CN100364440C - 一种仔猪肠道营养肽 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种仔猪肠道营养肽。它是寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质中的一种或一种以上物质按比例配伍加工而成。用大豆蛋白和菜籽蛋白以5∶1～2组成酶解原料，经灭菌，先后用枯草杆菌中性蛋白酶和黑曲霉酸性蛋白酶进行酶解；然后灭酶，超滤，制到寡肽。在仔猪日粮中添加1～5%本发明的仔猪肠道营养肽，可解决仔猪的断奶应激，显著提高仔猪生产性能。本发明的仔猪肠道营养肽能替代血浆蛋白粉等动物源活性蛋白，从而在根本上解决应用动物源活性蛋白所面临的生物安全性问题，并能有效地缓解动物源活性蛋白紧缺的现状。

Description

一种仔猪肠道营养肽
技术领域
本发明涉及一种仔猪肠道营养肽。
背景技术
养猪生产中，关键的环节是断奶仔猪生产，仔猪早期断奶是国内外集约化养猪生产中普遍关注的先进技术，早期断奶能提高母猪的繁殖率，可增加母猪的年产仔数，减少由母体向仔猪的疾病传播，并能提高生长猪的生产性能和胴体品质，同时可使产房等设备的利用率提高。目前养猪业发达的国家已经开始推广应用14日龄超早期断奶技术。但早期断奶带来的一个重要问题是如何提高断奶仔猪的生长性能，仔猪断奶后日粮的性质发生了重大变化，而仔猪消化道尚未发育完全、消化酶活性不足、免疫功能也尚未发育成熟(Aumaitre andCorring，1978)，而且断奶不仅关系到生理的变化、心理、环境和营养状况也发生了变化，因而常表现为食欲差、消化功能紊乱、腹泻、生长迟滞、饲料利用率低等所谓的“仔猪早期断奶综合症”。
解决“仔猪早期断奶综合症”的研究是目前养猪科技工作者的研究热点，例如，利用大型屠宰场健康的猪血资源，采用先进的分离、调质、喷雾干燥工艺生产的喷雾干燥血浆(球)蛋白粉，因其具有适口性好，蛋白含量高，氨基酸平衡且保留了血浆中的免疫球蛋白活性等特点而被用作解决“仔猪早期断奶综合症”的技术措施。但由于生物安全问题而被禁止使用。又如，利用外源性小分子活性肽，消除游离氨基酸的吸收竞争、促进激素的分泌、促进矿物质元素的吸收和利用，提高生产性能，但活性小肽不能解决因断奶应激对肠道粘膜的损伤。大量研究表明谷氨酰胺(GLN)是肠道细胞的燃料，是合成细胞分化所必需的嘌呤和嘧啶核苷酸的前体，是肠系膜淋巴和上皮淋巴细胞和重要能量底物，是维持与肠道相关的淋巴组织的必需成份，也是合成肠道分泌免疫球蛋白质的必需物质，在维持肠道正常功能和提高肠道免疫力方面起着重要的作用(James，1998)。而且GLN是猪乳中含量最丰富的氨基酸，断奶后GLN供应量减少是仔猪早期断奶综合症产生的最根本的原因(Alverdy，1990)。GLN二肽(如Gly-L-Gln)在小肠内主要以二肽的形式吸收，吸收率高，吸收后被小肠等组织器官中的二肽酶分解为其组成的氨基酸，能克服GLN单体热的不稳定性以及低溶解度，是一种GLN的有效添加方式。
发明内容
本发明的目的是提供一种仔猪肠道营养肽。
仔猪肠道营养肽是寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质中的一种或一种以上物质按以下比例配伍加工而成：寡肽∶甘氨酰-L-谷氨酰胺的比例为100∶1～10；或寡肽∶丙氨酰谷氨酰胺的比例为100∶1～10；或寡肽：甘氨酰-L-谷氨酰胺∶甘氨酸铁的比例为100∶1～10∶1～10；或寡肽∶丙氨酰谷氨酰胺∶甘氨酸铁的比例为100∶1～10∶1～10；或寡肽∶甘氨酰-L-谷氨酰胺∶丙氨酰谷氨酰胺的比例为100∶1～5∶1～5；或寡肽∶甘氨酰-L-谷氨酰胺∶丙氨酰谷氨酰胺∶甘氨酸铁的比例为100∶1～5∶1～5∶1～10。
所述寡肽的制备方法为：大豆蛋白和菜籽蛋白以5∶1～2组成酶解原料，经灭菌，先后用枯草杆菌中性蛋白酶和黑曲霉酸性蛋白酶进行酶解；然后灭酶，超滤，浓缩干燥得到寡肽。所述的大豆蛋白为浓缩蛋白、脱脂大豆粉、大豆粕、豆饼中的任何一种或多种以任何比组成的混合物。菜籽蛋白为菜籽粕、菜籽饼中一种或二种任意比组成的混合物。
本发明将大豆蛋白和菜籽蛋白进行酶解生产小肽，消除大豆蛋白对仔猪的抗原过敏反应以及菜籽蛋白抗营养因子对仔猪生产性能的影响。应用营养与免疫调控手段，将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁进行合理配伍，得到一种仔猪肠道营养肽。以大豆蛋白和菜籽蛋白为主要原料生产的仔猪肠道营养肽能替代血浆蛋白粉和鱼粉等动物蛋白，可明显减少仔猪日粮对动物蛋白的依赖性。在仔猪日粮中添加1～5％本发明的仔猪肠道营养肽，可解决仔猪的断奶应激，能防止仔猪断奶后1～7天肠黏膜绒毛过度萎缩和隐窝的加深，可显著提高断奶后8～14天肠黏膜绒毛高度，可显著提高断奶仔猪十二指肠内容物总蛋白酶活性，可显著提高断奶后14天断奶仔猪的淀粉酶活性。应用本发明的仔猪肠道营养肽，能显著提高断奶仔猪的平均日增重，明显降低仔猪断奶腹泻率。具有显著的经济效益和社会效益，市场前景广阔。
具体实施方式
本发明是用大豆蛋白和菜籽蛋白以5∶1～2组成酶解原料，用枯草杆菌中性蛋白酶和黑曲霉酸性蛋白酶进行水解作用得到寡肽，解决大豆产品在应用中的抗原过敏反应和菜籽蛋白中抗营养因子，提高大豆蛋白和菜籽蛋白利用率并充分发挥其生物功能。将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁进行合理配伍，得到一种仔猪肠道营养肽，其中，后三种均要求饲料级及以上，配合时均按净含量计。仔猪肠道营养肽为粉末状，应用时将该粉状的复合物添加到配合饲料、浓缩饲料，并进行均匀混合，其添加量折合配合饲料中含量计为1～5％，替代血浆蛋白粉等动物源活性蛋白，从而在根本上解决应用动物源活性蛋白所面临的生物安全性问题，并能有效地缓解动物源活性蛋白紧缺的现状。
仔猪肠道营养肽制备的具体步骤为：
(1)灭菌
大豆蛋白和菜籽蛋白以5∶1～2组成酶解原料，加水使液固比为5～10∶1，进行巴氏杀菌或在80～85℃下维持10～30分钟杀菌。其中大豆蛋白为浓缩蛋白、脱脂大豆粉、大豆粕、豆饼中的任何一种或多种以任何比组成的混合物；菜籽蛋白为菜籽粕、菜籽饼中一种或二种任意比混合物。
(2)酶解
将物料冷却到35～40℃，调节PH值6.0～7.0，按大豆蛋白质含量的1.0～1.5％(重量比)，加入酶枯草杆菌中性蛋白酶，酶活力≥5万U/g，进行酶解2～3小时(酶活力定义：在pH值6.5～7.0、温度为35～40℃条件下，1Min内水解标准酪蛋白释放出的5％三氯乙酸可溶物与Folin-酚反应的吸光度与1ug酪氨酸相当时所需的酶量为1U)。
在枯草杆菌中性蛋白酶酶解2～3小时后，调节pH值至3.0～3.5，温度控制在40～50℃，按大豆蛋白质含量的1.5～2.2％(重量比)，加入黑曲霉酸性蛋白酶，酶活力≥5万U/g，酶解2～3小时。  (酶活力定义：在pH值3.0～3.5，温度40～50℃条件下，1Min内水解标准酪蛋白释放出的5％三氯乙酸可溶物与Folin-酚反应的吸光度与1ug酪氨酸相当时所需的酶量为1U)。
(3)灭酶
将酶解后的物料升温至80～90℃灭酶10～30分钟。
(4)浓缩干燥
将物料超滤，平均截留相对分子质量6000，滤液浓缩干燥至水分≤8％，得到寡肽。
(5)将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁进行合理配伍。
实施例1
寡肽制备方法步骤如下：
(1)灭菌
大豆蛋白和菜籽蛋白以5∶1组成酶解原料，加水使液固比为5∶1，进行巴氏杀菌或在80℃下维持l0分钟杀菌。其中大豆蛋白为浓缩蛋白、脱脂大豆粉、大豆粕、豆饼中的任何一种或多种以任何比组成的混合物；菜籽蛋白为菜籽粕、菜籽饼中一种或二种任意比混合物。
(2)酶解
将物料冷却并保持在35℃，调节pH值至6.5，按大豆蛋白质含量的1.0％(重量比)，加入枯草杆菌中性蛋白酶，酶活力≥5万U/g，进行酶解2小时(酶活力定义：在pH值6.5、温度为35℃条件下，1Min内水解标准酪蛋白释放出的5％三氯乙酸可溶物与Folin-酚反应的吸光度与1 ug酪氨酸相当时所需的酶量为1U)。
在枯草杆菌中性蛋白酶酶解2小时后，调节pH值至3.0，温度控制在40℃，按大豆蛋白质含量的1. 85％(重量比)，加入黑曲霉酸性蛋白酶，酶活力≥5万U/g，酶解2小时。(酶活力定义：在pH值3.0，温度40℃条件下，1Min内水解标准酪蛋白释放出的5％三氯乙酸可溶物与Folin-酚反应的吸光度与1ug酪氨酸相当时所需的酶量为1U)。
(3)灭酶
将酶解后的物料升温至80℃灭酶10分钟。
(4)浓缩干燥
将物料超滤，平均截留相对分子质量6000，滤液浓缩干燥至水分≤8％，得到寡肽。
(5)将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁进行合理配伍。
实施例2
寡肽制备方法步骤如下：
(1)灭菌
大豆蛋白和菜籽蛋白以5∶2组成酶解原料，加水使液固比为10∶1，进行巴氏杀菌或在85℃下维持30分钟杀菌。其中大豆蛋白为浓缩蛋白、脱脂大豆粉、大豆粕、豆饼中的任何一种或多种以任何比组成的混合物；菜籽蛋白为菜籽粕、菜籽饼中一种或二种任意比混合物。
(2)酶解
将物料冷却并保持在40℃，调节pH值至7.0，按大豆蛋白质含量的1.5％(重量比)，加入枯草杆菌中性蛋白酶，酶活力≥5万U/g，进行酶解3小时(酶活力定义：在pH值7.0、温度为40℃条件下，1Min内水解标准酪蛋白释放出的5％三氯乙酸可溶物与Folin-酚反应的吸光度与1ug酪氨酸相当时所需的酶量为1U)。
在枯草杆菌中性蛋白酶酶解2～3小时后，调节pH值至3.5，温度控制在50℃，按大豆蛋白质含量的2.2％(重量比)，加入黑曲霉酸性蛋白酶，酶活力≥5万U/g，酶解3小时。(酶活力定义：在pH值3.5，温度50℃条件下，1Min内水解标准酪蛋白释放出的5％三氯乙酸可溶物与Folin-酚反应的吸光度与1ug酪氨酸相当时所需的酶量为1U)。
(3)灭酶
将酶解后的物料升温至90℃灭酶30分钟。
(4)浓缩干燥
将物料超滤，平均截留相对分子质量6000，滤液浓缩干燥至水分≤8％，得到寡肽。
(5)将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁进行合理配伍。
实施例3
寡肽制备方法步骤如下：
(1)灭菌
大豆蛋白和菜籽蛋白以5∶1.5组成酶解原料，加水使液固比为7.5∶1，进行巴氏杀菌或在82.5℃下维持20分钟杀菌。其中大豆蛋白为浓缩蛋白、脱脂大豆粉、大豆粕、豆饼中的任何一种或多种以任何比组成的混合物；菜籽蛋白为菜籽粕、菜籽饼中一种或二种任意比混合物。
(2)酶解
将物料冷却并保持在37.5℃，调节pH值至6.75，按大豆蛋白质含量的1.25％(重量比)，加入枯草杆菌中性蛋白酶，酶活力≥5万U/g，进行酶解2.5小时(酶活力定义：在pH值6.75、温度为37.5℃条件下，1Min内水解标准酪蛋白释放出的5％三氯乙酸可溶物与Folin-酚反应的吸光度与1ug酪氨酸相当时所需的酶量为1U)。
在枯草杆菌中性蛋白酶酶解2.5小时后，调节pH值至3.25，温度控制在45℃，按大豆蛋白质含量的1.85％(重量比)，加入黑曲霉酸性蛋白酶，酶活力≥5万U/g，酶解2.5小时。(酶活力定义：在pH值3.25，温度45℃条件下，1Min内水解标准酪蛋白释放出的5％三氯乙酸可溶物与Folin-酚反应的吸光度与1ug酪氨酸相当时所需的酶量为1U)。
(3)灭酶
将酶解后的物料升温至85℃灭酶20分钟。
(4)浓缩干燥
将物料超滤，平均截留相对分子质量6000，滤液浓缩干燥至水分≤8％，得到寡肽。
(5)将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁进行合理配伍。
实施例4
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺二种物质以100∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例5
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺二种物质以10∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例6
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺二种物质以100∶5.5比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例7
将寡肽与丙氨酰谷氨酰胺二种物质以100∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例8
将寡肽与丙氨酰谷氨酰胺二种物质以10∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例9
将寡肽与丙氨酰谷氨酰胺二种物质以100∶5.5比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例10
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质以100∶1∶10比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例11
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质以100∶10∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例12
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质以100∶5.5∶5.5比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例13
将寡肽与丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质以100∶1∶10比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例14
将寡肽与丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质以100∶10∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例15
将寡肽与丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质以100∶5.5∶5.5比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例16
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺三种物质以100∶1∶5比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例17
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺三种物质以100∶5∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例18
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺三种物质以100∶3∶3比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例19
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁四种物质以100∶1∶5∶10比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例20
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁四种物质以100∶5∶1∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例21
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁四种物质以100∶5∶1∶10比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例22
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁四种物质以100∶1∶5∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例23
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁四种物质以100∶5∶5∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例24
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁四种物质以100∶5∶5∶1比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例25
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁四种物质以100∶1∶1∶10比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。
实施例26
将寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁四种物质以100∶3∶3∶5.5比例组合，并将上述复合物混合均匀，得到一种仔猪肠道营养肽。

Claims (3)

1.一种仔猪肠道营养肽，其特征在于寡肽与甘氨酰-L-谷氨酰胺、丙氨酰谷氨酰胺、甘氨酸铁三种物质中的一种或一种以上物质按以下比例配伍加工而成：
寡肽∶甘氨酰-L-谷氨酰胺的比例为100∶1～10；
或寡肽∶丙氨酰谷氨酰胺的比例为100∶1～10；
或寡肽∶甘氨酰-L-谷氨酰胺∶甘氨酸铁的比例为100∶1～10∶1～10；
或寡肽∶丙氨酰谷氨酰胺∶甘氨酸铁的比例为100∶1～10∶1～10；
或寡肽∶甘氨酰-L-谷氨酰胺∶丙氨酰谷氨酰胺的比例为100∶1～5∶1～5；
或寡肽∶甘氨酰-L-谷氨酰胺∶丙氨酰谷氨酰胺∶甘氨酸铁的比例为100∶1～5∶1～5∶1～10；
所述寡肽的制备方法为：大豆蛋白和菜籽蛋白以5∶1～2组成酶解原料，经灭菌，先后用枯草杆菌中性蛋白酶和黑曲霉酸性蛋白酶进行酶解；然后灭酶，超滤，浓缩干燥得到寡肽。
2.根据权利要求1所述的一种仔猪肠道营养肽，其特征在于所述的大豆蛋白为浓缩蛋白、脱脂大豆粉、大豆粕、豆饼中的任何一种或多种以任何比组成的混合物。
3.根据权利要求1所述的一种仔猪肠道营养肽，其特征在于所述的菜籽蛋白为菜籽粕、菜籽饼中一种或二种任意比组成的混合物。
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Application publication date: 20060628

Assignee: Nanjing Clever Feed Co., Ltd.

Assignor: Zhejiang University

Contract record no.: 2014330000039

Denomination of invention: Intestine nutrition peptide for piglings

Granted publication date: 20080130

License type: Exclusive License

Record date: 20140314

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Granted publication date: 20080130

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