BRPI0806266A2 - composições alimentìcias que incorporam ácidos graxos de cadeia longa adicionais - Google Patents

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Abstract

COMPOSIçõES ALIMENTìCIAS QUE INCORPORAM áCIDOS GRAXOS DE CADEIA LONGA ADICIONAIS. A presente invenção refere-se ao aprimoramento de itens alimentícios por meio da utilização aumentada de ácido estearidónico derivado de plantas em uma composição que também reduz o teor de ácido linolênico. Muitos ácidos graxos de cadeia longa foram classificados como sendo Èmega 3 e demonstraram fornecer vários benefícios para a saúde, incluindo saúde cardíaca. De acordo com a presente invenção, o ácido estearidónico derivado de plantas (18:4<sym>3) foi incorporado em uma ampla gama de produtos alimentícios pela utilização de uma composição de base com baixo teor de ácido linolênico para aumentar a estabilidade e o prazo de validade, reduzindo, ao mesmo tempo, a necessidade de hidrogenação. A composição do produto pode ser usada como uma composição com base em óleo ou uma farinha processada a partir de sojas com níveis aumentados de ácido estearidónico. Esses alimentos variam de produtos baseados em óleo (molho de saladas, maionese) a produtos derivados do leite (leite, queijo), até alimentos preparados (entradas, acompanhamentos). Além dos benefícios aumentados para a saúde, a presente invenção fornece alimentos ricos em ácidos graxos Èmega-3 que possuem características aprimoradas de armazenamento e/ou em relação ao prazo de validade.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSI- ÇÕES ALIMENTÍCIAS QUE INCORPORAM ÁCIDOS GRAXOS DE CA- DEIA LONGA ADICIONAIS"
CAMPO DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se à utilização de ácido estearidôni- co derivado transgenicamente no desenvolvimento de produtos alimentícios funcionais. Mais especificamente, ela está relacionada a um aprimoramento tanto da qualidade nutricional quanto do prazo de validade de produtos ali- mentícios por meio do uso de ácido estearidônico transgênico derivado de plantas.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
A presente invenção é dirigida a um método para o aprimora- mento de gêneros alimentícios por meio da utilização de novas composições de ácido graxo poli-insaturado de cadeia longa ("LC-PUFA") parcialmente derivado de planta transgênica, em particular aquelas com os atributos posi- tivos de ácidos graxos Ômega-3 e estabilidade aumentada por meio da re- dução de ácido linolênico. Especificamente, o inventor fornece técnicas e métodos para a utilização de LC-PUFA derivado de planta em gêneros ali- mentícios que aprimora a qualidade nutricional quando combinado com óleo de linhagens aprimoradas convencionalmente de plantas produtoras de óleo. No passado, acreditava-se que as gorduras dietéticas eram componentes dietéticos sem valor ou até mesmo prejudiciais. Muitos estudos fizeram uma ligação fisiológica entre gorduras dietéticas e obesidade e outras patologias como, por exemplo, aterosclerose. Considerando essa percepção de baixo valor nutricional, o consumo de gorduras foi desencorajado por muitos no ambiente médico.
No entanto, estudos recentes determinaram que, apesar de suas estruturas biológicas relativamente simples, há alguns tipos de gorduras que parecem melhorar o funcionamento do corpo de várias formas e que podem, na verdade, ser essenciais para certos processos fisiológicos. A ampla clas- se de moléculas de gordura inclui ácidos graxos, isoprenóis, esteroides, ou- tros lipídeos e vitaminas lipossolúveis. Dentre esses estão os ácidos graxos. Os ácidos graxos são ácidos carboxílicos, que possuem de 2 a 26 carbonos em sua "estrutura central", com nenhum ou vários números de insaturações em sua estrutura de carboidratos. Eles geralmente possuem constantes de dissociação (pKa) de cerca de 4,5, o que indica que em condições corporais normais (pH fisiológico de 7,4) a grande maioria estará em uma forma disso- ciada.
Com o aumento da importância nutricional para as gorduras e, em particular, ácidos graxos, muitos na indústria de alimentos começaram a se concentrar na tecnologia de ácidos graxos e de lipídeos como um novo foco para a produção de alimentos. Esse foco tem sido particularmente in- tenso para a produção e incorporação de ácidos graxos Ômega-3 na dieta. Os ácidos graxos Ômega-3 são ácidos graxos poli-insaturados de cadeia longa (18-22 átomos de carbono de comprimento da cadeia) com a primeira das ligações duplas ("insaturações") começando com o terceiro átomo de carbono. Eles são denominados "poli-insaturados" porque suas moléculas possuem duas ou mais "insaturações" de ligações duplas em sua cadeia de carboidratos. Eles são denominados ácidos graxos "de cadeia longa" já que sua estrutura central de carbono possui pelo menos 18 átomos de carbono.
A família LC-PUFA de óleos para composições alimentícias inclui: ácido alfa- linolênico ("ALA"), ácido estearidônico ("SDA"), ácido gama-linolênico (nGLAn)i ácido Iinoleico ("LA"). ALA é o ácido graxo Ômega-3 "base", do qual SDA é feito no corpo por meio de uma série de reações enzimáticas, mas, de acordo com a presente invenção é reduzido para fornecer uma composi- ção de óleo mais saudável. Esses processos de síntese a partir de ALA são denominados "alongamento" (a molécula se torna mais longa por incorpora- ção de novos átomos de carbono) e "dessaturação" (são criadas novas liga- ções duplas), respectivamente. Na natureza, ALA é encontrado basicamente em certas sementes de plantas (por exemplo, linhaça).
Além das dificuldades para simplesmente assegurar um supri- mento de LC-PUFAs para consumo da sociedade, freqüentemente os custos para processar LC-PUFAs em produtos alimentícios são restritivos. Esses ácidos graxos Ômega-3 e alguns dos outros LC-PUFAs podem ser rapida- mente oxidados, produzindo odores e sabores desagradáveis. Para reduzir a taxa de oxidação, os processadores de alimentos devem, portanto, distribuir o óleo em uma condição congelada ou encapsular os ácidos graxos desejá- veis, cada um aumentando enormemente o custo de processamento e o custo conseqüente para o consumidor. Apesar desse gasto aumentado, as empresas de alimentos estão interessadas em fornecer Ômegas-3 e óleos alimentícios geralmente mais saudáveis, pois acreditam que consumidores conscientes com a saúde podem desejar pagar um pequeno acréscimo por uma dieta aprimorada caso um suprimento confiável possa ser desenvolvido.
Junto com o movimento de empresas de alimentos para o desen- volvimento de gorduras e óleos essenciais como um componente importante em uma dieta saudável, os governos começaram a desenvolver regulamen- tações em direção à adoção de LC-PUFAs na dieta. A dificuldade em aten- der a essas necessidades tem sido a incapacidade de desenvolver um su- primento suficientemente grande de óleo Ômega-3 para atender à demanda crescente do mercado. Essas limitações no fornecimento, estabilidade e fon- tes aumentam enormemente os custos e, consequentemente, limitam a dis- ponibilidade de Ômegas-3 dietéticos. Consequentemente, há necessidade de um fornecimento de um suprimento estável em larga escala de Ômega-3 para incluir em formulações de alimentos e rações de uma forma comercial- mente aceitável.
Além disso, o óleo de soja representa dois terços de todo o óleo alimentício consumido nos Estados Unidos. Empresas alimentícias usam o óleo de soja por ele ser abundante e de custo relativamente baixo. Ó óleo de soja é tipicamente baixo em gordura saturada prejudicial e possui sabor e textura desejados pelos consumidores. Atualmente, o óleo de soja é respon- sável por aproximadamente 80%, ou 8,2 milhões de toneladas, do óleo con- sumido nos Estados Unidos, é o óleo mais amplamente usado na produção de alimentos. No entanto, para atender às expectativas do mercado quanto ao prazo de validade, deve ser adicionado hidrogênio ao óleo de soja para aumentar seu prazo de validade e a estabilidade para uso em alimentos pro- cessados, tais como alimentos fritos, produtos assados e salgadinhos. Esse processo de hidrogenação cria gorduras trans.
Infelizmente, as gorduras trans foram ligadas às doenças cardía- cas em função dos achados de que possuem um impacto negativo sobre os perfis do colesterol humano. Com isso em mente, o FDA (Food and Drug Administration - agência governamental americana que regula e fiscaliza a fabricação de comestíveis, drogas e cosméticos) dos Estados Unidos exigiu que os rótulos dos alimentos incluíssem o teor de gordura trans desde 1o de janeiro de 2006. Isso criou uma demanda substancial para que os fornece- dores de óleos dietéticos tivessem níveis menores de gorduras trans. Con- sequentemente, há no mercado uma demanda por uma composição com menor teor de gorduras trans com um perfil que também incluísse outros benefícios identificáveis para a saúde, tais como ácidos graxos Ômega-3, para atender às diretrizes federais e às demandas de consumidores por ali- mentos mais saudáveis.
A presente invenção fornece uma invenção que atende a ambas às necessidades descritas acima. Ela oferece uma alternativa aos ácidos graxos Ômega-3 fornecidos por peixes ou micróbios e fornece um óleo de soja que possui teor mais baixo de ácido linolênico, aprimorando seu perfil de sabor e aumentando o prazo de validade, sem a produção de gorduras trans por meio de hidrogenação. A tecnologia na qual se baseia é a tecnolo- gia convencional de reprodução de plantas, a tecnologia de processamento de óleo e plantas desenvolvidas transgenicamente. As espécies de plantas que são especificamente incluídas dentro do grupo daquelas que poderiam atender à demanda são: sojas, milho e canola, mas também podem incluir outras plantas, se necessário. Após produzidos, os LC-PUFAs da invenção pode ser usados para melhorar as características saudáveis de uma enorme variedade de produtos alimentícios. Essa produção também pode ser esca- lonada, se necessário, para reduzir a necessidade de estoque de peixes e para fornecer componentes essenciais de ácido graxo para operações de aquicultura, cada um desses fatores reduzindo a pressão sobre os estoques de peixes globais.
Surpreendentemente, o inventor verificou que a concentração de LC-PUFAs de fontes da planta transgênica da invenção exige uma concen- tração menor em certo produto alimentício ou bebida para ser fisiologica- mente significativa, e essas faixas estão dentro de parâmetros de volume bem aceitáveis para produtos alimentícios típicos e podem ser usadas para uma variedade mais ampla de gêneros alimentícios.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
A presente invenção engloba a produção de óleo a partir de so- jas transgênicas projetadas para conter quantidades significativas de LC- PUFAs para uso em produtos alimentícios para melhorar a saúde de um consumidor final. Quantidades suficientes de Sojas enriquecidas com LC- PUFA foram desenvolvidas para permitir a produção de óleo de soja com um componente substancial de LC-PUFA. Esse "óleo de LC-PUFA" fornece um sabor limpo inicial, maior estabilidade e prazo de validade mais longo e qua- lidade nutricional aumentada em relação a outras fontes de óleos Ômega-3. Também foram desenvolvidos meios para manter a qualidade do óleo duran- te armazenamento. Foram produzidos vários produtos alimentícios feitos a partir do óleo de LC-PUFA, e constatou-se que eles possuem propriedades de gosto e sensoriais similares, comparados com produtos feitos a partir de óleos convencionais, por exemplo, óleo de soja.
Também de acordo com a presente invenção, também foram feitos testes do prazo de validade de produtos alimentícios, e o óleo de LC- PUFA derivado de plantas possui características substancialmente aprimo- radas quanto ao prazo de validade em relação a outros produtos que contêm Ômega-3. Portanto, uma modalidade preferida da presente invenção é a uti- lização do óleo de LC-PUFA produzido por plantas transgênicas na produ- ção de produtos alimentícios para consumo humano.
Estudos nutricionais demonstraram que, comparado com o áci- do alfa-linolênico, LC-PUFA é convertido cerca de 5 vezes mais eficiente- mente in vivo em EPA. Consequentemente, em outra modalidade da presen- te invenção, o LC-PUFA derivado de plantas pode ser utilizado como um suplemento nutracêutico ou aditivo dietético para certas condições patológi- cas com um prazo de validade prolongado em função de uma taxa de oxida- ção menor.
De acordo com outra modalidade da presente invenção, uma composição de LC-PUFA derivado de plantas pode fornecer um óleo reduzi- do em gorduras trans que podem aprimorar sinergicamente o perfil de saúde do óleo liberado ao também fornecer os benefícios para a saúde do óleo de Ômega-3.
Especificamente, a presente invenção demonstra que podem ser feitos produtos alimentícios aceitáveis com ácido estearidônico, aumen- tando seu prazo de validade além daquele de óleos de PUFA competitivos.
Além disso, o método da presente invenção também permite a otimização de formulações alimentícias para otimizar melhoras da saúde em consumidores finais, na forma de um óleo comestível, com o processamento do óleo ou da composição de óleo, uma extração do grão inteiro para uso em uma formulação de leite de soja ou como uma composição por extração parcial do tipo farinha.
Em uma modalidade adicional da presente invenção, os óleos de PUFA produzidos por plantas transgênicas podem formar a base para a dieta de peixes criados por aquicultura e/ou de produtos desses peixes.
Em uma modalidade adicional da presente invenção, os óleos de PUFA produzidos por plantas transgênicas podem formar a base para a dieta de gado de corte para melhorar as características nutricionais da carne bovina e/ou de produtos da carne bovina. Modalidades adicionais da presen- te invenção também podem melhorar a função reprodutiva.
Em uma modalidade adicional da presente invenção, os óleos de LC-PUFA produzidos por plantas transgênicas podem formar a base para a dieta de porcos para melhorar as características nutricionais da carne de porco e/ou de produtos da carne de porco. Modalidades adicionais da pre- sente invenção também podem melhorar a função reprodutiva.
Em uma modalidade adicional da presente invenção, os óleos de LC-PUFA produzidos por plantas transgênicas podem formar a base para a dieta de galinhas para melhorar as características nutricionais de galinhas e/ou de produtos de galinhas. Modalidades adicionais da presente invenção também podem melhorara função reprodutiva.
Outras características e vantagens dessa invenção ficarão evi- dentes na descrição detalhada seguinte de modalidades preferidas dessa invenção, consideradas com referência às figuras que as acompanham.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
* Figuras que fazem referência a "SDA + Vistive® também com- preendem o óleo de LC-PUFA da invenção.
A Fig. 1 mostra a via biossintética do metabolismo do PUFA.
A Fig. 2 mostra testes por ponto no tempo para informações sensoriais para o Molho Italiano A-E.
A Fig. 3 mostra testes por ponto no tempo para informações sensoriais para molho do tipo Ranch A-E.
A Fig. 4 mostra testes por ponto no tempo para informações sensoriais For Maionese A-D.
A Fig. 5 mostra um gráfico que representa a bioatividade relativa de ácidos graxos Ômega-3.
A Fig. 6 mostra um diagrama de fluxo do processo para a pro- dução de leite de soja.
A Fig. 7 mostra um diagrama de fluxo do processo para a pro- dução de leite de soja de baunilha.
A Fig. 8 mostra um diagrama de fluxo do processo para a pro- dução de margarina.
DESCRIÇÃO DA MODALIDADE PREFERIDA
As abreviações a seguir possuem os significados designados no relatório:
Abreviação:
AA Ácido araquidônico
ALA Ácido a-linolênico
DHA Ácido docosahexanóico
DNA Ácido desoxirribonucleico
EPA Ácido eicosapentanóico
GLA Ácido γ-linolênico LA Ácido Iinoleico
mRNA Ácido ribonucleico mensageiro
PUFA Ácidos graxos poli-insaturados
SDA Ácido estearidônico
Explanação de termos:
Expressão - O processo da transcrição de um gene para produ- zir o mRNA correspondente e a tradução desse mRNA para produzir o pro- duto gênico correspondente (ou seja, um peptídeo, um polipeptídeo ou uma proteína).
Ração - Materiais disponíveis para a alimentação de animais que incluem, sem limitação, forragem, alfafa e concentrados.
Alimento - Substâncias que são ingeridas por seres humanos e contêm nutrientes que podem ser metabolizados para a produção de energi- a.
Gene - DNA cromossômico, DNA de plasmídeo, cDNA, DNA sintético ou outro DNA que codifica um peptídeo, um polipeptídeo, uma pro- teína ou uma molécula de RNA.
Hospedeiro ou organismo hospedeiro - Células de bactérias, fungos, animais e células de animais, plantas e células de planta ou quais- quer partes ou tecidos de plantas incluindo protoplastos, calos, raízes, tubér- culos, sementes, caules, folhas, mudas, embriões e pólen.
Sensação bucal - Significa como a substância é sentida na bo- ca de um ser humano. Com relação aos perfis do teste de sabor, refere-se à viscosidade, textura e suavidade da substância que está sendo testada.
Barra nutricional alimentícia - Como aqui usado, o termo "barra nutricional alimentícia" significa uma barra de alimento projetada para pro- mover a saúde.
Transformação - Refere-se à introdução de ácido nucleico em um hospedeiro receptor.
Transgene - Qualquer pedaço de uma molécula de ácido nucle- ico que é inserido por um técnico em uma célula, ou um ancestral desta, e se torna parte do genoma da planta ou animal que se desenvolve a partir daquela célula. Esse transgene pode incluir um gene que é parcial ou intei- ramente exógeno (ou seja, estranho) à planta ou animal transgênico, ou po- de representar um gene que possui identidade para um gene endógeno da planta ou do animal.
Transgênico - Qualquer célula que inclua uma molécula de áci- do nucleico que foi inserida por um técnico em uma célula, ou um ancestral desta, e se torna parte do genoma da planta ou do animal que se desenvol- ve a partir daquela célula.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
A presente invenção está relacionada a um sistema para um método aprimorado de produção de ácido estearidônico e sua incorporação nas dietas de seres humanos e animais de criação em um esforço para me- lhorar a saúde humana. Essa produção ocorre por meio da utilização de plantas transgênicas projetadas para produzir LC-PUFA em alto rendimento para permitir a incorporação comercial em produtos alimentícios. Para os objetivos da presente invenção, o ácido e as formas de sal de ácidos graxos, por exemplo, ácido butírico e butirato, ácido araquidônico e araquidonato, serão considerados formas químicas intercambiáveis.
A composição de óleo da invenção fornece um perfil de ácido Ii- nolênico menor do que as composições de soja conhecidas, ao mesmo tem- po em que fornece os benefícios do ácido estearidônico derivado de Ômega- 3. A composição de LC-PUFA da invenção contém óleo de soja que possui menos de 3% de ácido linolênico, comparados com 8% para os óleos de soja tradicionais. Isso resulta em um óleo de soja mais estável porque, com menos ácido linolênico, o próprio óleo irá oxidar mais lentamente, resultando em um prazo de validade superior. Também o sabor de ácido linolênico é tal que, com uma composição com menos deste composto, o óleo terá um perfil de sabor mais palatável. Além disso, sojas com menos ácido linolênico exige menos ou nenhuma hidrogenação parcial. Portanto, a produção de gorduras trans indesejáveis no óleo de soja processado pode ser reduzida ou elimina- da, e o óleo correspondente terá um perfil cozimento melhor.
Em relação à FIG. 1, todas as plantas superiores possuem a habilidade para sintetizar os principais PUFAs de 18 carbonos, LA e ALA, e, em alguns casos, SDA (C18:4D3, SDA), mas poucos são capazes de alon- gar e dessaturar ainda mais esses para produzir AA, EPA ou DHA. Portanto, a síntese de EPA e/ou DHA em plantas superiores exige a introdução de vários genes que codificam todas as enzimas biossintéticas necessárias pa- ra converter LA em AA, ou ALA em EPA e DHA. Levando-se em considera- ção a importância dos PUFAs na saúde humana, a produção bem-sucedida de PUFAs (especialmente a classe n-3) em sementes oleaginosas transgê- nicas, de acordo com a presente invenção, pode então fornecer uma fonte sustentável desses ácidos graxos essenciais para uso dietético. A via aeró- bica "convencional" que opera na maioria dos organismos eucarióticos que sintetizam PUFA começa com a Δθ-dessaturação tanto de LA quanto de ALA para gerar ácido γ-linolênico (GLA, 18:3n6) e SDA.
Estabelecimento da composição de óleos
Em relação à Tabela 1a, é importante fornecer uma base do que constitui faixas "normais" de composição de óleo em comparação com as composições de óleo da presente invenção. Uma fonte significativa de dados usada para estabelecer os critérios básicos de composição para óleos e gorduras comestíveis de maior importância tem sido "Ministry of Agriculture, Fisheries and Food" (MAFF) e a "Federation of Oils, Seeds and Fats Associ- ations" (FOSFA) nas instalações da "Leatherhead Food Research Associati- on" no Reino Unido. Deve-se observar também que as figuras que fazem referência a "SDA + Vistive®" também compreendem o óleo de LC-PUFA da invenção.
Para estabelecer dados padronizados significativos, é essencial que sejam coletadas amostras suficientes de origens geográficas represen- tativas, e que os óleos sejam puros em relação às composições visadas. No trabalho de MAFF/FOSFA, mais de 600 amostras comerciais autênticas de sementes oleaginosas vegetais de origem e história conhecidas, geralmente de dez origens geográficas diferentes, foram estudadas quanto a cada um de 11 óleos vegetais. Os óleos extraídos foram analisados para determinar sua composição global de ácido graxo ("FAC"). A FAC na posição 2 da com- posição de triglicerídeo, esterol e tocoferol, o número de carbonos do triglice- rídeo e o valor do iodo, os valores de proteína no óleo, o ponto de fusão e teor gordura sólida, como apropriado, são determinados.
Antes de 1981, os dados da FAC não eram incluídos nos pa- drões publicados, pois não havia dados disponíveis de qualidade suficiente. Em 1981, foram adotados padrões que incluíam faixas da FAC como crité- rios mandatários da composição. O trabalho de MAFF/FOSFA forneceu a base para revisões posteriores dessas faixas.
Em geral, à medida que mais dados se tornaram disponíveis, foi possível propor faixas de ácidos graxos bem mais estreitas e, consequente- mente, mais específicas do que aquelas adotadas em 1981. A Tabela 1a dá exemplos de FAC de óleos que foram adotadas pela "Codex Alimentarius Commission" (CAC) em 1981 e faixas para os mesmos óleos propostas pelo encontro do "Codex Committee on Fats and Oils" (CCFO) ocorrido em 1993. Tabela 1a Considerando o que foi apresentado acima e de acordo com a presente invenção, o óleo rico em LC-PUFA produzido em uma planta de semente oleaginosa recombinante fornece uma composição de óleo não disponível previamente para fabricantes de alimentos. Ele permite a incorpo- ração de um óleo Ômega-3 em produtos alimentícios que não estava pre- sente em quantidades apreciáveis em óleos vegetais típicos, antes da pre- sente invenção. Além disso, o uso desse óleo Ômega-3 é possível sem as preocupações tradicionais com as qualidades sensoriais do alimento ou com o prazo de validade, quando esses óleos são originados tendo peixes ou algas como fontes. Após a liberação do óleo, ele pode ser recolhido e utili- zado para a produção de produtos assados, produtos derivados do leite, pastas, margarinas, produtos esportivos, barras nutritivas e fórmulas para bebês, rações, aquicultura, usos nutracêuticos e medicinais. Cada um pos- suindo um teor nutricional aumentado.
Em relação à Tabela 1b, para ilustrar a utilidade da presente in- venção, vários produtos alimentícios foram/estão sendo escolhidos, repre- sentando uma gama ampla de categorias de alimentos, para determinar o impacto do LC-PUFA e de outros óleos Ômega-3 sobre o sabor e o prazo de validade do produto.
A estabilidade oxidativa, como medida por testes sensoriais do prazo de validade aceitos, é uma característica importante do PUFA que de- termina a vida útil e as características de sabor de gorduras e óleos. A dete- rioração oxidativa em gorduras e óleos pode ser avaliada por métodos quí- micos úmidos como, por exemplo, o valor de peróxido (PV, que mede peró- xidos resultantes da oxidação primária), e valor de p-anisidina (AV, que me- de principalmente 2-alquenais resultantes da oxidação secundária) ou, em alimentos, pode ser avaliada por testes sensoriais do paladar. As categorias selecionadas de alimentos e produtos são as seguintes: <table>table see original document page 15</column></row><table> De acordo com os estudos atuais, o desenvolvimento de produ- tos alimentícios que incorporam LC-PUFA transgênico forneceu várias for- mulações e processos. O desenvolvimento e pesquisas adicionais foram efetuados para otimização do sabor e o aprimoramento das características do prazo de validade. Por exemplo, alimentos ou bebidas que podem conter as composições de LC-PUFA da presente invenção incluem produtos assa- dos e misturas para assar (por exemplo, bolos, brownies, bolinhos, biscoitos, massas, tortas e massas de tortas), gordura vegetal e produtos de óleo (por exemplo, gorduras vegetais, margarinas, óleos para frituras, óleos de cozi- nha e de saladas, óleos de pipoca, molhos de saladas e maionese), alimen- tos que são fritos em óleo (por exemplo, batatas fritas, salgadinhos de milho, salgadinhos do tipo tortilha, outros aperitivos farináceos fritos, rosquinhas e galinha frita), produtos derivados do leite e produtos artificiais derivados do leite (por exemplo, manteiga, sorvete e outras sobremesas congeladas que contêm gordura, iogurte e queijos, incluindo queijos naturais, queijos proces- sados, queijo cremoso, queijo cottage, alimentos de queijo e pastas de quei- jo, leite, creme, creme azedo, soro do leite e creme para café), produtos de carne (por exemplo, hambúrgueres, cachorros quentes, salsichas, lingüiças, mortadela e outras carnes para lanche, carnes em lata, incluindo pa- tês/produtos de carne, guisados, pastas para sanduíche e peixe em lata), análogos de carne, tofu, e vários tipos de pastas de proteína, doces e confei- tos (por exemplo, balas, chocolates, confeitos de chocolate, coberturas e glacês, xaropes, recheios de creme e recheios de frutas), pastas de nozes e vários tipos de sopas, patês, molhos e caldos. Cada um dos exemplos acima compreende diferentes modalidades da presente invenção.
A presente invenção baseia suas formulações em níveis-alvo de óleos Ômega-3 para cada produto alimentício. Esses níveis foram identifica- dos com base na bioequivalência do produto de LC-PUFA. As informações apresentadas na Tabela 2a identificam os níveis-alvo de Ômega 3 por por- ção: TABELA 2a
<table>table see original document page 17</column></row><table>
Com base nessas informações, foram desenvolvidas formula- ções preferidas do LC-PUFA da presente invenção com o nível de óleo a- propriado para liberar os níveis visados por porção. A quantidade adicionada variou entre diferentes aplicações em função das diferenças no tamanho da porção.
As Tabelas 2b-d abaixo refletem as faixas das composições de óleo de LC-PUFA da presente invenção.
TABELA 2b.Óleo de LC-PUFA/Variante-1 (produzido pelas plantas transgênicas da invenção)
<table>table see original document page 17</column></row><table> continuação
<table>table see original document page 18</column></row><table> continuação
<table>table see original document page 19</column></row><table> Tabela 2c <table>table see original document page 21</column></row><table> <table>table see original document page 22</column></row><table> <table>table see original document page 23</column></row><table> Tabela 2d <table>table see original document page 25</column></row><table> <table>table see original document page 26</column></row><table> TABELA 2e Comparação de óleo de base acabado
<table>table see original document page 27</column></row><table>
* O óleo de LC-PUFA da invenção é uma mistura do óleo transgênico "SDA" e do Óleo Vistive.
Para a presente invenção, a fonte primária de ácido estearidô- nico foi o óleo extraído de sojas transgênicas que foram projetadas para produzir níveis altos de ácido estearidônico. As sojas foram processadas em uma instalação de processamento de óleo e o óleo foi extraído de forma consistente com os métodos descritos nos Pedidos de Patente U.S. 2006/0111578 e 2006/0111254.
Para produzir a composição de LC-PUFA da invenção, foi usa- da uma quantidade de óleo de SDA derivado de transgenicamente, e qual- quer óleo de soja líquido foi substituído com óleo Vistive™. Esse óleo retinha os benefícios de um óleo rico em SDA Ômega-3 com muitos dos aprimora- mentos de consistência encontrados nos óleos Vistive™.
Além do óleo, foi feita farinha das sojas transgênicas e sojas de controle típicas das práticas industriais no processamento de farinha de soja integral. Um exemplo de uma formulação alimentícia que utiliza o LC-PUFA da invenção é encontrado nas Tabelas 3a-3c e nas Figuras 2a-2e abaixo. Os atributos gerais dos molhos de estilo italiano de acordo com modalidades preferidas da presente invenção são apresentados nas Tabelas 4a-4c. <table>table see original document page 29</column></row><table> <table>table see original document page 30</column></row><table>
Escala = 0 a 15 Tabela 3a
<table>table see original document page 31</column></row><table> <table>table see original document page 32</column></row><table> Tabela 3 b
<table>table see original document page 33</column></row><table> <table>table see original document page 34</column></row><table> TABELA 3b Molho de salada italiano - atributos de prazo de validade (continuacao)
<table>table see original document page 35</column></row><table> <table>table see original document page 36</column></row><table> TABELA 3c
<table>table see original document page 37</column></row><table> <table>table see original document page 38</column></row><table> Tabela 4a
<table>table see original document page 39</column></row><table> <table>table see original document page 40</column></row><table> <table>table see original document page 41</column></row><table> TABELA 4b: MOLHO DE SALADA DO TIPO ITALIANO_
Processo de produção do molho de salada do tipo italiano:_
<table>table see original document page 42</column></row><table> Tabela 4c
<table>table see original document page 43</column></row><table> De acordo com os métodos da presente invenção, amostras de vários molhos de saladas foram submetidas a um laboratório de análise de alimentos contratado para estudos confirmatórios e análise de várias moda- lidades da invenção. A abordagem geral para os testes do prazo de validade é a avaliação por 5 analistas de atributos na degustação dos molhos e a ob- tenção de um consenso em relação aos atributos e à intensidade (em uma escala de 15 pontos - 0 sendo ausente, 15 sendo extremo) para cada molho. As listas de atributos identificados pelos analistas estão nos documentos em anexo. Atributos adicionais são identificados, se necessário. As característi- cas do teste de atributos são fornecidas abaixo, na Tabela 5, juntamente com os dados do teste sensorial em vários pontos no tempo, na Tabela 6.
O óleo de soja de base VISTIVE, desenvolvido por meio de culti- vo convencional, contém menos de três por cento de ácido linolênico, quan- do comparado com nível típico de oito por cento encontrado em sojas tradi- cionais. O resultado é um óleo de soja mais estável, com menor necessida- de de hidrogenação. Na medida em que sojas com um nível menor de ácido linolênico reduzem a necessidade de hidrogenação parcial, sua aplicação em óleos de soja processados irá reduzir a presença de gorduras trans no óleo de soja processado. Em uma combinação sinérgica com o SDA trans- gênico da invenção, foi desenvolvida uma composição de óleo LC-PUFA que satisfaz tanto as necessidades regulamentares governamentais quanto as necessidades comerciais por óleos dietéticos com um perfil mais saudável. Ele mantém o nível menor de ácido linolênico, ao mesmo tempo em que for- nece os benefícios do óleo Ômega-3 e dos níveis aumentados de tocoferol.
TABELA 5. DEFINIÇÕES DO MOLHO DE LC-PUFA DE ATRIBUTOS SENSORIAIS
APARÊNCIA
Cor amarela A intensidade da cor amarela na amostra, do amarelo-claro ao escuro.
AROMA/SABOR
Aroma total - A intensidade do aroma total da amostra.
Sabor total - A intensidade do sabor total da amostra, incluindo os gostos básicos.
Óleo total - A intensidade de aroma/sabor de qualquer tipo de óleo, incluindo óleo oxidado.
Óleo oxidado - A intensidade de aroma/sabor de óleo oxidado, descrita como óleo velho que passou por oxidação, caracterizado como de papelão, pican- te, de tinta ou de peixe.
Aroma/sabor desagradável total - A intensidade de aroma/sabor que supos- tamente não devia haver no produto, inclui óleo oxidado e outras observa- ções desagradáveis. A natureza da observação desagradável deve ser des- crita.
Maionese/laticínios - A intensidade do aroma/sabor associado à maionese ou ao produto derivado do leite.
Vinagre - A intensidade do aroma/sabor de vinagre branco ou ácido acético. Cebola/alho/ervas - A intensidade de aroma/sabor associado à cebola, ao alho e a todas as ervas verdes secas e frescas.
Azedo - Um dos quarto paladares básicos, percebido primariamente nas laterais da língua; comum aos ácidos.
Salgado - Um dos quarto paladares básicos, percebido primariamente nas laterais da língua; comum ao cloreto de sódio (sal de mesa).
FATORES DA SENSAÇÃO
Pungente - A quantidade de queimação ou irritação da cavidade nasal pro- duzida ao cheirar a amostra, por exemplo, com raiz-rábado.
TEXTURA
Viscosidade pela boca - O grau de espessura da amostra da forma percebi- da quando manipulada na boca.
Impregnação oleosa na boca - A quantidade de impregnação percebida nos tecidos moles da boca.
PÓS-DEGUSTAÇÃO
Pós-degustação total - A intensidade pós-degustação total da amostra.
EXEMPL01
Molho de salada
As tabelas acima representam os dados desenvolvidos para uma modalidade preferida da presente invenção. Favor ver também as Figu- ras 2a-2e para uma representação gráfica dos dados determinados por qua- tro meses. De acordo com os dados aqui apresentados, as amostras que contêm LC-PUFA possuem significativamente menos sabor desagradável do que as formulações de Ômega-3 correspondentes de óleo de peixe e de al- ga, fornecendo o benefício da presença de uma formulação de Ômega-3, sem o prazo de validade substancialmente encurtado e estabilidade limitada. Em função de sabores pungentes e odores extremamente desagradáveis, os óleos derivados de peixes e algas simplesmente não puderam ser testados e foram removidos do período de avaliação acelerada de 3 meses, enquanto a composição de LC-PUFA da invenção não o foi. No geral, as composições de LC-PUFA da invenção demonstram estabilidade aumentada, degradação reduzida e conseqüente prazo de validade aumentado para utilização co- mercial em conjunto com a liberação de Ômegas-3 benéficos na dieta.
Com relação às modalidades específicas de molho de saladas, as composições de LC-PUFA da invenção desenvolvidas utilizadas para mo- lhos do tipo Ranch aprimorados mantiveram seu perfil de sabor por mais tempo do que os óleos de peixe e de alga após armazenamento por 6 me- ses em temperatura ambiente. Para os molhos do tipo italiano, o sistema de sabor mais complexo produz algum mascaramento, mas os molhos que con- têm LC-PUFA da presente invenção possuem novamente menos sabor de- sagradável do que molhos baseados em peixes/algas comparáveis.
Molhos de salada do tipo italiano:
De acordo com a presente invenção, os estudos de prazo de va- lidade, em temperatura ambiente e estudos acelerados, foram completados ao longo de 4 meses. Cada amostra foi avaliada pelo painel treinado de atri- butos em um laboratório de alimentos em 0, 2 e 4 meses em temperatura ambiente e em 1, 2 e 3 meses em temperatura acelerada (35°C). Para mo- lhos do tipo Ranch, as amostras de óleo de peixe e de alga só foram cheira- das por 3 meses em função do sabor e caráter altamente desagradável no ponto de dois meses, não foram testadas após aquele ponto. Todas as ou- tras amostras, incluindo aquelas que contêm o óleo de LC-PUFA da inven- ção, foram avaliadas por 2 meses. Isso é típico para avaliações aceleradas de prazo de validade.
De acordo com os métodos da presente invenção, os molhos do tipo italiano demonstraram estabilidade significativa em termos de sabor em relação aos outros produtos de teste que contêm Ômega-3. O teste acelera- do foi completado ao longo de quatro meses testando a 35°C. Nesse ponto, todos os produtos exibiram odores desagradáveis, com os óleos de peixe demonstrando os piores odores. Significativamente, as formulações de SDA da invenção foram similares à referência de óleo de soja com a presença dos aprimoramentos em termos de composição e perfil de saúde.
De acordo com os métodos da presente invenção, os molhos do tipo Ranch demonstraram melhoras significativas de acordo com parâmetros sensoriais com relação às formulações de óleo de peixe e óleo de alga que contêm outros Ômegas-3. Também de acordo com a invenção, o teste ace- Ierado foi completado. Odores desagradáveis de alta intensidade se desen- volveram nas amostras de peixe e alga em dois meses, enquanto o óleo de LC-PUFA da invenção e o óleo de soja de referência puderam ser avaliados de acordo com parâmetros sensoriais em 3 meses. As amostras de referên- cia e de linhaça exibiram mais sabores característicos e menos sabor desa- gradável do que o óleo de LC-PUFA da invenção. O óleo de LC-PUFA da invenção exibiu mais sabores característicos e menos odores desagradáveis do que as amostras de peixe e alga. Isso demonstra que LC-PUFA aumen- tou o prazo de validade vs. óleos de peixe e de alga. Além disso, o teste em temperatura ambiente foi completado para as formulações de acordo com a presente invenção ao longo de 4 meses. Os resultados indicam que as a- mostras de LC-PUFA da invenção indicam que o produto de LC-PUFA da invenção possui um perfil significativamente menor para odores desagradá- veis em relação às outras fontes de Ômega-3, incluindo óleos de peixe e de alga, incluindo óleos de peixe e de alga.
Os dados para molhos do tipo italiano e Ranch e gráficos que demonstram as características para a avaliação estão anexados nas Tabe- las 1 -11 e nas figuras 2 e 3. EXEMPLO 2
<table>table see original document page 48</column></row><table> <table>table see original document page 49</column></row><table> <table>table see original document page 50</column></row><table> TABELA 6a
<table>table see original document page 51</column></row><table> <table>table see original document page 52</column></row><table> TABELA 6b
<table>table see original document page 53</column></row><table> <table>table see original document page 54</column></row><table> Tabela 6 b
<table>table see original document page 55</column></row><table> <table>table see original document page 56</column></row><table>
Escala= 0 a 15- Observação: a cor indica variância em relação ao óleo de soja de referência no ponto no tempo incial; amarelo=+/- 1,0; TABELA 7a
<table>table see original document page 57</column></row><table> <table>table see original document page 58</column></row><table> TABELA 7b
Processo de produção de molho do tipo Ranch
1. Verificar se o misturador está em boas condições de funcionamento, limpo e livre de poeira e sujeiras, hermeticamente fechado.
2. Ajustar o moinho coloide em 0,45.
3. Ajustar a velocidade do tanque do misturador em 45 hz.
4. Adicionar água no tanque do misturador.
5. Acrescentar conservantes (benzoato, sorbato, EDTA) no tanque do mistu- rador.
6. Fazer uma mistura de goma (goma xantana + 700 g de óleo de soja).
7. Adicionar a mistura ao tanque de Dixie, deixar misturar por 3 minutos.
8. Aumentar a velocidade do tanque para 35 hz.
9. Adicionar os ingredientes secos restantes lentamente ao tanque do mistu- rador.
10. Adicionar gema de ovo e leite em pó cultivado.
11. Aumentar a velocidade do tanque para 45 hz.
12. Adicionar lentamente o óleo de soja restante e, se apropriado, o óleo Ômega 3.
13. Adicionar lentamente o vinagre e o ácido fosfórico.
14. Misturar tudo até que todos os ingredientes estejam incorporados e mis- turados (aproximadamente 30 segundos).
15. Abrir a válvula do tanque do misturador e ajustar a velocidade da bomba em 30 hz. TABELA 7c
PRODUÇÃO DO PRAZO DE VALIDADE RESULTADOS MICROANALÍTICOS MOLHO DO TIPO RANCH
<table>table see original document page 60</column></row><table>
A abordagem geral para os testes do prazo de validade é que 5 analistas treinados nos atributos degustem os molhos e encontrem um con- senso em relação aos atributos e à intensidade (em uma escala de 15 pon- tos - O sendo ausente, 15 sendo extremo) para cada molho. As listas dos atributos identificados pelos analistas estão nos documentos em anexo. Atri- butos adicionais podiam ser identificados, caso necessário. Molho do tipo Ranch cremoso - Ponto no tempo inicial
Comparado como o óleo de soja de referência:
A amostra de óleo de SDA não diferiu por 1,0 ou mais para qualquer um dos atributos. Os avaliadores comentaram que essa amostra tinha um caráter oxidado discreto, discretamente picante.
A amostra aqueles LC-PUFA tinha um teor ligeiramente menor no aroma de cebola/alho/ervas total. Os avaliadores comentaram que essa amostra tinha um caráter discreto de óleo oxidado, ligeiramente rançoso.
A amostra óleo de peixe não diferiu por 1,0 ou mais para qual- quer um dos atributos. Os avaliadores comentaram que essa amostra tinha um caráter picante discreto, e de óleo oxidado discreto. A amostra de óleo de alga tinha uma cor amarela ligeiramente maior. Os avaliadores comentaram que essa amostra tinha um caráter de óleo oxidado muito discreto.
A amostra de óleo de linhaça tinha um sabor desagradável total maior, e um aroma desagradável total e uma sensação bucal oleosa ligeira- mente maiores. Os avaliadores comentaram que essa amostra tinha um li- geiro sabor de peixe.
Para o exemplo atual, as tabelas acima fornecem dados signifi- cativos sobre o sabor e a consistência. No caso do molho do tipo Ranch1 por causa de seu sabor mais sensível, as diferenças entre os molhos feitos com LC-PUFA e suas contrapartes competitivas são mais óbvias. As tabelas aci- ma representam os dados desenvolvidos para uma modalidade preferida da presente invenção. Favor ver também as Figuras 3a-3h para uma represen- tação gráfica dos dados com molho do tipo Ranch. De acordo com os dados aqui apresentados, as amostras que contêm LC-PUFA possuem significati- vamente menos sabor desagradável do que aquelas que contêm os óleos de peixe e de alga. Em função dos sabores pungentes e do odor extremamente desagradável, os óleos derivados de peixes e algas foram simplesmente removidos do período de avaliação acelerada de 3 meses, enquanto os de LC-PUFA não o foram, demonstrando estabilidade aumentada, degradação reduzida e conseqüente prazo de validade aumentado.
EXEMPLO 3
MAIONESE
De acordo com a presente invenção, uma maionese foi prepara- da e testada com o óleo que contém Ômega-3 da invenção, os dados apre- sentados se aplicam a todas as variantes de maioneses e de molhos de sa- ladas, produzidas de diversas formas (moinho coloide, moinho de fritura etc.). Tabela 8a <table>table see original document page 63</column></row><table> TABELA 8b Composição da invenção - Comparação com maionese ba- seada em óleo de peixe
<table>table see original document page 64</column></row><table> continuação
<table>table see original document page 65</column></row><table>
TABELA 8c Composição da invenção -Comparação com maionese ba- seada em oleo de alga
<table>table see original document page 65</column></row><table> continuação
<table>table see original document page 66</column></row><table>
TABELA 8d Composição da invenção - Comparação com maionese ba seada em óleo de linhaça
<table>table see original document page 66</column></row><table> continuação
<table>table see original document page 67</column></row><table>
TABELA 8e Composição da invenção - Comparação com maionese ba seada em PUFA
<table>table see original document page 67</column></row><table> continuação
<table>table see original document page 68</column></row><table>
Faixa da escala = 0 a 15
Observação: a cor indica variância em relação à referência de soja; amarelo = +/-1,0, laranja = +/-1,5 a 2,0, vermelho = /<2,5
TABELA 9a.
FORMULAÇOES E PROCESSC DE MAIONESE DE LC-PUFA
<table>table see original document page 68</column></row><table>
Observações: Sorbato de potássio, concentrado de suco de limão, flavorizantes são ingre- dientes opcionais.
Podem ser feitas versões Iight e com gordura reduzida por redução do nível de gordura e pela adição de amido e goma.
HFCS e outros adoçantes podem ser usados no lugar do açúcar.
Fontes públicas:
21CFR160.10 "Standard of Identity for Mayonnasie" Literatura do produto: "EGGSolutions", "American Egg Board" Literatura do produto: "G.S. Dunn Ltd", "Full Egg Maionese"
Processo: da Iiterature do produto de "G.S. Dunn Ltd" e de práticas industri- ais conhecidas.
1. Hidratar a farinha de mostarda em água por 5 min.
2. Adicionar vinagre, suco de limão (ingrediente alternativo), sal, açúcar à mistura.
3. Adicionar gema de ovo.
Misturar.
4. Adicionar EDTA ao óleo.
5. Adicionar lentamente o óleo à mistura, aumentando a velocidade de agita- ção à medida que ele é adicionado.
6. Misturar e homogeneizar, utilizando um moinho coloide ou alternativo.
TABELA 9b
Processo de maionese - Planta piloto
2. Ajustar o moinho coloide em 30.
3. Primeiro adicionar a água, depois misturar no EDTA.
4. Adicionar a gema de ovo, misturar por 3 min.
5. Pré-misturar a farinha de mostarda, o açúcar e o sal. Adicionar a pré- mistura lentamente até dissolvida e dispersa igualmente.
6. Adicionar os óleos e misturar por 3 minutos, ajustar a velocidade do tan- que do misturadorde Dixie a 35 hz.
7. Adicionar o vinagre lentamente.
8. Misturar até que todos os ingredientes estejam dispersos. Desligar a agi- tação do misturador de Dixie, permitir que o ar saia. 9. Iniciar o moinho coloide. Abrir o tanque do misturador, a válvula, ajustar a velocidade da bomba em 30 hz.
10. Embalarem embalagens individuais.
De acordo com a presente invenção. A abordagem geral para os testes do prazo de validade é que 5 analistas treinados nos atributos degus- tem os molhos e encontrem um consenso em relação aos atributos e à in- tensidade (em uma escala de 15 pontos - 0 sendo ausente, 15 sendo extre- mo) para cada molho. As listas dos atributos identificados pelos analistas estão nos documentos em anexo.
Atributos adicionais podiam ser identificados, caso necessário.
TABELA 9c
<table>table see original document page 70</column></row><table> <table>table see original document page 71</column></row><table>
De acordo com a presente invenção, os seguintes dados foram desenvolvidos após avaliações iniciais. Similar ao exemplo de molhos de saladas, o sabor inicial da maionese que contém LC-PUFA era similar ao controle. A amostra de linhaça foi a mais diferente das outras comparadas.
De acordo com os métodos da presente invenção, os estudos de prazo de validade por dois meses em condições de armazenamento em temperatura ambiente e acelerada foram completados. Todas as amostras no estudo de temperatura acelerada tiveram sabor acentuadamente desa- gradável, com a amostra de óleo de alga contendo as maiores alterações. LC-PUFA teve melhor desempenho do que as outras fontes de óleo que contém Ômega-3. Para o estudo em temperatura ambiente, o óleo de alga exibiu níveis bem maiores de odores desagradáveis do que o óleo de LC- PUFA da invenção. Veja os dados acima nas tabelas 12-14 e nas Figuras 4a-4e.
EXEMPLO 4
LEITE DE SOJA
De acordo com a presente invenção, o leite de soja pode ser preparado de duas formas diferentes. Na primeira, sojas enriquecidas com LC-PUFA são descascadas, fragmentadas em flocos e depois transformadas em farinha de soja integral. O leite de soja é formulado dissolvendo-se pri- meiro a farinha de soja em água, misturando-se e processando-se para ina- tivar as enzimas. A base de soja é filtrada para remover os sólidos adicionais e desgaseificada. Os ingredientes restantes são adicionados, misturados, o produto é então homogeneizado em um homogeneizador de dois estágios, e depois processado por meio de uma unidade de processamento térmico "Ul- tra High Temperature" (UHT). O produto resultante é empacotado e refrige- rado, com um prazo de validade típico de 12 semanas. A seguir, será apre- sentada uma formulação da forma fornecida na Tabela 10, veja também a FIG. 6 for a diagrama de fluxo do processo.
TABELA 10
O exemplo usado também pode ser aplicado a diferentes tipos de unidades de homogeneização e de processamento térmico (vapor direto, vapor indireto etc.). Diferentes sabores de leite de soja, incluindo neutro, chocolate, maçã, laranja, frutas vermelhas etc. podem ser preparados da mesma forma.
Verificou-se que o produto resultante possui sabor aceitável e propriedades bucais agradáveis em comparação com o leite de soja feito de farinha processada da mesma forma, mas sem o aprimoramento de LC- PUFA da presente invenção. De acordo com os dados desenvolvidos de a- cordo com a presente invenção, após um prazo de validade de 9 meses, há apenas ligeiras diferenças no paladar entre as modalidades da presente in- venção aprimoradas com uma composição de LC-PUFA transgênico versus uma composição de controle corn óleo de soja não transgênica que não con- tém ácidos graxos Ômega-3. Isso foi feito tanto para o leite de soja quanto para os smoothies de frutas. Observe que esses são mantidos refrigerados e possuem apenas um prazo de validade de 3 meses na maioria dos estabe- lecimentos comerciais.
A segunda abordagem nesse exemplo é a utilização de proteína de soja isolada, e a adição de óleo de soja enriquecido com LC-PUFA para se obter uma nova composição de produto. A seguir, será apresentada uma formulação da forma fornecida na Tabela 11 com um diagrama de fluxo cor- respondente na FIG. 7.
TABELA 11
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De acordo com a presente invenção, o exemplo apresentado a- cima também pode ser aplicado a diferentes tipos de unidades de homoge- neização e de processamento térmico (vapor direto, vapor indireto etc.). Di- ferentes sabores de leite de soja, incluindo neutro, chocolate, maçã, laranja, frutas vermelhas etc., podem ser preparados da mesma forma. Verificou-se que o produto resultante possui sabor aceitável e propriedades de sensação bucal agradável em comparação com o leite de soja feito com óleo de soja refinado, branqueado e desodorizado. EXEMPLO 5
SMOOTHIES DE FRUTAS
De acordo com uma modalidade preferida da presente invenção, foram desenvolvidos smoothies de frutas a partir de leite de soja. Outras fon- tes de óleo de LC-PUFA também poderiam ser usadas para o desenvolvi- mento de smoothies de frutas em modalidades alternativas. Também de a- cordo com a presente invenção, os processos desenvolvidos para a produ- ção dos smoothies de frutas levam em consideração as propriedades únicas do óleo de LC-PUFA para a melhora da saúde e da nutrição. Foram desen- volvidos dois produtos do tipo smoothie, e foi determinado que ambos os produtos possuem propriedades de prazo de validade prolongado. Durante um processo que envolve a utilização de pasteurização ultraelevada, foi ob- tido um produto que é armazenado refrigerado, com um prazo de validade típico de 12 semanas de outras bebidas refrigeradas. Embora seja aqui des- crito um protótipo de frutas vermelhas variadas, outros sabores podem ser desenvolvidos, incluindo morango, uva, amora, laranja, limão, maçã, abaca- xi, manga, morango-banana e qualquer outra combinação de sabores de frutas.
Na primeira abordagem, o leite de soja é preparado como descri- to na primeira parte do Exemplo 4, utilizando farinha de soja enriquecida com LC-PUFA. Ingredientes adicionais, que incluem estabilizantes, flavori- zantes e frutas, são adicionados antes da homogeneização. A seguir, será apresentada uma formulação usada para o produto:
TABELA 12
SMOOTHIE BASEADO EM SOJA DE FRUTAS VERMELHAS VARIADAS
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A porção da base de soja foi preparada de acordo com o processo descrito no Exemplo 4. O processamento para o restante do produto é des- crito abaixo:
TABELA 13
Procedimentos de preparação:
1. Pesar previamente todos os ingredientes secos.
2. Porção estabilizadora: adicionar água prescrita para a porção estabiliza- dora em um vasilhame de mistura e começar a agitação.
3. Aquecer a água até 43,3 a 48,8°C.
4. Misturar a pectina e o Avicel com uma porção do açúcar seco e adicionar lentamente à água com mistura com cisalhamento elevado. Permitir 5 minu- tos para hidratação.
5. Adicionar o ácido cítrico.
6. porção de leite de soja:
7. Adicionar o citrato de potássio, a Iecitina de soja e o sal.
8. Combine a porção estabilizadora e a porção de leite de soja em um vasilhame de mistura maior, com camisa de vapor.
9. Adicionar os purês, a cor e os flavorizantes, e misturar até ficarem unifor- mes. 10. Verificar o pH. pH esperado de 4,2 ± 0,2.
11. Aquecer até 71,10C e homogeneizar d/s 17,23 ± 3,44 MPa (2500 + 500 psi) (20,68 MPa no total) (3000 psi).
12. Processo de UHT na unidade Microthermics. O processo-alvo é 106,6°C (224°F) por 19 segundos.
13. Resfriar nas seções de resfriamento do Microthermics e preencher dire- tamente nos recipientes.
14. Aplicar o fechamento e colocar as garrafas em um banho-maria resfria- do. Resfriar até < 10°C (50°F).
15. Numerar as garrafas, aplicar os rótulos e refrigerar (refrigerador walk-in PD Warehouse).
Uma segunda abordagem desenvolvida pela presente invenção é quando um óleo enriquecido em LC-PUFA é adicionado a uma formulação que contém proteína de soja isolada. Nessa modalidade, foi desenvolvido um produto de frutas vermelhas variadas, mas pode ser estendido para sa- bores adicionais, como descrito acima. A seguir, será descrita a formulação básica usada em uma modalidade da presente invenção:
TABELA 14
SMOOTHIE BASEADO EM SOJA DE FRUTAS VERMELHAS VARIADAS
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O produto foi desenvolvido de acordo com os métodos da inven- ção e possui a seguinte formulação:
TABELA 15
Procedimentos de preparação:
1. Pesar previamente todos os ingredientes secos.
2. Porção estabilizadora: adicionar água prescrita para a porção estabiliza- dora em um vasilhame de mistura e começar a agitação.
3. Aquecer a água até 43,3 a 48,8°C.
4. Misturar a pectina e o Avicel com uma porção do açúcar seco e adicionar lentamente à água com mistura com cisalhamento elevado. Permitir 5 minu- tos para hidratação.
5. Adicionar o ácido cítrico.
6. Porção de leite de soja: adicionar a água prescrita para a porção de leite de soja em um vasilhame de mistura separado, e começar a agitação.
7. Aquecer a água até 37,7 a 43,33°C (100 a 110°F).
8. Adicionar uma proteína de soja isolada. Misturar bem para dispersar.
9. Adicionar o citrato de potássio, a Iecitina de soja, o sal e o óleo.
10. Combine a porção estabilizadora e a porção de leite de soja em um vasi- lhame de mistura maior, com camisa de vapor.
11. Adicionar o purê congelado de morango, a cor e os flavorizantes, e mis- turar até ficarem uniformes. 10. Verificar o pH. pH esperado de 4,2 ± 0,2.
Os produtos resultantes de ambas as abordagens neste exem- plo eram típicos de uma modalidade de smoothie com sabor de fruta da in- venção com um prazo de validade refrigerada de 12 meses, como desenvol- vido pela presente invenção.
Os dados e as técnicas acima demonstram a produção de um smoothie de frutas vermelhas variadas a partir de leite de soja de acordo com os métodos da invenção. De acordo com uma modalidade da invenção, o óleo de LC-PUFA da invenção fornece diferenças substanciais em relação a outras amostras que contêm Ômega-3.
EXEMPLO 6
PASTAS DO TIPO MARGARINA
TABELA 16
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De acordo com uma modalidade preferida da presente inven- ção, um processo de margarina típico consiste em: a água, o sal, o benzoato de sódio e o sabor de manteiga são misturados em uma fase aquosa. Em relação à FIG. 7, um ingrediente de leite como, por exemplo, soro do leite em pó, caseinato de sódio ou leite em pó, pode ser adicionado à fase aquo- sa. Os óleos, a lecitina, os mono- e diglicerídeos, as vitaminas e os flavori- zantes são misturados e combinados com a fase aquosa e misturados. A emulsão misturada é passada através de uma série de trocadores de calor com a superfície escovada, misturadores dê pino e tubos de repouso (A, B e C unidades respectivamente) para se obter uma temperatura e consistência de preenchimento desejadas.
EXEMPLO 7
MASSA DE BISCOITO
De acordo com a invenção, o óleo de LC-PUFA da invenção também pode ser desenvolvido em produtos alimentícios, incluindo biscoitos. Será fornecida abaixo uma receita para esta utilização.
TABELA 17
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Produção de planta recombinante
Em um método para produzir de forma recombinante uma prote- ína de interesse, um ácido nucleico que codifica uma proteína transgênica pode ser introduzido em uma célula hospedeira. As células hospedeiras re- combinantes podem ser usadas para produzir a proteína transgênica, inclu- indo um ácido graxo desejável como, por exemplo, LC-PUFA, que pode ser secretada ou mantida na semente, na vagem ou em outra porção de uma planta-alvo. Um ácido nucleico que codifica uma proteína transgênica pode ser introduzido em uma célula hospedeira, por exemplo, por recombinação homóloga. Na maioria dos casos, um ácido nucleico que codifica a proteína transgênica de interesse é incorporado em um vetor de expressão recombi- nante.
Em particular, a presente invenção também se dirige às plantas transgênicas e células hospedeiras transformadas que compreendem, em uma orientação 5' para 3', um promotor operacionalmente ligado a uma se- qüência de ácidos nucleicos estrutural heteróloga. Seqüências de ácidos nucleicos adicionais também podem ser introduzidas na planta ou na célula hospedeira, juntamente com o promotor e a seqüência de ácidos nucleicos estrutural. Essas seqüências adicionais podem incluir finalizadores da trans- crição 3', sinais de poliadenilação 3', outras seqüências de ácidos nucleicos não traduzidas, seqüências de trânsito ou de direcionamento, marcadores selecionáveis, intensificadores e operadores.
Seqüências de ácidos nucleicos da presente invenção preferi- das, incluindo vetores recombinantes, seqüências de ácidos nucleicos estru- turais, promotores e outros elementos reguladores, estão descritas acima. Os meios para a preparação destes vetores recombinantes são bem conhe- cidos na técnica. Por exemplo, métodos para a produção de vetores recom- binantes particularmente adequados à transformação de plantas são descri- tos nas Patentes U.S. Nos 4.940.835 e 4.757.011.
Vetores típicos úteis para a expressão de ácidos nucleicos em células e plantas superiores são bem conhecidos na técnica e incluem veto- res derivados do plasmídeo indutor de tumor (Ti) de Agrobacterium tumefa- ciens. Outros vetores recombinantes úteis para a transformação de plantas também foram descritos na literatura.
A célula hospedeira transformada pode geralmente ser qualquer célula que seja compatível com a presente invenção. A célula hospedeira transformada pode ser uma célula procariótica, mais preferivelmente uma célula bacteriana, ainda mais preferivelmente uma célula de Agrobacterium, Bacillus, Escherichia, Pseudomonas e mais preferivelmente ainda, é uma célula de Escherichia coli. Alternativamente, a célula hospedeira transforma- da é preferivelmente eucariótica e, mais preferivelmente, uma célula de plan- ta, levedura ou fúngica. A célula de levedura preferivelmente é uma célula de Saccharomyces eerevisiae, Schizosaceharomyees pombe ou Piehia pastoris.
A célula de planta preferivelmente é uma célula de alfafa, maçã, banana, cevada, feijão, brócolis, repolho, canola, cenoura, mandioca, aipo, frutas cí- tricas, trevo, coco, café, milho, algodão, pepino, alho, uva, linhaça, melão, aveia, oliva, cebola, palma, ervilha, amendoim, pimenta, batata, rábano, col- za (não canola), arroz, centeio, sorgo, soja, espinafre, morango, beterraba, cana de açúcar, girassol, tabaco, tomate ou trigo. A célula hospedeira trans- formada é mais preferivelmente uma célula de canola, milho ou soja; e, mais preferivelmente ainda, uma célula de soja. A célula de soja é preferivelmente uma linhagem de elite de células de soja. Uma "linhagem de elite" é qual- quer linhagem que resultou de cruzamento e seleção para um desempenho agronômico superior.
A planta transgênica da invenção é preferivelmente uma planta de alfafa, maçã, banana, cevada, feijão, brócolis, repolho, canola, cenoura, mandioca, aipo, frutas cítricas, trevo, coco, café, milho, algodão, pepino, a- Iho, uva, linhaça, melão, aveia, oliva, cebola, palma, ervilha, amendoim, pi- menta, batata, rábano, colza (não canola), arroz, centeio, açafroa, sorgo, soja, espinafre, morango, beterraba, cana de açúcar, girassol, tabaco, toma- te ou trigo. A planta hospedeira transformada é, mais preferivelmente ainda, uma célula de canola, milho ou soja; e, destas, mais preferivelmente ainda, uma planta de soja.
Método para a preparação de plantas transgênicas
A invenção é ainda dirigida a um método para a preparação de plantas transgênicas capazes de produzir uma quantidade substancial de LC-PUFA, que compreendem, em uma direção 5' para 3', um promotor ope- racionalmente ligado a uma seqüência de ácidos nucleicos estrutural heteró- loga. A seqüência de ácidos nucleicos compreende a seqüência de LC- PUFA, quando traduzida e transcrita na forma de aminoácido. Outras se- qüências de ácidos nucleicos estruturais também podem ser introduzidas na planta, juntamente com o promotor e a seqüência de ácidos nucleicos estru- tural. Essas outras seqüências de ácidos nucleicos estruturais podem incluir finalizadores da transcrição 3', sinais de poliadenilação 3', outras seqüências de ácidos nucleicos não traduzidas, seqüências de trânsito ou de direciona- mento, marcadores selecionáveis, intensificadores e operadores.
O método geralmente compreende a seleção de uma célula de planta adequada, a transformação da célula de planta com um vetor recom- binante, a obtenção da célula hospedeira transformada e o cultivo da célula hospedeira transformada sob condições eficazes para produzir uma planta.
A planta transgênica da invenção pode geralmente ser qualquer tipo de planta, preferivelmente é uma com valor agronômico, agrícola, orna- mental, econômico ou comercial e, mais preferivelmente, é uma planta de alfafa, maçã, banana, cevada, feijão, brócolis, repolho, canola, cenoura, grão de mamona, aipo, frutas cítricas, trevo, coco, café, milho, algodão, pepino, conífera de Douglas, eucalipto, alho, uva, pinheiro Loblolly, linhaça, melão, aveia, oliva, cebola, palma, pastinaca, ervilha, amendoim, pimenta, álamo, batata, rábano, pinheiro Radiata, colza (não canola), arroz, centeio, açafroa, sorgo, pinheiro Southern, soja, espinafre, morango, beterraba, cana de açú- car, girassol, Docegum, chá, tabaco, tomate, turfa ou trigo. A planta trans- formada é mais preferivelmente uma célula de canola, milho ou soja; e, mais preferivelmente ainda, uma planta de soja. A planta de soja é preferivelmen- te uma planta de soja de elite. Uma planta de elite é qualquer planta de uma linhagem de elite. Linhagens de elite são descritas acima.
A regeneração, o desenvolvimento e o cultivo de plantas a partir de protoplasto ou explantes de plantas transformadas são plenamente ensi- nados na técnica (Gelvin e outros., "PLANT MOLECULAR BIOLOGY MA- NUAL", (1990); e Weissbach e Weissbach, "METHODS FOR PLANT MO- LECULAR BIOLOGY" (1989)). Nesse método, os transformantes são geral- mente cultivados na presença de um meio seletivo que seleciona as células transformadas com sucesso e induz a regeneração dos brotos da planta de- sejada. Esses brotos são obtidos tipicamente em até dois a quatro meses.
Os brotos são então transferidos para um meio indutor de raízes adequado que contém o agente seletivo e um antibiótico para evitar o cres- cimento bacteriano. Muitos dos brotos desenvolverão raízes. Estes são en- tão transplantados para o solo ou para outros meios para permitir a continu- ação do desenvolvimento de raízes. O método, como definido, geralmente irá variar, dependendo da cepa de planta empregada em particular.
De preferência, as plantas transgênicas regeneradas são auto- polinizadas para a geração de plantas transgênicas' homozigotas. Alternati- vamente, o pólen obtido das plantas transgênicas regeneradas pode ser cru- zado com plantas não transgênicas, preferível mente linhagens endogâmicas de espécies economicamente importantes. Inversamente, o pólen de plantas não transgênicas pode ser usado para polinizar as plantas transgênicas re- generadas.
A planta transgênica pode passar a seqüência de ácidos nuclei- cos que codifica a proteína de interesse para sua prole. A planta transgênica é preferivelmente homozigota para o ácido nucleico que codifica a proteína de interesse e transmite aquela seqüência para toda a sua prole mediante reprodução sexual. A prole pode ser desenvolvida a partir de sementes pro- duzidas pela planta transgênica. Essas plantas adicionais podem então ser autopolinizadas para gerar uma linhagem de geração verdadeira de plantas.
A prole dessas plantas é avaliada, dentre outras coisas, quanto à expressão gênica. A expressão gênica pode ser detectada por vários mé- todos comuns (por exemplo, western blotting, imunoprecipitação e ELISA).
Seqüências reguladoras incluem aquelas que dirigem a expres- são constitutiva de uma seqüência de nucleotídeos em muitos tipos de célu- Ias hospedeiras, aquelas que dirigem a expressão da seqüência de nucleotí- deos apenas em certas células hospedeiras (por exemplo, seqüências regu- ladoras tecido-específicas) e aquelas que dirigem a expressão de uma forma regulável (por exemplo, apenas na presença um agente de indução). Será observado por aqueles habilitados na técnica que o design do vetor de ex- pressão pode depender de fatores como, por exemplo, a escolha da célula hospedeira a ser transformada, o nível de expressão da proteína transgênica desejada, e semelhantes. Os vetores de expressão de proteína transgênica podem ser introduzidos em células hospedeiras para, desse modo, produzir proteínas transgênicas codificadas por ácidos nucleicos.
Como aqui usados, os termos "transformação" e "transfecção" referem-se às diversas metodologias reconhecidas na técnica para a intro- dução de ácido nucleico estranho (por exemplo, DNA) em uma célula hos- pedeira, incluindo coprecipitação com fosfato de cálcio ou cloreto de cálcio, transfecção mediada por DEAE-dextrana, lipofecção, eletroporação, microin- jeção e transfecção por mediação viral. Métodos adequados para a trans- formação ou transfecção de células hospedeiras podem ser encontrados em Sambrook e outros. ("Molecular Cloning: A Laboratory Manual", 2a Edição, Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989)), e em outros manuais de labo- ratório.
Aqueles habilitados na técnica podem consultar textos de refe- rência geral para descrições detalhadas de técnicas conhecidas aqui discuti- das ou técnicas equivalentes. Esses textos incluem: Ausubel, e outros., "CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY" (eds., John Wiley & Sons, N.Y. (1989)); Birren e outros., "GENOME ANALYSIS: A LABORA- TORY MANUAL 1: ANALYZING DNA", (Cold Spring Harbor Press, Cold S- pring Harbor, N.Y. (1997)); Clark, "PLANT MOLECULAR BIOLOGY: A LA- BORATORY MANUAL", (Clark, Springer-Verlag, Berlin, (1997)); e Maliga e outros., "METHODS IN PLANT MOLECULAR BIOLOGY", (Cold Spring Har- bor Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1995)). Esses textos podem, evidente- mente, também ser referidos na produção ou utilização de um aspecto da invenção. Entende-se que qualquer um dos agentes da invenção pode ser substancialmente purificado e/ou ser biologicamente ativo e/ou recombinante.
Redução de ácido Iinoleico
Sabe-se que ácidos graxos Ômega-3 e Ômega-6 são ácidos graxos que são necessários na nutrição humana. Ácidos graxos Ômega-6 incluem ácido linoleico e seus derivados. Esses óleos são considerados es- senciais à nutrição humana, pois esses ácidos graxos devem ser consumi- dos na dieta, já que os seres humanos não conseguem produzir outras gor- duras dietéticas ou nutrientes, e eles não podem ser armazenados no corpo. Ácidos graxos desse tipo fornecem energia e também são componentes de células nervosas, membranas celulares, e são convertidos em substâncias semelhantes a hormônio conhecidas como prostaglandinas.
Em relação à Fig. 1, o ácido Iinoleico é um ácido graxo poli- insaturado com 18 carbonos de comprimento que contém duas ligações du- plas. Sua primeira ligação dupla ocorre no sexto carbono a partir da extremi- dade ômega, o que o classifica como um óleo Ômega-6. Como o ácido Iino- Ieico é absorvido e metabolizado no corpo humano, ele é convertido em um ácido graxo derivado, ácido gama-linoleico (GLA), que é convertido em ácido di-homo-gama-linoleico (DGLA) e ácido araquidônico (AA). O DGLA e o AA são então convertidos em dois tipos de prostaglandinas por adição de duas moléculas de carbono e remoção de moléculas de hidrogênio. Há três famí- lias de prostaglandinas, PGE1, PGE2 e PGE3. DGLA é convertido em PGE1, enquanto AA é convertido em PGE2. PGE3 é feito pela conversão de ácidos graxos Ômega-3.
Nos seres humanos, o consumo excessivo de óleos Ômega-6 em relação ao consumo de óleos Ômega-3 pode levar a uma superprodução de prostaglandinas produtoras de inflamação (PGE2) e a uma escassez de prostaglandinas antiinflamatórias (PGE1 e PGE2). Isso, por sua vez, pode levar a vários outros problemas de saúde. Além disso, o consumo diário de ácidos graxos Ômega-6 por consumidores pode ser excessivo em função da presença de ácidos graxos Ômega-6 nos óleos vegetais de cozinha comuns e nos alimentos processados atualmente no mercado. A proporção de con- sumo de ácido graxo de Ômega-6 em relação ao Ômega-3 pode freqüente- mente atingir 20:1 nas dietas ocidentais. Para se obter uma proporção mais desejável, uma modalidade da presente invenção permite a produção au- mentada de LC-PUFA, ao mesmo tempo em que reduz a produção de LA em uma planta transgênica de semente oleaginosa. O óleo resultante con- tém níveis menores de LA, ao mesmo tempo em que permite a produção de quantidades significativas de LC-PUFA, e pode ser usado em diversos pa- peis na indústria de alimentos, desde óleos de cozinha até como ingrediente alimentício.
Elevação dos níveis de tocoferol
Os tocoferóis são antioxidantes naturais e nutrientes essenciais na dieta encontrados em óleos de plantas. Esses antioxidantes protegem as membranas celulares e outras partes lipossolúveis do corpo como, por e- xemplo, colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL), de danos. Pa- rece que ele também protege o corpo contra doenças cardiovasculares e certas formas de câncer, e demonstrou efeitos de estimulação imunológica. De acordo com a presente invenção, aumentos na presença de tocoferóis no óleo de plantas de sementes oleaginosas transgênicas serão benéficos aos consumidores do óleo. Em relação aos objetivos da presente invenção, con- centrações aumentadas de tocoferóis presentes em várias de suas modali- dades serão benéficas como parte de um produto de óleo e também podem reduzir a oxidação do LC-PUFA.
Embora a presente invenção tenha sido descrita com algum de- talhe como forma de ilustração e exemplo com o objetivo de facilitar sua compreensão, ficará evidente para aqueles habilitados na técnica que po- dem ser efetuadas algumas alterações e modificações. Portanto, a descrição e os exemplos não devem ser considerados como Iimitantes do escopo da invenção, o qual é delineado pelas reivindicações em anexo.
Consequentemente, deve-se entender que as modalidades da invenção aqui apresentadas fornecem uma fonte de LC-PUFA aprimorada para utilização em produtos alimentícios não se limitam aos exemplos espe- cíficos. Esses exemplos são ilustrativos da aplicabilidade geral da presente invenção para a ampla gama de itens alimentícios. Com a inclusão de LC- PUFA, esses itens também podem ser feitos com qualidades sensoriais i- guais ou melhores aumentando, ao mesmo tempo, significativamente a qua- lidade nutricional do alimento produzido para consumo humano.
Além disso, os exemplos aqui apresentados são meramente ilus- trativos da aplicação dos princípios da invenção. Ficará evidente a partir da descrição apresentada anteriormente que poderiam ser feitas alterações nas formas, nos métodos de uso e nas aplicações dos elementos da planta deri- vada para aplicações não relacionadas diretamente ao consumo humano. Nesse campo, está incluído o uso de LC-PUFA derivado de plantas para o desenvolvimento de rações com características nutricionais aprimoradas para uso nas indústrias de produção animal, geralmente incluindo, sem Iimi- tação: produção de carne bovina; produção de aves; produção de carne de porco; e/ou aquicultura. Esses usos variantes podem ser adotados sem se afastar do espírito da invenção ou do escopo das reivindicações em anexo. Literatura citada e incorporada por referência:
Essas referências são especificamente incorporadas por refe- rência relevante aos procedimentos suplementares ou a outros detalhes que possam fornecer.
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Claims (92)

1. Produto alimentício que compreende ácido estearidônico que exibe prazo de validade prolongado contra degradação do sabor em que o referido ácido estearidônico é derivado de uma planta transgênica que com-
2. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos 5% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
3. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
4. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo me- nos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
5. Produto de acordo com a reivindicação 1, que exibe ainda es- tabilidade aumentada e níveis menores de gordura trans.
6. Produto de acordo com a reivindicação 1, que compreende ainda tocoferóis.
7. Produto de acordo com a reivindicação 6, que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
8. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimen- tício.
9. Produto de acordo com a reivindicação 2, que compreende ainda proteína de soja.
10. Produto de acordo com a reivindicação 2, em que o referido produto alimentício compreende menos do que cerca de 40% de LA.
11. Produto de acordo com a reivindicação 1, que compreende ainda o fato de que o referido ácido estearidônico é parte de uma fração de óleo de uma planta de semente oleaginosa.
12. Produto de acordo com a reivindicação 3, em que a referida planta de fração de semente oleaginosa é composta de 2% a 50% do referi- do óleo de planta de semente oleaginosa após a semente e/ou o fragmento produzido pela planta ser triturado para liberar a referida fração de óleo.
13. Produto de acordo com a reivindicação 3, em que a referida planta de semente oleaginosa é composta por pelo menos 20% do referido óleo de planta de semente oleaginosa após a semente e/oü o fragmento produzido pela planta ser triturado para liberar a referida fração de óleo.
14. Produto de acordo com a reivindicação 1, que ainda com- preende: a) um ingrediente contendo umidade; e b) estabilizador suficiente para formar uma emulsão, de tal forma que o referido produto alimentício seja uma emulsão estável.
15. Produto de acordo com a reivindicação 6, que compreende adicionalmente um agente quelante.
16. Produto de acordo com a reivindicação 7, que compreende adicionalmente um componente lácteo.
17. Produto de acordo com a reivindicação 6, 7 ou 8 em que o referido produto alimentício é uma maionese.
18. Produto de acordo com a reivindicação 6, em que o referido ingrediente contendo umidade é um componente lácteo.
19. Produto de acordo com a reivindicação 10, em que o referi- do componente lácteo compreende entre 25% - 80% do peso do referido produto.
20. Produto de acordo com a reivindicação 11, em que o referi- do produto alimentício é um iogurte.
21. Produto de acordo com a reivindicação 11, em que o referi- do produto alimentício é congelado.
22. Produto de acordo com a reivindicação 13, em que o referi- do produto alimentício é um sorvete.
23. Produto de acordo com a reivindicação 11, em que o referi- do produto alimentício é uma margarina.
24. Produto de acordo com a reivindicação 6, em que a referida emulsão é do tipo óleo-em-água e em que a referida fase aquosa compre- ende 10% a 80% por peso do referido produto alimentício.
25. Produto de acordo com a reivindicação 16, em que a referi- da fase aquosa compreende água.
26. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 17, em que o referido produto alimentício é um molho de saladas.
27. Produto alimentício de acordo com uma das reivindicações -12, 14, 15 ou 18 em que o referido produto alimentício é estável quando re- frigerado.
28. Produto de acordo com a reivindicação 1, sem nenhum tra- tamento por aquecimento para a preparação do produto alimentício.
29. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que a referida planta transgênica é uma planta de cultivo.
30. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que a referida planta transgênica é uma planta de semente oleaginosa.
31. Produto de acordo com a reivindicação 1, em que a referida planta transgênica é selecionada do grupo que consiste em: canola, milho, linhaça e soja.
32. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 1, em que o referido produto alimentício é selecionado do grupo que consiste em: produtos assados, produtos derivados do leite, pastas, margarinas, produtos esportivos, barras nutritivas e fórmulas para bebês.
33. Produto alimentício animal contendo ácido estearidônico que exibe validade prolongada do produto, em que o ácido estearidônico é deri- vado de uma planta transgênica e em que o referido produto alimentício po- de ser utilizado como ração animal para animais de criação e/ou aquicultura que compreende ainda um nível menor de ácido linolênico. -26. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de criação é gado. -27. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de criação é um suíno. -28. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de criação é uma ave de criação. 29. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de criação é uma galinha. 30. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é salmão. 31. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é truta. 32. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é bagre. 33. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é tilápia.
34. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é um crustáceo.
35. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 33, em que o referido animal de aquicultura é cavala.
36. Produto de acordo com a reivindicação 33, em que o referi- do prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos 5% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
37. Produto de acordo com a reivindicação 33, em que o referi- do prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
38. Produto de acordo com a reivindicação 33, em que o referi- do prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
39. Produto de acordo com a reivindicação 33, que exibe ainda estabilidade aumentada e níveis menores de gordura trans.
40. Produto de acordo com a reivindicação 33, que compreende ainda tocoferóis.
41. Produto de acordo com a reivindicação 40, que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
42. Produto de acordo com a reivindicação 33, que compreende ainda o fato de que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimentício.
43. Produto de acordo com a reivindicação 42, que compreende ainda proteína de soja.
44. Produto de acordo com a reivindicação 42, em que o referi- do produto alimentício compreende menos do que cerca de 40% de LA.
45. Produto contendo ácido estearidônico que exibe estabilidade aumentada e prazo de validade prolongado contra degradação do sabor, em que o ácido estearidônico é derivado de uma planta transgênica e é utilizado como um nutracêutico que compreende ainda um nível menor de ácido Iino- lênico.
46. Nutracêutico contendo ácido estearidônico que exibe prazo de validade prolongado contra degradação do sabor, em que o ácido estea- ridônico é derivado de uma planta transgênica.
47. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, em que o re- ferido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos 5% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
48. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, em que o re- ferido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
49. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, em que o re- ferido prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
50. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, que exibe ainda estabilidade aumentada e níveis menores de gordura trans.
51. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, que com- preende ainda tocoferóis.
52. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 51, que com- preende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
53. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 46, que com- preende ainda o fato de que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimentício.
54. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 53, que com- preende ainda proteína de soja.
55. Nutracêutico de acordo com a reivindicação 53, em que o re- ferido produto alimentício compreende menos do que cerca de 40% de LA.
56. Método de produção de um produto selecionado do grupo que consiste em um produto alimentício, um produto alimentício médico, um suplemento dietético, uma fórmula para bebês e uma substância farmacêuti- ca, em que o produto é suplementado com ácido estearidônico que compre- ende ainda um nível menor de ácido linolênico.
57. Método de acordo com a reivindicação 56 que compreende ainda a diminuição do nível de ácidos graxos diferentes do ácido estearidô- nico.
58. Método de acordo com a reivindicação 56 que compreende ainda a suplementação com tocoferóis.
59. Método de acordo com a reivindicação 56, em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimentício.
60. Método de acordo com a reivindicação 59 que compreende ainda proteína de soja.
61. Método de acordo com a reivindicação 56, em que o referido produto exibe prazo de validade prolongado e níveis menores de gordura trans.
62. Método de acordo com a reivindicação 56, em que o referido ácido estearidônico é derivado de uma soja transgênica.
63. Método de acordo com a reivindicação 59, que compreende ainda a suplementação com ácidos graxos selecionados do grupo de ALA, DHA, EPA, ou ácido oleico.
64. Método de suplementação de uma ração animal que com- preende a combinação de ácido estearidônico derivado de uma planta trans- gênica com nutrientes de rações que compreende ainda um nível menor de ácido linolênico.
65. Método de acordo com a reivindicação 64, em que os nutri- entes de rações são selecionados do grupo que consiste em proteínas, lipí- deos, carboidratos, vitaminas, minerais e ácidos nucleicos.
66. Método de acordo com a reivindicação 64, que compreende ainda a suplementação com tocoferóis.
67. Método de acordo com a reivindicação 64, em que o referido ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto alimen- tício.
68. Método de acordo com a reivindicação 67, que compreende ainda proteína de soja.
69. Método de acordo com a reivindicação 64, em que o referido produto exibe prazo de validade prolongado e níveis menores de gordura trans.
70. Método de acordo com a reivindicação 64, em que o referido ácido estearidônico é derivado de uma soja transgênica.
71. Método para fornecer a um ser humano ou a um animal um suplemento dietético enriquecido com ácido estearidônico que compreende ácido estearidônico derivado de uma planta transgênica em uma forma con- sumível ou usável por seres humanos ou animais que compreende ainda um nível menor de ácido linolênico.
72. Produto de acordo com a reivindicação 71, em que o referi- do prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
73. Produto de acordo com a reivindicação 71, em que o referi- do prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
74. Produto de acordo com a reivindicação 71, que exibe ainda estabilidade aumentada e níveis menores de gordura trans.
75. Produto de acordo com a reivindicação 71, que compreende ainda tocoferóis.
76. Produto de acordo com a reivindicação 75, que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
77. Produto de acordo com a reivindicação 71, em que o referi- do ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido suplemento dietético.
78. Produto de acordo com a reivindicação 72, que compreende ainda proteína de soja.
79. Ingrediente alimentício que compreende um óleo de soja transgênica, em que o referido óleo de soja transgênica compreende pelo menos cerca de 0,2% de SDA e, no máximo, cerca de 40% de LA com base no peso total de ácidos graxos ou derivados destes na composição, e em que o referido óleo de soja compreende pelo menos cerca de 400 ppm de tocoferóis.
80. Produto como definido na reivindicação 79, em que o referi- do prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 10% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
81. Produto como definido na reivindicação 79, em que o referi- do prazo de validade prolongado compreende um prazo de validade pelo menos cerca de 15% mais longo do que uma concentração correspondente de EPA.
82. Produto como definido na reivindicação 79, que exibe ainda estabilidade aumentada e níveis reduzidos de gordura trans.
83. Produto como definido na reivindicação 79, que compreende ainda tocoferóis.
84. Produto de acordo com a reivindicação 83, que compreende ainda pelo menos cerca de 5 ppm de tocoferóis.
85. Produto como definido na reivindicação 79, em que o referi- do ácido estearidônico compreende de 0,1% a 80% do referido produto ali- mentício.
86. Produto de acordo com a reivindicação 80 que compreende ainda proteína de soja.
87. Ingrediente alimentício como definido na reivindicação 86, em que o óleo de soja transgênica compreende pelo menos um agente es- tabilizante selecionado do grupo que consiste em ácido cítrico, t-butil hidro- quinona, ascorbil palmitato, propil gaiato, e combinações destes.
88. Ingrediente alimentício como definido na reivindicação 86, em que o óleo de soja transgênica exibe estabilidade aumentada em compa- ração com um segundo óleo de soja transgênica que compreende um nível similar de SDA1 em que o segundo óleo de soja transgênica não compreen- de estabilizantes adicionados e compreende menos do que cerca de 400 ppm de tocoferóis.
89. Ingrediente alimentício como definido na reivindicação 86, em que o referido óleo de soja transgênica ainda compreende pelo menos -10% de SDA e, no máximo, cerca de 35% de LA com base no peso total de ácidos graxos ou derivados destes na composição, e em que o referido óléo de soja compreende pelo menos cerca de 400 ppm de tocoferóis.
90. Ingrediente alimentício como definido na reivindicação 86, em que o referido óleo de soja transgênica exibe prazo de validade prolon- gado em comparação com uma concentração correspondente de DHA.
91. Aomposição como definido na reivindicação 1, em que a composição é selecionada do produto alimentício selecionado do grupo que consiste em: a) farelo de soja; b) farinha de soja; c) farinha de soja sem gordura; d) leite de soja; e) leite de soja seco por spray; f) concentrado de proteína de soja; g) concentrado de proteína de soja texturizado; h) proteína de soja hidrolisada; i) isolado de proteína de soja; e, j) tofu seco por spray.
92. Produto alimentício de acordo com a reivindicação 1, em que o produto alimentício é uma bebida líquida ou uma mistura de bebida em pó que compreende ainda sacarose, carbonato de cálcio, flavorizante, sal, goma e vitamina.
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