多糖分离纯化的方法为:
步骤1.香菇多糖粗品经预处理
将香菇多糖粗糖按2%溶解含量加热至50℃-99℃,溶解在水中后冷却,在常温下扎透析袋,用自来水透析≥60H后,透析液浓缩至原体积的1/6-1/9范围内,在常温搅拌的条件下按1∶1.1加入药用乙醇沉淀,沉淀物分离出后,经2倍沉淀物体积的药用乙醇洗涤,再次分离出沉淀物,在≤60℃条件下真空干燥,得到经预处理的香菇多糖;
步骤2.香菇粗糖按2%的比例范围内,加热至50℃-99℃,全部溶解在水中,溶液自然冷却至常温,装在异型柱中,通过DEAE-纤维素吸附、洗涤、浓度为0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脱、中和、透析、浓缩、冻干方法,得到香菇多糖单一组份。
步骤2中的浓度为0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脱、中和、透析、浓缩、冻干方法为常规提取方法。

Claims (2)

1.一种香菇多糖分离纯化的方法,其特征在于,香菇多糖粗品经预处理后,通过经改变异型柱中DEAE-纤维素吸附、洗涤、各种浓度的NaOH溶液洗脱、中和、透析、沉淀、冻干而得到单一香菇多糖,其方法为:
步骤1.香菇多糖粗品经预处理,
将香菇多糖粗糖按2.5%以下溶解含量的范围加热至50℃-99℃溶解,在水中后冷却,在常温下扎透析袋,用自来水透析≥60H后,透析液浓缩至原体积的1/6-1/9范围内,在常温搅拌的条件下按1∶1.1加入药用乙醇沉淀,沉淀物分离出后,经2倍沉淀物体积的药用乙醇洗涤,再次分离出沉淀物,在≤60℃条件下真空干燥,得到经预处理的香菇多糖;
步骤2.香菇粗糖按2.5%以下的比例范围内,加热至50℃-99℃,全部溶解在水中,溶液自然冷却至常温,装在异型柱中,通过DEAE-纤维素吸附、洗涤、浓度为0.5mol/L以下的NaOH溶液洗脱、中和、透析、浓缩、冻干方法,得到香菇多糖单一组份。
2.根据权利要求1所述一种香菇多糖分离纯化的方法,其特征在于,所述的异型层析柱由柱接口(1)连接上大下漏斗体(2)和圆柱体(2)组成,其漏斗体最大直径为圆柱体直径的1-10倍。
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