CA1042425A

CA1042425A - Procede de preparation d'un derive neamine et ses sels_

Info

Publication number: CA1042425A
Application number: CA221,866A
Authority: CA
Inventors: Daniel Coussediere; Jean-Claude Gasc
Original assignee: Roussel Uclaf SA
Current assignee: Sanofi Aventis France
Priority date: 1974-03-12
Filing date: 1975-03-11
Publication date: 1978-11-14
Also published as: IE40957B1; FR2263747A1; DE2510838A1; JPS50126641A; CH606078A5; BE826546A; GB1489104A; FR2263747B1; LU72022A1; US4064339A; NL7502887A; IE40957L

Abstract

: Procédé de préparation de la 4-O-/2' ,6'-diamino 2' ,6,-didésocy .alpha., D-glycopyrannosyl/6-O-/3"-amino 3".4".6"tridésoxy .alpha., D-xylohexopyrannosyl/2-désoxy streptamine et ses sels avec les acides minéraux ou organiques. Les produits obtenus par le procédé de l'invention possèdent une activité antibiotique.

Description

1042~Z5 ~ a présente invention a pour objet un procédé de préparation de la 4-0-/2'~6'-diamino 2',6~-didésoxy a,D~gluco-p~rannosyl/6-0~/3"-amino 3",4",6"-trid~isoxy a,~-xylohexopyran-no~yl/ 2-désoxy streptamine de formule I :
CH2~H2 2 O ~ , ~2 ¦ (I) ~OH ¦

O

ainsi que de ses sels d'addition avec le~ acideq minéraux ou .~;
organiques. 4:
Les sels précédents peuvent être obtenus par neutra~
lisation totale ou partielle des cinq fonctionq aminées présen~
tes dans le produit de formule I. Ces ~els peuvent être par exempleun.chlorhydrate, un bromhydrate, un nitrate, un sulfate, un phosphate, un acétate, un formiate, un benzoate, un maléate, un ~umarate, un succinate, un tartrate, un citrate, un oxalate, ; un benzylate, un glyoxylate, un aspartate, un alcanesul~onate ~ .
.ou un arylsulfonate.
~e produit de formule I et ses sels thérapeutiquement :.
¢ompatible~ peuvent être employés pour la préparation de com-pos1tions pharmaceutiques qui renferment le~dits produits à
titre de principe actif. . .
~ ~es produit~ précités pQss~dent une très intéressan- ~
.30 te activité antibiot1que, d'une part sur les bactéries gram ~ ~ -(+) telles que les Staphylocoques, Streptocoques et notamment les Staphylocoques pénicillino-rési~tants, et d'autre part sur `, ~ ' ' ' : . . .

4 ~ 42 5 les bactéries gram (-) et notamment sur les bactérie~ coli-forme3.
Ces propriétes rendent aptes le produit de formule I
ainsi que ses sels thérapeutiquement compatibles ~ ~tre utili-~és ~ titre de médicaments notamment dans le traitement ae~
staph~lococcies telles que septicémies ~ staphylocoques, staphylococcie~ maligne~ de la face, staphylococcie~ cutanée~, pyodermite~, plaies ~eptique~ et suppurantes, anthrax, phleg-mons, érésyp~les, staphylococcies aigu~s primitives ou post-grippales, bronchopneumonies, suppuration~ pulmonaire~ et colibacillosesO Ces produit~ peuvent ~tre utili~és par voie paxentérale, buccale, rectale ou par voie locale en applica- ;
t.ion topique ~ur la peau ou les muqueuses.
Il~ peu~ent ~tre présenté~ sou~ forme de solutions ou de suspensions injectable~, de poudres ~térileæ pour pré-parations in,jectables extemporanées, de comprimés, de compri-, -~és enrobé~, de cap3ule~, de ~irops, de suppo~itoires, de cr~me~, de pommsdes et de préparation~ en aérosols. Ces for-mes pharmaceutique~ sont préparées selon les proc~dés cla~si-ques. ~a.dose usuelle, variable selon le produit utilisé, le AUjet traité et l'affection en cause, peut 3tre par exemple de 100 mg à 1 g par ~our chez l'homme par voie parent~rale.
~ e procédé, objet de l'invention~ ~8t caractéri~é e~
oe que l'on fait réagir le produit de formule II :

O H
C2H5 (II) OH
'::' ::
avec le brome ou l'iode en pré~enoe d'un agent alcalin pour '' . ~
.. . . -., . - .: .

lO~Z4Z5 obtenir le produit de formule III :
CH
O H
~ ~C2H5 (III~

que l'on traite par le chloroformiate d'éthyle en préRence d~un agent alcalin pour obtenir le produit de formule IV :
C~3 i O H
~t~ ( IV) ~ OC~

que l'on fait réagir avec un halogènure de benzyle en présence d~un agent alcalin pour obtenir le produit de for~ule V :

~ (V) ~

, OC~2C6H5 que l~on traite par l'anhydride acétique dans l'aoide acétique : .
en pr~sence d~un acide fort pour obtenir le produit de ~ormule VI :
~H

~coa~ (VI) H2~6H5 ., ., 'r:
gue l~on traite par l~acide chlorhydrique anh~dre en présence de chlorure d'acétyle au sein d'un ~olvant organique pour obte-nir le produit de iormule VII : .
:
~, , .
: _ 3 _ .

~H3 ,~0 H
(VII) ~:

OCH2a6H5 ~ I

que l'on fait réagir ~ur le produit de f~mule VIII: .
~H2N~C02CH3 2 3 10/~\1 H~NHC02CH3 CH3CO~O ~ (VIII) . ,.

. . " .
en présence d'un catalyseur pour obtenir un mélailge d'anomèr~s a ot ,B de formules IX et I~

CH2~HC02CH3 2 3 : ; :;
. ~O\H H~HC02cH3 :

C~I3CO~ O ~ -~: ~ CH2C6H5 :' et : ~ HC02cH3 T~C~3 a~3oo~co2c~3 ~` ao c~
;~ 2 3 CH3 .~ .
~0 ( IX ' ) . , ~ ...
~30 ~: ' O 2C6H5 , .~, :
' .' ;.

1~ 4 ~ ~Z~5 -mélange que l'on traite par l'hydrogè~e en présence d'un ca-. talyseur, puis par une base alcaline et qu'en~uite, on sépare les anomères du mélange résultant pour obtenir 1'anomère a de formule I que, 9i désiré~ on soumet ~ l'action dtun acide mi-néral ou organique, pour en ~ormer le sel.
Dans des co~ditions préférentielle~ de mi~e en oeuvre du procédé énoncé ¢i-de~su~, on opère comme ~uit: : .
~'agent alcalin en préæence duquel, on fait réagir ..
~ le brome ou l'iode ~ur le produit de ~ormule II est avantageu- 10 ~ement le méthylate de æodium, mais on peut égaleme~t utili~er une base alcaline comme l'hydroxyde de sodium ou de pota~ium I ou un autre alcoolate alcalin comme par exemple l'éthylate de ~odium, le terbutylate de potassium ou le teramylate de sodium~ -~lagent alcalin en présence duquel, on fait réagir le. .
chloroformiate d'éthyle sur le produit de formule III est avantageuseme~t le carbonate de ~odium mai~ on peut également utiliser par exemple du bicarbonate de sodium, du ~arbonate de pota~sium, de l'hydroxyde de sodium, de potassium ou d.e lithium . ou une ba~e.organique tertiaire telle que la triéthylamine ou la pyridine.
~ 'agent alcalin en présence duquel, on fait réagir l'halogenure de benzyle, qui peut etre le ohlorure ou le bro-mure de benzyle~ sur le produit de formule IV est avantageuse- r f ment de la baryte mais on peut également utiliser de l'hydrure . ou de l'amidure de sodium ou encore l'hydroxyde de sodium.
~ 'aoide fort en présence duquel, on fait réagir ;~ l'anhydride acétique ~ur le produit de formule V est aYanta-geusement con~titué par de l'a¢ide sulfurique; mais on peut .. ~ galement utiliser un autre acide minéral tel que l'acide . 30 ¢hlorhydrique,.un a¢ide organique tel que, par exemple, l'acide ~ trifluoracétique ou l'acide p-toluènesulfonique, un acide de ~ewis tel que, par exemple, le trifluorure de bore ou le : - .
.. _ 5 _ :
~ .; , , ~. .
, ~ . . . -104Z~ZS
chlorure d~aluminiu~ ou encore une résine échangeuse d'ions de type sulfonique~
~e solvant organique dan~ lequel a lieu la r~actio~
de l'acide chlorhydrique anhydre sur le produit de formule VI
est avantageusement le dioxanne; mai~ on peut également utili-æer, par exemple, l'éther éthylique, le tétrahydrofuran ou le 1,2-diméthoxyéthane.
~a condensation entre les produits de formule VII et ~III est une réaction du type habituellement dé~igné sous le nom de réaction de KO~NIGS - KNORR; elle e~t donc réalisée en pr~sence d'un catalyseur qui est avantageusement constitué par du cyanure mercurique; mais on peut egalement utili~er-un ~ ~-autre sel de mercure, un ~el d'argent ou de cadmium ou une ami~
ne tertiaixe telle que la collidine par exemple.
~e catalyseur que l'on utilise pour traiter par l'hy-drogène le mélange des produits de formule IX et IXt est avan-tageusement le palladium déposé sur noir de carbone; mais on peut également utiliser de~ sels de palladium, du platine, des dérivés du platine et d'autres catalyseur~ usuels tels que le rhodium, le ruthènium ou le nickel. -~a base alcaline que l'on utilise ~n~uite eet avanta-eeusement constituée par de la baryte dissoute dans de l'eau mais on peut également utiliser d'autres base~ aqueuses telles que, par exemple, l'hydroxyde de sodium ou de potassium.
Ia ~éparation dee anomères du produit ré~ultant est réalls~e par les méthodes phgsiques habituelle~; on utilise avantageus~ment la ¢hromatographie sur silice; mais on peut ~galement utiliser la chromatographie sur alumine, ~ur cellu-lo~e, ~ur silicate de magnésium ou encore la cristallisation ~ fraotionnée ou la méthode dite de séparation ~ contre-courant.
On utilise, pour mener à bien de telles séparationæ, différents ~olvants ou mélanges de æol~ants organique3 pur~ ou aqueux.

.
" ', - . ' ~ ' , T' 9 ~.. . . . . . .. . . . .... . .

~.U~
La ~alification du produit de formule I peut ~tre réalisée par aes méthodeæ usuelles. Elle peut ~tre obtenue par action sur ce produit d~acide~ tel~ que, par exemple le~ :
acides chlorhydri~ue, bromhydri~ue, nitrique, sulfurique, phosphorique, acétique, ~ormique, benzoqque, maléique, fuma- :.
rique~ ~ucciniquel tartrique, citrique~ oxaliquet benzylique, ~ glyoxylique, aspartique, alcanesul~oniques et arylsul~oniques.
Cette salification e~t réalisée de préférence dans un 901vant .
ou un mélange de solvants, tels que l'eau, l'éther éthylique, l'éthanol ou l'acétone.
~ e trait ondulé, ~ui relie les substituants de l'ato-me de carbone en position ~ du cycle deæ produits de formule III, IV, V, YI et ~II, indique ~ue ces substituants peu-~ent se trou~er en position a ou ~ de ce cycle.
Ces produits existent donc sous forme d'anomère ~ ou ou sous forme dlun mélange de ces anomères.
~ e produit de formule générale VIII ~ue l~on fait réagir a~ec le produit de formule VII peut être obtenu selon un procédé qui consiste ~ faire réagir le produit de formule 1 20 ~ ~
1, CH2NHC02CH3 NHC02CH3 ' ' H ~ ~HCO CH
H ~ ~
¢2CH3 ~ (X) :~ ' , ' .
~ ' .
' .

Avec l~anhydride acétique en présence d~une base organique pour obtenir le produit de formule XI :
. . -.. .
.~ :

- 7 - .

.

1~)42~S
.':'

2 3 ~ ~ 3 / ~ H / \NHC2CH3 xCH3C0 ~ ~ (XI~
~ C2 .,~, .
:; -~0 que l'on traite par un agent a¢ide pour obtenir le prod~it de or~ule YIII cherch~. . ..
~a base orga~ique en présence de laquelle on fait r~agir l~anhydride acétique sur le produit de formule X est .: ~-¦ de préféren¢e la pyridine; mai~ o~ peut égaleme~t employer par ~ :
~ exemple une lutidine ou la collidine.
: , .
~ agent acide que l'on utilise pour traiter le produit d~ formule XI est de préférence l'acide acétique aqueux; mais on peut également utiliser dfautres acides organiques tels .
que par exemple l~acide formique ou l'acide oxalique ou des acides mi~éraux aqueu~ tel~ que par exemple l'acide chlorhy-dxique ou l~acide ~ulfurique.
~ e procédé de l'invention permet d~obt0nir le produit lntermédiaire nou~eau de formule YIII :

i CH ~ C02C~3 NHC02CH3 ; ` ~ ~ E ~ ~HC02aH3 CH3C0 ~ ~ (VIII) : . 2 3 ; : .

~es exemples suivants illu~trent l~in~ention 9anS
1~:
toutefois la limiter.

- 8 - . . :

~,.... ... . . .. . ,, ,, , . .~ , . . . . . . .. . . . . . .

4~25 ~xemple 1 : 4-0-/2'~6'-diamino 2',6'-didesoxy a9 D-glucopy-rannosyl/6-0-/3"-amino 3",4'~26"-tr.~e~S~ x~lohexo~ran=
- nosyl/ 2-déso~y streptamine -Stade 1 ; ethyl 3-amino 3~4,6-tridé~o~ D-x2lohexo~ranno~ide:
___ ___ ___ ___________ _ __________ ____ ______ _ _ ______ On dissout 13,2 g d~éthyl 3-(N-méthyla~ino) 3,4,5-tridésoxy D-~ylohexopyrannoside (préparé selon J. Org. Chem., 1965, 30, 1287? dan~ 500 cm3 de méthanol contenant 18,8 g de méthylate de sodium. On refroidit la ~olution obtenue ~ 5C
et on y ajoute 88g d'iode. On agite pendant quatre heures 0C puis pendant trois heures ~ la température ambiante. On ajoute une solution aqueuse 0,5 N de thiosulfate de ~odium contenant 50 cm3 d'ammom aque jusqu1~ décoloration totale. On éYapore à sec 80U~ vide puis reprend le ré~idu par du chloru-re de méthylène. On sépare le3 sel~ minéraux par filtration et évapore le solvant. ~e produit ainsi obtenu est puri~ié
par chromatographie ~ur ~ilice en éluant avec un mélange chloroforme-i~opropanol-ammoniaque (2-2~ e produit qui contient encore du produit de départ est à nouYeau chromato-graphlé sur silice en éluant avec un mélange chloroforme-métha-nol-tri~thylamine (90-5-5). On obtient ainsi 3,9 g d'éthyl

3-amino 3~4,6-tridésoxy DLxylohexopyranno~ide, qui, recristal-lisé dan~ l~a¢~tate d~éthyle, ~ond en se sublimant ~ers 150C.
Analy~e C8H17N3 ~al¢ulé : C% 54,83 H% 9,78 N% 7,99 lrou~é : 55,1 10, 7,9 Stade 2 : éthyl 3-~N-carbéthoxyamino) 3,4,6-tridésox~ D-x~lo-he~o~rannoside :
On dissout 3,89 g de produit obtenu au stade précédent da~s 30 cm3 d'une solution aqueuse de carbonate de sodium puis on ajoute 2,5 cm3 de ~hloroformiate d'éthyle. On agite pen-dant une heure et demie à température ambiante puis dilue ~
l'eau et extrait au chlorure de méthyl~ne. Après évaporation -.
: 9 ' 104Z~25 du sol~ant, on obtient 4,6 g d'éthyl 3-(N-carbéthoxyamino) ~, -

4~6-tridésoxy DLxylohexopyranno~ide fondant ~ 140C.
- Chromatographie ~ur couche mi~ce ~ur silice R~ : 0,24 (benzène-acétate d'éthyle 1-1)~
Stade _ : ethyl 2-0-benzyl 3-tN-carbéthox~amin~ 3,4~6-tridé-~ox~ DL~lohexo~rannoside :
On mélange 4,6 g de produit obtenu au stade précédent~
4,6 g de bar~te anhydre, 2,3 g de baryte hydratée et 4,6 cm3 ~ de bromure de benzyle dan 15 cm3 de diméthylformamide. On ; 10 agite pendant soixante heure~ ~ la température ambiante et ajoute 150 cm3 d'eau. On essore le produit qui a précipité
pui~ on le la~e ~ l'eau avant de le dissoudre dans un mélange chlorure de méthylène-acétate d'éthyle. On sèche la phase organique sur ~ulfate de s~diu~ et evapore les ~olvants.
ré~idu obtenu est chromatographié ~ur 3ilice en éluant avec un méla~ge benz~ne-acétate d'éthyle (8-2). On obtient 5,8 g d'éthyl 2-0-benzyl 3-(~-carbéthoxyamino) 3,4,6-tridésoxy DLxylohe~opyrannoside fondant ~ une température inférieure 40C.
Chromatographie sur couche mince sur ~ilice :
Rf (mise en é~idence des deux anomères) : 0,23-0,29 (benzene-aoétate dléthyle 8-2).
Stade 4 : 1-0-acét~l 2-0-benz~ ~ (N-oarbéthox~amino) 3~4~6-trideso~y D~l_hex~rannose, anomères ~ et ~ :
0~ dissout 22,3 g de produit préparé au stade précé-dent dan~ 220 cm3 d'acide acétique contenant 22 c~3 d'anhydride scétique. On a~oute, en maintenant la température à 20C, i~ cm3d'acide sulfurique concentré puis on agite pendant qua-tre heures à température ambiante. On verse alors le mélange ~0 réactionnel dan~ l'eau et extrait à l'acétate d'éthyle. On lave la phase organique avec une solution aqueu~e de bicarbo-nate de sodium et à l~eau. On évapore le solvant et chromato~

-- 1 0 -- ;

~0 ~ ~ ~ 2 ~
graphie le résidu æur eilice en éluant avec un mélange éther-hexane 1-1. On obtient d'abord l'anomere ~ du produit atten-du :
Rf : 0,18 (~ilice ; éther-hexane 1-1), pui~ l'anomère ~, F :

Rf : 0,12 (~ili¢e ; éther-he2ane 1-1).
Stade 5 : 4_0-/2_~6'-di- ~ carbométhox~amino)_2'L6'-didé-90X~ 3~4~-di-0-acét~ DL~luco~2~annos~ 6-0-/3'~ -car-béthox~amin~ 2"-0-benz~l 3" 4"~6"-tridéso~ ~ D~lohexo~y-_____ ____ ___~_____ ___~._ _________ _ ____ ~____ _ rannos2~/ 1 3-di-N-carbométhox~ 2~désox~ stre~tamine:
-~
On di~sout 21 g de produit obtenu au stade précédent dans 360 cm3 de dioxanne contenant 5 p.cent d'acide chlorhy-drique gazeux et 180 cm3 de ¢hlorure d'acétyle. On chauffe la solution obtenue pendant une heure ~ 40C pUi9 évapore à
sec ~ou~ vide sans chauffer au delà de 40C. ~e résidu est di~sous dan~ 100 cm3 de dioxane et la 901~tion obtenue e~t ajoutée ~ une ~olution portée-à 60C de 12 g de 3t,4l-di-0-acétyl tétra-~-carbométhoxy néamine dans 200 om3 de dioxanne contenant 12 g de cyanure mercurique. On lais~e en contact pendant ~eize heure~ ~ 60G puis o~ refroidit le mélange ré-actionnel que l'on verse dans une solution aqueu~e de bicar- ;
bonate de sodium. On extrait au chlorure de méthylène et on évapore la phase organique à seo 80U8 vide. On chromatogra-phie le résidu sur ~ilice en éluant a~ec un mélange chloro-forme-ac~tone (7-3). On obtient ainsi 9,2 g de produit atten-du constitué par le mélange des anomères a et ~. Chromatographie ~ur couche mince :
Rf : 0,23 (silice ; chloroforme-acétone 7-3).
Sta_e_6 ~-0-/2~ 6'-diamino 2' 6'_dldé~o~ aL_D-gauco~ran-nos~l~6-Q -1 ~-a~lno_3~' ~" 6"-tridéso3~ ~ DL3y10hexo~ran~os~1/
2-désox~ stre~tamine :
__ ___ ____ __~__ On dissout 9,2 g du produit obtenu au ~tade précédent ~ ' , . ' '' ~ ' ~-~ - ' ,,' ': .:

~ 1~;)4Z4ZS
dans un mélange contenant 150 cm3 d'éthanol, 75 cm3 de chlo- ~-rure de méthylène et 7 cm3 d~acide chlorhydrique 2N. On ajou-te 6,5 ~ de palladium déposé ~ur noir de carbone ~ 10 p. cent, et o~ agite en atmosphère dlhydrogène. Au bout de trois heu- : ~:
res, on refroidit, ~iltre le cataly~eur et alcalinise le fil-i trat ~ l'aide d~une résine échangeuse d'ions de type ammonium quaternaire mise ~ou~ forme basique. On sépare la résine et amène la solution ~ sec 90US vide. ¦
On obtient un solide blanc que 1'on dissout dans ¦80 cm3 d'eau ~ laquelle on ajoute 80 g de baryte. On chauffe à 90C pendant quatre heureæ, refroidit et am~ne ~ pH = 2 avec . ~ -.
une ~olution d'acide sulfurique N. On filtre et alcalini~e le filtrat ~ l'aide d'une résine échangeuse d'ions de type ammonium quaternaire miæe GOU3 forme basique. On sépare la résine et évapore à sec sou~ vide.
~n obtient un produit amorphe que l'on purifie par 1 :
pa~sage sur une colonne de résine échangeuse d'ion~ de type ..
carbox~lique, miæe sous forme ammonium, par élution ~ l'aide d'ammoniaque 0,1 et 0,2 N. ~e prod.uit obtenu est ensuite chromatographié sur silioe à l'aide d'un mélange chloroforme- .
: méthanol-ammoniaque (2-2-1).
On obtient ainsi 250 mg de l'anomère ~ et 870 mg de l'anomère a de 4-0-/2',6'-diamino 2',6'-didésoxy a, DLglucopy-.ran~o~yl/ 6-0-/3"-amino 3n,4'l,6"-tridésoxy a, DLxylohexopyran-no~yl/ 2-désox~ streptamine. 1.
.~ Anomère a : a DO : ~115 (c - 0,5%, eau) Rf : 0,30 (silice, chloroforme-méthanol-ammonia_ : :
Anomère ~ : Ri : 0,38 (mêmes conditions) .~ ~a.3'4'-di-0-acétyl tétra_N-carbométhoxy neamine uti- . :
li~ée au stade 5, peut etre préparée d.e la façon suivante :
' :-. . .
.. ' ` ~ .
_ 12 - :

1~4Z425 Stade 1 : 5~6-0-c~clohe~lidane 3~4~-di-0-acétyl tétra-N-. ____ ______ ~ carbome~thox2 néamine :
____ ___ _ ________ On dissout 38 g de 5~6-0-cyclohexylidène tétra-N-carbométhoxy néamine (préparée selon J. of Antiobiotic~, 1971, page 711) dans un mélange de 240 cm3 de pyridine et 80 cm3 d'anhydride acétique. On laisæe en contact pendant vingt heures ~ la température ambiante puis on é~apore le mélange $. réactionnel ~ sec sous vide. On purifie le résidu obtenu par chromatographie sur ~ilice en éluant avec un mélange chloro-forme-acétone (8-2), On obtient 32 g de 5j6-0-cyclohexylidène 3~,41-di-O-acétyl tétra_N-carbométhox~ néamine.
Chromatographie sur eouche mince : Rf : 0,31 (silice ; chloro-forme-acétone 7-3).
Stade 2 : 3~4'-di-0-acét~l tétra-N-carbométhox~ néamine _______ _ _ ____--___ _ ___ ______ _ ___ _ ________ .
On dissout 31 g du produit obtenu au stade préc~dent ~ -dans 240 c~3 d'acide acétique contenant 60 cm3 d'eau. On ~--chauffe la ~olution à 600a pendant quatre heures sous agita-tion. ~n e~apore à sec sous vide et obtient ainsi 27,5 g de 3~,4t-di-~-acét~l tétra-N-carbométhoxy n~amine sous forme d~un solide incolore.
~hromatographie sur couche mince : Rf : 0,31 (silice ; chloro-forme-méthanol 9-1).
Pré~aration d~une composition pharmaceutique On a réallsé une préparation pour in~ection de formule:
- Produit décrit ~ l'exemple 1............ 50 mg .
- Excipient aqueux ~térile................ .1 cm3 Etude pharmacologi~ue du produit décrit à l~exemple 1 :
.
I L~activité antiba¢térienne a été mesurée in vitro par . ~ . .
la méthode des dilutions en milieu liquide.
On p~épare une série de tubes dans lesquel~ on répar~
tit une même quantité de milieu nutritif. On distribue des . . .
.

. . . . . . . . . ~. , -~4~42S
q-~antites croi~santes de l'antibiotique étudié puis chaque tube est en~emencé avec une ~ouche bact~rienne. Apr~8 une .~-incubation de vingt-quatre, quarante-huit ou soixante-douze heures ~ l~étuve à 37~C, l~inhibition de la croi~sance bacté-rienne e~t appréciée par transillumination, ce qui permet de déterminer les concentration~ minimales i~hibitrices (CMI) du produit exprimées ici en ~g/c~3. ~e pro~uit décrit à l'exem-ple 1 a donné les résultats suivants :

. _ _ . . . . . . .. . . . -Souche~ CMI en ~g/cm3 -:
. . . .. -- . . . ~ ~
24 h -48 h ~2 h . _ __ ~ ..... , .. .
Staphylococcus Oxfoxd U.C. 1061 Penicillino-sen3ible 0,2 0,2 0,2 Staphylococcus aureus U.C.112~
~enicillino-résistant 0,2 0,2 0,5 Streptococcus Hemolyticus 905 20 20 20 .: .
Streptococcu~ ~aecalis 5432 ~100 Bacillus subtilis ~ 0,05 ~: 0,05 ~ 0,05 Escherichia Coli U.C. 1020 1 1 1 P~eudomonas pyocyanea ~100 ; :
Klebsiella pneumoniae 52145 0,2 0,5 ,5 Proteus mirabilis A 235 2 2 2 :
.... ~ ... ~ . ~ '., Ce~ résultat3 montrent la bonne activité antibiotique du ZO ~rodult.

..

. ' : ~
' '.

` ~ 14 ~

.

Claims

Les réalisations de l'invention, au sujet desquelles un droit exclusif de propriété ou de privilège est revendiqué, sont définies comme il suit :

1, Procédé de préparation de la 4-O-/2',6'-diamino 2',6'-didésoxy .alpha.,D-glucopyrannosyl/ 6-O-/3"-amino 3",4",6"-tridésoxy .alpha., D-xylohexopyrannosyl/ 2-désoxy streptamine de formule I :

(I) ainsi que de ses sels d'addition non toxiques et pharmaceuti-quement acceptables avec les acides minéraux ou organiques, caractérisé en ce que l'on fait réagir le produit de formule II :

(II) avec le brome ou l'iode en présence d'un agent alcalin pour obtenir le produit de formule III :

(III) que l'on traite par le chloroformiate d'éthyle en présence d'un agent alcalin pour obtenir le produit de formule IV :

(IV) que l'on fait réagir avec un halogènure de benzyle en présence d'un agent alcalin pour obtenir le produit de formule V :

(V) que l'on traite par l'anhydride acétique dans l'acide acétique en présence d'un acide fort pour obtenir le produit de formule VI :

(VI) que l'on traite par l'acide chlorhydrique anhydre en présence de chlorure d'acétyle au sein d'un solvant organique pour obtenir le produit de formule VII :

(VII) que l'on fait réagir sur le produit de formule VIII :

(VIII) en présence d'un catalyseur pour obtenir un mélange d'anomères .alpha. et .beta. de formules IX et IX' :

(IX) et :
(IX') mélange que l'on traite par l'hydrogène en présence d'un cata-lyseur, puis par une base alcaline et qu'ensuite, on sépare les anomères du mélange résultant pour obtenir l'anomère .alpha. de for-mule I que, si désiré, on soumet à l'action d'un acide minéral ou organique, pour en former le sel non toxique et pharmaceu-tiquement acceptable.

2. Procédé de préparation du produit de formule I et de ses sels non toxiques et pharmaceutiquement acceptables tels que définis à la revendication 1, caractérisé en ce que l'on part du produit de formule VII :
(VII) que l'on fait réagir sur le produit de formule VIII :

(VIII) en présence d'un catalyseur pour obtenir un mélange d'anomères .alpha. et .beta. de formules IX et IX':

(IX) et : (IX') mélange que l'on traite par l'hydrogène en présence d'un cata-lyseur, puis par une base alcaline et qu'ensuite, on sépare les anomères du mélange résultant pour obtenir l'anomère .alpha.
de formule I que, si désiré, on soumet à l'action d'un acide minéral ou organique, pour en former le sel non toxique et pharmaceutiquement acceptable.

3. Le produit de formule I et ses sels non toxiques et pharmaceutiquement acceptables, tels que définis à la revendication 1, chaque fois qu'ils sont obtenus par un procédé
selon la revendication 1 ou ses équivalents chimiques manifestes.

4. Le produit de formule I et ses sels non toxiques et pharmaceutiquement acceptables, tels que définis à la revendication 2, chaque fois qu'ils sont obtenus par un procédé
selon la revendication 2 ou ses équivalents chimiques manifestes.