CN101099547B - 具有生物活性的水溶性蜂胶提取物和浅色蜂胶提取物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及具有生物活性的水溶性蜂胶提取物和浅色蜂胶提取物及其制备方法，和含有该提取物的食用、药用和化妆品用组合物。二提取物均为100％蜂胶精华，不含任何有害物质和制剂辅料，具有抑制口腔致病菌，特别是产臭菌，抗氧化等多方面的医疗保健作用。除此之外，水溶性蜂胶提取物的特点是在水中极易溶解，生物利用度高，能充分发挥蜂胶的生物活性；浅色蜂胶提取物的特点是颜色鲜亮，可以轻易添加到有效剂量而不必担心产品的颜色成为让人不能接受的棕色或深棕色。该提取方法根据蜂胶中活性成分的极性分布，采用含水乙醇进行提取，并合理地控制醇水比例、提取温度和时间，对蜂胶中的不同活性成分进行提取，一步提取得到两种各具特性的提取物，工艺简单，不存在溶剂残留带来的副作用，因而极具开发潜力，在保健品、化妆品和食品添加剂方面有良好的应用前景。

Description

具有生物活性的水溶性蜂胶提取物和浅色蜂胶提取物 

技术领域

本发明涉及水溶性蜂胶提取物和浅色蜂胶提取物及其制备方法，以及该提取物作为抑菌、抗氧化剂的新用途。所述提取物具有抑制口腔致病菌、抗氧化等多方面的作用，属于天然产物深加工领域，本发明所述水溶性蜂胶提取物和浅色蜂胶提取物特别适用于化妆品、保健品和食品添加剂。 

背景技术

蜂胶是蜜蜂从植物的树芽、树皮等部位采集的树脂，再混以蜜蜂的舌腺、蜡腺等腺体分泌物，经蜜蜂加工转化而成的一种胶状物质。据文献报导，蜂胶具有广泛的药理作用，其中包括抗肿瘤、抗病原微生物、护肝、免疫调节、抗氧化、改善心血管、消炎、抗变态反应、抗辐射、抗溃疡、降血脂、降血糖等作用，国内外已有许多以蜂胶为原料的保健食品。 

蜂胶的基本成份为树脂类、蜂蜡、花粉等。从化合物来讲，主要有类黄酮化合物、有机酸类的化合物、脂、醛、醇类化合物以及烯、烃、萜类化合物等。 

目前，国内外的蜂胶提取基本上都是通过高浓度酒精(75％以上)浸提获取有效成分，也有报道蜂胶冷水浸提或者是热回流提取的，但该法提取效率低，生物活性成分破坏程度大。醇提蜂胶液气味浓、刺激性强，多数消费者难以接受，使用时对酒精过敏者也易产生过敏反应，增加了过敏源，作为化妆品和口服保健品的原料有很大的限制性；固体醇提蜂胶虽然刺激性不强，但不易溶于水，产品的剂型受到限制，水溶性活性成分有一部分没有被提取出来.而且其生物学活性和人体吸收率不如水提物理想。已经报道的其它的提取方法大致有 蜂胶氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、甘油浸提、油提和超临界抽提法等，成本高，活性成分提取不完全，未能解决蜂胶水溶性的问题。 

发明专利97111643将醇提蜂胶进行碱化处理制成水溶性蜂胶，但碱性环境对蜂胶的活性发挥有一定的干扰作用，生物学效应受一定影响。发明专利94118328.9和发明专利03141394.3分别用甘油、聚乙二醇加热浸泡蜂胶醇提物制备水溶性蜂胶，以及发明专利03150648.8用表面活性剂助溶的方法来制备水溶性蜂胶，都是将蜂胶溶解于化学助剂中，现有的技术中还有使用了非天然的助溶成分以改善蜂胶的水溶性。上述各种方法均无法制备蜂胶含量为100％的固体水溶性蜂胶。如发明专利200610003995.2所公开的水溶性蜂胶的制备方法中蜂胶含量不超过25％；发明专利200610016805.6所公开的方法中蜂胶含量不超过20％；因为水溶蜂胶的制备技术没有得到实质性的突破，严重制约了产品的深层次开发。因此，制备真正能够溶解于水中，而不是借助于化学助剂助溶的固体水溶蜂胶是当前蜂胶产品深加工研究中的热点和难点。 

由于蜂胶是黑褐色的块状固体，而高浓度乙醇蜂胶提取物亦为褐色粉末或黑褐色固体，在化妆品中添加极少量的蜂胶不足以发挥蜂胶的生物活性，而有效剂量的添加又使得产品的颜色呈棕褐色，不令人满意；而且蜂胶的水不溶性使其在化妆品中难以均匀分散，虽然用乙醇作为溶剂可以使蜂胶很好的溶解，但乙醇的使用对皮肤有很大的损害，以上缺陷使蜂胶在化妆品应用上受到了很大限制。目前国内外未见浅色蜂胶的报道，浅色蜂胶是蜂胶产品深加工研究中的创新。 

采用本发明的方法制得的固体水溶蜂胶和浅色蜂胶其蜂胶含量为100％，不含任何助剂和辅料，处理条件温和，保持其天然有效成分，具有很好的生物活 性。采用本发明的方法处理后还可以继续用现有技术提取蜂胶中其他的有效成分，因此能充分利用蜂胶资源。 

发明内容

本发明的目的之一是提供一种水溶性蜂胶提取物和一种浅色蜂胶提取物。二提取物均为100％蜂胶精华，不含任何有害物质和制剂辅料，具有抑制口腔致病菌，特别是产臭菌，抗氧化等多方面的医疗保健作用。除此之外，水溶性蜂胶提取物的特点是具有相当好的水溶解性，在水中极易溶解，充分发挥蜂胶的生物活性，生物利用度高；浅色蜂胶提取物的特点是颜色鲜黄，可以轻易添加到有效剂量而不必担心产品的颜色成为让人不能接受的棕色或深棕色。 

本发明的目的之二是提供一种水溶性蜂胶提取物和浅色蜂胶提取物的制备方法，该方法根据蜂胶的提取特性，选择适宜比例的含水乙醇进行提取，一步提取两种蜂胶提取物，工艺过程简单，提取条件温和，成型过程中无需添加化学助剂，保证了提取物的天然特性和生物活性。 

本发明的目的之三是提供用本发明方法提取的水溶性蜂胶和浅色蜂胶为原料制备的各类产品，特别是在化妆品、口腔保健品等方面的用途。 

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下： 

取蜂胶原料(毛胶)粉碎(约20目)，加含水乙醇溶液恒温搅拌浸提2～4次或热回流提取1～2次，提取液合并过滤，减压浓缩，回收乙醇得浓缩液，低温静置或离心分离沉淀，沉淀经水洗后干燥为粉末状浅色蜂胶提取物(简称浅色蜂胶)；上清液及水洗液减压浓缩，干燥即得到粉末状水溶性蜂胶提取物(简称水溶蜂胶)。 

水溶性蜂胶提取物为红褐色粉末，具有蜂胶的芳香味，易潮解；总酚酸含 量高达40％以上。水溶性蜂胶提取物其特征在于具有抑制口腔致病菌(特别是产臭菌)、抗氧化等功能，具有在化妆品、保健品和食品添加剂方面的新用途。因其具有良好的水溶性，特别适合制成口含片、漱口水等口腔制剂和口服液、冲剂等内服制剂，亦可用于各种常规制剂，如片剂、胶囊剂、液体制剂等。 

浅色蜂胶提取物为黄色粉末，具有蜂胶的芳香味，其总黄酮含量高于高浓度乙醇提取物。浅色蜂胶提取物其特征在于具有抑制口腔致病菌(特别是产臭菌)、抗氧化等功能，具有在化妆品、保健品和食品添加剂方面的新用途。因其颜色亮黄，特别适合制成各种化妆品，亦可用于各种常规制剂，如片剂、胶囊剂、液体制剂等。 

本发明提供的水溶性蜂胶和浅色蜂胶的提取方法中所用溶剂为含水乙醇。乙醇为无毒有机溶剂，安全性高。通过调整乙醇与水的比例，改变溶剂的极性提取得到蜂胶中极性大的和颜色浅的有效成分。本发明提供的蜂胶提取方法，一步提取可得到两种不同的提取产物，最后经过真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥得到含一种或多种有效成分的粉末状水溶性蜂胶提取物和浅色蜂胶提取物。提取后的渣滓可以进行常规提取，非常经济实用。 

在本发明制得的粉末状的水溶性蜂胶和浅色蜂胶提取物中，可以根据需要加入适当的赋形剂及其它添加剂制成咀嚼用的口香糖、含漱用的漱口水和含服的口含片，也可以加入牙膏基本原料内制成功效牙膏。对口腔致病菌有抑制作用，对预防龋齿、牙周炎、牙龈炎、口腔溃疡有良好功效；亦可作为添加剂制成各种具有功效的化妆品。 

本发明的优点在于： 

1、原料易得，所得提取物不含任何有害物质和化学助剂，具有抑制口腔致 病菌、抗氧化等多方面的医疗保健功能。 

2、根据蜂胶中各种有效成分的溶解特性，采用含水乙醇进行提取，通过调整醇水比例，提取得到蜂胶中水溶性有效成分和颜色鲜亮的有效成分，其工艺过程简单，无污染、无残留。 

3、溶解性好。水溶性蜂胶提取物在水中能够完全溶解，溶解度大，无须添加任何化学助剂，保证产品的安全性。 

4、刺激性小。水溶性蜂胶为固体粉末，可用水作为溶剂制成各种液体制剂，在减少传统的蜂胶醇溶液体制剂带来的酒精过敏方面有很大优势，尤其在口腔制品中，可避免蜂胶醇溶液体制剂对口腔粘膜的刺激。 

5、颜色鲜亮。浅色蜂胶提取物为黄色粉末而非常规提取方法所得到的褐色粉末，具有良好的视觉感。 

5、扩大了适用范围。水溶性蜂胶提取物可制备各种水溶制剂，易于被机体吸收。浅色蜂胶提取物特别适用于各种化妆品的制备，可轻易的添加到有效剂量而不会使产品呈现褐色或深褐色。两种提取物特别适用于保健品、化妆品和食品添加剂。 

附图说明

图1为本发明方法的简单工艺流程图。 

为了更好地理解发明的实质，下面用实施例来详细说明本发明的技术内容，应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。 

实施例1本发明方法的一个实例 

取蜂胶原料(毛胶)，用含水乙醇为溶剂，固液比(重量比)为1∶10，调整乙醇浓度为20％，加热回流提取2次，每次1h，合并提取液，减压脱醇，浓缩 液冷藏静置，分离沉淀，上清液浓缩，分别干燥即得浅色蜂胶和水溶蜂胶。 

实施例2本发明方法的一个实例 

取蜂胶原料(毛胶)，用含水乙醇为溶剂，固液比(重量比)为1∶8，调整乙醇浓度为40％，恒温搅拌提取4次，每次24h，合并提取液，减压脱醇，浓缩液冷藏静置，分离沉淀，上清液浓缩，分别干燥即得浅色蜂胶和水溶蜂胶。 

实施例3水溶蜂胶和浅色蜂胶的抑菌作用 

经抑菌实验证实，用本发明制备的提取物具有良好的药理学活性，可以抑制口腔致病菌，尤其是产臭菌的生长，对3种常见口腔致病菌均有不同程度的抑制作用：牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis简称P.g)、粘性放线菌(A.viscosus简称A.v)和变形链球菌(S.mutans简称S.m)。采用杯碟法进行抑菌实验，连续倍数稀释15个浓度，测定样品对各菌种的抑菌环直径，确定最低抑菌浓度(MIC)，结果表明，本发明制备的提取物对3种口腔致病菌都有显著的抑制作用，尤其是对牙周炎致病菌及产臭有明显的抑制效果。 

实施例4浅色蜂胶的色度学测定 

采用SMY-2000SF型测色色差计对本发明制备的浅色蜂胶和常规提取的精制蜂胶(75％乙醇或95％乙醇提取的)进行色度学测定。以明度指数(L^*)，红绿轴色品指数(a^*)和黄蓝轴色品指数(b^*)为测定指标。明度指数(L^*)表示黑白，0为黑色，100为白色；红绿轴色品指数(a^*)正值为红色，负值为绿色；黄蓝轴色品指数(b^*)正值为黄色，负值为蓝色。所有颜色用L^*、a^*和b^*表示，以浅色蜂胶为标样，比较75％醇提蜂胶和95％醇提蜂胶的颜色差异。试样与标样的L^*、a^*和b^*之差，用ΔL^*，Δa^*和Δb^*表示，ΔE^*表示总色差。 

${\mathrm{\ΔE}}^{*}=\sqrt{{\left({\mathrm{\ΔL}}^{*}\right)}^2+{\left({\mathrm{\Δa}}^{*}\right)}^2+{\left({\mathrm{\Δb}}^{*}\right)}^2}$

ΔL^*为正，说明试样比标样浅，为负，说明试样比标样深；Δa^*为正，说明试样比标样红(或少绿)，为负，说明试样比标样绿(或少红)；Δb^*为正，说明试样比标样黄(或少蓝)，为负，说明试样比标样蓝(或少绿)。测定结果如下： 

结果表明，浅色蜂胶颜色最浅，L^*值最大，95％醇提蜂胶最接近于黑色；b^* 值表明，浅色蜂胶最接近于黄色，而95％醇提蜂胶最接近于蓝色；a^*值75％醇提蜂胶最低而浅色蜂胶和95％醇提蜂胶相近，总色差ΔE^*显示浅色蜂胶的色调与75％和95％醇提蜂胶色调有极显著差异。 

实施例5水溶蜂胶在口腔保健品中的应用 

将水溶蜂胶应用到口腔护理中，主要是利用其抑菌消炎、清新口气的作用。可制备成防龋消炎漱口水，制备工艺如下： 

本发明水溶性蜂胶                  0.5-15重量份 

甜味剂                            0.01-0.5重量份 

香精(薄荷、香橙、水蜜桃、香兰精)  0.01-0.5重量份 

蒸馏水                            加至100重量份 

将上述基料加入蒸馏水中搅拌混匀，最后加入蒸馏水定容，搅拌均匀，0.22μ膜除菌。因蜂胶具有防腐作用，无须添加防腐剂或减量添加食用防腐剂。 

本发明亦可将水剂改为口含片，即用山梨醇、甘露醇、淀粉等代替蒸馏水作为填充剂，制备成防龋消炎口含片，其制备工艺如下： 

本发明水溶性蜂胶                   0.5-15重量份 

甜味剂                               0.01-0.5重量份 

香精(薄荷、香橙、水蜜桃、香兰精)     0.01-0.5重量份 

硬脂酸镁                             0.1-0.5重量份 

山梨糖醇                             加至100重量份 

常规制粒，即可压成各种形状的口含片。 

本发明水溶性蜂胶还可加入牙膏基质中制备成功效牙膏，其制备工艺如下： 

本发明水溶性蜂胶                     0.1-5重量份 

甘油                                 20-35重量份 

羧甲基纤维素钠                       1-3重量份 

十二烷基硫酸钠                       1-3重量份 

碳酸钙                               40-50重量份 

去离子水                             余量 

本发明制品使用的活性成分为水溶性蜂胶提取物，成分天然，无毒副作用，经常使用不会产生负面作用，不刺激口腔黏膜，通过水溶性蜂胶对口腔致病菌及产臭的抑制作用，可达到防龋、消炎、除臭、清新口气的效果，十分简便、对防治口腔疾病有效。 

实施例6浅色蜂胶在化妆品中的应用 

本发明浅色蜂胶可加入化妆品基质中制备各种膏霜，营养美容露(霜)的重量百分组成为：制备各种膏霜，营养美容露(霜)的重量百分组成为： 

蜂蜡                                  13～17重量份 

精制地蜡                              13～17重量份 

凡士林                        15～20重量份 

羊毛脂                        3～7重量份 

橄榄油                        8～12重量份 

聚氧乙烯山梨糖醇单月桂酸酯    2～6重量份 

香料                          0.1～1重量份 

浅色蜂胶                      0.5～5.0重量份 

水                            加至100重量份。 

在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。 

Claims (13)

1.具有生物活性的浅色蜂胶提取物，其特征在于，采用先取蜂胶原料粉碎，加10～60％的乙醇溶液提取2～4次，溶剂的用量按重量计，每次提取所用的溶剂不低于4倍量，提取液合并滤过，减压回收乙醇得浓缩液，静置得到沉淀和上清液，沉淀水洗后干燥即得到固体浅色蜂胶提取物。

2.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，所述蜂胶原料为采用过20目筛的粗粉。

3.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，所述乙醇溶液浓度为20～50％。

4.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，所述提取所用溶剂的用量为4～10倍量。

5.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，提取方法为热回流、浸提方法。

6.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，提取时间控制在1～48小时。

7.如权利要求6所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，提取时间控制在10～30小时。

8.如权利要求7所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，提取时间控制在20～24小时。

9.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，滤过时采用离心过滤和板框过滤。

10.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，浓缩液经常温静置5～48小时。 

11.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，浓缩液经4～10℃静置15～24小时。

12.如权利要求1所述的浅色蜂胶提取物，其特征在于，干燥方式采用真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。

13.具有生物活性的水溶性蜂胶提取物，其特征在于，采用先取蜂胶原料粉碎，加10～60％的乙醇溶液提取2～4次，溶剂的用量按重量计，每次提取所用的溶剂不低于4倍量，提取液合并滤过，减压回收乙醇得浓缩液，静置得到沉淀和上清液，沉淀水洗后，合并上清液和水洗液，减压浓缩干燥，即得到固体水溶性蜂胶提取物。