CH615441A5

CH615441A5 -

Info

Publication number: CH615441A5
Application number: CH609876A
Authority: CH
Inventors: Francois-Xavier Jarreau; Roger Sarfati
Original assignee: Nativelle Sa Ets
Priority date: 1975-05-16
Filing date: 1976-05-14
Publication date: 1980-01-31
Also published as: FR2310766A1; US4060607A; NL187748B; NL187748C; CA1068257A; FR2310766B1; JPS627200B2; GR58249B; JPS51141862A; NL7605226A; GB1524092A; ES447664A1; DE2621507A1; BE841652A; DE2621507C2

Description

La présente invention concerne un procédé de préparation de nouveaux dérivés de cardénolides ainsi que de leurs sels minéraux ou organiques.

On sait que de nombreuses substances naturelles dérivées 55 des hétérosides cardiotoniques sont utilisées en thérapeutique pour le traitement de l'insuffisance cardiaque. L'activité cardiotonique des cardénolides-glycosides tels que la digitoxine, dépend notamment de la structure de la partie cardénolide et de la nature de la chaîne sucrée en 3 ß. Cependant ces substances 6(l naturelles présentent généralement une marge thérapeutique faible qui rend leur utilisation délicate, d'où l'intérêt de préparer des composés de structure voisine possédant une forte activité cardiotonique associée à une faible toxicité. De tels composés peuvent être obtenus en greffant un substituant approprié en 3 65 de la partie cardénolide, et par exemple un reste aminé comme décrit au brevet français 2 181 694.

Toutefois la présence du reste aminé confère à ces composés des propriétés basiques.

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Le présent procédé fournit des dérivés de cardénolides Les dérivés de cardénolides obtenus par le procédé selon cardiotoniques possédant une activité thérapeutique modifiée et l'invention peuvent être représentés par la formule générale I présentant des propriétés amphotères procurant des propriétés suivante :

dans laquelle m et n, identiques ou différents, peuvent prendre acide ou d'un oligo-peptide ; comme exemple de groupe alkyl-

l'une des valeurs 0,1,2,3, ou 4. Rj R2 R4 R5 R6, identiques ou 20 oxy- ou aralcoxy-carbonyle, on peut citer un groupe t-butyloxy-

différents, représentent un atome d'hydrogène ou un groupe carbonyle, ou benzyloxycarbonyle diversement substitué sur le hydroxy, alcoxy, ou acyloxy; R3 représente un groupe alkyle noyau aromatique; R7 et R8 peuvent être conjointement deux inférieur, aldéhyde, halogénoalkyle, hydroxyalkyle, acyloxyal- restes acyles et former avec l'atome d'azote un groupe phtal-

kyle, ou éthylènedioxyalkyle ; R7 représente un atome d'hydro- imide ; R9 peut représenter un groupe hydroxy, un groupe gène, un groupe alkyle, acyle, alkyloxycarbonyle, ou aralcoxy- 25 alcoxy tel que méthoxy, éthoxy, ou phtalimidométhyloxy, ou un carbonyle ; R8 représente un atome d'hydrogène ou un groupe groupe aralcoxy et notamment un groupe benzyloxy.

alkyle ; R7 et R8 peuvent former un hétérocycle conjointement avec l'atome d'azote ; R9 représente un groupe hydroxy, alcoxy, Comme indiqué ci-dessus, l'activité cardiotonique des com-

aralcoxy, ou un reste aminé d'un amino-acide ou d'un oligo- posés tels que ceux représentés par la formule I dépend notam-

peptide. 30 ment de la structure de la partie cardénolide, et plus particu-

Dans la formule I représentée ci-dessus, n prend de préfé- liérement de la stéréochimie des substituants qui y sont greffés, rence la valeur 1 ou 2, et m la valeur 0, ou inversement. Lorsque La présente invention concerne de préférence les dérivés de

R7 représente un groupe acyle, ce groupe peut être par exemple cardénolides représentés par la formule la ci-après, où la confi-

un groupe acétyle, ou un groupe acyle dérivant d'un amino- guration stéréochimique a été indiquée.

(la)

/

N

R

8

\

CH-(CH2)n~COO ^

R9-CO«(CH2)m

L'invention concerne également un procédé de préparation des composés de formule I, par couplage entre des génines cardiotoniques, par la fonction alcool-3, et de préférence par la fonction alcool-3ß, et des diacides aminés, par l'une ou l'autre fonction acide carboxylique.

Conformément au procédé de l'invention on fait réagir un cardénolide préalablement protégé et un dérivé de diacide aminé convenablement substitué au niveau du groupe amino et au niveau de l'une des deux fonctions acide carboxylique, l'autre étant judicieusement activée. Comme cardénolide de départ, on peut choisir par exemple la digitoxigénine, la digoxigénine, la strophanthidine, la gitoxigénine, la gitaloxigénine, l'ouabaigé-nine, etc.. Comme exemples de diacides aminés utilisables pour la préparation de composés suivant l'invention, on peut citer l'acide aspartique, l'acide glutamique, l'acide amino-2 propane-dioique-1,3, etc., sous forme lévogyre, dextrogyre, ou racémi-que. Ces divers diacides aminés peuvent être éventuellement substitués sur l'atome d'azote.

Les groupements protecteurs du reste amino et de la fonction acide carboxylique peuvent être ceux communément employés en synthèse peptidique; on peut citer à titre d'exemples les groupements benzyloxycarbonyle, trityle, phtalimido, 55 etc., pour le reste amino, et les groupements ester benzylique ou méthylique, ou phtalimidométhyle, etc., pour la fonction acide carboxylique.

L'activation de la seconde fonction acide carboxylique est réalisable selon les techniques habituelles de la synthèse peptidi-60 que, en la transformant par exemple en chlorure d'acyle, ester actif, anhydride, etc., ou en l'associant à un agent de condensation tel que, par exemple, le dicyclohexyl-carbodiimide, le N-éthyl-5-phényl-isoxazolium-3' sulfonate, ou le pyrophosphite de tétraéthyle.

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De plus, les groupements protecteurs des diverses fonctions alcool, acide carboxylique, amine et/ou aldéhyde, existant dans les produits de condensation peuvent être éliminés, puis éven

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tuellement remplacés par d'autres groupements et ce par les techniques usuelles.

Le couplage est effectué, de préférence, en ajoutant à froid le cardénolide à une solution de l'acide convenablement protégé et activé, puis en laissant la réaction évoluer à température 5 ambiante pendant quelques heures. Il se forme avec prédominance un composé que l'on extrait par un solvant organique du milieu réactionnel préalablement dilué par de l'eau et acidifié, et que l'on purifie par cristallisation ou Chromatographie.

Les composés représentés par la formule I ci-dessus, possè- ! „ dent une action tonicardiaque qui s'exerce de façon plus ou moins différent de celle des hétérosides cardiotoniques connus.

Plus particulièrement, ces dérivés de cardénolides possèdent d'intéressantes propriétés pharmacologiques, notamment une activité inhibitrice de 1'ATPase membranaire, vérifiée sur le 15 tissu de cerveau, et une activité convulsivante après injection dans le ventricule latéral de cerveau de rat, selon la technique de E.P. Noble, J. Axelrod, R.J. Wurtman, décrite dans «Life Science> (1967,6j 281.)

L'activité inotrope variable selon les espèces, a été recher- 2n chée sur le coeur de cobaye isolé (type Langendorff) et sur le coeur de chien in situ. De même l'activité chronotrope a été testée sur les mêmes préparations. On observe, dans certains cas, une dissociation des paramètres pharmacologiques différenciant les dérivés de cardénolides selon l'invention des hétérosi- 25 des cardiotoniques classiques usuellement employés en thérapeutique.

Les doses actives, par voie intraveineuse chez le chien, sont nettement inférieures au mg par kg de poids, ce qui situe ces produits à un niveau voisin des digitaliques naturels, avec une 30 marge thérapeutique différente de ces derniers.

Il est en particulier remarquable que l'on puisse toujours observer une persistance de l'activité inhibitrice de 1'ATPase membranaire pour les composés de formule I alors qu'au contraire on constate de nettes variations dans l'effet inotrope en 35 fonction des substituants greffés en 3 de la partie cardénolide, et en fonction de la nature du cardénolide lui-même.

Les composés de formule I sont plus particulièrement adaptés au traitement de l'insuffisance cardiaque et des troubles du rythme. 4«

Les composés de formule I peuvent être administrés sous les formes classiques. Pour l'administration par voie orale on peut utiliser des comprimés, capsules ou gélules, contenant un ou plusieurs composés selon l'invention associés aux véhicules pharmaceutiquement acceptables usuels tels que le lactose, 45 l'amidon, la polyvinylpyrrolidone, le stéarate de magnésium, la poudre de cellulose, le talc, etc.. L'administration parentérale peut se faire en utilisant des solutions hydroalcooliques, de l'eau bi-distillée, ou du propylèneglycol, ou un mélange de ces divers solvants. 50

Toutes les formulations adaptées à ces modes d'administration peuvent être utilisées, le médicament étant associé, en tant que principe actif, à un excipient pharmaceutiquement acceptable, de manière usuelle.

Les exemples suivants illustrent l'invention. 55

Exemple 1

Préparation de l'a-L-aspartyl-3ß digitoxigénine et dérivés. 60 (a) [a-N-benzyloxycarbonyl-ß-L-aspartyl]-3ß digitoxygénine. A 5,358 g d'acide N-benzyloxycarbonylß-benzyl L-asparti-que, en solution dans 30 cm3 de pyridine anhydre, sont ajoutés, sous agitation et à —5° C, 15 cm3 de solution molaire de chlorure de benzène sulfonyle dans la pyridine. L'agitation à « —5° C est maintenue pendant 30 minutes, puis 2,808 g de digitoxigénine en solution dans 20 cm3 de pyridine anhydre,

sont ajoutés en 30 minutes. L'agitation est encore maintenue à

— 5° C pendant 45 minutes, à 0° C pendant 2 heures, et à température ordinaire pendant 48 heures.

Le milieu est alors noyé et acidifié à pH 2-3, par une solution d'acide citrique à 10% dans l'eau, puis extrait par de l'acétate d'éthyle. L'extractum, lavé à l'eau, puis par une solution de bicarbonate de sodium, enfin à l'eau, séché et distillé à sec, permet d'obtenir 7,422 g de résidu. Celui-ci, cristallisé dans l'éthanol à 95° , fournit après recristallisation 3,88 g de cristaux blancs, mono-tache en Chromatographie sur couche mince (Kie-selgel Merck G CH2Cl2-MeOH 97-3), de [a-(N-benzyloxycar-bonyl ß-benzyl-L-aspartyl] -3ß digitoxigénine. Rendement s 75%.

Point de fusion (Kofler) 177—178° C Spectre I.R. (Nujol) 3465,3410,1755,1739,1722 cm"1 Spectre R.M.N. (CDC13) ô= 51 et 54 (2 s, CH3), 290 (2H), 304 (s, 5H), 347 (1H), 438 (s, 10H) cps.

(b) a-L-aspartyl-3ß digitoxigénine

On place 3,570 g de [a-(N-benzyloxycarbonyl ß-benzyl)-L-aspartyl] -3ß digitoxigénine, en solution dans 750 cm3 de méthanol, et on maintient 3 heures sous agitation et sous atmosphère d'hydrogène en présence de 900 mg de palladium sur carbonate de calcium à 5 %. Le milieu, filtré et concentré à sec, fournit 2,43 g de résidu. Celui-ci est cristallisé dans l'éthanol à 90° et conduit à 1,84 g de a-L-aspartyl-3ß digitoxigénine (Rendement = 15%).

C.C.M. : Plaque Kieselgel G - Solvant CHC13 saturé par le mélange EtOH/NH4OH (40/15)

Point de fusion: (Kofler) (décomposition): 220—240° C Spectre I.R. (Nujol): 3490,1745 cm"1 Spectre R.M.N. (DMSO d6): ô = (cps) 46 et 51 (2 s, CH3), 293 (2H), 351 (1H)

(c) [a-(N-acétyl)-L-aspartyl] -iß digitoxigénine

400 mg de a-L-aspartyl-3ß digitoxigénine, en solution dans 15 cm3 de méthanol anhydre avec 4 cm3 d'anhydride acétique, sont laissés 4h à température ambiante.

Le milieu, distillé à sec, fournit 447 mg de résidu. Celui-ci, repris par 10 cm3 de chlorure de méthylène, est extrait par une solution aqueuse de bicarbonate de sodium. L'extractum alcalin, acidifié à pH 2, est extrait à nouveau par du chlorure de méthylène. Celui-ci, lavé, séché et distillé à sec, fournit 294 mg de [a-(N-ac0tyl)-L-aspartyl]-3ß digitoxigénine, résidu blanc mono-tache en C.C.M. (Kieselgel Merck G, CHC13 saturé par le mélange EtOH-NH4OH(40-15).

Spectre I.R. (Nujol) : 3340,1740 cm-1 R.M.N. (CLCI3): ô=(cps) 53,55 et 122 (3 s, CH3), 292 (2H), 306 (1H), 350 (OH), 410 (NH)

(d) [a-(N-acétyl$-méthyl)-L-aspartyl]-3$ digitoxigénine. A150 mg de a-(N-acétyl)-L-aspartyl-3ß digitoxigénine, en solution dans 2 cm3 de méthanol et 3 cm3 d'éther, sont ajoutés, à 0° C et sous agitation, 2mM de diazométhane en solution dans l'éther. Après 30 minutes d'agitation à 0° C, le milieu, distillé à sec, fournit 153 mg de [a-(N-acétyl- ß-m0thyl)-L-aspartyl]- 3ß digitoxigénine, mono-tache en C.C.M. (Kieselgel Merck G, CH2Cl2/MeOH 9/1).

SpectreI.R. (Nujol): 3390,1740 cm-1 Spectre R.M.N. (CDC13): ô=(cps) 52,57,121 et 219 (4 s, CH3), 173 (2H), 291 (2H), 307 (1H), 349 (1H), 399 (d, 1H)7 Spectre de masse: M+ = 545 (C30H43NO8)

Exemple 2

Préparation de la ß-L-aspartyl-3ß digitoxigénine et dérivés (a) [$-(N-benzyloxycarbonyl a-p-nitrobenzyl)-L-aspartyl]-3ß digitoxigénine

Comme dans l'exemple 1 (a), 281 mg de digitoxigénine en solution dans 5 cm3 de pyridine sont couplés à 603 mg d'aci-de(N-benzyloxycarbonyl a-p-nitrobenzyl)-L-aspartique, en

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présence de 260 milligrammes de chlorure de benzène sulfonyle dans 6 cm3 de pyridine.

Après une agitation de 48 heures, le milieu réactionnel acidifié à pH 2-3 par une solution d'acide citrique à 10% est extrait par l'acétate d'éthyle. L'extractum, distillé à sec, fournit 780 mg d'un résidu jaune orangé qui est chromatographié sur 60 g de silice Merck. Les fractions éluées par le mélange chlorure de méthylène/méthanol 98,5/1,5, fournissent 530mg d'un résidu jaune pâle, encore impur. Une seconde Chromatographie sur 10 g de silice permet d'obtenir 390 mg de [ß-(N-benzyloxy-carbonyl a-p-nitrobenzyl)-L-aspartyl]-3ß digitoxigénine (Rdt. = 70%).

Spectre I.R. (Nujol): 3440, 1740 cm"'

Spectre R.M.N. (CDC1,): ô = (cps) 51 et 55 (2s, CH3), 177 (2H), 236 (1H), 291 (2H), 306 et 314 (2 s, CH2), 350 (2H), de i 438 à 486 (s et 2d, Ar).

(b) [$-(N-benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl]-3ß digitoxigénine

L'hydrogénation de 1 g de [ß-(N-benzyloxycarbonyl a-p-

nitrobenzyl)-L-aspartyl]-3ß digitoxigénine, en présence de 250 g de palladium sur carbonate de calcium à 5 %, dans 150 cm3 de méthanol pendant lh30, fournit après filtration et évaporation à sec, 901 mg de résidu jaune orange. Celui-ci est repris par du chlorure de méthylène et extrait par une solution de bicarbonate de sodium. L'extractum alcalin, lavé par du chlorure de méthylène et acidifié à pH 2 par HCl concentré, est : extrait à nouveau par du chlorure de méthylène. Celui-ci lavé, séché, et distillé à sec, permet d'obtenir 680 mg de [ß-(N-benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl]-3ß digitoxigénine (Rdt =

83%).

Spectre I.R. (Nujol): 3425, 1728 cm-1.

Spectre R.M.N. (CDCl3):ô = (cps) 51 et 55 (2 s, CH3) 175, 291,303,349,373 (OH), 436 (Ar).

(c) fi-L-aspartyl-3ft digitoxigénine

On place 600 mg de ß-(N-benzyIoxycarbonyl)-L-aspartyl-3ß digitoxigénine sous atmosphère d'hydrogène, en présence de ■ 150 mg de palladium sur carbonate de calcium à 5 % dans 90 cm3 de méthanol. Après 2 heures le milieu, filtré et distillé à sec, fournit 483 mg de résidu. Celui-ci, cristallisé dans le mélange méthanol/acétate d'éthyle, puis dans le méthanol, fournit 253 mg de cristaux purs de ß-L-aspartyl-3ß digitoxigénine -i (Rdt. = 54%).

Point de fusion = décomposition vers 260° C

Spectre I.R. (Nujol): 3625, 3160,1745,1715 cm-'.

Spectre R.M.N. (CD3OD): ô = (cps) 52, 58 (2 s CH3), 177 (2H), 233 (1H), 297 (2H), 351 (IH) _ a

(d) f$-(N-acétyla-méthyl)-L-aspartyl]-3fi digitoxigénine

On procède comme dans l'exemple 1 (c) en faisant agir l'anhydride acétique à température ambiante sur la ß-L-aspar-tyl-3ß digitoxigénine dans le méthanol. Le produit obtenu est alors traité, comme dans l'exemple 1 (d), par le diazométhane en solution dans l'éther à 0° C, pour donner la [ß-(N-acötyl a-m6thyl)-L-aspartyl]-3ß digitoxigénine.

Spectre R.M.N. (CDC13) : ô (cps) 51, 52,121 et 224 (4 s, CH3) 174 (q 2H), 293 (3H), 306 (1H), 350 (s, 1H), 398 (d, 1H)

Spectre de masse: M+ =545 (C30H43NO8)

Exemple 3

Préparation de l'a-L-glutamyl-3ß digitoxigénine et ses dérivés.

(a) [a-(N-benzyloxycarbonyly -benzyl)-L-glutamyl]-3ß di- t gitoxigénine

De la même façon que dans l'exemple 1 (a), on ajoute 1 g de digitoxigénine en solution dans 8 cm3 de pyridine au mélange refroidi de 2 g d'acide N-benzyloxycarbonyl-y -benzyl-L-gluta-mique et de 0,930 g de chlorure de benzène sulfonyle dans i 15 cm3 de pyridine. Après agitation pendant 20 heures, le milieu réactionnel est acidifié à pH 2-3 par une solution d'acide citrique à 10%, puis extrait par l'acétate d'éthyle. L'extractum,

distillé à sec, fournit un résidu de 2,8 g qui est chromatographié sur colonne de 75 g de Kieselgel Merck.

Les fractions, éluées par le mélange chlorure de méthylène/ méthanol 99/1, permettent d'obtenir 1,5 g de [a-(N-benzyloxy-; carbonyl y-benzyl)-L-glutamyl]-3ß digitoxigénine (Rdt. 80%), poudre blanche, mono-tache en C.C.M. (Kieselgel Merck G -CH2Cl2/MeOH 95/5).

Spectre I.R. (Nujol): 3510, 3340,1735 cm'1.

Spectre R.M.N. (CDC13): ô = (cps) 50 et 54 (2 s, CH3) 264 , (1H), 290 (2H), 303 (s, 4H), 328 (NH) 348 (1H), 436 (s, Ar).

(b) a-L-glutamyl-3ß digitoxigénine

L'hydrogénolyse de 1,4 gramme de [a-(N-benzyloxy-carbo-nyl y-benzyl)-L-gIutamyl]-3ß digitoxigénine, en présence de 350 mg de palladium/carbonate de calcium à 5 % dans 200 ml : de méthanol, pendant 90 minutes, fournit, après filtration et évaporation à sec, 970 mg de résidu. Par cristallisation dans le méthanol/acétate d'éthyle, on obtient 470 mg de cristaux purs d'a-L-glutamyl-3ß digitoxigénine (Rdt.: 50%).

Point de fusion 264° C (décomposition)

) Spectre I.R. (Nujol): 3560, 3430,1745 cm"1.

Spectre R.M.N. (DMSOd6): ô = (cps) 46, 54 (2 s, CH3), 280 (OH, NH2), 295 (3H), 353 (1H).

(c) [a-(N-acétyly-méthyl)-L-glutamyl] -J?ß digitoxigénine

On procède comme dans l'exemple 1 (c) en faisant agir

. l'anhydride acétique à température ambiante sur l'a-L-gluta-myl-3ß digitoxigénine dans le méthanol. Le produit obtenu est alors traité, comme dans l'exemple 1 (d), par le diazométhane en solution dans l'éther à 0° C, pour donner l'[a-(N-acétyl y-m6thyl)-L-glutamyl]-3ß digitoxigénine.

i Spectre R.M.N. (CDC13): ô = (cps) 52, 53,120 et 219 (4 s, CH3), 170 (1H), 272 (1H), 293 (2H), 303 (1H), 350 (1H), 378 (d, NH).

Spectre de masse M+ = 559 (C31H45NO(().

Exemple 4

Préparation de l'a-L-aspartyl-3ß digoxigénine et dérivés

(a) [a-(N-benzyloxycarbonyl ß-benzyl)-L-aspartyl]-3ß acé-tyl-12ß digoxigénine

Comme ci-dessus, 714 mg d'acide N-benzyloxycarbonyl ß-benzyl-L-aspartique, 350 mg de chlorure de benzène sulfonyle et 432 mg d'ac6tyl-12ß digoxigénine sont laissés sous agitation en solution dans 8 cm3 de pyridine refroidie pendant 6 heures.

Le milieu réactionnel est alors acidifié à pH 2-3 par une solution d'acide citrique à 10%, puis extrait par de l'acétate d'éthyle. L'extractum fournit 982 mg de résidu qui est chromatographié sur une colonne de 25 g de silice Merck. Les fractions éluées par le mélange de chlorure de méthylène/méthanol (99/ 1) fournissent 490 mg de [a-(N-benzyloxycarbonyl ß-benzyl)-L-aspartyl]-3ß ac6tyl-12ß digoxigénine mono-tache (Rdt. = '63%).

Spectre I.R. (Nujol): 3440 et 1732 cm"'

Spectre R.M.N. (CDC1,): ô = (cps) 53, 53,5 et 129 (3 s, CH3) 172 (3H), 275 (2H), 289 (2H), 304 (5H), 343, 5 (NH), 348 (1H) et 437 (10H).

(b) a-L-aspartyl-3 ß acétyl-12 ß digoxigénine

Comme ci-dessus, 500 mg de [a-(N-benzyloxycarbonyl ß-benzyl)-L-aspartyl]-3ß ac0tyl-12ß digoxigénine dans 75 cm3 de méthanol sont laissés sous atmosphère d'hydrogène et sous agitation, en présence de 125 mg de palladium sur carbonate de calcium à 5 % pendant 3 heures. Après filtration, évaporation et lavage du résidu jaune à l'éther, on obtient 264 mg de a-L-aspartyl-3ß ac6tyl-12ß digoxigénine, mono-tache en C.C.M. (Rdt.: s 75%).

Spectre I.R. (Nujol): 3440 et 1735 cm"1.

Spectre R.M.N. (CD3OD): ô = (cps) 54,59,5 et 124,5 (3 s, CH3), 170 (3H), 243 (1H), 275 (1H), 310 (1H), 350 (2H).

(c) [a-(N-benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl]-3f> digoxigénine

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A 700 mg de [a-(N-benzyloxycarbonyl-ß-benzyl)-L-aspar-tyl]-3ß ac6tyl-12ß digoxigénine, en solution dans 70 cm3 d'éthanol à 95°, sont ajoutés, goutte à goutte, 70 cm3 d'eau contenant 1,34 g de bicarbonate de potassium et 70 mg de carbonate de potassium.

Le milieu est laissé 12 jours en vase fermé à l'étuve à 50%, puis concentré au tiers, extrait trois fois par du chlorure de méthylène, acidifié à pH 2 par de l'acide chlorhydrique et enfin extrait par le mélange chloroforme/éthanol (8/2).

L'extractum, lavé, séché, et distillé à sec, fournit 546 mg de [a-(N-benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl]-3ß digoxigénine pure (Rdt. = 94%).

Spectre I.R. (Nujol): 3420 et 1730 cm~'.

Spectre R.M.N. (C,D,N): ô = (cps) 52 et 72 (2 s, CH,) 199 (2H), 220 (2H), 307 (2H), 316, 5 (3H), 436, 5 (Ar)

(d) a-L-aspartyl-3ß digoxigénine

L'hydrogénolyse de 480 mg de [a-(N-benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl]-3ß digoxigénine, en solution dans 70 cm3 de méthanol en présence de 120 mg de palladium à 5% sur carbonate de calcium pendant 5 heures, fournit, après filtration et évapora-< tion, 376 mg de a-L-aspartyl-3ß digoxigénine (Rdt. s 100%).

Spectre I.R. (Nujol): 3400. 3360. 1740 cm"1.

Spectre R.M.N. (CD,OD): ò = (cps) 46.5 et 59 (2 s. CH,) 168 (2H), 246 (1H), 309 (1H), 351 (1H).

Il est bien entendu que la présente invention ne se limite pas m à la préparation des composés représentés par la formule générale (I), mais s'étend également à celle de leurs sels et plus particulièrement de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. On peut remarquer que la présence d'un groupement amino -NR7Rs et d'un groupement acide RgCO, Ry pouvant être i - notamment un groupement hydroxy. permet la préparation de sels aussi bien par action de bases que d'acides minéraux ou organiques.

C

Claims

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2

REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation des dérivés de cardénolides de formule générale:

/7

Cil- (CH0 ) -C00 v 2 n

R9-CO-(CH2)m dans laquelle n et m, identiques ou différents, peuvent prendre l'une des valeurs 0,1,2,3, ou 4; R, R2 R4 R5 et R6, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, ou un groupe hydroxy, alcoxy, ou acyloxy; R3 représente un groupe alkyle inférieur, aldéhyde, halogénoalkyle, hydroxyalkyle, acyloxyal-kyle ou éthylènedioxyalkyle; R7 représente un groupe alkyle, acyle, alkyloxycarbonyle ou aralcoxycarbonyle; R8 représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle ; R7 et R8 peuvent former un hétérocycle, conjointement avec l'atome d'azote ; R9 représente un groupe alcoxy, aralcoxy, ou un rest aminé d'un amino-acide ou d'un oligo-peptide; ainsi que de leurs sels minéraux ou organiques, caractérisé en ce que l'on couple une génine de formule:

~( 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la réaction de couplage est effectuée en présence de chlorure de benzène sulfonyle dans la pyridine.
4. Procédé de préparation des dérivés de cardénolides de formule générale (I) ci-dessus dans laquelle n, m, Rj à ont les

25 significations susindiquées, le groupe NR7R8 est remplacé par un groupe NH2, et/ou le groupe CO-R9 est remplacé par un groupe COOH, ainsi que de leurs sels minéraux ou organiques, caractérisé en ce qu'on couple une génine correspondante de formule (II), préalablement protégée, avec un acide aminé 10 correspondant de formule (III) dont, le cas échéant, le groupe NH2 et le groupe COOH remplaçant CO-R9 sont protégés, en ce qu'on élimine les groupes protecteurs et en ce qu'on réalise éventuellement une salification du produit par une base ou un acide minéral ou organique.
5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'on utilise un acide dont le groupe NH2 est protégé par un groupe benzyloxycarbonyle, trityle ou phtalimido, et l'une des deux fonctions acide carboxylique est protégé par un groupe ester benzylique, p-nitrobenzylique, méthylique, ou un groupe phtal-imidométhyle.
6. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la réaction de couplage est effectuée à une température comprise entre —10 et +30° C.
7. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la réaction de couplage est effectuée en présence de chlorure de benzène sulfonyle dans la pyridine.

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(II)

dans laquelle Rj à Rg ont les significations susindiquées, préalablement protégé, avec un acide aminé de formule:

/•'

N

H./ \

/

VC0-<CH2)m

8 ,CH-(CH2)n-C00H (III)

dans laquelle R7, Rg, R9, m et n ont les significations susindiquées, en ce qu'on élimine le ou les groupes protecteurs, et en ce qu'on réalise éventuellement une salification du produit par une base ou un acide minéral ou organique.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la réaction de couplage est effectuée à une température comprise entre —10 et +30° C.

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