CN101023953A - 治疗支气管哮喘的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗支气管哮喘的药物组合，特别是将甘草酸、甘草次酸包括其可接受的盐与β₂肾上腺素受体激动剂类化合物组合，从而在提高激动剂的药效。要缓解哮喘症状，需要降低气道的高反应性、控制气道粘膜的炎症，β₂肾上腺素受体激动剂是治疗哮喘的基本药物。本发明目的是提供一种治疗支气管哮喘组合物的技术方案，它主要由β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类两种活性成分组成，可制成复方气雾剂、喷雾剂、粉雾剂和片剂，用于有效的治疗支气管哮喘。具体的技术方案如下：本发明的有益效果：组合物具有较宽的比例范围，使用时比单独使用激动剂类药物平喘效果更显著。本发明用药量范围较大，疗效持续时间长，综合效果好，使用方便。

Description

治疗支气管哮喘的组合物

技术领域

本发明涉及一种治疗支气管哮喘的药物组合，特别是将甘草酸、甘草次酸包括其可接受的盐与β₂肾上腺素受体激动剂类化合物组合，从而在提高激动剂的药效，同时也对细胞起到一定程度的保护作用。此组合物可制成复方气雾剂、喷雾剂、粉雾剂和片剂，有效的缓解支气管哮喘患或喘息型支气管炎伴有支气管痉挛的病症。

背景技术

支气管哮喘是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道炎症，易感患者因此种炎症可引起反复发作的喘息、气促、胸闷和/或咳嗽等症状。因此，要缓解哮喘症状，需要降低气道的高反应性、控制气道粘膜的炎症。

β₂肾上腺素受体激动剂具有扩张支气管的药理作用。β₂肾上腺素受体是以鸟苷酸结合调节蛋白质-腺苷酸环化酶为效应器，通过提高细胞内cAMP水平，并以此为第二信使，启动级联反应，而产生生物效应。能使细胞内的第二信使cAMP升高，cGMP降低，使支气管平滑肌受细胞内cAMP/cGMP的比值增大的药物，均可使支气管平滑肌张力降低，产生扩张支气管的作用。β₂肾上腺素受体激动剂通过激活平滑肌细胞上的腺苷酸环化酶，而使cAMP增加，从而导致细胞内贮存部位的蛋白质磷酸化摄取Ca²⁺，使Ca²⁺进入结合状态，胞内游离Ca²⁺减少，平滑肌收缩蛋白系统兴奋性下降，肌肉松弛。β₂肾上腺素受体激动剂尚可激活肥大细胞等致敏细胞上的腺苷酸环化酶，使细胞内cAMP增加，游离Ca²⁺减少，因此能稳定细胞膜，从而抑制了过敏反应介质如组胺，慢性反应物质5-羟色胺、缓激肽和嗜酸性细胞趋化因子(ECF-A)等的释放。这不仅有利于解除支气管平滑肌痉挛，还能减轻或消除支气管粘膜的充血和水肿。β₂肾上腺素受体激动剂也可以影响细胞膜K⁺通道，从而促进了即使cAMP浓度未增加情况下的平滑肌松弛。哮喘发作时β₂肾上腺素受体功能往往降低，而α受体功能相对亢进。由于气道平滑肌上β₂肾上腺素受体占相对优势，因此构成了β₂肾上腺素受体激动剂治疗哮喘的物质基础。

β₂肾上腺素受体激动剂分非选择性和选择性两大类。前者包括麻黄碱(ephedrine)、肾上腺素(adrenaline)、异丙肾上腺素(Isoprenaline)等，后者又分中效和长效两种。中效β₂肾上腺素受体激动剂代表药物有沙丁胺醇(salbutamol)、特布他林(terbutaline)、氯丙那林(chlorprenaline)、克仑特罗(clenbuterol)等。长效β₂肾上腺素受体激动剂代表药物有沙美特罗(salmeterol)、福莫特罗(formoterol)、马布特罗(mabuterol)、班布特罗(bambuterol)等。

甘草酸(glycyrrhizic acid，甘草甜素)是甘草中最重要的有效成分之一。研究证实，甘草酸具有肾上腺皮质激素样、抗炎、抗病毒、解毒及增强免疫功能等作用。由于甘草酸有糖皮质激素样药理作用而无严重不良反应，临床被广泛用于治疗各种急慢性肝炎、支气管炎和艾滋病，还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。抗炎是甘草酸类最主要的药理作用，抗炎机理与抑制前列腺素等介质的作用有关。抗病毒作用也是甘草酸类的主要药理作用之一。近年来，有关甘草酸、以及其甙原甘草次酸(glycyrrhetic acid)对肝炎病毒、艾滋病毒及其它病毒的作用研究和应用，取得了较好的效果，甘草酸具有高甜度、低热量、起泡性和溶血作用很低、安全无毒和医疗保作用较强等优良特性，甘草甜素片已正式在临床上用于治疗乙肝病人。甘草酸类具有非特异性免疫调节作用，其主要是增强细胞免疫作用，还可选择性地增强辅助性T淋巴细胞的增殖能力和活性。另外甘草酸还具有降血脂与抗动脉粥样硬化作用，阻止动脉粥样硬化的形成，近年药理实验发现，甘草次酸对家兔或大鼠实验性动脉粥样硬化有极显著的降低血中胆固醇、β-脂蛋白及甘油三酯的作用，且其强度超过抗动脉硬化药。

甘草这种药材出现在很多中医药方中，根据中医理论甘草起着调和诸药的作用，加入甘草促进其它药物成分发挥更好的治疗效果。本发明经过细胞以及体外药理实验，证明甘草酸、甘草次酸及其单铵盐对于β₂肾上腺素受体激动剂对受体的激活有增强作用，同时也对细胞及受体有一定的保护作用，能抑制受体脱敏。因此，将甘草酸以及甘草次酸与β₂肾上腺素受体激动剂联合使用，比单独使用激动剂类药物疗效更好，也可减轻部分副作用，缓解支气管哮喘等呼吸系统疾病患者的病痛。

发明内容

本发明目的是提供一种治疗支气管哮喘组合物的技术方案，它主要由β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类两种活性成分组成，可制成复方气雾剂、粉雾剂、喷雾剂和片剂，用于有效的治疗支气管哮喘。具体的技术方案如下：

这种治疗支气管哮喘的组合物，它主要由β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类两种组分组成，其特点在于它的组分及其重量百分比如下：

(1)第一个活性成分，它是一种β₂肾上腺素受体激动剂及其盐，其重量百分比为：90.0～0.1％；

(2)第二个活性成分，它是甘草酸或甘草次酸以及其可接受的盐：其重量百分比为90.0～0.1％；

(3)一种或多种可药用的非活性成分：其重量百分比为1.0～99.8％；

其中，(1)与(2)的重量比为1∶0.1～100，(1)+(2)+(3)的重量百分比的和为100％。

这种治疗支气管哮喘的组合物的制备方法，它要经过下属3个步骤：

(1)制备复方气雾剂或喷雾剂组合物；

(2)制备复方粉雾剂组合物；

(3)制备复方片剂型组合物

本发明的有益效果：本发明中包括对第一个活性成分与第二个活性成分的药理性质反复进行了研究。结果表明β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸或甘草次酸及其单铵盐的组合物具有较宽的比例范围，组合使用时比单独使用激动剂类药物平喘效果更显著。本发明用药量的可选范围较大，疗效持续时间长，综合效果好，使用方便。

附图说明

图1：甘草酸与β₂肾上腺素受体激动剂联合使用的效果考察，

图2：甘草次酸对沙丁胺醇脱敏的细胞保护作用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步说明：

这种治疗支气管哮喘的组合物，它主要由β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类两种组分组成，其特点在于它的组分及其重量百分比如下：

(1)一个活性成分，它是一种β2肾上腺素受体激动剂及其盐，其重量百分比为：90.0～0.1％；

(2)第二个活性成分，它是甘草酸或甘草次酸以及其可接受的盐：其重量百分比为90.0～0.1％；

(3)一种或多种可药用的非活性成分：其重量百分比为1.0～99.8％；

其中，(1)与(2)的重量比为1∶0.1～100，(1)+(2)+(3)的重量百分比的和为100％。

所述的第一个活性成分衍生自β₂肾上腺素受体激动剂是：沙丁胺醇、特布他林、氯丙那林、克仑特罗、沙美特罗、福莫特罗、马布特罗、班布特罗；以及肾上腺素、异丙肾上腺素、辛弗林、麻黄碱等。

所述的第一个活性成分衍生自β₂肾上腺素受体激动剂的盐是：氯化物、溴化物、硫酸盐、磷酸盐、羟萘酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、4-甲氧基苯甲酸盐、2-或4-羟基苯甲酸盐、4-氯苯甲酸盐、对甲苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、抗坏血酸盐、乙酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、戊二酸盐、丙三羧酸盐、羟基萘甲酸盐或油酸盐或其溶剂化物。

所述的第二个活性成分是：甘草酸和甘草次酸，包括其可接受的盐，如单胺盐、二胺盐。

所述的一种或多种可药用的非活性成分是：

稀释剂：乳糖、葡聚糖、阿拉伯胶、甘露糖醇、葡萄糖、淀粉、糊精、微细纤维素；

抛射剂：三氯一氟甲烷CCl₃F、二氯二氟甲烷CCl₂F₂、二氯四乙烷CClF₂-CClF₂、丙烷C₃H₈、异丁烷iso-C₄H₁₀、正丁烷n-C₄H₁₀、二氧化碳、一氧化二氮、氮气；

潜溶剂：甘油、丙二醇、聚乙二醇；

抗氧化剂：维生素C、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠；

润滑剂：硬脂酸镁、滑石粉；

粘合剂：水、淀粉浆、PVP、明胶；

崩解剂：干淀粉、羧甲基淀粉钠、海藻酸钠；

矫味剂：甜菊糖甙、低聚麦芽糖、乳糖、食用香精。

这种治疗支气管哮喘的复方制剂的制备方法，其特点在于它要经过下属步骤：

(1)将处方量的抗氧化剂、矫味剂加入潜溶剂中，搅拌加热溶解，并加入处方量的β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类药物，继续搅拌，使原料溶解，砂芯漏斗过滤；将溶解好的药液分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入抛射剂，即得复方气雾剂或喷雾剂组合物；

(2)将处方量的β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类药物粉末与处方量的稀释剂、润滑剂、抗氧化剂等混合，用流能磨对药物进行充分微粉化处理后，将载药粉末灌装至胶囊，即得复方粉雾剂组合物；

(3)将处方量的β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类药物中加入处方量的稀释剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、抗氧化剂以及矫味剂，按常规方法混合、制粒，干燥后整粒压片；薄膜片可用成膜材料如纤维素类、聚乙二醇类按常规包衣；制片后分装入密闭瓶或铝塑板中，即得复方片剂组合物。

本发明中使用的活性成分可以制成粉雾剂，以干燥粉末的形式，例如微粒化的干燥粉末，粉末物质的中间直径小于10μm。更优选的为聚集的微粒化的干燥粉末，可以将细碎的活性成分与一个或多个可药用的非活性成分，如添加剂、稀释剂或载体等形成指定的混合物形式。本发明中使用的成分可以通过本领域技术人员已知的方法得到这些优选的形式。

本发明中使用的活性成分也可以制成气雾剂和喷雾剂，将活性成分与一个或多个药用的非活性成分，如添加剂、稀释剂、抛射剂或抗氧化剂混合形成指定的混合物形式。本发明中使用的成分可以通过本领域技术人员已知的方法得到这些优选的形式。

本发明中使用的活性成分也可以制成片剂，将活性成分与一个或多个药用的非活性成分，如稀释剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、抗氧化剂，以及矫味剂混合形成指定的混合物形式。按常规方法制粒，干燥后整粒压片。本发明中使用的成分可以通过本领域技术人员已知的方法得到这些优选的形式。

通过以下实例进一步说明本发明，但它并无意图限制申请的范围。本发明的组合物可以通过口或鼻内吸入给药。成分适合于从干燥粉末吸入器、加压的计量吸入器或喷雾器给药，也适合于进行气雾给药。在实例中微粒化以常规方式进行，以使每个组分的颗粒大小范围适合于吸入给药，或者是溶液形式，也以常规方式进行配制，制成普通溶液型或混悬液型，以便制成气雾剂或喷雾剂。本发明的组合物也可以制成普通片剂、缓释片、薄膜包衣片，通过口服给药。

实例1

硫酸沙丁胺醇    2.5g

甘草酸          22.5g

乙醇            750g

丙二醇          150g

二氯二氟甲烷    1500g

维生素C         8g

制备工艺：将处方量的硫酸沙丁胺醇和甘草酸加入搅拌均匀的维生素C、乙醇和丙二醇内，搅拌，在温水中加热，使原料溶解，砂芯漏斗过滤，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入二氯二氟甲烷，即得，理论灌装1000瓶，灌装收率在90％以上。经45-50℃水浴检漏30分钟，无泄漏。每瓶50揿，每揿含硫酸沙丁胺醇50μg，甘草酸450μg。

实例2

沙美特罗        2.5g

甘草次酸        11g

乙醇            750g

丙二醇          150g

二氯二氟甲烷    1500g

维生素C         7g

制备工艺：将处方量的沙美特罗和甘草次酸加入搅拌均匀的维生素C、乙醇和丙二醇内，搅拌，在温水中加热，使原料溶解，砂芯漏斗过滤，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入二氯二氟甲烷，即得，理论灌装1000瓶，灌装收率在90％以上。经45-50℃水浴检漏30分钟，无泄漏。每瓶50揿，每揿含沙美特罗50μg，甘草次酸220μg。

实例3

异丙肾上腺素    5g

甘草酸单铵盐    30g

乙醇            750g

甘油            150g

三氯一氟甲烷    1500g

维生素C         8g

制备工艺：将处方量的异丙肾上腺素和甘草酸单铵盐加入搅拌均匀的维生素C、乙醇和甘油内，搅拌，在温水中加热，使原料溶解，砂芯漏斗过滤，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入三氯一氟甲烷，即得，理论灌装1000瓶，灌装收率在90％以上。经45-50℃水浴检漏30分钟，无泄漏。每瓶50揿，每揿含异丙肾上腺素100μg，甘草酸单铵盐600μg。

实例4

辛弗林          2.5g

甘草酸单铵盐    24g

乙醇            750g

甘油            150g

二氯四氟乙烷    1500g

维生素C         8g

制备工艺：将处方量的麻黄碱和甘草酸单铵盐加入搅拌均匀的维生素C、乙醇和甘油内，搅拌，在温水中加热，使原料溶解，砂芯漏斗过滤，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入二氯四氟乙烷，即得，理论灌装1000瓶，灌装收率在90％以上。经45-50℃水浴检漏30分钟，无泄漏。每瓶50揿，每揿含辛弗林50μg，甘草酸单铵盐480μg。

实例5

克仑特罗       2.5g

甘草次酸       24g

乙醇           750g

甘油            150g

二氯四氟乙烷    1500g

焦亚硫酸钠      7.5g

制备工艺：将处方量的克仑特罗和甘草次酸加入搅拌均匀的焦亚硫酸钠、乙醇和甘油内，搅拌，在温水中加热，使原料溶解，砂芯漏斗过滤，分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入二氯四氟乙烷，即得，理论灌装1000瓶，灌装收率在90％以上。经45-50℃水浴检漏30分钟，无泄漏。每瓶50揿，每揿含克仑特罗50μg，甘草次酸480μg。

实例6

沙美特罗       50mg

甘草酸单铵盐   480mg

乳糖           25g

苯甲酸钠       125mg

制备工艺：将处方量沙美特罗、甘草酸单铵盐、乳糖、苯甲酸钠混合，用流能磨对药物进行充分微粉化处理后，将载药粉末灌装至胶囊，理论灌装1000粒胶囊，成品率90％以上。每粒胶囊内含微粉化的沙美特罗50μg和甘草酸单铵盐480μg、乳糖25mg、苯甲酸钠125μg。

实例7

硫酸沙丁胺醇    50mg

甘草酸单铵盐    600mg

甘露醇          25000mg

苯甲酸钠        125mg

制备工艺：将处方量硫酸沙丁胺醇、甘草酸单铵盐、甘露醇、苯甲酸钠混合，用流能磨对药物进行充分微粉化处理后，将载药粉末灌装至胶囊，即可，理论灌装1000粒胶囊，成品率90％以上。每粒胶囊内含微粉化的硫酸沙丁胺醇50μg和甘草酸单铵盐600μg、甘露醇25mg、苯甲酸钠125μg。

实例8

克仑特罗        70mg

甘草酸单铵盐    600mg

木糖醇           25g

硬脂酸镁         125mg

制备工艺：将处方量克仑特罗、甘草酸单铵盐、木糖醇、硬脂酸镁混合，用流能磨对药物进行充分微粉化处理后，将载药粉末灌装至胶囊，即可，理论灌装1000粒胶囊，成品率90％以上。每粒胶囊内含微粉化的克仑特罗70μg和甘草酸单铵盐600μg、木糖醇25mg、硬脂酸镁125μg。

实例9

羟萘酸沙美特罗    2.5g

甘草酸单铵盐      24g

乙醇              1000g

丙二醇            250g

焦亚硫酸钠        25g

制备工艺：将处方量的羟萘酸沙美特罗和甘草酸单铵盐加入搅拌均匀的乙醇、丙二醇内，搅拌，在温水浴中加热，使原料溶解，加入焦亚硫酸钠，搅拌使溶解混合均匀，砂芯漏斗过滤，分剂量灌装，冲入二氧化碳，即得，理论灌装1000瓶，实际灌装收率在90％以上。经45-50℃水浴检漏30分钟，无泄漏。每瓶50喷，每天使用两次，每喷含羟萘酸沙美特罗50μg，甘草酸单铵盐480μg。

实例10

硫酸沙丁胺醇      2.5g

甘草酸单铵盐      20g

淀粉              70g

淀粉浆(10％)      10g

硬脂酸镁          0.2g

制备工艺：将处方量的硫酸沙丁胺醇和甘草酸单铵盐加入稀释剂、粘合剂、润滑剂，搅拌混合均匀，按常规湿法制粒，干燥后整粒压片，即得，理论制备1000片。每天使用三次，每次1-2片，每片含硫酸沙丁胺醇2.5mg，甘草酸单铵盐20mg。

应用实例1.比较β₂肾上腺素受体激动剂与同甘草酸联合使用对受体活性的影响

一、实验目的：证明甘草酸可以增强β₂肾上腺素受体激动剂的敏感性

二、实验材料：

1、细胞株：CHO/d2EGFP/β₂AR细胞

此中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中含有d2EGFP绿色荧光蛋白报告基因，并且已经稳定表达了鼠β₂肾上腺素受体基因。当细胞膜表面的受体被激动剂刺激时，腺苷酸环化酶系统被激活，cAMP浓度升高，cAMP结合元件(CRE)被激活，从而激活其下游的启动子进行转录。d2EGFP就位于CRE下游，表达后细胞在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光。并且通过计算荧光强度，可以评价β₂肾上腺素受体对受体激动剂的敏感性。

2、实验仪器：细胞培养箱、倒置荧光显微镜、CCD图像采集系统

3、实验药品：肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、硫酸沙丁胺醇、麻黄碱、甘草酸

4、数据处理：荧光照片用Image Pro Plus 5.1图像处理软件分析荧光强度，将荧光强度数据用GraphPad Prism绘制不同激动剂的荧光-剂量曲线，由曲线得到其EC₅₀值。

三、试验方法：

在96孔培养板中培养CHO/d2EGFP/β₂AR细胞，长至80％满加入不同浓度的激动剂100μl，在37℃细胞培养箱中培养12小时，用倒置荧光显微镜观察并用CCD图像采集系统采集荧光照片，分析剂量曲线，并计算其EC₅₀值。

四、实验结果：

由图1及表1可见，添加甘草酸后，几种激动剂的EC₅₀值均有不同程度的减小，表明与甘草酸共同使用后，激动剂对受体的激活能力都得到增强。

表1：激动剂活化β₂肾上腺素受体的EC₅₀值

β2肾上腺素受体激动剂	EC50(nM)
				甘草酸的添加量(μM)	0	10	0.1
肾上腺素	74.76	11.54	14.20
				异丙肾上腺素	108.7	10.53	28.76
沙丁胺醇	51.13	7.310	50.18
				麻黄碱	5500	920.4	4315

与单独使用激动剂的条件相比较，分别向细胞加入10μM或0.1μM的甘草酸后，肾上腺素的EC₅₀值分别降低了63.22nM和60.56nM，异丙肾上腺素的EC₅₀值分别降低了98.17nM和79.94nM，沙丁胺醇的EC₅₀值分别降低了43.82nM和0.85nM，麻黄碱的EC₅₀值分别降低了4579.6nM和1185nM。

五、结论：

从细胞水平证明甘草酸对β₂肾上腺素受体激动剂的活性有促进作用，将二者联合作用于受体及细胞比单独使用激动剂更有效。在细胞中加入激动剂的同时分别加入10μM或0.1μM的甘草酸与单独使用激动剂比较，EC₅₀值都明显减小，表明活性都有所提高。其中，肾上腺素的活性分别增强了5倍和4倍，异丙肾上腺素的活性分别增强了9倍和3倍，沙丁胺醇的活性分别增强了5倍和0.02倍，麻黄碱的活性分别增强了6倍和1.3倍。

应用实例2考擦甘草次酸对沙丁胺醇刺激细胞的保护作用

一、实验目的：证明甘草次酸对沙丁胺醇脱敏的细胞具有保护作用

二、实验材料：

1、细胞株：细胞表面表达有鼠β₂AR的CHO细胞，CHO/β₂AR细胞

2、实验仪器：细胞培养箱、倒置荧光显微镜、CCD图像采集系统、酶标仪

3、实验药品：硫酸沙丁胺醇、甘草次酸、四甲基偶氮唑盐(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)

4、数据处理：数据成组t检验

三、试验方法：

在96孔培养板中培养CHO/β₂AR细胞，当长满至70％后加入浓度为1μM或10μM的沙丁胺醇(Salbutamol)，同时也加入不同浓度的甘草次酸(GA)，37℃细胞培养箱中培养24小时后，再次加入浓度为1μM或10μM的激动剂。于37℃温箱中再培养12小时后，每孔加入浓度为0.5mg/ml溶于培养基的MTT 100μl，37℃继续培养4小时，小心吸取培养基，每孔加入100μl DMSO溶解蓝色结晶物，振荡待结晶物完全溶解后用酶标仪测定490nm的OD值。

四、实验结果：

由图2可见，经过沙丁胺醇长时间刺激后，细胞存活率显著降低。当以10μM的沙丁胺醇刺激细胞，并同时加入10μM或100μM甘草次酸后，细胞存活率可以从29.2％增加至70.5％或84.2％。当以1μM的沙丁胺醇刺激的细胞，并同时加入1μM或10μM甘草次酸后，细胞存活率可以从33.4％增加至71.5％或75.2％。甘草次酸可以明显的提高沙丁胺醇作用后细胞的存活率，其结果有极显著差异。(P＜0.01)

六、结论：

与β₂肾上腺素受体激动剂单独使用相比，甘草次酸与激动剂同时作用于CHO/β₂AR细胞，可以显著提高细胞的存活率，表明甘草次酸对受体脱敏的细胞具有一定的保护作用，可以减小激动剂长期刺激对细胞造成的损伤。

应用实例3  比较沙丁胺醇/甘草酸单铵盐组合物对组织胺诱导的豚鼠哮喘发作的影响

一、实验目的：证明甘草酸与沙丁胺醇联合使用可以增强激动剂对哮喘的治疗效果

二、实验材料：

1、试验动物：选取体重200-250g豚鼠，由北京军事医学科学院提供；

2、实验仪器：医用超声波雾化器、5L玻璃罩

3、实验药品：2％氯化乙酰胆碱、0.1％磷酸组胺、硫酸沙丁胺醇、甘草酸单铵盐

4、数据处理：分组进行t检验、

三、试验方法：

取豚鼠放入喷有2％氯化乙酰胆碱和0.1％磷酸组胺混合物的玻璃罩12秒钟，观察豚鼠的引喘潜伏期。取合格豚鼠按需要分为6组，即对照组，沙丁胺醇的高、中、低剂量组，甘草酸单铵盐组，沙丁胺醇与甘草酸单铵盐混合组。次日，以气雾方法给予受试药物30秒，停止给药3分钟后，将豚鼠放入事先喷有2％氯化乙酰胆碱和0.1％磷酸组胺混合物的玻璃罩12秒钟，记录引喘潜伏期及抽搐发生率的变化。

四、实验结果：

由表2可见，联合使用沙丁胺醇和甘草酸单铵盐可明显延长磷酸组胺诱发的豚鼠哮喘发作潜伏期，减少抽搐发生率。与对照组，以及与单独使用甘草酸单铵盐组相比较差异显著，与单独使用同等剂量的沙丁胺醇组比较，也能够延长豚鼠哮喘发作潜伏期，减少抽搐发生率，作用更强，差异显著。

表2联合用药对磷酸组胺诱导哮喘发作的影响(n＝7，mean±SD)

给药内容		分组	给药计量(μg/ml)	引喘潜伏期(sec)
							给药前	给药后	延长
				对照组		1				生理盐水	17.0±4.9	17.7±2.8	0.7±4.8
沙丁胺醇组(SAL)	低剂量组	2	1.5				19.8±1.6	27.3±2.2	7.5±2.5*
				中剂量组	3	15				16.7±4.5	36.3±7.1	19.7±5.3**
	高剂量组	4	150				20.2±5.5	68.2±14.5	48.0±13.5**
				甘草酸组(GA)		5				135	22.7±5.3	21.5±4.5	-0.8±5.8
沙丁胺醇与甘草酸组		6	15/SAL+135/GA				20.8±6.5	51.7±18.7	30.9±20.2**^##

^*P＜0.05，^**P＜0.01与对照组比较；

^P＜0.05与SAL中剂量组比较；^**P＜0.01与GA组比较

七、结论：

单独使用沙丁胺醇可延长磷酸组胺诱发的豚鼠哮喘发作潜伏期，减少抽搐发生率。使用同剂量的沙丁胺醇配伍甘草酸单铵盐，比单独使用沙丁胺醇效果更加明显，可进一步延长磷酸组胺诱发的豚鼠哮喘发作潜伏期，减少抽搐发生率，差异显著。

Claims (6)

1.一种治疗支气管哮喘的组合物，它主要由β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类两种组分组成，其特征在于它的组分及其重量百分比如下：

(1)第一个活性成分，它是一种β₂肾上腺素受体激动剂及其盐，其重量百分比为：90.0～0.1％；

(2)第二个活性成分，它是甘草酸或甘草次酸以及其可接受的盐：其重量百分比为90.0～0.1％；

(3)一种或多种可药用的非活性成分：其重量百分比为1.0～99.8％；

其中，(1)与(2)的重量比为1∶0.1～100，(1)+(2)+(3)的重量百分比的和为100％。

 2.根据权利要求1所述的治疗支气管哮喘的组合物，其特征在于：所述的第一个活性成分衍生自β₂肾上腺素受体激动剂是：沙丁胺醇、特布他林、氯丙那林、克仑特罗、沙美特罗、福莫特罗、马布特罗、班布特罗；以及肾上腺素、异丙肾上腺素、辛弗林、麻黄碱等。

3.根据权利要求1所述的治疗支气管哮喘的组合物，其特征在于：所述的第一个活性成分衍生自β₂肾上腺素受体激动剂的盐是：氯化物、溴化物、硫酸盐、磷酸盐、羟萘酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、4-甲氧基苯甲酸盐、2-或4-羟基苯甲酸盐、4-氯苯甲酸盐、对甲苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、抗坏血酸盐、乙酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、戊二酸盐、丙三羧酸盐、羟基萘甲酸盐或油酸盐或其溶剂化物。

4.根据权利要求1所述的治疗支气管哮喘的组合物，其特征在于：所述的第二个活性成分是：甘草酸和甘草次酸，包括其可接受的盐，如单胺盐、二胺盐。

5.根据权利要求1所述的治疗支气管哮喘的组合物，其特征在于：所述的一种或多种可药用的非活性成分是：

稀释剂：乳糖、葡聚糖、阿拉伯胶、甘露糖醇、葡萄糖、淀粉、糊精、微细纤维素；

抛射剂：三氯一氟甲烷CCl₃F、二氯二氟甲烷CCl₂F₂、二氯四乙烷CClF₂-CClF₂、丙烷C₃H₈、异丁烷iso-C₄H₁₀、正丁烷n-C₄H₁₀、二氧化碳、一氧化二氮、氮气；

潜溶剂：甘油、丙二醇或聚乙二醇；

抗氧化剂：维生素C、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠；

润滑剂：硬脂酸镁、滑石粉；

粘合剂：水、淀粉浆、PVP、明胶；

崩解剂：干淀粉、羧甲基淀粉钠、海藻酸钠；

矫味剂：甜菊糖甙、低聚麦芽糖、乳糖、食用香精。

6.一种治疗支气管哮喘的组合物的制备方法，其特征在于它要经过下属步骤：

(1)将处方量的抗氧化剂、矫味剂加入潜溶剂中，搅拌加热溶解，并加入处方量的β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类药物，继续搅拌，使原料溶解，砂芯漏斗过滤；将溶解好的药液分剂量灌装，封接剂量阀门系统，分别再加压注入抛射剂，即得复方气雾剂或喷雾剂组合物；

(2)将处方量的β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类药物粉末与处方量的稀释剂、润滑剂、抗氧化剂等混合，用流能磨对药物进行充分微粉化处理后，将载药粉末灌装至胶囊，即得复方粉雾剂组合物；

(3)将处方量的β₂肾上腺素受体激动剂和甘草酸类药物中加入处方量的稀释剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、抗氧化剂以及矫味剂，按常规方法混合、制粒，干燥后整粒压片；薄膜片可用成膜材料如纤维素类、聚乙二醇类按常规包衣；制片后分装入密闭瓶或铝塑板中，即得复方片剂组合物。

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