CA3065480A1 - Procede de production d'huiles et de tourteaux degraisses par extraction solide/liquide - Google Patents

Abstract

Le présente invention porte sur une procédé de production d'une huile et d'un tourteau dégraissé par extraction solide/liquide. Le procédé comprend une étape d'extraction solide/liquide mettant en oeuvre un solvant comprenant du 2-méthyloxolane et de l'eau.

Description

I
Description Titre : Procédé de production d'huiles et de tourteaux dégraissés par extraction solide/liquide Domaine technique [1] L'invention relève du domaine de la production d'huiles et de tourteaux dégraissés à partir d'un substrat biologique par un procédé d'extraction solide/liquide.
Contexte de l'invention

[2] Les huiles tiennent une place importante dans l'industrie alimentaire, pharmaceutique, nutraceutique et cosmétique. Depuis peu l'attention s'est focalisée sur la production d'huiles riches en polyphénols. En effet, selon des études récentes, les huiles riches en polyphénols auraient des effets bénéfiques sur la santé, en particulier sur la peau et contre les maladies cardiovasculaires et les cancers. Les développements industriels récents se sont donc portés sur la production d'huiles riches en polyphénols.
Pl Il existe deux grandes catégories connues de procédés de production des huiles, le procédé mécanique qui permet d'obtenir une huile vierge et le procédé par extraction solide/liquide permettant de produire une huile à partir d'un substrat solide.
Classiquement, le procédé par extraction solide/liquide comprend une étape d'extraction solide/liquide mettant en jeu un solvant pour obtenir une fraction liquide comprenant une huile et le solvant.
[4] Les deux procédés mécanique et d'extraction solide/liquide, peuvent être combinés, à savoir un premier procédé mécanique suivi d'une extraction solide liquide, le solide étant constitué par le résidu solide provenant du procédé
mécanique.
[5] Les résidus solides, aussi appelés tourteaux, sont principalement utilisés en alimentation animale, et de plus en plus en alimentation humaine, principalement comme supplément protéique, mais aussi comme source d'énergie métabolisable.

[6] Il est important que ces tourteaux soient dégraissés car cela favorise leur conservation dans le temps (limitation du risque de rancissement) et facilite l'isolement des protéines pour l'alimentation animale. De plus la matière grasse perturbe la digestion des animaux, en particulier des bovins.
(71 Actuellement, l'hexane est le solvant le plus utilisé dans le procédé
d'extraction solide/liquide car il présente des propriétés avantageuses. En effet, l'hexane permet une extraction à haut rendement de l'huile (> 97%) et permet de laisser moins de 3% d'huile résiduelle dans le substrat solide, ce qui évite que ce dernier ne rancisse. L'hexane est facile à séparer de l'huile extraite, il présente un point d'ébullition adapté (i.e. assez élevé pour limiter les pertes durant l'extraction mais assez faible pour limiter la consommation d'énergie durant sa séparation avec l'huile extraite et durant son recyclage), il est stable et présente une bonne sélectivité
en lipide.
Cependant l'hexane présente des inconvénients importants. Il est d'origine pétrolière, il est neurotoxique et est classé comme toxique pour la reproduction de catégorie 2. Il est également toxique pour l'environnement aquatique de catégorie 2.
[9] De plus des analyses sur les huiles obtenues par extraction solide/liquide avec l'hexane ont mis en évidence que le procédé mettant en oeuvre l'hexane ne permet pas de produire une huile riche en polyphénol.
[10] Des solvants alternatifs à l'hexane ont été testés. Par exemple, l'article d'Anne-Gaélle Sicaire et al. "2-Methyltetrahydrofuran: Main Properties, Productions Processes, and Application in Extraction of Natural Products" aux pages 253-268 de "Alternative Solvents for Natural Products Extraction" décrit l'extraction solide/liquide de bourgeons de cassis avec du 2-méthyloxolane anhydre pour obtenir des colorants et des arômes.
[11] La présente invention vise donc à fournir un procédé industriel d'extraction solide/liquide qui permet de produire une huile brute riche en polyphénol et/ou un tourteau dégraissé.

3 [12] De façon surprenante, la Demanderesse a mis au point un procédé qui répond à ce besoin.
Exposé de l'invention [13] Selon un premier aspect, l'invention porte sur un procédé de production d'une huile brute riche en polyphénol à partir d'un substrat biologique comprenant une étape de:
a) extraction solide/liquide du substrat biologique avec un solvant pour obtenir d'une part une fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant et d'autre part un résidu solide, caractérisé en ce que, le solvant comprend du 2-méthyloxolane et de l'eau, et le pourcentage massique d'eau dans le solvant lors de l'étape a) d'extraction est de 0,3% à 20%.
[14] Au sens de la présente invention, on entend par "extraction solide/liquide"
l'obtention d'une fraction liquide et d'un résidu solide à partir d'un substrat biologique solide en utilisant un solvant liquide comme solvant d'extraction. Typiquement l'extraction solide/liquide peut être réalisée par décoction, infusion, digestion, percolation, lixiviation ou macération. Une étape d'extraction liquide/liquide n'est pas une étape d'extraction solide/liquide au sens de la présente invention car elle ne met pas en oeuvre de substrat biologique solide ; de plus les caractéristiques physico-chimiques mises en jeu dans une étape d'extraction solide/liquide et dans une étape d'extraction liquide/liquide sont différents.
[15] Au sens de la présente invention, on entend par "huile brute" une huile non raffinée, i.e. n'ayant pas subie d'étape de raffinage chimique ou mécanique, aussi appelé physique, après son extraction par un procédé solide/liquide.
[16] De façon avantageuse, le procédé selon l'invention permet de produire une huile brute plus riche en polyphénol que l'huile brute produite par les procédés mettant en uvre de l'hexane ou du 2-méthyloxolane anhydre.

4 [17] Au sens de la présente invention, on entend par "huile brute riche en polyphénol" une huile brute comprenant un ou plusieurs polyphénols et dont la concentration massique en polyphénols est supérieure ou égale à 100 ppm, en particulier de 320 ppm à 2000 ppm, plus particulièrement de 350 ppm à 1500 ppm, plus particulièrement encore de 400 ppm à 1200 ppm.
[18] Au sens de la présente invention, on entend par "polyphénol" une classe de molécules caractérisées par la présence de plusieurs groupes phénoliques arrangés en structures complexes.
[19] L'huile brute peut également comprendre un tocophérol.
[20] Les tocophérols présentent des propriétés anti-oxydantes qui permettent de protéger, avantageusement, l'huile brute de l'oxydation et donc du rancissement. De plus les tocophérols ont des effets bénéfiques sur la santé, en particulier en prévention contre les maladies cardiovasculaires. L'huile brute comprenant un tocophérol peut donc présenter des effets bénéfiques sur la santé, en particulier en prévention contre les maladies cardiovasculaires.
[21] La concentration massique en tocophérol dans l'huile brute peut être supérieure ou égale à 350 ppm, en particulier de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm. Pour un même substrat biologique, cette concentration massique en tocophérol est supérieure à la concentration massique en tocophérol dans une huile brute produite par des procédés mettant en oeuvre de l'hexane ou du 2-méthyloxolane anhydre.
[22] Selon un mode de réalisation très particulier, la concentration massique en tocophérol dans l'huile brute peut être supérieure ou égale à 350 ppm, en particulier de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm, à l'exception de l'huile brute produite à partir du substrat biologique qui est le colza dont la concentration massique en tocophérol dans l'huile brute peut être de 825 ppm à 10000 ppm, plus

5 particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm.
[23] L'huile brute peut également comprendre du 2-méthyloxolane.
[24] Typiquement la concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'huile brute peut être de 0,5 ppm à 500 ppm, en particulier de 50 ppm à 300 ppm.
[25] Le procédé selon l'invention met en oeuvre un solvant comprenant du 2-méthyloxolane (n CAS 96-47-9) et de l'eau. De façon avantageuse, le 2-méthyloxolane n'est pas classé toxique pour l'environnement et est d'origine biosourcée car sa matière première est typiquement issue de bagasse de canne à

sucre ou de rafles de maïs. De plus le 2-méthyloxolane est non toxique en ingestion pour les quantités envisagées. En effet, un test publié de 3 mois en ingestion sur des rats a montré une dose dans effet indésirable observé ("NOAEL - Non Observed Adverse Effect Limit", suivant la terminologie anglaise) de 250 mg/kg poids corporel/jour contre 23 mg/kg poids corporel/jour pour l'hexane (Parris et al. Regulatory Toxicology and Pharmacology 87 (2017) 54-63 et Avis du comité scientifique européen pour l'alimentation publié le 17 juin 1994).
[26] Selon un mode réalisation particulier, le pourcentage massique d'eau dans le solvant est de 1% à 15%, plus particulièrement de 4% à 6% lors de l'étape a) d'extraction.
[27] Au sens de la présente invention, "le pourcentage massique d'eau dans le solvant" correspond à la masse d'eau dans le solvant divisée par la masse totale du solvant à l'entrée de l'extracteur dans lequel l'étape a) d'extraction est réalisée.
Typiquement, le pourcentage massique d'eau dans le solvant peut être déterminé
par la méthode Karl Fischer.
[28] Sous certaines conditions, en particulier dans les plages de pourcentage massique d'eau dans le solvant indiquées ci-dessus, le 2-méthyloxolane et l'eau peuvent former des mélanges liquides homogènes.

6 [29] En effet un azéotrope comprenant 89,4% en poids de 2-méthyloxolane et 10,6% en poids d'eau se forme à 71 C. De plus l'eau est partiellement soluble dans le 2-méthyloxolane, la solubilité de l'eau dans le 2-méthyloxolane étant de 4,1%
en poids à 20 C et de 4,6% en poids à 60 C.
[30] De façon avantageuse, la mise en uvre du procédé selon l'invention est plus simple lorsque que le solvant est un mélange liquide homogène que lorsque le solvant est un mélange liquide biphasique. Ceci est typiquement le cas pour l'étape a) d'extraction du procédé selon l'invention.
[31] Au sens de la présente invention, on entend par "substrat biologique"
une matière solide choisie parmi un végétal, une algue, un microorganisme et leurs mélanges, en particulier un végétal.
[32] Lorsque le substrat biologique est un végétal alors l'huile brute obtenue selon le procédé selon l'invention est appelée huile brute végétale.
[33] Par exemple le végétal peut être un oléagineux, un protéagineux ou leur mélange.
[34] Comme oléagineux, on peut citer le colza, le tournesol, le soja, l'arachide, le sésame, la noix, l'amande, le coton, le lin ou leurs mélanges, en particulier le colza, le tournesol, le soja ou leurs mélanges.
[35] Des exemples de protéagineux sont les pois, les fèves, le lupin et leur mélange.
[36] Typiquement le substrat biologique peut être un végétal choisi parmi l'amande, l'amarante, l'arachide, l'argan, l'argousier, l'anacardier, l'avocat, l'avoine, la bourrache, la carthame, la cameline, la carotte, le cacao, le cajou, le chanvre, le colza, le coprah, la courge, le coton, le croton, le cynorrhodon, la figue, la figue de barbarie, la grenade, le houblon, l'illipé, le jojoba, le karité, le lin, le lupin, le maïs, le noisetier, le noyer, le cocotier, l'oeillette, l'olive, l'onagre, le palmiste, le paprika, le pécan, la pistache, le poivre, le ricin, le riz, le rosier musqué, le sésame, le soja, la tagète, le tournesol, le Calophyllum inophyllum, le madhuca, le noyer du Queensland, la

7 framboise, le cassis, le melon, le raisin, la tomate, le baobab, le babassu, la canneberge, le chia, la citrouille, la moutarde, le neem, le Nigella Sativa, le niger, le pavot, le Perilla, le Plukenetia volubili, le potiron, le rocou, le Taramira, l'abricot, la prune, la pêche, le blé, en particulier le soja, le colza, le tournesol, le baobab, le maïs, l'arachide, le cocotier, le palmiste, le coton, tout particulièrement le soja, le colza, le tournesol, le baobab et leurs mélanges.
[37] Dans le cas où le substrat biologique est un végétal, l'étape a) d'extraction peut être effectué à partir du végétal en entier ou d'une ou plusieurs parties du végétal, et en particulier une partie choisie parmi la racine, la tige, l'écorce, la fleur, la graine, le germe, la feuille, le son, le fruit, la noix, les pépins, le noyau.
[38] En fonction du végétal, l'homme du métier saura quelle partie choisir.
[39] Typiquement le substrat biologique peut être choisi parmi le son d'avoine, les pépins de framboise, les pépins de cassis, les pépins de grenade, les pépins de melon, les pépins de raisin, les pépins de tomate, les graines de baobab, les graines de babassu, les graines de canneberge, les graines de chia, les graines de maïs, les graines de coton, les graines d'arachide, les graines de colza, les graines de courge, les graines de madhuca, les graines de moutarde, les graines de neem, les graines de Nigella Sativa, les graines de niger, les graines de pavot, les graines de Perilla, les graines de Plukenetia volubili, les graines de potiron, les graines de rocou, le son de riz, les graines de soja, les graines de Taramira, les graines de tournesol, les noyaux d'abricot, les noyaux de prune, les noyaux de pêche, le fruit du Calophyllum inophyllum, la noix, la noix de cajou, la noix de macadamia, la noix de coco, la noix de pécan , en particulier les graines de soja, les graines de colza, les graines de tournesol, les graines de baobab et leurs mélanges.
[40] Selon un mode de réalisation très particulier le substrat biologique est choisi parmi les graines de soja, les graines de colza, les graines de tournesol et leurs mélanges.
[41] Lorsque le substrat biologique est une algue, il peut être choisi parmi les genres Arthrospira, Haematococcus, Dunaliella, Chlorella, Nannochloropsis,

8 Schizochytrium, Crypthecodinium, Culindrotheca, lsochrysis, Nannochloris, Nitzchia, Phaeodactylum, Chaetoceros et leurs mélanges.
[42] Lorsque le substrat biologique est un microorganisme choisi parmi une levure, une moisissure, une bactérie, un champignon ou leur mélange. La levure peut typiquement être choisie parmi les genres Cryptococcus, Candida, Lipomyces, Rhodotoru la, Saccharomyces, Trichosporon, Yarrowia et leurs mélanges.
[43] Typiquement, le substrat biologique peut avoir subi, avant l'étape a) d'extraction, une étape préalable de préparation. Cette étape de préparation peut être, par exemple, un aplatissage aussi appelé floconnage pour obtenir un flocon, un broyage, une extraction mécanique pour obtenir une écaille, une pression, une centrifugation, une cuisson, une lyophilisation, une lyse enzymatique, une lyse mécanique, une macération, une trituration pour obtenir un tourteau, un traitement par ultra-sons, un traitement par micro-onde, un séchage ou leurs mélanges ou toute combinaison des dites préparations.
[44] L'étape a) d'extraction peut typiquement être réalisée en lot ("batch"
en anglais) ou en continu.
[45] Lorsque l'étape a) d'extraction est réalisée en lot, le substrat biologique et le solvant sont avantageusement mélangés dans un extracteur, tel qu'un extracteur à lit fixe ou un extracteur à charge dispersée. Lorsque l'étape a) d'extraction est réalisée en lot le rapport massique substrat biologique:solvant peut être de 1:1 à
1:50, en particulier de 1:2 à 1:20, plus particulièrement de 1:5 à 1:10.
[46] Lorsque l'étape a) d'extraction est réalisée en continu, le substrat biologique arrive, de façon continue, dans un extracteur en lit mobile, tels que les extracteurs à
compartiments mobiles, à panier mobiles, à chaine de convoyage ou à bande transporteuse. Le solvant est mis en contact avec le substrat biologique par circulation ou percolation, typiquement à contre-courant du substrat biologique.
Lorsque l'étape a) d'extraction est réalisée en continu le rapport massique substrat biologique:solvant peut avantageusement être de 1:0,5 à 1:5, en particulier de 1:0,75 à 1:3, plus particulièrement de 1:1 à 1:1,3.

9 [47] Typiquement l'étape a) d'extraction est avantageusement réalisée à
une température de 20 C à 100 C, en particulier de 40 C à 80 C, plus particulièrement de 55 C à 75 C. De façon avantageuse, l'étape a) d'extraction est facilitée dans ces plages de température car elles sont compatibles avec le point d'ébullition de l'azéotrope 2-méthyloxolane/eau qui est de 71 C.
[48] Selon un mode de réalisation, le procédé selon l'invention peut comprendre en outre une étape b) de récupération de la fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant.
[49] Typiquement, le procédé selon l'invention peut comprendre, en plus de l'étape a) d'extraction, les étapes suivantes :
b) récupération de la fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant, et c) séparation de l'huile brute et du solvant de la fraction liquide pour récupérer d'une part l'huile brute et d'autre part le solvant.
[50] L'étape b) de récupération de la fraction liquide permet de séparer la fraction liquide du résidu solide. Typiquement cette étape b) peut être réalisée par filtration.
[51] L'étape c) de séparation peut être réalisée par extraction liquide/liquide, par entrainement à la vapeur d'eau, par chauffage, par distillation ou leur combinaison, en particulier par entrainement à la vapeur d'eau, par distillation ou leurs combinaisons, tout particulièrement par distillation.
[52] Typiquement l'étape c) de séparation peut être réalisée en lot ou en continu.
[53] Les étapes b) et c) sont des étapes classiques des procédés de production des huiles par extraction solide/liquide. L'homme du métier saura adapter les conditions opératoires de ces étapes pour les réaliser.
[54] Typiquement, le procédé selon l'invention peut comprendre, après l'étape c), une étape d) de recyclage dans l'étape a) d'extraction de tout ou partie du solvant récupéré à la fin de l'étape c).

10 [55] De façon avantageuse, recycler le solvant récupéré à la fin de l'étape c) permet de diminuer le coût économique en matière première du procédé selon l'invention et donc d'améliorer sa viabilité industrielle.
[56] Selon une première variante, tout ou partie du solvant récupéré à la fin de l'étape c) subit, avant l'étape d) de recyclage, une étape d') de réduction du pourcentage massique d'eau. Cette première variante est particulièrement avantageuse lorsque le pourcentage massique d'eau dans le solvant récupéré à
la fin de l'étape c) est supérieur à 20%, en particulier supérieur à 15%, tout particulièrement supérieur à 6%.
[57] Selon une seconde variante, tout ou partie du solvant récupéré à la fin de l'étape c) est directement recyclé dans l'étape a) d'extraction lors de l'étape d) de recyclage. Ainsi dans cette seconde variante, le procédé ne comprend pas, entre l'étape c) et l'étape d), d'étape d') de réduction du pourcentage massique d'eau. Cette seconde variante est particulièrement avantageuse lorsque le pourcentage massique d'eau dans le solvant récupéré à la fin de l'étape c) est de 0,3% à 20%, en particulier de 1% à 15%, plus particulièrement de 4% à 6%.
[58] Selon un mode de réalisation, l'étape d') de réduction du pourcentage massique d'eau peut être réalisée par condensation, par décantation, par distillation ou leurs combinaisons, en particulier par condensation, par décantation ou leur combinaison, plus particulièrement par décantation suivie d'une distillation.
[59] Pour faciliter le recyclage du solvant, il peut être avantageux de former l'azéotrope comprenant 89,4% en poids de 2-méthyloxolane et 10.6% en poids d'eau à 71 C lors de la condensation. Dans ce cas le pourcentage massique d'eau dans le solvant peut être de 1% à 25%, en particulier de 5% à 20% et plus particulièrement de 10% à 12% après la condensation. Il peut être également avantageux de solubiliser l'eau dans le 2-méthyloxolane directement lors de la condensation ou de l'éventuelle décantation, la solubilité de l'eau dans le 2-méthyloxolane étant de 4,1%
à 20 C et de 4,6% à 60 C. Dans ce cas le pourcentage massique d'eau dans le

11 solvant peut être de 0,3% à 20%, en particulier de 1% à 15%, plus particulièrement de 4% à 6% après la condensation ou de l'éventuelle décantation.
[60] L'homme du métier saura adapter les conditions opératoires de la condensation pour former l'azéotrope et/ou solubiliser l'eau dans le 2-méthyloxolane.
[61] L'homme du métier saura également adapter les conditions opératoires de l'éventuelle décantation pour solubiliser l'eau dans le 2-méthyloxolane.
[62] Selon un mode de réalisation spécifique, l'étape d') de réduction du pourcentage massique d'eau peut être réalisée par condensation suivie d'une décantation et:
- le pourcentage massique d'eau dans le solvant après la condensation est de 1% à 25%, en particulier de 5% à 20% et plus particulièrement de 10% à 12%, et - le pourcentage massique d'eau dans le solvant après la décantation est de 0,3% à 20%, en particulier de 1% à 15%, plus particulièrement de 4% à 6%.
[63] L'huile brute peut comprendre des impuretés telles que des gommes, des cires, des acides gras libres, des pigments, des traces métalliques, des composés odorants volatils et leurs mélanges. L'huile brute peut donc subir une étape de raffinage pour éliminer au moins une de ces impuretés de l'huile brute et récupérer une huile raffinée. De façon avantageuse, cette huile raffinée peut être adaptée, par exemple, à un usage alimentaire, à un usage cosmétique, un usage pharmaceutique et/ou un usage technique.
[64] Un mode de réalisation de l'invention est un procédé de production d'une huile raffinée comprenant une étape de raffinage de l'huile brute récupérée lors de de l'étape c) du procédé de production d'une huile brute selon l'invention.
[65] L'huile raffinée produite par le procédé de production d'une huile raffinée selon l'invention peut comprendre un tocophérol. De façon avantageuse, une huile raffinée comprenant un tocophérol peut présenter des effets bénéfiques sur la santé.
[66] La concentration massique en tocophérol dans l'huile raffinée peut être supérieure ou égale à 350 ppm, en particulier de 825 ppm à 10000 ppm, plus

12 particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm. Pour un même substrat biologique, cette concentration massique est supérieure à la concentration massique en tocophérol dans une huile raffinée produite par des procédés mettant en oeuvre de l'hexane ou du 2-méthyloxolane anhydre.
[67] Selon un mode de réalisation très particulier, la concentration massique en tocophérol dans l'huile raffinée peut être supérieure ou égale à 350 ppm, en particulier de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm, à l'exception de l'huile raffinée produite à partir du substrat biologique qui est le colza dont la concentration massique en tocophérol dans l'huile brute peut être de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm.
[68] L'huile raffinée produite par le procédé de production d'une huile raffinée selon l'invention peut comprendre du 2-méthyloxolane.
[69] La concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'huile brute diminue au cours de l'étape de raffinage. Ainsi la concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'huile raffinée est très faible. Typiquement, la concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'huile raffinée peut être inférieure ou égale à 5 ppm, en particulier de 0,01 ppm à 3 ppm, plus particulièrement de 0,1 ppm à 1 ppm.
[70] De façon avantageuse, l'huile raffinée produite par le procédé de production d'une huile raffinée selon l'invention ne comprend pas d'hexane. Ainsi cette huile raffinée est plus sûre qu'une huile raffinée obtenue par un procédé
conventionnel mettant en uvre de l'hexane car, contrairement au 2-méthyloxolane, l'hexane est neurotoxique et est classé comme toxique pour la reproduction de catégorie 2.
[71] Une huile raffinée dont la concentration massique en 2-méthyloxolane est supérieure à 5 ppm présente des propriétés organoleptiques dégradées. L'huile raffinée produite par le procédé de production d'une huile raffinée selon l'invention présente donc avantageusement des propriétés organoleptiques satisfaisantes.

13 [72] Selon un mode de réalisation, l'étape de raffinage peut être une étape de raffinage chimique et/ou une étape de raffinage physique.
[73] L'étape de raffinage chimique peut comprendre au moins une des sous-étapes suivantes :
- dégommage pour éliminer et récupérer les gommes, aussi appelées lécithines, - neutralisation chimique basique, en particulier à la soude, pour éliminer las acides gras libres, - décoloration pour éliminer les pigments et récupérer une huile décolorée, et - désodorisation pour éliminer les composés odorants volatils et récupérer un distillat.
[74] L'étape de raffinage physique peut comprendre au moins une des sous-étapes suivantes :
- dégommage pour éliminer et récupérer les gommes, aussi appelées lécithines, - décoloration pour éliminer les pigments et récupérer une huile décolorée, et - distillation, en particulier distillation sous vide avec injection de vapeur, pour éliminer les composés odorants volatils et les acides gras libres, récupérés sous forme de distillat.
[75] Ces sous-étapes de raffinage chimique et de raffinage physique sont des sous-étapes classiques des procédés de production des huiles raffinées par extraction solide/liquide. L'homme du métier saura adapter les conditions opératoires de ces sous-étapes pour les réaliser.
[76] De façon avantageuse, les lécithines récupérées lors de la sous-étape de dégommage et le distillat récupéré lors de l'étape de distillation comprennent des polyphénols. Ils sont donc bons pour la santé.
[77] Les lécithines récupérées lors de la sous-étape de dégommage peuvent notamment être utilisées en tant qu'émulsifiant.

14 [78] Le distillat récupéré lors de l'étape de distillation peut par exemple être utilisé
dans une composition pharmaceutique, nutraceutique ou cosmétique. Il peut également être utilisé en tant que complément alimentaire.
[79] Le procédé selon l'invention permet également de produire un résidu solide.
[80] Selon un second aspect, l'invention porte sur un procédé de production d'un résidu solide comprenant en une étape e) de récupération du résidu solide obtenu lors de l'étape a) d'extraction solide/liquide du procédé de production d'une huile brute riche en polyphénol selon l'invention.
[81] Au sens de la présente invention, on entend par "résidu solide" le solide dégraissé produit par le procédé de production d'un résidu solide selon l'invention à
partir du substrat biologique. Le résidu solide est aussi appelé tourteau.
[82] Le procédé selon l'invention permet de produire une huile brute riche en polyphénol à partir du substrat biologique, le résidu solide est donc appauvri en polyphénol.
[83] La concentration massique en polyphénol dans le résidu solide produit par le procédé de production d'un résidu solide selon l'invention est inférieure à
concentration massique en polyphénols dans un résidu solide produit par un procédé
conventionnel mettant en oeuvre de l'hexane.
[84] Le résidu solide produit par le procédé de production d'un résidu solide selon l'invention comprend un polyphénol et une huile résiduelle, la concentration massique en polyphénol dans ledit résidu solide étant inférieure ou égale à 3000 ppm, en particulier de 10 ppm à 1500 ppm, plus particulièrement de 50 ppm à 500 ppm et la concentration massique en huile résiduelle dans ledit résidu solide étant inférieure ou égale à 5 %, en particulier de 0,1 % à 3 %, plus particulièrement de 0,3 % à 2 %.
[85] De façon avantageuse, avoir une concentration massique en polyphénols dans ces plages de valeur permet de diminuer, voire d'éviter, des problèmes organoleptiques, tels que l'apparition d'une coloration foncée et/ou d'une amertume,

15 dans les farines, isolats protéiniques et concentrés protéiniques issus de ces résidus solides.
[86] De plus, pour un même substrat biologique, le résidu solide produit par le procédé de production d'un résidu solide selon l'invention présente avantageusement une concentration massique en huile résiduelle inférieure à un résidu solide produit par un procédé conventionnel mettant en oeuvre de l'hexane ou un procédé
mettant en uvre du 2-méthyloxolane anhydre.
[87] Au sens de la présente invention, une "huile résiduelle" comprise dans le résidu solide est une huile extraite selon le procédé décrit dans la norme NF
EN ISO
734: Fév 2016.
[88] L'étape e) de récupération du résidu solide permet de séparer la fraction liquide du résidu solide. Typiquement cette étape e) peut être réalisée par filtration.
[89] Le résidu solide peut comprendre du solvant du procédé selon l'invention, en particulier du 2-méthyloxolane. Le résidu solide peut donc subir une étape f) de désolvatation après l'étape e) pour récupérer d'une part le solvant et d'autre part un résidu solide désolvaté.
[90] Ainsi un autre mode de réalisation de l'invention est un procédé de production d'un résidu solide désolvaté comprenant une étape f) de désolvatation du résidu solide récupéré lors de l'étape e) du procédé de production du résidu solide selon l'invention pour récupérer d'une part le solvant et d'autre part le résidu solide désolvaté.
[91] Selon un mode de réalisation, l'étape f) de désolvatation peut être réalisée par chauffage du résidu solide puis injection de vapeur dans le résidu solide chauffé, éventuellement accompagnée d'une mise sous vide.
[92] Par exemple, la vapeur peut être une vapeur du solvant selon l'invention, une vapeur surchauffée du solvant selon l'invention, une vapeur de 2-méthyloxolane anhydre, une vapeur surchauffée de 2-méthyloxolane anhydre, une vapeur d'eau, une vapeur surchauffée d'eau et leurs mélanges, en particulier une vapeur

16 surchauffée du solvant selon l'invention ou une vapeur surchauffée de 2-méthyloxolane anhydre, plus particulièrement une vapeur surchauffée du solvant selon l'invention.
[93] Classiquement une étape de désolvatation réduit la concentration massique en 2-méthyloxolane présent dans le résidu solide. Ainsi le résidu solide désolvaté
comprend du 2-méthyloxolane et la concentration massique en 2-méthyloxolane peut typiquement être inférieure à 1000 ppm, en particulier de 10 ppm à 500 ppm, tout particulièrement de 100 ppm à 300 ppm.
[94] Typiquement la concentration massique en huile résiduelle dans le résidu solide désolvaté est inférieure ou égale à 5 %, en particulier de 0,1 % à 3 %, plus particulièrement de 0,3 % à 2 %.
[95] Selon un mode réalisation, le résidu solide peut subir une étape de prétraitement avant l'étape f) de désolvatation telle qu'un mouillage complémentaire pour ajuster la teneur en eau dans le résidu solide. De façon avantageuse cette étape de mouillage complémentaire peut faciliter la désolvatation du résidu solide.
L'homme du métier saura adapter cette étape de mouillage complémentaire en fonction de la teneur en eau souhaitée dans le résidu solide.
[96] Le résidu solide désolvaté peut ensuite être transformé en sous-produit destiné, par exemple, à l'alimentation animale ou à l'alimentation humaine.
[97] Un autre mode de réalisation de l'invention est donc un procédé de production d'un sous-produit comprenant une étape g) de transformation du résidu solide désolvaté récupéré lors de l'étape f) du procédé de production d'un résidu solide désolvaté selon l'invention pour produire le sous-produit.
[98] De façon avantageuse, le sous-produit produit par le procédé de production d'un sous-produit selon l'invention est particulièrement adapté à
l'alimentation des animaux, en particulier des bovins. En effet il est dégraissé, car issu du résidu solide, et ne perturbe pas la digestion des animaux, en particulier des bovins. De plus ce sous-produit est plus sûr qu'un sous-produit obtenu par un procédé
conventionnel

17 mettant en uvre de l'hexane car, contrairement au 2-méthyloxolane, l'hexane est neurotoxique et est classé comme toxique pour la reproduction de catégorie 2.
[99]
Selon un mode de réalisation, le sous-produit peut être choisi parmi une farine, un concentré protéinique, isolat protéinique, une protéine texturée et leurs mélanges.
[100] Au sens de la présente invention, on entend par "farine" le sous-produit issu du broyage, de la mouture ou de la pulvérisation du résidu solide en vue d'en obtenir une poudre.
[101] Au sens de la présente invention, on entend par "concentré protéinique"
un sous-produit issu du traitement du résidu solide par une extraction solide-liquide de façon à retirer les sucres et les facteurs anti-nutritionnels, de façon à
obtenir une fraction solide contenant environ 60 à 70% de protéines.
[102] Au sens de la présente invention, on entend par "isolat protéinique" un sous-produit issu du traitement en milieu aqueux via une succession d'étapes du résidu solide de façon à obtenir une fraction solide contenant environ 90% de protéines.
[103] Au sens de la présente invention, on entend par "protéine texturée" un sous-produit issu du traitement par extrusion d'une farine ou d'un concentré
protéinique.
[104] Selon un mode de réalisation, l'étape g) de transformation peut être choisie parmi une étape de broyage, une étape d'extraction solide-liquide, une étape de solubilisation des protéines, une étape de précipitation des protéines, une étape de centrifugation, une étape d'extrusion, une étape de modification des protéines, une étape de fonctionnalisation des protéines ou leurs mélanges.
[105] L'homme du métier saura choisir et adapter l'étape g) de transformation en fonction du sous-produit qu'il souhaite obtenir.
[106] Par exemple, pour produire une farine, l'étape g) de transformation peut être une étape de broyage.

18 [107] Par exemple, pour produire un concentré protéinique, l'étape g) de transformation peut être une étape d'extraction solide-liquide à l'aide d'un mélange hydro-alcoolique.
[108] Par exemple, pour produire un isolat protéinique, l'étape g) de transformation peut être une succession d'étapes de solubilisation et de précipitation des protéines à
des pH spécifiques de façon à retirer sélectivement les sucres et les fibres présents initialement dans le résidu solide.
[109] Par exemple, pour produire une protéine texturée, l'étape g) de transformation peut être une étape d'extrusion à partir d'une farine ou d'un concentré
protéinique.
[110] L'étape g) de transformation peut réduire la concentration massique en 2-méthyloxolane. Ainsi, le sous-produit comprend du 2-méthyloxolane et la concentration massique en 2-méthyloxolane est inférieure à 1000 ppm, en particulier inférieure à 500 ppm, tout particulièrement de 0,5 ppm à 50 ppm.
[111] La concentration massique en 2-méthyloxolane dans le sous-produit peut dépendre du sous-produit.
[112] Par exemple, la concentration massique en 2-méthyloxolane dans la farine peut être inférieure à 1000 ppm, en particulier inférieure à 500 ppm, tout particulièrement de 5 ppm à 50 ppm.
[113] La concentration massique en 2-méthyloxolane dans le concentré
protéinique, dans l'isolat protéinique ou dans la protéine texturée peut typiquement être inférieure à 30 ppm, en particulier de 0,5 ppm à 20 ppm, tout particulièrement de 8 ppm à

12 ppm.
[114] Typiquement la concentration massique en huile résiduelle dans le sous-produit est inférieure ou égale à 5 %, en particulier de 0,1 % à 3 %, plus particulièrement de 0,3 % à 2 %.

19 [115] Selon un mode de réalisation, le procédé selon l'invention peut comprendre en outre une étape h) de recyclage dans l'étape a) d'extraction de tout ou partie du solvant récupéré lors de l'étape f) de désolvatation.
[116] De façon avantageuse, recycler le solvant récupéré lors de l'étape f) de désolvatation permet de diminuer le coût économique en matière première du procédé selon l'invention et donc d'améliorer sa viabilité industrielle.
[117] Selon une première variante, tout ou partie du solvant récupéré à la fin de l'étape f) de désolvatation subit, avant l'étape h) de recyclage, une étape h') de réduction du pourcentage massique d'eau. Cette première variante est particulièrement avantageuse lorsque le pourcentage massique d'eau dans le solvant récupéré à la fin de l'étape f) de désolvatation est supérieur à 20%, en particulier supérieur à 15%, tout particulièrement supérieur à 6%.
[118] Selon une seconde variante, tout ou partie du solvant récupéré à la fin de l'étape f) de désolvatation est directement recyclé dans l'étape a) d'extraction lors de l'étape h) de recyclage. Ainsi dans cette seconde variante, le procédé ne comprend pas, entre l'étape f) de désolvatation et l'étape h) de recyclage, d'étape h') de réduction du pourcentage massique d'eau. Cette seconde variante est particulièrement avantageuse lorsque le pourcentage massique d'eau dans le solvant récupéré à la fin de l'étape f) de désolvatation est de 0,3% à 20%, en particulier de 1% à 15%, plus particulièrement de 4% à 6%.
[119] L'étape h') de réduction du pourcentage massique d'eau est réalisée dans les mêmes conditions que l'étape d') de réduction du pourcentage massique d'eau.
[120] Selon un mode de réalisation particulier, tout ou partie des solvants récupérés lors des étapes c) et f) peuvent être mélangés et tout ou partie de leur mélange peut être recyclé dans l'étape a) d'extraction dans une étape i) de recyclage.
[121] Selon une première variante, tout ou partie des solvants récupérés lors des étapes c) et f) peuvent être mélangés et tout ou partie de leur mélange peut subir une étape i') de réduction du pourcentage massique d'eau avant d'être recyclé dans l'étape a) d'extraction dans une étape i) de recyclage.

20 [122] Selon une seconde variante, tout ou partie des solvants récupérés lors des étapes c) et f) peuvent être mélangés et tout ou partie de leur mélange peut être directement recyclé dans l'étape a) d'extraction lors d'une étape i) de recyclage. Ainsi dans cette seconde variante, le procédé ne comprend pas, entre les étapes c) et f) et l'étape i), d'étape i') de réduction du pourcentage massique d'eau.
[123] L'étape i') de réduction du pourcentage massique d'eau est réalisée dans les mêmes conditions que l'étape d') de réduction du pourcentage massique d'eau.
[124] Selon un mode de réalisation très particulier, le procédé de production d'une huile brute selon l'invention comprend les étapes suivantes :
a) extraction solide/liquide du substrat biologique avec le solvant pour obtenir d'une part une fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant et d'autre part un résidu solide, b) récupération de la fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant, c) séparation de l'huile brute et du solvant de la fraction liquide par entrainement à la vapeur d'eau pour récupérer d'une part l'huile brute et d'autre part le solvant, et d) recyclage dans l'étape a) de tout ou partie du solvant récupéré lors de l'étape c) après une étape d') de réduction du pourcentage massique d'eau dans tout ou partie du solvant récupéré à la fin de l'étape c) par condensation suivie d'une décantation et:
- le pourcentage massique d'eau dans le solvant après la condensation est de 1% à 25%, en particulier de 5% à 20% et plus particulièrement de 10% à 12%, et - le pourcentage massique d'eau dans le solvant après la décantation est de 0,3% à 20%, en particulier de 1% à 15%, plus particulièrement de 4% à
6%.
[125] Selon un mode de réalisation très particulier, le procédé de production d'un résidu solide désolvaté selon l'invention comprend les étapes suivantes :
a) extraction solide/liquide du substrat biologique avec le solvant pour obtenir d'une part une fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant et d'autre part un

21 résidu solide, b) séparation de la fraction liquide et du résidu solide, e)récupération du résidu solide, f) désolvatation du résidu solide récupéré lors de l'étape e) pour obtenir d'une part le solvant et d'autre part le résidu solide désolvaté, h) recyclage dans l'étape a) de tout ou partie du solvant récupéré lors de l'étape f).
[126] Selon un mode de réalisation très particulier, le procédé de production d'un sous-produit selon l'invention comprend les étapes suivantes :
a) extraction solide/liquide du substrat biologique avec le solvant pour obtenir d'une part une fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant et d'autre part un résidu solide, b) séparation de la fraction liquide et du résidu solide, e) récupération du résidu solide, f) désolvatation du résidu solide récupéré lors de l'étape e) pour obtenir d'une part le solvant et d'autre part le résidu solide désolvaté, g) transformation du résidu solide désolvaté récupéré lors de l'étape f) pour produire le sous-produit, et h) recyclage dans l'étape a) de tout ou partie du solvant récupéré lors de l'étape f).
[127] Comme expliqué ci-dessus, le procédé de production d'une huile brute selon l'invention permet de produire une huile brute avantageusement riche en polyphénol et qui peut comprendre du 2-méthyloxolane.
[128] Ainsi l'invention porte aussi sur une huile brute riche en polyphénol issue d'un substrat biologique, ladite huile brute comprenant un ou des polyphénols, du 2-méthyloxolane, et étant caractérisée en ce que la concentration massique en polyphénol est supérieure ou égale à 100 ppm, en particulier ladite huile brute est susceptible d'être obtenue par le procédé de production d'une huile brute selon l'invention.

22 [129] Au sens de la présente invention, on entend par "huile brute riche en polyphénol" une huile brute comprenant un ou plusieurs polyphénols et dont la concentration massique en polyphénol est supérieure ou égale à 100 ppm, en particulier de 320 ppm à 2000 ppm, plus particulièrement de 350 ppm à 1500 ppm, plus particulièrement encore de 400 ppm à 1200 ppm.
[130] Typiquement la concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'huile brute peut être de 0,5 ppm à 500 ppm, en particulier de 50 ppm à 300 ppm.
[131] L'huile brute peut également comprendre un tocophérol.
[132] La concentration massique en tocophérol dans l'huile brute peut être supérieure ou égale à 350 ppm, en particulier de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm. Pour un même substrat biologique, cette concentration massique en tocophérol est supérieure à la concentration massique en tocophérol dans une huile brute produite par des procédés mettant en oeuvre de l'hexane ou du 2-méthyloxolane anhydre.
[133] Selon un mode de réalisation très particulier, la concentration massique en tocophérol dans l'huile brute peut être supérieure ou égale à 350 ppm, en particulier de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm, à l'exception de l'huile brute produite à partir du substrat biologique qui est le colza dont la concentration massique en tocophérol dans l'huile brute peut être de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm.
[134] Le substrat biologique est tel que décrit ci-dessus en lien avec le procédé de production d'une huile brute selon l'invention.
[135] L'huile brute peut avantageusement être bonne pour la santé car elle est riche en polyphénol et peut comprendre un tocophérol. De façon avantageuse, l'huile brute peut être adaptée, par exemple, à un usage alimentaire, à un usage cosmétique, un usage pharmaceutique et/ou un usage technique.

23 [136] Ainsi la présente invention a pour objet l'utilisation de cette huile brute pour la préparation d'une composition telle qu'une composition alimentaire, une composition cosmétique et une composition pharmaceutique.
[137] Comme expliqué ci-dessus, le procédé de production d'une huile raffinée selon un mode de réalisation de l'invention permet avantageusement de produire une huile raffinée comprenant un tocophérol de sorte que cette huile raffinée peut présenter des effets bénéfiques sur la santé.
[138] Ainsi un objet de l'invention est une huile raffinée issue d'un substrat biologique comprenant un tocophérol, la concentration massique en tocophérol dans l'huile raffinée étant supérieure ou égale à 500 ppm, en particulier ladite huile raffinée est susceptible d'être obtenue par le procédé de production d'une huile raffinée selon un mode de réalisation de l'invention.
[139] Typiquement la concentration massique en tocophérol dans l'huile raffinée peut être supérieure ou égale à 350 ppm, en particulier de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm. Pour un même substrat biologique, cette concentration massique en tocophérol est supérieure à la concentration massique en tocophérol dans une huile raffinée produite par des procédés mettant en oeuvre de l'hexane ou du 2-méthyloxolane anhydre.
[140] Selon un mode de réalisation très particulier, la concentration massique en tocophérol dans l'huile raffinée peut être supérieure ou égale à 350 ppm, en particulier de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm, à l'exception de l'huile raffinée produite à partir du substrat biologique qui est le colza dont la concentration massique en tocophérol dans l'huile brute peut être de 825 ppm à 10000 ppm, plus particulièrement de 1500 ppm à 5000 ppm, plus particulièrement encore de 2000 ppm à 3000 ppm.
[141] L'huile raffinée de l'invention peut également comprendre du 2-méthyloxolane.
Cette huile raffiné est plus sûre qu'une huile raffinée produite par un procédé

24 conventionnel mettant en oeuvre de l'hexane car, contrairement au 2-méthyloxolane, l'hexane est neurotoxique et est classé comme toxique pour la reproduction de catégorie 2.
[142] Selon un mode de réalisation, la concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'huile raffinée peut être inférieure ou égale à 5 ppm, en particulier de 0,01 ppm à 3 ppm, plus particulièrement de 0,1 ppm à 1 ppm.
[143] Une huile raffinée dont la concentration massique en 2-méthyloxolane est supérieure à 5 ppm présente des propriétés organoleptiques dégradées. L'huile raffinée selon l'invention présente donc avantageusement des propriétés organoleptiques satisfaisantes.
[144] Le substrat biologique est tel que décrit ci-dessus en lien avec le procédé de production d'une huile brute selon l'invention.
[145] L'huile raffinée qui comprend un tocophérol peut avantageusement être bonne pour la santé. De façon avantageuse, l'huile raffinée peut être adaptée, par exemple, à un usage alimentaire, à un usage cosmétique, un usage pharmaceutique.
[146] Ainsi la présente invention a pour objet l'utilisation de cette huile raffinée pour la préparation d'une composition telle qu'une composition alimentaire, une composition cosmétique et une composition pharmaceutique.
[147] Le procédé de production d'une huile raffinée selon un mode de réalisation de l'invention permet également de produire des lécithines et/ou un distillat comprenant un polyphénol.
[148] Ainsi un objet de l'invention est des lécithines issues d'un substrat biologique comprenant un polyphénol, en particulier lesdites lécithines sont susceptibles d'être obtenues par le procédé de production d'une huile raffinée selon un mode de réalisation de l'invention.
[149] Le substrat biologique est tel que décrit ci-dessus en lien avec le procédé de production d'une huile brute selon l'invention.

25 [150] De façon avantageuse, les lécithines comprennent des polyphénols. Elles sont donc bonnes pour la santé.
[151] Ces lécithines peuvent notamment être utilisées en tant qu'émulsifiant.
[152] Ainsi la présente invention a pour objet l'utilisation de ces lécithines en tant qu'émulsifiant.
[153] Un objet de l'invention est un distillat issu d'un substrat biologique comprenant un polyphénol, en particulier ledit distillat est susceptible d'être obtenu par le procédé de production d'une huile raffinée selon un mode de réalisation de l'invention.
[154] Le substrat biologique est tel que décrit ci-dessus en lien avec le procédé de production d'une huile brute selon l'invention.
[155] Le distillat peut par exemple être utilisé dans une composition pharmaceutique, nutraceutique ou cosmétique. Il peut également être utilisé en tant que complément alimentaire.
[156] Ainsi la présente invention a pour objet l'utilisation de ce distillat pour la préparation d'une composition telle qu'une composition pharmaceutique, une composition nutraceutique ou une composition cosmétique. La présente invention a pour objet l'utilisation de ce distillat en tant que complément alimentaire.
[157] Comme expliqué ci-dessus, le procédé de production d'un résidu solide selon un mode de réalisation de l'invention permet avantageusement de produire un résidu solide appauvri en polyphénols et comprenant une faible concentration massique en huile résiduelle.
[158] Ainsi un mode de réalisation de l'invention est un résidu solide issu d'un substrat biologique comprenant un polyphénol et une huile résiduelle, dont la concentration massique en polyphénol est inférieure ou égale à 3000 ppm, en particulier de 10 à 1500 ppm, plus particulièrement de 50 à 500 ppm et dont la concentration massique en huile résiduelle est inférieure ou égale à 5 %, en particulier de 0,1 % à 3 %, plus particulièrement de 0,3 % à 2 %, en particulier ledit

26 résidu solide est susceptible d'être obtenu par le procédé de production d'un résidu solide selon un mode de réalisation de l'invention.
[159] De façon avantageuse, avoir une concentration massique en polyphénols dans ces plages de valeur permet de diminuer, voire d'éviter, des problèmes organoleptiques, tels que l'apparition d'une coloration foncée et/ou d'une amertume, dans les farines, isolats protéiniques et concentrés protéiniques issus de ces résidus solides.
[160] Le substrat biologique est tel que décrit ci-dessus en lien avec le procédé de production d'une huile brute selon l'invention.
[161] L'huile résiduelle comprise dans le résidu solide est telle que définie ci-dessus en lien avec le procédé de production d'un résidu solide.
[162] Selon un mode de réalisation, le résidu solide peut également comprendre du 2-méthyloxolane.
[163] Selon un mode de réalisation, le résidu solide ne comprend pas d'hexane.
[164] Le résidu solide peut ensuite être transformé en sous-produit destiné, par exemple, à l'alimentation animale ou à l'alimentation humaine.
[165] La présente invention a également pour objet l'utilisation de ce résidu solide pour la préparation d'une composition alimentaire animale ou humaine.
[166] De façon avantageuse, il est possible de produire un résidu solide désolvaté
avec le procédé de production d'un résidu solide désolvaté décrit ci-dessus.
[167] Ainsi un mode de réalisation de l'invention est un résidu solide désolvaté issu d'un substrat biologique comprenant du 2-méthyloxolane et dont la concentration massique en 2-méthyloxolane est inférieure à 1000 ppm, en particulier de 10 ppm à
500 ppm, tout particulièrement de 100 ppm à 300 ppm, en particulier ledit résidu solide désolvaté est susceptible d'être obtenu par le procédé de production d'un résidu solide désolvaté selon un mode de réalisation de l'invention.

27 [168] Typiquement la concentration massique en huile résiduelle dans le résidu solide désolvaté est inférieure ou égale à 5 %, en particulier de 0,1 % à 3 %, plus particulièrement de 0,3 % à 2 c/o.
[169] Selon un mode de réalisation, le résidu solide désolvaté ne comprend pas d'hexane.
[170] Le substrat biologique est tel que décrit ci-dessus en lien avec le procédé de production d'une huile brute selon l'invention.
[171] Le résidu solide désolvaté peut ensuite être transformé en sous-produit destiné, par exemple, à l'alimentation animale ou à l'alimentation humaine.
[172] La présente invention a également pour objet l'utilisation de ce résidu solide désolvaté pour la préparation d'une composition alimentaire animale ou humaine.
[173] De façon avantageuse, il est aussi possible de produire un sous-produit particulièrement adapté à l'alimentation, en particulier l'alimentation animale avec le procédé de production d'un sous-produit décrit ci-dessus.
[174] Ainsi l'invention porte aussi sur un sous-produit issu d'un substrat biologique comprenant du 2-méthyloxolane et dont la concentration massique en 2-méthyloxolane est inférieure à 1000 ppm, en particulier inférieure à 500 ppm, tout particulièrement de 0,5 ppm à 50 ppm, en particulier ledit sous-produit est susceptible d'être obtenu par le procédé de production d'un sous-produit selon un mode de réalisation de l'invention.
[175] Selon un mode de réalisation, le sous-produit peut être choisi parmi une farine, un concentré protéinique, isolat protéinique, une protéine texturée, et leurs mélanges.
[176] La concentration massique en 2-méthyloxolane dans le sous-produit peut dépendre du sous-produit.
[177] Par exemple, la concentration massique en 2-méthyloxolane dans la farine peut être inférieure à 1000 ppm, en particulier inférieure à 500 ppm, tout particulièrement de 5 ppm à 50 ppm.

28 [178] La concentration massique en 2-méthyloxolane dans le concentré
protéinique, dans l'isolat protéinique ou dans la protéine texturée peut typiquement être inférieure à 30 ppm, en particulier de 5 ppm à 20 ppm, tout particulièrement de 8 ppm à
12 ppm.
[179] Typiquement la concentration massique en huile résiduelle dans sous-produit est inférieure ou égale à 5 %, en particulier de 0,1 % à 3 %, plus particulièrement de 0,3 % à 2 %.
[180] Selon un mode de réalisation, le sous-produit ne comprend pas d'hexane.
[181] Le substrat biologique est tel que décrit ci-dessus en lien avec le procédé de production d'une huile brute selon l'invention.
[182] Le sous-produit étant particulièrement adapté à l'alimentation, en particulier l'alimentation animale la présente invention a également pour objet l'utilisation de ce sous-produit pour la préparation d'une composition alimentaire, en particulier une composition alimentaire animale.
[183] Typiquement, la concentration massique en polyphénols dans l'huile brute, dans le résidu solide, dans les lécithines et dans le distillat est déterminée selon la méthode dite de "Folin Ciocalteu" décrite par Slinkard et Singleton dans la publication "Total Phenol Analysis: Automation and Comparison with Manual Methods" parue dans la revue American Journal of Enology and Viticulture 28, no 1 (1 janvier 1977):
49-55 . L'homme du métier sait adapter cette méthode à l'échantillon analysé
et pour sa mise en oeuvre sur un lecteur de microplaques 96 puits (FLUOstar Omega, BMG LABTECH, France).
[184] Typiquement, la concentration massique en tocophérols dans l'huile brute et dans l'huile raffinée est déterminée selon la norme NF EN ISO 9936 : Juin 2016.
[185] La concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'huile brute, l'huile raffinée, le résidu solide, le résidu solide désolvaté, la farine, la protéine texturée, le concentré protéinique et l'isolat protéinique est mesurée à l'aide d'une technique classique de chimie analytique dite GC-Headspace (Chromatographie en phase gazeuse avec prélèvement de l'espace de tête). Cette technique analytique est

29 connue de l'homme du métier comme étant adaptée à l'analyse de composés volatils contenus dans une matrice huileuse et dans une matrice solide. Les conditions opératoires dépendant de l'échantillon et l'homme du métier saura les adapter à cet échantillon.
[186] Par exemple pour un isolat protéinique les conditions opératoires sont les suivantes : 0,50 0,01 g d'échantillon à analyser sont pesés dans un flacon de 20 mL, spécialement conçu pour la technique "HeadSpace" (23 x 77 mm), puis 7,0 mL
d'eau ultrapure et 1,0 mL de DMF (N, N-diméthylformamide) sont ajoutés dans le flacon. Le flacon est ensuite fermé hermétiquement à l'aide d'un bouchon équipé d'un septum adapté. Le flacon est ensuite agité vigoureusement durant 30 secondes avant analyse. Les conditions opératoires de l'étape de prélèvement et injection de l'espace de tête sont les suivantes : instrument = HeadSpace module 7697A; désorption =

min à 100 C ; température de la ligne de transfert = 160 C ; température de la boucle d'injection = 130 C; volume d'injection = 1 pL ; pression d'hélium = 12 PSI.
Les conditions opératoires de l'étape de séparation chromatographique sont les suivantes : instrument = GC 7890A (Agilent) ; colonne = DB624 - 60 m ¨ 320 pm ¨
1,8 pm ; liner = Agilent 5190-6168 (Ultralnert, splitless, droit, 2 mm id);
température de l'injecteur = 250 C; nature et débit du gaz vecteur = He, 1.3 mL/min ;
Profil de température du four = 60 C (3 min) ¨ rampe 5 C/min jusqu'à 70 C ¨ rampe à
C/min jusqu'à 220 C ¨ 220 C (2 min). Les conditions opératoires de l'étape de détection sont les suivantes : type de détecteur = spectromètre de masse (MS) ;
ionisation= El, mode SIM (ions 56, 71 & 86 Da) pour identification et courant ionique total pour quantification ; température de la source = 230 C ; température du quadripôle = 150 C. Tous les réactifs, solvants et matériels utilisés sont de qualité
analytique adaptée.
La concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'échantillon analysé
d'isolat protéinique est déterminée à l'aide d'une courbe de calibration réalisée sur une plage de concentrations massiques en 2-nriéthyloxolane adaptée.
[187] Pour le résidu solide, les conditions opératoires sont les suivantes :
le résidu solide est tout d'abord broyé à l'aide d'un broyeur centrifuge ZM 200 (Retsch GmbH)

30 équipé d'un tamis de 0,2 mm. Puis 0,5 0,01 g de l'échantillon broyé à
analyser est pesé dans un flacon de 20 mL, spécialement conçu pour la technique "HeadSpace"

(23 x 77 mm). Puis 2,0 mL d'eau sont ajoutés précisément dans le flacon avant de le fermer hermétiquement à l'aide d'un bouchon équipé d'un septum. Le flacon est laissé au repos durant au moins 5 min avant analyse. Les conditions opératoires de l'étape de prélèvement et injection de l'espace de tête sont les suivantes :
instrument = Turbomatrix HS40 (Perkin Elmer) ; désorption = 60 min à 80 C ;
température de la ligne de transfert = 120 C; température de l'aiguille = 110 C ; volume d'injection =
0.2 mL; pression d'hydrogène = 20 PSI. Les conditions opératoires de l'étape de séparation chromatographique sont les suivantes : instrument = Clarus 500 (Perkin Elmer) ; colonne = DB1 - 30 m ¨ 0,32 mm ¨ 3,0 pm ; température de l'injecteur =
110 C ; température du four = 40 C (7 min, isotherme). Les conditions opératoires de l'étape de détection sont les suivantes : type de détecteur = détecteur à
ionisation de flamme (FID) ; température du détecteur = 250 C; pression d'hydrogène = 20 PSI.
Tous les réactifs, solvants et matériels utilisés sont de qualité analytique adaptée.
Une droite d'étalonnage tracée au préalable permet de déterminer la concentration massique 2-méthyloxolane dans l'échantillon de résidu solide analysé, selon la formule suivante : Ci= Ici *A, où Ci est la concentration massique en 2-méthyloxolane, AI l'aire du pic correspondant au 2-méthyloxolane et ki la pente de la droite d'étalonnage du 2-méthyloxolane.
[188] La concentration massique en huile résiduelle dans le résidu solide est déterminée selon la norme NF EN ISO 734: Fév 2016.
Exemples [189] Dans les exemples ci-après la méthode pour déterminer la concentration massique en polyphénols dans les huiles brutes est la méthode dite de Folin Ciocalteu , décrite par Slinkard et Singleton dans la publication Total Phenol Analysis: Automation and Comparison with Manual Methods parue dans la revue American Journal of Enology and Viticulture 28, no 1 (1 janvier 1977): 49-55 , avec les modifications décrites ci-dessous pour la mettre en oeuvre sur un lecteur de

31 microplaques 96 puits (FLUOstar Omega, BMG LABTECH, France).
Tous les réactifs et solvants utilisés sont de qualité analytique adaptée.
Les polyphénols contenus dans l'huile brute sont préalablement extraits par la méthode suivante : 1 g d'huile est dilué dans 1 mL d'hexane, puis la solution est extraite par 3 extractions successives avec 3 mL d'un mélange méthanol / eau (60%vol / 40%vol). Après chaque extraction, les 2 phases sont agitées puis séparées par centrifugation (10 000 tr.min-1 / 10 min / 20 C) et la phase hydro-alcoolique liquide est collectée (les éventuels dépôts, précipités ou particules solides potentiellement formés ne sont pas prélevés). Les 3 phases hydro-alcoolique sont rassemblées puis lavées avec 1 mL d'hexane. Les phases sont séparées par centrifugation puis la phase hydro-alcoolique est transférée dans une fiole jaugée de mL, et le volume est complété au trait de jauge avec le mélange méthanol/eau (60%vol / 40%vol).
A l'aide d'une micropipette, 20 pL de cette solution sont introduits dans un puit de la microplaque auxquels sont ajoutés 80 pL de solution aqueuse de Na2CO3 (anhydre, Acros Organics) à 75 g/L. Le même mélange est répété dans 7 autres puits, soit puits au total pour 1 échantillon d'huile brute analysé. Ensuite 100 pL de réactif de Folin-Ciocalteu (Panreac AppliChern, ref. 251567.1609), préalablement dilué au (v/v) dans l'eau distillée, sont ajoutés dans chaque puits de façon automatisée par l'injecteur automatique du lecteur microplaque. La lecture de l'absorbance de chaque puit est réalisée par le détecteur UV-Visible du lecteur de microplaque à 750 nm à
25 C après 1h d'agitation dans l'obscurité dans l'appareil. En parallèle, une courbe d'étalonnage a été établie à l'aide de 8 solutions aqueuses d'acide gallique (Sigma-Aldrich) dans une gamme de concentration allant de 0 à 100 mg/L d'acide gallique, selon le même protocole d'analyse défini pour les échantillons, la différence étant que la solution comprenant la phase et le mélange méthanol/eau est remplacée par l'une des 8 solutions aqueuses d'acide gallique.
Dans un second temps, afin d'éliminer les composés non-polyphénoliques présents dans l'huile et pouvant réagir avec le réactif de Folin-Ciocalteu (sucres réducteurs, protéines...), 5 mL de la solution de polyphénols obtenue précédemment à
partir de

32 l'huile brute sont acidifiés à pH = 3,5 avec une solution de HCI à 0,1 N. Puis à ce mélange sont ajoutés 5 mL d'eau distillée et 1 g de polyvinylpolypyrrolidone (PVPP, taille des particules =110 pm, Sigma-Aldrich) afin de capter les polyphénols.
Le mélange est agité mécaniquement durant 10 min à 25 C avant d'être centrifugé à

000 tr.min-1 durant 10 min à 20 C. Le surnageant est ensuite prélevé puis filtré à
l'aide d'un filtre-seringue (0,25 pm) avant d'être analysé selon le même protocole que la solution non-traitée au PVPP. La valeur d'absorbance de cette solution traitée au PVPP sera utilisée comme blanc , elle sera soustraite à la valeur obtenue précédemment.
La valeur d'absorbance ainsi obtenue, moyenne issue de la mesure d'absorbance de 8 puits, à laquelle est soustraite la contribution des composés non-polyphénoliques, sert à calculer la concentration massique en polyphénols de l'échantillon, à
partir de l'équation de la droite de calibration. En considérant la masse d'huile utilisée initialement pour l'analyse, la concentration massique en polyphénols dans l'échantillon est exprimée en pg d'acide gallique (EAG, en abrégé) / g d'huile brute, ou bien de façon équivalente, en ppm.
[190] Dans les exemples ci-après, la méthode pour déterminer la concentration massique en tocophérols dans les huiles brutes et dans les huiles raffinées est la norme NF EN ISO 9936 : Juin 2016..
[191] Dans les exemples ci-après, la méthode pour déterminer la concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'huile raffinée est mise en oeuvre à l'aide de la technique classique de chimie analytique dite "GC-HeadSpace" (Chromatographie en phase gazeuse avec prélèvement de l'espace de tête), selon les conditions décrites ci-après. Cette technique analytique est connue de l'homme du métier comme étant adaptée à l'analyse de composés volatils contenus dans une matrice huileuse.
Tous les réactifs, solvants et matériels utilisés sont de qualité analytique adaptée.
Dans un premier temps, 5 0,01 g d'huile raffinée à analyser sont pesés dans un flacon de 20 mL, spécialement conçu pour la technique "HeadSpace" (23 x 77 mm).
Puis 15 pL d'une solution d'étalon (heptane à 40% v/v dans l'octane) sont ajoutés précisément dans le flacon de 20 mL avant de le fermer hermétiquement à l'aide d'un

33 bouchon équipé d'un septum. Le flacon de 20 mL est agité vigoureusement (vortex) durant 5 min avant analyse. Les conditions opératoires de l'étape de prélèvement et injection de l'espace de tête sont les suivantes : instrument = Turbomatrix (Perkin Elmer) ; désorption = 60 min à 80 C; température de la ligne de transfert =
120 C; température de l'aiguille = 110 C; volume d'injection = 0.2 mL ;
pression d'hydrogène = 20 PSI. Les conditions opératoires de l'étape de séparation chromatographique sont les suivantes : instrument = Clarus 500 (Perkin Elmer) ;
colonne = DB1 - 30 m ¨ 0,32 mm ¨ 3,0 pm ; température de l'injecteur = 150 C;
température du four = 40 C (3 min) puis rampe de 10 C/min jusqu'à 110 C (0 min).
Les conditions opératoires de l'étape de détection sont les suivantes : type de détecteur = détecteur à ionisation de flamme (FID) ; température du détecteur =
250 C ; pression d'hydrogène = 11 PSI.
La concentration massique en 2-méthyloxolane dans l'échantillon d'huile raffinée analysé est déterminée selon la formule suivante : Cmeox = a * (Ameox I
Aheptane) OU
Cmeox est la concentration massique en 2-méthyloxolane, Ameox l'aire du pic correspondant au 2-méthyloxolane, Aheptane l'aire du pic correspondant à
l'heptane (étalon interne), et a la pente de la droite d'étalonnage du 2-méthyloxolane établie auparavant.
La courbe d'étalonnage a été tracée, selon les principes classiques de la chimie analytique, en ajoutant des quantités connues d'une solution contenant du 2-méthyloxolane et de l'heptane, dans une huile raffinée dépourvue de 2-méthyloxolane, de façon à obtenir des concentrations massiques dans l'huile de 0,51 ; 1,02 ;
2,05;
5,12 et 10,25 pg/g.
[192] Exemple 1 selon l'invention : le solvant comprend du 2-méthyloxolane et de l'eau [193] Exemple 1-1 : le substrat est la graine de soja [194] L'extraction d'huile brute de soja a été mise en oeuvre à l'aide d'un système d'extraction automatique type Soxhlet (Extraction System B-811, Büchi), à
partir de graines de soja décoquillées (Fournisseur : OLEAD, variété : ES PALLADOR,

34 récolte : France, 2017, teneur en eau : 8,5% +/- 0,3). Le solvant utilisé est un mélange de 2-nnéthyloxolane (stabilisé au BHT, Sigma Aldrich) contenant 4,5 g d'eau distillée pour 100 g de solvant.
[195] Environ 50 g de graines de soja sont broyés à l'aide d'un broyeur à
couteaux de façon à obtenir des particules d'une taille inférieure à 1 mm.
Environ 30 g de la poudre obtenue sont pesés et introduits dans une cartouche d'extraction en verre adaptée à l'appareil (B(chi). La cartouche est ensuite introduite et fixée dans la chambre Soxhlet selon les instructions définies dans le manuel d'utilisation de l'appareil.
Ensuite, 170 mL de solvant sont introduits dans le gobelet récepteur de 250 mL
prévu à cet effet. Ensuite l'appareil est réglé de façon à opérer selon le mode Soxhlet Standard , sans rinçage ni dessiccation, avec un nombre de cycles fixé à 20 et une puissance de chauffage fixée à 10.
Enfin, le détecteur de niveau est placé environ 1 cm au-dessus du niveau haut du substrat végétal et le réfrigérant est alimenté avec de l'eau froide (8 C).
Le solvant est ensuite porté à ébullition à l'aide de la plaque chauffante intégrée. Une fois les 20 cycles terminés, tout le solvant contenant l'huile extraite est collecté dans le gobelet récepteur, tandis que le résidu solide reste à l'intérieur de la cartouche d'extraction.
Le solvant contenant l'huile extraite est laissé à refroidir environ 20 min à
température ambiante avant d'être transféré dans un ballon de 250 mL. Le solvant est ensuite évaporé à l'aide d'un évaporateur rotatif sous pression réduite (150 tr/min;
50 C;
180 mbar, puis 1 mbar pour finir).
L'huile brute ainsi obtenue est pesée puis refroidie sous un léger flux d'azote durant minutes avant d'être transférée dans un tube étanche puis stockée au congélateur à -20 C en attendant les analyses.
[196] La concentration massique en polyphénols dans l'huile brute est présentée dans le Tableau 1.
[197] Exemple 1-2: le substrat est la graine de colza

35 [198] Le protocole opératoire est le même que dans l'Exemple 1-1, la différence étant que le substrat de départ est la graine de colza entière (fournisseur :
OLEAD ;
provenance : Gironde (France); récolte : 2016; teneur en eau : 5,2% +1- 0,15) et que les cartouches d'extraction Soxhlet utilisées sont en cellulose et non en verre.
[199] La concentration massique en polyphénols dans l'huile brute est présentée dans le Tableau 1.
[200] Exemple 1-3: le substrat est le grain de maïs [201] Le protocole opératoire est le même que dans l'Exemple 1-1, les différences étant que le substrat de départ est le grain de maïs (fournisseur : Université

d'Avignon ; provenance : France ; teneur en eau = 7,25%), que les cartouches d'extraction Soxhlet utilisées sont en cellulose et non en verre, que le niveau du capteur a été fixé de telle sorte que le volume de la chambre d'extraction soit de 175 mL environ, que la durée d'extraction a été fixé à 1h sans consigne de nombres de cycles et que la puissance de chauffe a été fixée à 12.
[202] La concentration massique en polyphénols dans l'huile brute est présentée dans le Tableau 1.
[203] Exemple 1-4: le substrat est la graine de coton [204] Le protocole opératoire est le même que dans l'Exemple 1-3, les différences étant que le substrat de départ est la graine de coton (fournisseur :
Université
d'Avignon ; provenance : Turquie ; teneur en eau = 7 ,99%) et que les graines ont été
préalablement broyée et tamisée de façon à ne récupérer que l'amande, sans la fibre de coton.
[205] La concentration massique en polyphénols dans l'huile brute est présentée dans le Tableau 1.
[206] Exemple 2 comparatif : le solvant est hexane ou le 2-méthyloxolane anhydre [207] Exemple 2-1 comparatif : hexane

36 [208] Le protocole opératoire et les substrats biologiques sont les mêmes que dans les Exemples 1-1 et 1-4, la différence étant que le solvant est l'hexane.
[209] La concentration massique en polyphénols est présentée dans le Tableau 1.
[210] Exemple 2-2 comparatif : 2-méthvloxolane anhydre [211] Le protocole opératoire et les substrats biologiques sont les mêmes que dans les Exemples 1-1 et 1-4, la différence étant que le solvant est le 2-méthyloxolane anhydre.
[212] La concentration massique en polyphénols est présentée dans le Tableau 1.
[213] Les résultats du Tableau 1 mettent en évidence que le procédé selon l'invention mettant en oeuvre un solvant comprenant du 2-méthyloxolane et de l'eau permet de produire une huile plus riche en polyphénol que l'huile obtenue par l'hexane (solvant de référence) et par du 2-méthyloxolane anhydre.
[214] [Tableau 1]
Polyphénols totaux Substrat (pg acide gallique / g huile brute) biologique 2-méthyloxolane + 2-méthyloxolane Hexane eau anhydre Soja 1138 309 25 Colza 386 128 13 Maïs 516 303 10 Coton 394 195 52 [215] Exemple 3: Impact de la concentration massique en eau dans le solvant [216] Dans cet exemple une huile brute est obtenue par extraction solide/liquide à
partir de trois substrats biologiques différents avec différents solvants comprenant du 2-méthyloxolane (stabilisé au BHT, Sigma Aldrich) et de l'eau distillée, le pourcentage massique en eau dans chaque solvant étant de 1%, 4,5%, 10% ou 20%.

37 [2171 Les trois substrats biologiques sont :
- des graines de soja (fournisseur : OLEAD, variété : ES PALLADOR, récolte : France, 2017 ; teneur en eau : 8,5% +/- 0,3), - des graines de colza (fournisseur : OLEAD ; provenance : Gironde (France) ; récolte : 2016 ; teneur en eau : 5,2% +/- 0,15), et - des graines de tournesol (provenance : Espagne ; fournisseur : L'île aux épices ; lot LPR22-1017 ; teneur en eau : 2,54% +/- 0,12).
Les huiles alimentaires extraites à partir de ces trois graines oléagineuses sont parmi les plus produites au monde hors huile de palme.
[218] Dans cet Exemple 3 l'extraction solide/liquide est réalisée par la méthode d'extraction dite de macération à reflux car cette méthode est plus adaptée au solvant biphasique que la méthode d'extraction Soxhlet .
[219] Exemple 3-1 selon l'invention : le substrat est la graine de soja [220] Dans cet exemple 3-1, le substrat biologique est la graine de soja.
[221] Environ 50 g de graines de soja décoquillées sont broyées à l'aide d'un broyeur à couteaux afin d'obtenir des particules d'une taille inférieure à 1 mm. 30 g de la poudre obtenue sont pesés et introduits dans un ballon en verre de 250 mL
surmonté d'un réfrigérant de telle sorte de pouvoir mettre en oeuvre une extraction à
reflux.
Ensuite, 170 mL de chaque solvant est introduit dans le ballon puis le contenu du ballon est porté à reflux à l'aide d'un chauffe ballon.
La durée de l'extraction est fixée à 2h à partir du premier signe de reflux.
Au bout des 2h, le chauffage est arrêté et le mélange est laissé à refroidir à température ambiante durant 20 min.
Par la suite, le contenu du ballon est filtré sur un lit de coton de façon à
séparer d'un côté le résidu solide du solvant contenant l'huile, collecté dans un nouveau ballon de 250 mL. Le solvant est ensuite évaporé à l'aide d'un évaporateur rotatif sous pression réduite (150 tr/min ; 50 C ; 180 mbar, puis 1 mbar pour finir). L'huile brute ainsi obtenue est pesée puis les traces de solvant résiduel sont éliminées par un léger flux

38 d'azote durant 10 minutes. L'huile est transférée dans un tube étanche puis stockée au congélateur à -20 C en attendant les analyses.
[222] Pour chaque solvant exemplifié, la concentration massique en polyphénols est présenté dans le Tableau 2.
[223] Exemple 3-2 selon l'invention : le substrat est la graine de colza [224] Le mode opératoire de cet Exemple 3-2 selon l'invention est identique à
l'Exemple 3-1 selon l'invention à l'exception du substrat qui est la graine de colza.
[225] Pour chaque solvant exemplifié, la concentration massique en polyphénols est présentée dans le Tableau 3.
[226] Exemple 3-3 selon l'invention : le substrat est la graine de tournesol [227] Le mode opératoire de cet Exemple 3-3 selon l'invention est identique à
l'Exemple 3-1 selon l'invention à l'exception du substrat qui est la graine de tournesol décortiquée.
[228] Pour chaque solvant exemplifié, la concentration massique en polyphénols est présentée dans le Tableau 4.
[229] Exemple 3-4 comparatif : hexane [230] Le protocole opératoire et les substrats biologiques sont les mêmes que dans les Exemples 3-1 à 3-3, la différence étant que le solvant est l'hexane.
[231] Pour chaque substrat biologique, la concentration massique en polyphénols est présentés dans les Tableaux 2, 3 et 4.
[232] Exemple 3-5 comparatif : 2-méthyloxolane anhydre [233] Le protocole opératoire et les substrats biologiques sont les mêmes que dans les Exemples 3-1 à 3-3, la différence étant que le solvant est le 2-méthyloxolane anhydre.
[234] Pour chaque substrat biologique, la concentration massique en polyphénols est présentée dans les Tableaux 2, 3 et 4.

39 [235] [Tableau 2]
Le substrat est la graine de soja MeTHF signifie 2-méthyloxolane Solvant Concentration massique en polyphénols (ppm) Hexane (comparatif) 58 MeTHF anhydre (comparatif) 266 MeTHF + 1% H20 (selon l'invention) MeTHF + 4.5% H20 (selon l'invention) MeTHF + 10% H20 (selon l'invention) MeTHF + 20% H20 (selon l'invention) [236] [Tableau 3]
Le substrat est la graine de colza MeTHF signifie 2-méthyloxolane Solvant Concentration massique en polyphénols (ppm) Hexane (comparatif) 6 MeTHF anhydre (comparatif) 58 MeTHF + 1% H20 (selon l'invention) MeTHF + 4.5% H20 (selon l'invention) MeTHF + 10% H20 (selon l'invention) MeTHF + 20% H20 (selon l'invention)

40 [237] [Tableau 4]
Le substrat est la graine de tournesol MeTHF signifie 2-méthyloxolane Solvant Concentration massique en polyphénols (ppm) Hexane (comparatif) 49 MeTHF anhydre (comparatif) 52 MeTHF + 1% H20 (selon l'invention) MeTHF + 4.5% H20 (selon l'invention) MeTHF + 10% H20 (selon l'invention) MeTHF + 20% H20 (selon l'invention) [238] Les résultats des Tableaux 2 à 4 mettent en évidence que le procédé de production d'une huile brute selon l'invention mettant en oeuvre un solvant comprenant du 2-méthyloxolane et de 1% à 20% d'eau permet de produire une huile plus riche en polyphénols que l'huile obtenue par l'hexane (solvant de référence) et par le 2-méthyloxolane anhydre.
[239] Les concentrations massiques en polyphénols totaux obtenus par la méthode d'extraction dite de macération à reflux (Exemples 3 et 4) sont logiquement inférieurs à ceux obtenus par la méthode d'extraction Soxhlet (Exemples 1 et 2). En effet, contrairement à la méthode d'extraction Soxhlet , le solvant mis en oeuvre dans la méthode d'extraction dite de macération à reflux se concentre au fur et à
mesure en extrait, limitant ainsi l'extraction de l'huile et des polyphénols, selon les lois du transfert de matière connues de l'homme du métier.
[240] Exemple 4: Production d'un tourteau dégraissé
[241] Exemple 4-1 : le substrat est des flocons de soja et le solvant comprend du 2-méthyloxolane et 4,5% d'eau.

41 [242] L'extraction solide/liquide a été mise en uvre à l'aide d'un système d'extraction automatique (Extraction System B-811, Büchi), à partir de flocons de soja (fournisseur : OLEAD, récolte : France, 2017, teneur en eau : 9,96% +/- 0,20%, teneur en huile = 19,19% +/- 0,20%, épaisseur 1 mm). Le solvant utilisé est un mélange de 2-méthyloxolane (Stabilisé au BHT, Sigma Aldrich) contenant 4,5 g d'eau distillée pour 100 g de solvant.
[243] Environ 15 g de flocons de soja sont pesés et introduits dans une cartouche d'extraction en cellulose adaptée à l'appareil (Büchi). La cartouche est ensuite introduite dans la chambre d'extraction, selon les instructions définies dans le manuel d'utilisation de l'appareil. La hauteur du détecteur de niveau est réglée de façon à ce que le volume maximum de solvant de la chambre d'extraction soit environ égale à
220 mL.
[244] Ensuite, 170 mL de solvant sont introduits dans le gobelet récepteur de mL prévu à cet effet. Ensuite, l'appareil est paramétré de façon à opérer selon le mode Soxhlet Standard , sans rinçage ni dessication, avec une durée fixée à

heure et une puissance de chauffage égale à 12 de façon à garantir un nombre de cycles de remplissage-vidange de la chambre d'extraction égal à 7 1 par heure. Les condenseurs sont alimentés avec de l'eau du robinet, avec un débit suffisant pour garantir la condensation des vapeurs de solvant qui seront générées.
[245] Le solvant est ensuite porté à ébullition à l'aide de la plaque chauffante intégrée. Au bout de 60 min d'extraction, tout le solvant contenant l'huile extraite est collecté dans le gobelet récepteur, tandis que le tourteau dégraissé reste à
l'intérieur de la cartouche. Le contenu du gobelet récepteur est ensuite transféré dans un ballon adapté puis le mélange est désolvaté selon les conditions citées dans les exemples précédents. La cartouche contenant le tourteau dégraissé est quant à elle récupérée puis placée dans un dessiccateur ventilé (type Biosec, marque = TauRo) fonctionnant à une température d'environ 45 C durant au moins 10 heures et dans tout état de cause jusqu'à ce que l'odeur de solvant ne soit plus perceptible. Une fois désolvaté, la concentration massique en huile résiduelle du tourteau dégraissé est déterminée

42 selon la norme NF EN ISO 734: Fév 2016, mis en oeuvre à l'aide du système d'extraction automatique (Extraction System B-811, Büchi) selon le mode Continuous Extraction correspondant à la méthode dite de Twisselmann , avec une légère modification car la matière à analyser est finement broyée à l'aide d'un broyeur à couteaux au lieu d'un micro-broyeur à billes.
[246] La concentration massique en huile résiduelle obtenue après extraction par 2-méthyloxolane + eau est présentée dans le Tableau 5.
[247] Exemple 4-2: le substrat est des écailles de colza et le solvant comprend du 2-méthyloxolane et 4,5% d'eau.
[248] L'extraction solide/liquide a été mise en oeuvre selon le même protocole que dans l'exemple 4-1, à la différence que le substrat est des écailles de colza (fournisseur : OLEAD, récolte : France, 2017, teneur en eau: 8,21% +/- 0,13%, teneur en huile = 23,03% +/- 0,07%, taille des particules 5_ 3 mm) et que la durée d'extraction est de 90 min.
[249] La concentration massique en huile résiduelle obtenue après extraction par 2-méthyloxolane + eau est présentée dans le Tableau 5.
[250] Exemple 4-3: le substrat est des écailles de tournesol et le solvant comprend du 2-méthyloxolane et 4,5% d'eau.
[251] L'extraction solide/liquide a été mise en oeuvre selon le même protocole que dans l'exemple 4-1, à la différence que le substrat est des écailles de tournesol (fournisseur : OLEADõ récolte : France, 2017, teneur en eau : 5,38% +/- 0,24%, teneur en huile = 30,81% +/- 2,59%, taille des particules 10 mm) et que la durée d'extraction est de 90 min.
[252] La concentration massique en huile résiduelle obtenue après extraction par 2-méthyloxolane + eau est présentée dans le Tableau 5.
[253] Exemple 4-4 comparatif : hexane [254] Le protocole opératoire et les substrats biologiques sont les mêmes que dans les Exemples 4-1 à 4-3, les différences étant que le solvant est l'hexane et que la

43 puissance de chauffage est fixée à 9 de façon à garantir un nombre de cycles de remplissage-vidange de la chambre d'extraction égal à 7 1 par heure.
[255] Pour chaque substrat biologique, les concentrations massiques en huile résiduelle obtenues après extraction par hexane sont présentées dans les Tableau 5.
[256] Exemple 4-5 comparatif : 2-méthyloxolane anhydre [257] Le protocole opératoire et les substrats biologiques sont les mêmes que dans les Exemples 4-1 à 4-3, les différences étant que le solvant est le 2-méthyloxolane anhydre et que la puissance de chauffage est fixée à 12 de façon à garantir un nombre de cycles de remplissage-vidange de la chambre d'extraction égal à 7 1 par heure.
[258] Pour chaque substrat biologique, les concentrations massiques en huile résiduelle obtenues après extraction par 2-méthyloxolane anhydre sont présentées dans les Tableau 5.
[259] [Tableau 5]
Concentration massique en huile résiduelle (g / 100 g matière sèche) Substrat biologique 2-méthyloxolane 2-méthyloxolane Hexane + eau anhydre (comparatif) (selon l'invention) (comparatif) Flocons de soja 0,44 0,92 1,49 Ecailles de colza 0,67 1,08 2,22 Ecailles de tournesol 1,73 1,82 2,90 [260] Les résultats du Tableau 5 mettent en évidence que le procédé de production d'un résidu solide selon l'invention mettant en oeuvre un solvant comprenant du 2-méthyloxolane et 4,5% d'eau permet de produire un résidu solide comprenant moins d'huile résiduelle que le résidu solide obtenu par l'hexane (solvant de référence) et par le 2-méthyloxolane anhydre.

44 [261] Ceci est particulièrement avantageux car cela permet de limiter les pertes en huile, de faciliter l'élimination du solvant résiduel dans le résidu solide, d'augmenter la concentration des protéines dans le résidu solide, d'améliorer sa stabilité au cours du stockage et de faciliter sa digestion par les animaux, en particulier des bovins.
[262] Exemple 5: Essai à échelle pilote avec du soja [263] Exemple 5-1 selon l'invention: le substrat est la graine de soja et le solvant est un mélange de 2-méthyloxolane et d'eau.
[264] L'extraction d'huile brute de soja a été mise en uvre à l'échelle pilote dans un filtre sécheur de 480 L (type "Guedu"). Les graines de soja (Fournisseur :
OLEAD, récolte : France, 2017, teneur en eau : 12,2%) ont été préparées pour l'extraction par des étapes classiques de décoquillage et floconnage de façon à diminuer la taille des particules et augmenter l'accessibilité du solvant d'extraction.
Puis environ 60 kg de flocons de soja ont été introduits dans le filtre sécheur, puis extraits par trois passages successifs de 2-méthyloxolane (fournisseur =
Pennakem LLC ; non-stabilisé). A chaque passage, la teneur en eau est différentes, respectivement 1,44%; 2,85% puis 4,76%.
La température d'extraction a été en moyenne de 57 +/- 6 C, le ratio massique solvant/solide a été fixé à 1,8 kg/kg et la durée d'extraction à 15 min par passage, soit 3 x 15 min au total.
Le solvant contenant l'huile extraite (mélange noté miscella) a été collecté
par filtration après chaque passage, puis concentré à l'aide d'une colonne de distillation (80-85 C, sous pression réduite) et enfin désolvaté à l'aide d'un évaporateur rotatif (Hei-VAP Advantage, Heidolph, Germany) sous vide et à 60 C jusqu'à l'absence de condensation de solvant, puis 1 heure à 90 C. L'extrait désolvaté est ensuite centrifugé (4000 rpm/4 min) afin d'enlever une fraction solide extraite par le mélange 2-méthyloxolane et eau mais devenue insoluble dans un milieu huileux. L'huile brute obtenue est ensuite stockée à -20 C avant raffinage ou analyse.
[265] Une fois l'extraction terminée, le résidu solide (flocons dégraissés et filtrés) est désolvaté dans la même cuve (filtre sécheur Guedu ). La cuve est connectée à

45 un générateur de vide puis chauffée à 55 C durant 140 min, avec injection d'un flux d'azote (14-18 L/min) afin d'aider la désolvatation. Enfin, le résidu solide est déchargé, étalé sur une plaque et exposé à l'air ambiant pendant 1 jour afin d'enlever les traces de solvant résiduel.
[266] L'huile brute obtenue subie ensuite une étape classique de raffinage chimique comprenant une étape de dégommage à pH neutre puis à pH acide, suivie d'une étape de neutralisation, une étape de décoloration puis une étape de désodorisation pour obtenir une huile raffinée.
[267] La concentration massique en polyphénols et en tocophérols dans l'huile brute, et la concentration massique en tocophérols et en 2-méthyloxolane dans l'huile raffinée sont présentées dans le Tableau 6.
[268] Exemple 5-2 comparatif: Le substrat est la graine de soja et le solvant est du 2-méthyloxolane anhydre.
[269] Le protocole opératoire de l'extraction est identique à l'Exemple 5-1 selon l'invention à l'exception des points suivants : le solvant est le 2-méthyloxolane anhydre (non-stabilisé), le ratio solvant/solide est de 2,9 kg/kg, la température d'extraction est de 53 +/- 5 C.
[270] La concentration massique en polyphénols et en tocophérols dans l'huile brute, et la concentration massique en tocophérols et en 2-méthyloxolane dans l'huile raffinée sont présentées dans le Tableau 6.
[271] Exemple 5-3 comparatif: Le substrat est la graine de soja et le solvant est l'hexane.
[272] Le protocole opératoire de l'extraction est identique à l'Exemple 5-1 selon l'invention à l'exception des points suivants : le solvant est de l'hexane (qualité
extraction), le ratio solvant/solide est de 2,2 kg/kg, la température d'extraction est de 52 +/- 3 C.

46 [273] La concentration massique en polyphénols et en tocophérols dans l'huile brute, et la concentration massique en tocophérols dans l'huile raffinée sont présentées dans le Tableau 6.
[274] [Tableau 6]
2-méthyloxolane 2-méthyloxolane Hexane + eau anhydre (comparatif) (selon l'invention) (comparatif) Concentration massique en 106 Non-détecté 71 polyphénols dans l'huile brute (ppm) Concentration massique en tocophérols dans l'huile brute (ppm) Concentration massique en tocophérols dans l'huile raffinée (ppm) Concentration massique en 2-<1 Non-détectable <1 méthyloxolane dans l'huile raffinée (ppm) [275] Les résultats du Tableau 6 mettent en évidence que le procédé de production d'une huile brute selon l'invention mettant en oeuvre un solvant comprenant du méthyloxolane et de 1,44% à 4,76% d'eau permet de produire une huile brute plus riche en polyphénols que l'huile brute obtenue par l'hexane (solvant de référence) et par le 2-méthyloxolane anhydre.
[276] Les résultats du Tableau 6 mettent également en évidence que le procédé
de production d'une huile brute selon l'invention mettant en uvre un solvant comprenant du 2-méthyloxolane et de 1,44% à 4,76% d'eau permet de produire une huile raffinée plus riche en tocophérols que l'huile raffinée obtenue par l'hexane (solvant de référence) et par le 2-méthyloxolane anhydre

Claims (2)

1. Revendications [Revendication 1] Procédé de production d'une huile brute riche en polyphénol à
   partir d'un substrat biologique comprenant une étape de :
   a) extraction solide/liquide du substrat biologique avec un solvant pour obtenir d'une part une fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant et d'autre part un résidu solide, où
   le solvant comprend du 2-méthyloxolane et de l'eau, et le pourcentage massique d'eau dans le solvant lors de l'étape a) d'extraction est de 0,3% à 20%.
   [Revendication 2] Procédé selon la revendication 1 dans lequel le substrat biologique est choisi parmi un végétal, une algue, un microorganisme et leurs mélanges.
   [Revendication 3] Procédé selon la revendication 2 dans lequel le substrat biologique est un végétal choisi parmi l'amande, l'amarante, l'arachide, l'argan, l'argousier, l'anacardier, l'avocat, l'avoine, la bourrache, la carthame, la cameline, la carotte, le cacao, le cajou, le chanvre, le colza, le coprah, la courge, le coton, le croton, le cynorrhodon, la figue, la figue de barbarie, la grenade, le houblon, l'illipé, le jojoba, le karité, le lin, le lupin, le maïs, le noisetier, le noyer, le cocotier, l'oeillette, l'olive, l'onagre, le palmiste, le paprika, la pistache, le poivre, le ricin, le riz, le rosier musqué, le sésame, le soja, la tagète, le tournesol, le Calophyllum inophyllum, le madhuca, le noyer du Queensland, la framboise, le cassis, le melon, le raisin, la tomate, le baobab, le babassu, la canneberge, le chia, la citrouille, la moutarde, le neem, le Nigella Sativa, le niger, le pavot, le pécan, le Perilla, le Plukenetia volubili, le potiron, le rocou, le Taramira, l'abricot, la prune, la pêche, et le blé.
   [Revendication 4] Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 dans lequel l'étape a) d'extraction est réalisée à une température de 20°C à
   100°C.
   
   [Revendication 5] Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, comprenant, en plus de l'étape a) d'extraction, les étapes suivantes :
   b) récupération de la fraction liquide comprenant l'huile brute et le solvant, et c) séparation de l'huile brute et du solvant de la fraction liquide pour récupérer d'une part l'huile brute et d'autre part le solvant.
   [Revendication 6] Procédé de production d'une huile raffinée comprenant une étape de raffinage de l'huile brute récupérée lors de de l'étape c) du procédé de production d'une huile brute tel que défini dans la revendication 5.
   [Revendication 7] Procédé de production d'un résidu solide comprenant une étape e) de récupération du résidu solide obtenu lors de l'étape a) d'extraction solide/liquide du procédé tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 5.
   [Revendication 8] Procédé de production d'un résidu solide désolvaté
   comprenant en outre une étape f) de désolvatation du résidu solide récupéré lors de l'étape e) du procédé tel que défini dans la revendication 7 pour récupérer d'une part le solvant et d'autre part le résidu solide désolvaté..
   [Revendication 9] Procédé de production d'un sous-produit comprenant une étape g) de transformation du résidu solide désolvaté récupéré lors de l'étape f) du procédé
   tel que défini dans la revendication 8 pour obtenir le sous-produit.
   [Revendication 10] Procédé selon la revendication 9 dans lequel le sous-produit est choisi parmi une farine, un concentré protéinique, un isolat protéinique, une protéine texturée et leurs mélanges.
   [Revendication 11] Huile brute issue d'un substrat biologique, ladite huile brute _comprenant un polyphénol et du 2-méthyloxolane, et où la concentration massique en polyphénol est supérieure ou égale à 100 ppm.
   [Revendication 12] Huile brute selon la revendication 11 dans laquelle la concentration massique en 2-méthyloxolane est de 0,5 ppm à 500 ppm.
   
   [Revendication 13] Huile raffinée issue d'un substrat biologique comprenant un tocophérol, et où la concentration massique en tocophérol est supérieure ou égale à 350 ppm.
   [Revendication 14] Huile raffinée selon la revendication 13 comprenant en outre du 2-méthyloxolane.
   [Revendication 15] Résidu solide issu d'un substrat biologique et comprenant un polyphénol et une huile résiduelle, où la concentration massique en polyphénol est inférieure ou égale à 3000 ppm et la concentration massique en huile résiduelle est inférieure ou égale à 5 %.
   [Revendication 16] Résidu solide selon la revendication 15 comprenant en outre du
2. 2-méthyloxolane.
   [Revendication 17] Résidu solide désolvaté issu d'un substrat biologique comprenant du 2-méthyloxolane, où la concentration massique en 2-méthyloxolane est inférieure à 1000 ppm.
   [Revendication 18] Sous-produit issu d'un substrat biologique comprenant du 2-méthyloxolane, où la concentration massique en 2-méthyloxolane est inférieure à 1000 ppm.
   [Revendication 19] Sous-produit selon la revendication 18 choisi parmi une farine, un concentré protéinique, isolat protéinique, une protéine texturée, et leurs mélanges.