CN101045071A - 一种灵芝孢子的破壁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种灵芝孢子的破壁方法，旨在提供一种效率高、成本低、破壁率高、适合中试和规模化生产的孢子破壁方法，技术要点包括下述步骤：(1)将灵芝孢子粉加入水中并分散均匀形成混合液，混合液中灵芝孢子粉的重量百分含量低于2％；(2)使混合液进入超高压细胞破碎机内进行破壁处理，混合液加压压力190MPa以上；本发明的方法用于灵芝孢子、花粉的破壁处理。
Description
技术领域
本发明涉及一种灵芝孢子的破壁方法。
背景技术
灵芝孢子粉是灵芝发育后期弹射释放出来的种子，生物学上称为担孢子，集中起来后呈粉末状，通称灵芝孢子粉。每个灵芝孢子的直径只有5～8微米，孢子的孢壁坚韧，表面光滑，孢壁主要成分为几丁质、纤维素、木质素等高分子成分，不溶于水，且耐酸、耐碱，耐压、耐温，对消化酶也稳定，直接使用孢子粉其有效成分难于提取，生物利用率低。为充分利用灵芝孢子粉的有效物质，必须对孢子进行破壁处理。对灵芝孢子的破壁方法，国内相关单位和个人进行了大量的研究，方法也多种多样，如中国专利CN95111019.5采用低温浸泡48～72小时，分离后烘干、再进行微波加热破壁；中国专利CN96115298.2采用浸泡加酶解1～10小时，然后经2～5次的冷冻、融化处理破壁；又如中国专利CN00135195.8采用连续干式滚动研磨进行破壁处理，中国专利CN00136003.5采用气流磨机加超音速气流进行破壁处理；上述的前面四种方法普遍存在成本高、效率低的不足，后一种方法所使用的设备复杂。本发明的申请人在对超高压细胞破碎机的研究中，对现有的超高压细胞破碎机进行了深入的研究，改进了进、出液方式，并提出了“超高压细胞破碎装置”(申请号：200620059195.8，申请日：2006年05月22日)、“一种超高压细胞破碎装置”(申请号：200620059198.1申请日：2006年05月22日)的实用新型专利申请和“一种平面式单向阀”(申请号：200610123691.x，申请日：2006年11月22日)的发明专利申请，还发现利用改进的超高压细胞破碎机对灵芝孢子粉进行破壁处理，具有很好的效果。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种效率高、成本低、破壁率高、适合中试和规模化生产的灵芝孢子的破壁方法。
本发明的技术方案是这样的：一种灵芝孢子的破壁方法，包括下述步骤：(1)将灵芝孢子粉加入水中并分散均匀形成混合液，混合液中灵芝孢子粉的重量百分含量低于2％；(2)使混合液进入超高压细胞破碎机内进行破壁处理，混合液加压压力190MPa以上。
上述的灵芝孢子的破壁方法中步骤(1)灵芝孢子粉的分散方法是将混合液进入超高压细胞破碎机进行均质处理一次，液体加压压力为80～120MPa，这样处理的混合液分散均匀，有利进一步破壁处理。
上述的灵芝孢子的破壁方法中步骤(2)中混合液采用2～3次破壁处理，可以达到超过90％的破壁率。
上述的灵芝孢子的破壁方法中步骤(1)前将灵芝孢子粉过400目筛，以除去孢子粉中杂质。
本发明的方法与现有技术相比，具有下述优点：
(1)本发明的方法是利用超高压细胞破碎机内的破壁阀(均质阀)对灵芝孢子的剪切、空穴、碰撞效应，破壁两次的破壁率可达到80％以上，三次破壁达95％以上，破壁的效果好。
(2)处理效率高，如采用12L/小时流量的超高压细胞破碎机，平均每2～3小时可处理灵芝孢子粉240g。
(3)破壁的温度可以低于12℃，可保证灵芝孢子粉的有效成分不受温度的破坏。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
实施例
超高压细胞破碎机(均质机)规格：流量12L/小时，最高压力250MPa。
样品处理：先将灵芝孢子粉过400目筛，以除去杂质；按实验设计称取灵芝孢子粉后置于容器内，按重量比例加入蒸馏水并搅拌混匀；将混合液进入超高压细胞破碎机内进行均质处理一次，液体加压压力80～120MPa。
样品处理液的制备及孢子计数：用超高压在一定的破碎压力下对混匀的样品原液进行破碎处理，然后用血球计数板依次对破碎后的样品处理液中的灵芝孢子进行计数，按对角线法取5个大格为1个计数单位，每个样品处理液的计数单位灵芝孢子数是取3个计数单位的平均值。如果在血球计数板的视野中出现大量灵芝孢子难于计数时，就必须对其样品处理液进行稀释处理，而这时的样品处理液的计数单位灵芝孢子数是取3个单位的平均值再乘以稀释倍数。
实验共分6组，每组灵芝孢子粉的含量分别为3g、5g、7g、9g、15g、20g。
实验结果见表1。
表1 不同含量和压力下灵芝孢子粉的破壁率
| 序号 | 孢子粉∶水 | 匀质压力(MPa) | 破壁次数 | 破壁压力(MPa) | 破壁率 |
| 1 | 3g∶1000ml | 80 | 第一次 | 190 | 0.5346 |
| 第二次 | 190 | 0.8368 | |||
| 2 | 5g∶1000ml | 100 | 第一次 | 200 | 0.6198 |
| 第二次 | 200 | 0.8459 | |||
| 第三次 | 200 | 0.9610 | |||
| 3 | 7g∶1000ml | 120 | 第一次 | 220 | 0.5902 |
| 第二次 | 220 | 0.8254 | |||
| 4 | 9g∶1000ml | 100 | 第一次 | 230 | 0.5629 |
| 第二次 | 230 | 0.8302 | |||
| 第三次 | 230 | 0.9547 | |||
| 5 | 15g∶1000ml | 100 | 第一次 | 230 | 0.5469 |
| 第二次 | 230 | 0.8212 | |||
| 6 | 20g∶1000ml | 100 | 第一次 | 230 | 0.5142 |
| 第二次 | 230 | 0.8119 |
从表1可以看出，本发明的灵芝孢子的破壁方法中，不同的破壁次数对总体的破壁率的影响十分明显，破壁一次的破壁率只能在51.42％到61.98％之间，而破壁两次的破壁率均超过80％，最高能够达到84.59％，说明两次破壁的效果比一次破壁的效果高出许多。实验中还对浓度为0.5％和0.9％的两个样品进行了三次破壁处理，其破壁率分别为96.10％，95.47％，说明破壁的次数越多其破壁率越高，但考虑到生产成本及周期，以破壁2～3次为佳。
由于花粉的结构与灵芝孢子类似，本申请的发明人还利用上述方法对花粉(松花粉、蜂花粉)进行了破壁处理，其效果也非常理想，连续两次破壁处理后的破壁率可达85％以上，说明本发明的方法也可用于花粉的破壁处理。
Claims (4)
1.一种灵芝孢子的破壁方法，其特征是包括下述步骤：(1)将灵芝孢子粉加入水中并分散均匀形成混合液，混合液中灵芝孢子粉的重量百分含量低于2％；(2)使混合液进入超高压细胞破碎机内进行破壁处理，混合液加压压力190MPa以上。
2.根据权利要求1所述的灵芝孢子的破壁方法，其特征是步骤(1)灵芝孢子粉的分散方法是将混合液进入超高压细胞破碎机进行均质处理一次，液体加压压力为80～120MPa。
3.根据权利要求1所述的灵芝孢子的破壁方法，其特征是步骤(2)中混合液采用2～3次破壁处理。
4.根据权利要求1所述的灵芝孢子的破壁方法，其特征是步骤(1)前将灵芝孢子粉过400目筛。
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