Procédé de fabrication du dérivé monoaminogualiidine d'adrénochrome
La présente invention a pour objet un procédé de fabrication du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome, qui peut être transformé en sels solubles dans l'eau.
L'adrénochrome et ses dérivés présentent d'excellentes propriétés hémostatiques et stabilisatrices des capillaires. On pense que différents facteurs conditionnent l'action hémostatique, facteurs que l'on classe généralement en deux groupes: les uns sont les facteurs capillaires et les. autres les facteurs de coagulation du sang. Par exemple, la perméabilité capillaire et la réaction des vaisseaux capillaires à. la pression sanguine appartiennent au premier groupe, tandis que la formation de thromboplastine et sa transformation en prothrombine et fibrinogène appartiennent au second groupe.
Un bon nombre d'expériences fondamentales ont démontré que l'adréno- chrome et ses dérivés raccourcissent la durée de l'hémorragie et qu'ils ont une action inhibitrice remarquable contre l'accroissement de la perméabilité capillaire, alors qu'ils ne diminuent pas le temps de coagulation du sang. Dès lors, on peut dire, tenant compte égalemen : t d'autres résultats d'expériences fondamentales, que l'adrénochrome et ses dérivés exercent une influence non pas sur les facteurs de coagulation du sang, mais sur les facteurs capillaires, bien qu'il y ait eu quelques tentatives pour démontrer qu'ils influencent l'un et l'antre des deux groupes de facteurs.
On a également démontré, à la suite de nombreuses expériences fondamentales, que l'adrénoch. rome à la dose de 5 à 10 mg par kg, ou les dérivés d'adrénochrome à la dose de 100 à 300 mg par kg, ne présentent pas de toxicité du tout et que même une dose de dérivé d'adrénochrome correspondant au maximum de sa solubilité dans l'eau ne produit pas d'effets secondaires lorsqu'on l'administre par voie intraveineuse, intrapérito néale, sous-cutanée ou orale. En n d'autres termes, l'adrénochrome et ses dérivés ne présentent pour ainsi dire pas de toxicité fait qui accroît d'autant plus l'excellence de leurs effets pharmacologiques.
L'un des dérivés courants d'adrénochrome le plus souvent utilisé dans des préparations hémostatiques et à action stabilisatrice des capillaires est la monosemicarbazone d'adrénochrome, dont la formule développée est la suivante:
EMI1.1
On constate actuellement une demande accrue de ce composé, à cause de ses bons effets hémostatiques et stabilisateurs des capillaires.
En pratique, toutefois, la monosemicarbazone d'adrénochrome ne peut pas être utilisée de façon satisfaisante dans des. préparations aqueuses de concentration élevée, notamment pour injections, parce qu'elle n'est pas suffisamment soluble dans l'eau, vu que 0,5 mg seulement de ce composé se dissout dans 1 ml d'eau à 200 C. C'est pourquoi il est nécessaire d'ajouter un agent solubilisant ou d'appliquer d'autres méthodes spéciales pour obtenir des préparations aqueuses de monosemicarbazone d'adrénochrome, notamment pour injections, c'est-à-dire des préparations contenant plus de 5 mg de ce composé par ml d'eau. Toutefois, l'addition d'agents solubili sants en grandes quantités soulève quelques problèmes d'ordre clinique.
Par exemple, il est courant d'ajouter 500 mg de salicylate de sodium par 100 mi en vue de solubiliser la monosemicarbazone d'adrénochrome dans des préparations à injecter. Une dose aussi élevée de salicylate de sodium provoque des effets secondaires, parce qu'elle stimule l'écorce surrénale, parce qu'elle accélère L'action de l'hyaluridonase et parce qu'elle présente également d'autres actions pharmacologiques.
Le but de la présente invention est la fabrication du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome, qui peut être transformé en sels qui sont à ce point solubles dans l'eau qu'on peut en faire des préparations aqueuses de concentration élevée, notamment pour injections, qui sont satisfaisantes.
Le procédé selon l'invention est caractérisé en ce qu'on effectue une réaction de condensation avec élimination d'eau, cette réaction étant effectuée en ajoutant à une solution aqueuse d'adrénochrome un sel d'aminoguanidine ainsi qu'une quantité appropriée d'un acide minéral, et en ce qu'on alcalinise la solution obtenue au moyen d'ammoniaque ou de soude caustique afin de précipiter un produit cristallin de couleur orange, ledit acide minéral exerçant une action catalytique d'accélération de ladite réao tion entre ladite solution aqueuse d'adrénochrome et ledit sel d'aminoguanidine.
Plusieurs formes d'exécution du procédé seront décrites ci-après à titre d'exemple.
Le dérivé monoarninoguanidine d'adrénochrome, est synthétisé par une'réaction de condensation, avec élimination d'eau, entre l'adrénochrome et l'amino- guanidine. L'adrénochrome correspond à la formule suivante:
EMI2.1
L'aminoguanidine correspond à la formule suivante:
EMI2.2
Dès lors, le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome synthétisé par condensation, avec élimina tion- d'eau, de ces deux composés correspond à la formule suivante:
EMI2.3
I1 est bien connu que l'aminoguanidine réagit avec une cétone aromatique ou un aldéhyde et forme un produit aisément cristallisable.
Dans le processus décrit, c'est donc le groupe cétonique en position 6 de l'adrénochrome qu'on fait réagir avec le groupe
NH2 de l'aminoguanidine. En pratique, une solution aqueuse d'adrénochrome est additionnée d'un sel d'aminoguanidine, d'habitude le nitrate, on ajoute aussi un peu d'acide comme catalyseur, par exemple de l'acide nitrique, et le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome cristallise sous forme de cristaux de couleur orange lorsque la solution est alcalinisée au moyen d'ammoniaque ou de soude caustique. On dissout alors les cristaux de couleur orange dans une solution aqueuse d'acide acétique et le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome cristallise à l'état purifié lorsque cette solution est alcalinisée au moyen de soude caustique.
Le nitrate d'aminoguanidine peut être préparé par une méthode habituelle. Par exemple, il peut être préparé en faisant réagir de l'acide nitrique sur du bicarbonate d'aminoguanidine, lequel peut lui-même être préparé par réduction de la nitroguanidine au moyen d'acide acétique et de zinc.
L'adrénochrome peut également être préparé par toute méthode habituelle. Par exemple, il peut être obtenu en oxydant de l'adrénaline au moyen d'oxyde d'argent ou de ferricyanure de potassium.
Dans la réaction de l'adrénochrome avec le nitrate d'aminoguanidine ,le rendement en dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome dépend de l'agent de condensation mis en oeuvre et de la quantité de ce dernier.
Tableau 1
Relation entre le rendement en dérivé
monoaminoguanidine d'adrénochrome
et l'agent de condensation utilisé
Rendement en
dérivé monoanino- dérivé monoanililo
guaninne
d'adrénochrome
Bicarbonate de quantité équi- une petite sodium molaire quantité
Hydroxyde de quantité équi- 39 mg sodium molaire
Acide nitrique 0,05 ml 380 mg
Acide nitrique 0,20 ml 960 mg
Par exemple, si l'on part de 1 g d'adrénochrome mis en réaction, la relation entre le poids de dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome obtenu et l'agent de condensation utilisé est indiqué au tableau 1 qui précède.
On obtient un meilleur rendement du côté acide que du côté faiblement alcalin, du fait qu'un acide minéral tel que l'acide nitrique exerce une action catalytique d'accélération de la réaction entre l'adrénochrome et le nitrate d'aminoguanidine.
Toutefois, l'addition d'une quantité trop forte d'acide n'est pas indiquée, parce qu'elle décompose le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome forme.
Exemple I
Dans un ballon rond à trois cols de 200 ml muni d'un agitateur, on introduit une solution de 0, 1 g d'adrénochrome dans 50ml d'eau. On introduit un mélange de 0, 75 g de nitrate d'aminoguanidine, 0, 2 ml d'acide nitrique et 5 ml d'eau dans la solution aqueuse d'adfénochrome, à travers un entonnoir fixé au côté du ballon, ce dernier étant soumis à une agitation. Environ 30 minutes plus tard, on ajoute 20 mi d'ammoniaque aqueuse à 20 O/o, puis le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome pré cipite sous forme de cristaux de couleur orange. Le produit cristallin qui a précipité est isolé au moyen d'un entonnoir de Büchner et lavé à l'eau.
Le produit cristallin lavé est dissous dans 10 mi de solution aqueuse d'acide acétique à 3 /e. Après avoir été filtrée, la solution est alcalinisée au moyen de 15 ml de solution aqueuse de soude caustique à 10 0/o, à la suite de quoi on obtient environ 0,9 g de dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome purifié, sous forme de cristaux en aiguilles, de couleur orange.
Le produit cristallisé en aiguilles est soluble dans l'acide chlorhydrique. I1 n'est que peu soluble dans l'eau, l'alcool et l'acétone. Son point de fusion est de 195-2000 C, température à laquelle il se décompose.
Exemple II
Une solution de 34,1 g de ferricyanure de potassium, 11,2 g de bicarbonate de sodium et 80 ml d'eau est introduite dans un bécher de 200 ml. Au moyen d'un entonnoir, on ajoute un mélange de 5 g d'adrénaline et de 50 ml de solution aqueuse d'acide acétique à 3 O/o à la solution contenue dans le bécher de 200. ml, ce dernier étant soumis à une agitation.
Une minute après, on ajoute de la même manière un mélange de 1 ml de solution aqueuse d'acide acétique à 3 /o, 3,8 g de nitrate d'aminoguanidine et 20 mi d'eau. 10 minutes plus tard, on alcalinise la solution au moyen d'une solution aqueuse de soude caustique à 10 0/o ; il précipite alors environ 5,1 g de dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome, sous forme de cristaux de couleur orange, qui sont purifiés exactement de la même manière que celle qui vient d'être décrite dans l'exemple qui précède.
Le produit purifié se présente sous forme de cristaux en aiguilles de couleur orange, solubles dans l'acide chlorhydrique, peu solubles dans l'eau, l'alcool et l'acétone; il fond à 195-2000 C, température à laquelle il se décompose.
L'adjonction d'acide minéral, en quantités telles que celles qui sont indiquées dans les deux exemples qui viennent d'être décrits, ne décompose pas le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome, mais au contraire permet d'en obtenir un bon rendement. n n'est pas nécessaire de chauffer dans les deux exemples qui viennent d'être décrits.
Le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome peut être transformé en sels en vue de l'appliquer sous forme aqueuse, notamment par injection, du fait que les sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome sont suffisamment solubles dans l'eau. Dans ce cas, le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome est dissous. dans un acide aqueux dilué, puis la solution est additionnée d'un solvant organique soluble dans l'eau, à la suite de quoi on obtient un sel du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome à l'état cristallin. Le produit cristallin est dissous dans de l'eau et la solution additionnée d'un solvant organique. Lorsqu'on refroidit la solution, on obtient le sel du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome sous forme de cristaux purifiés.
L'acide utilisé en vue de dissoudre le dérivé mo noaminoguanidine d'adrénochrome lors de la réaction de salification peut être l'un des acides minéraux, acides organiques carboxyliques et acides organiques sulfoniques qui sont généralement représentés par les formules HX, R - COOH et R - SO5H. I1 n'est pas indiqué d'utiliser trop d'acide, parce que cela décompose le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome.
Le solvant organique à utiliser dans le processus de salification peut être l'un quelconque des sui vante: alcool méthylique, alcool éthylique, acétone, mélanges d'alcool et d'éther et mélanges d'acétone et d'éther.
Exemple III
Une solution de 30 ml d'eau et de 15 ml d'acide chlorhydrique à 37 O/o est introduite dans un Erlenmeyer de 200 ml. On dissout 5,1 g de dérivé mono aminoguanidine d'adrénochrome non purifié, à 40500 C, dans une solution placée dans l'Erlenmeyor.
On filtre la solution à travers un entonnoir. On place la solution filtrée dans un Erlenmeyer de 1000 mi et on y ajoute 450 ml d'acétone. Lorsque la solution est refroidie, le chlorhydrate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome précipite sous forme cristalline.
Le produit cristallin est séparé au moyen d'un entonnoir de Büchner, lavé à l'acétone et séché à l'air. Le produit cristallin séché à l'air est dissous dans 100 ml d'eau dans un Erlenmeyer de 200 ml. Après avoir été filtrée au moyen d'un entonnoir, la solution est placée dans un Erienmeyer de 700 ml et on y ajoute 400 ml d'acétone. Lorsque la solution est refroidie, on obtient environ 3,8 g de chlorhydrate de dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome purifié, sous forme de cristaux en aiguilles de couleur rouge foncée. Le chlorhydrate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome est suffisamment soluble dans l'eau, vu que 12 mg de ce sel se dissolvent dans 1 ml d'eau à 200 C.
Par contre, il n'est que peu soluble dans l'alcool, et insoluble dans l'acétone, le chloroforme et le benzène. Son point de fusion est de 235-2400 C, température à laquelle il se décompose. Le chlorhydrate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome obtenu dans cet essai correspond à la formule C1Jf14O2NCl et contient:
calculé: C44,20o/o H5,190/o N25,780/o trouvé : C 44,200/o H 5,12 0/o N 24,73 0/o
Exemple IV
Une solution de 35 ml d'eau et de 0,23 g d'acide formique est placée dans un Erlenmeyer de 100 ml.
On dissout 1,18 g de dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome non purifié, à 50-600 C, dans la solution placée dans l'Erlenmeyer. On filtre la solution à travers un entonnoir. On introduit la solution filtrée dans un ballon de 200 mi et on y ajoute 100 ml d'alcool et 10ml d'éther. Lorsqu'on refroidit la solution à 00 C, le formiate du dérivé monoamine guanidine d'adrénochrome précipite sous forme cristalline. Le produit cristallin est séparé au moyen d'un entonnoir. On dissout le produit cristallin qu'on a séparé dans 15 ml d'eau placés dans un Erlenmeyer de 50ml, puis on ajoute 80 mi d'alcool et 10ml d'éther.
Lorsqu'on refroidit la solution, on obtient environ 0,95 g de formiate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome purifié, sous forme de cristaux en aiguilles de couleur orange. Le formiate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome est suffisamment soluble dans l'eau, vu que 15 mg de ce sel se dissolvent dans 1 mi d'eau à 200 C. Son point de fusion est de 2180 C, température à laquelle il se décompose. Le formiate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome obtenu dans cet exemple correspond à la formule C11H14N5O4 et contient:
calculé: C 46,97 0/o H 5,36 0/o N 24,900/o trouvé : C 47,13 0/ H 5,34 0/o N 25,000/o
Quelques autres sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome sont décrits dans le tableau 2 qui suit.
Comme on le voit dans ce tableau 2, les sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome sont en général suffisamment solubles dans l'eau. Ils sont beaucoup plus solubles dans l'eau que les dérivés habituels de l'adrénochrome, notamment que la monosemicarbazone d'adrénochrome, qui n'est soluble qu'à raison de 0,5 mg dans 1 ml d'eau. Par exemple, le méthane-sulfonate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome est soluble à raison de 110 mg dans 1 mi d'eau, comme indiqué au tableau 2.
Tableau 2
Sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome
Point de fusion Solubilité dans
Sel Aspect < 'C) I'eau à 20"C
Chlorhydrate rouge foncé 235-2400 12 mg/ml
cristaux en aiguilles
Sulfate brun 1850 10 mg/ml
cristaux en aiguilles
Formiate orange foncé 2180 15 mg/ml
cristaux en aiguilles
Acétate orange 174-1750 10 mg/ml
cristaux en aiguilles
Tartrate brun 1710 10 mg/ml
cristaux en aiguilles
Citrate rouge foncé 190-191O 15 mg/ml
cristaux en aiguilles
Ethylsulfate orange foncé 2080 10 mg/ml
cristaux en aiguilles
Méthane-sulfonate orange 2070 110 mg/ml
cristaux en aiguilles
Oxyméthane-sulfonate orange foncé 210 115 mg/ml
cristaux en aiguilles
Les sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome peuvent être utilisés de façon
satisfaisante dans des préparations. aqueuses de concentration élevée, notamment pour injections, grâce à leur grande solubilité dans l'eau. I1 n'est pas nécessaire d'ajouter un agent solubilisant à des préparations sous forme de solutions aqueuses de sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome préparés con formément à l'invention. Dès lors, ces sels ne soulèvent pas les problèmes. cliniques qu'on attribue à l'adjonction, en grande quantité, d'un agent solubilisant tel que par exemple le salicylate de sodium qui est nécessaire pour solubiliser dans l'eau une dose suffisante de monosemicarbazone d'adrénochrome, habituellement utilisée.
Le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome et ses sels sont supérieurs en ce qui concerne leur action hémostatique et stabilisatrice des capillaires, ce qui a été démontré clairement dans un grand nombre d'essais sur des animaux effectués par l'inventeur et ses nombreux collaborateurs. Les animaux présentent une. diminutionévidente de la durée d'hémorragie, 5 à 10 minutes après avoir reçu des in- jections intraveineuses de 0,1 à 0,4 mg/kg de sulfate ou de méthane-sulfonate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome, tandis qu'ils ne présentent pas de changement de la durée de coagulation du sang.
Des animaux pesant chacun 2 kg, ayant reçu des doses de 0,1 à 1 v de sel du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome par voie cutanée, sont visiblement protégés contre l'augmentation de la perméabilité capillaire provoquée par l'histamine. Une dose cutanée de 1 v de sel du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome inhibe l'action de l'hyaluronidase de façon significative chez des animaux pesant chacun 2 kg. Une dose de 0,1 à 0,4 mg/kg de sel du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome, injectée par voie intraveineuse, donne un effet préventif significatif quant à la formation de pétéchies provoquée par l'application d'une pression négative.
A la dose de 1 à 3 mg/kg, un sel du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome présente un effet protecteur bien déterminé contre la pneumorragie provoquée par une baisse de pression. On n'a pas noté de modifications. significatives de la pression sanguine, de la respiration et de-l'électrocardio- gramme lors de l'injection intraveineuse. de sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome. Lors d'autres essais avec des sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome, on a constaté un effet tonifiant sur la fatigue musculaire.
Le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome et ses sels ne présentent pour ainsi dire pas de toxicité. Lors d'esssais effectués sur des animaux, aucune souris pesant 10 g n'est morte, même après injection sous-cutanée de 8 mg de sulfate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome. La dose létale (LD50) du sulfate du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome injecté par voie intrapéritonéale à des souris est de 11,75 mg/10 g, alors que celle du méthane-sulfonate est de 18,4 mg/tO Il est dès lors évident que le dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome et ses sels solubles dans l'eau sont supérieurs quant à leur action hémostatique et stabilisatrice des capillaires, tout en présentant une toxicité négligeable.
L'inventeur possède une grande collection de rap ports cliniques concernant les sels du dérivé monoaminoguanidine d'adrénochrome, rapports qu'on peut résumer comme suit: en médecine interne, ils sont efficaces dans 90 O/o des cas de néphrite chronique, 67 0/o des cas de diathèses hémorragiques, 1000/o des cas de purpura et lO00/o des cas d'épistaxis, en dermatologie et urologie, ils sont t efficaces dans 100 O/o des cas d'eczéma aigu, 100 O/o des cas d'urticaire, lOO0/o des cas de dermatite, 100 oxo des cas d'épididyméctomie, 100 o/o des cas de tumorectomie, 105 /o des cas de néphrectomie et,
en obstétrique et gynécologie, ils sont efficaces dans 95 o/o des cas d'hémorragie fonctionnelle de l'utérus. et 90 /o des cas d'hémorragie post partum. En plus de tous ces cas, les rapports mentionnent qu'ils. ont de remarquables effets dans la prévention et le traitement de la proctorragie, de la ménorragie, de l'ulorragie, de la pneumorragie, de l'hémorragie de la rétine, de l'hémorragie gastro-intestinale, de l'hémorragie rénale idiopatique et de l'hémato-néphrophtisie. En outre, les rapports mentionnent qu'ils sont efficaces dans la prévention et le traitement d'hémorragies et d'épanchements consécutifs à des interventions chirurgicales, d'affections dues à la fragilité des capillaires, telles que les pernios, le purpura simple, érythème exsudatif multiforme, etc.
Les rapports ne mentionnent pas d'effets secondaires.
On peut déduire des rapports cliniques résumés ci-dessus que le dérivé monoaminoguanidine d'adore nochrome et ses sels sont excellents comme agents hémostatiques et stabilisateurs des capillaires et ne présentent que des effets secondaires négligeables.
Manufacturing process of the adrenochrome monoaminogualiidine derivative
The present invention relates to a process for the manufacture of the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome, which can be converted into water-soluble salts.
Adrenochrome and its derivatives exhibit excellent hemostatic and capillary stabilizing properties. It is believed that different factors condition the hemostatic action, factors that are generally classified into two groups: one is the capillary factors and the. other blood clotting factors. For example, capillary permeability and the reaction of capillary vessels to. blood pressure belong to the first group, while the formation of thromboplastin and its transformation into prothrombin and fibrinogen belong to the second group.
A good number of fundamental experiments have shown that adrenochromium and its derivatives shorten the duration of bleeding and that they have a remarkable inhibitory action against the increase in capillary permeability, while they do not decrease. blood clotting time. Therefore, it can be said, also taking into account other results of fundamental experiments, that adrenochrome and its derivatives exert an influence not on the coagulation factors of the blood, but on the capillary factors, although there have been some attempts to show that they influence one and the other of the two groups of factors.
It has also been shown, through many fundamental experiments, that adrenoch. Rome at a dose of 5 to 10 mg per kg, or adrenochrome derivatives at a dose of 100 to 300 mg per kg, show no toxicity at all and that even a dose of adrenochrome derivative corresponding to the maximum of its solubility in water does not produce side effects when administered intravenously, intraperitoneally, subcutaneously or orally. In other words, adrenochrome and its derivatives exhibit virtually no toxicity, which all the more increases the excellence of their pharmacological effects.
One of the common adrenochrome derivatives most often used in hemostatic and capillary stabilizing preparations is adrenochrome monosemicarbazone, the structural formula of which is as follows:
EMI1.1
There is currently an increased demand for this compound, because of its good hemostatic and capillary stabilizing effects.
In practice, however, the adrenochrome monosemicarbazone cannot be used satisfactorily in. aqueous preparations of high concentration, especially for injections, because it is not sufficiently soluble in water, since only 0.5 mg of this compound dissolves in 1 ml of water at 200 C. This is why it is necessary to add a solubilizing agent or to apply other special methods to obtain aqueous preparations of adrenochrome monosemicarbazone, especially for injections, that is, preparations containing more than 5 mg of this composed per ml of water. However, the addition of solubilizers in large amounts raises some clinical problems.
For example, it is common practice to add 500 mg of sodium salicylate per 100 ml for the purpose of solubilizing the adrenochrome monosemicarbazone in preparations for injection. Such a high dose of sodium salicylate causes side effects, because it stimulates the adrenal bark, because it accelerates the action of hyaluridonase and because it also exhibits other pharmacological actions.
The object of the present invention is the manufacture of the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome, which can be converted into salts which are so soluble in water that they can be made into aqueous preparations of high concentration, in particular for injections, which are satisfactory.
The process according to the invention is characterized in that a condensation reaction is carried out with elimination of water, this reaction being carried out by adding to an aqueous solution of adrenochrome an aminoguanidine salt as well as an appropriate amount of a mineral acid, and in that the solution obtained is made alkaline by means of ammonia or caustic soda in order to precipitate a crystalline product of orange color, said mineral acid exerting a catalytic action to accelerate said reaction between said solution aqueous adrenochrome and said aminoguanidine salt.
Several embodiments of the method will be described below by way of example.
The monoarninoguanidine derivative of adrenochrome is synthesized by a condensation reaction, with elimination of water, between adrenochrome and aminoguanidine. Adrenochrome corresponds to the following formula:
EMI2.1
Aminoguanidine corresponds to the following formula:
EMI2.2
Therefore, the monoaminoguanidine adrenochrome derivative synthesized by condensation, with elimination of water, of these two compounds corresponds to the following formula:
EMI2.3
It is well known that aminoguanidine reacts with an aromatic ketone or an aldehyde and forms an easily crystallizable product.
In the process described, it is therefore the ketone group at position 6 of the adrenochrome that is reacted with the group
NH2 from aminoguanidine. In practice, an aqueous adrenochrome solution is added with an aminoguanidine salt, usually nitrate, a little acid is also added as a catalyst, for example nitric acid, and the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome crystallizes as orange crystals when the solution is made alkaline with ammonia or caustic soda. The orange-colored crystals are then dissolved in an aqueous solution of acetic acid and the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome crystallizes in the purified state when this solution is alkalinized by means of caustic soda.
Aminoguanidine nitrate can be prepared by a usual method. For example, it can be prepared by reacting nitric acid with aminoguanidine bicarbonate, which itself can be prepared by reduction of nitroguanidine using acetic acid and zinc.
Adrenochrome can also be prepared by any usual method. For example, it can be obtained by oxidizing adrenaline with silver oxide or potassium ferricyanide.
In the reaction of adrenochrome with aminoguanidine nitrate, the yield of monoaminoguanidine adrenochrome derivative depends on the condensing agent used and on the amount of the latter.
Table 1
Relationship between derivative yield
adrenochrome monoaminoguanidine
and the condensing agent used
Yield in
monoanino derivative- monoanililo derivative
guaninne
adrenochrome
Bicarbonate of quantity equals a small molar sodium quantity
Equal amount hydroxide 39 mg molar sodium
Nitric acid 0.05 ml 380 mg
Nitric acid 0.20 ml 960 mg
For example, if we start from 1 g of adrenochrome reacted, the relationship between the weight of the monoaminoguanidine adrenochrome derivative obtained and the condensing agent used is shown in Table 1 above.
A better yield is obtained on the acid side than on the weakly alkaline side, because a mineral acid such as nitric acid exerts a catalytic action to accelerate the reaction between adrenochrome and aminoguanidine nitrate.
However, the addition of too much acid is not indicated, because it breaks down the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome form.
Example I
A 200 ml round three-necked flask fitted with a stirrer is introduced into a solution of 0.1 g of adrenochrome in 50 ml of water. A mixture of 0.75 g of aminoguanidine nitrate, 0.2 ml of nitric acid and 5 ml of water is introduced into the aqueous solution of adfenochrome, through a funnel attached to the side of the flask, the latter being subjected to agitation. About 30 minutes later, 20 ml of 20 O / o aqueous ammonia are added, then the monoaminoguanidine adrenochrome derivative precipitates in the form of orange crystals. The crystalline product which has precipitated is isolated using a Büchner funnel and washed with water.
The washed crystalline product is dissolved in 10 ml of a 3 / e aqueous solution of acetic acid. After having been filtered, the solution is alkalinized by means of 15 ml of aqueous solution of caustic soda at 10 0 / o, following which one obtains approximately 0.9 g of purified monoaminoguanidine derivative of adrenochrome, in the form of crystals. in needles, orange color.
The product crystallized in needles is soluble in hydrochloric acid. It is only slightly soluble in water, alcohol and acetone. Its melting point is 195-2000 C, at which temperature it decomposes.
Example II
A solution of 34.1 g of potassium ferricyanide, 11.2 g of sodium bicarbonate and 80 ml of water is introduced into a 200 ml beaker. Using a funnel, a mixture of 5 g of adrenaline and 50 ml of a 3 O / o aqueous solution of acetic acid is added to the solution contained in the 200 ml beaker, the latter being subjected to restlessness.
One minute later, a mixture of 1 ml of 3 / o aqueous acetic acid solution, 3.8 g of aminoguanidine nitrate and 20 ml of water is added in the same way. 10 minutes later, the solution is basified by means of an aqueous solution of caustic soda at 10 0 / o; it then precipitates approximately 5.1 g of adrenochrome monoaminoguanidine derivative, in the form of orange crystals, which are purified in exactly the same manner as that which has just been described in the preceding example.
The purified product is in the form of orange-colored needle crystals, soluble in hydrochloric acid, sparingly soluble in water, alcohol and acetone; it melts at 195-2000 C, the temperature at which it decomposes.
The addition of mineral acid, in amounts such as those indicated in the two examples which have just been described, does not decompose the monoaminoguanidine adrenochrome derivative, but on the contrary makes it possible to obtain a good yield thereof. It is not necessary to heat in the two examples which have just been described.
The monoaminoguanidine adrenochrome derivative can be converted into salts with a view to applying it in aqueous form, in particular by injection, because the salts of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative are sufficiently soluble in water. In this case, the adrenochrome monoaminoguanidine derivative is dissolved. in dilute aqueous acid, then the solution is added with an organic solvent soluble in water, as a result of which a salt of the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome in crystalline state is obtained. The crystalline product is dissolved in water and the solution added with an organic solvent. When the solution is cooled, the salt of the monoaminoguanidine adrenochrome derivative is obtained in the form of purified crystals.
The acid used in order to dissolve the adrenochrome mo noaminoguanidine derivative during the salification reaction can be one of the mineral acids, organic carboxylic acids and organic sulfonic acids which are generally represented by the formulas HX, R - COOH and R - SO5H. It is not indicated to use too much acid, because it breaks down the adrenochrome monoaminoguanidine derivative.
The organic solvent to be used in the salification process can be any of the following: methyl alcohol, ethyl alcohol, acetone, mixtures of alcohol and ether, and mixtures of acetone and ether.
Example III
A solution of 30 ml of water and 15 ml of 37 O / o hydrochloric acid is introduced into a 200 ml Erlenmeyer flask. 5.1 g of unpurified mono aminoguanidine adrenochrome derivative are dissolved at 40500 ° C. in a solution placed in the Erlenmeyor.
The solution is filtered through a funnel. The filtered solution is placed in a 1000 ml Erlenmeyer flask and 450 ml of acetone is added thereto. When the solution is cooled, the hydrochloride of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative precipitates in crystalline form.
The crystalline product is separated by means of a Büchner funnel, washed with acetone and dried in air. The air-dried crystalline product is dissolved in 100 ml of water in a 200 ml Erlenmeyer flask. After having been filtered through a funnel, the solution is placed in a 700 ml Erienmeyer and 400 ml of acetone is added thereto. When the solution is cooled, about 3.8 g of purified adrenochrome monoaminoguanidine derivative hydrochloride is obtained in the form of dark red needle crystals. The hydrochloride of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative is sufficiently soluble in water, since 12 mg of this salt dissolves in 1 ml of water at 200 C.
On the other hand, it is only slightly soluble in alcohol, and insoluble in acetone, chloroform and benzene. Its melting point is 235-2400 C, at which temperature it decomposes. The hydrochloride of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative obtained in this test corresponds to the formula C1Jf14O2NCl and contains:
calculated: C44.20o / o H5.190 / o N25.780 / o Found: C 44.200 / o H 5.12 0 / o N 24.73 0 / o
Example IV
A solution of 35 ml of water and 0.23 g of formic acid is placed in a 100 ml Erlenmeyer flask.
1.18 g of unpurified adrenochrome monoaminoguanidine derivative are dissolved at 50-600 ° C. in the solution placed in the Erlenmeyer flask. The solution is filtered through a funnel. The filtered solution is introduced into a 200 ml flask and 100 ml of alcohol and 10 ml of ether are added thereto. When the solution is cooled to 00 ° C., the formate of the adrenochrome monoamine guanidine derivative precipitates in crystalline form. The crystalline product is separated by means of a funnel. The crystalline product is dissolved and separated in 15 ml of water placed in a 50 ml Erlenmeyer flask, then 80 ml of alcohol and 10 ml of ether are added.
When the solution is cooled, about 0.95 g of purified adrenochrome monoaminoguanidine derivative formate is obtained in the form of orange needle crystals. The formate of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative is sufficiently soluble in water, since 15 mg of this salt dissolves in 1 ml of water at 200 C. Its melting point is 2180 C, the temperature at which it decomposes. . The formate of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative obtained in this example corresponds to the formula C11H14N5O4 and contains:
calculated: C 46.97 0 / o H 5.36 0 / o N 24.900 / o Found: C 47.13 0 / H 5.34 0 / o N 25.000 / o
Some other salts of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative are described in Table 2 below.
As can be seen in this Table 2, the salts of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative are in general sufficiently soluble in water. They are much more soluble in water than the usual adrenochrome derivatives, in particular than adrenochrome monosemicarbazone, which is only soluble at a rate of 0.5 mg in 1 ml of water. For example, the methanesulfonate of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative is soluble at 110 mg in 1 ml of water, as shown in Table 2.
Table 2
Salts of adrenochrome monoaminoguanidine derivative
Melting point Solubility in
Salt Appearance <'C) water at 20 "C
Dark red hydrochloride 235-2400 12 mg / ml
needle crystals
Brown sulphate 1850 10 mg / ml
needle crystals
Formate dark orange 2180 15 mg / ml
needle crystals
Orange acetate 174-1750 10 mg / ml
needle crystals
Brown tartrate 1710 10 mg / ml
needle crystals
Dark red citrate 190-191O 15 mg / ml
needle crystals
Ethyl sulphate dark orange 2080 10 mg / ml
needle crystals
Methanesulfonate orange 2070 110 mg / ml
needle crystals
Oxymethanesulfonate dark orange 210 115 mg / ml
needle crystals
Salts of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative can be used
satisfactory in preparations. aqueous solutions of high concentration, in particular for injections, thanks to their high solubility in water. It is not necessary to add a solubilizing agent to preparations in the form of aqueous solutions of salts of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative prepared in accordance with the invention. Therefore, these salts do not raise the problems. clinical studies attributed to the addition, in large quantities, of a solubilizing agent such as for example sodium salicylate which is necessary to dissolve in water a sufficient dose of adrenochrome monosemicarbazone, usually used.
The adrenochrome monoaminoguanidine derivative and its salts are superior in their hemostatic and capillary stabilizing action, which has been clearly demonstrated in a large number of animal tests carried out by the inventor and his numerous collaborators. The animals present a. obvious reduction in the duration of bleeding, 5 to 10 minutes after having received intravenous injections of 0.1 to 0.4 mg / kg of sulphate or methanesulphonate of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative, whereas they do not show no change in the duration of blood clotting.
Animals weighing 2 kg each, having received doses of 0.1 to 1 v of salt of the monoaminoguanidine adrenochrome derivative by the cutaneous route, are visibly protected against the increase in capillary permeability caused by histamine. A dermal dose of 1 v of adrenochrome monoaminoguanidine derivative salt significantly inhibits the action of hyaluronidase in animals weighing 2 kg each. A dose of 0.1 to 0.4 mg / kg of salt of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative, injected intravenously, gives a significant preventive effect with regard to the formation of petechiae caused by the application of negative pressure.
At a dose of 1 to 3 mg / kg, a salt of the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome exhibits a well-defined protective effect against pneumorrhage caused by a drop in pressure. No changes were noted. of blood pressure, respiration and the electrocardio- gram during intravenous injection. salts of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative. In other tests with salts of the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome, a toning effect on muscle fatigue was observed.
The adrenochrome monoaminoguanidine derivative and its salts exhibit virtually no toxicity. In animal testing, no mice weighing 10 g died, even after subcutaneous injection of 8 mg of sulfate of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative. The lethal dose (LD50) of the sulfate of the adrenochrome monoaminoguanidine derivative injected intraperitoneally into mice is 11.75 mg / 10 g, while that of methanesulfonate is 18.4 mg / tO It is therefore It is evident that the adrenochrome monoaminoguanidine derivative and its water-soluble salts are superior in their haemostatic and capillary stabilizing action, while exhibiting negligible toxicity.
The inventor has a large collection of clinical reports concerning the salts of the monoaminoguanidine derivative of adrenochrome, reports which can be summarized as follows: in internal medicine, they are effective in 90% of cases of chronic nephritis, 67%. / o cases of hemorrhagic diatheses, 1000 / o cases of purpura and lO00 / o cases of epistaxis, in dermatology and urology, they are t effective in 100 O / o of cases of acute eczema, 100 O / o cases of urticaria, lOO0 / o cases of dermatitis, 100% of cases of epididymectomy, 100% of cases of lumpectomy, 105 / o of cases of nephrectomy and,
in obstetrics and gynecology, they are effective in 95% of cases of functional uterine hemorrhage. and 90 / o cases of postpartum hemorrhage. In addition to all these cases, reports mention that they. have remarkable effects in the prevention and treatment of proctorrhagia, menorrhagia, ulorrhagia, pneumorrhage, retinal hemorrhage, gastrointestinal hemorrhage, idiopatic renal hemorrhage and hemato-nephrophthisia. In addition, reports mention that they are effective in the prevention and treatment of hemorrhages and effusions following surgical procedures, conditions due to the fragility of capillaries, such as pernios, simple purpura, erythema multifaceted exudative, etc.
Reports do not mention any side effects.
It can be inferred from the clinical reports summarized above that adore nochrome monoaminoguanidine derivative and its salts are excellent as haemostatic agents and capillary stabilizers and exhibit only negligible side effects.