CN100406458C

CN100406458C - 萘酰亚胺衍生物及其用途

Info

Publication number: CN100406458C
Application number: CNB2005100267846A
Authority: CN
Inventors: 钱旭红; 杨鹏
Original assignee: Dalian University of Technology; East China University of Science and Technology
Current assignee: Dalian University of Technology; East China University of Science and Technology
Priority date: 2005-06-15
Filing date: 2005-06-15
Publication date: 2008-07-30
Anticipated expiration: 2025-06-15
Also published as: CN1880313A

Abstract

本发明涉及一种萘酰亚胺衍生物及其用途，所述的衍生物是在吖啶或吩嗪类化合物的芳环上并入杂环后获得，其结构如式(1)所示。与现有的吖啶或吩嗪类化合物相比，本发明所述衍生物对DNA的嵌插能力得以提高，从而提高它们的抗肿瘤活性，尤其是对人肺癌、胃癌、肝癌和白血病等多种不同组织来源的肿瘤细胞的增殖显示出明显的抑制活性，且作用效果呈明显的量效关系。

Description

萘酰亚胺衍生物及其用途

技术领域

本发明涉及一类萘酰亚胺衍生物(或称吖啶或吩嗪衍生物)及其用途。

背景技术

芳环上无并杂环的吖啶或吩嗪类化合物是一类有抗癌活性的化合物，其中活性最好的DACA，NSC 601316(9-氨基-N-[2-(二甲胺基)乙基]-吖啶-4-羧基胺)，已经进入二期临床试验(Kestell，P.Dunlop，I.C.McCrystal，M.R.Cancer Chemother，Pharmacol.1999，44，45-50)。这类化合物能嵌插入DNA的碱基对之间，抑制DNA和RNA的合成，并能抑制拓扑异构酶II，从而达到抑制肿瘤的目的。

然而已有的吖啶或吩嗪类化合物对DNA的嵌插能力还不强，导致其抗肿瘤活性不高。因此，如何提高该类化合物对DNA的嵌插能力，从而提高它们的抗肿瘤活性成为本发明需要解决的技术问题。

发明内容

本发明的发明人经广泛且深入地研究后发现：如能增大吖啶或吩嗪类化合物的芳香环平面和增强芳香环的平面刚性，则可提高其对DNA的嵌插能力，从而提高它们的抗肿瘤活性。据此，发明人设计并合成了一类在吖啶或吩嗪类化合物的芳环上并入杂环的吖啶或吩嗪类衍生物(或称萘酰亚胺衍生物)。经体外抑制肿瘤细胞生长活性测定，本发明所述的衍生物对肿瘤细胞生长表现出很强的抑制能力。

本发明所说的萘酰亚胺衍生物，其具有式(1-a)或式(1-b)所示结构：

式中：R₁为

当X为C时：R₂为H、卤素、-S-R₆、

R₃为H；

其中：R₄、R₅、R₇、R₇、R₈、R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂分别选自H或C₁～C₆烷基中一种，n、m和p分别为1～6，A为式(2)所示基团，式(2)中曲线表示取代位；

当X为N时：R₂不存在，R₃为H、C₁～C₆烷基或C₁～C₆烷氧基。

在本发明中，优选的n为1～3，最佳的n为2；优选的R₄、R₅分别选自C₁～C₃烷基中一种；

当X为C时：

优选的R₂为H、Cl、Br、-S-R₆、

其中：R₆、R₇、R₈和R₉分别选自C₁～C₃烷基中一种，R₁₀、R₁₁和R₁₂分别选自H和C₁～C₃烷基中一种，m和p分别为1～3，A为上述式(2)所示结构；

当X为N时：

优选的R₃为H、C₁～C₃烷基或C₁～C₃烷氧基，最佳的R₃为H、甲基或甲氧基。合成本发明所述衍生物的主要步骤如下：

当X为C时，主要中间体的合成路线如下：

即以4-溴-1，8萘酐(购于鞍山市惠丰化工有限责任公司)为起始原料，与相应的胺在无水乙醇中反应得式(3)化合物；由式(3)化合物与邻氨基苯甲酸在有Cu/CuI存在下反应得式(4)化合物；将式(4)化合物在浓硫酸存在下环化或先将其在三乙胺/咪唑条件下还原为相应醇、然后用二氧化锰再氧化为醛、最后在三氟乙酸存在下环化得到一类目标化合物(上述合成路线中未标出)；式(4)化合物与POX₃反应得到另一类目标(式(5)化合物)；式(5)化合物分别与HS-R₆和相应的胺反应得到第三类目标化合物(上述合成路线中未标出)；

当X为N时，其合成的主要步骤如下：

以3-硝基，4-溴-1，8萘酐(购于鞍山市惠丰化工有限责任公司)为起始原料，首先将其与苯胺或由C₁～C₆烷基或C₁～C₆烷氧基取代的苯胺在DMF中反应，然后在NaBH₄/NaOH条件下环化，最后再与相应得胺(HN-R₁)反应得相应目标化合物。

上述合成过程中所涉及的试剂及原料均为市售品。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步的说明，其目的是为更好理解本发明的内容，但所举的实施例并不限制本发明的保护范围：

实施例1

8-氯-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮(化合物1)的合成：

(1)2.77克4-溴-1，8萘酐(0.01摩尔)，加入无水乙醇中，再向加入1克N，N-二甲基乙二胺。升温，回流，薄板层析跟踪反应，直至反应完全，过滤，称量固体为2.950克，所得固体抽干放置产率为85％。

(2)取2克由步骤(1)合成的产物，加入10毫升N，N’-二甲基甲酰胺中，再向加入0.8克，2-氨基苯甲酸(6毫摩尔)，0.038克青铜粉(0.6毫摩尔)，0.101克CuI(0.53毫摩尔)，升温100℃，薄板层析跟踪反应，直至反应完全，过滤，所得固体经柱层析分离，得2.0克红色固体。

(3)取1克由步骤(2)合成的产物，加入5毫升三氯氧磷中，升温110℃，薄板层析跟踪反应，直至反应完全，到入含有三乙基胺的冰水中，过滤，干燥，所得固体经柱层析分离，得纯目标产物(化合物1)0.65克，产率65％，熔点204.8-205.2℃(未校正)。

1H NMR(d₆-CDCl₃)δ(ppm)：2.998(s，6H，NCH₃)，3.514(s，2H，NCH₂)，4.690-4.720(t，J₁＝6.0Hz，J₂＝6.0Hz，2H，CONCH₂)，7.778-7.816(t，J₁＝7.6Hz，J₂＝7.6Hz，1H)，7.968-8.035(m，2H)，8.393-8.415(d，J₁＝8.8Hz，1H)，8.528-8.549(d，J＝8.4Hz，1H)，8.727-8.746(d，J＝7.6Hz，1H)，9.516(s，1H)，9.771-9.791(d，J＝8.0Hz，1H)

IR(KBr)：2923，2853，1702，1660，1347cm^-1

ESI-HRMS；C₂₃H₁₈ClN₃O₂(M+H⁺)计算值：404.1166，试验值：404.1158.

实施例2

8-乙硫基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮(化合物2)的合成：

称取1克化合物1(2.48毫摩尔)和0.18克乙硫醇(2.97毫摩尔)，加入10毫升无水乙腈中，升温，回流，薄板层析跟踪反应，直至反应完全，过滤，所得固体经柱层析分离，得纯品目标产物(化合物2)称量固体为0.83克，产率76％，熔点161.0-161.4℃(未校正)。

1H NMR(d₆-CDCl₃)δ(ppm)：1.192-1.229(t，J₁＝7.2Hz，J₂＝7.6Hz，3H，SCH₂CH₃)，2.509(s，6H，NCH₃)，2.865(s，2H，NCH₂)，3.046-3.101(q，J₁＝7.2Hz，J₂＝7.6Hz，J₃＝7.2Hz，2H，SCH₂)，4.438-4.474(t，J₁＝7.2Hz，J₂＝7.2Hz，2H，CONCH₂)，7.747-7.785(t，J₁＝8.4Hz，J₂＝6.8Hz，1H)，7.938-8.004(m，2H)，8.389-8.411(d，J＝8.8Hz，1H)，8.704-8.724(d，J＝8.0Hz，1H)，8.870-8.892(d，J＝8.8Hz，1H)，9.747-9.767(d，J＝8.0Hz，1H)，9.884(s，1H)

IR(KBr)：3297，2962，2852，1701，1663，1346cm^-1

ESI-HRMS；C₂₅H₂₃N₃O₂S(M+H⁺)计算值：430.1589，试验值：430.1592。

实施例3

8-N’，N’-二甲基胺基乙胺基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮(化合物3)的合成：

除用N，N-二甲基乙二胺代替乙硫醇外，其它合成及提纯方法同实施例2。所得产物0.91g，产率80％(化合物3)，熔点148.9-150.4℃(未校正)。

1H NMR(d₆-CDCl₃)δ(ppm)：2.468(s，6H，N(CH₃)₂)，2.526(s，6H，N(CH₃)₂)，2.750-2.778(t，J₁＝6.0Hz，J₂＝5.2Hz，2H，CH₂)，2.871(s，2H，CH₂)，4.066-4.095(t，J₁＝5.6Hz，J₂＝6.0Hz，2H，CH₂)，4.422-4.457(t，J₁＝6.8Hz，J₂＝7.2Hz，2H，CH₂)，7.516-7.552(t，J₁＝6.8Hz，J₂＝7.6Hz，1H)，7.799-7.884(m，2H)，8.132-8.153(d，J＝8.4Hz，1H)，8.199-8.220(d，J＝8.4Hz，1H)，8.617-8.636(d，J＝7.6Hz，1H)，9.355(s，1H)，9.629-9.651(d，J＝8.8Hz，1H)

IR(KBr)：3397，2924，2854，1692，1653，1347cm^-1

ESI-HRMS；C₂₃H₁₈ClN₃O₂(M+2H⁺/2)计算值：228.6239，试验值：228.6231。

实施例4

8-N-甲基哌嗪基-5-(2-N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮(化合物4)的合成

除用N-甲基哌嗪代替乙硫醇外，其它合成及提纯方法同实施2，所得产物(化合物4)，熔点197.6-198.2℃。

1H NMR(d₆-DMSO)δ(ppm)：1.622(br s，7H，(CH₂CH₂)₂NCH₃)，2.605(s，6H，NCH₃)，2.935(brs，4H，(CH₂CH₂)₂NCH₃)，3.874(s，2H，NCH₂)，4.503(s，2H，CONCH₂)，7.619(s，1H)，7.855-7.964(m，2H)，8.345-8.366(d，J₁＝8.4Hz，1H)，8.424-8.446(d，J₁＝8.8Hz，1H)，8.674-8.693(d，J＝7.6Hz，1H)，9.455(s，1H)，9.702-9.724(d，J＝8.8Hz，1H)。

IR(KBr)：2937，2819，1698，1657，1377cm^-1

ESI-HRM S；C₂₃H₁₉N₃O₂(M+H⁺)计算值：370.1556，试验值：370.1565。

实施例5

8-氧代-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮(化合物5)的合成：

称取1克由例2步骤(2)合成的产物，加入5毫升98％的浓硫酸，90℃反应2小时，到入水中，过滤，干燥，所得固体经柱层析分离，所得产物(化合物5)熔点＞300℃(未校正)。

1H NMR(d₆-DMSO)δ(ppm)：2.246(s，6H，NCH₃)，2.550(s，2H，NCH₂)，4.147(s，2H，CONCH₂)，7.391-7.425(t，J₁＝6.8Hz，J₂＝6.8Hz，1H)，7.807-7.844(t，J₁＝7.6Hz，J₂＝7.2Hz，1H)，7.950-8.022(m，2H)，8.220-8.239(d，J＝7.6Hz，1H)，8.556-8.583(d，J＝6.8Hz，1H)，9.094(s，1H)，9.276-9.298(d，J＝8.8Hz，1H).

IR(KBr)：3327，2959，2817，1699，1656，1396cm^-1

ESI-HRMS；C₂₃H₂₀N₄O₂(M+H⁺)计算值：386.1505，试验值385.1516。

实施例6

8-H-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮(化合物6)的合成：

(1)取114毫克(0.283毫摩尔)由例2步骤(2)合成的产物，加入10毫升无水四氢呋喃，再向其中加入40毫克咪唑(0.588毫摩尔)和76毫克(0.752毫摩尔)三乙基胺，回流24小时，冷却，将2毫升0℃的水加入其中，搅拌，再向其中加入114毫克(0.632毫摩尔)硼氢化钠，常温反应，薄板层析跟踪反应，直至反应完全，加入10％的盐酸中和至PH值为6，然后加入NH₃水中和至PH值为9，过滤，得到暗红色固体。

(2)向所得产品中加入无水丙酮，再向其中加入新制的过量的二氧化锰固体粉末，薄板层析跟踪反应，直至反应完全，过滤，丙酮洗涤滤饼，合并滤液。

(3)蒸干丙酮。，所得产品不经分离，在氮气保护下向其中加入2毫升三氟乙酸，薄板层析跟踪反应，直至反应完全，到入冰氨水中，过滤，干燥，所得固体经柱层析分离，所得产物30.9毫克(化合物6)产率32％。熔点：191-193℃(未校正)。

1H NMR(d⁶-DMSO)δ(ppm)：2.458(s，6H，NCH₃)，2.805(s，2H，NCH₂)，4.412-4.447(t，J₁＝6.4Hz，J₂＝7.6Hz，2H，CONCH₂)，7.817-7.854(t，J₁＝7.2Hz，J₂＝7.6Hz，1H)，7.941-8.017(m，2H)，8.128-8.150(d，J＝8.8Hz，1H)，8.401-8.423(d，J＝8.8Hz，1H)，8.717-8.737(d，J₁＝8.0Hz，1H)，8.968(s，1H)，9.041(s，1H)，9.752-9.773(d，J＝8.4Hz，1H).

IR(KBr)：2926，2854，1735，1632，1384cm^-1

ESI-HRMS；C₂₃H₁₉N₃O₂(M+H⁺)计算值：370.1556，试验值：370.1565.

实施例7

N，N′-双{2-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]乙基}胺(化合物7)的合成：

称取2克(4.9毫摩尔)化合物1，加入10毫升已腈中，再向加入0.2克(1.9毫摩尔)二乙烯三胺(NH₂(CH₂)₂NH(CH₂)₂NH₂)，升温，回流，薄板层析跟踪反应，直至反应完全，过滤，所得固体经柱层析分离，得2.0克纯的目标产品，产率49％，熔点：191.3-191.5℃(未校正)

1H NMR(d₆-DMSO)δ(ppm)：2.285(s，4H，2CH₂)，2.447(s，12H，2N(CH₃)₂)，3.186(s，4H，2CH₂)，3.713(s，4H，2CH₂)，4.020(s，4H，2CH₂)，7.325(s，2H)，7.671-7.70(m，4H)，7.782-7.803(d，J＝8.4Hz，2H)，8.226-8.246(d，J＝8.0Hz，2H)，8.279-8.300(d，J＝8.4Hz，2H)，8.955(s，2H)，9.080-9.101(d，J＝8.4Hz，2H)。

IR(KBr)：3427，2922，2853，1696，1653，1346cm^-1。

ESI-HRMS；C₅₀H₄₇N₉O₄(M+2H⁺/2)计算值：419.6954，试验值：419.6948。

实施例8

N，N′-二{3-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]丙基}胺(化合物8)的合成：

除用N，N-双(三氨基丙基)胺(NH₂(CH₂)₃NH(CH₂)₃NH₂)替代二乙烯三胺外，其它合成及提纯方法同实施例7，得目标化合物8，熔点：195.9-196.1℃(未校正)。

1HNMR(d₆-CDCl₃)δ(ppm)：2.177(s，4H，2CH₂)，2.325(s，12H，2N(CH₃)₂)，2.475(s，4H，2CH₂)，3.178(s，4H，2CH₂)，3.856(s，4H，2CH₂)，4.182(s，4H，2CH₂)，7.320-7.358(t，J₁＝7.2Hz，J₂＝8.0Hz，2H)，7.621-7.659(m，4H)，7.768-7.789(d，J＝8.4Hz，2H)，8.017(brs，2H)，8.317-8.337(d，J＝8.0Hz，2H)，8.863(s，2H)，8.978-8.998(d，J＝8.0Hz，2H)

IR(KBr)：3399，2924，2853，1689，1650，1376cm^-1

ESI-HRMS；C₅₂H₅₁N₉O₄(M+3H⁺/3)计算值：289.4766，试验值：289.4767。

实施例9

N，N′-双{3-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]丙基}甲基胺(化合物9)的合成：

除用N，N-双(三氨基丙基)甲基胺(NH₂(CH₂)₃NCH₃(CH₂)₃NH₂)替代二乙烯三胺外，其它合成及提纯方法同实施例7，得目标化合物9，熔点：213.6-213.8℃(未校正)。

1H NMR(d₆-DMSO)δ(ppm)：2.149(s，4H，2CH₂)，2.301(s，4H，2CH₂)，2.317(s，3H，NCH₃)，2.417(s，12H，2NCH₃)，2.742(s，4H，2CH₂)，3.656(s，4H，2CH₂)，4.015(s，4H，2CH₂)，7.330-7.368(t，J₁＝7.6Hz，J₂＝7.6Hz，2H)，7.330-7.368(t，J₁＝7.6Hz，J₂＝7.6Hz，2H)，7.561-7.689(m，6H)，8.125-8.143(d，J＝7.2Hz，2H)，8.282-8.302(d，J＝8.0Hz，2H)，8.713(s，2H)，8.857-8.875(d，J＝7.2Hz，2H)

IR(KBr)：3431，2922，2854，1691，1652，1395cm^-1

ESI-HRMS；C₅₃H₅₃N₉O₄(M+3H⁺/3)计算值：294.1485，试验值：294.1483。

实施例10

N，N′-双{2-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]乙基}-乙二胺(化合物10)的合成

除用N，N-双(3-氨基乙基)乙二胺(NH₂(CH₂)₂NH(CH₂)₂NH(CH₂)₂NH₂)替代二乙烯三胺外，其它合成及提纯方法同实施例7，得化合物10，熔点：159.9-160.1℃(未校正).

1H NMR(d₆-DMSO)δ(ppm)：2.353-2.387(t，J₁＝6.8Hz，J₂＝6.8Hz，4H，2CH₂)，2.404(s，6H，2NCH₃)，2.968(s，4H，2CH₂)，3.133(s，4H，2CH₂)，3.791(s，4H，2CH₂)，3.973(s，4H，2CH₂)，7.328(s，2H)，7.569-7.639(m，6H)，8.119-8.136(d，J＝6.8Hz，2H)，8.294-8.314(d，J＝8.0Hz，2H)，8.846(s，2H)，8.922-8.943(d，J＝8.4Hz，2H)，

IR(KBr)：3419，2926，2852，1693，1650，1392cm^-1.

ESI-HRMS；C₅₂H₅₂N₁₀O₄(M+2H⁺/2)计算值：441.2165，试验值：441.2179。

实施例11

N，N′-双{2-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]乙基}-1，3-丙二胺(化合物11)的合成：

除用N，N-双(3-氨基丙基)-1，3-丙二胺(NH₂(CH₂)₂NH(CH₂)₃NH(CH₂)₂NH₂)替代二乙烯三胺外，其它合成及提纯方法同实施例7，得化合物11，熔点：102.2-102.5℃(未校正).

1HNMR(d₆-DMSO)δ(ppm)：2.117-2.135(m，2H CH₂)，2.377(s，4H，2CH₂)，2.538(s，12H，2N(CH₃)₂)，2.890(s，4H，2CH₂)，3.027(s，4H，2CH₂)，3.820(s，4H，2CH₂)，3.904(s，4H，2CH₂)，7.400(s 2H)，7.600-7.691(m，6H)，8.167-8.186(d，J＝7.6Hz，2H)，8.268-8.288(d，J＝8.0Hz，2H)，8.847(s，2H)，8.978-8.998(d J＝8.0Hz，2H)

IR(KBr)：3334，2924，2853，1695，1654，1391cm^-1

ESI-HRMS；C₅₃H₅₄N₁₀O₄(M+2H⁺/2)计算值：448.2243，试验值：448.2260。

实施例12

5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮(化合物12)的合成：

(1)3.22克3-硝基，4-溴-1，8萘酐(0.01摩尔)和1.1克苯胺(0.012摩尔)，加入N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，室温搅拌。薄板层析跟踪反应，直至反应完全，过滤，称量固体为3.05克，所得固体抽干。

(2)称取1克NaBH₄(0.0263摩尔)和2克步骤(1)中所得产品，加入到100毫升2M浓度的NaOH水溶液中。升温，回流。薄板层析跟踪反应，直至反应完全，冷却，向其中滴6M的HCl至pH值为6，过滤，干燥，然后加入甲醇和三乙胺的混合液中，回流至溶液为均相。冷却后用醋酸调节到pH值到6，过滤，干燥。

(3)称取0.3毫升N’，N’-二甲基乙二胺和0.6克步骤(2)所得产品，加入30毫升乙醇中升温，回流。薄板层析跟踪反应，直至反应完全。所得固体经柱层析分离，所得产物(化合物12)熔点198.3-198.5℃(未校正)。

1H NMR(CDCl₃)δ(ppm)：2.595(s，6H，NCH₃)，2.995(s，2H，NCH₂)，4.508(s，2H，CONCH₂)，7.955-8.075(m，3H)，8.379-8.426(m，2H)，8.764-8.784(d，J＝8.0Hz，1H)，9.215(s，1H)，9.691-9.711(d，J＝8.0Hz，1H)，

IR(KBr)：2924，2854，1708，1662，and 1336，cm^-1.

ESI-HRMS：CalcdforC₂₂H₁₈N₄O₂(M+H⁺)：计算值：371.1508，试验值：371.1510。

实施例13

9-甲基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮(化合物13)的合成：

除用3-甲基苯胺代替苯胺外，其它合成及提纯方法同实施例12。所得产物产率40％(化合物13)熔点178.1-178.5℃(未校正).

1H NMR(CDCl₃)δ(ppm)：2.465(s，6H，NCH₃)，2.826(s，2H，NCH₂)，2.994(s，3H，CH₃)，4.427-4.462(t，J₁＝6.8Hz，J₂＝7.2Hz，2H，CONCH₂)，7.770-7.786(d，J＝6.4Hz，1H)，7.862-7.901(t，J₁＝8.0Hz，J₂＝7.6Hz，1H)，8.014-8.052(t，J₁＝7.6Hz，J₂＝7.6Hz，1H)，8.220-8.241(d，J＝8.4Hz，1H)，8.747-8.766(d，J＝7.6Hz，1H)，9.238(s，1H)，9.660-9.680(d，J＝8.0Hz，1H)

IR(KBr)：2924，2853，1702，1660，1340cm^-1.

ESI-HRMS：C₂₃H₂₀N₄O₂(M+H⁺)：计算值：385.1665，试验值：385.1671。

实施例14

9-甲氧基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮(化合物14)的合成：

除用3-甲氧基苯胺代替苯胺外，其它合成及提纯方法同实施例12。所得产物产率45％(化合物14)熔点189.6-190.5℃(未校正)。

1H NMR(CDCl₃)δ(ppm)：2.998(s，6H，NCH₃)，3.516(s，2H，NCH₂)，4.244(s，3H，OCH₃)，4.698(s，2H，CONCH₂)，7.259-7.298(t，J₁＝7.6Hz，J₂＝8.0Hz，1H)，7.912-8.051(m，3H)，8.767-7.784(d，J＝6.8Hz，1H)，9.390(s，1H)，9.687-9.708(d，J＝8.4Hz，1H)，

IR(KBr)：2924，2853，1702，1660，1340cm^-1.

ESI-HRMS，C₂₃H₂₀N₄O₃(M+H⁺)：计算值：401.1614，试验值：401.1595.

实施例15

10-甲基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮(化合物15)的合成：

除用4-甲基苯胺代替苯胺外，其它合成及提纯方法同实施例12。所得产物产率75％(化合物15)熔点209.6-210.1℃(未校正)。

1H NMR(CDCl₃)δ(ppm)：2.485(s，6H，NCH₃)，2.722(s，3H，CH₃)，2.852(s，2H，NCH₂)，4.432-4.467(t，2H，J₁＝6.8Hz，J₂＝7.2Hz，CONCH2)，7.818-7.843(d，J＝10.0Hz，1H)，8.011-8.050(t，J₁＝7.6Hz，J₂＝8.0Hz，1H)，8.133(s，1H)，8.280-8.302(d，J＝8.8Hz，1H)，8.740-8.758(d，J＝7.2Hz，1H)，9.182(s，1H)，9.647-9.667(d，J＝8.0Hz，1H)，

IR(KBr)：2924，2854，1704，1663，1357cm^-1.

ESI-HRMS，C₂₃H₂₀N₄O₂(M+H⁺)：计算值：385.1665，试验值Found：385.1664。

实施例16

10-甲氧基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮(化合物16)的合成：

除用4-甲氧基苯胺代替苯胺外，其它合成及提纯方法同实施例12。所得产物产率85％(化合物16)熔点214.4-215.2℃(未校正).

1H NMR(CDCl₃)δ(ppm)：2.610(s，6H，NCH₃)，3.010(s，2H，NCH₂)，4.088(s，3H，OCH₃)，4.512(s，2H，CONCH₂)，7.560-7.567(d，J＝2.8Hz，1H)，7.645-7.651(d，J＝2.4Hz，1H)，7.668-7.675(d，J＝2.8Hz，1H)，8.010-8.049(t，J₁＝7.6Hz，J₂＝8.0Hz，1H)，8.256-8.280(d，J＝9.6Hz，2H)，8.729-8.748(d，J＝7.6Hz，1H)，9.164(s，1H)，9.630-9.650(d，J＝8.0Hz，1H)，

IR(KBr)：2924，2853，1705，1655，1350cm^-1.

ESI-HRMS，C₂₃H₂₀N₄O₃(M+H⁺)：计算值：401.1614，试验值：401.1618。

实施例17

12-甲基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮(化合物17)的合成：

除用2-甲基苯胺代替苯胺外，其它合成及提纯方法同实施例12。所得产物(化合物17)产率75％熔点185.2-185.5℃(未校正)。

1H NMR(CDCl₃)δ(ppm)：2.977(s，6H，NCH₃)，3.061(s，3H，CH₃)，3.497(s，2H，NCH₂)，4.698(s，2H，CONCH₂)，7.833-7.860(m，2H)，8.053-8.093(t，J₁＝8.0Hz，J₂＝8.0Hz，1H)，8.200-8.217(d，J＝6.8Hz，1H)，8.753-8.771(d，J＝7.2Hz，1H)，9.226(s，1H)，9.724-9.746(d，J＝8.8Hz，1H).

IR(KBr)：2924，2854，1704，1667，1345cm^-1

ESI-HRMS，C₂₃H₂₀N₄O₂(M+H⁺)：计算值：385.1665，385.1665，试验值：385.1682。

实施例18

体外抑制肿瘤细胞生长活性测定：

分别用四氮唑盐(microculture tetrozolium，MTT)还原法对P388小鼠白血病细胞和磺酰罗丹明B(SulforhodamineB，SRB)蛋白染色法对A-549人肺腺癌细胞进行抑制试验。

四氮唑盐(MTT)还原法的具体操作是：按不同肿瘤生长速率，将一定数量处于对数生长期的肿瘤细胞90μl/孔接种于96孔微量培养板内，培养24h后加入药液10μl/孔，对每个细胞株，每个浓度均为三个复孔。另设无细胞调零孔、如果药物有颜色要做相应药物浓度无细胞调零孔。肿瘤细胞在37℃、5％CO₂条件下培养48小时后，加MTT(Sigma)液5mg/ml用生理盐水配制20μl/孔；继续培养4小时后，加入三联液(10％SDS-5％异丁醇-0。01mol/1HCl)50μl/孔，于CO₂培养箱中过夜。然后用酶标仪测OD570值。按下列公式计算被测物对癌细胞生长的抑制率：肿瘤抑制率＝(对照组OD值-治疗组OD值)/对照组OD值×100％。

磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B，SRB)蛋白染色法的具体操作如下：根据细胞生长速率，将处于对数生长期的肿瘤细胞以90μl/孔接种于96孔培养板，贴壁生长24小时再加药10μl/孔。每个浓度设三复孔。并设相应浓度的生理盐水溶媒对照及无细胞调零孔。肿瘤细胞在37℃、5％CO₂条件下培养72小时，然后倾去培养液，用10％冷TCA固定细胞，4℃放置1小时后用蒸馏水洗涤5次，空气中自然干燥。然后加入由1％冰醋酸配制的SRB(Sigma)4mg/ml溶液100μl/孔，室温中染色15分钟，去上清液，用1％醋酸洗涤5次，空气干燥。最后加入150μl/孔的Tris溶液，酶标仪520nm波长下测定A值。按下列公式计算被测物对癌细胞生长的抑制率：肿瘤抑制率＝(A_540对照孔-A_540给药孔)/A_540对照孔×100％。

筛选方法：磺酰罗丹明B(SulforhodamineB，SRB)蛋白染色法

四氮唑盐(microculture tetrozolium，MTT)还原法＊

细胞株：P388小鼠白血病^* A-549人肺腺癌

作用时间：48h＊-72h

筛选方法：磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B，SRB)蛋白染色法

四氮唑盐(microculture tetrozolium，MTT)还原法＊

对化合物1～17的体外生测结果如下：

化合物1～17对A-549生长的抑制率％

化合物1～17对P388生长的抑制率％

以上化合物具有广泛的抗肿瘤活性，尤其是对人肺癌、胃癌、肝癌和白血病等多种不同组织来源的肿瘤细胞的增殖显示出明显的抑制活性，且作用效果呈明显的量效关系。

Claims

1.一种萘酰亚胺衍生物，其具有式(1-a)或式(1-b)所示结构：

式中：R₁为

当X为C时：R₂为H、卤素、-S-R₆、

或R₃为H；

其中：R₄、R₅、R₇、R₇、R₈、R₁₀、R₁₀、R₁₁和R₁₂分别选自H或C₁～C₆烷基中一种，n、m和p分别为1～6，A为式(2)所示基团，式(2)中曲线表示取代位；

当X为N时：R₂不存在，R₃为H、C₁～_C6烷基或C₁～C₆烷氧基。

2.如权利要求1所述的萘酰亚胺衍生物，其特征在于，其中n为1～3，R₄、R₅分别选自C₁～C₃烷基中一种。

3.如权利要求2所述的萘酰亚胺衍生物，其特征在于，其中X为N，R₃为H、C₁～C₃烷基或C₁～C₃烷氧基。

4.如权利要求2所述的萘酰亚胺衍生物，其特征在于，其中当X为C，所说的卤素为氯或溴，R₆、R₇、R₈和R₉分别选自C₁～C₃烷基中一种，R₁₀、R₁₁和R₁₂分别选自H和C₁～C₃烷基中一种，m和p分别为1～3。

5.如权利要求4所述的萘酰亚胺衍生物，其特征在于，所述的萘酰亚胺衍生物为化合物8-氯-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮、8-乙硫基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮、8-N-甲基哌嗪基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮、8-氧代-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮、8-H-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮、N，N′-双{2-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]乙基}胺、N，N′-二{3-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]丙基}胺、N，N′-双{3-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]丙基}甲基胺、N，N′-双{2-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]乙基}-乙二胺或N，N′-双{2-[(4，6-二氧-5-(2-(二甲基氨基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-8-)氨基]乙基}-1，3-丙二胺。

6.一种萘酰亚胺衍生物，其特征在于，所说的萘酰亚胺衍生物是8-N’，N’-二甲基胺基乙胺基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[4，5-bc]吖啶-4，6-二酮。

7.如权利要求3所述的萘酰亚胺衍生物，其特征在于，所述的萘酰亚胺衍生物为化合物5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮、9-甲基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮、9-甲氧基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮、10-甲基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮、10-甲氧基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮或12-甲基-5-(2-(N’，N’-二甲基胺基)乙基)-5H-异喹啉[5，4-ab]吩嗪-4，6-二酮。

8.如权利要求1～7中任意一项所述的萘酰亚胺衍生物在制备抑制肿瘤细胞增殖的药物中的应用。