CN101024849A - 一种辅酶q10的光合细菌生产法 - Google Patents

一种辅酶q10的光合细菌生产法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种辅酶Q10的光合细菌发酵法。其特征在于利用DNA重组技术构建、筛选高产辅酶Q10光合细菌菌株，同时，采用化学物质或紫外线致突变，利用类胡萝卜素合成抑制剂和生长抑制剂筛选高产辅酶Q10光合细菌突变体，实现高产辅酶Q10菌株的选育和培育。此外，采用超临界萃取，保证了生理活性物质的活性。本发明从根本上提高了光合细菌微生物发酵制取辅酶Q10的发酵产率，提高了产品质量，解决了微生物发酵法发酵产率低、产品质量不稳定的瓶颈问题。

Description

一种辅酶Q10的光合细菌生产法
技术领域：
本发明涉及一种辅酶Q10的光合细菌生产法。
背景技术：
随着辅酶Q10在医药、保健品和食品领域越来越广泛的应用，世界市场对辅酶Q10原料需求不断增加。目前，国外辅酶Q10生产技术已趋于成熟，而国内掌握辅酶Q10制造技术，尤其微生物发酵技术的厂家寥寥无几.随着国内市场对辅酶Q10需求量的不断增加，国内辅酶Q10产品出现了供不应求的状况.因此，有必要研发拥有自主知识产权的微生物发酵制备辅酶Q10的技术，缓解国内的需求矛盾，进一步推动辅酶Q10在国内生物制药行业、保健品和食品领域的应用。
发明内容：
本发明的目的是建立高产辅酶Q10光合细菌微生物发酵法，包括菌种的筛选、培育以及辅酶Q10的萃取工艺。
本发明的目的是这样实现的：
首先利用诱变剂(紫外线或亚硝基胍)处理光合细菌菌液，并对突变株中辅酶Q10含量检测。随后利用含类胡萝卜素合成抑制剂对辅酶Q10含量高的菌株进行培养。通过不断筛选和培养，找到生长快、辅酶Q10含量高的突变菌株，并进行菌株保存。
其次对光合细菌进行基因工程育种。从光合细菌中提取、分离、鉴定对羟基苯甲酸∶聚异戊二烯焦磷酸转移酶基因，构建含有光合细菌对羟基苯甲酸∶聚异戊二烯焦磷酸转移酶基因的质粒，再转化光合细菌菌种，增加上述基因的拷贝数，并使之超量表达，提高辅酶Q10的产率。
最后对辅酶Q10进行超临界萃取。将光合细菌菌体(干或湿)依次放入萃取斧、分离斧，最后得到萃取产物辅酶Q10。
本发明由于根采用了诱变育种和基因工程育种技术，提高了光合细菌发酵法的发酵产率，极大地提高了辅酶Q10的产量。同时采用先进的萃取技术，保证了萃取物优良的生物活性，产品品质稳定。
具体实施方式：
实施例：
首先对光合细菌进行诱变育种：光合细菌菌液→诱变剂(紫外线或亚硝基胍)处理→突变株中辅酶Q10含量检测→含类胡萝卜素合成抑制剂的平板培养法培养→筛选辅酶Q10含量高的突变株→含生长抑制剂的平板培养法培养→筛选生长快辅酶Q10含量高的突变菌株→菌株保存。
其次对光合细菌进行基因工程育种：从光合细菌中提取分离目的基因→目的基因插入质粒→质粒电脉冲转化光合细菌→基因工程菌株的扩大培养→菌株中辅酶Q10含量测定→目的基因表达产物定量检测→菌种保存。
最后是光合细菌辅酶Q10进行超临界萃取：光合细菌菌体(干或湿)→进入萃取斧→调整工艺参数(压力、温度、流量、萃取时间)→分离斧→剂型配制→辅酶Q10提取率计算→确定最优化的萃取工艺参数。

Claims (1)

1、本发明涉及一种辅酶Q10的光合细菌发酵法，其特征在于利用DNA重组技术构建、筛选高产辅酶Q10光合细菌菌株，同时，采用化学物质或紫外线致突变，利用类胡萝卜素合成抑制剂和生长抑制剂筛选高产辅酶Q10光合细菌突变体，实现高产辅酶Q10菌株的选育和培育。此外，采用超临界萃取，保证了生理活性物质的活性。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101591685B (zh) * 2008-05-30 2012-05-30 中国农业大学 一种超临界co2条件下微生物转化制备辅酶q10的方法
CN103196860A (zh) * 2013-03-06 2013-07-10 厦门金达威集团股份有限公司 辅酶q10高产菌株选育快速筛选的方法

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WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

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