CN101148468A - 以动物胆汁为原料高效提取胆红素和胆汁酸技术 - Google Patents

Abstract

本发明涉及从猪、牛、羊的胆汁中提取胆酸、去氧胆酸、胆红素方法。猪、牛、羊的胆汁主要由水(约占97％)、胆汁酸(约占2.5％)和胆红素(约占0.4％)组成，此外还含有磷脂、胆固醇、钠、钾、钙、磷酸盐、碳酸盐以及极少量蛋白质等成分。将新鲜胆汁进行冷却、过滤脱脂、碱性水解、酸化、有机溶剂萃取制备胆红素，剩余溶液深度皂化、酸化、有机溶剂沉淀制备胆酸和去氧胆酸混合物，再应用重结晶方法将胆酸和去氧胆酸分开，得到高纯度胆酸和去氧胆酸。

Description

以动物胆汁为原料高效提取胆红素和胆汁酸技术

技术领域

本发明涉及从猪、牛、羊的胆汁中提取胆酸、去氧胆酸、胆红素方法。其特征在于用于制备人工牛黄和其它功能药物和材料。

背景技术

胆汁是在胆道中流动的一种特殊的体液，由哺乳动物肝脏分泌产生。在肝脏中形成后经胆囊管进入胆囊，并在那里储存起来；进食后从胆囊中释放出来，消化食物中的脂肪和类脂。胆汁中极大部分是水(约占97％)，在水中溶有许多种物质，其中包括能帮助脂肪消化和吸收的胆汁酸(约占2.5％)，以及与消化无关的肝的排泄物胆红素(约占0.4％)。此外，胆汁中含有磷脂、胆固醇、钠、钾、钙、磷酸盐、碳酸盐以及极少量蛋白质等成分。

天然牛黄是牛科动物干燥的胆结石，其主要成分为胆红素、胆酸、去氧胆酸、胆固醇、无机盐等，是传统名贵中药材。由于其产量低，不能够满足市场需求，目前以牛黄做原料的药物绝大多数是用人工牛黄代替天然牛黄。由于胆汁酸和胆红素是制备人工牛黄的原料，促使从胆汁中提取胆汁酸和胆红素的研究与生产技术的提高。国外从上个世纪60年代开始胆汁酸和胆红素的提取工作，现在是技术成熟、设备先进、产品纯度高、质量好；我国从上个世纪80年代展开胆汁酸和胆红素的提取工作，现在有几家企业进行这方面的生产，但是没有高纯度的胆汁酸和胆红素商品，同时产品的产量也难以满足日益扩大的市场需求。本发明提出了一种从猪、牛、羊的胆汁中联合提取胆红素和胆汁酸的方法，应用此种方法可以制备高纯度胆红素和胆汁酸；此种方法生产成本低，没有污染和有毒物质排放。产品可以用于制备人工牛黄等药物，为制药行业提供必要的原料，解决市场供需缺口大的矛盾。

发明内容

本发明的目的是提供一种从猪、牛、羊的胆汁中提取胆酸、去氧胆酸、胆红素方法。本发明从猪、牛、羊的胆汁中提取胆酸、去氧胆酸、胆红素方法包括下述步骤：脱脂，水解，萃取，皂化与浓缩，酸化与沉淀，分离与纯化。

具体实施方式

本发明合成所用的原料：新鲜胆汁(天津市肉类联合加工厂提供)，浓盐酸，氯仿，氢氧化钠，乙醇(天津化学试剂公司)。熔点用X-4熔点仪测定。IR用Bio-RAD FTS 135型傅立叶变换红外光谱仪测定，KBr压片。¹HNMR用Varian Unity Plus-300核磁共振仪测定，CDCl₃为溶剂，TMS为内标。元素分析用FOSSHeraeus元素分析仪测定。

实施操作

1)脱脂：将新鲜的胆汁冷却，至其中析出的固体物不再增加，过滤，除去固体物。

2)水解：向除酯后的胆汁中加入氢氧化纳，调节pH值为9～10，加热至沸，保持沸腾10分钟，冷却。

3)萃取：向水解冷却后的胆汁中加入少量的亚硫酸氢钠，搅匀后再加入约胆汁量四分之一体积的氯仿，搅拌下向其中滴加盐酸，调节pH到5～6，充分搅拌后倒入分液漏斗静置；分层后放出下层的氯仿，将中间层固体取出，将其溶于等量氯仿，再放入分液漏斗静置，分层后将氯仿放出，与第一次等到的氯仿合并，旋蒸，得到胆红素粗品，氯仿回收循环利用。分液后的上层胆汁备提取胆汁酸用。

4)胆红素纯化：将胆红素粗品溶解于乙醇中，蒸发部分溶剂使胆红素析出，过滤，将得到的固体物避光下真空干燥，得精品胆红素(IR(cm^-1)：3411，3262，2918，2852，1696，1613，1441，1220，991，698)。

5)皂化与浓缩：向提取胆红素后的胆汁中加入氢氧化纳，调节pH值为10～11，加热浓缩至大部分水分被蒸出，得固化物。

6)酸化与沉淀：将固化物溶于适量的乙醇中，向其中滴加盐酸，调节pH至3～4，有沉淀析出，过滤，得固体胆汁酸混合物。

7)分离与纯化：将得到的固体胆汁酸混合物溶解于适量的热乙醇中，室温冷却，待析出固体物不增加，过滤，将得到的固体真空干燥，得胆酸纯品(m.p.：196～198℃；IR(cm-1)：3352，2936，2868，1726，1464，1376，1177，981；1H-NMR(400MHz，DMSO3)：δ/ppm＝0.60(s，3H，18-H₃)，0.81(s，3H，19-H₃)，0.94(d，J＝6.0Hz，3H，21-H₃)，3.38(m，1H，3α-H)，3.61(s，7α-H)，3.78(s，12α-H))：滤液旋蒸，回收乙醇，得到的固体用氯仿重结晶，得去氧胆酸精品(m.p.：172～174℃；跟(cm-1)：IR(cm-1)：3371，2935，1734，1466，1447，1370，1078，9914；1H-NMR(400MHz，CDCl3)：6/ppm＝0.65(s，3H，18-H₃)，0.85(s，3H，19-H₃)，0.92(d，J＝6.0Hz，3H，21-H₃)，3.39(m，1H，3α-H)，3.82(s，12α-H))。

Claims (8)

1.一种从猪、牛、羊的新鲜胆汁中提取胆酸、去氧胆酸、胆红素方法。胆酸、去氧胆酸、胆红素可以用于制备人工牛黄和功能高分子材料。

2.权利要求1所述的从猪、牛、羊的新鲜胆汁中提取胆酸、去氧胆酸、胆红素方法，其特征在于它包括下述步骤：脱脂，水解，萃取，皂化与浓缩，酸化与沉淀，分离与纯化。

3.权利要求2所述的脱脂，其特征在于将新鲜的胆汁冷却，使其中的酯类化合物以固体形式析出，用过滤的方法将其除去。

4.权利要求2所述的水解其特征在于向除酯后的胆汁中加入碱，调节pH值，加热水解。

5.权利要求2所述的萃取其特征在于向水解的胆汁中加入亚硫酸氢钠和氯仿后用盐酸调节pH，放出氯仿层后，旋蒸，得到胆红素，氯仿回收循环利用。

6.权利要求2所述的皂化与浓缩其特征在于向提取胆红素后的胆汁中加入碱，调节pH值，加热至大部分水分被蒸出。

7.权利要求2所述的酸化与沉淀其特征在于将浓缩后的胆汁固化物溶于乙醇中，用盐酸酸化，析出沉淀。

8.权利要求2所述的分离与纯化其特征在于分别用乙醇和氯仿对固体胆汁酸混合物进行重结晶，得到胆酸和去氧胆酸产品。