CN101007828A - 一种红花黄色素的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种红花黄色素的提取方法，包括以下步骤：1)红花用水温浸2－4次，合并提取液，过滤；2)调节提取液pH值至2.0－4.0；3)提取液经非极性大孔吸附树脂层析，先用水洗去除杂质，再用水洗脱；4)收集洗脱液，反渗透浓缩去除70－90％的水，剩余的水溶液减压浓缩干燥。即可得到黄色粉末即为红花黄色素。
Description
技术领域
本发明涉及植物药的提取方法领域，特别涉及红花有效成分的提取方法领域。
背景技术
红花〔Carthamus tinctorius L〕为菊科植物红花的花，系一年生草本植物，在我国有广泛分布。红花活血通经，化瘀止痛，用于多种血液循环障碍疾病。临床上红花以水煎液入药，其主要水溶性组分为红花黄色素(红花黄Safflor yellow，SY)，羟基红花黄色素(HSYA)为其含量最高的查尔酮成分。SY为多种水活性成份的棕黄色混合物，它是红花中具有生理活性的重要成份之一，具抗血小板激活因子等心血管药理活性，为红花水溶性有效部位，HSYA可竞争性地抑制流标记的血小板激活因子与血小板受体的结合，为SY中的主要有效成分。另外，红花黄色素还可以作为食品色素使用，近年来，随着人民生活水平的提高，食用合成色素对人体健康的影响和危害已经引起人们关注。因此，天然色素在食品领域中也得到越来越广泛的应用。
对于红花黄色素的提取方法，已有报道，如有文献(《中草药》1990年第21卷第4期第44-45页)报道，红花经水提醇沉后，通过Sephadex LH-20柱层析，水为洗脱剂，反复处理纯化得红花黄色素，该方法过程复杂，且Sephadex LH-20价格昂贵，限制了此法的应用。另外，中国专利981251218(授权公告号CN 1085674，公告日2002年5月29日)也公开了一种红花黄色素的提取方法，该方法用极性溶剂如水提取2-4次，每次1-3天，合并提取液，浓缩，用大孔树脂层析，先用一种极性溶剂去除杂质，再用另一种极性溶剂洗脱，收集洗脱液浓缩干燥得到红花黄色素。该方法的不足在于提取周期较长，并且采用了有机溶剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生产周期短，成本低廉、有利环保并且有效成分含量高的红花黄色素的提取方法。
发明人通过大量的实验，包括正交实验，得到了本发明的技术方案：一种红花黄色素的提取方法，包括以下步骤：
1)红花用水于温浸2-4次，合并提取液，过滤；
2)调节提取液pH值至2.0-4.0；
3)提取液经非极性大孔吸附树脂层析，先用水洗去除杂质，再用水洗脱；
4)收集洗脱液，反渗透浓缩去除70-90％的水，剩余的水溶液减压浓缩干燥。
即可得到黄色粉末即为红花黄色素。
本发明的提取方法，其中步骤1)温浸的温度为30-70℃，优选40-60℃，最优选50℃；加水量优选每次分别为红花重量的为15-17倍、9-11倍和9-11倍，最优选为16倍、10倍和10倍；温浸时间优选分别为1-3小时、1-3小时和1-3小时，最优选分别为2小时、2小时和1小时。
本发明的提取方法，其中步骤2)pH值优选为2.0±3.0，更优选为2.0±0.1。
本发明的提取方法，其中步骤3)所述的非极性大孔树脂可以是DM-130、D-101和D-4020，优选为D-4020型大孔树脂；洗脱时先用水洗去2-4个柱体积，优选3个柱体积，然后继续用5-7个柱体积的水洗，优选6个柱体积的水洗。
本发明的提取方法具有以下优点：1)缩短了温浸时间，且温浸后的提取液无需浓缩处理直接进行大孔吸附树脂层析处理，因此缩短了生产周期短；2)提取液调节成酸性，不仅增强了自身的稳定性(发明人的实验研究证明pH值在2-3之间时放置8天保存率在80％以上)，减少了生产过程中的损失，而且也提高了树脂的吸附容量(pH2.0-3.0时，吸附容量为0.29g药材/ml树脂；pH5.0-6.0时，吸附容量为0.18g药材/ml树脂)。3)用树脂制备过程中只用到水，没有使用醇以及其他溶剂，降低了成本；4)常温常压下去除大量的水采用反渗透浓缩，不仅有利于安全生产和节约能源，并且利于产品的稳定性；5)产品纯度高：本发明的红花黄色素产品中羟基红花黄色素的含量可达到29％(HPLC)以上。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作具体说明，实施例不以任何方式限制本发明。
本发明中以羟基红花黄色素的含量作为红花黄色素产品质量的评价指标，羟基红花黄色素的含量是按照下述方法测定的：
色谱条件：Discovery C18(250×4.6mm；5um)；甲醇-乙腈-0.7％磷酸(26∶2∶72)，检测波长403nm，流速1ml/min。
(1)对照品溶液的制备：取羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A HSYA)对照品适量，加蒸馏水制成1ml中含0.15mg的溶液。
(2)供试品溶液的制备：取样品15mg，加水定容至25ml容量瓶。
分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
实施例一 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水50℃下温浸3次，加水量分别为红花重量的16倍，10倍，10倍，提取时间分别为2小时，2小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝2.0，过滤。滤液过大孔树脂D-4020，水洗3倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集6倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率1.98％，羟基红花黄色素的含量32.0％。
实施例二 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水60℃下温浸3次，加水量分别为红花重量的16倍，10倍，10倍，提取时间分别为2小时，2小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝2.5，过滤。滤液过大孔树脂D-4020，水洗3倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集6倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率1.87％，羟基红花黄色素的含量31.5％。
实施例三 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水40℃下温浸3次，加水量分别为红花重量的16倍，10倍，10倍，提取时间分别为2小时，2小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝2.6，过滤。滤液过大孔树脂D-4020，水洗3倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集6倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率1.82％，羟基红花黄色素的含量30.9％。
实施例四 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水50℃下温浸3次，加水量分别为红花重量的16倍，10倍，10倍，提取时间分别为2小时，2小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝3.0，过滤。滤液过大孔树脂D-4020，水洗3倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集6倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率1.98％，羟基红花黄色素的含量31.2％。
实施例五 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水30℃下温浸3次，加水量分别为红花重量的15倍，9倍，10倍，提取时间分别为2小时，2小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝3.0，过滤。滤液过大孔树脂DM-130，水洗3倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集6倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率1.80％，羟基红花黄色素的含量29.0％。
实施例六 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水70℃下温浸3次，加水量分别为红花重量的17倍，9倍，10倍，提取时间分别为2小时，2小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝2.0，过滤。滤液过大孔树脂D-101，水洗3倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集6倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率1.77％，羟基红花黄色素的含量29.1％。
实施例七 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水50℃下温浸3次，加水量分别为红花重量的16倍，10倍，9倍，提取时间分别为2小时，2小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝4.0，过滤。滤液过大孔树脂D-4020，水洗4倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集6倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率1.97％，羟基红花黄色素的含量30.5％。
实施例八 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水50℃下温浸2次，加水量分别为红花重量的16倍，10倍，提取时间分别为2小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝2.1，过滤。滤液过大孔树脂D-4020，水洗2倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集5倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率2.08％，羟基红花黄色素的含量29.9％。
实施例九 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水50℃下温浸4次，加水量分别为红花重量的15倍，11倍，10倍和10倍提取时间分别为3小时，3小时，1小时，1小时。合并三次提取液，调节pH＝2.0，过滤。滤液过大孔树脂D-101，水洗3倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集6倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率1.98％，羟基红花黄色素的含量29.0％。
实施例十 红花黄色素提取工艺
红花500g，加入去离子水50℃下温浸3次，加水量分别为红花重量的17倍，10倍，9倍，提取时间分别为2小时，3小时，3小时。合并三次提取液，调节pH＝2.0，过滤。滤液过大孔树脂DM-130，水洗3倍柱体积，弃去，树脂柱继续用水洗脱，并收集7倍柱体积的水。洗脱液过反渗透膜浓缩，浓缩去除80％的水，浓缩液减压干燥得红花黄色素，收率2.03％，羟基红花黄色素的含量29.0％。
Claims (9)
1.一种红花黄色素的提取方法，包括以下步骤：
1)红花用水温浸2-4次，合并提取液，过滤；
2)调节提取液pH值至2.0-4.0；
3)提取液经非极性大孔吸附树脂层析，先用水洗去除杂质，再用水洗脱；
4)收集洗脱液，反渗透浓缩去除70-90％的水，剩余的水溶液减压浓缩干燥。
2.如权利要求1的方法，其中步骤1)温浸温度为40-60℃，次数为3次，加水量每次分别为红花重量的15-17倍、9-11倍和9-11倍。
3.如权利要求2的方法，其中步骤1)温浸的温度为50℃，加水量每次分别为红花重量的16倍、10倍和10倍。
4.如权利要求1的方法，其中步骤1)温浸3次，时间分别为1-3小时、1-3小时和1-3小时。
5.如权利要求6的方法，其中步骤1)温浸时间最优选分别为2小时、2小时和1小时。
6.如权利要求1的方法，其中步骤2)pH值为2.0-3.0。
7.如权利要求8的方法，其中步骤2)pH值为2.0±0.1。
8.如权利要求1的方法，其中步骤3)的大孔吸附树脂为D-4020型大孔树脂，洗脱时先用水洗去2-4个柱体积，然后继续用5-7个柱体积的水洗。
9.如权利要求9的方法，其中步骤3)的大孔吸附树脂为D-4020型大孔树脂，洗脱时先用水洗去3个柱体积，然后继续用6个柱体积的水洗。
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| CN 200610013123 Pending CN101007828A (zh) | 2006-01-25 | 2006-01-25 | 一种红花黄色素的提取方法 |
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101774989B (zh) * | 2009-02-04 | 2011-07-27 | 王来忠 | 一种从红花中提取精制黄色素的方法 |
| CN102382151A (zh) * | 2011-09-08 | 2012-03-21 | 成都中医药大学 | 红花黄色素的分离纯化方法 |
| CN106496172A (zh) * | 2016-10-21 | 2017-03-15 | 乌鲁木齐上善元生物科技有限公司 | 一种从红花中提取红花黄色素的方法 |
-
2006
- 2006-01-25 CN CN 200610013123 patent/CN101007828A/zh active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101774989B (zh) * | 2009-02-04 | 2011-07-27 | 王来忠 | 一种从红花中提取精制黄色素的方法 |
| CN102382151A (zh) * | 2011-09-08 | 2012-03-21 | 成都中医药大学 | 红花黄色素的分离纯化方法 |
| CN106496172A (zh) * | 2016-10-21 | 2017-03-15 | 乌鲁木齐上善元生物科技有限公司 | 一种从红花中提取红花黄色素的方法 |
| CN106496172B (zh) * | 2016-10-21 | 2018-12-25 | 乌鲁木齐上善元生物科技有限公司 | 一种从红花中提取红花黄色素的方法 |
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