CN101011570A - 一种重组新疆家蚕抗菌肽制剂、生产方法及其在养禽业中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种重组新疆家蚕抗菌肽制剂及其在养禽业中的应用。重组新疆家蚕抗菌肽制剂是通过将新疆家蚕抗菌肽的基因克隆到载体上，然后进入酵母细胞中表达、发酵制备而成。本发明重组新疆家蚕抗菌肽制剂能在保障家禽健康的基础上促进生长，增重效果显著。本发明抗菌肽制剂可以用于开发绿色、环保、安全有效的新型优质饲料添加剂和禽舍环境消毒剂。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域。具体地说，涉及到一种重组新疆家蚕抗菌肽制剂、重组新疆家蚕抗菌肽制剂的生产方法及其在养禽业中的应用。
背景技术
我国是养禽大国，但禽产品出口量在国际市场上占有率很低，行业始终“大而不强”。造成这种局面的一个重要方面是饲料中使用抗生素。积极寻找和开发绿色的抗生素饲料添加剂取代物，对提升我国禽业竞争力意义重大；寻找适用于饲料工业生产使用的新型安全、环保、无耐药性，并且能促进畜禽健康生长的饲料添加剂和环境消毒剂，是新世纪动物营养研究的重要课题，也是推行食品安全、保障人民身体健康计划的重要组成部分。
抗菌肽为动物体内免疫防御系统的重要组成部分，是一种氨基酸短链肽，被称为无污染的天然抗生素，具有广谱抗菌、无耐药性、热稳定、水溶性好、无毒无残留等优点，符合绿色环保及便于与现代饲料生产流程相结合的实用特点。研究用抗菌肽代替抗生素作饲料添加剂具有重要价值。温刘发等(2001)报道，抗菌肽可促进小鸡生长和减少排泄物氮含量，对粤黄鸡具有促进生长、保健和治疗疾病的功能。另有报道，昆虫抗菌肽应用于预防及治疗鸡的白痢效果明显，应用抗菌肽的柞蚕免疫血淋巴粉添加于断奶仔猪料，可减轻断奶仔猪的腹泻。证明抗菌肽可替代抗生素类饲料添加剂。
新疆养蚕历史悠久。在长期的生产实践中，培育出大量有较强抗病能力的品种。张富春等从新疆阿克苏地区蚕种场所培育的新蚕三号的3龄幼虫中克隆到家蚕抗菌肽的cDNA分子，为新疆家蚕抗菌肽制剂在真核酵母表达系统中大量的制备提供了基础。
新疆家蚕抗菌肽基因是一个有别于其他而含有特定核酸序列的家蚕抗菌肽的基因，由此重组基因表达、发酵而得的抗菌肽制剂具有更强的抗菌活性，有很好的热稳定性，开发其相应的产品和剂型应用具有重要意义。
发明内容
针对目前饲料中添加大量的抗生素而造成的养禽业“大而不强”，亟需开发绿色、环保并促进家禽健康生长的饲料添加剂和环境消毒剂的现状。本发明提供了一种重组新疆家蚕抗菌肽制剂。本发明还提供了抗菌肽制剂的生产方法及其在养禽业中的应用。
本发明提供了一种重组新疆家蚕抗菌肽制剂具体的制备方法。具体的制备方法是将新疆家蚕抗菌肽的基因克隆到载体上，然后进入宿主细胞中表达。其中表达载体是穿梭质粒，宿主细胞是真核细胞，优选酵母细胞中毕赤酵母SMD1168和酵母GS115。
本发明提供了一种重组新疆家蚕抗菌肽制剂，通过上述制备方法而获得。具体的新疆家蚕抗菌肽制剂的特征参数为：抗菌肽效价不低于4000U/mL，抗菌肽制剂组分中包含有，新疆家蚕抗菌肽基因、按质量百分比1％酵母浸出粉、2％蛋白胨和1％葡萄糖。这些组分带给抗菌肽制剂产品在应用中作为营养成分，强化其应用效果，如在与对照相比，在料重比、胰岛素样生长因子IGF-1、提高饲料的转化率及对于机体内分解代谢的平衡和体重的增加方面都具有明显的提高。同时，本发明提供的抗菌肽制剂制备方法为常规的发酵技术，操作简便，周期短，制剂组分成本低，生产抗菌肽制剂比获得抗菌肽纯品更容易，投入很少，可直接进行扩大生产，适宜工业化生产。
对于真核细胞的表达、发酵产物，将发酵液离心去除沉淀，经过加热煮沸30min后，离心去除沉淀，再重复煮沸和离心2次，收集上清液制备成抗菌肽制剂，置于4℃或-20℃保存。
本发明提供了抗菌肽制剂在养禽业中的应用。具体是240只1日龄家禽随机分成对照组和抗菌肽制剂组共4组。对照组饮用自来水，抗菌肽制剂组在自来水的基础上每升分别添加0.5、1.5、3.5mL抗菌肽制剂。结果显示：1.5、3.5mL/L添加量组增重效果显著(P＜0.05)，3.5mL/L添加量组最佳；抗菌肽制剂组比对照组料重比降低。血清总蛋白浓度差异不显著(P＞0.05)，但尿素氮浓度下降，1.5、3.5mL/L添加量组达显著水平(P＜0.05)。抗菌肽制剂组与对照组相比胰岛素样生长因子IGF-1随着抗菌肽制剂剂量的增加而显著升高，以高抗菌组提高幅度最大；在家禽生长的不同时期，添加抗菌肽制剂能适当地提高或降低甲状腺激素T3、T4水平。结果说明：
1、本发明提供的抗菌肽制剂能提高饲料的转化率；
2、本发明提供的抗菌肽制剂使机体在蛋白质合成量变化不大的情况下减少机体蛋白质的分解代谢，从而促进生长；
3、本发明提供的抗菌肽制剂在家禽生长的不同时期，能适当地提高或降低甲状腺激素T3、T4水平，维持了机体内的分解代谢的平衡，有利于体重的增加；
4、本发明提供的抗菌肽制剂能提高胰岛素样生长因子IGF-1水平，有效促进家禽的生长，增重效果显著。
抗菌肽制剂能够杀灭沙门氏菌等禽类致病菌，将其喷洒禽舍，直接有效的控制家禽细菌性感染，减少家禽发病死亡率，为家禽的健康生长提供良好的生长环境。
通过实施本发明具体的技术方案，实现本发明内容，可以实现所获得的重组新疆家蚕抗菌肽制剂在养禽业中的应用，其具体的药效和潜在的效果：
1、本发明添加抗菌肽制剂达1.5mL/L时能有效提高家禽生长性能，料重比降低，提高了饲料的转化率。从尿素氮和总蛋白浓度的结果看，添加抗菌肽制剂会使机体在蛋白质合成量变化不大的情况下减少机体蛋白质的分解代谢，从而促进生长，这与测得的增重、料重比结果相吻合。此外，添加抗菌肽制剂能适当地降低甲状腺激素T3水平，因而降低了机体分解代谢活动，有利于体重的增加；同时，抗菌肽制剂能提高胰岛素样生长因子IGF-1水平，有效促进家禽的生长，增重效果显著。因此，该发明抗菌肽制剂具备作新型环保安全添加剂的特质，对提高养禽业生产效益具有重要的实际意义。
2、1～28d：添加抗菌肽制剂对家禽生产性能作用显著，平均日增重分别提高1.74％(低抗菌肽组)、6.84％(中抗菌肽组)、9.56％(高抗菌肽组)，中、高抗菌肽组与对照组相比差异显著(P＜0.05)。IGF-1显著升高，说明饮用水中添加抗菌肽对1～28日龄家禽可达到显著的促生长效果。
3、29～56d：低抗菌肽组与中抗菌肽组平均日增重有增大趋势但差异不显著(P＞0.05)；而高抗菌肽组与对照组相比差异显著(P＜0.05)。表明饮用水中添加高抗菌肽组在29～56日龄可显著的促进家禽生长。
4、1～56d：平均日增重分别提高4.47％(低抗菌肽组)、6.10％(中抗菌肽组)、6.44％(高抗菌肽组)，中、高抗菌肽组与对照组相比差异显著(P＜0.05)。说明饮用水中添加抗菌肽对1～56日龄家禽可达到显著的促生长效果。且添加1.5mL/L以上的抗菌肽制剂即可达到显著效果。
5、本发明抗菌肽制剂对于1～56d的麻花鸡有显著的促生长作用，且添加1.5mL/L以上的抗菌肽即可达到显著效果(P＜0.05)。以麻花鸡为例，平均每只鸡增重1 05克。如果每公斤麻花鸡按照10元销售，1000只鸡将增收1050元，扣除抗菌肽的成本200元，1000只鸡将净增收850元。
附图说明
没有具体的附图及相应的说明
具体实施方式
下面，举实施例说明本发明，但是，本发明并不限于下述的实施例，本发明所涉及到的载体、宿主细胞、酶、培养基及相应的鉴定方法和转化法，除专门指出其特殊性外，都是本领域普通技术人员熟知并可以通过市场获得。
实施例1：重组新疆家蚕抗菌肽制剂的制备方法一
将新疆家蚕抗菌肽cDNA片段构建到真核表达穿梭质粒pGAPZαA上，用AvrII酶将重组的真核表达质粒线性化后，根据锂盐法(LiCl)或电击转化法转化酵母SMD1168菌株。
种子库建立：将筛选出来的重组克隆接种10mL YPD，30℃振荡培养过夜；取0.1mL的过夜培养物接种到含有50mL YPD的250mL的锥形瓶中，30℃振荡培养24h，将250mL培养物分装到1.5mLEP管中并加入20％甘油，保存在-80℃。
生产菌的制备：将保存在-80℃种子1mL接种到10mL YPD，30℃振荡培养过夜；取1mL的过夜培养物接种到含有100mL YPD的500mL的锥形瓶中，30℃振荡培养过夜；取过夜培养物接种到含有10个100mL YPD的500mL的锥形瓶中，30℃振荡培养过夜。
抗菌肽制剂的生产：取过夜培养生产菌，按照10％的接种量加入到生产发YPD酵罐中，以通气量为1-2L/min发酵罐、pH6～8、进行发酵。3d后，以每天一个罐体体积连续加入YPD发酵液并以同体积连续吸出发酵液，连续发酵1～3个月。
将发酵液12000rpm离心30min，去除沉淀，经过加热煮沸30min后，离心去除沉淀，再重复煮沸和离心2次，收集上清液制备成抗菌肽制剂，置于4℃或-20℃保存。
实施例2：重组新疆家蚕抗菌肽制剂的制备方法二
将新疆家蚕抗菌肽cDNA片段构建到真核表达质粒pPIC9K上，用SalI酶将重组的真核表达质粒线性化后，根据锂盐法(LiCl)或电击转化法转化甲醇毕赤酵母GS115菌株。
转化物涂布于MD平板，30℃培养2d。将MD平板上生长的转化菌落分别接种到MM和MD平板上的相应位置，30℃培养2～3d，根据菌落在MM平板上的生长情况，鉴定转化子的表型。
高拷贝转化子的筛选：将获得的His+Muts转化子分别在含0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.5mg/mL、2.0mg/mL、3.0mg/mL的G418的YPD平板上，30℃培养3～5d，以筛选多拷贝的阳性转化子。将筛选到的阳性克隆接种于1％甘油最低限度缓冲液培养液中，30℃振荡培养16～20h至OD600＝2～6，离心收集菌体，加甲醇最低限度缓冲液培养基稀释至OD600＝1。每隔24h补加甲醇，使其终浓度为0.5％，发酵3-5d。
将发酵液12000rpm离心30min，去除沉淀，经过加热煮沸30min后，离心去除沉淀，再重复煮沸和离心2次，收集上清液制备成抗菌肽制剂，置于4℃或-20℃保存。
实施例3：重组新疆家蚕抗菌肽制剂的抑菌活性检测方法
首先从不同发酵时间的发酵抗菌肽中取出一定体积待测上清液。以金黄色葡萄球菌为实验菌种，在LB液体培养基中，培养至OD650＝0.6，参照琼脂糖孔穴扩散法，取400μL菌悬液与100mL固体培养基(含1.3％琼脂)在45℃混匀，并铺在无菌培养皿中，待凝固后于4℃保存备用；使用时，在平皿中打直径为2mm的若干小孔，并在孔中分别滴入10μL待测上清液，37℃条件下过夜培养。第二天测量抑菌圈大小。根据抑菌圈的大小判定抗菌肽制剂的活性。
实施例4：重组新疆家蚕抗菌肽制剂促进南宁麻花鸡生长的应用
供试鸡为南宁麻花鸡，鸡苗由广州白云家禽发展有限公司提供。将240只1日龄鸡苗随机分成对照组和试验组共4个组，每组设3个重复，每重复20只鸡，各组称始重并经统计分析证实差异不显著。对照组饮用不加抗菌肽制剂的自来水，试验组分3组，为低、中、高抗菌肽组，分别在每升水中添加0.5mL/L、1.5mL/L、3.5mL/L抗菌肽制剂。
试验期56d，分两个饲养阶段，1～28日龄为小鸡饲养期，喂小鸡料；29～56日龄为中鸡饲养期，喂中鸡料。全过程自由采食和饮水。每天记录各组耗料量、死亡鸡数、温度。
在28d和56d清晨空腹称重，计算两个阶段各组平均日增重、平均日耗料量、料重比；在28d和56d，每组固定10只鸡翅静脉抽血3mL，将血样在3500rpm转速下离心15min，取上清液血清，将分离到的血清样本在-20℃冰箱保存待用。利用Chook IGF-1 ELISA(购自RapidBio Lab.Calabasas，California，USA)检测胰岛素样生长因子(IGF-1)；总蛋白、尿素氮浓度、血清三碘甲状原氨酸(T3)、血清甲状腺素(T4)在新疆维吾尔自治区人民医院检验中心生化室检测。
数据统计处理用SPSS13.0进行单因素方差分析，LSD法分析显著性。统计结果以“平均值±标准误”表示。结果如下：
5.1对麻花鸡增重效果的影响(参见表1)。
表1 麻花鸡不同阶段增重效果
| 平均日增重(g/只.d) | 与对照组比试验各组增量提高的幅度(％) | |||||
| 1～28d | 29～56d | 1～56d | 1～28d | 29～56d | 1～56d | |
| 对照组 | 17.26±0.33c | 35.02±1.01b | 33.09±0.64b | - | - | - |
| 低抗菌肽组 | 17.56±0.47bc | 36.94±1.17 | 34.57±0.59b | 1.74 | 5.48 | 4.47 |
| 中抗菌肽组 | 18.44±0.24ab | 37.05±1.17 | 35.11±0.73a | 6.84 | 5.80 | 6.10 |
| 高抗菌肽组 | 18.91±0.45a | 38.83±0.64a | 35.22±0.55a | 9.56 | 10.88 | 6.44 |
注：同列数据肩标含相同或未标注表示差异不显著(P＞0.05)，不同表示差异显著(P＜0.05)，下同。
1～28d：添加抗菌肽制剂对麻花鸡生产性能作用显著，平均日增重分别提高1.74％(低抗菌肽组)、6.84％(中抗菌肽组)、9.56％(高抗菌肽组)，中、高抗菌肽组与对照组相比差异显著(P＜0.05)。说明饮用水中添加抗菌肽对1～28日龄麻花鸡可达到显著促生长效果。
29～56d：低抗菌肽组与中抗菌肽组平均日增重有增大趋势但差异不显著(P＞0.05)；而高抗菌肽组与对照组相比差异显著(P＜0.05)。表明饮用水添加高抗菌肽组在29～56日龄可显著促进麻花鸡生长。
1～56d：平均日增重分别提高4.47％(低抗菌肽组)、6.10％(中抗菌肽组)、6.44％(高抗菌肽组)，中、高抗菌肽组与对照组相比差异显著(P＜0.05)。说明饮用水中添加抗菌肽对1～56日龄麻花鸡可达到显著的促生长效果。
结果表明，本发明所提供的抗菌肽制剂添加浓度，对于1～56日龄的麻花鸡有显著的促生长作用，且添加1.5mL/L以上的抗菌肽制剂即可达到显著效果。
5.2对耗料及料重比的影响(参见表2)。
由表2可以看出：在整个试验期中的平均日采食量，抗菌肽组与对照组相比差异不显著(P＞0.05)，但抗菌肽组均比对照组略低。料重比也有同样的现象，抗菌肽组与对照组差异不显著(P＞0.05)，抗菌肽组比对照组低。
表2 麻花鸡不同阶段耗料及料重比
| 平均日采食量(g/只.d) | 料重比 | |||||
| 1～28d | 29～56d | 1～56d | 1～28d | 29～56d | 1～56d | |
| 对照组 | 30.65±9.4 | 117.13±15.33 | 84.69±18.54 | 1.78±0.26 | 3.34±0.24 | 2.56±0.39 |
| 低抗菌肽组 | 28.49±8.37 | 115.25±16.19 | 82.72±18.79 | 1.62±0.22 | 3.12±0.23 | 2.39±0.37 |
| 中抗菌肽组 | 30.68±9.13 | 113.34±14.54 | 82.63±17.62 | 1.66±0.21 | 3.06±0.20 | 2.36±0.36 |
| 高抗菌肽组 | 30.10±9.2 | 116.94±14.59 | 84.37±18.37 | 1.59±0.21 | 3.01±0.23 | 2.40±0.36 |
5.3对生理生化指标的影响(参见表3)。血清中尿素氮和总蛋白浓度能反映出动物体内蛋白质的代谢情况。尿素氮为衡量机体蛋白质分解代谢的指标，瞿明仁(2003)在研究日粮氨基酸对泰和乌骨鸡血清尿素氮含量影响中发现，尿素氮含量与生长速度呈显著负相关。Frisen等(1992)在研究木聚糖酶对肉仔鸡生长性能的影响中发现，体内总蛋白浓度增高，蛋白质合成增加。从本试验结果看，尿素氮浓度：中抗菌肽组、高抗菌肽组与对照组相比差异显著(P＜0.05)。总蛋白浓
表3 56日龄麻花鸡血清尿素氮和总蛋白浓度
| 尿素氮(mmol/L) | 总蛋白(g/L) |
| 对照组 0.49±0.02b | 30.98±2.70 |
| 低抗菌肽组 0.45±0.01ab | 29.46±0.70 |
| 中抗菌肽组 0.39±0.02a | 28.53±1.45 |
| 高抗菌肽组 0.41±0.03a | 28.87±1.48 |
度：各组无显著差异(P＞0.05)。这说明加入抗菌肽可能会在蛋白质合成未变的情况下减少机体蛋白质的分解代谢，从而使得麻花鸡生长速度提高。
5.4对血清中IGF-1质量浓度的影响(参见表4)。
IGF-I能显著改变正常机体成分的分布，包括脂肪减少、肌肉比重增高、体重增加等。IGF对肌肉有很强的合成代谢效应，能抑制蛋白质分解，增加氨基酸的摄取和细胞增生，是合成代谢的直接效应物质。Vasilatos-youlldkell等(1991)的试验结果认为快速生长型雏鸡血清IGF-I水平显著高于缓慢生长型的雏鸡，且血清IGF-I水平与雏鸡体重间呈显著正相关。从试验结果看：本发明提供的抗菌肽制剂能显著提高胰岛素样生长因子IGF-1水平，有效促进麻花鸡的生长。
表4 28和56日龄麻花鸡血清中IGF-1质量浓度
| 组别 | 28d(μg/L) | 56d(μg/L) |
| 对照组 | 34.95±1.22b | 44.44±2.22 |
| 低抗菌肽组 | 34.26±1.36b | 38.62±1.91b |
| 中抗菌肽组 | 36.34±2.81b | 60.03±2.12 |
| 高抗菌肽组 | 52.54±4.69a | 63.27±2.26a |
5.5对血清中代谢激素质量浓度的影响(参见表5)。
表5 28和56日龄麻花鸡血清中代谢激素质量浓度
| 组别 | T3(ng/mL) | T4(μg/dL) | ||
| 28d | 56d | 28d | 56d | |
| 对照组 | 2.62±0.13 | 3.81±0.31b | 1.38±0.08b | 1.14±0.05b |
| 低抗菌肽组 | 2.51±0.51 | 2.64±0.12a | 1.18±0.09ab | 1.17±0.06b |
| 中抗菌肽组 | 2.93±0.21 | 3.03±0.22a | 1.14±0.04a | 1.37±0.19 |
| 高抗菌肽细 | 2.96±0.18 | 3.02±0.09a | 1.04±0.03a | 1.66±0.08a |
血液中T3水平与生长率呈正相关，机体甲状腺机能亢进和低下对家禽的生长发育均不利，所以在正常范围内，适当高的T3水平水平对禽类生长具重要意义。
本发明试验结果显示28日龄鸡，与对照相比抗菌肽制剂组T3浓度差异不显著，但随着抗菌肽浓度的增加，T3水平升高；T4水平，随着抗菌肽浓度的增加而降低，差异显著(P＜0.05)，说明抗菌肽制剂促进机体代谢活动增强，有利于增重，其中T4可能部分转化成T3。对于56日龄，与对照相比抗菌肽组T3浓度降低显著；T4水平，随着抗菌肽浓度的增加而升高，差异显著(P＜0.05)；说明抗菌肽制剂降低了机体蛋白质和糖的分解代谢活动，有利于体重的增加。虽然T4升高，但是甲状腺激素参代谢活动，其生物学效应主要以T3为主。本研究显示了中鸡阶段在代谢上的不同特点，由于体内T3是T4在受脱单碘酶作用而转化而成，所以T4的升高表明：①机体对T4的合成速度加快；②机体对T3的需要量减少，所以通过T4转化的量也下降。T4的变化可能与机体的消耗减少有关，表明中鸡阶段的代谢强度要低于小鸡阶段。
对照组，与28日龄的麻花鸡相比，56日龄的T3浓度升高45％，T4降低21％；说明随着饲喂时间的延长，麻花鸡的分解代谢活动增强。暗示蛋白质等的储存量降低。
抗菌肽制剂组，与28日龄的麻花鸡相比，低抗菌肽组56日龄的T3、T4浓度变化不大；中抗菌肽组56日龄的T3浓度变化不大、T4增加20％；中抗菌肽组56日龄的T3浓度变化不大、T4增加59.6％。这些结果暗示，抗菌肽可能维持了机体内的分解代谢的平衡，在不过度增强分解代谢的前提下，增加体重。
实施例5：重组新疆家蚕抗菌肽制剂促进其它家禽生长的应用
供试以鸭、鹅等其他家禽苗由新疆三坪农场畜牧兽医工作站提供。将240只1日龄不同家禽苗随机分成对照组和试验组共4个组，每次每组设3个重复，每重复20只，各组称始重并经统计分析证实差异不显著。对照组饮用不加抗菌肽制剂的自来水，试验组分3组，为低、中、高抗菌肽组，分别在每升水中添加0.5mL/L、1.5mL/L、3.5mL/L抗菌肽制剂。
试验期56d，分两个饲养阶段，1～28d为幼禽饲养期；29～56d周龄为中禽饲养期。全过程自由采食和饮水。每天记录各组耗料量、死亡只数、温度。
具体试验步骤如上述实施例，通过系列试验同样得出如下结论：
添加抗菌肽制剂达1.5mL/L时能有效提高家禽生长性能，抗菌肽制剂组比对照组料重比降低，提高了饲料的转化率。从尿素氮和总蛋白浓度的结果看，添加抗菌肽制剂会使机体在蛋白质合成量变化不大的情况下减少机体蛋白质的分解代谢，从而促进生长，这与测得的增重、料重比结果相吻合。此外，在家禽生长的不同时期，添加抗菌肽制剂能适当地提高或降低甲状腺激素T3、T4水平，维持了机体内的分解代谢的平衡，有利于体重的增加；同时，抗菌肽制剂能提高胰岛素样生长因子IGF-1水平，有效促进家禽的生长，增重效果显著：
1、本发明提供的抗菌肽制剂能提高家禽饲料的转化率；
2、本发明提供的抗菌肽制剂使机体在蛋白质合成量变化不大的情况下减少机体蛋白质的分解代谢，从而促进生长；
3、本发明提供的抗菌肽制剂在家禽生长的不同时期，能适当地提高或降低甲状腺激素T3、T4水平，维持了机体内的分解代谢的平衡，有利于体重的增加；
4、本发明提供的抗菌肽制剂能提高胰岛素样生长因子IGF-1水平，有效促进家禽的生长，增重效果显著。
因此，该发明抗菌肽制剂具备作新型环保安全添加剂的特质，对提高养禽业生产效益具有重要的实际意义。
实施例6：重组新疆家蚕抗菌肽制剂与纯化的抗菌肽成本对比
表6 抗菌肽制剂与纯品抗菌肽成本对比
| 项目 | 抗菌肽制剂 | 纯品抗菌肽 |
| 生产工艺 | 简单 | 复杂 |
| 试制耗费 | 15元 | 3000元 |
| 生产周期 | 2天 | 2个月 |
| 人工费 | 30元 | 1200元 |
以获得1升3000U产品为例，参见表6可以看出，抗菌肽制剂的生产工艺比获得纯品抗菌肽简单易行，生产成本很低，适合大规模生产并应用于养禽业。
Claims (9)
1、一种重组新疆家蚕抗菌肽制剂，其特征在于，抗菌肽制剂组分含有，重组新疆家蚕抗菌肽基因、按质量百分比1％酵母浸出粉、2％蛋白胨和1％葡萄糖，抗菌肽效价不低于4000U/mL。
2、一种重组新疆家蚕抗菌肽制剂的制备方法，其特征在于，所述的制备方法为将新疆家蚕抗菌肽的基因克隆到载体上，然后转化进入酵母细胞中表达、发酵后制备成所述重组新疆家蚕抗菌肽制剂。
3、根据权利要求2所述重组新疆家蚕抗菌肽制剂的制备方法，其特征在于，所述及的载体优选为穿梭质粒。
4、根据权利要求2所述重组新疆家蚕抗菌肽制剂的制备方法，其特征在于，所述及的转化方法优选为锂盐法。
5、根据权利要求2所述重组新疆家蚕抗菌肽制剂的制备方法，其特征在于，所述及的酵母细胞优选毕赤酵母SMD1168。
6、根据权利要求2所述重组新疆家蚕抗菌肽制剂的制备方法，其特征在于，所述及的酵母细胞优选酵母GS115。
7、一种如权利要求1所述重组新疆家蚕抗菌肽制剂的应用，其特征在于所述的抗菌肽制剂在养禽业中的应用。
8、根据权利要求7所述重组新疆家蚕抗菌肽制剂的应用，其特征在于，所述及的家禽包括鸡、鸭、鹅。
9、根据权利要求7所述重组新疆家蚕抗菌肽制剂的应用，其特征在于，所述及的应用是在制备饲料添加剂，促进家禽生长中的应用。
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Cited By (4)
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|---|---|---|---|---|
| CN102626184A (zh) * | 2012-04-03 | 2012-08-08 | 浙江大学 | 提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂及其制作方法 |
| CN104490720A (zh) * | 2015-01-18 | 2015-04-08 | 新疆大学 | 一种抗菌肽洗手液及其制备方法 |
| CN110218245A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-09-10 | 青岛红樱桃生物技术有限公司 | 一种具有抑菌活性的抗菌肽atmp7及其在用于制备抗菌剂中的应用 |
| CN113396959A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-09-17 | 山东凤祥实业有限公司 | 一种用于鸡翅分割的装置及方法 |
-
2007
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102626184A (zh) * | 2012-04-03 | 2012-08-08 | 浙江大学 | 提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂及其制作方法 |
| CN102626184B (zh) * | 2012-04-03 | 2013-06-05 | 浙江大学 | 提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂及其制作方法 |
| CN104490720A (zh) * | 2015-01-18 | 2015-04-08 | 新疆大学 | 一种抗菌肽洗手液及其制备方法 |
| CN110218245A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-09-10 | 青岛红樱桃生物技术有限公司 | 一种具有抑菌活性的抗菌肽atmp7及其在用于制备抗菌剂中的应用 |
| CN113396959A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-09-17 | 山东凤祥实业有限公司 | 一种用于鸡翅分割的装置及方法 |
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