CN100496773C - Stago系列全自动血凝仪的清洗方法 - Google Patents
Stago系列全自动血凝仪的清洗方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种STAGO系列全自动血凝仪的清洗方法。该清洗方法,样品针由下而上吸入特殊清洗剂,用常规清洗剂进行冲洗,特殊清洗剂的配制:聚氧乙烯壬基苯酚醚、甘油单月桂酸酯、十二烷基苯磺酸钠分别用去离子水加热溶解;将水溶液混合配成的原液、氢氧化钠1g,安替福民调pH过滤即可;常规清洗剂的配制:聚氧乙烯壬基苯酚醚、十二烷基苯磺酸钠分别用去离子水加热溶解;将水溶液混合配成的原液、烷基二甲基苄基氯化铵加到去离子水中,再加硼酸,用磷酸二氢钠调pH过滤即可。本试剂选用的清洗剂生物降解性好,毒性小,对保护环境深远的意义,所以具有广阔的推广前景。
Description
(一)所属技术领域
本发明涉及一种清洗方法,特别涉及一种STAGO系列全自动血凝仪的清洗方法。
(二)背景技术
自80年代初,自动化分析仪器进入我国以来,结束了临床上手工分析血液中各种成分的历史,全国上下各家医院进行了一场轰轰烈烈的自动化革命,从半自动分析仪到全自动分析仪应用,解放了生产力,提高了检验速度,重要的是检验结果的准确性有了很大的提高,为临床提供更加可靠的参考依据。STAGO全自动血凝仪是法国制造,检查凝血机制先进的常规设备。因仪器所用清洗剂是无水冲洗的清洗剂。对配套的两种清洗剂:常规清洗剂、特殊清洗剂要求非常严格。即对清洗三个吸样针清洗后,清洗剂无残留,对管道无影响,不影响测定项目的结果。
(三)发明内容
本发明为了弥补现有技术的不足,提供了一种价格低廉、清洗干净的STAGO系列全自动血凝仪的清洗方法。
本发明是通过如下技术方案实现的:
一种STAGO系列全自动血凝仪的清洗方法,样品针由下而上吸入特殊清洗剂,在样品针管腔内停留2秒,然后用常规清洗剂由上而下进行冲洗,其特殊之处在于:
所述特殊清洗剂是采用如下方法配制的:(1)聚氧乙烯壬基苯酚醚50ml加到50ml温度为50—60℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(2)甘油单月桂酸酯50ml加到50ml温度为50—60℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(3)十二烷基苯磺酸钠10g用100ml去离子水加热溶解;(4)将上述各步骤配制的水溶液完全混合,配成原液;(4)取原液20ml,加到475ml去离子水中,另加氢氧化钠1g,安替福民5ml,混匀,pH调为10--11过滤即可;
所述常规清洗剂是采用如下方法配制的:(1)聚氧乙烯壬基苯酚醚50ml加到50ml温度为50—60℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(2)十二烷基苯磺酸钠5g用100ml去离子水加热溶解;(3)将上述各步骤配制的水溶液完全混合,配成原液;(4)取原液20ml、烷基二甲基苄基氯化铵2.5ml加到2477.5ml去离子水中,再加20g硼酸,混匀,用磷酸二氢钠调pH为5—6,过滤即可。
本发明的试验分析:
1、材料
1.1 仪器:法国STAGO COMPACT CT全自动血凝仪
酸度计:PH3C型精密PH计
光电分析天平:DT—100型
1.2 化学试剂:本发明的产品
1.3 全自动血凝配套试剂(4种)
①PT 12302 产地 法国 批号 041153
②APTT 12203 产地 法国 批号 040942
③TT 12344 产地 法国 批号 042945
④FIB 12321 产地 法国 批号 042472
1.4 质控品: STAGO专用质控N+P 产地 法国
N:(12351) 批号 042361
P:(12352) 批号 042361
1.5 统计方法:资料经stat软件包做配对t检验相关分析
2、方法:
2.1 析因设计选择表面活性剂的种类
文献报道两种或两种以上的表面活性剂组成复合配方:因种类不同可发生协同作用,以一定的工艺形成无粘性高效、低泡清洗剂获得很强的去污力,根据这一原理采用析因设计筛选表面活性剂的种类,其方法:将新鲜配制的一定浓度的表面活性剂,两两随机分配,每次处理两个因素(a,b)每个因素两个水平(a1,a2,b1,b2)研究采用α<2析因设计组合方式如表I
表I α×2析因设计
通过5分钟、15分钟、20分钟、60分钟连续观察,根据表面活性剂的性质,发现某种浓度下表面活性剂之间能迅速使凝块脱壁。交叉作用分析证明,介面活性剂间最合理的组合具有明显的增效作用。
2.2 常规清洗剂的配制方法
见实施例1。
2.3 特殊清洗剂的配制方法
见实施例1。
2.4 清洗剂的使用方法
按照仪器的操作规程将进口的常规、特殊清洗剂全部更换为自研的常规清洗剂和特殊清洗剂,使用一天,从第2天开始观察,共观察90天
2.4.1 日保养:即从主菜单Maintenance----Ring pump---Sampleneedle cleaning---Type any key to open the product drawer——插入5ml特殊清洗液---浸泡300秒后,按程序退出。
2.4.2 周保养:其程序按照日保养程序进行浸泡,时间为1800秒。
2.5 效果评估方法
2.5.1 去污效果的评估(泵冲洗体积的检测)
操作方法:从Maintenance---Ring pump----Vercationer---进行校正样品针1号样品针2号样品针3号
2.5.2 质控品N+P观察
将目前血凝分析中四个项目PT、APTT、TT、FIB作为观察对象,测定N+P质控物共观察90天,并与进口清洗剂测定的质控结果进行对比分析。
结果分析
1、自研常规清洗剂仪器的影响:(见表1-5)
使用自研常规清洗剂与进口特殊清洗剂对质控N+P中的PT、APTT、TT、FIB进行测定,其X、SD、CV%均在允许范围内p>0.05,说明测定值与定值比较无显著性差异,自研常规清洗剂对仪器试验无影响。
2、自研特殊清洗剂对仪器的影响:(见表6-10)
使用自研特殊清洗剂与进口常规清洗剂对质控N+P中的PT、APTT、TT、FIB进行测定并与配套进口清洗剂的质控结果进行对比分析其均在X、SD、CV%允许范围内p>0.05,说明测定值与定值比较无显著性差异,自研特殊清洗剂对仪器试验结果无影响。
3、自研常规清洗剂、特殊清洗剂对仪器试验的影响
使用自研的常规清洗剂、特殊清洗剂与进口的常规清洗剂、特殊清洗剂对质控N+P中进PT、APTT、TT、FIB行测定其X、SD、CV%均在允许范围内p>0.05,说明两者间无显著性差异。(见表11-12)
4、对泵体积的影响
清洗剂在日常工作中主要对样品针内外壁中的血浆蛋白脂类进行清除,若清洗能力不强,内壁将附着一些蛋白质,使管径变细,样品吸样量、清洗样的体积将减少,影响测定结果。使用自研清洗剂一年,其泵测定体积与规定体积均在允许范围内。
5、温度对清洗剂的影响
将自研常规清洗剂装入500ml无菌瓶中密封,分别放入0-4℃冰箱,25℃、45℃温箱中,分别放置1周、4周、12周、24周观察清洗剂的变化。
温度对常规清洗剂的稳定性观察
温度对自研特殊清洗剂的稳定性观察
注:特殊清洗液开瓶使用时间最多不超过1个月,因次氯酸易挥发,最好以15ml为一包装,一次用完。
表1、自研常规清洗剂对质控中PT(秒)的影响
n=90
表2、自研常规清洗剂对质控中PT(%)的影响
n=90
表3、自研常规清洗剂对质控中APTT(秒)的影响
n=90
表4、自研常规清洗剂对质控中TT(秒)的影响
n=90
表5、自研常规清洗剂对质控中FIB的影响
n=90
表6、自研特殊清洗剂对质控中PT(秒)的影响
n=90
表7、自研特殊清洗剂对质控中PT(%)的影响
n=90
表8、自研特殊清洗剂对质控中APTT(秒)的影响
n=90
表9、自研特殊清洗剂对质控中TT(秒)的影响
n=90
表10、自研特殊清洗剂对质控中FIB的影响
n=90
表11、自研配套清洗剂与进口配套清洗剂对质控N的影响
试验项目 | 进口清洗剂(X±SD) | 自制清洗剂(X±SD) |
PT(秒)T(%)APTTTTFIB | 15.5±1.082±1032±517±52.85±0.55 | 14.9±1.184±831±416±42.90±0.50 |
n=90
表12、自研配套清洗剂与进口配套清洗剂对质控P的影响
试验项目 | 进口清洗剂(X±SD) | 自制清洗剂(X±SD) |
PT(秒)PT(%)APTTTTFIB | 24.0±3.536±755±619±30.95±0.15 | 22.0±3.538±853+520±40.98±0.18 |
n=90
两种清洗剂同常规血凝项目分析结果间无显著性差异
实验室中自动化分析仪在操作过程中清洗剂的使用是必不可少的。因仪器的类型不同对清洗剂的要求相距甚远。共同的目的是将比色杯、管道、吸样针清洗干净,更重要的是清除交叉污染。而全自动血凝仪的测定原理为磁珠法,其检测杯为一次性,因此对检测杯清洗没有特殊要求。法国STAGO全自动血凝仪为无水冲洗式的清洗剂,此种方式是因一次性检测杯的使用而设计的,虽方式简便、快捷,但在没有水冲洗的条件下,达到完全清洗并不发生交叉污染,就会对两种清洗剂的成分、配伍要求甚高。根据这一特点,我们经过大量的筛选、配比,充分利用表面活性剂的性质,以一定的工艺,根据清洗对象设计研究出两种清洗剂。此清洗剂为无粘性清洗剂。因为当特殊清洗液被吸入几秒钟后,特殊清洗液与常规清洗液被排出,若清洗液粘性大,而仍滞留于内壁几秒,在吸样针吸入标本后,就与标本混合,即影响样本的体积,继而影响检验结果。又由于清洗剂中成份可能干扰测定的成份,而又影响检验结果,尤其对纤维蛋白原的影响更为突出。在测定纤维蛋白原时,所需样本量为5ul,内壁如存在1ul清洗液就会因吸样体积而给纤维蛋白原的测定造成很大的误差。常规清洗与特殊清洗剂之间PH的作用:在设计特殊清洗剂时考虑到清洗对象中蛋白质的存在,我们将其PH用碱调至10.0-11.0之间。由于此仪器为无水冲洗模式,常规清洗剂既要保证管道的清洗作用,又要将特殊清洗剂冲洗干净,不影响检验结果,因此经反复试验推敲,将其PH设为5—6之间最为适宜。我们所研制的清洗剂(两种)以非结构型透明胶体洗涤为特点。一般情况下,表面活性剂的浓度低于15%时可不加助溶剂,但本研究显示清洗剂中表面活性剂的浓度必须低于15%,这是清洗目标所决定的。不必加入助溶剂。但加入助溶剂后溶液能保持稳定、降低粘度。由于STAGO全自动血凝仪冲洗时有较大冲力,且废液被吸入缓冲瓶的吸力较大,形成丰富泡沫,而出现“溢锅”现象,这样可能将清洗池周围及电路污染,轻则污染机器内部,重则造成短路将仪器损坏;在废液缓冲液中如泡沫形成太多,使飘浮塞上浮,废液虚拟已满,频繁造成负压启动吸引废液,也会使仪器受到损害。清洗剂中的三种表面活性剂虽然其性能不同,剂量不同,但都发挥了很大的作用:(1)非离子表面活性剂:通常情况下是不溶于水,不电离。其分子结构中的亲油基团与离子表面活性剂大致相同。亲水基一般是含有羟基的化合物或含有醚基的化合物组成的含氧基团。正是由于这一结构特点,非离子表面活性剂则较离子型表面活性剂有一系列优点。如稳定性高,不易受电解质的影响,也不受酸、碱的影响,因此与其它类型的表面活性剂相比有较好的溶解性。在水和有机溶剂中也有很好的溶解性。其亲水亲油平衡值(HLB)的强弱决定了其乳化、浸透、湿润、溶解的性能各不相同。(2)阴离子表面活性剂:当溶于水时,与其增水基相连的亲水基是阴离子,亲水基与增水基的不同,其去污能力各自不同,不同的阴离子表面活性剂其消泡作用也各自不同。(3)阴离子表面活性剂的共同特点是它溶于水时与增水基相连的亲水基是阳离子,其作用是杀菌、柔软、脱脂、破乳。我们研制的清洗液与进口清洗剂的外观相同。其去污原理是吸附、湿润、渗透、乳化、分散、增溶等综合作用的结果。这种清洗剂实际上是一种水包油型乳状液(O/W),清洗剂中起乳化作用的表面活性剂称为乳化剂。它有两种作用:一是降低两种液体间界面张力的稳定作用。因为当油在水中分散成许多微小离子时,就扩大了它与水的接触面积,因此它和水之间的斥力液随之增加而处于不稳定状态。当加入一些乳化剂时,乳化剂分子的亲油基端吸附在油滴微粒表面,而亲水基一端深入水中,并在油滴表面定向排列组成一层亲水性分子膜,使油水界面张力降低,并且减少了油滴之间的相互吸引力,防止油滴聚集重新恢复水油两层的原状。二是保护作用,表面活性剂在油滴周围形成的定向排列亲水分子膜又是一层坚固的保护膜,能防止油滴碰撞时,互相聚集,如果是离子型表面活性剂形成的定向排列分子膜,还会使油滴带负电荷,油滴带上同种电荷排斥力增加,也可防止油滴,在频繁碰撞中发生聚集。
在湿法脱脂洗涤过程中和液状油性污垢的洗涤去除过程中,乳化剂有着十分重要的作用:附着在物体表面的液状污垢,浸没在表面活性剂水溶液中,表面逐渐被湿润、乳化、解离的过程,叫做卷缩过程[2]。例如,液体污垢一般能在固体表面很好的湿润铺展,在洗涤去污过程中向水中加入表面活性剂之后,由于它有降低水的表面张力作用,所以很快水溶液就在固体表面铺展并湿润,结果表面活性剂水溶液逐渐占据表面把油污顶替下来。原来铺展在物体表面上的液体油污,逐渐卷缩成油珠(接触角逐渐加大,有湿润变为不湿润,这个过程称为卷缩)。在机械力或水流冲击作用下,“卷缩”的油滴就会脱离表面进入水中并被表面活性剂乳化形成水包油乳滴而稳定分散在洗涤液中。
还有表面活性剂水溶液有程度不同的发泡作用,产生的泡沫表面对污垢有着强烈的吸附作用,使清洗液的耐久力提高,也防止污垢的再沉积,但过渡的起泡作用容易引起溢锅,所以清洗剂中加入少量的抑泡剂使泡沫减低不易溢出,否则造成清洗池被污染,重则造成短路将仪器损坏。
本发明根据被清洗物的性质,选择不同种类的表面活性剂,选择具有高效协同的成分及其浓度比,反复筛选,配伍研制成新型的高效清洗剂,经临床应用效果良好,对吸样针无损害,对实验结果无影响,具有明显的社会效益和经济效益。清洗剂经齐鲁医院、山东中医药大学附属医院、山东电力医院、山东省医聊城市人民医院的试用和评价,其效果能达到相应要求,完全可以替代进口清洗剂。
本试剂的推广应用,使医院节约挖潜,降低成本向进口试剂的国产化迈进了一步,另外本清洗剂为无磷清洗剂,选用的清洗剂生物降解性好,毒性小:聚氧乙烯壬基苯酚醚(n=9)的LD50经口、大鼠为2.6g/kg;甘油单月桂酸酯的LD50经口、大鼠为53.4g/kg;十二烷基苯磺酸钠的LD50经口、大鼠为1.3g/kg。对保护环境造福后代,有深远的意义,所以具有广阔的推广前景。
(四)具体实施方式
实施例1:
该STAGO系列全自动血凝仪的清洗方法,试验开始,1号样品针吸标本加入样品杯,由下而上吸入特殊清洗剂,在样品针管腔内停留2秒,然后用常规清洗剂由上而下进行冲洗,再吸标本完成一个循环;试验过程中,2号、3号样品针吸入试剂加入样品杯中,反应开始,然后吸入特殊清洗剂,在样品针管腔内停留2秒,然后用常规清洗剂由上而下进行冲洗5次,再吸试剂完成,下一次试剂加入。特殊清洗剂是采用如下方法配制的:(1)聚氧乙烯壬基苯酚醚50ml加到50ml温度为55℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(2)甘油单月桂酸酯50ml加到50ml温度为50℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(3)十二烷基苯磺酸钠10g用100ml去离子水加热溶解;(4)将上述各步骤配制的水溶液完全混合,配成原液;(4)取原液20ml,加到475ml去离子水中,另加氢氧化钠1g,安替福民5ml,混匀,pH调为10过滤即可;
常规清洗剂是采用如下方法配制的:(1)聚氧乙烯壬基苯酚醚50ml加到50ml温度为50℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(2)十二烷基苯磺酸钠5g用100ml去离子水加热溶解;(3)将上述各步骤配制的水溶液完全混合,配成原液;(4)取原液20ml、烷基二甲基苄基氯化铵2.5ml加到2477.5ml去离子水中,再加20g硼酸,混匀,用磷酸二氢钠调pH为5,过滤即可。
实施例2:
该STAGO系列全自动血凝仪的清洗方法,样品针由下而上吸入特殊清洗剂,在样品针管腔内停留2秒,然后用常规清洗剂由上而下进行冲洗,特殊清洗剂是采用如下方法配制的:(1)聚氧乙烯壬基苯酚醚50ml加到50ml温度为60℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(2)甘油单月桂酸酯50ml加到50ml温度为50℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(3)十二烷基苯磺酸钠10g用100ml去离子水加热溶解;(4)将上述各步骤配制的水溶液完全混合,配成原液;(4)取原液20ml,加到475ml去离子水中,另加氢氧化钠1g,安替福民5ml,混匀,pH调为11过滤即可;常规清洗剂是采用如下方法配制的:(1)聚氧乙烯壬基苯酚醚50ml加到50ml温度为55℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(2)十二烷基苯磺酸钠5g用100ml去离子水加热溶解;(3)将上述各步骤配制的水溶液完全混合,配成原液;(4)取原液20ml、烷基二甲基苄基氯化铵2.5ml加到2477.5ml去离子水中,再加20g硼酸,混匀,用磷酸二氢钠调pH为6,过滤即可。
Claims (1)
1.一种STAGO系列全自动血凝仪的清洗方法,样品针由下而上吸入特殊清洗剂,在样品针管腔内停留2秒,然后用常规清洗剂由上而下进行冲洗,其特征在于:
所述特殊清洗剂是采用如下方法配制的:(1)聚氧乙烯壬基苯酚醚50ml加到50ml温度为50—60℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(2)甘油单月桂酸酯50ml加到50ml温度为50—60℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(3)十二烷基苯磺酸钠10g用100ml去离子水加热溶解;(4)将上述各步骤配制的水溶液完全混合,配成原液;(4)取原液20ml,加到475ml去离子水中,另加氢氧化钠1g,安替福民5ml,混匀,pH调为10--11过滤即可;
所述常规清洗剂是采用如下方法配制的:(1)聚氧乙烯壬基苯酚醚50ml加到50ml温度为50—60℃的去离子水中搅拌至完全溶解;(2)十二烷基苯磺酸钠5g用100ml去离子水加热溶解;(3)将上述各步骤配制的水溶液完全混合,配成原液;(4)取该原液20ml、烷基二甲基苄基氯化铵2.5ml,加到2477.5ml去离子水中,再加20g硼酸,混匀,用磷酸二氢钠调pH为5—6,过滤即可。
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STAGO COMPACT CT 全自动血凝仪的系统维护. 潘林,李宏伟,张延芳,马全萍,张丽.现代预防医学,第33卷第5期. 2006 |
STAGO COMPACT CT 全自动血凝仪的系统维护. 潘林,李宏伟,张延芳,马全萍,张丽.现代预防医学,第33卷第5期. 2006 * |
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