CN100348224C - 一种用于降血脂的中药胶囊及其制备方法 - Google Patents

一种用于降血脂的中药胶囊及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种治疗降血脂的中药胶囊及其制备方法；它是由提取后的绞股蓝粉、提取后的山楂粉、提取后的丹参粉、提取后的黄芪粉制成；制备方法是由下列重量比的原料制成：提取后的绞股蓝粉3-12份、提取后的山楂3-12份、提取后的丹参粉2-8份、提取后的黄芪粉2-8份，分别称取提取后的绞股蓝粉、山楂粉、丹参粉、黄芪粉，过60目，外观检测，混合，用双层聚乙烯胶袋包装，胶囊充填、抛光、检查，入瓶、入盒包装，即得产品；该中药胶囊具有降血脂和预防脂肪肝的功能，特别适用于高血脂、脂肪肝及需要预防心血管疾病、保肝、护肝人群的食疗和预防保健。

Description

一种用于降血脂的中药胶囊及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种治疗疾病的中药组合物，更具体地说是涉及一种由提取后的绞股蓝粉、提取后的山楂、提取后的丹参、提取后的黄芪粉制成，具有降血脂功能的中药胶囊及其制备方法。
背景技术
现代生活中，高脂血症已成为中老年人的一种常见病，而且随着生活水平的提高，发病率有明显上升趋势。目前，临床上采用的西药在长期服用中会产生许多不良反应，而中药中含有多种调脂活性成分，作用于多个靶点产生综合疗效，作用温和持久，而且对肝肾的毒性相对要小。
高血脂、脂肪肝是现代生活中的常见病症，且有年轻化的趋势。高血脂可引发多种心血管疾病，而脂肪肝则可致肝功能的损害，发展成为脂肪肝性肝病和肝纤维化，甚至导致脂肪性肝硬化或其相关的疾病。
血脂代谢失调、内分泌紊乱、酒精性肝损伤，饮食失调等是造成高血脂、脂肪肝的主因。单纯用西药降血脂治疗，疗效差，且有毒副作用。
研究开发以降血脂、抗氧化、抗肝纤维化，安全无毒副作用的纯天然植物制剂，是广大病患者的需要。
发明内容
本发明的目的在于利用现供医学新进展，按中医药理论及现代医学研究，采用适宜的配伍组合，协同发挥作用，提供一个能够全方位针对多个环节的一种具有降血脂、抗氧化、预防动脉粥样硬化，缓减CCl4对肝脏的急性及慢性肝损伤，保肝护肝、预防脂肪肝和肝纤维化等作用，以天然药物组分及药食同源的中草药配制成的中药胶囊(商品名：生科降脂(RCF))及其制备方法。
本发明的目的可以通过以下措施来实现：该中药胶囊的有效成分是由下列重量比的原料制成：
提取后的绞股蓝粉    3-12份
提取后的山楂        3-12份
提取后的丹参        2-8份
提取后的黄芪粉      2-8份。
优选的原料重量配比为：
提取后的绞股蓝粉    9份
提取后的山楂粉      9份
提取后的丹参粉      6份
提取后的黄芪粉      6份。
本发明还提供了生科降脂(RCF)组合物中药胶囊的制备方法：
提取后的绞股蓝粉的制备方法是：取合格的绞股蓝，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加8-12倍量水，煮沸，提取2-4次，每次煮沸提取时间均为0.5-1.5小时，提取液200目过筛网，取滤液，在-80--95kpa，65-80℃减压，浓缩，60℃下热测相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的绞股蓝粉。
优选的绞股蓝粉的制备方法是：取合格的绞股蓝，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加10倍量水，煮沸，提取3次，每次煮沸提取时间均为1小时，提取液200目过筛网，取滤液，在-85kpa，70℃减压，浓缩，在60℃下热测相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的绞股蓝粉。
提取后的山楂粉的制备方法是：取合格的山楂，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加入4-8倍量的80％的乙醇，加热至60-70℃，回流提取2-4次，每次提取时间均为1-3小时，提取液100目过筛网，合并乙醇滤液，在-70--95kPa，60-70℃减压回收乙醇，继续浓缩至山楂投料量的1/2体积(V/W)的浓缩液，100目过筛网，将滤过的浓缩液上大孔树脂柱，依次用水、60％乙醇洗脱，收集60％乙醇的洗脱液，在-70--95kPa，60-70℃减压回收乙醇，继续浓缩，60℃下热测相对密度为1.10-1.13，过100目，将浓缩液喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的山楂粉。
优选的提取后的山楂粉的制备方法是：取合格的山楂，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加入6倍量的80％的乙醇，加热至65℃，回流提取3次，每次提取时间均为2小时，提取液100目过筛网，合并乙醇滤液，在-85kPa，65℃减压回收乙醇，继续浓缩，至山楂投料量体积的1/2，浓缩液100目过筛网，将滤过的浓缩液上大孔树脂柱，依次用水、60％乙醇洗脱，收集60％乙醇的洗脱液，在-85kPa，65℃减压回收乙醇，继续浓缩，  60℃下热测相对密度为1.10-1.13，过100目，将浓缩液喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的山楂粉。
提取后的丹参粉的制备方法是：分别取合格的丹参，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加入4-8倍量的80％的乙醇，加热回流提取1-3次，每次加热回流提取时间为1-2小时，提取液120目过筛网，药渣备用，合并乙醇滤液，减压回收乙醇，合并浓缩液为醇提浸膏，备用；取醇提后的丹参药渣，加8-12倍量水，煮沸提取0.5-1.5小时，提取液经200目筛网过滤，取滤液，在-80--95kPa，65-80℃减压条件下，浓缩，60℃下热测相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液为水提浸膏，将丹参醇提浸膏与水提浸膏合并，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的丹参粉。
优选的提取后的丹参粉的制备方法是：分别取合格的丹参，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加入6倍量的80％的乙醇，加热回流提取2次，每次加热回流提取时间为1.5小时，提取液120目过筛网，药渣备用，合并乙醇滤液，减压回收乙醇，合并浓缩液为醇提浸膏，备用；取醇提后的丹参药渣，加10倍量水，煮沸提取1小时，提取液经200目筛网过滤，取滤液，在-85kPa，75℃减压条件下，浓缩，60℃下热测相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液为水提浸膏，将丹参醇提浸膏与水提浸膏合并，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的丹参粉。
提取后的黄芪粉的制备方法是：取合格的黄芪，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加8-12倍量水，煮沸，提取2-4次，每次煮沸提取时间均为0.5-1.5小时，提取液200目过筛网，取滤液，在-80--95kpa，65-80℃减压，浓缩，60℃下热测相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的黄芪粉。
优选的提取后的黄芪粉的制备方法是：取合格的黄芪，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加10倍量水，煮沸，提取3次，每次煮沸提取时间均为1小时，提取液200目过筛网，取滤液，在-85kpa，75℃减压，浓缩，在60℃下相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的黄芪粉。
按本发明的原料配比，分别称取提取后的绞股蓝粉、提取后的山楂粉、提取后的丹参粉、提取后黄芪粉，过60目筛网，取过筛合格的提取物，置于混合机内进行总混粉，收集已混合均匀的混合粉，用双层聚乙烯胶袋包装，粘贴标签，通知质量控制人员进行取样、检验。将收集的混合粉于自动或半自动胶囊充填机进行胶囊充填，胶囊经抛光、检查，入瓶、入盒包装，即得产品。
本发明相比现有技术具有如下优点：该中药胶囊安全、无毒副作用，具有良好降脂保肝、健脾益气之功效。
生科降脂(RCF)组方中的成分具有以下的功能：绞股蓝滋养肝肾、清热解毒、健脾益气；现代药理研究证实有降血脂，增加冠状动脉和脑血流量，抗自由基损伤，抗衰老，乌发，生发，镇静、改善睡眠、抗紧张、解疲劳、改善记忆力，增强免疫力，保肝，抗DNA的变异，抗肿瘤等作用；山楂消食健胃，行气散瘀；现代药理研究证实有活血化瘀，降血脂等作用；丹参活血祛瘀养血安神；现代药理研究证实有扩张冠状动脉、增加冠状动脉血流量、减慢心率、改善心肌缺氧、降低血粘度、降低血脂、防止血栓形成和抗凝作用、扩张血管、改善微循环、抗氧化、改善肝功能、抗肝损伤、抗肝纤维化、促进肝细胞增殖、清除脂类自由基、促进组织的修复与再生、镇静和安定、除心烦、抑制细菌等作用；黄芪补中益气、益卫固表、利水消肿；现代药理研究证实有强心、抗心肌缺血、抗血栓、促进抗体形成、增强免疫功能、清除自由基、抗病毒、降血糖、抗氧化、抗衰老、抗缺氧、抗疲劳、护肝保肺、保肾等作用。以上组合成分共有降脂护心，活血祛瘀，利水消肿的功能。具有降血脂，护心，抗自由基损伤，增强免疫力，防治肝损伤，抗肝纤维化，抗氧化，抗衰老，抑制肿瘤等作用。
附图说明
图1是对照组                      肝细胞未见异常改变H.E×100
图2是模型组                      中央静脉周边肝细胞轻度脂肪变H.E×100
图3是模型组                      肝细胞点状坏死H.E×100
图4是生科降脂中药胶囊组          肝细胞未见明显变化H.E×100
图5是生科降脂中药胶囊组          肝细胞轻度脂肪变H.E×100
图6是生科降脂中药胶囊组          肝细胞点状坏死、炎性细胞浸润H.E×100
图7是硫普罗宁组                  肝细胞轻度脂肪变H.E×100
图8是硫普罗宁组                  肝细胞未见损伤H.E×100
图9是对照组                      肝细胞未见异常改变H.E×100
图10是模型组                     肝细胞脂肪变、气球样变H.E×100
图11是模型组                     小胆管增生和纤维组织增生H.E×100
图12是模型组                     肝细胞坏死、炎性细胞浸润H.E×100
图13是生科降脂中药胶囊组         肝细胞脂肪变H.E×100
图14是生科降脂中药胶囊组         肝细胞未见明显损伤H.E×100
图15是生科降脂中药胶囊组         肝轻度纤维增生H.E×100
图16是生科降脂中药胶囊组         肝细胞核分裂相H.E×200
图17是双环醇组    肝细胞脂肪变H.E×100
图18是双环醇组    肝细胞脂肪变H.E×50
图19是双环醇组    肝结缔组织增生H.E×100
图20是双环醇组    残留肝细胞大小不等H.E×100
具体实施方式
下面列举3个实施例，对本发明加以进一步说明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
取合格的绞股蓝，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加10倍量水，煮沸，提取3次，每次煮沸提取时间均为1小时，提取液200目过筛网，取滤液，在-80--95kpa，65-80℃减压，浓缩，60℃相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的绞股蓝粉。
取合格的山楂，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加入6倍量的80％的乙醇，加热至60-70℃，回流提取3次，每次提取时间均为2小时，提取液100目过筛网，合并乙醇滤液，在-70--95kPa，60-70℃减压回收乙醇，继续浓缩，至山楂投料量体积的1/2，浓缩液100目过筛网，将滤过的浓缩液上大孔树脂柱，依次用水、60％7醇洗脱，收集60％乙醇的洗脱液，在-70--95kPa，60-70℃减压回收乙醇，继续浓缩，至60℃相对密度为1.10-1.13，过100目，将浓缩液喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的山楂粉。
分别取合格的丹参，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加入6倍量的80％的乙醇，加热回流提取2次，每次加热回流提取时间为1.5小时，提取液120目过筛网，药渣备用，合并乙醇滤液，减压回收乙醇，合并浓缩液为醇提浸膏，备用；取醇提后的丹参药渣，加10倍量水，煮沸提取1小时，提取液经200目筛网过滤，取滤液，在-80--95kPa，65-80℃减压条件下，浓缩至60℃相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液为水提浸膏，将丹参醇提浸膏与水提浸膏合并，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的丹参粉。
取合格的黄芪，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加10倍量水，煮沸，提取3次，每次煮沸提取时间均为1小时，提取液200目过筛网，取滤液，在-80--95kpa，65-80℃减压，浓缩至60℃相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的黄芪粉。
按本发明的原料配比，分别称取提取后的绞股蓝粉0.3kg、提取后的山楂粉0.3kg、提取后的丹参粉0.2kg、提取后黄芪粉0.2kg，过60目筛网，取过筛合格的提取物，置于混合机内进行总混粉，收集经混合均匀的混合粉，用双层聚乙烯胶袋包装，粘贴标签，经质量控制人员进行取样、检验。将收集的混合粉于自动或半自动胶囊充填机进行胶囊充填，胶囊经抛光、检查，入瓶、入盒包装，即得产品。
实施例2
按实施例1的方法，其中，以提取后的绞股蓝粉0.3kg，提取后的山楂粉0.3kg，提取后的丹参粉0.8kg，提取后黄芪粉0.8kg分别代替实施例1中相应的原料制得。
实施例3
按实施例1的方法，其中，以提取后的绞股蓝粉1.2kg，提取后的山楂粉1.2kg，提取后的丹参粉0.2kg，提取后黄芪粉0.2kg分别代替实施例1中相应的原料制得。
本发明的中药胶囊生科降脂(RCF)产品质量稳定，功效确切，安全性高。经北京中国医学科学院药物研究实验室研究证明：生科降脂(RCF)对小鼠急性CCl4肝损伤引起的ALT升高有明显的保护作用；对DL-乙硫氨酸引起急性肝脏甘油三酯升高、血清甘油三酯降低和病理形态改表有明显的保护作用；对CCl4引起大鼠慢性肝损伤所致大鼠血清的ALT，AST，ALP，总胆红素和羟脯氨酸升高，白蛋白和GLU下降，A/G比值倒置，生科降脂(RCF)可显著降低升高的ALT，AST，ALP以及肝脏羟脯氨酸含量，血清GLU明显升高，并呈一定的剂量效应关系，肝脏病理形态改变也明显减轻；对过氧化氢引起血管内皮细胞损伤有一定的保护作用。
生科降脂中药胶囊(RCF)对实验性肝损伤和脂肪肝保护作用的研究
实验单位：      中国医学科学院药物研究所
实验负责人：    李燕
实验参加人员：  李烨陈晖
实验日期：      2003年10月-2004年3月
实验1、生科降脂中药胶囊(RCF)对四氯化碳引起小鼠急性肝损伤的保护作用
实验2、生科降脂中药胶囊(RCF)对乙硫氨酸引起小鼠急性肝损伤的保护作用
实验3、生科降脂中药胶囊(RCF)对四氯化碳引起大鼠慢性肝损伤的保护作用
实验4、生科降脂中药胶囊(RCF)对过氧化氢引起血管内皮细胞损伤的保护作用
实验1、生科降脂中药胶囊(RCF)对四氯化碳引起小鼠急性肝损伤的保护作用
1.1实验目的
四氯化碳是常用的肝化学毒物，本实验拟观察本发明生科降脂中药胶囊(RCF)连续给药10天后对四氯化碳引起的小鼠急性肝损伤的保护作用。
1.2实验材料
1.2.1实验动物
ICR小鼠，雄性，体重18-22克，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：SCDK(京)2002-0003
1.2.2受试药物
生科降脂中药胶囊(RCF)，褐色粉末状，2-5℃避光保存，批号RCF03001，(每克浸膏粉相当于13克生药提取物)由香港科技生物研究院有限公司提供，用时以0.5％CMC-Na混悬。
1.3实验方法
将动物随机分为三组，每组7只，分别为正常对照组、四氯化碳模型组和生科降脂中药胶囊(RCF)给药组。生科降脂中药胶囊(RCF)给药组动物每日口服降脂中药胶囊(5g/Kg)两次，连续10日。正常对照组和四氯化碳模型组给予同体积赋形剂。除正常对照组外，其它各组均于给药10日腹腔注射0.14％四氯化碳花生油溶液10ml/Kg后禁食过夜。给予四氯化碳16小时后将动物断头处死，取血并分离血清，测定血清中ALT水平。
1.4实验结果
正常动物给予CCl4后，血清ALT明显升高。降脂保肝中药连续给药10次可抑制四氯化碳引起的血清ALT升高，与CCl4对照组相比，有显著性差异。结果见表1。
表1生科降脂中药胶囊(RCF)提前给药(5g/Kg×10)对小鼠急性四氯化碳肝损伤的保护作用
    组别   动物数   剂量   ALT(卡门氏单位)
正常对照CCl4模型     1010   ------   56.4±9.4***1063.8±143.9△
生科降脂胶囊     10     5g/Kg  395.0±242.2★★★
注：P＜0.001，与模型相比，
1.5结论
生科降脂中药胶囊(RCF)(5g/Kg)连续给药10次，对小鼠急性CCl4肝损伤引起的ALT升高有明显的保护作用。
实验2生科降脂中药胶囊(RCF)对DL-乙硫氨酸引起小鼠急性肝损伤的保护作用
2.1实验目的
DL-乙硫氨酸可引起小鼠急性脂肪肝，肝脏甘油三酯明显升高。本实验拟观察生科降脂中药胶囊(RCF)对DL-乙硫氨酸造成小鼠急性脂肪肝的保护作用。
2.2实验材料
2.2.1实验动物
ICR小鼠，雄性，体重18-22克，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：SCDK(京)2002-0003
2.2.2受试药物
生科降脂中药胶囊(RCF)，褐色粉末状，2-5℃避光保存，批号RCF03001，(每克浸膏粉相当于13克生药提取物)由香港科技生物研究院有限公司提供，用时以0.5％CMC-Na混悬。
2.2.3阳性对照组
硫普罗宁，白色粉末状，由湖北制药厂提供，纯度＞99％，用时以双蒸水溶解。
2.2.4 DL-乙硫氨酸
购自Sigma公司
2.3实验方法
将动物随机分为6组，分别为正常对照组、DL-乙硫氨酸模型组、个硫普罗宁对照组和生科降脂中药胶囊(RCF)给药组(1.25，2.5和5g/Kg)。除正常对照组外，各给药组和模型组均口服给予DL-乙硫氨酸，350mg/10ml/kg。各给药组于口服DL-乙硫氨酸后1小时，11小时和22小时，分别口服不同剂量生科降脂中药胶囊(RCF)(1.25，2.5和5/10ml/Kg)，硫普罗宁阳性对照组口服硫普罗宁300mg/10ml/kg。各组动物于给DL-乙硫氨酸24小时后断头处死，测定血清和肝脏甘油三酯含量各组动物取同一部位肝组织做病理形态学检查。
2.4实验结果
正常动物口服DL-乙硫氨酸后，肝脏甘油三酯含量明显升高，在24小时达到最高。肝脏病理形态改变已肝细胞脂肪变性为主。动物口服降脂保肝中药后肝脏甘油三酯含量明显降低，与DL-乙硫氨酸模型相比，有显著性差异；血清甘油三酯含量恢复到正常水平，病理形态损伤也明显减轻。结果见表2和病理检验报告。
表2生科降脂中药胶囊(RCF)对小鼠急性DL-乙硫氨酸脂肪肝的保护作用
  组别   动物数    剂量 TG(mg/g肝)     sTG(mg/dl)
正常对照DL-乙硫氨酸模型硫普罗宁生科降脂中药胶囊     101010101010  ------300mg/kg1.25g/kg2.5g/kg5g/kg 4.36±0.66***9.37±2.644.59±1.27***9.12±3.629.47±3.036.15±3.30*     130.0±26.6***72.2±15.2121.9±35.0**107.0±42.4*136.3±24.1***134.4±28.3
注：和模型组比，***P＜0.001 **P＜0.01 *P＜0.05
生科降脂中药胶囊(RCF)对小鼠急性DL-乙硫氨酸脂肪肝的保护作用(详细见病理报告附件1)
2.5结论
小鼠口服生科降脂中药胶囊(RCF)(5g/kg)三次对DL-乙硫氨酸引起急性肝脏甘油三脂升高、血清甘油三脂降低和病理形态有明显的保护作用，作用弱于阳性对照药硫普罗宁。
实验3、生科降脂中药胶囊(RCF)对四氯化碳引起大鼠慢性肝损伤的保护作用
3.1实验目的
25％四氯化碳皮下注射三个月可造成大鼠肝损伤及肝硬化。本研究拟观察生科降脂中药胶囊(RCF)对慢性CCl4肝损伤有无保护作用。
3.2实验材料
3.2.1实验动物
SD大鼠，雄性，体重130-150克。由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：SCDK(京)2002-0003
3.2.2受试药物
生科降脂中药胶囊(RCF)，褐色粉末状，2-5℃避光保存，批号RCF03001，(每克浸膏粉相当于13克生药提取物)由香港科技生物研究院有限公司提供，用时以0.5％CMC-Na混悬。
3.2.3阳性对照药
双环醇，由本所合成事提供，纯度＞99％，用时以0.5％CMC-Na混悬。
3.3实验方法
实验开始时，除正常对照组外，其余各组动物均皮下注射25％四氯化碳花生油溶液，体积为2ml/kg，每周两次，连续三个月。于实验第7周始，将大鼠按体重随机分组编号，分为四氯化碳模型组、一双环醇对照组和生科降脂中药胶囊(RCF)给药组(1.25，2.5和5g/Kg)，给药组动物于实验第7周开始给药，每日一次，连续45天，给药方式及剂量如下：双环醇组，灌胃给药，200mg/kg；生科降脂中药胶囊(RCF)给药组，灌胃给药，1.25，2.5和5g/kg，对照组给予同体积赋形剂，各组给药体积均为10ml/kg。于末次给药后24小时，将动物股动脉放血处死，分离血清后，测定ALT，AST，ALP，GLU，总胆红素，总蛋白，白蛋白和A/G比值，取肝脏组织测定羟脯氨酸含量，同时每支动物取同一部位肝脏作病理检查。
3.4实验结果
与正常对照组相比，25％四氯化碳皮下注射三个月可造成大鼠血清ALT，AST，ALP，总胆红素和羟脯氨酸升高，白蛋白和GLU下降，A/G比值倒置。生科降脂中药胶囊(RCF)连续口服45天可显著降低升高的ALT，AST，ALP以及肝脏羟脯氨酸含量，血清GLU明显升高，并呈一定的剂量效应关系，肝脏病理形态改变也明显减轻。结果见表3-表6。
表3生科降脂中药胶囊对慢性肝损伤大鼠血清ALT和AST升高的影响
  组别   动物数   剂量     ALT(卡门氏单位) AST(卡门氏单位)     ALP
正常对照CCl4模型双环醇组生科降脂中药胶囊     1010101010 ------200mg/kg1.25g/kg2.5g/kg     43.3±5.2***573.0±164.069.7±17.9***429.6±119.6*390.3±108.1* 130.5±18.8***918.1±317.4314.9±99.9***655.3±264.1616.9±207.0* 99.3±18.5***476.3±225.8196.6±75.7**276.0±93.5*289.9±121.2*
    10 5g/kg     353.0±119.3** 550.1±204.0** 259.1±118.2*
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，与模型组相比，
表4生科降脂中药胶囊对慢性CCl4肝损伤大鼠血清总胆红素升高，GLU降低和A/G比值倒置的影响
  组别 动物数   剂量     总胆红素含量(mg/dl)     GLU     A/G
正常对照CCl4模型双环醇组生科降脂中药胶囊     1010101010   ------200mg/kg1.25g/kg2.5g/kg     3.7±0.4**18.8±14.94.0±0.8*10.4±6.411.3±10.8 4.4±0.5***2.3±0.93.2±0.4*4.3±0.4***3.8±0.5***   1.50±0.42*1.19±0.201.42±0.17*1.34±0.201.30±0.32
    10   5g/kg     10.8±8.9 3.5±0.5**   1.26±0.13
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，与模型组相比，
表5生科降脂中药胶囊对慢性CCl4肝损伤大鼠肝脏羟脯氨酸含量升高的影响
  组别  动物数     剂量     肝脏羟脯氨酸含量(mg/100g protein)
正常对照CCl4模型双环醇组生科降脂中药胶囊     1010101010   ------200mg/kg1.25g/kg2.5g/kg     4.16±0.72***8.58±1.956.19±0.70**7.92±1.127.14±1.20
    10   5g/kg     6.83±0.88*
*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，与模型组相比，
表6生科降脂中药胶囊(RCF)对慢性CCl4肝损伤大鼠体重改变的影响
    组别   正常对照组  CCl4模型组     生科降脂中药胶囊   双环醇组200mg/kg
  1.25g/kg   2.5g/kg   5g/kg
    7week   443±19***   394±14   389±21   381±23   381±23   385±17
    8week   464±19***   408±18   407±23   391±24   397±29   406±20
    9week   484±22***   428±18   413±29   409±26   415±33   428±23
    10week   512±26***   438±23   446±28   425±31   436±36   449±27
    11week   532±27***   451±28   459±28   437±33   449±36   466±28
    12week   542±28***   458±30   461±31   440±34   451±40   470±30
    13week   552±28***   464±27   469±32   437±34   462±41   476±37
    14week   567±34***   479±33   471±31   458±34   472±39   485±34
注：与模型组相比，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，
生科降脂中药胶囊对慢性CCl4大鼠肝脏病理损伤的保护作用(详细见病理报告附件2)3.5结论
大鼠连续口服生科降脂中药胶囊(RCF)(5g/kg)45天能显著降低慢性CCl4引起的大鼠血清ALT，AST，ALP和肝脏羟脯氨酸含量的升高以及血清GLU的降低，与模型组相比，有显著性差异，并呈一定的剂量---效应关系。此外，生科降脂中药胶囊(RCF)可明显改善慢性四氯化碳引起的肝脏病理形态变化。
实验4、生科降脂中药胶囊(RCF)对过氧化氢引起血管内皮细胞损伤的保护作用
4.1实验目的
观察生科降脂中药胶囊(RCF)体外对过氧化氢引起血管内皮细胞损伤的保护作用。
4.2实验材料
ECV-304细胞为人脐静脉内皮细胞，过氧化氢，MTT。
4.3受试药物
生科降脂中药胶囊(RCF)，褐色粉末状，2-5℃避光保存，批号RCF03001，(每克浸膏粉相当于13克生药提取物)由香港科技生物研究院有限公司提供。用时以DMSO配置并用生理盐水稀释成不同浓度。
4.4实验方法
4.4.1将培养细胞用胰酶消化后，制备成105/ml细胞悬液，加入到96孔板，100ul/孔。
4.4.2培养24小时后，换无血清培养基，加入不同浓度待测药物10ul，温孵30分钟后加入8mM的过氧化氢(过氧化氢终浓度为0.8mM)。
4.4.3温孵5小时后弃上清，加入MTT100ul，4小时后测定。
4.5实验结果
表7
Figure C20051006835000161
4.6实验结论
生科降脂中药胶囊(RCF)体外在常规浓度范围(一般中药粗制剂的有效浓度在50ug/ml)时对过氧化氢引起血管内皮细胞损伤无明显保护作用，仅在高浓度(1.25-10mg/ml)时对过氧化氢引起血管内皮损伤有一定保护作用，但浓度-效应关系不明显。生科降脂中药胶囊(RCF)本身在以上浓度范围内对ECV-304细胞无损伤作用。
实验5、生科降脂中药胶囊(RCF)对乙硫氨酸所致小鼠急性肝脂肪变药效观察(小鼠肝脏组织病理学观察)
5.1、目的
评价生科降脂中药胶囊对乙硫氨酸所致小鼠急性肝脂肪变的疗效观察
5.2、分组
5.2.1正常对照组
5.2.2模型对照组
5.2.3生科降脂中药胶囊组(5g/kg×2次/日)
5.2.4硫普罗宁阳性对照组
标本经10％甲醛固定，石蜡包埋，切片，光镜检查。
5.3、病理检查内容
重点观察小鼠肝脂肪变，并以半定量方法，给出各组动物肝病变积分的平均值±标准差(x+S)，经t检验进行比较。
5.4、结果
5.4.1正常组：正常动物未见肝脂肪变、气球样变和坏死病变，只有个别动物见到灶性炎性细胞浸润，总积分为0.10±0.21。(见图1)
5.4.2模型组：动物肝脏细胞脂肪变性或气球样变性均为轻变以下，大部分动物仅在肝小叶中央静脉周围肝细胞发生轻度脂肪变性或肝细胞气球样变性，多数动物肝脏发现散在点状或小灶性肝细胞坏死和炎性细胞浸润，病变总积分为5.05±0.90(见图2、图3)。
5.4.3生科降脂中药胶囊组：有些肝脏在中央静脉周边的肝细胞可见轻微肝细胞脂肪变或气球样变，50％的动物肝脏未见病变，少数动物肝脏可见散在点状(1-2肝细胞)坏死或炎性细胞浸润，该组动物肝脏病变明显轻于模型组，总积分为1.70±1.30，与模型组相比差异非常显著(P＜0.01)，见图4、图5、图6。5.4.4硫普罗宁组：多数动物肝脏细胞未见脂肪变和气球样变性，只有2例在肝中央静脉周边可见轻微的肝细胞脂肪变或气球样变，1只动物可见点性肝细胞坏死或炎性细胞浸润，肝病变总积分为0.35±0.58，与模型组相比差异非常显著(P＜0.01)。见图7、图8。这表明该药物对乙硫氨酸所致小鼠急性肝细胞脂肪变有显著的疗效作用。
表8    各组动物肝病变积分    n＝10
  组别   肝病变积分(x+S)     P值
正常对照组模型组生科降脂中药胶囊组硫普罗宁组     0.10±0.215.05±0.901.70±1.300.35±0.58     ＜0.01-＜0.01＜0.01
表9、生科降脂中药胶囊(RCF)对乙硫氨酸所致小鼠急性肝脂肪变性药效观察
  组别 序号 肝脂肪变×1 气球样×1 坏死×3 炎性细胞浸润×1     分积
正常组   1     0     0     0     0.5×1     0.5
  2     0     0     0     0     0.0
  3     0     0     0     0     0.0
  4     0     0     0     0     0.0
  5     0     0     0     0     0.0
  6     0     0     0     0     0.0
  7     0     0     0     0     0.0
  8     0     0     0     0.5×1     0.5
  9     0     0     0     0     0.0
  10     0     0     0     0     0.0
  1     0.5×1     0.5×1   0.5×3     1×1     3.5
模型组     2     1×1     1×1    0.5×3     1×1     4.5
    3     1×1     1×1    0.5×3     1×1     4.5
    4     1×1     1×1    0.5×3     1×1     4.5
    5     0.5×1     0.5×1    1×3     1×1     5.0
    6     1×1     1×1    1×3     1×1     6.0
    7     1×1     1×1    1×3     1×1     6.0
    8     0.5×1     0.5×1    1×3     0.5×1     4.5
    9     1×1     1×1    1×3     1×1     6.0
    10     1×1     1×1    1×3     1×1     6.0
    中科降脂中药胶囊     1     0.5×1     0.5×1    0.5×3     0×1     0.0
    2     0×1     0×1    0×3     0×1     0.0
    3     0×1     0×1    0×3     0×1     0.0
    4     0×1     0×1    0.5×3     0×1     1.5
    5     0.5×1     0.5×1    0.5×3     0×1     2.5
    6     0.5×1     0.5×1    0×3     0×1     2.5
    7     0×1     0×1    0.5×3     0×1     0.0
    8     0.5×1     0.5×1    0.5×3     0.5×1     3.0
    9     0×1     0×1    0.5×3     0×1     1.5
    10     0.5×1     0.5×1    0.5×3     0.5×1     3.0
硫普罗宁   1     0.5×1     0.5×1    0×3     0×1     1.0
    2     0×1     0×1    0×3     0×3     0.0
    3     0×1     0×1    0×3     0×3     0.0
    4     0×1     0×1    0×3     0×3     0.0
    5     0×1     0×1    0×3     0×3     0.0
    6     0×1     0×1    0×3     0.5×3     1.5
    7     0×1     0×1    0×3     0×3     0.0
    8     0×1     0×1    0×3     0×3     0.0
    9     0.5×1     0.5×1    0×3     0×3     1.0
    10     0×1     0×1    0×3     0×3     0.0
实验6、生科降脂中药胶囊(RCF)对CCL4所致大鼠肝纤维化的药效观察
(肝组织病理学观察)
6.1、目的
评价生科降脂中药胶囊(RCF)对CCL4所致大鼠肝纤维化的治疗作用
6.2、分组
6.2.1正常对照组
6.2.2模型组
6.2.3生科降脂中药胶囊组(5g/kg)
6.2.4双环醇阳性对照组(200mg/kg)
标本经10％甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜检查。
6.3、病理检查内容
肝脏炎性细胞浸润，脂肪变性，气球样变性，坏死，纤维结缔组织增生，假小叶形成等。
对各项病变严重程度以半定量方法积分，并按各种病变的重要性乘以不同的加权数(详见表10)，计算每只动物肝病变的总积分，各组动物肝病变积分的总平均值±标准差(x+S)，经t检验作比较。
6.4、结果
6.4.1对照组：对照组动物肝主要病变为肝脏汇管区、门脉区、肝实质内发生散在点状或小灶性炎性细胞浸润，未见脂肪变、气球样变、坏死、结缔组织增生或假小叶形成，总积分为0.75±0.26(详见表10)，参见图9。
6.4.2模型组：
CCL4致大鼠慢性肝损伤特点是：肝脏发生严重的脂肪变性，气球样变性，散在小灶性或点状肝细胞凝固性坏死，炎性细胞浸润和肝脏结缔组织增生或假小叶形成等，肝细胞脂肪变性或气球样变性均以门静脉为中心，大部分肝细胞受累，严重者仅残存少量的大小不等的肝细胞。在病变肝细胞中可见散在点状或小灶性肝细胞坏死，炎性细胞浸润，大部分动物肝脏均发生结缔组织增生。其中2例(2/10)形成假小叶，小胆管增生，病变总积分为14.70±3.29。参见图10、11、12。
6.4.3生科降脂中药胶囊组(5g/kg)：
该方剂对CCL4致慢性肝损伤有明显的治疗作用，肝脂肪变性，气球样变性，坏死和炎性细胞浸润均轻于模型组，特别是对肝脏组织增生要轻于模型组，未见假小叶形成，尚存留的肝细胞可见部分核裂相，病变总积分为8.80±2.16，与模型组相比差异非常显著(P＜0.01)，参见图13、14、15、16。
6.4.4双环醇组(200mg/kg)：
对慢性CCL4致大鼠肝细胞脂肪变性，气球样变性比模型组未见明显好转，但对肝细胞坏死，炎性细胞浸润或结缔组织增生明显好于模型组，至1例(1/10)动物肝脏发生假小叶，尚存在的肝细胞可见核分裂相。病变总积分为8.60±3.07，与模型组相比差异非常显著(P＜0.01)，参见图17、18、19、20。
6.5、结论
生科降脂中药胶囊组(5g/kg)对CCL4所致大鼠肝纤维化有较好的治疗作用。
表10、各组动物肝病变积分(x±S)  n＝10
  组别     肝病变积分(x+S)     P值
正常对照组模型组生科降脂中药胶囊组硫普罗宁组     0.75±0.2614.70±3.298.80±2.168.60±3.07     ＜0.01-＜0.01＜0.01
表11、生科降脂中药胶囊组(5g/kg)对CCL4所致大鼠肝纤维化病变观察
组别     序号   脂肪变×1 气球样×1 坏死×3   炎性细胞×1   纤维增生×1 假小叶×3   病变积分
正常组     1     0     0     0     1×1     0     0     1
    2     0     0     D     0.5×1     0     0     0.5
    3     0     0     0     0.5×1     0     0     0.5
    4     0     0     0     0.5×1     0     0     0.5
    5     0     0     0     1×1     0     0     1
    6     0     0     0     1×1     0     0     1
    7     0     0     0     0.5×1     0     0     0.5
    8     0     0     0     0.5×1     0     0     0.5
    9     0     0     0     1×1     0     0     1
    10     0     0     0     1×1     0     0     1
    1     3×1     3×1     1×3     1×1     2×1     1×3     14 0
    2     3×1     3×1     1×3     1×1     2×1     0.5×3     13.5
  模型组     3     1×1     1×1     1×3     1×1     3×1     3×3     18.0
    4     2×1     2×1     1×3     1×1     2×1     1×3     13.0
    5     1×1     1×1     1×3     1×1     3×1     3×3     18.0
    6     3×1     3×1     1×3     1×1     2×1     1×3     14.0
    7     3×1     3×1     1×3     1×1     2×1     1×3     15.0
    8     3×1     3×1     1×3     1×1     2×1     1×3     15.0
    9     3×1     3×1     1×3     1×1     3×1     2×3     19.0
    10     2×1     1×1     1×3     1×1     0.5×1     0×3     7.5
  中科降脂中药胶囊     1     3×1     3×1     0.5×3     0.5×1     2×1     0×3     10.0
    2     2×1     2×1     0.5×3     0.5×1     2×1     0.5×3     9.5
    3     2×1     2×1     1×3     1.0×1     2×1     0×3     10.0
    4     2×1     2×1     1×3     1.0×1     2×1     0×3     13.0
    5     2×1     2×1     1×3     1.0×1     2×1     0×3     10.0
    6     2×1     2×1     0.5×3     0.5×1     1×1     0×3     7.0
    7     2×1     2×1     0.5×3     0.5×1     1×1     0×3     7.0
    8     2×1     2×1     0.5×3     0.5×1     0×1     0×3     6.0
    9     3×1     3×1     0.5×3     0.5×1     1×1     0×3     9.0
    10     2×1     2×1     0.5×3     0.5×1     0.5×1     0×3     6.5
双环醇组     1     3×1     3×1     0.5×1     0.5×1     0.0×1     0.0×3     7.0
    2     3×1     3×1     0.5×1     0.5×1     1.0×1     0.0×3     8.0
    3     3×1     3×1     0.5×1     0.5×1     1.0×1     0.0×3     8.0
    4     3×1     3×1     0.5×1     0.5×1     0.0×1     0.0×3     7.0
    5     3×1     3×1     1.0×1     1.0×1     0.5×1     0.0×3     8.5
    6     3×1     3×1     0.5×1     0.5×1     0.5×1     0.0×3     7.5
    7     2×1     2×1     1.0×1     1.0×1     2.0×1     3.0×3     17.5
    8     3×1     3×1     0.5×1     0.5×1     1.0×1     0.0×3     8.0
    9     2×1     3×1     1.0×1     1.0×1     1.0×1     0.0×3     9.0
    10     2×1     2×1     1.0×1     1.0×1     0.0×1     0.0×3     6.0
本发明中药胶囊的用途，用于降血脂和预防脂肪肝。特别适用于高血脂、脂肪肝及需要预防心血管疾病、保肝、护肝人群的食疗和预防保健。

Claims (7)

1、一种用于降血脂的中药胶囊，其特征在于它的有效成分是由下列重量比的原料制成：
提取后的绞股蓝粉    3-12份
提取后的山楂粉      3-12份
提取后的丹参粉      2-8份
提取后的黄芪粉      2-8份。
2、根据权利要求1所述的中药胶囊，其特征在于所述的中药胶囊的有效成分是由下列重量比的原料制成：
提取后的绞股蓝粉    9份
提取后的山楂粉      9份
提取后的丹参粉      6份
提取后的黄芪粉      6份。
3、一种权利要求1所述的中药胶囊的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
a.分别称取提取后的绞股蓝粉、山楂粉，丹参粉、黄芪粉，过60目筛待用；所有原料进行外观检测，并置于混合机内进行混粉；
b.收集步骤a已混合均匀的混合粉，用双层聚乙烯胶袋包装待用；
c.将步骤b收集的混合粉于自动或半自动胶囊充填机进行胶囊充填；
d.胶囊经抛光、检查，入瓶、入盒包装，即得产品。
4、根据权利要求3所述的中药胶囊的制备方法，其特征在于所述的提取后的绞股蓝粉的制备方法是：取合格的绞股蓝，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加8-12倍量水，煮沸，提取2-4次，每次煮沸提取时间均为0.5-1.5小时，提取液200目筛网过滤，取滤液，在-80--95kpa，65-80℃下减压，浓缩，60℃下相对密度为1.08-1.10，过120目，合并浓缩液，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的绞股蓝粉。
5、根据权利要求3所述的中药胶囊的制备方法，其特征在于所述的提取后的山楂粉的制备方法是：取合格的山楂，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加入4-8倍量的80％的乙醇，加热至60-70℃，回流提取2-4次，每次提取时间均为1-3小时，提取液100目过筛网，合并乙醇滤液，在-70---95kPa，60-70℃减压回收乙醇，继续浓缩，至山楂投料量的1/2体积(V/W)的浓缩液，100目过筛网，将滤过的浓缩液上大孔树脂柱，依次用水、60％乙醇洗脱，收集60％乙醇的洗脱液，在-70--95kPa，60-70℃减压回收乙醇，继续浓缩，60℃下热测相对密度为1.10-1.13，过100目，将浓缩液喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的山楂粉。
6、根据权利要求3所述的中药胶囊的制备方法，其特征在于所述的提取后的丹参粉的制备方法是：分别取合格的丹参，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加入4-8倍量的80％的乙醇，加热回流提取1-3次，每次加热回流提取时间为1-3小时，提取液120目过筛网，药渣备用，合并乙醇滤液，减压回收乙醇，合并浓缩液为醇提浸膏，备用；取醇提后的丹参药渣，加8-12倍量水，煮沸提取0.5-1.5小时，提取液经200目筛网过滤，取滤液，在-80--95kPa，65-80℃减压条件下，浓缩，60℃下热测相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液为水提浸膏，将丹参醇提浸膏与水提浸膏合并，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的丹参粉。
7、根据权利要求3所述的中药胶囊的制备方法，其特征在于所述的提取后的黄芪粉的制备方法是：取合格的黄芪，净选，除杂质，清水洗净，切碎，置多功能提取罐内，加8-12倍量水，煮沸，提取2-4次，每次煮沸提取时间均为0.5-1.5小时，提取液200目过筛网，取滤液，在-80--95kpa，65-80℃减压，浓缩，60℃下热测相对密度为1.05-1.08，过120目，合并浓缩液，进行喷雾干燥，收集喷干粉，即制得提取后的黄芪粉。
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