BRPI0709083A2

BRPI0709083A2 - composições que compreendem porphyra e métodos de preparação e utilização destas

Info

Publication number: BRPI0709083A2
Application number: BRPI0709083-8A
Authority: BR
Inventors: Harry Stephen Ewart; Junzeng Zhang; James Colin Barrow
Original assignee: Ocean Nutrition Canada Ltd
Priority date: 2006-03-24
Filing date: 2007-03-23
Publication date: 2011-06-28
Also published as: US20070220806A1; US7691388B2; WO2007144779A2; EP2001311A2; JP2009531413A; CA2646980A1; WO2007144779A3

Abstract

COMPOSIçõES QUE COMPREENDEM PORPHYRA E MéTODOS DE PREPARAçãO E UTILIZAçãO DESTAS. São aqui reveladas composições que compreendem Porphyra, assim como métodos de preparação e utilização de tais composições.

Description

RELATQRIO DESCRITIVO

Pedido de Patente de Invenção para "COMPOSIÇÕES QUECOMPREENDEM PORPHYRA E MÉTODOS DE PREPARAÇÃO EUTILIZAÇÃO DESTAS"

Referência a Pedido de Patente Relacionado

Este pedido de patente reivindica o benefício da prioridade aoPedido de Patente U.S. N0. 11/388,574,. depositado em 24 de março de2006. O Pedido de Patente U.S. N0. 1 1/388,574 é aqui incorporado por estareferência em sua totalidade.

Campo

A matéria revelada se refere de um modo geral a composiçõesque compreendam Porphyra, assim como a métodos de preparação eutilização de tais composições.

Fundamentos

A alga marinha vermelha Porphyra tem alto teor de proteína,vitaminas, minerais e fibras solúveis, e é a alga marinha mais comida ecomercialmente valiosa do mundo. Comumente chamada de "Nori", ela édesenvolvida comercialmente nos mares abertos das costas do Japão, daChina, Coréia e Taiwan em redes que cobrem quase 70.000 hectares. Ascolheitas anuais resultam em mais de 130.000 de toneladas métricas, comvendas que totalizam mais de $6 bilhões de dólares norte-americanos. Omercado para folhas de Nori somente nos Estados Unidos tem um valorestimado de ao menos $50 milhões de dólares anualmente e vem crescendoa uma taxa de acima de 17% ao ano.

O desenvolvimento de técnicas de cultivo para reduzir oscustos, aumentar o rendimento, e para realçar os níveis de vários nutrientesdo Nori tem sido de suma importância. Alguns melhoramentos realizadosnos aspectos técnicos do cultivo do Nori incluem o desenvolvimento detécnicas para o cultivo controlado utilizando-se lagos de água salgadabaseados em terra e para a semeadura artificial de esporos em redes decultivo, que podem ser armazenados até serem despejados no oceano.

Com aproximadamente 70 espécies de Porphyra me todo o

mundo, o melhoramento genético das espécies cultivadas também tem sidocrucial para maximizar o rendimento e desenvolver programas de cultivode bom custo-benefício. Para este fim, os métodos de reprodução clássicos,particularmente a seleção de linhagens, têm sido os mais bem sucedidospara melhorar as técnicas de cultivo de algas marinhas. Por exemplo, emresultado de esforços de seleção de linhagens, existem diversas dúzias decultivares de duas espécies da Porphyra, a P. yezoensis e a P. tenera,cultivadas no Japão. Essas cultivares foram desenvolvidas principalmenteem resultado de um intenso programa de seleção de linhagens no Japão. Aolongo de muitos anos de seleções repetidas, foram feitos melhoramentos noaumento do comprimento médio das frondes, assim como a duração dastemporadas de crescimento dessas duas espécies.

Apesar do sucesso de tais esforços para melhorar as técnicasde cultivo, ainda há um número de desafios, desvantagens e limitações. Emparticular, a seleção de linhagens repetida requer muitos anos de esforçosintensos e requer trabalho muito intenso. Sendo assim, a seleção delinhagens particulares da Porphyra que produza os níveis desejados devários nutrientes pode ser difícil. Além disso, a variabilidade genéticaexistente em uma ou mais populações de interesse pode não ser suficientepara o propósito da seleção de linhagens. Isso pode limitar as técnicas deseleção de linhagens àquelas variantes com alta variabilidade genética,potencialmente impedindo o uso de linhagens que possam conter níveis denutrientes desejados, porém não tenham a variabilidade genética adequadapara a seleção de linhagens.O que se precisa é de métodos que permitam que alguémobtenha múltiplos tipos de composições de Porphyra sem que precisecultivar múltiplas linhagens de Porphyra. São também precisos métodosque possam ser utilizados para produzir composições de Porphyraespecíficas e confeccionadas, porém que possam minimizar o uso detécnicas de cultivo ou de seleção de linhagens especializadas. Composiçõespreparadas por tais métodos, e métodos de utilização de tais composições,são também precisas. São aqui revelados composições e métodos quesatisfazem estas e outras necessidades.

Sumário

De acordo com os propósitos dos materiais, compostos,composições, artigos e métodos, como realizados e amplamente descritosaqui, a matéria revelada, em um aspecto, se refere a compostos ecomposições e a métodos de preparação e utilização de tais compostos ecomposições. Em um outro aspecto, a matéria revelada se refere acomposições que compreendem Porphyra, e a suplementos nutricionais,gêneros alimentícios, e composições farmacêuticas que compreendem taiscomposições. Em ainda um outro aspecto, a matéria revelada se refere amétodos de preparação de tais composições contendo Porphyra. Aindaalém, a matéria revelada se refere a dispositivos de distribuição que contêmtais composições e a métodos de preparação dos dispositivos dedistribuição. Em ainda um outro aspecto, a matéria revelada se refere amétodos de utilização das composições descritas.

Vantagens adicionais serão apresentadas em parte na descriçãoseguinte, e em parte serão óbvias a partir da descrição, ou poderão seraprendidas pela prática dos aspectos descritos abaixo. As vantagensdescritas abaixo serão realizadas e alcançadas por meio dos elementos e dascombinações particularmente assinaladas nas reivindicações anexas. Deveser entendido que tanto a descrição geral anterior quanto a descriçãodetalhada a seguir são exemplificativas e explanatórias apenas, e nãorestritivas.

Breve Descrição dos Desenhos

As Figuras anexas, que são incorporadas e constituem partedesta descrição, ilustram diversos aspectos descritos abaixo.

A Figura 1 é uma apresentação esquemática de umprocedimento de mistura para a produção de composições como reveladasaqui.

A Figura 2 é um histograma que mostra o efeito estimulante do extrato de Nori sobre a absorção de glicose por células preadipócitas 3T3-Ll.

A Fig. 3A é um gráfico dos níveis de glicose no sangue (mM)em camundongos após injeção intraperitoneal de soro fisiológico (controle)ou de extrato de Nori (100 mg/Kg de peso corporal). A Fig. 3B é umgráfico dos níveis de glicose no sangue (mM) em camundongos após aadministração de soro fisiológico (controle) e de extrato de Nori (100mg/Kg de peso corporal) via gavagem oral.

A Fig. 4 é um histograma que mostra uma comparação daprodução de óxido nítrico (μΜ) em células macrófagas RAW264.7 tratadascom extrato de Nori, extrato de Chlorella pyrenoidosa (CPE;RESPONDIN™ da Ocean Nutrition Canada, Darmouth, Canadá), elipopolissacarídeos (LPS).

A Fig. 5 é um histograma que mostra o efeito do extrato deNori, extrato de Chlorella pyrenoidosa (CPE; RESPONDIN™) elipopolissacarídeos (LPS) sobre a proliferação de esplenócitos decamundongos.Descrição Detalhada

Os materiais, compostos, composições, artigos e métodosdescritos aqui podem ser entendidos mais prontamente por referência àseguinte descrição detalhada de aspectos específicos da matéria revelada eaos Exemplos incluídos aí, e aos Desenhos.

Antes que os presentes materiais, compostos, composições,artigos e métodos sejam revelados e descritos, deve ser entendido que osaspectos descritos abaixo não são limitados a métodos sintéticosespecíficos ou a reagentes específicos, uma vez que estes podem,evidentemente, variar. Deve ser também entendido que a terminologiautilizada aqui tem o propósito de descrever aspectos particulares apenas enão tem a intenção de ser limitativa.

Além disso, ao longo deste relatório, várias publicações sãoreferidas. As divulgações dessas publicações em suas totalidades são aquiincorporadas por referência dentro deste pedido de patente para descrevermais totalmente o estado da técnica a que a matéria revelada se relaciona.As referências reveladas são também individual e especificamenteincorporadas aqui por referência pela matéria contida nelas que sejadiscutida na frase em que a referência é utilizada.

Definições Gerais

Neste relatório e nas reivindicações que o seguem, será feitareferência a um número de termos, que devem ser definidos comopossuindo os seguintes significados:

Ao longo do relatório e nas reivindicações deste, a palavra"compreende", e outras formas da palavra, tais como "compreendendo" e"compreender", significa incluindo mas não se limitando a, e não pretendeexcluir, por exemplo, outros aditivos, componentes, inteiros ou etapas.Como utilizadas na descrição e nas reivindicações anexas, asformas singulares "um", "uma", "o" e "a" incluem os seus referentesplurais a não ser que o contexto indique claramente o contrário. Assim, porexemplo, a referência a "uma composição" inclui misturas de duas ou maisde tais composições; a referência a "um extrato" inclui misturas de dois oumais de tais extratos; a referência "ao componente" inclui misturas de doisou mais de tais componentes, e assim por diante.

"Opcional" ou "opcionalmente" significa que o evento oucircunstância subseqüente descrita poderá ou não ocorrer, e que a descrição10 inclui situações em que o evento ou circunstância ocorre e situações emque não ocorre.

Faixas de valores podem ser aqui expressas como sendo de"aproximadamente" um valor particular, e/ou até "aproximadamente" umoutro valor particular. Quando tal faixa é expressa, uma outra modalidadeinclui a partir de um desses valores particulares e/ou até o outro valorparticular. Da mesma forma, quando valores são expressos comoaproximações, pelo uso do antecedente "aproximadamente", deve serentendido que o valor particular forma uma outra modalidade. Deve sertambém entendido que os pontos de extremidade de cada uma das faixassão significativos tanto com relação ao outro ponto de extremidade, comoindependentemente do outro ponto de extremidade. Deve ser tambémentendido que há um número de valores aqui divulgados, e que cada valor étambém aqui divulgado como "aproximadamente" o valor divulgado alémdo próprio valor. Por exemplo, se o valor "10" é divulgado, então"aproximadamente 10" também é divulgado. Deve ser também entendidoque quando um valor é divulgado, "menor ou igual do que" o valor, "maiorou igual do que" o valor, e possíveis faixas entre os valores também sãodivulgadas. Por exemplo, se o valor "10" é divulgado, o "menor ou igualdo que 10" assim como o "maior ou igual do que 10" também sãodivulgados. Também deve ser entendido que ao longo do pedido depatente, dados são providos em um número de diferentes formatos e queesses dados representam pontos de extremidade final e pontos deextremidade inicial, e faixas para qualquer combinação dos pontos dedados. Por exemplo, se um ponto de dado particular "10" e um ponto dedado particular "15" são divulgados, deve ser entendido que maior do que,maior ou igual do que, menor do que, menor ou igual do que, e igual a 10 e15 são também considerados divulgados assim como entre 10 e 15. Deveser também entendido que cada inteiro entre dois inteiros particulares sãotambém divulgados. Por exemplo, se 10 e 15 são divulgados, então 11, 12,13 e 14 são também divulgados.

As referências no relatório e nas reivindicações conclusivas àspartes por peso de um elemento ou componente particular em umacomposição denotam o relacionamento quanto ao peso entre o elemento oucomponente e quaisquer outros elementos ou componentes na composiçãoou artigo para o qual a parte por peso é expressa. Assim, em um compostoque contenha 2 partes por peso do componente X e 5 partes por peso docomponente Υ, X e Y estão presentes a uma razão de peso de 2:5, e estãopresentes em tal razão independentemente de componentes adicionaisestarem contidos no composto.

Um percentual em peso (% em peso) de um componente, a nãoser quando especificado o contrário, se baseia no peso total da formulaçãoou composição na qual o componente está incluído.

Como utilizado aqui, por um "sujeito" quer-se dizer umindivíduo. Portanto, o "sujeito" pode incluir animais domesticados (por ex.,gatos, cães etc.), animais criados (por ex., gado, cavalos, porcos, ovelhas,cabras etc.), animais de laboratório (por ex., camundongos, coelhos, ratos,porquinho-da-índia etc.), e aves. "Sujeito" pode também incluir ummamífero, tal como um primata ou um ser humano.Será agora feita referência em detalhes a aspectos específicosdos materiais, compostos, composições, artigos e métodos revelados, dosquais exemplos são ilustrados nos Exemplos e nos Desenlios apensos.

Materiais e Composições

Os materiais, compostos, composições e componentes quepodem ser utilizados para, podem ser utilizados em conjunto com, podemser utilizados para a preparação de, ou que sejam produtos dos métodos ecomposições revelados, são revelados aqui. Deve ser entendido que,quando combinações, subconjuntos, interações, grupos, etc. dessesmateriais são revelados, ainda que não se faça referência específica a cadauma das várias combinações e permutações individuais e coletivas dessescompostos, cada uma delas é especificamente prevista e descrita aqui. Porexemplo, se uma molécula for revelada e um número de modificações quepode ser feito a um número de substitutos for discutido, cada uma e todasas combinações e permutações que forem possíveis estarão especificamenteprevistas a não ser que seja especificamente indicado o contrário. Em umoutro exemplo, se um composto for revelado e um número de modificaçõesque podem ser feitas a um número de componentes ou resíduos docomposto for discutido, cada uma e todas as combinações e permutaçõesque forem possíveis estarão especificamente previstas a não ser que sejaespecificamente indicado o contrário. Assim, se uma classe decomponentes ou resíduos A, B e C for revelada assim como uma classe desubstitutos ou componentes D, E e F, e um exemplo de uma molécula decombinação ou de uma composição de combinação A-D for revelado,então, mesmo que cada uma das combinações não seja individualmentemencionada, cada uma delas será individualmente e coletivamente prevista.

Assim, neste exemplo, cada uma das combinações Α-E, A-F, B-D, B-E, B-F, C-D, C-E e C-F serão especificamente previstas e deverão serconsideradas reveladas a partir da revelação de A, B e C; e D, E e F; e dacombinação exemplificativa A-D. Da mesma forma, qualquer subconjuntoou combinação destes será também especificamente prevista e revelada.

Assim, por exemplo, o subgrupo Α-E, B-F e C-E terão sidoespecificamente previstos e deverão ser considerados revelados a partir darevelação de A, B e C; D, E e F; e da combinação exemplificativa A-D.

Esse conceito se aplica a todos os aspectos desta publicação, incluindo, masnão se limitando, a etapas em métodos de preparação e utilização dascomposições reveladas. Assim, caso haja uma variedade de etapasadicionais que possam ser realizadas, deve ser entendido que cada umadestas etapas adicionais poderá ser realizada com qualquer aspecto oucombinação de aspectos específicos dos métodos revelados, e que cadauma destas combinações estará sendo especificamente prevista e deverá serconsiderada revelada.

Certos materiais, compostos, composições e componentesrevelados aqui podem ser obtidos comercialmente ou prontamentesintetizados através da utilização de técnicas geralmente conhecidas pelostécnicos no assunto. Por exemplo, os materiais e reagentes iniciaisutilizados na preparação dos compostos e composições revelados seencontram disponíveis através de fornecedores comerciais como a AldrichChemical Co., (Milwaukee, Wis., EUA), Acros Organics (Morris Plains,N.J., EUA), Fisher Scientific (Pittsburgh, Pa., EUA), Sigma (St. Louis,Mo., EUA), Pfizer (Nova York, NY, EUA), GlaxoSmilhKline (Raleigh,NC, EUA), Merck (Whitehouse Station, NJ, EUA), Johnson & Johnson(New Brunswick, NJ, EUA), Aventis (Bridgewater, NJ, EUA), AstraZeneca(Wilmington, DE, EUA), Novartis (Basel, Suíça), Wyeth (Madison, NJ),Bristol-Myers-Squibb (Nova York, NY5 EUA), Roche (Basel, Suíça), Lilly(Indianapolis, IN, EUA), Abbott (Abbott Park, IL, EUA), Schering Plough(Kenilworth, NJ) ou Boehringer Ingelheim (Ingelheim, Alemanha), ou sãopreparados por métodos conhecidos pelos conhecedores do assuntosegundo procedimentos expostos em referências como Fieser and Fieser'sReagents for Organic Synthesis de, Volumes 1-17 (John Wiley and Sons,1991); Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Volumes 1-5 eSupplementals (Elsevier Science Publishers, 1989); Organic Reactions,Volumes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991); Mareh's Advanced OrganicChemistry, (John Wiley and Sons, 4a Ed.); e Larock's ComprehensiveOrganic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989).

Em um aspecto, são aqui reveladas composições quecompreendem Porphyra. Por exemplo, são aqui reveladas composiçõescompreendendo uma mescla de Porphyra com um extrato de Porphyra. Emoutros exemplos, são aqui reveladas composições que compreendem umextrato de Porphyra. Pelo termo "Porphyra" quer-se dizer qualquermembro (por ex., espécie, subespécie, formas) que pertença ao gêneroPorphyra de algas marinhas, inclusive linhagens selecionadas egeneticamente modificadas, independentemente da origem ou lugar decultivo, estagio particular do ciclo de vida (por ex., espermácios,carpósporos, conchocelis, conchósporos, aplanósporos, talo, plântulas, eoutras), ou se foram processadas ou não processadas. Além disso, o termoiiPorphyra" é utilizado aqui como sinônimo da palavra "Nori". Outrosnomes comerciais para Porphyra são Amanori, Ana-amanori, Asakusanori, Beni-tasa, Califórnia laver, Casóg, Chi Choy, Chi Tsai, e ChishimaKuro-nori. Ao preparar mesclas de Porphyra com um extrato de Porphyra,pode-se chegar a composições projetadas especificamente com perfis denutrientes/componentes que não seriam obteníveis pela seleção delinhagens ou técnicas de cultivo apenas. Além disso, os métodos reveladospodem ser utilizados para fornecer composições com perfis denutrientes/componentes consistentes, desse modo reduzindo a variabilidadevista em composições baseadas em Porphyra preparadas por outrosmétodos.Porphyra

Em alguns exemplos revelados aqui, a Porphyra é P. abboíae,P. acanthophora, P. atropurpurae, P. columbina, P. crispata, P. fallax, P.leucostica, P. perforata, P. pseudolanceolata, P. spirilis, P. suborticulata,P. torta, P. umbilicalis, ou P. vietnamensis, incluindo misturas destas.Outros exemplos incluem, mas não se limitam a, P. tenera, P. haitanensis,P. pseudolinearis, P. kuniedae, P. arasaki, P. purpúrea, e P. seriata,incluindo misturas destas. As espécies e variantes de Porphyra reveladasem WO 99/29160 podem também ser utilizadas nos métodos ecomposições revelados aqui. Em alguns exemplos específicos, a Porphyraé P. yezoensis, P. sp. Taiwanese, ou misturas destas.

A Porphyra revelada aqui pode ser obtida de fornecedorescomerciais, ou pode ser cultivada e colhida por métodos revelados aqui, porexemplo, Bold e Wynne, Introduction to the Algae: Structure andReproduction, Prentice-Hall, Inc., 1978; Lobban e Wynne, uThe Biology ofSecrweeds", University of Califórnia Press, 1981; Lubchenco e Cubit, tiTheheteromorphic Iife histories of certain marine algae as adaptations tovariations in herbivory", Ecology 61(3):676-687, 1980; Waaland e outros,iiConchocelis growth andphotoperiodic control of conchosphere release inPorphyra torta", J. Phycology 23:406-414, 1987; Patente US N0 3.195.271,Patente US N0 6.056.476, e Publicação N0 WO 99/29160, que são aquiincorporados por referência ao menos quanto aos seus ensinamentos dePorphyra e métodos para o seu cultivo.

Em alguns exemplos específicos, a Porphyra que pode serutilizada nas composições e métodos revelados aqui pode ser obtida pormétodos revelados na publicação N0 WO 05/051073 da Noritech SeaweedBiotechnologies Ltd. (Yokneam, Israel), que é incorporada aqui comoreferência por seus ensinamentos sobre espécies de Porphyra específicas emétodos para o seu cultivo. Por exemplo, a Porphyra pode ser preparadaem um sistema para cultivo baseado em terra de algas marinhas quecompreenda instalações de laboratórios capazes de produzir esporos eesporófitos em culturas, uma pluralidade de bolsas para permitir amaturação dos esporófitos, uma pluralidade de pequenos tanques deinoculação contendo água do mar enriquecida com nutrientes sobcondições ideais para permitir que os esporófitos maduros cresçam comopedaços de alga marinha, e uma pluralidade de grandes tanques de cultivopara permitir que os pedaços de alga marinha cresçam até seu tamanhonormal. Em um outro exemplo específico, a Porphyra adequada para usonas composições e métodos revelados pode ser preparada pela produção deesporos e esporófitos em culturas mantidas em uma instalação delaboratório, desenvolvendo-se os esporófitos um culturas de suspensão sobcondições de crescimento ideais, transferindo-se os esporófitos madurospara grandes tanques de cultivo para permitir um crescimento rápido,colhendo-se os pedaços de alga-marinha inteiramente desenvolvidos,secando-se e moendo-se as algas marinhas colhidas, e preparando-se a algamarinha resultante para o consumo humano.

Além disso, as seguintes algas marinhas podem ser utilizadasnos métodos revelados ao invés ou adicionalmente à Porphyra: Laminaria,Undaria, Euchema, Gracilaria, Ulva, Sargassuml Codium, Cladophora,Ascophyllum, Palmaria, Furcellaria., Fucus, Enteromorpha, Nemacystus,KjellmanieUa, Hizikia, Gelidium, Gloiopeltis, Hemineura., Spirogyra eAcetabularia, incluindo misturas destas.

Extrato de Porphyra

O extrato de Porphyra pode ser obtido a partir de qualquerPorphyra revelada aqui. Em particular, esse extrato pode ser obtido porextrações aquosas e/ou orgânicas de Porphyra. Solventes de extraçãoadequados que podem ser utilizados incluem, mas não se limitam a, água,soluções aquosas ácidas (por ex., soluções de HCl, H2SO4, H3PO4, HNO3,ou ácido acético), soluções aquosas básicas (por ex., soluções de KOH,NaOH, Na2CO3, K2CO3, NaHCO3 e outras do gênero), metanol, etanol,propanol, isopropanol, hexano, e misturas destes, tais como metanol:água,e etanol:água. Em exemplos específicos, o extrato de Porphyra pode serobtido pelo contato da Porphyra com o solvente de extração, por ex., água,um solvente aquoso, ou um solvente orgânico. A mistura resultante podeopcionalmente ser aquecida e/ou mexida. Geralmente, temperaturas maisaltas e a agitação podem melhorar a eficiência da extração. Tipicamente,quando o solvente de extração é a água ou uma solução aquosa, a misturapode ser aquecida até ao menos aproximadamente 80°C, 70°C, 60°C, 50°C,40°C, 30°C, ou 20°C, sendo que qualquer um dos valores declarados podeformar um ponto de extremidade superior ou inferior quando apropriado.

Em exemplos adequados, a extração pode ser conduzida emaproximadamente 60 até aproximadamente 95°C. Quando solventesorgânicos são utilizados como o solvente de extração, a mistura pode seraquecida até temperaturas abaixo do ponto de ebulição do solvente deextração orgânico. A agitação da mistura pode ser obtida por qualquermétodo conhecido na técnica, por ex., um misturador mecânico, uma barrade mistura magnética, agitação, sonicação, bolhas de gás através damistura, e outros.

A mistura de Porphyra e solvente de extração pode serseparada por vários métodos. Por exemplo, filtração (por ex., papel defiltro, tampas porosas, filtração com gel e ultrafiltração), cromatografia,osmose reversa, diálise ou centrifugação podem ser utilizadas para separaro solvente de extração do resíduo de Porphyra extraído. É previsto aquique o resíduo de Porphyra. extraído possa ser submetido a uma ou maisextrações como descrito acima. É também previsto que quaisquer extraçõessubseqüentes possam ser as mesmas ou diferentes daquelas descritas acima.

Por exemplo, enquanto uma primeira extração pode utilizar um solvente deextração aquosa em altas temperaturas, uma extração subseqüente podeusar um solvente orgânico em temperaturas mais baixas, e vice-versa. Ossolventes de extração particulares e o número de tipos de extração irãodepender da preferência do pesquisador, dos custos, dos nutrientesparticulares que se deseja obter, e outros.

Em um exemplo, um extrato de Nori pode ser obtido por umaou mais extrações aquosas de Nori, onde os vários extratos podem sercombinados e opcionalmente secados. Em outros exemplos, um extrato deNori pode ser obtido extraindo-se o Nori (por ex., pó de Nori da NoritechSeaweed Biotechnologies Ltd. (Yokneam, Israel)) primeiramente comhexano. O resíduo remanescente pode ser extraído novamente com etanol(95%). O resíduo desta extração pode então ser extraído com água natemperatura ambiente. O resíduo da extração com água na temperaturaambiente pode então ser extraído com água em temperaturas elevadas (porex., aproximadamente 80°C).

Em certos exemplos revelados aqui, os extratos obtidos decada extração de Porphyra podem ser combinados e então secados pormétodos tais como secagem por nebulização, liofilização, evaporação, eoutros.

Composições

Várias composições reveladas aqui compreendem Porphyra,como revelada acima, e um extrato de Porphyra, também revelado acima.

As composições reveladas podem ser preparadas mesclando-se a Porphyracom o extrato de Porphyra. A mescla pode ser obtida misturando-se osolvente de extração líquido ou o extrato seco com a Porphyra. Em algunsexemplos, a Porphyra pode ser seca-moída. A mescla da Porphyra e doextrato de Porphyra pode ainda envolver a trituração e/ou a moagem parase produzir um pó fino.A razão de Porphyra para extrato de Porphyra nascomposições reveladas pode ser de aproximadamente 1:10 até 10:1 partespor peso. Exemplos específicos incluem composições que contenhamaproximadamente 1:10, 1:9, 1:8, 1:7, 1:6, 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1, 2:1, 3:1,4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, ou 10:1 partes por peso de Porphyra para extratode Porphyra. Ainda outros exemplos incluem composições que contenhamde aproximadamente 1 até aproximadamente 10, de aproximadamente atéaproximadamente 8, de aproximadamente 4 até aproximadamente 6 partespor peso de Porphyra para aproximadamente 1 até 10, aproximadamente 2até 8, ou aproximadamente 4 até 6 partes por peso de extrato de Porphyra.Em um exemplo particular, as composições podem conteraproximadamente 1:1 partes por peso de Porphyra para extrato dePorphyra.

Nas composições reveladas, a Porphyra e o extrato de Porphyra podem ser obtidos da mesma espécie, linhagem ou variante daPorphyra. Por exemplo, a espécie, linhagem ou variante que for extraída,como revelado aqui, poderá ser a mesma Porphyra que for combinada como extrato para produzir uma composição como revelada aqui. Em outrosexemplos, a Porphyra e o extrato de Porphyra mesclados entre si podemser de uma ou mais espécies, linhagens ou variantes da Porphyra. O uso dediferentes espécies, linhagens ou variantes desta forma pode permitir quealguém prepare composições que tenham as características (por ex., osníveis de nutrientes) de cada uma das fontes de Porphyra diferentes.Assim, pode-se confeccionar composições de maneira que elas contenhamníveis de nutrientes desejados. Por exemplo, pode-se mesclar um extrato deuma espécie de Porphyra que seja rica em certos nutrientes com uma outraespécie de Porphyra que seja rica em outros nutrientes, obtendo-se umacomposição que contenha os nutrientes de ambas espécies de Porphyra.As composições de Porphyra reveladas podem ser um pó decor púrpura de fluxo livre, com cheiro e gosto salgado e picante. Em geral,o conteúdo em umidade das composições reveladas pode ser menor do queaproximadamente 6%, menor do que aproximadamente 5%, ou menor doque aproximadamente 4%. Em um exemplo particular, a composiçãorevelada pode ter um conteúdo em umidade de aproximadamente 4,5%. Oconteúdo em umidade pode ser determinado conforme descrito em OfficialMethods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL, 15a Edição, 1990,950.46, p. 931, que é aqui incorporado como referência por seusensinamentos sobre métodos analíticos relacionados ao conteúdo emumidade.

O resíduo de ignição (Cinzas) das composições reveladas podeser menor do que aproximadamente 40%, menor do que aproximadamente35%), menor do que aproximadamente 30%o, menor do queaproximadamente 25%, com base no peso total da composição. Em umexemplo particular, a composição revelada pode ter um resíduo de igniçãode aproximadamente 29%. O conteúdo em Cinzas pode ser determinadoconforme descrito em Official Methods of Analysis of AOACINTERNATIONAL, 15a Edição, 1990, 920.155c, p. 947. que é aquiincoiporado como referência por seus ensinamentos sobre métodosanalíticos relacionados ao conteúdo em Cinzas.

O total em fibras alimentares das composições reveladas podeser maior do que aproximadamente 25%, maior do que aproximadamente30%), maior do que aproximadamente 35%, maior do que aproximadamente40%o, com base no peso total da composição. Em um exemplo particular, acomposição revelada pode ter aproximadamente 35%> de fibras alimentaresno total. O conteúdo em fibras alimentares pode ser determinado conformedescrito em Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL, 15aEdição, 1990, 993.19/991.42, que é aqui incorporado como referência porseus ensinamentos sobre métodos analíticos relacionados ao conteúdo emfibras alimentares.

O total em lipídios das composições reveladas pode ser maiordo que aproximadamente 0,5%, maior do que aproximadamente 1,0%,maior do que aproximadamente 1,5%, maior do que aproximadamente2,0%, com base no peso total da composição. Em um exemplo particular, acomposição revelada pode ter aproximadamente 1,8% de fibras alimentaresno total. O conteúdo em fibras alimentares pode ser determinado conformedescrito em Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL, 15aEdição, 1990, 963.15 (soxhlet), que é aqui incorporado como referência porseus ensinamentos sobre métodos analíticos relacionados ao conteúdo emfibras alimentares.

As composições reveladas podem conter diversos pigmentos.Por exemplo, as composições reveladas podem conter de aproximadamente7,0 a aproximadamente 11,0; de aproximadamente 8,0 atéaproximadamente 1,0; ou aproximadamente 9,0 (por ex., 9,11) mg/g deficoeritrina. Em um outro exemplo, as composições reveladas podemconter de aproximadamente 3,0 a aproximadamente 6,0; deaproximadamente 4,0 até aproximadamente 5,0; ou aproximadamente 4,5(por ex., 4,63) mg/g de ficocianina. Em ainda outro exemplo, ascomposições reveladas podem conter de aproximadamente 0,1 aaproximadamente 0,5; de aproximadamente 0,15 até aproximadamente0,35; ou aproximadamente 0,25 (por ex., 0,29) mg/g de clorofila a. Emainda um outro exemplo, as composições reveladas podem conter deaproximadamente 3,0 a aproximadamente 6,0; de aproximadamente 0,050até aproximadamente 0,075; ou aproximadamente 0,060 (por ex., 0,054)mg/g de luteína. Em mais um exemplo, as composições reveladas podemconter de aproximadamente 0,010 a aproximadamente 0,050; deaproximadamente 0,015 até aproximadamente 0,035; ou aproximadamente0,025 (por ex., 0,027) mg/g de beta-caroteno. Métodos de determinação dasquantidades de fico eritrina e de ficocianina são descritos em Zhang eoutros, "Analytical approach to the discoloration of edible laver 'Nori' inthe Ariake Sea.", Anal. Sci., 20:37-43, 2004. Métodos de determinação dasquantidades de clorofila a, luteína e beta-caroteno são descritos em Li eoutros, "Phytoplankton pigment analysis by HPLC and ils applications inalgal community investigations", Bot. Buli. Acad. Sin., 43:283-290, 2002.Essas referências são aqui incorporadas por seus ensinamentos sobre aanálise de pigmentos.

Também são reveladas composições que podem ter atividadeantioxidante (isto é, capacidade de absorção de radicais de oxigênio (ensaioORAC)), de aproximadamente 40 até aproximadamente 60, deaproximadamente 45 até aproximadamente 55, ou de aproximadamente 50(por ex., 53) μιηοΐ ET/g. Métodos de determinação da atividadeantioxidante (ORAC) são descritos em Huang e outros, "High-throughputassay of oxygen radical absorbance capacity (ORAC) using a multichannelliquid handling system coupled with a microplate fluorescence reader in96-well formai", J. Agr. Food Chem., 50:4437-4444, 2002, que é aquiincorporado como referência por seus ensinamentos sobre métodos dedeterminação de atividade antioxidante.

As composições reveladas podem também conter váriosaminoácidos e proteínas. Por exemplo, o conteúdo total em proteína dascomposições reveladas pode ser de aproximadamente 25 aaproximadamente 50, de aproximadamente 30 a aproximadamente 40, oude aproximadamente 35% (por ex., 32,5%), com base no peso total dacomposição. O conteúdo total em proteína pode ser determinado conformedescrito em em Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL,15a Edição, 1990, 981.10, que é aqui incorporado como referência por seusensinamentos sobre métodos analíticos relacionados à determinação doconteúdo em proteínas.

Em outros exemplos, o conteúdo total em aminoácidosessenciais das composições reveladas pode ser de aproximadamente 7,0 atéaproximadamente 9,0, ou de aproximadamente 8,5% (8,3%), com base nopeso total da composição. Em ainda outros exemplos, as composiçõesreveladas podem ter de aproximadamente 10 a aproximadamente 30, deaproximadamente 15 a aproximadamente 25, ou de aproximadamente 20%(por ex., 22,02%) de total de aminoácidos condicionalmente essenciais ounão-essenciais, com base no peso total da composição.

Os aminoácidos específicos que podem estar presentes nascomposições reveladas incluem, mas não se limitam a, isoleucina, que podeestar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 6, aomenos aproximadamente 7, ao menos aproximadamente 8, ou ao menosaproximadamente 9 mg/g (por ex., aproximadamente 8,91 mg/g); leucina,que pode estar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente14, ao menos aproximadamente 16, ao menos aproximadamente 17, ou aomenos aproximadamente 18 mg/g (por ex., aproximadamente 17,20 mg/g);lisina, que pode estar presente em uma quantidade de ao menosaproximadamente 10, ao menos aproximadamente 11, ao menosaproximadamente 12, ou ao menos aproximadamente 13 mg/g (por ex.,12,61 mg/g); metionina, que pode estar presente em uma quantidade de aomenos aproximadamente 2, ao menos aproximadamente 3, ao menosaproximadamente 4, ou ao menos aproximadamente 5 mg/g (por ex.,aproximadamente 4,30 mg/g); fenilalanina, que pode estar presente emuma quantidade de ao menos aproximadamente 6, ao menosaproximadamente 7, ao menos aproximadamente 8, ou ao menosaproximadamente 9 mg/g (por ex., aproximadamente 8,73 mg/g); treonina,que pode estar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente10, ao menos aproximadamente 12, ao menos aproximadamente 14, ou aomenos aproximadamente 16 mg/g (por ex., aproximadamente 14,62 mg/g);triptofano, que pode estar presente em uma quantidade de ao menosaproximadamente 0,1, ao menos aproximadamente 1, ao menosaproximadamente 1,5, ou ao menos aproximadamente 2,0 mg/g (por ex.,aproximadamente 1,67 mg/g); valina, que pode estar presente em umaquantidade de ao menos aproximadamente 10, ao menos aproximadamente12, ao menos aproximadamente 14, ou ao menos aproximadamente 16mg/g (por ex., aproximadamente 14,95 mg/g); alanina, que pode estarpresente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 25, ao menosaproximadamente 30, ao menos aproximadamente 35, ou ao menosaproximadamente 40 mg/g (por ex., aproximadamente 36,09 mg/g);arginina, que pode estar presente em uma quantidade de ao menosaproximadamente 20, ao menos aproximadamente 25, ao menosaproximadamente 30, ou ao menos aproximadamente 35 mg/g (por ex.,aproximadamente 1,67 mg/g); ácido aspártico, que pode estar presente emuma quantidade de ao menos aproximadamente 15, ao menosaproximadamente 20, ao menos aproximadamente 25, ou ao menosaproximadamente 30 mg/g (por ex., aproximadamente 25,41 mg/g); cistina,que pode estar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente5, ao menos aproximadamente 6, ao menos aproximadamente 7, ou aomenos aproximadamente 8 mg/g (por ex., aproximadamente 7,20 mg/g);ácido glutâmico, que pode estar presente em uma quantidade de ao menosaproximadamente 25, ao menos aproximadamente 30, ao menosaproximadamente 35, ou ao menos aproximadamente 40 mg/g (por ex.,aproximadamente 37,94 mg/g); glicina, que pode estar presente em umaquantidade de ao menos aproximadamente 12, ao menos aproximadamente15, ao menos aproximadamente 17, ou ao menos aproximadamente 20mg/g (por ex., aproximadamente 17,46 mg/g); histidina, que pode estarpresente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 1, ao menosaproximadamente 2, ao menos aproximadamente 3, ou ao menosaproximadamente 4 mg/g (por ex., aproximadamente 3,39 mg/g); prolina,que pode estar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente7, ao menos aproximadamente 9, ao menos aproximadamente 11, ou aomenos aproximadamente 13 mg/g (por ex., aproximadamente 11,26 mg/g);tirosina, que pode estar presente em uma quantidade de ao menosaproximadamente 5, ao menos aproximadamente 6, ao menosaproximadamente 7, ou ao menos aproximadamente 8 mg/g (por ex.,aproximadamente 7,04 mg/g); ou taurina, que pode estar presente em umaquantidade de ao menos aproximadamente 9, ao menos aproximadamente10, ao menos aproximadamente 11, ou ao menos aproximadamente 12mg/g (por ex., aproximadamente 11,49 mg/g). Métodos de determinação doconteúdo em aminoácidos são descritos em Bidlingmeyer e outros, "Ropidanalysis of amino acids using pre-column derivatization,Chromatography 336:93-104, 1984; Heinrikson e Meredith5 "Amino acidanalysis by rever phase HPLC: pre-column derivatization wilhphenylisothiocyanato", Anal. Biochem. 136:65-74, 1984; e Cohen eStrydom, "Amino acid analysis utilizing phenylisothiocyanatoderivatives", Anal Biochem. 174:1-16, 1988, os quais são todosincorporados aqui como referências por seus ensinamentos sobre métodospara determinar o conteúdo em aminoácidos.

As vitaminas específicas que podem estar presentes nascomposições reveladas incluem, mas não se limitam a, vitamina C, quepode estar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 0,1;ao menos aproximadamente 0,2; ao menos aproximadamente 0,3, ou aomenos aproximadamente 0,4 mg/g (por ex., aproximadamente 0,39 mg/g);Bl (Tiamina), que pode estar presente em uma quantidade de ao menosaproximadamente 15, ao menos aproximadamente 17, ao menosaproximadamente 19, ou ao menos aproximadamente 21 μg/g (por ex.,aproximadamente 19,04 μg/g); B2 (Riboflavina), que pode estar presenteem uma quantidade de ao menos aproximadamente 35, ao menosaproximadamente 40, ao menos aproximadamente 45, ou ao menosaproximadamente 50 μg/g (por ex., 46,02 μg/g); B3 (Niacina), que podeestar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 115, aomenos aproximadamente 130, ao menos aproximadamente 145, ou aomenos aproximadamente 160 μg/g (por ex., 141,24 μg/g); B6 (Piridoxina),que pode estar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente9, ao menos aproximadamente 10, ao menos aproximadamente 11, ou aomenos aproximadamente 12 μg/g (por ex., 11,11 μg/g); ou ácido fólico,que pode estar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente7, ao menos aproximadamente 8, ao menos aproximadamente 9, ou aomenos aproximadamente 10 μg/g (por ex., 9,20 μg/g).

Métodos para determinar o conteúdo em vitamina C sãodescritos em Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL, 17aEdição, 2000, 967.22. Métodos para determinar o conteúdo em vitaminaBl são descritos em Offieial Methods of Analysis of AOACINTERNATIONAL, 17a Edição, 2000, 942.23 e 986.27, assim como emReyes e Subryan, "An improved method of simultaneous ITPLC andthiamin in seleeted cerealproducts, J. Food Composition & Anal., 2(1):41-47, 1989. Métodos para determinar o conteúdo em vitamina B2 sãodescritos em OfficialMethods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL, 17aEdição, 2000, 970.65 981.15, e 985.31, assim como em Reyes e Subryan,"An improved method of simultaneous HPLC and thiamin in seleetedcereal products, J. Food Composition & Anal., 2(l):41-47, 1989. Métodospara determinar o conteúdo em vitamina B3 são descritos em OfficialMethods of Analysis of AOACINTERNATIONAL, 17a Edição, 2000, 960.46944.13, e 985.34, assim como em USFDA: "Methods for MicrobiologicalAnalysis of Selected Nutrients ", AOAC, 1996. Essas referências são todaselas aqui incorporadas por seus ensinamentos sobre a análise de vitaminas.

O minerais específicos que podem estar presentes nascomposições reveladas incluem, mas não se IiiTiitam a, cálcio, que podeestar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 1, aomenos aproximadamente 2, ao menos aproximadamente 3, ou ao menosaproximadamente 4 mg/g (por ex., 3,48 mg/g); potássio, que pode estarpresente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 50, ao menosaproximadamente 55, ao menos aproximadamente 60, ou ao menosaproximadamente 65 mg/g (por ex., 62,1 mg/g); magnésio, que pode estarpresente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 4, ao menosaproximadamente 5, ao menos aproximadamente 6, ou ao menosaproximadamente 7 mg/g (por ex., 6,3 mg/g); manganês, que pode estarpresente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 0,0075, aomenos aproximadamente 0,010, ao menos aproximadamente 0,025, ou aomenos aproximadamente 0,050 mg/g (por ex., 0,026 mg/g); sódio, quepode estar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 6,ao menos aproximadamente 8, ao menos aproximadamente 10, ou aomenos aproximadamente 12 mg/g (por ex., 10 mg/g); fósforo, que podeestar presente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 6, aomenos aproximadamente 7, ao menos aproximadamente 8, ou ao menosaproximadamente 9 mg/g (por ex., 8,45 mg/g); ou zinco, que pode estarpresente em uma quantidade de ao menos aproximadamente 0,0075, aomenos aproximadamente 0,01, ao menos aproximadamente 0,025, ou aomenos aproximadamente 0,05 mg/g (por ex., 0,033 mg/g).

As composições reveladas podem possuir baixos níveis demetais pesados, muitos dos quais afetam a saúde adversamente quandopresentes em níveis maiores. Por exemplo, as composições reveladaspodem possuir menos do que aproximadamente 7, menos do queaproximadamente 6, menos do que aproximadamente 5, ou menos do queaproximadamente 4 ppm (por ex., 5,6 ppm) de arsênico; menos do queaproximadamente 0,75, menos do que aproximadamente 0,5, menos do queaproximadamente 0,25, ou menos do que aproximadamente 0,1 ppm (porex., 0,2 ppm) de cádmio; menos do que aproximadamente 3, menos do queaproximadamente 2, menos do que aproximadamente 1, ou menos do queaproximadamente 0,5 ppm (por ex., 1,7 ppm) de chumbo, ou menos do queaproximadamente 0,1, menos do que aproximadamente 0,05, menos do queaproximadamente 0,01, ou menos do que aproximadamente 0,005 ppm (porex., < 0,001 ppm) de mercúrio.

Suplementos

As composições reveladas podem ser particularmente úteiscomo suplementos nutricionais. Portanto, são aqui revelados suplementosnutricionais que compreendem as composições aqui reveladas. Umsuplemento nutricional é qualquer composição que possa ser administradaou tomada por um sujeito para prover, suprir ou aumentar um nutriente(s)(por ex., vitamina, mineral, oligoelemento essencial, aminoácido, peptídeo,ácido nucléico, oligonucleotídeo, lipídio, colesterol, esteróide, carboidrato,e outros).

O suplemento nutricional pode compreender qualquerquantidade das composições reveladas aqui, mas irá tipicamente conteruma quantidade determinada para suprir a um sujeito uma dose desejada deum nutriente particular encontrado nas composições reveladas. Aquantidade exata das composições reveladas requeridas no suplementonutricional irá variar de sujeito a sujeito, dependendo da espécie, idade,peso e condição geral do sujeito, da gravidade da deficiência alimentarsendo tratada, do modo de administração particular, e outros fatores. Sendoassim, não é possível especificar uma quantidade exata para cadasuplemento nutricional. Contudo, uma quantidade apropriada pode serdeterminada por algum técnico no assunto utilizando apenasexperimentações rotineiras a partir dos ensinamentos daqui.

O suplemento nutricional pode compreender também outro(s)nutriente(s) que sejam adicionados além das composições de Porphyrareveladas, tais como vitaminas, minerais, proteínas, aminoácidos, outrosoligoelementos, e outros. Além disso, o suplemento nutricional podecompreender outros compostos tais como preservativos, antimicrobianos,antioxidantes, agentes quelantes, engrossadores, flavorizantes, diluentes,emulsificadores, auxiliares de dispersão ou ligantes.

Os suplementos nutricionais são geralmente tomadosoralmente e podem estar em qualquer forma adequada para administraçãooral. Por exemplo, um suplemento nutricional pode tipicamente estar naforma de tablete, cápsula gelatinosa, cápsula, líquido, sache ou xarope.

Formulação Farmacêutica

São também reveladas aqui formulações farmacêuticas. Emum aspecto, uma formulação farmacêutica pode compreender qualquer umadas composições reveladas aqui com um portador farmaceuticamenteaceitável. Por exemplo, uma formulação farmacêutica pode compreenderuma composição que compreenda uma mescla de Porphyra com umextrato aquoso seco de Porphyra e com um portador farmaceuticamenteaceitável. As formulações farmacêuticas reveladas podem ser utilizadasterapeuticamente ou profilaticamente.

Por "farmaceuticamente aceitável" quer-se dizer um materialque não seja biologicamente ou de outra forma indesejável, isto é, ummaterial que possa ser administrado a um sujeito sem causar quaisquerefeitos biológicos indesejáveis ou interagir de forma deletéria com qualquerum dos outros componentes da formulação farmacêutica em que ele estejacontido. O portador seria naturalmente selecionado para minimizarqualquer degradação do ingrediente ativo e para minimizar quaisquerefeitos colaterais adversos no sujeito, como saberia algum técnico noassunto.

Portadores farmacêuticos são conhecidos pelos técnicos noassunto. Eles seriam mais tipicamente portadores convencionais para aadministração de drogas em seres humanos, incluindo soluções como águaesterilizada, soluções salinas e soluções tampão em pH fisiológico.

Portadores adequados e suas formulações são descritos em Remington: TheScience and Praclice of Pharmaey, 21a Ed., Lippincott Williams &Wilkins, Filadélfia, PA, EUA, 2005, que é aqui incorporado comoreferência sobre portadores e formulações farmacêuticas. Tipicamente, umaquantidade apropriada de um sal farmaceuticamente aceitável é utilizada naformulação para tomar a formulação isotônica. Exemplos de portadorfarmaceuticamente aceitável incluem, mas não se limitam a, solução salina,solução de Ringer e solução de dextrose. O pH da solução épreferivelmente de aproximadamente 5 a aproximadamente 8, e maispreferivelmente de aproximadamente 7 a aproximadamente 7,5. Portadoresadicionais incluem preparações de liberação sustentada tais como matrizessemipermeáveis de polímeros hidrofóbicos sólidos contendo os compostosrevelados, estando as matrizes na forma de artigos moldados, por ex.,películas, lipossomos, micro-partículas ou micro-cápsulas. Será aparentepara os técnicos no assunto que certos portadores podem ser maispreferíveis dependendo, por exemplo, da via de administração e daconcentração da composição sendo administrada. Outros compostos podemser administrados de acordo com procedimentos padronizados utilizadospelos técnicos no assunto.

As formulações farmacêuticas podem incluir portadoresadicionais, assim como engrossadores, diluentes, tampões, preservativos,agentes ativos de superfície e outros além dos compostos revelados aqui.As formulações farmacêuticas podem também incluir um ou maisingredientes, tais como agentes antimicrobianos, agentes antiinflamatórios,anestésicos, e outros.

A formulação farmacêutica pode ser administrada de umnúmero de maneiras, dependendo se um tratamento local ou sistêmico fordesejado, e da área a ser tratada. A administração pode ser tópica(incluindo oftalmológica, vaginal, retal e intra-nasal), oral, por inalação, ouparenteral, por exemplo por injeção intravenosa, subcutânea,intraperitoneal ou intramuscular. As composições reveladas podem seradministradas por via intravenosa, intraperitoneal, intramuscular,subcutânea, intra-cavidade ou transdérmica.

As formulações para administração parenteral incluemsoluções aquosas ou não-aquosas estéreis, soluções, suspensões e emulsões.Exemplos de solventes não-aquosos são o propileno glicol, polietilenoglicol, óleos vegetais como o azeite de oliva, óleos de peixe, e ésteresorgânicos injetáveis tais como o oleato etílico. Os portadores aquososincluem a água, soluções alcoólicas/aquosas, emulsões ou suspensões,incluindo soluções salinas e meios tamponados. Os veículos parenteraisincluem solução de cloreto de sódio, dextrose de Ringer lactada, ou óleosfixos. Os veículos intravenosos incluem restauradores de fluidos enutrientes, restauradores de eletrólitos (tais como os baseados na dextrosede Ringer), e outros. Os preservativos e outros aditivos também podemestar presentes, tais como, por exemplo, agentes antimicrobianos,antioxidantes, quelantes, gases inertes e outros do gênero.

As formulações farmacêuticas para administração tópicapodem incluir pomadas, loções, cremes, gel, gotas, supositórios, sprays,líquidos e pós. Portadores farmacêuticos convencionais, bases aquosas, empó ou oleosas, engrossadores e outros podem ser necessários ou desejáveis.As formulações farmacêuticas para administração oralincluem, mas não se limitam a, pós ou grânulos, suspensões ou soluções emágua ou em meios não-aquosos, cápsulas, saches ou tabletes.

Engrossadores, flavorizantes, diluentes, emulsificadores, auxiliares dedispersão ou ligantes podem ser desejáveis.

Gêneros Alimentícios

São também revelados aqui gêneros alimentícios quecompreendam qualquer uma das composições reveladas aqui. Por "gêneroalimentício" quer-se dizer qualquer produto que possa ser consumido (porex., comido, bebido ou ingerido) por um sujeito. Em um aspecto, ascomposições reveladas podem ser utilizadas como suplementos nutricionaisem um gênero alimentício. Por exemplo, as composições reveladas podemser carregadas com compostos que forneçam benefícios à saúde, e elaspodem ser assim incorporadas em vários gêneros alimentícios. Em algunsoutros exemplos, o gênero alimentício é um produto assado, uma massa,um produto de carne, um produto laticínio congelado, um produto de leite,um produto de queijo, um produto de ovo, um condimento, um concentradode sopa, um petisco, um produto de nozes, um produto de proteína vegetal,um doce duro, um doce macio, um produto de ave, um suco de frutasprocessado, um açúcar granulado (por ex., branco ou mascavo), um molho,um caldo, um xarope, uma barra nutritiva, uma bebida, um pó de bebidaseco, uma geléia ou uma gelatina, um fruto do mar, ou comida para animaisde estimação. Em outros exemplos, o gênero alimentício é pão, tortillas,cereal, salsicha, frango, sorvete, iogurte, leite, molho de salada, farelo dearroz, suco de frutas, pó de bebida seco, rocamboles, bolachas, biscoitos,tortas de fruta ou bolos. Além disso, as composições reveladas podem serfornecidas em um sache (por ex., uma bolsa de chá).Métodos de Uso

As composições reveladas têm muitos usos. Por exemplo, ascomposições reveladas podem ter atividade antiviral, atividadeantibacteriana, atividade antimicobacteriana, atividade anti-helmíntica,atividade anti-úlcera, atividade antiinflamatória, efeitos endócrinos,propriedades quelantes em metais, propriedades de cura de feridas equeimaduras, propriedades rejuvenescedoras, propriedades antioxidantes,propriedades anti-arterioscleróticas, propriedades imunomoduladoras, eoferecer proteção contra radiação UV. Usos particulares para ascomposições reveladas são como agentes anti-diabéticos.

Em um exemplo particular, são aqui revelados métodos desuplementação de nutrientes em um sujeito através da administração deuma composição que compreenda uma composição de Porphyra comorevelada aqui. Em ainda um outro exemplo, são aqui revelados métodos demelhoria da sensibilidade à insulina em um sujeito pela administração deuma quantidade eficaz de uma composição de Porphyra como reveladaaqui. Em mais um exemplo, são aqui revelados métodos de redução dahiperglicemia em um sujeito pela administração de uma quantidade eficazde uma composição de Porphyra conforme revelada aqui. Em ainda maisum exemplo, são aqui revelados métodos de modulação de uma reaçãoimunológica em um sujeito pela administração de uma quantidade eficaz deuma composição de Porphyra conforme revelada aqui. Em ainda outroexemplo, são aqui revelados métodos de modulação da proliferação decélulas do baço em sujeito pela administração de uma quantidade eficaz deuma composição de Porphyra conforme aqui revelada. Em ainda outroexemplo, são aqui revelados métodos de inibição de infecções virais em umsujeito pela administração de uma quantidade eficaz de uma composição dePorphyra conforme aqui revelada.É previsto que os métodos revelados aqui possam seralcançados pela administração de várias formas das composições reveladas.Por exemplo, pode-se administrar qualquer uma das formulaçõesfarmacêuticas com qualquer um dos gêneros alimentícios revelados aqui.

Em um outro exemplo, pode-se administrar um tablete ou uma cápsula comqualquer um dos suplementos nutricionais revelados aqui. Em ainda maisum exemplo, pode-se administrar qualquer uma das formulaçõesfarmacêuticas com qualquer um dos dispositivos de distribuição esuplementos nutricionais revelados aqui, e assim por diante.

Dosagem e Distribuição

Quando utilizada nos métodos descritos acima ou em outrostratamentos, ou com os suplementos nutricionais, formulaçõesfarmacêuticas ou gêneros alimentícios revelados aqui, uma "quantidadeeficaz" de uma das composições reveladas pode ser empregada em formapura, ou, quando tal forma existir, em forma de sal farmaceuticamenteaceitável, e com ou sem um excipiente, portador ou outro aditivofarmaceuticamente aceitável.

O nível específico de dosagem eficaz para qualquer sujeito emparticular irá depender de uma variedade de fatores que incluem o mal a sertratado e a gravidade da doença; a identidade e atividade da composiçãoespecífica empregada; a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta dopaciente; o tempo de administração; a via de administração; a taxa deexcreção da composição específica empregada; a duração do tratamento;drogas utilizadas em combinação ou concomitantemente com a composiçãoespecífica empregada, e outros fatores bem conhecidos na técnica médica.Por exemplo, está bem dentro do alcance da técnica começar com doses dacomposição em níveis mais baixos do que os necessários para se obter oefeito terapêutico desejado, e aumentar gradualmente a dosagem até que oefeito desejado seja obtido. Caso desejado, a dose diária eficaz pode serdividida em doses múltiplas para os propósitos da administração.Conseqüentemente, composições de dose única podem conter taisquantidades ou seus submúltiplos para compor a dose diária.

A dosagem pode ser ajustada pelo médico individual ou pelosujeito na eventualidade de quaisquer contra-indicações. A dosagem podevariar, e pode ser administrada em uma ou mais administrações de dosesdiárias, por um ou vários dias. Orientações podem ser encontradas naliteratura quanto às dosagens apropriadas para dadas classes de produtosfarmacêuticos.

Além disso, são revelados métodos para a distribuição de umacomposição revelada a um sujeito pela administração ao sujeito dequalquer um dos suplementos, formulações farmacêuticas, dispositivos dedistribuição, e/ou gêneros alimentícios revelados aqui. As composiçõesreveladas (incluindo suplementos nutricionais, dispositivos de distribuiçãoe formulações farmacêuticas) podem tipicamente ser administradasoralmente.

EXEMPLOS

Os exemplos a seguir são apresentados abaixo para ilustrar osmétodos e resultados de acordo com a matéria revelada. Esses exemplosnão pretendem incluir todos os aspectos da matéria revelada aqui, porémilustrar métodos e resultados representativos. Esses exemplos nãopretendem excluir equivalentes e variações da presente invenção que sejamevidentes para alguém versado no assunto.

Foram feitos esforços no sentido de assegurar a precisão comrelação aos números (por ex., quantidades, temperaturas etc.), mas algunseiTos e desvios devem ser levados em conta. A não ser quando indicado ocontrário, as partes são partes por peso, a temperatura está em 0C ou é atemperatura ambiente, e a pressão é igual ou próxima à pressãoatmosférica. Existem numerosas variações e combinações de condições dereação, por ex., concentrações de componentes, solventes desejados,misturas solventes, temperaturas, pressões e outras faixas e condições dereação que podem ser utilizadas para aperfeiçoar a pureza do produto e orendimento obtidos a partir do processo descrito. Somente experimentaçõessensatas e rotineiras serão necessárias para aperfeiçoar tais condições deprocesso.

Exemplo 1: Composição d ε Porphyra

Uma composição de Porphyra, como revelada aqui, foipreparada mesclando-se Nori seco-moído e um extrato de Nori comomostrado na Figura 1. Resumidamente, as algas marinhas Nori obtidas daNoritech Seaweed Biotechnologies Ltd. (Yokneam, Israel) foram lavadaspara remover o sal aderente, secadas, e trituradas em um pó fino (chamadode "Nori seco-moído").

O pó de Nori seco-moído foi então misturado com água,mexido a 40°C por 4 horas, e centrifugados por 15 minutos. A fase aquosafoi colhida. O resíduo restante foi novamente misturado com água parauma segundo extração sob as mesmas condições de antes. A fase aquosadesta segunda extração foi combinada com a fase aquosa da primeiraextração. Após a secagem por nebulização das fases aquosas combinadas, oextrato de Nori seco resultante foi então mesclado com pó de Nori seco-moído adicional. As características desta composição de Porphyra sãofornecidas na Tabela 1.

Tabela 1: Composição de Porphyra

<table>table see original document page 33</column></row><table><table>table see original document page 34</column></row><table>GlicinaHistidinaProlinaTirosinaTaurina

17,46 mg/g3,39 mg/g11,26 mg/g7,04 mg/g11,49 mg/g

Vitaminas

Vitamina C 0,39 mg/gBl (Tiamina) 19,04 μδ/δB2 (Riboflavina) 46,02 μξ/gB3 (Niacina) 141,24 Mg/gB6 (Piridoxina) 11,11 μΕ/gÁcido Fólico 9,20 μ§/δMinerais Cálcio 3,48 mg/gPotássio 62,1 mg/gMagnésio 6,3 mg/gManganês 0,026 mg/gSódio 10 mg/gFósforo 8,45 mg/gZinco 0,033 mg/gMetais pesados Arsênico 5,6 ppmCádmio 0,2 ppmChumbo 1,7 ppmMercúrio < 0,01 ppmA mistura do Nori seco-moído com o extrato de Nori seco emvárias proporções pode ser um meio de assegurar níveis de nutriçãoconsistentes. As composições resultantes podem ser organicamentecertificadas como uma fonte vegetal marinha de vitaminas, minerais,proteínas e fibras solúveis. A composição resultante pode também ser umaboa fonte de aminoácidos essenciais, pigmentos antioxidantes, vitaminas B,e minerais, tais como cálcio, zinco e magnésio. Outros atributos são o seubaixo conteúdo em sódio e o seu alto conteúdo em potássio. Além disso,ela pode conter pouca gordura, e a gordura presente é principalmente deácidos graxos poliinsaturado de ômega-3, ácido eicosapentaenóico.

Exemplo 2: Modelo de Células da Diabetes

A linhagem celular 3T3-L1, obtida da American Type TissueCulture Collection (Manassas, VA, EUA), é um modelo bem caracterizadopara o estudo de eventos mediados por insulina em células de gordura (ver,por ex., Pessin e Bell, uMammalian Facilitative Glucose Transportei-Family: Structure and Molecular Regulation", Annu. Rev. Physiol., 54:911-930, 1992). Após diferenciação, essas células compartilham muitascaracterísticas bioquímicas e morfológicas das células de gordura maduras,incluindo a absorção de glicose sensível à insulina. Adipócitos 3T3-L1diferenciadores foram incubados a 37°C por 20 minutos sem insulina oucom insulina (100 nM) e contendo, ou não, várias concentrações de extratode Nori e suas frações. O tratamento foi paralisado por remoção dos meiosseguida por uma etapa de lavagem com 1 ml de tampão de absorção (PBSpH 7,4; 0,5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2; 2,5 mM KCl). As células foramentão incubadas a 28°C em tampão de absorção contendo 50 μΜ de desoxi-glicose (50 μΜ) e [3H]-desoxi-glicose (1 μ^/ηιΐ). A absorção de 2-desoxiglicose não mediada por transportador foi determinada em paralelona presença de citocalasina B (75 μΜ) e subtraída de ambas as medições deabsorção basal e estimulada. A absorção foi paralisada após 10 minutos poraspiração da solução tampão de absorção e rapidamente os poços foramlavados duas vezes com 1 ml de NaCl 0,9% gelado. As células foramlisadas em NaOH 0,05 M (1 ml/poço), e 800 μΐ do lisato foram misturadoscom 3 ml de fluido de cintilação e a radioatividade foi determinada. Olisato restante foi guardado para a determinação do conteúdo em proteínanas células utilizando-se o ensaio de proteína Coomassie com albumina desoro bovino como padrão. Um experimento representativo é mostrado naFigura 2, em que 300 μ§/πι1 de extrato de Nori foram utilizados sem e cominsulina (5 nM). Essas descobertas mostram que o extrato de Nori continhaum ou mais constituintes que estimulavam o transporte de glicose paradentro das células de gordura.

O extrato de Nori utilizado neste exemplo foi obtidoprimeiramente pela extração de pó de Nori da Noritech SeaweedBioiechnologies Ltd. (Yokneam, Israel) com hexano. O resíduo restante foiem seguida extraído com etanol (95%). O resíduo desta extração foi entãoextraído com água na temperatura ambiente. Finalmente, o resíduo daextração de água em temperatura ambiente foi extraído com água a 80°C.Esse extrato final de água quente foi o extrato de Nori utilizado nesteexemplo.

Exemplo 3: Modelo da Diabetes Tipo II em Camundongos

A diabetes tipo II foi produzida em camundongos por injeçõesde doses pequenas de streptozotocina (35 mg/Kg de peso corporaldissolvidos em tampão de citrato de sódio, pH 4,5) diariamente por 5 dias.

A streptozotocina destrói as células-β produtoras de insulina no pâncreas. Oprotocolo utilizou camundongos C57BL/6J alimentados por uma dieta ricaem gordura e sacarose (n°. D12451, Research Diets Inc., New Brunswick,NJ, EUA). A combinação do tratamento com streptozotocina com a dietarica em gordura e sacarose produziu a condição da diabetes tipo II. O nívelde glicose foi medido utilizando-se um glicômetro em uma gota de sangueobtida da veia safena. Camundongos eram utilizados para o estudo quandoseus níveis de glicose no sangue estivessem entre 15 e 30 mM. Oscamundongos ficavam sem alimentação por aproximadamente 2 horasantes do começo de um experimento. Um nível de glicose no sangue inicialfoi determinado (tempo 0) e então o extrato de Nori (extrato de Nori217.4), dissolvido em tampão fosfato-salino (PBS), foi administrado porinjeção intraperitoneal (100 mg por Kg de peso corporal) ou por gavagemoral (500 mg por Kg de peso corporal). Os animais de controle receberamsomente PBS (controles). A glicose no sangue foi medida após 1, 3 e 6horas em seguida à administração. Os resultados dessas investigações sãomostrados nas Figuras 3A e 3B.

O extrato de Nori (ON0217.4) utilizado neste exemplo foiobtido primeiramente pela extração de pó de Nori da Noritech SeoweedBiotechnologies Ltd. (Yokneam, Israel) com hexano. O resíduo restante foiem seguida extraído com etanol (95%). O resíduo desta extração foi entãoextraído com água na temperatura ambiente. Finalmente, o resíduo daextração de água em temperatura ambiente foi extraído com água a 80°C.Esse extrato final de água quente é aqui identificado como ON0217.4.

Este extrato de Nori aquoso demonstrou produzir uma reduçãosignificativa da glicose no sangue em camundongos diabéticos quandoinjetado em uma dosagem de 100 mg/Kg de peso corporal (Figura 3A). Aredução foi evidente dentro de 6 horas de tratamento. O Nori (500 mg/Kgde peso corporal), dado como uma gavagem oral, não produziu umaredução de glicose no sangue ao longo de um período de 6 horas, mas haviauma tendência em direção a níveis de glicose no sangue reduzidos (Figura3B).

Esses estudos foram realizados em total conformidade com asregulamentações da Canadian Council on Animal Care.Exemplo 4: Atividade Imunomoduladora

Células RAW264.7, uma linhagem de células macrófagas decamoundongo, obtidas da American Tissue Culture Collection (Rockville,MD), foram utilizadas para testes de extratos de Nori quanto à atividadeimunomoduladora. A produção de óxido nítrico foi utilizada como ummarcador de ativação macrófaga. As células RAW264.7 foram semeadasem placas com 48 poços com uma densidade de 2,5 χ IO5 células por poçoem meio de cultura (sem vermelho de fenol) e desenvolvidas por uma noite(confluência 80-90%). As células foram então tratadas com 3,91; 7,91; 15;31,25 e 62,5 μg/ml de extrato de Nori (ON201.4) ou com extrato deChlorella pyrenoidosa (CPE; RESPONDIN™), ou com 5 μg/mJ delipopolissacacarídeos (LPS). As células de controle receberam somente omeio de cultura. Após 24 horas, o meio de cultura foi colhido e congelado.

A produção de óxido nítrico foi avaliada medindo-se o nível de nitritoutilizando Reagente de Griess (1,0% sulfanilamida, 010% dihidrocloreto deN-(l-naftil)-etilenodiamina e 2,5% ácido fosfórico). 50 microlitros de meiode cultura foram misturados com 50 μΐ de Reagente de Griess, incubadosna temperatura ambiente por 10 minutos, e a absorvência resultante foimedida em 550 nm. Nitrito de sódio dissolvido em água deionizada foiutilizado como padrão.

O teste do Nori que a água de extrações seriais, assim como ade extrações singulares, resultou em uma ativação de macrófagossignificativa. Estudos de reação a dosagens mostraram que um extrato deágua (ON0201.4) resultava em uma geração de nitrito comparável àproduzida por extrato de Chlorella pyrenoidosa (CPE; RESPONDIN™),um produto conhecido por ter atividade imunomoduladora (Figura 4).

O extrato de Nori (ON0201.4) utilizado neste exemplo foiobtido primeiramente pela extração de pó de Nori da Noritech SeaweedBiotechnologies Ltd. (Yokneam, Israel) com hexano. O resíduo restante foiem seguida extraído com etanol (95%). O resíduo desta extração foi entãoextraído com água na temperatura ambiente. Finalmente, o resíduo daextração de água em temperatura ambiente foi extraído com água a 80°C.Esse extrato final de água quente é aqui identificado como ON0201.4.

Exemplo 5: Reação de Proliferação

O extrato de Nori foi testado quanto à sua capacidade deproliferação estimulada de células de baço de camundongos. CamundongosBALB/c com entre 9 a 16 semanas de idade foram mortos pordeslocamento cervical, seus baços removidos sob condições assépticas, e osesplenócitos isolados. Os esplenócitos foram postos em placas com 3 χ IOicélulas/poço em 0,1 ml de meio RPMI 1640 em placas de cultura de baseplana com 96 poços. O extrato de Nori (ON201.4) foi dissolvido no meiocelular e foi adicionado a poços triplicados para da rum volume final de 0,2ml/poço. As placas foram incubadas a 37°C sob uma atmosfera umidificadade 95% O2 / 5% CO2. LPS (20 ng/ml) foi adicionado a poços triplicadoscomo um controle positivo. Após 48 horas, as células foram pulsadas com[3H]-timidina (1 μΟί / poço em 10 μΐ RPMI) e incubadas por 18 horasadicionais. As células foram colhidas por sobre filtros de fibra de vidro e aradioatividade associada determinada por contagem de cintilação líquida.Como mostrado na Fig. 5, o extrato de Nori (ON0201.4) produziu umareação proliferativa dependente de dosagem comparável à da Chlorellopyrenoidosa (CPE; RESPONDIN™), um produto conhecido por teratividade imunomoduladora.

Modalidades Específicas

Em certos aspectos, são aqui reveladas composições quecompreendem uma mescla de Porphyra com um extrato de Porphyra. Sãotambém reveladas composições que compreendem um extrato de Porphyra,em que o extrato é obtido por extração de um pó de Porphyra com umprimeiro solvente de extração orgânico, desse modo fornecendo umprimeiro resíduo extraído; extração do primeiro resíduo extraído com umsegundo solvente de extração orgânico, desse modo fornecendo umsegundo resíduo extraído; e por extração do segundo resíduo extraído aomenos uma vez com água, desse modo fornecendo o extrato de Porphyra.Além disso ainda, são reveladas composições que compreendem umextrato de Porphyra, em que o extrato é obtido pela obtenção de um pó dePorphyra pelas etapas que compreendem (i) crescimento de esporos e deesporófitos de Porphyra em uma cultura de suspensão; (ii) transferência deesporófitos maduros para um tanque de cultivo; (iii) colheita de algastotalmente desenvolvidas; e (iv) secagem de trituração das algas colhidas,desse modo dando o pó de Porphyra; extração do pó de Porphyra comhexano, desse modo fornecendo um primeiro resíduo extraído; extração doprimeiro resíduo extraído com etanol, desse modo fornecendo um segundoresíduo extraído; extração do segundo resíduo extraído com água emtemperaturas ambientes, desse modo fornecendo um terceiro resíduoextraído; e extração do terceiro resíduo extraído com água emaproximadamente 60 até aproximadamente 95°C, desse modo dando oextrato de Porphyra. São também revelados métodos de preparação de umacomposição nutritiva pela combinação de Porphyra com um extrato dePorphyra. São também reveladas composições preparadas pelos métodosrevelados. Tabletes, cápsulas ou saches, compreendendo qualquer uma dascomposições reveladas são também revelados.

Nas composições e métodos revelados, a Porphyra podecompreender P. yezoensis, P. sp. Taiwanese, ou uma mistura destas. Nascomposições reveladas, a Porphyra pode compreender P. abboíae, P.acanthophora, P. atropurpurae, P. columbina, P. crispata, P. fallax, P.leucostica, P. perforaía, P. pseudolanceolata, P. spirilis, P. suborticulata,P. torta, P. umbilicalis, P. vietnamensis, P. tenera, P. haitanensis, P.pseudolinearis, Ρ. kuniedae, Ρ. arasaki, Ρ. purpúrea, Ρ. seriata, oumisturas destas. O extrato de Porphyra pode ser um extrato aquoso seco. APorphyra pode ser secada-moída. O extrato de Porphyra pode ser umextrato seco. Aproximadamente 1:1 partes por peso de Porphyra para oextrato de Porphyra podem ser utilizadas nas composições e nos métodosrevelados (isto é, aproximadamente 1 parte por peso de Porphyra pode sercombinada com aproximadamente 1 parte por peso do extrato dePorphyr a).

Além disso, a Porphyra. pode ser lavada antes de triturada eutilizada nos métodos e composições reveladas. O extrato de Porphyratambém pode ser obtido por uma extração aquosa. O extrato de Porphyrapode ser uma combinação de duas ou mais extrações aquosas. O extrato dePorphyra pode ser obtido por uma extração orgânica. O extrato dePorphyra pode ser obtido por uma ou mais extrações orgânicas e uma oumais extrações aquosas.

Nas composições reveladas, o conteúdo em umidade pode sermenor do que aproximadamente 6%, o resíduo de ignição (Cinzas) pode sermenor do que aproximadamente 40%, o total de fibras alimentares pode sermaior do que aproximadamente 25%, ou o total em lipídios pode ser maiordo que aproximadamente 0,5%, com base no peso total da composição. Ascomposições reveladas podem compreender de aproximadamente 7,0 atéaproximadamente 11,0 mg/g de ficoeritrina, de aproximadamente 3,0 atéaproximadamente 6,0 mg/g de ficocianina, de aproximadamente 0,1 atéaproximadamente 0,5 mg/g de clorofila a, de aproximadamente 0,001 atéaproximadamente 0,100 mg/g de luteína, ou de aproximadamente 0,010 atéaproximadamente 0,050 mg/g de beta-caroteno. As composições reveladaspodem ter atividade antioxidante de aproximadamente 40 atéaproximadamente 60 μιηοΐβ ET/g. O conteúdo total em proteína dacomposição pode ser de aproximadamente 25 até aproximadamente 50%, oconteúdo total em aminoácidos essenciais pode ser de aproximadamente7,0 até aproximadamente 10%, ou o conteúdo em aminoácidoscondicionalmente essenciais ou não-essenciais pode ser deaproximadamente 10 até aproximadamente 30%, com base no peso total dacomposição. As composições reveladas podem compreender ao menosaproximadamente 6 mg/g de isoleucina, ao menos aproximadamente 14mg/g de leucina, ao menos aproximadamente 10 mg/g de lisina, ao menosaproximadamente 2 mg/g de metionina, ao menos aproximadamente 6mg/g fenilalanina, ao menos aproximadamente 10 mg/g de treonina, aomenos aproximadamente 0,1 mg/g de triptofano, ao menosaproximadamente 10 mg/g de valina, ao menos aproximadamente 25 mg/gde alanina, ao menos aproximadamente 20 mg/g de arginina, ao menosaproximadamente 15 mg/g de ácido aspártico, ao menos aproximadamente

5 mg/g de cistina, ao menos aproximadamente 25 mg/g de ácido glutâmico,ao menos aproximadamente 12 mg/g de glicina, ao menos

aproximadamente 1 mg/g de histidina, ao menos aproximadamente 7 mg/gde prolina, ao menos aproximadamente 5 mg/g de tirosina, ao menosaproximadamente 9 mg/g de taurina. As composições reveladas podemcompreender ao menos aproximadamente 0,1 mg/g de vitamina C, aomenos aproximadamente 15 μg/g de Bl (Tiamina), ao menosaproximadamente 35 μg/g de B2 (Riboflavina), ao menosaproximadamente 115 μg/g de B3 (Niacina), ao menos aproximadamente 9μg/g de B6 (Piridoxina), ou ao menos aproximadamente 7 μg/g de ácidofólico. As composições reveladas podem compreender ao menosaproximadamente 1 mg/g de cálcio, ao menos aproximadamente 50 mg/gde potássio, ao menos aproximadamente 4 mg/g de magnésio, ao menosaproximadamente 0,0075 mg/g de manganês, ao menos aproximadamente6 mg/g de sódio, ao menos aproximadamente 6 mg/g de fósforo, ou aomenos aproximadamente 0,0075 mg/g de zinco. As composições reveladaspodem compreender menos de aproximadamente 7 ppm de arsênico, menosde aproximadamente 0,75 ppm de cádmio, menos de aproximadamente 3ppm de chumbo, ou menos de aproximadamente 0,1 ppm de mercúrio.

Nos métodos revelados, o primeiro solvente de extraçãoorgânica pode compreender o hexano. Nos métodos revelados, o segundosolvente de extração orgânica pode compreender o etanol. Nos métodosrevelados, o segundo resíduo extraído pode ser extraído com água natemperatura ambiente, desta forma dando um terceiro resíduo extraído, e oterceiro resíduo extraído pode ser extraído com água em aproximadamente60 até aproximadamente 95°C, dando assim um extrato de Porphyra.

Além disso, são revelados suplementos nutricionais quecompreendam qualquer uma das composições reveladas, formulaçõesfarmacêuticas que compreendem qualquer uma das composições reveladase um portador farmacêutico, e gêneros alimentícios que compreendemqualquer uma das composições reveladas. Os gêneros alimentíciosrevelados podem compreender um produto assado, uma massa, um produtode carne, um produto de laticínio congelado, um produto de leite, umproduto de queijo, um produto de ovos, um condimento, uma sopa em pó,um alimento para lanche, um produto de nozes, um produto de proteínavegetal, um doce duro, um doce macio, um produto de frango, um suco defrutas processado, um açúcar granulado, um molho, um caldo, um xarope,uma barra nutritiva, uma bebida, uma bebida em pó seco, uma geléia, umagelatina, um produto de peixe, ou comida para animais de estimação.

Além disso, são revelados métodos de suplementação denutrientes em um sujeito que possam compreender a administração de umaquantidade eficaz de qualquer uma das composições, suplementosnutricionais, formulações farmacêuticas, gêneros alimentícios, e cápsulasrevelados aqui, administrados ao sujeito. São também revelados métodosde tratamento da diabetes Tipo II, de melhoria da sensibilidade à insulina,e/ou de redução de hiperglicemia em um sujeito, compreendendo aadministração de uma quantidade eficaz de qualquer uma das composições,suplementos nutricionais, formulações farmacêuticas, gêneros alimentícios,e cápsulas revelados aqui, administrados ao sujeito.

Métodos de modulação de uma reação imunológica e/ouproliferação de células do baço em um sujeito compreendendo aadministração de uma quantidade eficaz de qualquer uma das composições,suplementos nutricionais, formulações farmacêuticas, gêneros alimentícios,e cápsulas revelados aqui, administrados ao sujeito são revelados.

São revelados métodos de inibição de infecções virais e/ou detratamento de inflamações em um sujeito compreendendo a administraçãode uma quantidade eficaz de qualquer uma das composições, suplementosnutricionais, formulações farmacêuticas, gêneros alimentícios, e cápsulasrevelados aqui, administrados ao sujeito.

Será aparente para os técnicos no assunto que váriasmodificações e variações podem ser feitas na presente invenção sem seafastar do escopo ou espírito da invenção. Outras modalidades da invençãoserão aparentes para os técnicos no assunto a partir da consideração dadescrição e da prática da invenção revelada aqui. E pretendido que adescrição e os exemplos sejam considerados como exemplificativos apenas,com o verdadeiro escopo e espírito da invenção sendo indicado pelasreivindicações a seguir.

Claims

1. Composição caracterizada por compreender umamistura de Porphyra e um extrato de Porphyra.

2. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada por compreender aproximadamente 1:1 parte por peso dePorphyra para o extrato de Porphyra.

3. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada pela Porphyra compreender P. yezoensis, P. sp. Taiwanese,ou uma mistura destas.

4. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada pela Porphyra compreender P. abbotae, P. acanthophora,P. atropurpurae, P. columbina, P. crispata, P. fallax, P. Ieucostica, P.perforata, P. pseudolanceolata, P. spirilis, P. suborticulata, P. torta, P.umbilicalis, P. vietnamensis, P. tenera, P. haitanensis, P. pseudolinearis,P. kuniedae, P. arasaki, P. purpúrea, P. seriata, ou misturas destas.

5. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada pelo extrato de Porphyra ser um extrato aquoso seco.

6. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada pela Porphyra ser moída-seca.

7. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada pelo conteúdo em umidade ser menor do queaproximadamente 6%, pelo resíduo de ignição (Cinzas) ser menor do queaproximadamente 40%, pela fibra alimentar total ser maior do queaproximadamente 25%, ou pelos lipídios totais serem maiores do queaproximadamente 0,5%, com base no peso total da composição.

8. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada por compreender de aproximadamente 7,0 atéaproximadamente 11,0 mg/g de ficoeritrina, de aproximadamente 3,0 atéaproximadamente 6,0 mg/g de ficocianina, de aproximadamente 0,1 atéaproximadamente 0,5 mg/g de clorofila a, de aproximadamente 0,001 atéaproximadamente 0,100 mg/g de luteína, ou de aproximadamente 0,010 atéaproximadamente 0,050 mg/g de beta-caroteno.

9. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada por possuir atividade antioxidante de aproximadamente 40até aproximadamente 60 μηιοί ET/g.

10. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada pelo conteúdo total em proteína da composição ser deaproximadamente 25 até aproximadamente 50%, pelo conteúdo total emaminoácidos essenciais ser de aproximadamente 7,0 até aproximadamente-10%, ou pelo conteúdo total em aminoácidos condicionalmente essenciaisou não-essenciais ser de aproximadamente 10 até aproximadamente 30%,com base no peso total da composição.

11. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada por compreender ao menos aproximadamente 6 mg/g deisoleucina, ao menos aproximadamente 14 mg/g de leucina, ao menosaproximadamente 10 mg/g de lisina, ao menos aproximadamente 2 mg/g demetionina, ao menos aproximadamente 6 mg/g de fenilalanina, ao menosaproximadamente 10 mg/g de treonina, ao menos aproximadamente 0,1mg/g de triptofano, ao menos aproximadamente 10 mg/g de valina, aomenos aproximadamente 25 mg/g alanina, ao menos aproximadamente 20mg/g de arginina; ao menos aproximadamente 15 mg/g de ácido aspártico,ao menos aproximadamente 5 mg/g de cistina, ao menos aproximadamente-25 mg/g de ácido glutâmico, ao menos aproximadamente 12 mg/g deglicina, ao menos aproximadamente 1 mg/g de histidina, ao menosaproximadamente 7 mg/g de prolina, ao menos aproximadamente 5 mg/gde tirosina, ou ao menos aproximadamente 9 mg/g de taurina.

12. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada por compreender ao menos aproximadamente 0,1 mg/g devitamina C5 ao menos aproximadamente 15 μg/g de vitamina B1 (Tiamina),ao menos aproximadamente 35 μ^/g de vitamina B 2 (Riboflavina), aomenos aproximadamente 115 μg/g de vitamina B3 (Niacina), ao menosaproximadamente 9 μg/g de vitamina B6 (Piridoxina), ou ao menosaproximadamente 7 μg/g de ácido fólico.

13. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada por compreender ao menos aproximadamente 1 mg/g decálcio, ao menos aproximadamente 50 mg/g de potássio, ao menosaproximadamente 4 mg/g de magnésio, ao menos aproximadamente 0,0075mg/g de manganês, ao menos aproximadamente 6 mg/g de sódio, ao menosaproximadamente 6 mg/g de fósforo, ou ao menos aproximadamente-0,0075 mg/g de zinco.

14. Composição de acordo com a reivindicação 1,caracterizada por compreender menos do que aproximadamente 7 ppm dearsênico, menos do que aproximadamente 0,75 ppm de cádmio, menos doque aproximadamente 3 ppm de chumbo, ou menos do queaproximadamente 0,1 ppm de mercúrio.

15. Suplemento nutritivo caracterizado por compreender acomposição da reivindicação 1.

16. Formulação farmacêutica caracterizada porcompreender a composição da reivindicação 1 e um portador farmacêutico.

17. Gênero alimentício caracterizado por compreender acomposição da reivindicação 1.

18. Gênero alimentício de acordo com a reivindicação 17,caracterizado por compreender um produto assado, uma massa, umproduto de carne, um produto de laticínio congelado, um produto quecontenha leite, um produto que contenha queijo, um produto que contenhaovos, um condimento, uma mistura de sopa, um alimento para lanches, umproduto com nozes, um produto de proteína vegetal, uma bala dura, umabala mole, um produto de aves, um suco de frutas processado, um açúcargranulado, um molho, um caldo, um xarope, uma barra nutritiva, umabebida, um pó de bebida seco, uma geléia, uma gelatina, um produto depeixe, ou comida para animais domésticos.

19. Tablete, cápsula ou sachê caracterizado porcompreender a composição da reivindicação 1.

20. Método de suplementação de nutrientes em um sujeito,caracterizado por compreender a administração de uma quantidade eficazde uma composição da reivindicação 1 ao sujeito.

21. Método de tratamento da diabetes tipo II em um sujeito,caracterizado por compreender a administração de uma quantidade eficazde uma composição da reivindicação 1 ao sujeito.

22. Método de melhora da sensibilidade à insulina em umsujeito, caracterizado por compreender a administração de umaquantidade eficaz de uma composição da reivindicação 1 ao sujeito.

23. Método de redução de hiperglicemia em um sujeito,caracterizado por compreender a administração de uma quantidade eficazde uma composição da reivindicação 1 ao sujeito.

24. Método de modulação da proliferação de células dobaço em um sujeito, caracterizado por compreender a administração.deuma quantidade eficaz de uma composição da reivindicação 1 ao sujeito.

25. Método de preparação de uma composição nutritiva,caracterizado por compreender a combinação de Porphyra com umextrato de Porphyra.

26. Método de acordo com a reivindicação 25,caracterizado por aproximadamente 1 parte por peso de Porphyra sercombinada com aproximadamente 1 parte por peso do extrato de Porphyra.

27. Método de acordo com a reivindicação 25,caracterizado pela Porphyra compreender P. yezoensis, P. sp. Taiwanese,ou uma mistura destas.

28. Método de acordo com a reivindicação 25,caracterizado pela Porphyra compreender P. abbotae, P. acaníhophora,P. atropurpurae, P. columbina, P. crispata, P. fallax, P. Ieucostica., P.perforata, P. pseudolanceolata, P. spirilis, P. suborticulata, P. torta, P.umbilicalis, P. vietnamensis, P. tenera, P. haitanensis, P. pseudolinearis,P. kuniedae, P. arasaki, P. purpúrea, P. seriata, ou misturas destas.

29. Método de acordo com a reivindicação 25,caracterizado pelo extrato de Porphyra ser obtido por uma ou maisextrações aquosas.

30. Método de acordo com a reivindicação 25,caracterizado pelo extrato de Porphyra ser obtido por uma extraçãoorgânica.

31. Método de acordo com a reivindicação 25,caracterizado pelo extrato de Porphyra ser obtido por uma ou maisextrações orgânicas e uma ou mais extrações aquosas.

32. Método de acordo com a reivindicação 25,caracterizado pelo extrato de Porphyra ser um extrato seco.

33. Composição caracterizada por ser preparada pelométodo definido na reivindicação 25.

34. Composição que compreende um extrato de Porphyra.,caracterizada pelo extrato ser obtido por um processo que compreende asetapas de:a) extração de um pó de Porphyra com um primeirosolvente de extração orgânica, deste modo fornecendo um primeiro resíduoextraído;b) extração do primeiro resíduo extraído com um segundosolvente de extração orgânica, deste modo fornecendo um segundo resíduoextraído; ec) extração do segundo resíduo extraído ao menos uma vezcom água, deste modo fornecendo o extrato de Porphyra.

35. Composição de acordo com a reivindicação 34,caracterizada pelo primeiro solvente de extração orgânica compreenderhexano.

36. Composição de acordo com a reivindicação 34,caracterizada pelo segundo solvente de extração orgânica compreenderetanol.

37. Composição de acordo com a reivindicação 34,caracterizada pelo segundo resíduo extraído ser extraído com água natemperatura ambiente, deste modo fornecendo um terceiro resíduo extraído,e pelo terceiro resíduo extraído ser extraído com água emaproximadamente 60 até aproximadamente 95°C, deste modo fornecendo oextrato de Porphyra.

38. Composição que compreende um extrato de Porphyra,caracterizada pelo extrato ser obtido por um processo que compreende asetapas de:a) fornecimento de um pó de Porphyra pelas etapas quecompreendem:i) crescimento de esporos e germes de Porphyra emuma cultura de suspensão;ii) transferência dos germes amadurecidos para umtanque de cultivo;iii) colheita da alga marinha totalmente desenvolvida;eiv) secagem e moagem da alga marinha, deste modofornecendo o pó de Porphyra;b) extração do pó de Porphyra com hexano, deste modofornecendo um primeiro resíduo extraído;c) extração do primeiro resíduo extraído com etanol, destemodo fornecendo um segundo resíduo extraído;d) extração do segundo resíduo extraído com água emtemperaturas ambientes, deste modo fornecendo um terceiro resíduoextraído; ee) extração do terceiro resíduo extraído com água emaproximadamente 60 até 95°C, deste modo fornecendo o extrato dePorphyra.