CN101011392A - 增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物 - Google Patents

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蒋与刚
庞伟
杨继军
韦京豫
房恒通
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Abstract

本发明公开了一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,本发明的组合物包括异亮氨酸2%-8%,亮氨酸3%-15%,赖氨酸3%-5%,蛋氨酸2%-4%,半胱氨酸0.3%-0.8%,苯丙氨酸2%-4%,酪氨酸0.3%-0.8%,苏氨酸2%-4%,色氨酸0.9%-2%,缬氨酸2%-10%,精氨酸6%-11%,组氨酸1%-3%,谷氨酸1%-8%,丙氨酸7%-19%,甘氨酸1%-12%,脯氨酸5%-11%,丝氨酸4%-11%,实验结果表明,给创伤大鼠经口补充本发明的组合物可上调肠道生长因子表达,增强抗氧化功能。

Description

增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物
技术领域
本发明涉及一种药物组合物,特别是涉及一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物。
背景技术
创伤,包括烧伤及其他各种因素的复合伤,是现代社会的一个突出问题。在我国,创伤是第五位死亡原因,而全球每年因创伤致死约一百余万人,伤数千万人。因此,加强创伤防治的综合研究受到普遍关注。
营养支持作为综合治疗中不可缺少的重要措施之一,一方面是因为营养是生命的物质基础,另一方面是由于创伤后机体处于高分解代谢状态,能量消耗及蛋白质分解加剧,营养素需要量大大增加。以结晶氨基酸为优质氮源的新型氨基酸注射液将为创伤后的营养支持提供重要的物质保证。平战时带有普遍性的临床外科术后病人的营养支持,氨基酸注射液也必不可少。因此根据氨基酸营养药理学与创伤代谢研究进展,应用现代临床营养学理论,研究开发新型结晶氨基酸注射液,具有广阔的应用前景。
经过多年的努力,我国的氨基酸输液品种目前已发展到近20个,但目前临床可直接使用的治疗型氨基酸大输液的品种较少,与国际先进水平相比,仍有较大差距。特别是以往同类研究中对氨基酸输液制剂的抗氧化功能以及促进小肠上皮生长因子表达的免疫增强作用少见报道。因而需加强基础研究,制订符合我国人民营养素需求量模式和各种疾病时氨基酸代谢变化规律的最佳配方,以满足临床治疗的需要。
生长因子与创伤愈合的关系及其调控机制已成为创伤外科领域的研究热点。研究表明,多种生长因子在创伤愈合过程中发挥着调控细胞增殖、分化、基质合成等多种功能,应用外源性生长因子可以促进创伤愈合,加快组织的修复。在组织修复早期,表皮生长因子(EGF)对肉芽组织中毛细血管胚芽的形成和毛细血管网的建立具有重要影响;转化生长因子(TGFβ)可刺激细胞外基质的分泌,调节细胞生长分化,趋化巨噬细胞、成纤维细胞,促进血管生成,从而在创伤修复中起重要作用;碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)具有显著促进创伤愈合的作用,其作用机制可能与促进创面巨噬细胞增生、活化,促进表皮增生、伤口收缩及促进肉芽组织生长有关。但创伤条件下有关氨基酸调控生长因子表达的研究报道少见。
国内外研究资料表明,创伤条件下氨基酸代谢紊乱,自由基产生增加,机体抗氧化防御系统功能下降。而精氨酸(Arg)、谷氨酰胺(Gln)等某些氨基酸对机体的抗氧化功能有促进作用。因此,依据创伤条件下机体氨基酸代谢特点和氨基酸营养药理学研究进展,设计提高创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,并通过肠内、肠外营养支持的实验研究加以验证,对新型氨基酸输液制品的研究与开发具有重要的理论和实际意义。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的不足,提供一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物。
本发明的技术方案概述如下:
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,按重量百分比包括:异亮氨酸2%-8%,亮氨酸3%-15%,赖氨酸3%-5%,蛋氨酸2%-4%,半胱氨酸0.3%-0.8%,苯丙氨酸2%-4%,酪氨酸0.3%-0.8%,苏氨酸2%-4%,色氨酸0.9%-2%,缬氨酸2%-10%,精氨酸6%-11%,组氨酸1%-3%,谷氨酸1%-8%,丙氨酸7%-19%,甘氨酸1%-12%,脯氨酸5%-11%,丝氨酸4%-11%。
优选的是所述异亮氨酸为3.03%,所述亮氨酸为4.11%,所述赖氨酸为4.84%,所述蛋氨酸为3.89%,所述半胱氨酸为0.58%,所述苯丙氨酸为3.60%,所述酪氨酸为0.57%,所述苏氨酸为3.89%,所述色氨酸为1.52%,所述缬氨酸为3.31%,所述精氨酸为10.09%,所述组氨酸为2.52%,所述谷氨酸为7.92%,所述丙氨酸为18.73%,所述甘氨酸为11.24%,所述脯氨酸为10.08%,所述丝氨酸为10.08%。
还可以优选:异亮氨酸为7.20%,所述亮氨酸为14.60%,所述赖氨酸为3.78%,所述蛋氨酸为3.04%,所述半胱氨酸为0.45%,所述苯丙氨酸为2.81%,所述酪氨酸为0.45%,所述苏氨酸为3.04%,所述色氨酸为1.18%,所述缬氨酸为8.20%,所述精氨酸为7.89%,所述组氨酸为1.97%,所述谷氨酸为6.19%,所述丙氨酸为14.64%,所述甘氨酸为8.80%,所述脯氨酸为7.88%,所述丝氨酸为7.88%。
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,按重量百分比还可以包括:谷氨酰胺或甘氨酰谷氨酰胺二肽或丙氨酰谷氨酰胺二肽11%-16%。
本发明的一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物经肠内营养支持的动物实验结果显示,与对照组比较,能增加强创伤大鼠小肠上皮生长因子(EGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等生长因子的蛋白及mRNA表达;同时降低血浆丙二醛(MDA)含量,增强超氧化物歧化酶(SOD)活性。上述实验结果表明,给创伤大鼠经口补充适量的一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物可上调肠道生长因子表达,增强抗氧化功能。
通过静脉营养的动物实验结果显示,与对照组比较,静脉给予适量的本发明的组合物能使明显减轻DNA氧化损伤。上述实验结果表明,给创伤大鼠静脉补充适量的本发明的组合物可增强其抗氧化防御系统功能。
附图说明
图1为本发明的一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物对创伤大鼠小肠3种上皮因子蛋白表达的影响。(与创伤组比较,*P<0.01;与创伤+17AA组比较,#P<0.01)
图2为本发明的一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物对创伤大鼠小肠3种上皮因子mRNA表达的影响。(与创伤组比较,*P<0.01;与创伤+17AA组比较,#P<0.01)
具体实施方式
本发明的组方的理论依据
(一)创伤机体氨基酸代谢谱的变化
随着氨基酸分析技术的不断改进,有关创伤机体血清游离氨基酸的变化及规律逐渐被人们所认识,也为氨基酸静脉注射液的研制提供了依据。
研究结果表明,血浆游离氨基酸的改变虽不尽相同,但就其总量来说,创伤后三天起不论必需氨基酸或非必需氨基酸或其总和均显著降低;对照组的血浆游离氨基酸基本无改变。究其原因,主要有两个方面:一是创面渗出液中丢失大量氨基酸;二是因为创伤后氨基酸的分解代谢增加。
从每个氨基酸的改变看,大致可分为以下几类。第一类:创伤后含量下降。包括异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、谷氨酸、精氨酸和丝氨酸。第二类:创伤后含量一度升高,但以后均恢复。有苯丙氨酸和组氨酸。第三类:创伤后含量基本无改变。有蛋氨酸等。
(二)氨基酸的免疫调节和抗氧化作用
创伤后机体自由基产生增加,抗氧化酶活性降低;同时免疫功能降低。实验表明,创伤小鼠血清中MDA含量升高,SOD活性及维生素E含量降低。烧伤小鼠血浆及组织中脂质过氧化水平明显升高,谷胱甘肽(GSH)含量减少。
许多研究指出,精氨酸(Arg)、谷氨酰胺(Gln)等某些氨基酸对机体的抗氧化功能有促进作用。研究提示,Tau可明显减轻脑脊液蛋白漏出和组织水肿,减少组织MDA生成。补充Gln能增加大鼠肠道谷胱甘肽(GSH)的生成。
研究表明,支链氨基酸(BCAA)对创伤后的免疫功能低下有促进作用。Gln是巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞的重要能源物质,可维持肠粘膜形态和功能的完整性。静脉补充2g/L Gln可促进肠道感染患者的小肠免疫细胞功能,并减少肠道细菌移位。
(三)谷氨酰胺二肽在肠外营养支持中的应用
由于谷氨酰胺的不稳定性及低溶解度,制约了它在氨基酸注射液和全静脉营养中的应用,现市售氨基酸注射液中都不含谷氨酰胺,限制了氨基酸注射液的功能。而谷氨酰胺二肽克服了它的缺点,并可被机体有效分解为氨基酸而被利用,且没有任何毒副作用和不良反应。
目前应用的谷氨酰胺二肽主要有两种:甘氨酰谷氨酰胺二肽(Gly-Gln)和丙氨酰谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)。动物和人体实验证明,含谷氨酰胺二肽的TPN可提高创伤机体血中和细胞内谷氨酰胺浓度,减少骨酪肌蛋白质的分解,维持机体体重;给危重病人补充谷氨酰胺二肽,还可增强肠粘膜的屏障功能,减少细菌移位。因此,创伤用氨基酸输液制剂中应适当强化谷氨酰胺二肽以提高促进伤口愈合的治疗效果。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明:
实施例1
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸为3.03,亮氨酸为4.11,赖氨酸为4.84,蛋氨酸为3.89,半胱氨酸为0.58,苯丙氨酸为3.60,酪氨酸为0.57,苏氨酸为3.89,色氨酸为1.52,缬氨酸为3.31,精氨酸为10.09,组氨酸为2.52,谷氨酸为7.92,丙氨酸为18.73,甘氨酸为11.24,脯氨酸为10.08,丝氨酸为10.08。
实施例2
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸为7.20,亮氨酸为14.60,赖氨酸为3.78,蛋氨酸为3.04,半胱氨酸为0.45,苯丙氨酸为2.81,酪氨酸为0.45,苏氨酸为3.04,色氨酸为1.18,缬氨酸为8.20,精氨酸为7.89,组氨酸为1.97,谷氨酸为6.19,丙氨酸为14.64,甘氨酸为8.80,脯氨酸为7.88,丝氨酸为7.88。
实施例3
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸2,亮氨酸15,赖氨酸4,蛋氨酸4,半胱氨酸0.3,苯丙氨酸4,酪氨酸0.45,苏氨酸2,色氨酸0.9,缬氨酸10,精氨酸6,组氨酸3,谷氨酸1,丙氨酸19,甘氨酸6.35,脯氨酸11,丝氨酸11。
实施例4
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸8,亮氨酸3,赖氨酸5,蛋氨酸2,半胱氨酸0.8,苯丙氨酸3,酪氨酸0.8,苏氨酸4,色氨酸2,缬氨酸2,精氨酸11,组氨酸1,谷氨酸8,丙氨酸19,甘氨酸12,脯氨酸11,丝氨酸7.4。
实施例5
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸8,亮氨酸15,赖氨酸3,蛋氨酸4,半胱氨酸0.7,苯丙氨酸2,酪氨酸0.3,苏氨酸4,色氨酸2,缬氨酸10,精氨酸11,组氨酸3,谷氨酸8,丙氨酸19,甘氨酸1,脯氨酸5,丝氨酸4。
实施例6
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸8,亮氨酸15,赖氨酸5,蛋氨酸4,半胱氨酸0.7,苯丙氨酸4,酪氨酸0.3,苏氨酸4,色氨酸2,缬氨酸10,精氨酸11,组氨酸3,谷氨酸8,丙氨酸7,甘氨酸8,脯氨酸5,丝氨酸5。
实施例7
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸7.20,亮氨酸14.60,赖氨酸4.84,蛋氨酸3.89,半胱氨酸0.75,苯丙氨酸3.60,酪氨酸0.57,苏氨酸3.89,色氨酸1.51,缬氨酸8.20,精氨酸10.09,组氨酸2.52,谷氨酸1.84,丙氨酸7.50,甘氨酸2.50,脯氨酸10.08,丝氨酸4.60,甘氨酰谷氨酰胺二肽11.82。
实施例8
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸7.20,亮氨酸14.60,赖氨酸4.84,蛋氨酸3.89,半胱氨酸0.75,苯丙氨酸3.60,酪氨酸0.57,苏氨酸3.89,色氨酸1.51,缬氨酸8.20,精氨酸10.09,组氨酸2.52,谷氨酸1.84,丙氨酸7.50,甘氨酸2.50,脯氨酸10.08,丝氨酸4.60,谷氨酰胺11.82(谷氨酰胺也可以用丙氨酰谷氨酰胺二肽替代后构成新的实施例)。
实施例9
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸7.20,亮氨酸14.60,赖氨酸3.13,蛋氨酸2.52,半胱氨酸0.38,苯丙氨酸2.33,酪氨酸0.37,苏氨酸2.52,色氨酸0.99,缬氨酸8.20,精氨酸6.54,组氨酸1.63,谷氨酸5.13,丙氨酸12.13,甘氨酸7.27,脯氨酸6.53,丝氨酸6.53,谷氨酰胺12.00(谷氨酰胺也可以用甘氨酰谷氨酰胺二肽或丙氨酰谷氨酰胺二肽替代后构成新的实施例)。
实施例10
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸2.72,亮氨酸3.67,赖氨酸4.31,蛋氨酸3.47,半胱氨酸0.56,苯丙氨酸3.22,酪氨酸0.50,苏氨酸3.48,色氨酸1.33,缬氨酸2.96,精氨酸8.93,组氨酸2.27,谷氨酸5.98,丙氨酸16.70,甘氨酸9.91,脯氨酸8.95,丝氨酸8.95,谷氨酰胺12.09(谷氨酰胺也可以用甘氨酰谷氨酰胺二肽或丙氨酰谷氨酰胺二肽替代后构成新的实施例)。
实施例11
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸7.20,亮氨酸14.60,赖氨酸3.13,蛋氨酸2.52,半胱氨酸0.38,苯丙氨酸2.33,酪氨酸0.37,苏氨酸2.52,色氨酸0.99,缬氨酸8.20,精氨酸7.54,组氨酸1.63,谷氨酸5.13,丙氨酸12.13,甘氨酸7.27,脯氨酸6.53,丝氨酸6.53,谷氨酰胺11.00(谷氨酰胺也可以用甘氨酰谷氨酰胺二肽或丙氨酰谷氨酰胺二肽替代后构成新的实施例)。
实施例12
一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,包括(g/100g氨基酸):
异亮氨酸6.20,亮氨酸13.60,赖氨酸3.13,蛋氨酸2.52,半胱氨酸0.38,苯丙氨酸2.33,酪氨酸0.37,苏氨酸2.52,色氨酸0.99,缬氨酸8.20,精氨酸6.54,组氨酸1.63,谷氨酸5.13,丙氨酸11.13,甘氨酸6.27,脯氨酸6.53,丝氨酸6.53,谷氨酰胺16.00(谷氨酰胺也可以用甘氨酰谷氨酰胺二肽或丙氨酰谷氨酰胺二肽替代后构成新的实施例)。
在上述各实施例中,所有氨基酸均为L-形式;半胱氨酸可使用L-半胱氨酸或N-乙酰-L-半胱氨酸形式;其中半胱氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、丝氨酸由日本进口,其余均分别采用国产氨基酸原料。
实施例13
效果评价
中国人民解放军军事医学科学院动物中心提供雄性Wistar大鼠24只,体重180~220g。行创伤手术后分别饲以酪蛋白、17AA(实施例1)及18AA(实施例7)为氮源的合成饲料。实验期14天。实验结束后处死动物,取血、组织检测各项指标。
结果显示,18AA组和17AA组大鼠小肠小肠上皮生长因子(EGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等生长因子的蛋白及mRNA表达增强;(图1、图2),18AA组生长因子的表达量最高;与酪蛋白组比较,17AA组和18AA组大鼠血浆丙二醛(MDA)含量降低,超氧化物歧化酶(SOD)活性增强,18AA组提高创伤动物抗氧化能力的作用更显著。
表1复方氨基酸对大鼠血浆MDA含量及SOD活性的影响
 组别   n   MDA(μmol/L)    SOD(NU/ml)
 酪蛋白组   8   55.63±7.72    159.22±28.46
 17AA组   8   31.82±5.07*    175.18±13.57*
 18AA组   8   27.14±5.07*#    198.81±20.80*#
与酪蛋白组比较,*P<0.01;与17AA组比较,#P<0.01
实施例14
效果评价:肠外营养支持实验
Wistar雄性大鼠(180~220g)24只,行创伤和中心静脉插管手术,按体重随机分成葡萄糖对照组、乐凡命组、18AA组(实施例7)。分别输以葡萄糖、乐凡命和本发明组合物,浓度均为2.5%。其中乐凡命为华瑞制药公司生产的18种氨基酸注射液。各组均给予无氮饲料。液体流量由输液泵控制为50ml/d,动物单笼喂养,自由饮水、摄食无氮饲料。连续输液7天。检测各项指标。
结果显示,上述实验结果表明,给创伤动物静脉补充适量的本发明的组合物可显著减轻创伤大鼠的DNA氧化损伤。
表2大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的变化
   组别   n    DNA移动距离(μm)
   对照组   6    49.00±19.79
   乐凡命组   6    25.25±4.57*
   18AA组   6    16.92±4.24*#
与对照组比较,*P<0.01;与乐凡命组比较,#P<0.05

Claims (4)

1.一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,其特征是按重量百分比包括:异亮氨酸2%-8%,亮氨酸3%-15%,赖氨酸3%-5%,蛋氨酸2%-4%,半胱氨酸0.3%-0.8%,苯丙氨酸2%-4%,酪氨酸0.3%-0.8%,苏氨酸2%-4%,色氨酸0.9%-2%,缬氨酸2%-10%,精氨酸6%-11%,组氨酸1%-3%,谷氨酸1%-8%,丙氨酸7%-19%,甘氨酸1%-12%,脯氨酸5%-11%,丝氨酸4%-11%。
2.根据权利要求1所述的一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,其特征是所述异亮氨酸为3.03%,所述亮氨酸为4.11%,所述赖氨酸为4.84%,所述蛋氨酸为3.89%,所述半胱氨酸为0.58%,所述苯丙氨酸为3.60%,所述酪氨酸为0.57%,所述苏氨酸为3.89%,所述色氨酸为1.52%,所述缬氨酸为3.31%,所述精氨酸为10.09%,所述组氨酸为2.52%,所述谷氨酸为7.92%,所述丙氨酸为18.73%,所述甘氨酸为11.24%,所述脯氨酸为10.08%,所述丝氨酸为10.08%。
3.根据权利要求1所述的一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,其特征是所述异亮氨酸为7.20%,所述亮氨酸为14.60%,所述赖氨酸为3.78%,所述蛋氨酸为3.04%,所述半胱氨酸为0.45%,所述苯丙氨酸为2.81%,所述酪氨酸为0.45%,所述苏氨酸为3.04%,所述色氨酸为1.18%,所述缬氨酸为8.20%,所述精氨酸为7.89%,所述组氨酸为1.97%,所述谷氨酸为6.19%,所述丙氨酸为14.64%,所述甘氨酸为8.80%,所述脯氨酸为7.880%,所述丝氨酸为7.88%。
4.根据权利要求1所述的一种增强创伤机体生长因子表达及抗氧化功能的氨基酸组合物,其特征是按重量百分比包括:谷氨酰胺或甘氨酰谷氨酰胺二肽或丙氨酰谷氨酰胺二肽11%-16%。
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