CN100352936C - 嗜麦芽寡食单胞菌的快速检测方法及其检测用培养基组合 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合，所述培养基组合由下列三联培养基组成：培养基I：由50%～90%MBM；1%～40%甲硫氨酸和5%～49%乳酸盐组成；培养基II：由96%MBM和4%的乳酸盐组成；培养基III：由10%～95%MBM；2.5%～40%酵母膏和2.5%～80%麦芽糖组成。在上述培养基中分别接种菌株；在25～40℃培养8～30小时；若培养基I表现生长，并呈碱性；培养基II不生长，pH不变；培养基III表现生长，并产酸，则可判定为嗜麦芽寡食单胞菌，其他菌则与此不同。本发明的培养基组合检测嗜麦芽寡食单胞菌的方法简单，检测快速，结果准确。

Description

嗜麦芽寡食单胞菌的快速检测方法及其检测用培养基组合
技术领域
本发明涉及一种致病微生物的检测组合，具体涉及一种检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合。本发明同时涉及一种应用上述嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合快速检测嗜麦芽寡食单胞菌的方法。
背景技术
嗜麦芽寡食单胞菌为土壤和植物根系细菌，在自然界和公共活动场所分布广泛，为条件致病菌和院内感染菌，作为需氧性的感染菌，该菌仅次于铜绿假单胞菌，根据有关报道该菌可通过化妆品、土壤、植物等引起感染，主要感染途径有(1)通过呼吸道，(2)尿路感染，(3)外伤皮肤感染。近年来已引起广泛重视，因此，在医院中对该菌感染的临床诊断检验是非常重要的，另外，为杜绝嗜麦芽寡食单胞菌引起疾病，也应对化妆品、玩具等产品，特别是进口产品进行严格检验控制。现有技术中，主要通过下列方法对嗜麦芽寡食单胞菌进行检测(1)采用表型形状鉴定菌株，该方法利用菌株在生化反应与底物利用试验上存在的差异来区别菌株。但由于在一些基本生化反应上的性状存在差异，有误鉴定为其他菌的可能，另外操作较繁，需要约40多种药品试剂。(2)脂肪酸裂解气相色谱法，该方法首先需要对细菌进行培养分离，然后再用高温裂解器对菌体进行高温裂解，用气相色谱分析所产生的脂肪酸，获得相应指纹图谱，与标准菌株的指纹图谱进行比较后得出结果。该方法一是需要精密分析仪器，二是准确度稍差。(3)遗传学方法，包括限制性片断长度多态法；脉冲场凝胶电泳法；随机扩增DNA法等，均存在重复性差的缺点，有的结果难于解释。上述现有的鉴定技术，如表型性状法；脂肪酸裂解气相法；遗传学方法，存在着操作较繁、需要精密仪器和较多药品试剂、重复性差等不足。
发明内容
本发明克服了现有技术中检测嗜麦芽寡食单胞菌方法存在的不足，根据嗜麦芽寡食单胞菌的生物学特性，设计了专属性检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合，可适用于临床和进出口商品的检验鉴定，经与其他方法比较研究可得到非常准确的结果。
本发明同时提供了利用检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合快速检测嗜麦芽寡食单胞菌的方法。
本发明公开了一种检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合，所述培养基组合由下列三联培养基组成：
培养基I：由50％～90％MBM；1％～40％含硫氨基酸和5％～49％乳酸盐组成；
培养基II：由96％MBM和4％的乳酸盐组成；
培养基III：由10％～95％MBM；2.5％～40％酵母膏和2.5％～80％麦芽糖组成；
上述百分比为重量百分比。
上述技术方案中，无机盐培养基MBM为多种无机盐组合物的水溶液，为常规技术产品，其通常用于细菌检验。通过公知技术可制备无机盐基础培养基(MBM)，按有关微生物学手册配制，根据需要对其成分和配比可适当增减。
上述所述培养基I和培养基II中的含碳有机盐可为现有技术中的各种含碳有机盐，通常所述培养基I和培养基II中的含碳有机酸盐为柠檬酸盐和/或乳酸盐。
为在快速检测嗜麦芽寡食单细胞过程中显色容易，检测方便，通常所述培养基I中还包括酸碱指示剂。所述酸碱指示剂可为各种指示剂，如酚酞等。
通常所述培养基I、培养基II和培养基III采用常规的培养基基质，即培养基I、培养基II和培养基III与琼脂混溶。
通常所述培养基I、培养基II和培养基III分别置于玻璃试管中，以在利用三联培养基快速检测嗜麦芽寡食单细胞时易于观察，判断方便，同时，可将三联培养基加工成成品使用，使用方便。当然，上述培养基可置于其他器皿如培养皿中
为使上述三联培养基加工成成品后使用方便，通常所述试管为一体式结构或通过铝箔将试管自上端密封并连为一体。
本发明同时公开了一种嗜麦芽寡食单胞菌的快速鉴定方法，包括下列顺序步骤：
(1)在权利要求1所述的培养基I、培养基II和培养基III中分别接种菌株；
(2)在25～40℃培养8～30小时；
若培养基I表现生长，并呈碱性；
培养基II不生长，pH不变；
培养基III表现生长，并产酸；
若接种的菌株同时表现为以上特性，则可判定为嗜麦芽寡食单胞菌，其他菌则与此不同。
通常上述步骤(2)中的培养温度为30～40℃；培养时间为20～30小时。
本发明中，嗜麦芽寡食单胞菌的三联培养基组合制备方便、简单，其可直接加工成成品用于检测嗜麦芽寡食单胞菌，检测迅速、直观，检测结果准确，经对34株嗜麦芽寡食单胞菌和其他相近菌株进行比较检测，结果完全准确。
附图说明
图1为嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合具体实施方式结构示意图。
具体实施方式
具体实施方式1
一种检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合，所述培养基组合包括下列三联培养基：
培养基I：90gMBM；5g甲硫氨酸和5g乳酸盐；
培养基II：96gMBM和4g乳酸盐；
培养基III：95gMBM；2.5g酵母膏和2.5g麦芽糖.
具体实施方式2
一种检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合，所述培养基组合包括下列三联培养基：
培养基I：50gMBM；25g甲硫氨酸和25g柠檬酸盐；
培养基II：50gMBM和50g甲硫氨酸；
培养基III：50gMBM；25g酵母膏和25g麦芽糖；
将上述培养基I、培养基II和培养基III分装在试管I、试管II和试管III中，如图1所示试管I1、试管II2和试管III3开口端通过铝箔4密封连成一体。
具体实施方式3
一种检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合，所述培养基组合包括下列三联培养基：
培养基I：75gMBM；15g甲硫氨酸、5g柠檬酸盐和5g乳酸盐；
培养基II：75gMBM和25g甲硫氨酸；
培养基III：75gMBM；15g酵母膏和10g麦芽糖；
将上述培养基I、培养基II和培养基III分装在试管I、试管II和试管III中，试管I、试管II和试管III为一体式结构，上述培养基与基质琼脂混溶。
具体实施方式4
一种检测嗜麦芽寡食单胞菌的培养基组合，所述培养基组合包括下列三联培养基：
培养基I：98gMBM；1g甲硫氨酸、1g柠檬酸盐和适量酚酞；
培养基II：98gMBM和2g甲硫氨酸；
培养基III：98gMBM；1g酵母膏和1g麦芽糖；
上述培养基与基质琼脂混溶。
具体实施方式5
一种嗜麦芽寡食单胞菌的快速鉴定方法，包括下列顺序步骤：
(1)在上述具体实施方式1至4任一检测嗜麦芽寡食单胞菌的三联培养基组合的I、II、III号培养基中分别接种包括嗜麦芽寡食单胞菌的菌株；
(2)在20℃培养30小时；
培养基I表现生长，并呈碱性(在具体实施方式4中溶液变红)；
培养基II不生长，pH不变；
培养基III表现生长，并产酸。
同时表现为以上特性，则可判定为嗜麦芽寡食单胞菌。
具体实施方式6
(1)在上述具体实施方式1至4任一检测嗜麦芽寡食单胞菌的三联培养基组合的I、II、III号培养基中分别接种包括嗜麦芽寡食单胞菌的菌株；
(2)在40℃培养20小时；
培养基I表现生长，并呈碱性；
培养基II不生长，pH不变；
培养基III表现生长，并产酸
同时表现为以上特性，则可判定为嗜麦芽寡食单胞菌。
具体实施方式7
(1)在上述具体实施方式1至4任一检测嗜麦芽寡食单胞菌的三联培养基组合的I、II、III号培养基中分别接种包括嗜麦芽寡食单胞菌的菌株；
(2)在30℃培养30小时；
培养基I表现生长，并呈碱性；
培养基II不生长，pH不变；
培养基III表现生长，并产酸。
同时表现为以上特性，则可判定为嗜麦芽寡食单胞菌。

Claims (7)

1、检测嗜麦芽寡食单胞菌的组合培养基，所述组合培养基由下列三联培养基组成：
培养基I：由50％～90％MBM；1％～40％甲硫氨酸和5％～49％乳酸盐组成；
培养基II：由96％MBM和4％的乳酸盐组成；
培养基III：由10％～95％MBM；2.5％～40％酵母膏和2.5％～80％麦芽糖组成；
上述百分比为重量百分比。
2、根据权利要求1所述的检测嗜麦芽寡食单胞菌的组合培养基，其特征是：所述培养基I中还包括酸碱指示剂。
3、根据权利要求1所述的检测嗜麦芽寡食单胞菌的组合培养基，其特征是：所述培养基I、培养基II和培养基III与琼脂混溶。
4、根据权利要求1所述的检测嗜麦芽寡食单胞菌的组合培养基，其特征是：所述培养基I、培养基II和培养基III分别置于试管中。
5、根据权利要求4所述的检测嗜麦芽寡食单胞菌的组合培养基，其特征是：所述试管为一体式结构或通过铝箔将试管自上端密封并连为一体。
6、一种嗜麦芽寡食单胞菌的快速鉴定方法，包括下列顺序步骤：
(1)在权利要求1所述的培养基I、培养基II和培养基III中分别接种菌株；
(2)在25～40℃培养8～30小时；
若培养基I表现生长，并呈碱性；
培养基II不生长，pH不变；
培养基III表现生长，并产酸；
若接种的菌株同时表现为以上特性，则可判定为嗜麦芽寡食单胞菌，其他菌则于此不同。
7、根据权利要求6所述的嗜麦芽寡食单胞菌的快速鉴定方法，其特征是：培养温度为30～40℃；培养时间为20～30小时。
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