BRPI0317883B1 - comprimido revestido com filme compreendendo um extrato de folhas de vinha vermelha - Google Patents

Abstract

"comprimido revestido com filme compreendendo um extrato de folhas de vinha vermelha". a presente invenção refere-se a um comprimido revestido com filme compreendendo os seguintes constituintes: a) pelo menos 50% em peso de um extrato seco de folhas vermelhas de vinha, que é obtenível por extração de folhas vermelhas de vinha com água e secagem; b) até 50% em peso de um excipiente consistindo essencialmente em pelo menos um aglutinante, pelo menos um desintegrante, pelo menos um material de enchimento, e um lubrificante; e c) um filme de comprimido consistindo essencialmente em um formador de filme, um plastificante, um agente de revestimento, e opcionalmente um agente corante. além disso, a invenção refere-se a um extrato aquoso de folhas vermelhas de vinha que é obtenível através de um processo compreendendo as etapas de: a) coleta de folhas vermelhas de vinha em um ponto de tempo quando o teor em flavonóides atingiu um ótimo; b) secagem e trituração de folhas; c) corte de folhas em pedaços; d) extração de folhas com água em temperaturas elevadas por 6 a 10 horas; e) concentração e secagem de extrato obtido, e adição de até 10% em peso de um regulador de fluxo durante a relação para a quantidade total final do resultante extrato durante o processo de secagem (e).

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPRIMIDO REVESTIDO COM FILME COMPREENDENDO UM EXTRATO DE FOLHAS DE VINHA VERMELHA".

Antecedentes da Invenção 1. Campo Técnico A invenção refere-se a um comprimido revestido com filme compreendendo um extrato seco de folhas de vinha vermelha, um excipiente e um filme de comprimido e uso com o mesmo para aperfeiçoamento de circulação de sangue e/ou o suprimento de oxigênio das extremidades inferiores. 2. Informação de Antecedentes Insuficiência venosa crônica (CVI) é uma doença progredient e conduzirá em muitos pacientes - especialmente se não tratada - a edema, flebectasia coronária (Widmer estágio I), hiperpigrneníação, endurecimento, lipodermatoesclerose, atrofia branca (Widmer estágio II), ou úlceras de perna de varicose (Widmer estágio III). Hemodinâmicas perturbadas cronicamente de veias profundas ou superficiais devido a segmentos venosos obstruídos ou incompetência valvular usualmente conduz a doenças de pele na área de tornozelo dos membros inferiores. 1 Distúrbios na microcirculação da pele foram considerados serem os principais contribuintes para alterações de pele associadas com hipervolemia venosa crônica e hipertensão venosa (por exemplo, Fagrell B Vital microscopy and the pathophysiology of deep venous insufficiency. Int Angiol 1995; 14:18-22; Jünger M., Klyscz T, Hahn M, Rassner G. Disturbed blood flow regulation in venous leg ulcers. Int J Microcirc 1996; 16:259-265).

Obviamente, microangiopatia cutânea de relevância clínica como capilares tortuosos, aumentados, circundados por microedema contribui para as alterações nos membros inferiores e determina o curso de CVI (Fagrell B, loc. cit. and Jünger M et al., loc. cit.). A aplicação da técnica Doppler de laser em distúrbios venosos é bem ilustrada (por exemplo, Tulevski II, Ubbink DT, Jacobs MJHM. Red and green laser Doppler compared with capillary microscopy to assess skin microcirculation in the feet of healthy subjects. Microvasc Res 1999; 58(2):83-88 e Bollinger A, Jàger K, Jünger M, Seifert H. The vascular laboratory: advances in non-invasive techniques. World J Surg 1988; 12:724-731).

Diferentes técnicas foram desenvolvidas para investigação de microcirculação em ambas camadas funcionalmente diferentes da pele: a camada mais profunda, principalmente termorreguladora e a camada superficial, nutritiva. Perturbações microcirculatórias na camada nutritiva superficial são de maior relevância para alterações tróficas de pele (Jünger M et al., loc. cit. and Gschwandtner ME, Ambrozy E, Fasching S, Willfort A, Schneider B, Bõhler K, et al. Microcirculation in venous ulcers and surrounding skin: findings with capillary microscopy and laser Doppler imager. Eur J Clin Invest 1999;29:708-716). A patente britânica GB 934 554 mostra que a resistência capiiar de porquinhos-da-índia deficientes em uma vitamina pode ser aperfeiçoada através de injeção intraperitoneal de um extrato alcoólico de folha de vinha. O pedido de patente internacional WO 01/28363 mostra um processo para prevenção ou alívio de desconforto associado com insuficiência venosa crônica suave-a-moderada das extremidades inferiores com o auxílio de um extrato aquoso de folhas vermelhas de vinha. Em adição, um regime de dosagem diária de 80 a 1000 mg dividida em até 1 a 3 cápsulas é sugerido. O problema subjacente da presente invenção foi prover uma forma de dosagem que permita administração de tais altas quantidades de extrato aquoso de folhas vermelhas de vinha no regime sugerido. Em vista de aquiescência de paciente existe o requisito de que tais formas de dosagem não devem ser muito grandes, de modo a facilitar a deglutição. Por outro lado, a forma de dosagem tem de ter uma estabilidade para assegurar longos tempos de estocagem em prateleira. Além disso, alta biodisponibili-dade é um pré-requisito para o sucesso terapêutico e/ou preventivo de uma tal forma de dosagem.

Breve Sumário da Invenção Foi surpreendentemente verificado que um comprimido revestido com filme compreendendo: (a) pelo menos 50% em peso de um extrato seco de folhas vermelhas de vinha, que é obtenível através de extração de folhas vermelhas de vinha com água e secagem; (b) até 50% em peso de um excipiente consistindo essencialmente em - pelo menos um aglutinante, - pelo menos um desintegrante, - pelo menos um material de enchimento, e - um lubrificante; e (c) um filme de comprimido consistindo essencialmente em um formador de filme, um plastificante, um agente de revestimento e opcionai-mente um agente corante; satisfaz estes requisitos e pode ser usado para aperfeiçoar significantemente a microcirculação e o suprimento de oxigênio na área perimaleolar predominantemente afetada da perna em pacientes de CVI.

Da mesma maneira, a invenção refere-se a um comprimido revestido com filme compreendendo os seguintes constituintes: (a) pelo menos 50% em peso de um extrato seco de folhas vermelhas de vinha, que é obtenível através de extração de folhas vermelhas de vinha com água e secagem; (b) até 50% em peso de um excipiente consistindo essencialmente em - pelo menos um aglutinante, - pelo menos um desintegrante, - pelo menos um material de enchimento, e - um lubrificante; e (c) um filme de comprimido consistindo essencialmente em um formador de filme, um plastificante, um agente de revestimento e opcionalmente um agente corante.

Um outro aspecto da presente invenção é um processo para preparação de tal comprimido revestido com filme compreendendo as etapas de: (A) mistura de extrato aquoso seco de folhas vermelhas de vinha (a) com os excipientes (b), opcionalmente na presença de um diluente volátil; (B) opcionalmente peneirando a mistura obtida; (C) compressão de mistura com uma prensa de comprimido apropriada; e (D) revestimento de comprimido resultante com o filme de comprimido (c).

Além disso, a invenção refere-se ao uso de um tal comprimido revestido com filme para preparação de uma composição farmacêutica ou de dieta para o tratamento ou prevenção do desconforto, distúrbio e/ou doença associada com hipervolemia venosa crônica e hipertensão venosa.

Além disso, a invenção refere-se a um extrato aquoso de folhas vermelhas de vinha, que é obtenível através do processo compreendendo as etapas de: (a) coleta de folhas vermelhas de vinha em um ponto de tempo quando o teor em flavonóides atingiu um ótimo; (b) secagem e trituração de folhas; (c) corte de folhas em pedaços; (d) extração de folhas com água em temperaturas elevadas por 6 a 10 horas; (e) concentração e secagem de extrato obtido, e (f) adição de até 10% em peso de sílica com relação à quantidade total final do extrato resultante.

Breve Descrição dos Desenhos A Figura 1 mostra o desenho esquemático do estudo clínico que foi realizado para provar a eficácia do comprimido revestido com filme da presente invenção. A Figura 2 mostra a influência do comprimido revestido com filme contendo extrato de folha de vinha -·- AS195 360 mg comparado com -o- placebo sobre a microcirculação medida com Fiuxometria Dopler Laser (LDF 10-37 kHz). A Figura 3 mostra a influência do comprimido revestido com filme contendo extrato de folha -·- AS 195 360 mg comparado com -o- placebo sobre pressão parcial de oxigênio transcutânea (tp02).

Descrição Detalhada da Invenção O comprimido revestido com filme da presente invenção consiste em ingredientes herbáceos derivados por uma extração aquosa de folhas vermelhas de vinha (folis vitis viniferae; Extractum Vitis viniferae e folium spissum et siccum) e secagem (a), excipientes (b) e o filme de comprimido (c). Este extrato contém flavon(ol) - glicosídeos, -glucuronídeos e flavonói-des, com quercetin-3-0-p-D-glucuronídeo e isoquercitrin (quercetin-3-Ο-β-glucosídeo) como seus ingredientes ativos principais. A faixa de suas ações farmacológicas ainda não foi inteiramente elucidada, mas estudos in vitro indicam que eles têm propriedades antioxidantes e antiinflamatórias e que eles inibem agregação de plaquetas e hialuronidase e reduzem edema, possivelmente através de redução de permeabilidade capilar. Experimentos in vivo pré-clínicos demonstraram efeitos de espessamento de parede capilar e antiinflamatórios. O comprimido revestido com filme de acordo com a presente invenção compreende 50 a 70% de um extrato de folha vermelha de vinha aquoso seco com um alto teor de flavonóide de 2-15%.

Como uma regra a relação em peso entre o extrato seco e os excipientes usados para produção de núcleo do comprimido está entre 1:1 a 2:1, preferivelmente entre 1,1:1 e 1,8:1, em particular entre 1,25:1 e 1,75:1.

Um comprimido revestido com filme compreendendo (a) 50 a 70% em peso do dito extrato seco de folhas vermelhas de vinha; (b) 25 a 49% em peso do dito excipiente, e (c) 1 a 5% em peso do dito filme de comprimido, baseado na massa total do comprimido revestido com filme, é preferido.

Mais preferido é um comprimido revestido com filme compreendendo (a) 51 a 59%, em particular cerca de 55% em peso do dito extrato seco de folhas vermelhas de vinha; (b) 38 a 48%, em particular cerca de 43% em peso do dito excipiente, e (c) 1 a 3%, em particular cerca de 2,7% em peso do dito filme de comprimido, baseado na massa total do comprimido revestido com filme.

Uma outra modalidade preferida é um comprimido revestido com filme de acordo, onde o excipiente (b) consiste essencialmente em - 70 a 85% em peso de pelo menos um aglutinante, - 0,5 a 12,5% em peso de pelo menos um desintegrante, - 5 a 15% em peso de pelo menos um material de enchimento, e -1 a 5% em peso de pelo menos um lubrificante, baseado na massa total dos excipientes combinados. O termo "aglutinante" como usado anteriormente e a seguir representa um excipiente que é apropriado para ligar outros componentes uns aos outros. Aglutinantes preferidos de acordo com a invenção são selecionados dentre: celulose pulverizada, celulose microcristalina, sorbitol, amido, polivinil pirroli-dona (povidona), copolímeros de vinil pirrolidona com outros derivados vinila (copovidona) derivados de celulose, particularmente metil hidróxi propil celulose, por exemplo, Methocel A 15 LV, e misturas destes compostos. Os aglutinantes preferidos são celulose pulverizada, particularmente celulose microcristalina e/ou copovidona. Se os aglutinantes mencionados acima são usados, a quantidade em peso , baseada na massa total do comprimido de acordo com a invenção, está preferivelmente em uma faixa de 15-45% em peso, mais preferivelmente 25-40% em peso, mais preferivelmente cerca de 33% em peso. Devido ao aglutinante de celulose microcristalina particularmente preferido, comprimidos são obtidos tendo uma alta estabilidade e boa aquiescência para os pacientes aos quais o extrato aquoso de folhas vermelhas de vinha tem de ser administrado. O comprimido de acordo com a invenção também contém desintegrantes em adição aos ingredientes mencionados acima. Dentro do escopo da presente invenção estes desintegrantes opcionalmente também podem ser conhecidos como agentes de colapso. Estes são preferivelmente selecionados, de acordo com a invenção, dentre amido glicolato de sódio, polivinil pirrolidona reticulada (crospovidona), sal de sódio de croscarmelose (sal de sódio de carboxi metil éter de celulose, reticulado), carbóxi metil celulose de sódio, amido de milho seco, sílica anidra coloidal e suas misturas. Dentro do escopo da presente invenção é particularmente preferido usar amido glicolato de sódio, crospovidona e, preferivelmente, o sai de sódio de crospovidona ou croscarmelose e sílica anidra coloidal. Mais preferido é uma mistura de sódio croscarmelose, sílica anidra coloidal e opcionalmente crospovidona. Se os desintegrantes mencionados acima são usados, a quantidade em peso, baseada na massa total do comprimido de acordo com a invenção, está preferivelmente em uma faixa de cerca de 0,5-10% em peso, mais preferivelmente cerca de 1,5-7,5% em peso. Devido à combinação particularmente preferida de desintegrantes, comprimidos são obtidos tendo uma alta estabilidade e proporcionam alta biodisponibílidade para o extrato aquoso de folhas vermelhas de vinha. O comprimido de acordo com a invenção também contém um material de enchimento. Como uma regra, materiais de enchimento são compostos inertes tais como óxidos de metais inorgânicos ou fosfato ou hi-drogenofosfato inorgânico. Preferivelmente o material de enchimento é hi-drogenofosfato de cálcio anidro. Se os materiais de enchimento mencionados acima são usados, a quantidade em peso, baseada na massa total do comprimido de acordo com a invenção, está preferivelmente em uma faixa de cerca de 1-10% em peso, mais preferivelmente cerca de 2-8% em peso. O comprimido de acordo com a invenção também contém agentes de fluxo ou reguladores de fluxo e também lubrificantes, como ingredientes adicionais. Estes incluem, dentro do escopo da presente invenção, por exemplo, dióxido de silício, talco, ácido esteárico, estearil fumarato de sódio, estearato de magnésio e tribehenato de glicerol. De acordo com a invenção estearato de magnésio é preferivelmente usado. Se os lubrificantes preferidos mencionados acima são usados, a quantidade em peso dos mesmos, baseada na massa total do comprimido de acordo com a invenção, está preferivelmente em uma faixa de cerca de 0,1-10% em peso, preferivelmente 0,5-5% em peso, mais preferivelmente entre 0,6 e 1,5% em peso.

Além disso, é preferido um comprimido revestido com filme, onde o filme de comprimido (c) consiste essencialmente em - 50 a 85% em peso de pelo menos um formador de filme, - 5 a 10% em peso de pelo menos um plastificante, - 10 a 20% em peso de peio menos um agente de revestimento tal como talco, e - 0 a 15% em peso de pelo menos um corante, baseado na massa total do filme de comprimido (c). O filme de comprimido de acordo com a invenção também pode conter um ou mais corantes sintéticos ou naturais, farmaceuticamente aceitáveis, preferivelmente um ou mais óxidos de metais inorgânicos como dióxido de titânio (E171) e/ou oxido férrico (E172). Se os corantes preferidos mencionados acima são usados, a quantidade em peso dos mesmos baseada na massa total do comprimido de acordo com a invenção é 0,01 a 0,5% em peso.

Foi ainda um objeto da presente invenção prover um comprimido revestido com filme para prevenção e/ou alívio de desconforto associado com insuficiência venosa crônica suave-a-moderada das extremidades inferiores compreendendo ingredientes herbáceos, onde o comprimido é fabricado de acordo com um processo controlado que conserva as qualidades de cura herbáceas dos ingredientes. É ainda um objeto da presente invenção prover um comprimido revestido com filme que é efetivo em prevenção e/ou alívio de desconforto associado com insuficiência venosa crônica suave-a-moderada das extremidades inferiores. É ainda um objeto da presente invenção prover um comprimido revestido com filme para prevenção e/ou alívio de desconforto associado com insuficiência venosa crônica suave-a-moderada das extremidades inferiores compreendendo ingredientes herbáceos e tendo mínimo ou nenhum efeito colateral e sendo assim seguro para consumo interno e uma alta estabilidade e boa aquiescência de paciente. O extrato aquoso preparado a partir de folhas vermelhas de vinha secas é caracterizado por um alto teor de 2 a 20%, preferivelmente 2 a 10% de flavonóides biologicamente ativos. O termo "uma pessoa em sua necessidade" ou "paciente" como usado aqui acima e abaixo refere-se a uma pessoa macho ou fêmea que sofre de estágios iniciais ciinicamente irrelevantes de insuficiência venosa crônica (CVI) de provada CVI estágio I e II de acordo com Widmer. Como uma regra, tais pacientes são pessoas mais idosas com uma idade entre 30 e 80, preferivelmente entre 32 e 76 anos tendo uma idade média (+/- desvio padrão) de 55,5+/-7,7 anos. Como uma regra, CVI é mais expressa em pacientes fêmeas que em machos.

De modo que esta invenção se torne mais inteiramente entendida, os exemplos mostrados que se seguem. Estes exemplos são para o propósito de realizações ilustrativas desta invenção, e não são para serem construídos como limitantes do escopo da invenção de qualquer maneira.

Os exemplos que se seguem são ilustrativos e, como reconhecido por aqueles versados na técnica, particulares condições podem ser modificadas quando necessário para composições individuais. Os materiais usados em testes abaixo são comercialmente disponíveis ou facilmente preparados a partir de materiais comercialmente disponíveis por aqueles versados na técnica. A base do comprimido é o extrato aquoso de folhas vermelhas de vinha (foliae vitis viniferae L.). O material de partida para a preparação do extrato são folhas vermelhas de vinha coletadas em um ponto de tempo onde o teor de flavonóides atingiu um ótimo. Este é usualmente o caso ao redor do tempo de colheita das uvas. As folhas são cuidadosamente secas e trituradas. Para extração as folhas são cortadas em peças de preferivelmente 5 a 10 mm. Para obter um alto teor de flavonóides a extração é feita em temperatura elevada, preferivelmente em uma temperatura na faixa de 60 a 80°C, por um tempo de pelo menos 6 até 10 horas. O processo preferido é aquele de uma percolação exaustiva. O assim chamado extrato fluido assim obtido no curso da extração é concentrado através do uso de um evaporador apropriado. O extrato espesso obtido nesta etapa é seco, por exemplo, através do uso de um forno de secagem a vácuo ou um transportador de secagem a vácuo.

Todos ou alguns dos excipientes podem ser adicionados durante secagem para facilitar ainda processamento do extrato. Como uma regra, até 10% de um ou mais constituintes dos excipientes podem ser adicionados durante o processo de secagem.

Preferivelmente uma parte do regulador de fluxo tal como sílica anidra, coloidal, é adicionada ao extrato durante secagem ou antes de mistura com os outros constituintes. Preferivelmente a composição de extrato resultante contém 0,5 a 10% em peso, em particular 2,5 a 7,5% em peso, mais preferivelmente cerca de 4% em peso de sílica anidra, coloidal.

Surpreendentemente, comprimidos obtidos de um extrato ao qual uma parte dos excipientes foi adicionada durante o processo de secagem mostra uma estabilidade aperfeiçoada.

Mais preferivelmente o comprimido revestido com filme de acordo com a invenção consiste em • 300 a 500 mg, preferivelmente 320 a 400 mg, em particular cerca de 355 a 380 mg de extrato aquoso seco de folha vermelha de vinha (4-6:1 )(extractum vitis vinifera foliae aquosum siccum), que pode conter até 10% em peso de um regulador de fluxo, em particular sílica anidra, coloidal; os seguintes excipientes do núcleo de comprimido: celulose microcristalina, croscarmelose de sódio, hidrogenofos-fato de cálcio (anidro), sílica coloidal (anidra), estearato de magnésio, e op- cionalmente crospovidona, e um filme de comprimido consistindo em: hipromelose, triestearato de glicerila, dióxido de titânio (E 171), talco, óxido férrico, vermelho (E 172).

Comprimidos revestidos com filme foram preparados com os ingredientes listados nas seguintes Tabelas A e B: Tabela A O extrato é misturado com os excipientes do núcleo de comprimido e comprimido sobre uma prensa de comprimido apropriada.

Tabela B_______________________________________________________ O extrato é misturado com 15,000 mg de sílica durante o processo de secagem, o que rende um extrato consistindo em 96% em peso nos ingredientes do extrato e 4% de sílica. Esta mistura resultante é misturada com os excipientes restantes do núcleo de comprimido e comprimida sobre uma apropriada prensa de comprimido.

As forças de compressão que são necessárias para produção de comprimidos de apropriada resistência à ruptura e portanto com os requeridos tempos de colapso são dependentes das formas e tamanhos das ferramentas de puncionamento usadas. Forças de compressão na faixa de 2-20 kN são preferidas. Maiores forças de compressão podem conduzir a comprimidos com uma liberação retardada de substância ativa. Menores forças de compressão podem produzir comprimidos mecanicamente instáveis. Os núcleos de comprimidos podem ter formas diferentes; as formas preferidas são formas biplanares redondas ou biconvexas e oval ou oblonga. A solução de revestimento é preparada através de mistura de agente de formação de filme com os materiais corantes e um plastificante em água. Usando uma apropriada caçarola de revestimento a solução de revestimento de filme é aplicada sobre os núcleos de comprimidos.

Preferivelmente os comprimidos têm uma forma oblonga para facilitar deglutição. No caso de um comprimido revestido com filme contendo 360 mg de extrato e uma razão de extrato para excipiente como indicada antes, um comprimido oblongo pode ser de cerca de 17-18 mm de comprimento e ter uma largura de cerca de 8 a 9 mm. Estes comprimidos revestidos com filme da Tabela A são aqui abaixo codificados "AS 195".

Para aperfeiçoar a circulação de sangue e/ou o suprimento de oxigênio para as extremidades inferiores, o comprimido deve ser tomado em dosagens correspondendo a 150 e 1000 mg de extrato, preferivelmente 300-800 mg, em particular 350-750 mg diários. A quantidade total de extrato pode ser dividida até em 1 a 3 comprimidos revestidos com filme por dia. A dose diária deve ser tomada de uma vez, preferivelmente de manhã.

Aperfeiçoamento impressionante dos sintomas podem ser esperados dentro de 6 semanas de uso contínuo. O efeito ótimo é mantido ou amplificado em uso mais longo.

Processos Participantes Pacientes machos e fêmeas, idade 18 anos ou mais, como CVII ou CVI provada de acordo com Widmer, com diagnóstico confirmado e presente por pelo menos um ano foram arrolados. Doenças concomitantes medicamente relevantes têm de ser ausentes. Pacientes que usaram drogas para aliviar seus sintomas de CVI dentro de 4 semanas ou foram tratados com teofilin, diuréticos, glicosídeos cardíacos, inibidores ACE ou antagonistas de cálcio dentro de 8 dias antes de primeiro exame não foram permitidos serem arrolados. Bandagens de compressão ou terapia simultânea para problemas venosos foram proibidas durante a participação no experimento. Desenho e Procedimentos O experimento de cruzamento controlado - placebo, randomizado, cego - duplo, foi corrido de acordo com os princípios da declaração de Helsinki e a International Conference of Harmonisation of Good Clinicai Practice.

Cada paciente participou por 17 semanas no experimento: por uma semana lavado - fora (tratado - placebo), por um período de tratamento de 6 semanas (Grupo 1 partindo com AS 195, Grupo 2 partindo com placebo), para uma lavagem fora de 4-semanas (tratado - placebo), e para um segundo período de tratamento de 6 semanas (Grupo-1 continuando com placebo, Grupo-2 continuando com o). AS 195 (comprimidos revestidos com filme contendo 360 mg de extrato seco de folhas vermelhas de vinha) ou comprimidos de placebo foram tomados de acordo com o esquema randomizado como dose simples de manhã. Ambos comprimidos foram idênticos com relação a tamanho, forma, peso, aparência interna, e sabor. Para fluxometria de Doppler laser o equipamento foi provido por LMTB, Berlin, Germany (por exemplo, Doerschel K, Mueller G. Veíocity resolved laser Doppler flow measurement in skin. Lasermedizin 1996; 12:163-171). O equipamento é uma unidade móvel baseada em computador usando uma freqüência de laser de 785 nm. A sonda de laser foi fixada 3,5 cm distai para o tornozelo interno da perna mais afetada. Após 30 minutos repousando para adaptação à temperatura ambiente, medição iniciou-se após 10 minutos de repouso (256 pontos de medição, duração de medição: aproximadamente 0,4 segundo). A luz contradispersada foi recuperada por dois diodos na faixa de freqüências entre 0,2 a 37,2 kHz. Os dados foram processados usando uma Fast Fourier Transformation. Finalmente, a produção referida para a faixa de freqüências entre 0,2 a 10,0 kHz para vasos no plexo venoso reticular (vasos principalmente termorreguladores, maiores, diâmetro de mais que 30 micrometros) e para a faixa de freqüências entre 10,1 a 37,2 kHz para capilares no plexo venoso subpapilar (vasos nutritivos pequenos superficiais, diâmetro de 6 a 30 micrometros).

Pressão de oxigênio transcutânea (tcP02) foi medida usando eletrodos polarográficos tipo Clark modificados contendo catodos de metal nobre e anodos de prata/cloreto de prata (TCM 3, Radiometer Copenhagen, Br0nsh0j, Denmark). Um elemento de aquecimento adjacente ao anodo manteve a temperatura de pele em 43°C. Nesta temperatura as arteríolas são maximamente dilatadas, tcP02 aproxima-se de P02 de sangue arterial (por exemplo, Bollinger A, Jãger K, Jünger M, Seifert H. The vascular labo-ratory: advances in non-invasive techniques. World J Surg 1988:12:724-731). O eletrodo foi ligado à superfície de pele através de um dispositivo de anel adesivo que foi enchido com solução salina fisiológica, 3,5 cm anteriolateral a partir da sonda Doppler Laser. Após 30 minutos de repouso para adaptação para temperatura ambiente, medição iniciou após 10 minutos de repouso. Uma medição levou aproximadamente 15 minutos. Os valores de tcP02 são expressos em milímetros de coluna de mercúrio (mmHg). Valores normais disponíveis para o dorso do pé de pacientes sem CVI são variados entre 40 e 80 mmHg. A temperatura de pele local foi medida com um termistor fixado adjacente ao eletrodo de oxigênio na região perimaieoiar. De modo a minimizar efeitos sobre a perfusão de pele, medições de LDF e tcP02 foram conduzidas entre 28 e 32°C de temperatura de pele local.

Circunferência de barriga-da-perna e tornozelo foram medidas usando uma fita de medição. Medições foram realizadas no tornozelo lateral e mediai e no meio da barriga-da-perna.

Sintomas subjetivos de CVI (pernas pesadas, cansadas, sensação de tensão, sensação de formigamento, e dor) foram medidos através do uso de uma escala análoga visual de 10 cm como zero como "nenhum" e 10 cm como "muito forte".

Eficácia de tratamento total foi classificada por pacientes e investigadores sobre uma escala de classificação verbal de 4-pontos (bom, satisfatório, não satisfatório e mau) no fim de cada período de tratamento.

Tolerabilidade total foi classificada por pacientes e investigadores em uma escala de classificação verbal de 4 pontos (bom, satisfatório, não satisfatório, e mau). Os pacientes foram questionados sobre seu bem-estar em termos gerais em cada visita.

Resultados Setenta e uma mulheres e homens de idade entre 36 e 76 anos com CVI estágios I e II provados de acordo com Widmer foram incluídos. A idade média (+/- desvio padrão) foi 55,2+/-7,7 anos; 55 foram mulheres e 16 homens. O status flebológico revelou intensidade moderada ou severa de varicose em 47 (67,1%), pigmentação em 27 (38,6%), edema de tornozelo em 26 (37,1%), e edema em perna inferior em 25 (35,7%) de pacientes. Sinais suaves de atrofia estavam presentes em 13 pacientes (18,6%), de eczema em nenhum (Tabela 1).

Tabela 1: Características demográficas e de linha base de CVI __________ AS 195/Placebo Placebo/AS195 ___________________________________(n=36)________________(n=35)__________ Variável Contínua (mediana(faixa)) Idade [anos] 66(32-76) 66(37-76) Altura [cm] 168(150-186) 165(150-191) Peso [Kg] 76,5(48-97) 73(55-120) índice de massa de corpo [kg/m2] 27,6(20,6-32,0) 26,7(20,1-42,5) Pressão sangüínea sistólica [mmHg] 130(100-150) 135(120-140) Pressão sangüínea diastólica [mmHg] 80(60-90)____________80(65-90) Variáveis categóricas (n(%)) Fêmea 24(66,7) 31(88,6) Fumante atual 4(11,1) 1(2,9) Estágio CVI

Estágio I 26(72,2) 23(65,7) Estágio II 10(27,8) 12(34,3) Status flebológico de intensidade moderada-severa Varicose 26(72,2) 22(62,9) Pigmentação 11(30,6) 17(48,6) Atrofia 0(0,0) 0(0,0) Eczema 0(0,0) 0(0,0) Edema de tornozelo 13(36,1) 14(40,0) Edema de perna inferior^________12(33,3) 14(40,0)______ Violações de protocolo não ocorrem nos pacientes restantes.

Por isso, todos os pacientes permaneceram na intenção de tratar análises (Figura 1). Características de pacientes foram homogeneamente distribuídas através de duas seqüências de tratamento(Grupo-1, Grupo-2) exceto para a razão de sexo (12 homens no Grupo-1, 4 homens no Grupo-2)(Tabela 1). Valores de linha base para os parâmetros de Doppler laser, oximetria trans-cutânea, circunferências de tornozelo e barriga da perna, e sintomas subjetivos foram comparáveis para Grupo-1 e Grupo-2 (Tabela 2). Aquiescência com o comprimido revestido com filme de acordo com a invenção foi aproximadamente 100% em ambas seqüências de tratamento.

Tabela 2: Média (+/-desvio padrão) de características de linha base de cada período de tratamento________________________ __________Período 1___________________________________Período 2_____________ AS 195 Placebo AS 195 Placebo _____________________________________________(n=36)_______________(n=34)________________(n=34)_________________(n=36) Fluxometria Doppler Laser [AU] 10-37 kHz 303,5(135,2) 333,5(153,0) 275,4(126,4) 293,3(119,9) <10 kHz 352,7(87,7) 370,8(120,0) 174,7(77,0) 189,4(67,6) Oximetria transcutânea 32,1(7,0) 32,3(6,4) 30,1(6,2) 30,8(6,4) [mmHg] Circunferência [cm] Tornozelo 20,3(2,2) 20,4(2,4) 20,2(2,6) 20,3(2,2) Barriga da perna 34,7(3,1) 34,2(3,0) 34,0(3,1) 34,6(3,2) Sintomas subjetivos [cm] Cansado/pernas pesadas 4,3(2,8) 3,7(2,9) 4,6(2,9) 5,2(2,6) Dor nas pernas 4,0(3,2) 3,2(3,1) 4,5(2,7) 4,9(3,1) Sensação de tensão 4,5(2,9) 4,1(2,8) 4,5(2,6) 5,1(2,5) _______ Sensação de formigamento______________3,3(3,1)____________2,7(2,9)_____________3,7(2,6)______________4,2(2,8) Medições de fluxo de Doppler Laser na faixa de freqüência de 10-37 kHz foram eleitas para o ponto final primário. Estas frequências são consideradas serem determinadas pelo número de eritrócitos e seus movimentos (velocidade de fluxo) nos capilares da camada superficial da pele da perna. Após 6 semanas, as freqüências de Doppler de laser (10-37 kHz) aumentaram no grupo AS195 (mais 241,8+/-18,7 AU) mas diminuíram no grupo placebo (menos 41,0+/-18,7 AU, p<0,0001)(Tabela 3). Este efeito estava presente tão inicial como 3 semanas após o início de tratamento (p<0,0001)(Tabela 4, Figura 2).

Tabela 3: Média (+/-SEM) de mudança a partir de linha base ajustada para efeitos de período, intervalo de confiança de 95% para contrastes de tratamento e valor p após 3 semanas de tratamento com 360 mg de AS195 ou placebo__________________________________ ___________Tratamento_____________________________________Contraste de Tratamento____________ ________________________________________AS 195 (n=70) Placebo (n=70) Diferença (n=70) Intervalo de confiança (n=70) Valor de p Semana 3 Fluxometria Doppler de Laser [AU] 10-37 kHz 132,2(11,9) -28,2(11,9) 160,5 127,0 a 194,0 <0,0001 <10 kHz -3,7(9,2) -99,9(9,2) 96,2 70,2 a 122,2 <0,0001 Oximetria Transcutânea [mmHg] 0,62(0,97) -3,84(0,97) 4,46 1,72 a 7,20 0,0018 Circunferência [cm] Tornozelo -0,19(0,09) 0,21(0,09) -0,40 -0,65 a -0,15 0,0025 Barriga da perna -0,24(0,04) 0,04(0,04) -0,28 -0,40 a -0,17 <0,0001 Sintomas Subjetivos [cm] Cansado/pernas pesadas -0,94(0,25) 0,21 (0,25) -0,73 -1,42 a-0,04 0,0396 Dor nas pernas -1,17(0,23) -0,24(0,23) -0,94 -1,5 a-0,28 0,0061 Sensação de tensão -1,00(0,24) -0,52(0,24) -0,49 -1,17 a 0,19 0,1588 _______ Sensação de formigamento -0,99 (0,26) -0,20 (0,26)________-0,79 -1,52 a 0^______________0£335— Tabela 4: Média (+/-SEM) de mudança a partir de linha base ajustada para efeitos de período, intervalo de confiança de 95% para contrastes de tratamento e valor p após 6 semanas de tratamento com 360 mg de AS195 ou placebo_____________________________ __________Tratamento____________________________________Contraste de Tratamento__________ ________________________________________AS195(n=7Q) Placebo (n=70) Diferença (n=70) Intervalo de confiança (n=70) Valor de p Semana 6 Fluxometria Doppler de Laser [AU] 10-37 kHz(ponto final primário 241,8(18,7) -41,0(18,7) 282,8 229,9 a 335,7 <0,0001 <10 kHz 57,0(12,4) -107,7(12,4) 164,7 129,7 a 199,7 <0,0001 OximetriaTranscutânea [mmHg] 1,35 (0,97) -7,27(0,97) 8,63 5,88 a 11,38 <0,0001 Circunferência [cm] Tornozelo -0,39(0,09) 0,29(0,09) -0,68 -0,94 a 0,43 < 0,0001 Barriga da perna -0,54(0,05) 0,14(0,05) -0,68 -0,83 a-0,53 <0,0001 Sintomas Subjetivos [cm] Cansado/pernas pesadas -0,78 (0,33) -0,94(0,33) 0,16 -0,76 a 1,09 0,7285 Dor nas pernas -0,76 (0,35) -0,86 (0,35) 0,10 -0,88 a 1,09 0,8323 Sensação de tensão 0,96 (0,35) -1,40(0,35) 0,44 -0,46 a 1,44 0,3819 ________Sensação de formigamento________-0,55 (0,30)____-0,66 (0,30)________0JJ__________ -0,75 a 0,96____________0,8044 Medições de Fluxo Doppler de Laser na faixa de freqüência abaixo de 10 kHz são consideradas serem determinadas pelo número de eritrócitos e seus movimentos (velocidade de fluxo) nos capilares na camada mais profunda principalmente termorreguladora da pele da perna. Após 6 semanas, as freqüências Doppler de laser abaixo de 10 kHz) aumentaram no grupo AS195 (mais 57,0+/-12,4 AU) e diminuíram no grupo placebo (menos 107,7+/-12,4 AU, p<0,0001) (Tabela 3). Este efeito parece depender da condição climática durante o período de tratamento. Durante o período de estudo de temperaturas moderadas (Abril/Maio) as medições de Doppler de Laser (<10 kHz) permaneceram inalteradas no grupo de tratamento AS195 após uma queda inicial enquanto as medições no grupo placebo diminuíram (p<0,0001). Durante o período de estudo de maiores temperaturas (Julho / Agosto) as medições de Doppler de laser (<10 kHz) aumentaram no grupo de tratamento de AS 195 e permaneceram constantes no grupo piacebo (p<0,0001). A pressão de oxigênio transcutânea aumentou no grupo AS195 (mais 1,35+/-0,97 mmHg) mas diminuíram no grupo placebo (menos 7,27+1-0,97 mmHg, p<0,0001). Esta observação foi consistente em ambos períodos de tratamento e pode por isso estar em linha o fluxo de Doppler Laser na camada superficial nutritiva da pele (isto é, 10-37 kHz)(Tabelas 3, 4, Figura 3). A estatisticamente significante e clinicamente relevante redução de circunferências de tornozelo (após 3 semanas: AS195 menos 0,19+/-0,09 cm, placebo mais 0,21 +/-0,09 cm, p = 0,0025) e barriga da perna (após 3 semanas: AS195 menos 0,24+/-0,04 cm, placebo mais 0,04+/-0,04 cm, p<0,0001) indica um início de ação tão cedo como 3 semanas após o começo de tratamento (Tabela 3). Este efeito torna-se mais pronunciado após 6 semanas (AS 195 tornozelo: menos 0,39+/-0,09 cm, barriga da perna: menos 0,54+/-0,05; placebo tornozelo: mais 0,29+/-0,09 cm, barriga da perna: mais 0,14 +/- 0,05 cm, p < 0,0001 )(Tabela 4). Não houve alteração relevante da intensidade dos sintomas subjetivos relacionados a CVI após 6 semanas de tratamento. Este resultado está em linha com aqueles de um estudo prévio onde sintomas subjetivos medidos em uma escala análoga visual foram reduzidos somente após períodos de tratamento mais longos (12 semanas).

Eventos adversos ocorreram raramente neste estudo. Treze de 71 pacientes experimentaram pelo menos um evento adverso, 12 deles experimentaram o início de ação enquanto em tratamento de placebo, um enquanto em AS195 (bronquite, intensidade moderada, considerada não relacionada com droga pelo investigador). O paciente que morreu de parada cardíaca foi tratado com placebo (nunca recebeu AS195 neste experimento). Todos os pacientes avaliaram a tolerabilidade total como boa ou satisfatória. Os parâmetros de laboratório não se alteraram durante o estudo.

Discussão Foi mostrado no estudo anterior (WO 01/28363) que extrato de folhas vermelhas de vinha AS195 reduz edema de perna inferior, circunferência de barriga da perna, e circunferência de tornozelo em adição a aperfeiçoamento de sintomas subjetivos relacionados à insuficiência venosa crônica em pacientes tratados uma vez por dia por 12 semanas7. O presente estudo foi designado para prover informação adicional sobre o mecanismo subjacente de ação através de investigação de microcirculação como um parâmetro substituto clinicamente relevante para problemas de perna relacionados com CVI. Este estudo é o primeiro em pacientes CVI alveja para investigar em adição à edema de perna redução de ainda efeitos clínicos relevantes relacionados à terapia com extrato de folhas vermelhas de vinha. A reduzida drenagem venosa resulta em microcirculação cutânea prejudicada com perturbações tróficas da pele. Se CVI permanece não tratada esta condição pode mesmo resultar em úlceras de perna venosas. Fluxometria Do-ppler de laser, como usada no presente estudo, é um processo válido e sensível para medir efeitos de tratamento objetivos que podem ser relacionados à redução de volume experimentada subjetivamente após 3 meses de tratamento.

Os resultados de estudo adaptam-se nos dados clínicos disponíveis para AS195 e adicionam informação sobre o início de ação. O volume de perna como um parâmetro objetivo será reduzido em um grau clinicamente relevante e estatisticamente significante após 6 semanas de tratamento. Este efeito objetivo também foi reportado recentemente com extrato de semente de castanha (por exemplo, Diehm C, Trampisch HJ, Lange S, Schmidt C. Comparison of leg compression stocking and oral horse-chestnut seed extract therapy in patients with chronic venous insufficiency. Lancet 1996; 347:292-294) e Butchers Broom (por exemplo, Vanscheidt W, Jost V, Wolna P, et al. Efficacy and safety of a Butcher’s Broom preparation (Ruscus aculeatus L. extract) compared to placebo in patients suffering from chronic venous insufficiency. Drug Res. 2002;52(4):243-250).

No presente estudo foi mostrado que os parâmetros de fluxome-tria Doppler laser, as circunferências de tornozelo e barriga da perna e a pressão de oxigênio transcutânea foram afetadas tão inicialmente como após 3 semanas de tratamento. Em contraste, os sintomas subjetivos de CVI classificados em uma escala análoga visual não foram significantemente diferentes de placebo após 6 semanas de tratamento como foram no estudo anterior. Uma duração de tratamento de 12 semanas é obrigatória para uma relevante redução de sintomas CVI subjetivos.

Os presentes resultados sugerem um principal papel de extrato de folhas vermelhas de vinha em prevenção de progressão de CVI e a ocorrência de lesões de pele tróficas e pode mesmo prevenir ou retardar a transição de estágios clinicamente não relevantes iniciais de CVI para CVI Estágio I.

Claims (6)

1. Comprimido revestido com filme possuindo maior estabilidade, caracterizado pelo fato de que compreende: (a) 50 a 70% em peso de um extrato aquoso seco de folhas vermelhas de vinha; (b) 25 a 49% em peso de um excipiente; e (c) 1 a 5% em peso de um formador de filme; com base na massa total do comprimido revestido por filme, em que o extrato aquoso seco das folhas vermelhas de vinha é obtido por um processo de secagem que compreende a etapa de adição de sílica durante o processo de secagem.

2. Comprimido revestido com filme de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o dito extrato aquoso seco de folhas vermelhas de vinha é obtenível através de um processo compreendendo as etapas: (a) coleta de folhas vermelhas de vinha em um ponto de tempo quando o teor em flavonóides atingiu um ótimo; (b) secagem e trituração de folhas; (c) corte de folhas em pedaços; (d) extração de folhas com água em uma temperatura na faixa de 60 a 80°C por 6 a 10 horas; (e) concentração e secagem do extrato obtido, e (f) adição de até 10% em peso de sílica relacionada à quantidade total final do extrato resultante;

3. Comprimido revestido com filme de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a sílica é uma sílica coloidal anidra;

4. Comprimido revestido com filme de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o dito extrato compreende 2,5 a 7,5% em peso de sílica anidra, coloidal.

5. Comprimido revestido com filme de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o excipiente compreende um aglutinan-te em uma quantidade em peso com base na massa total do comprimido de 15 a 45%, e em que o aglutinante é selecionado dentre celulose pulverizada, celulose microcristalina, amido, polivinil pirrolidona, copolímeros de vinil pir-rolidona com outros derivados vinila, derivados de celulose e misturas dos mesmos.

6. Comprimido revestido com filme de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o excipiente (c) consiste em 50 a 85% em peso de pelo menos um formador de filme, 5 a 10% em peso de pelo menos um plastificante, 10 a 20% em peso de pelo menos um agente de revestimento, e 0 a 15% em peso de pelo menos um corante com base na massa total do filme de comprimido (c).