BRPI0117190B1

BRPI0117190B1 - composto, composição farmacêutica, processo para a fabricação de um composto e uso do mesmo

Info

Publication number: BRPI0117190B1
Application number: BRPI0117190A
Authority: BR
Inventors: Descours Anne; Obrecht Daniel; Anthony Robinson John
Original assignee: Polyphor Ltd; Univ Zuerich
Priority date: 2001-12-11
Filing date: 2001-12-11
Publication date: 2018-10-23
Also published as: JP4098244B2; CN101157720B; CA2466591A1; AU2002234564A1; AU2002234564B2; CN1582296A; EP1458747B1; HK1117541A1; JP2005524613A; US20050187145A1; US7417024B2; DE60137654D1; WO2003054000A1; BR0117190A; AU2002234564C1; ATE422501T1; EP1458747A1; CA2466591C; CN101157720A; CN101157924A

Abstract

"composto, composição farmacêutica, uso do composto, e, processo para fabricá-lo". peptideomiméticos de grampo-de-cabelo <225> fixados-a-gabarito da fórmula geral em que z é uma cadeia fixa-ao-gabarito de 7 ou 11 radicais de aminoácidos <244> que, dependendo de suas posições na cadeia (contadas partindo do aminoácido n-terminal) são gly, ou pro, ou de determinados tipos que, como os símbolos remanescentes nas fórmulas acima, são definidos na descrição e nas reivindicações, e seus sais, apresentam a propriedade de inbir proteases, em particular serina proteases. estes peptideomiméticos de grampo-de-cabelo em <225> podem ser fabricados por meio de um processo que se baseia em uma estratégia sintética mista de fase sólida e de fase solução.

Description

(54) Título: COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, PROCESSO PARA A FABRICAÇÃO DE UM COMPOSTO E USO DO MESMO (51) lnt.CI.: C07K 7/06; C07K 7/08; C07K 7/64; A61K 38/08; A61K 38/10 (73) Titular(es): POLYPHOR LTD.. UNIVERSITÀT ZÜRICH (72) Inventor(es): DANIEL OBRECHT; JOHN ANTHONY ROBINSON; ANNE DESCOURS (85) Data do Início da Fase Nacional: 04/06/2004 “COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, PROCESSO PARA A FABRICAÇÃO DE UM COMPOSTO E USO DO MESMO”

A presente invenção proporciona peptideomiméticos tipo βhairpin, fixados-a-template incorporando uma cadeia fixa-a-template de 7 ou 11 radicais de aminoácidos α que, dependendo de sua posição na cadeia, são Gly, ou Pro, ou de determinados tipos, como definido abaixo. Estes peptideomiméticos tipo β-hairpin fixados-a-template são úteis como inibidores de enzimas protease. Eles são particularmente valiosos como inibidores de várias serina proteases, como tripsina, catepsina humana G, e trombina. Adicionalmente, a presente invenção proporciona um processo eficiente através do qual, se desejado, estes processos podem ser preparados em formato de biblioteca. Esta abordagem tipo-biblioteca constitui uma ferramenta eficiente e inédita para identificar inibidores específicos de serina protease.

Inibidores de proteases estão emergindo com utilizações terapêuticas promissoras no tratamento de doenças, como cânceres (R. P. Beckett, A. Davidson, A. H. Drummond, M. Whittaker, Drug Disc. Today 1996, 1, 16-26; L. L. Johnson, R. Dyer, D. J. Hupe, Curr. Opin. Chem. Biol. 1998, 2, 466-71; D. Leung, G. Abbenance, e D. P. Fairlie, J. Med. Chem. 2000, 43, 305-341), infecções parasíticas, fúngicas e viróticas [p. ex. esquistosomose (Μ. M. Becker, S. A. Harrop, J. P. Dalton, B. H. Kalinna, D. P. McManus, D. P. Brindley, J. Biol. Chem. 1995, 270, 24496-501); malária (A. M. Silva, A. Y. Lee, S. V. Gulnik, P. Maier, J. Collins, T. N. Bhat, P. J. Collins, R. E. Cachau, K. E. Luker, I. Y. Gluzman, S. E. Francis, A. Oksman, D. E. Goldberg, J. W. Erikson, Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A 1996, 93, 100349), C. albicans (C. Abad-Zapetero, R. Goldman, S. W. Muchmore, C. Hutchins, K. Stewart, J. Navaza, C. D. Payne, T. L. Ray, Protein Sei. 1996, 5, 640-52), HIV (A. Wlodawer, J. W. Erickson, Annu. Rev. Biochem. 1993, 62, 543-85; P. L. Darke, J. R. Huff, Adv. Pharmacol. 1994, 5, 399-454), hepatite de 23/07/2018, pág. 13/186 (J. L. Kim, K. A. Morgenstem, , C. Lin, T. Fox, M. D. Dwyer, J. A. Landro, S. P. Chambers , W. Markland, C. A. Lepre, E. T. CTMalley, S. L. Harbeson,

C. M. Rice, Μ. A. Murcko, P. R. Caron, J. A. Thomson, Cell, 1996, 87, 34355; R. A. Love, Η. E. Parge, J. A. Wickersham, Z. Hostomsky, N. Habuka, E.

W. Moomaw, T. Adachi, Z. Hostomska, Cell, 1996, 87, 331-342), herpes (W. Gibson, M. R. Hall, Drug. Des. Discov. 1997, 15, 39-47)], e defeitos inflamatórios, imunológicos, respiratórios (P. R. Bemstein, P. D. Edwards, J. C. Williams, Prog. Med. Chem. 1994, 31, 59-120; T. E. Hugli, Trends Biotechnol. 1996, 14, 409-12), cardiovasculares (Μ. T. Stubbs, W. A. Bode,

Thromb. Res. 1993, 69, 1-58), e neurodegenerativos incluindo doença de Alzheimer (R. Vassar, B. D. Bennett, S. Babu-Kahn, S. Kahn, E. A. Mendiaz, Science, 1999, 286, 735-41).

Como a maior parte das proteases ligam seus substratos em conformações estendidas ou em filamento β, inibidores bons precisam portanto ser capazes de emular uma tal conformação. Assim, miméticos de βhairpin são idealmente apropriados para travar seqüências de peptídeos numa conformação estendida.

Entre as proteases, serina proteases constitutem alvos terapêuticos importantes. Serina proteases são classificadas de acordo com sua especificidade por um substrato, particularmente pelo tipo de radical encontrado em Pl, como radicais semelhantes a tripsina radicais carregados positivamente Lys/Arg preferidos em Pl), semelhantes a elastase (radicais hidrofóbicos pequenos Ala/Val em Pl), ou semelhantes a quimiotripsina (radicais hidrofóbicos grandes Phe/Tyr/Leu em Pl). Serina proteases para as quais dados de raios-X de inibidor de protease são disponíveis no banco de dados PDB (PDB: www.rcsb.org/pdb) incluem tripsina, α-quimiotripsina, γquimiotripsina, elastase de neutrófilos humanos, trombina, sutilisina, citomegalovírus humano, proteinase A, achromobacter, catepsina humana G, protease específica para ácido glutâmico, carbopeptidase D, fator de

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 14/186 coagulação do sangueVIIa, fator porcino 1XA, peptidase mesentérica, HCV protease, e termitase. Outras serina proteases que são de interesse terapêutico incluem triptase, convertase de complemento, protase sa hepatite C-NS3. Inibidores de trombina (p. ex. J. L. Metha, L. Y. Chen, W. W. Nichols, C.

Mattsson, D. Gustaffson, T. G. P. Saldeen, J. Cardiovasc. Pharmacol. 1998, 31, 345-51; C. Lila, P. Gloanec, L. Cadet, Y. Herve, J. Foumier, F. Leborgne, T. J. Verbeuren, G. Denanceuil, Synth. Comm. 1998, 28, 4419-29) e fator Xa (p. ex. J. P. Vacca, Annu. Rep. Med. Chem. 1998, 33, 81-90) encontram-se sob avaliação clínica como anti-trombóticos, inibidores of elastase (J. R.

Williams, R. C. Falcone, C. Knee, R. L. Stein, A. M. Strimpler, B. Reaves, R. E. Giles, R. D. Krell, Am. Rev. Respir. Dis. 1991,144, 875-83) encontram-se sendo submetidos a ensaios clínicos quanto a enfisema e outras doenças pulmonares em que inibidores de triptase encontram-se correntemente em ensaios clínicos de fase II quanto a asma (C. Seife, Science 1997, 277, 160215 3). Finalmente, a catepsina G e a elastase estão intimamente envolvidas na modulação de atividades de citocinas e seus receptores. Particularmente, em sítios de inflamação, altas concentrações de catepsina G, elastase e proteinase 3 são liberadas de células polimorfonucleares infiltrantes em estreita correlação temporal com níveis elevados de citocinas inflamatórias, indicando fortemente que estas proteases estão envolvidas no controle da bioatividade e disponibilidade (U. Bank, S. Ansorge, J. Leukoc. Biol. 2001, 69, 177-90). Assim inibidores of trombina e catepsina G constitutem alvos valiosos para drogas candidatas inéditas.

Dos muitos inibidores de serina protease proteináceos ocorrentes, um é um peptídeo cíclico com 14 aminoácidos de sementes de girassol, demoninado inibidor de tripsina de girassol (SFTI-1: sunflower tripsin inhibitor) (S. Luckett, R. Santiago Garcia, J. J. Barker, A. V. Konarev, P. R. Shewry, A. R. Clarke, R. L. Brady, J. Mol. Biol. 1999, 290, 525-533; Y.-Q. Long, S.-L. Lee, C.-Y. Lin, I. J. Enyedy, S. Wang, P. Li, R. B. Dickson,

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Ρ. Ρ. Roller, Biorg. & Med. Chem. Lett. 2001, 11, 2515-2519), que mostra similaridade tanto de seqüência como de conformação com a alça reativa para tripsina da família Bowman-Birk de inibidores de serina protease. O inibidor adopta uma conformação de β-hairpin quando bgado ao sítio ativo de βtripsina bovina. SFTI-1 inibiu β-tripsina (Ki<0,lnM), catepsina G, elastase (Kj~105nM), quimiotripsina (Κι~7,4μΜ) e trombina (Ki~136mM).

Nós ilutramos aqui uma abordagem para projeto de inibidor que envolve transplantar a alça de β-hairpin do peptídeo naturalmente ocorrente para um template indutor de alça em hairpin. Com base na estrutura de 3D bem definida do β-hairpin é possível projetar bibbotecas de miméticos de compostos que, finalmente, levam a inibidores inéditos que apresentam diferentes perfis de especificidade relativamente a várias classes de proteases.

Peptídeos miméticos de hairpin ligados a template foram descritos na bteratura (D, Obrecht, M. Altorfer, J. A. Robinson, Adv. Med. Chem. 1999, 4, 1-68; J. A. Robinson, Syn. Lett. 2000, 4, 429-441), porém moléculas desse tipo não foram avabadas previamente quanto ao desenvolvimento de peptídeos que inibem proteases e constituem miméticos com conformações estendidas de peptídeos. No entanto, a capacidade de gerar peptideomiméticos de β-hairpin utibzando métodos de sínteses combinatoriais e paralelas foi estabelecida agora (L. Jiang, K. Moehle, B. Dhanapal, D. Obrecht, J. A. Robinson, Helv. Chim. Acta. 2000, 83, 30973112). Esta tecnologia permite sintetizar rapidamente bibbotecas de inibidores de protease e explorar radicais-chave que determinam a especificidade para uma dada serina protease.

Os peptideomiméticos tipo β-hairpin da presente invenção são compostos da fórmula geral

	á
Template

(I)

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 16/186 em que

	k
Template

é um grupo de uma das fórmulas

,20

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é o resíduo de um aminoácido L-α em que B é um radical de fórmula NR²⁰CH(R⁷¹)- ou o enanciômero de um dos grupos de Al a A69 como definido previamente;

é um grupo de uma das fórmulas

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Α25 Α26

Α29 Α30 Α31

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Α85 Α86

I . ^N-R

Α92 Α93 Α94

Α95 Α96

N O R¹²

A97

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Α100 Α101 Α102 Α103 Α104

R¹ é H; alquila inferior; ou arila-alquila inferior;

R² é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; -(CH2)m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOCONR³³R⁷⁸; (CH2)m(CHR⁶¹)sNR²⁰CONR³³R⁷⁸; -(CH2)o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; (CH2)o(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)₂;

(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R³ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶;

-(CH₂)_m(CHR⁶¹)_sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷ ; -(CH2)_o(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹ ; (CH2)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁴ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶;

-(CH₂)_m(CHR⁶¹)_sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_p(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_p(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; (CH2)_p(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_p(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁵ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOCONR³³R⁷⁸; (CH2)m(CHR⁶¹)sNR²⁰CONR³³R⁷⁸; -(CH2)o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; (CH2)o(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)₂;

(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁶ é H; alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; (CH2)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 22/186

-(CH₂)_O(CHR⁶¹)S SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁷ é alquila; alquenila; -(CH2)q(CHR⁶¹)sOR⁵⁵;

(CH₂)_q(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴;-(CH2)_r(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_r(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)_r(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

(CH₂)_r(CHR⁶¹)_sSO₂R⁶²; ou

-(CH₂)_r(CHR⁶¹)_s C₆H4R⁸;

R⁸ é H; Cl; F; CF3; NO2; alquila inferior; alquenila inferior; arila; arilaalquila inferior; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)NR³³R³⁴ ; -(CH2)_o(CHR⁶¹)sOCONR³³R⁷⁸; 10 (CH2)_o(CHR⁶¹)_sNR²⁰CONR³³R⁷⁸; -(CH2)o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷;(CH₂)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)₂; (CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCOR⁶⁴;

R⁹ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R¹⁰ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R¹¹ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶;

-(CH₂)_m(CHR⁶¹)_sNR³³R³⁴; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOCONR³³R⁷⁸;

(CH₂)_m(CHR⁶¹)_sNR²⁰CONR³³R⁷⁸; -(CH2)o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; (CH2)o(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)₂; (CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_s CóPLR⁸;

R¹² é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; -(CH2)m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)r(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 23/186 (CH₂)_r(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)_r(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

(CH₂)_r(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_r(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R¹³ é alquila; alquenila; -(CH2)q(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)q(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)q(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_q(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_q(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_q(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_q(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_q(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R¹⁴ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵;

(CH₂)_m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)_q(CHR⁶¹)_sCOOR⁵⁷;

(CH₂)_q(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)_q(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

(CH₂)_q(CHR⁶¹)sSOR⁶²; ou -(CH2)_q(CHR⁶¹)_s C₆H₄R⁸;

R¹⁵ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_O(CHR⁶¹)_SC₆H4R⁸;

R¹⁶ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_O(CHR⁶¹)_SC₆H4R⁸;

R¹⁷ é alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_q(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_q(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_q(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_q(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_q(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R¹⁸ é alquila; alquenila; -(CH2)P(CHR⁶¹)SOR⁵⁵; -(CH2)p(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)P(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_p(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_p(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 24/186 (CH₂)_p(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_p(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R¹⁹é alquila inferior; -(CH2)P(CHR⁶¹)SOR⁵⁵; -(CH2)p(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)p(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_p(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_p(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_p(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_p(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)sC6H4R⁸; ou R¹⁸ e R¹⁹ tomados em conjunto podem formar: -(CH2)₂_6-; -(CH₂)₂O(CH₂)₂-; (CH₂)₂S(CH₂)₂-; ou 10 -(CH₂)₂NR³⁴(CH₂)₂-_;

R²⁰ é H; alquila; alquenila; ou arila-alquila inferior;

R²¹ é H; alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R²² é H; alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R²³ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R²⁴ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 25/186 (CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R²⁵ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵;

(CH₂)_m(CHR⁶¹)_sSR⁵⁶; -(CH2)m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R²⁶ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; -(CH2)m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)₂;

(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸; ou

R²⁵ e R²⁶ tomados em conjunto podem formar: -(CH2)2_6-; -(CH2)rO(CH2)r-; (CH2)rS(CH2)r-; ou -(CH2)rNR³⁴(CH2)_r-;

R²⁷ é H; alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; 15 (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R²⁸ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)s-OR⁵⁵; -(CH2)O(CHR⁶¹)S SR⁵⁶; 20 (CH2)O(CHR⁶¹)S NR³³R³⁴;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s COOR⁵⁷; -(CH2)₀(CHR⁶¹)s CONR⁵⁸R⁵⁹; (CH2)_O(CHR⁶¹)S PO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_s CôífiR⁸;

R²⁹ é alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; 25 (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R³⁰ é H; alquila; alquenila; ou arila-alquila inferior;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 26/186

R³¹ é

R³²é R³³ é

R³⁴é R³⁵ é

R³⁶é

R³⁷ é

R³⁸ é

H; alquila; alquenila; -(CH2)_P(CHR⁶¹)SOR⁵⁵; (CH2)_p(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCOOR⁵⁷;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)₂; (CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)_O(CHR⁶¹)_S CóELR⁸;

H; alquila inferior; ou arila-alquila inferior;

H; alquila, alquenila; -(CH₂)_m(CHR⁶¹)_sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; -(CH2)m(CHR⁶¹)sNR³⁴R⁶³; -(CH₂)_m(CHR⁶¹)sOCONR³⁴R⁷⁸;(CH2)_m(CHR⁶¹)sNR²⁰CONR³⁴R⁷⁸; -(CH2)_o(CHR⁶¹)sCOR⁶⁴; (CH2)_o(CHR⁶¹)s-CONR⁵⁸R⁵⁹, -(CH2)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

(CH₂)₀(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_O(CHR⁶¹)_SC₆H4R⁸;

H; alquila inferior; arila, ou arila-alquila inferior;

H; alquila; alquenila; -(CH₂)_m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; (CH2)_m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)_P(CHR⁶¹)_SCOOR⁵⁷;

(CH₂)_p(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)_p(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

(CH₂)_p(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)_P(CHR⁶¹)_S CóFUR⁸;

H, alquila; alquenila; -(CH₂)_o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; (CH2)_p(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)_p(CHR⁶¹)_sCOOR⁵⁷;

(CH₂)_p(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)_p(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2; (CH₂)_p(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)_O(CHR⁶¹)_S CóFUR⁸;

H; F; Br; Cl; NO₂; CF₃; alquila inferior; -(CH₂)_P(CHR⁶¹)SOR⁵⁵; (CH2)_p(CHR⁶¹)_sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)_O(CHR⁶¹)_S CóFLR⁸;

H; F; Br; Cl; NO₂; CF₃; alquila; alquenila; -(CH₂)_P(CHR⁶¹)SOR⁵⁵; (CH2)_p(CHR⁶¹)_sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)_O(CHR⁶¹)_SC₆H4R⁸;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 27/186

R³⁹ é H; alquila; alquenila; ou arila-alquila inferior;

R⁴⁰ é H; alquila; alquenila; ou arila-alquila inferior;

R⁴¹ é H; F; Br; Cl; NO₂; CF₃; alquila; alquenila; -(CH₂)_P(CHR⁶¹)SOR⁵⁵; (CH2)_p(CHR⁶¹)_sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_s CôPLR⁸;

R⁴² é H; F; Br; Cl; NO₂; CF₃; alquila; alquenila; -(CH₂)_P(CHR⁶¹)SOR⁵⁵; (CH2)_p(CHR⁶¹)_sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_s CôPLR⁸;

R⁴³ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵;

(CH₂)_m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCOOR⁵⁷;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)o(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)₂;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sSO2R⁶²; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_s CôPUR⁸;

R⁴⁴ é alquila; alquenila; -(CH₂)_r(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)_r(CHR⁶¹)_sSR⁵⁶; (CH2)r(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_r(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_r(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_r(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_r(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_r(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁴⁵ é H; alquila; alquenila; -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)0(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; (CH2)O(CHR⁶¹)SNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_s(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

(CH₂)_s(CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_s(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_s(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁴⁶ é H; alquila; alquenila; ou -(CH2)O(CHR⁶¹)PC6H4R⁸;

R⁴⁷ é H; alquila; alquenila; ou -(CH2)o(CHR⁶¹)sOR⁵⁵;

R⁴⁸ é H; alquila inferior; alquenila inferior; ou arila-alquila inferior;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 28/186

R⁴⁹é H; alquila; alquenila; -(CHR⁶¹)SCOOR⁵⁷; (CHR⁶¹)SCONR⁵⁸R⁵⁹; (CHR⁶¹)sPO(OR⁶⁰)2;

-(CHR⁶¹)sSOR⁶²; ou -(CHR⁶¹)sC₆H4R⁸;

R⁵⁰ é H; alquila inferior; ou arila-alquila inferior;

R⁵¹ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶;

-(CH₂)_m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_sCOOR⁵⁷;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)_o(CHR⁶¹)pPO(OR⁶⁰)2;

(CH₂)_p(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_p(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁵² é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; 10 -(CH2)m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁵⁷; -(CH2)_o(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; (CH2)_o(CHR⁶¹)pPO(OR⁶⁰)2;

-(CH₂)_p(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_p(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁵³ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵; -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶; 15 -(CH2)m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴;

-(CH₂)_p(CHR⁶¹)s SO2R⁶²; ou -(CH2)_p(CHR⁶¹)_sC₆H4R⁸;

R⁵⁴ é H; alquila; alquenila; -(CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁵;

(CH₂)_m(CHR⁶¹)sNR³³R³⁴; -(CH2)_o(CHR⁶¹)COOR⁵⁷;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCONR⁵⁸R⁵⁹; ou -(CH2)₀(CHR⁶¹)_s C₆H₄R⁸;

R⁵⁵ é H; alquila inferior; alquenila inferior; arila-alquila inferior; (CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁷;

-(CH₂)_m(CHR⁶¹)sNR³⁴R⁶³; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_s-COR⁶⁴;

(CH₂)_o(CHR⁶¹)COOR⁵⁷; ou

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹;

R⁵⁶ é H; alquila inferior; alquenila inferior; arila-alquila inferior; (CH2)m(CHR⁶¹)sOR⁵⁷;

-(CH₂)_m(CHR⁶¹)sNR³⁴R⁶³; -(CH2)_o(CHR⁶¹)_s-COR⁶⁴; ou

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 29/186

	R⁵⁷ é	(CH₂)_o(CHR⁶¹)_sCONR⁵⁸R⁵⁹; H; alquila inferior; alquenila inferior; arila alquila inferior; ou
	R⁵⁸ é	heteroarila alquila inferior; H; alquila inferior; alquenila inferior; arila; heteroarila; arila-alquila
5		inferior; ou heteroarila-alquila inferior;
	R⁵⁹é	H; alquila inferior; alquenila inferior; arila; heteroarila; arila-alquila
	rS8 _{e R}59	inferior; ou heteroarila-alquila inferior; ou tomados em conjunto podem formar: -(CH₂)₂_6-; -(CH₂)₂O(CH₂)₂-; -
10		(CH₂)₂S(CH₂)₂-; ou -(CH₂)₂NR³⁴(CH₂)₂-;
	R⁶⁰é	H; alquila inferior; alquenila inferior; arila; ou arila-alquila inferior;
	R⁶¹ é	alquila; alquenila; arila; heteroarila; arila-alquila inferior;
15		heteroarila-alquila inferior; -(CH₂)_mOR⁵⁵; -(CH₂)_mNR³³R³⁴; -(CH2)oCOOR³⁷; -(CH2)_ONR⁵⁸R⁵⁹; ou (CH2)oPO(COR⁶⁰)2;
	R⁶²é	alquila inferior; alquenila inferior; arila, heteroarila; ou arila-alquila
	R⁶³ é	inferior; H; alquila inferior; alquenila inferior; arila, heteroarila; arila-alquila
20	-COR⁶⁴;	inferior; heteroarila-alquila inferior; -COOR⁵⁷; -CONR⁵⁸R⁵⁹; -SO2R⁶²; ou -PO(OR⁶⁰)2;
	R⁶⁴é	H; alquila inferior; alquenila inferior; arila; heteroarila; arila-alquila
25	R⁶⁵ é	inferior; heteroarila-alquila inferior; -(CH₂)_p(CHR⁶¹)sOR⁶⁵; -(CH2)_p(CHR⁶¹)_sSR⁶⁶; ou (CH₂)_p(CHR⁶¹)_sNR³⁴R⁶³; H; alquila inferior; alquenila inferior; arila, arila-alquila inferior;
	R⁶⁶é	heteroarila-alquila inferior; -COR⁵⁷; -COOR⁵⁷; ou -CONR⁵⁸R⁵⁹; H; alquila inferior; alquenila inferior; arila; arila-alquila inferior;
		heteroarila-alquila inferior; ou -CONR⁵⁸R⁵⁹;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 30/186 m é 2-4; o é 0-4; p é 1-4; q é 0-2; r é 1 ou 2; s é 0 ou 1;

Z é uma cadeia de n radicais de aminoácidos a, sendo que n é número inteiro 7 ou 11, sendo que as posições dos referidos radicais de aminoácidos na referida cadeia são contadas partindo do aminoácido N-terminal, de modo que estes radicais de aminoácidos são, dependendo de sua posição nas cadeias, Gly, ou Pro, ou de fórmula -A-CO-, ou de um dos tipos

C: -NR²⁰CH(R⁷²)CO-;

D: -NR²⁰CH(R⁷³)CO-;

E: -NR²⁰CH(R⁷⁴)CO-;

F: -NR²⁰CH(R⁸⁴)CO-; e

H: -NR²⁰-CH(CO-)-(CH₂)₄-7-CH(CO-)-NR²⁰-;

-NR²⁰-CH(CO-)-(CH₂)_pSS(CH₂)p-CH(CO-)-NR²⁰-;

-NR²⁰-CH(CO-)-(-(CH2)pNR²⁰CO(CH2)p-CH(CO-)-NR²⁰-;e

-NR²⁰-CH(CO-)-(-(CH2)pNR²⁰CONR²⁰(CH2)p-CH(CO-)-NR²⁰-;

R⁷¹ é H; alquila inferior; alquenila inferior; -(CH2)P(CHR⁶¹)SOR⁷⁵; (CH2)p(CHR⁶¹)sSR⁷⁵; -(CH₂)_pNR⁷⁸R⁷⁹ ;

-(CH₂)_o(CHR⁶¹)sCOOR⁷⁵; -(CH2)_pCONR⁷⁸R⁷⁹; -(CH2)pPO(OR⁶²)2; (CH₂)_PSO₂R⁶²; ou

-(CH₂)_o-C₆R⁶⁷R⁶⁸R⁶⁹R⁷⁰R⁷⁶;

R⁷² é H; alquila inferior; alquenila inferior; -(CH2)P(CHR⁶¹)SOR⁸⁵; ou (CH2)p(CHR⁶¹)sSR⁸⁵;

R⁷³ é -(CH2)OR⁷⁷; -(CH2)_rO(CH₂)_oR⁷⁷; -(CH2)rS(CH2)0R⁷⁷; ou (CH2)_rNR²⁰(CH₂)_oR⁷⁷;

R⁷⁴ é -(CH2)PNR⁷⁸R⁷⁹; -(CH2)_pC(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_PC(=NOR⁵⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_PC(=NNR⁷⁸R⁷⁹)NR⁷⁸R⁷⁹; -(CH2)pNR⁸⁰C(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹; (CH2)_PC₆H4NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)pC6H4C(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;-(CH₂)pC₆H4C(=NOR⁵⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 31/186

-(CH₂)pC₆H4C(=NNR⁷⁸R⁷⁹)NR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_pC₆H4NR⁸⁰C(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rO(CH₂)_mNR⁷⁸R⁷⁹; -(CH2)rO(CH2)pC(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹; (CH2)_rO(CH₂)_pC(=NOR⁵⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rO(CH₂)_pC(=NNR⁷⁸R⁷⁹)NR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_rO(CH₂)_mNR⁸⁰C(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rO(CH₂)_pC₆H4CNR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_rO(CH₂)_pC₆H4C(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rO(CH₂)_pC₆H4C(=NOR⁵⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;10 (CH₂)_rO(CH₂)_pC₆H4C(=NNR⁷⁸R⁷⁹)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rO(CH₂)_pC₆H4NR⁸⁰C(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_rS(CH₂)_mNR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rS(CH₂)_pC(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_rS(CH₂)_pC(=NOR⁵⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rS(CH₂)_pC(=NNR⁷⁸R⁷⁹)NR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_rS(CH₂)_mNR⁸⁰C(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rS(CH₂)_pC₆H4CNR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_rS(CH₂)_pC₆H4C(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rS(CH₂)pC₆H4C(=NOR⁵⁰)NR⁷⁸R⁷⁹;

(CH₂)_rS(CH₂)_pC₆H4C(=NNR⁷⁸R⁷⁹)NR⁷⁸R⁷⁹;

-(CH₂)_rS(CH₂)_pC₆H4NR⁸⁰C-(=NR⁸⁰)NR⁷⁸R⁷⁹; (CH₂)_PNR⁸⁰CONR⁷⁸R⁷⁹; ou

-(CH₂)_PC₆H4NR⁸⁰CONR⁷⁸R⁷⁹;

R⁷⁵ é alquila inferior; alquenila inferior; ou arila-alquila inferior;

R⁷⁶ é H; alquila inferior; alquenila inferior; arila-alquila inferior; (CH2)oOR⁷²; -(CH2)_oSR⁷²; -(CH₂)_oNR³³R³⁴;

-(CH₂)_oCOOR⁷⁵; -(CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹; -(CH2)_oPO(OR⁶⁰)2; (CH2)PSO2R⁶²; ou -(CH2)_oCOR^M;

R⁷⁷ é -C6R⁶⁷R⁶⁸R⁶⁹R⁷⁰R⁷⁶; ou um grupo heteroarila de uma das fórmulas

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 32/186

Η38

Η36

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 33/186

Η50 Η51

R⁷⁸ é H; alquila inferior; arila; ou arila-alquila inferior;

R⁷⁹ é H; alquila inferior; arila; ou arila-alquila inferior; ou

R⁷⁸ e R⁷⁹, tomados em conjunto, podem ser -(CH2)2_7-; -(CH2)2O(CH2)2-; ou (CH2)2NR³³(CH2)₂-;

R⁸⁰ é H; ou alquila inferior;

R⁸¹ é H; alquila inferior; ou arila-alquila inferior;

R⁸² é H; alquila inferior; arila; heteroarila; ou arila-alquila inferior;

R⁸³ é H; alquila inferior; arila; ou -NR⁷⁸R⁷⁹;

R⁸⁴ é -(CH2)m(CHR⁶¹)sOH; -(CH₂)_PCONR⁷⁸R⁷⁹; -(CH2)PNR⁸⁰CONR⁷⁸R⁷⁹; 10 -(CH2)_pC₆H4CONR⁷⁸R⁷⁹; -(CH₂)_pCOOR⁸⁰ ou (CH₂)_pC₆H4NR⁸⁰CONR⁷⁸R⁷⁹;

R⁸⁵ é alquila inferior; ou alquenila inferior;

com a condição de que na referida cadeia de n radicais de aminoácidos α Z

- se n for 7, os radicais de aminoácidos nas posições de 1 a 7 são:

PI: de tipo C ou de tipo F ou de tipo D;

P2: de tipo E ou de tipo C ou de tipo D ou de tipo F;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 34/186

Ρ3: de tipo F ou de tipo C, ou o radical é Gly ou Pro;

P4: de tipo C ou de tipo D ou de tipo F, ou o radical é Gly ou Pro;

P5: de tipo F ou de fórmula -A-CO-, ou o radical é Gly ou

Pro;

P6: de tipo C ou de tipo E ou de fórmula -A-CO-, ou o radical é Pro;

P7: de tipo C ou de tipo F ou de tipo D; se n for 11, os radicais de aminoácidos nas posições de 1 a 11 são:

PI: de tipo E ou de tipo F ou de tipo C;

P2: de tipo C ou de tipo F ou de tipo E;

P3: de tipo C ou de tipo F;

P4: de tipo E ou de tipo C ou de tipo D ou de tipo F, ou o radical é Gly ou Pro;

P5: de tipo F ou de tipo C, ou o radical é Gly ou Pro;

P6: de tipo C ou de tipo D ou de tipo F, ou o radical é Gly ou Pro;

P7: de tipo F ou de fórmula -A-CO-, ou o radical é Gly ou

Pro;

P8: de tipo C ou de tipo E ou de fórmula -A-CO-, ou o radical é Gly ou Pro;

P9: de tipo C ou de tipo F;

PIO: de tipo F ou de tipo C;

PI 1: de tipo D ou de tipo E ou de tipo F ou de tipo C; ou P2 e PIO, tomados em conjunto, podem formar um grupo de tipo H;

e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

De acordo com a presente invenção estes peptideomiméticos de 23/07/2018, pág. 35/186 de β-hairpin podem ser preparados por meio de um processo que compreende (a) acoplamento de um suporte sólido apropriadamente funcionalizado com um derivado apropriadamente N-protegido daquele aminoácido que, no produto final desejado, encontra-se na posição 72+½ ou ⁿ/2-'/2, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido é apropriadamente protegido;

(b) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido;

(c) acoplame nto do produto assim obtida com um derivado apropriadamente N-protegido daquele aminoácido que, no produto final desejado encontra-se uma posição mais próximo do radical aminoácido Nterminal, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadamente protegido;

(d) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido;

(e) repetição, se necessário, das etapas (c) e (d) até que o radical de aminoácido N-terminal tenha sido introduzido;

(f) acoplamento do produto assim obtido a um composto da fórmula geral %-^0H X

Template em que

J_L

Template é como definido acima e X é um grupo N-protetor ou, se

Template deve ser grupo (al) ou (a2), acima, alternativamente de 23/07/2018, pág. 36/186 (fa) acoplamento do produto obtida na etapa (d) ou (e) com um derivado apropriadamente N-protegido de um aminoácido da fórmula geral

HOOC-B-H III ou HOOC-A-H IV em que B e A são como definido acima, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadamente protegido;

(fb) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido; e (fc) acoplamento do produto assim obtido com um derivado apropriadamente N-protegido de um aminoácido da fórmula geral IV acima e, respectivamente, III, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadametne protegido;

(g) remoção do grupo N-protetor do produto obtido na etapa (f) ou (fc);

(h) acoplamento do produto assim obtido a um derivado apropriadamente N-protegido daquele aminoácido que, no produto final desejado, encontra-se na posição n, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadamente protegido;

(i) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido;

(j) acoplamento do produto assim obtido a um derivado apropriadamente N-protegido daquele aminoácido que, no produto final desejado, encontra-se uma posição mais além da posição n, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadamente protegido;

(k) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido;

(l) repetição, se necessário, das etapas (j) e (k) até que todos os radicais de aminoácidos fossem introduzidos;

(m) se desejado, desproteger seletivamente um ou vários de 23/07/2018, pág. 37/186 grupos funcionais protegidos presentes na molécula e substituir apropriadamente o(s) grupo(s) reativo(s) assim liberados;

(o) destacamento do produto assim obtido do suporte sólido;

(p) ciclização do produto clivado do suporte sólido;

(q) se desejado, formar uma ligação inter-filamentos entre cadeias laterais de radicais aminoácidos apropriados em posições opostas da região do filamento β;

(r) remover quaisquer grupos protetores presentes em grupos funcionais de quaisquer membros da cadeia dos radicais de aminoácidos e, se desejado, qualquer grupo(s) protetor(es) que podem estar presentes adicionalmente na molécula; e (r) se desejado, converter o produto assim obtido em um sal farmaceuticamente aceitável ou converter um sal farmaceuticamente aceitável, ou inaceitável, assim obtido a um composto livre correspondente de fórmula I ou a um sal diferente, farmaceuticamente aceitável.

Como usado nesta descrição, o termo alquila, considerado sozinho ou em combinações, indica radicais hidrocarboneto saturados, de cadeia reta ou ramificada, apresentando até 24, de preferência até 12, átomos de carbono. De maneira semelhante, o termo alquenila indica radicais hidrocarboneto de cadeia reta ou ramificada apresentando até 24, de preferência até 12, átomos de carbono e contendo pelo menos uma ou, dependendo do comprimento da cadeia, até quatro duplas ligações olefínicas. O termo inferior indica radicais e compostos apresentando até 6 átomos de carbono. Assim, por exemplo, o termo alquila inferior indica radicais hidrocarboneto saturados, de cadeia reta ou ramificada apresentando até 6 átomos de carbono, como metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, sec.butila, isobutila, ter.-butila e análogos. O termo arila indica radicais hidrocarboneto carboxílico aromáticos contendo um ou dois anéis com seis membros, como fenila ou naftila, que podem ser substituídos por até três

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 38/186 substituintes, como Br, Cl, F, CF3, NO2, alquila inferior ou alquenila inferior. O termo heteroarila heteroarila indica radicais heterocíclicos aromáticos contendo um ou dois anéis com cinco e/ou seis membros, pelo menos um dos mesmos contendo até três heteroátomos selecionados do grupo que consiste de O, S e N e sendo que referido anel/anéis são opcionalmente substituídos; exemplos representativos de referidos radicais heteroarila opcionalmente substituídos são indicados acima em conexão com a definição de R⁷⁷.

O elemento estrutural -A-CO- indica blocos construtivos de aminoácidos que, em combinação com o elemento estrutural -B-CO-, formam Templates (al) e (a2). Templates de (a) até (p) constituem blocos construtivos que apresentam uma ponta N e uma ponta C orientadas no espaço de tal forma que a distância entres aqueles dois grupos se situe entre 4,0-5,5 A. Uma cadeia peptídica encontra-se bgada na ponta C e na ponta N dos Templates de (a) até (p) via as pontas N e C correspondentes de modo que o template e a cadeia formem uma estrutura cícbca conforme aquela ilustrada na fórmula I. Num caso em que a distância entre as pontas N e C do template situa-se entre 4,0-5,5 A o template induzirá a uma retícula ligada com H necessária para a formação de uma conformação em β-hairpin na cadeia peptídica Z. Assim, template e cadeia peptídica formam um mimético de β-hairpin. A conformação em β-hairpin é altamente relevantes para as atividades inibidoras de protease dos miméticos de β-hairpin da presente invenção. As propriedades conformacionais que estabilizam o β-hairpin dos Templates de (a) até (p) desempenham um papel-chave não só para a atividade inibidora de protease, mas também para o processo de síntese definido acima, porque a incorporação dos Templates nas proximidades do centro dos precursores de peptídeos protegidos bneares acentua significamente os rendimentos de cicbzação.

Blocos construtivos A1-A69 pertencem a uma classe de aminoácidos em que a ponta N é uma amina secundária que faz parte de um de 23/07/2018, pág. 39/186 anel. Entre os aminoácidos geneticamente codificados, apenas a prolina enquadra-se nesta classe. A configuração do bloco construtivo de Al até A69 é (D), e eles são combinados com um bloco construtivo -B-CO- com uma configuração (L). Combinações preferidas para Templates (al) são -^DA1-CO5 ^LB-CO- de ^DA69-CO-^LB-CO-. Assim, por exemplo, ^DPro-^LPro constitui o protótipo de Templates (al). São menos preferíveis, porém possíveis, combinações em que Templates (a2) são de -^LA1-CO-^DB-CO- a ^LA69-CO^DB-CO-. Assim, por exemplo, ^LPro-^DPro constitui um protótipo menos preferido de template (a2).

Há de se considerar que blocos construtivos de -Al-CO- a A69-CO- em que A tem configuração (D), portam um grupo R¹ na posição α relativamente à ponta N. Os valores preferidos para R¹ são H e alquila inferior, sendo que os valores mais preferidos para R¹ é H e metila. Aqueles versados na arte deverão reconhecer que A1-A69 são mostrados em configuração (D) que, para R¹ é H e metila, corresponde à configuração (R). Dependendo da prioridade de outros valores para R¹ de acordo com as regras de Cahn, Ingold e Prelog, esta configuração também precisa ser expressa como (S).

Adicionalmente, a blocos construtivos R¹ -Al-CO- a -A6920 CO- podem portar um substituinte adicional indicado como de R² a R¹⁷. Este substituinte adicional pode ser H, e se for diferente de H, é, de preferência, um grupo aromático ou alifático de tamanho pequeno a médio. Exemplos de valores preferidos para de R² a R¹⁷ são:

R²: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)_mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mOCONR³³R⁷⁸ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)mNR²⁰CONR³³R⁷⁸ (em que R²⁰: H ou alquila

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 40/186 inferior; R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R³: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁴: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴(ern que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H ou alquila inferior); (CH2)mN(R²⁰)COR⁶⁴(em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior;

de 23/07/2018, pág. 41/186 alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁵: alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)_mOCONR³³R⁷⁸ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)mNR²⁰CONR³³R⁷⁸ (em que R²⁰: H ou alquila inferior; R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)_oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila; alquenila; arila; e arila-alquila inferior; heteroaril-alquila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁶: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)_oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁷: alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)qOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_qSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H ou de 23/07/2018, pág. 42/186 alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_qNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)qN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)rCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)qCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)rPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH₂)_rSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CIDqCôtLR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; (CIDoOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)OSR⁵⁶(em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H ou alquila inferior); (CH2)oOCONR³³R⁷⁸ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)oNR²⁰CONR³³R⁷⁸ (em que R²⁰: H ou alquila inferior; R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CIDqCôtLR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁹: alquila inferior; alquenila inferior; (CIDoOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou de 23/07/2018, pág. 43/186 alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSC)2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (ÜDqCôtfiR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R¹⁰: alquila inferior; alquenila inferior; (CFDoOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CFDqCôFfiR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

Rⁿ: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CFDmOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CFDmSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mOCONR³³R⁷⁸ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)mNR²⁰CONR³³R⁷⁸ (em que R²⁰: H; ou alquila inferior; R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)_mNR²⁰COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CIDoSC^R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CFDqCôFfiR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

de 23/07/2018, pág. 44/186

R¹²·. H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH^mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH^mSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)rCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)rCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)_rPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH^oSC^R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôtUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R¹³: alquila inferior; alquenila inferior; (CH^qOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)qSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)qNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)qN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)rCOC)⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)qCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)rPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CFkXSC^R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôFUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R¹⁴: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH^mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH^mSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH^oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila de 23/07/2018, pág. 45/186 inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH^oSC^R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH^qCótUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R¹⁵: alquila inferior; alquenila inferior; (CH^oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); particularmente favoured are NR²⁰CO alquila inferior (R²⁰=H; ou alquila inferior); (CH2)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôtUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R¹⁶: alquila inferior; alquenila inferior; (CH^oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôtUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R¹⁷: alquila inferior; alquenila inferior; (CH^qOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH₂)_qSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H;

de 23/07/2018, pág. 46/186 ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_qNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)qN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_rCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)qCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_rPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_rSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH₂)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

Entre os blocos construtivos de Al a A69 os seguintes são preferidos: A5 sendo que R² é Η, A8, A22, A25, A38 sendo que R² é Η, A42, A47, e A50. São mais preferidos blocos construtivos de tipo A8’ e A8”:

A8' A8 em que R²⁰ é H ou alquila inferior; e R⁶⁴ é alquila; alquenila; arila; arila-alquila inferior; ou heteroarila-alquila inferior; e R⁷⁵ é alquila inferior; alquenila inferior; ou arila-alquila inferior; especialmente aqueles em que R⁷⁵ é alila (A8’-l) e R⁶⁴ é n-hexila (A8”-l).

Bloco construtivo A70 pertence à classe de aminoácidos α substituídos em α de cadeia aberta, blocos construtivos A71 e A72 aos análogos de aminoácidos β correspondentes e blocos construtivos de A73A104 aos análogos cíclicos de A70. Verificou-se que referidos derivados de aminoácidos restringem pequenos peptídeos em conformações bem definidas de volta invertida ou em forma de U (C. M. Venkatachalam, Biopolymers, 1968, 6, 1425-1434; W. Kabsch, C Sander, Biopolymers 1983, 22, 2577). Referidos blocos construtivos ou Templates são idealmente adequados para a de 23/07/2018, pág. 47/186 estabilização de conformações em β-hairpin em alças peptídicas (D. Obrecht, M. Altorfer, J. A. Robinson, Novel Peptide Mimetic Building Blocs and Strategies for Efficient Lead Finding, Adv. Med Chem. 1999, Vol.4, 1-68; P. Balaram, Non-standard amino acids in peptide design and protein engineering, Curr. Opin. Struct. Biol. 1992, 2, 845-851; M. Crisma, G. Valle, C. Toniolo, S. Prasad, R. B. Rao, P. Balaram, β-tum conformations in crystal structures of model peptides containing - disubstituted amino acids, Biopolymers 1995, 35, 1-9; V. J. Hruby, F. Al-Obeidi, W. Kazmierski, Biochem. J. 1990, 268, 249-262).

Verificou-se que ambos os enanciômeros de blocos construtivos de -A70-CO- a A104-CO- em combinação com um bloco construtivo -B-CO- de configuração L podem estabibzar eficientemente e induzir conformações em β-hairpin (D. Obrecht, M. Altorfer, J. A. Robinson, Novel Peptide Mimetic Building Blocs and Strategies for Efficient Lead Finding, Adv. Med Chem. 1999, Vol.4, 1-68; D. Obrecht, C. Spiegler, P. Schõnholzer, K. Müller, H. Heimgartner, F. Stierb, Helv. Chim. Acta 1992, 75, 1666-1696; D. Obrecht, U. Bohdal, J. Daly, C. Lehmann, P. Schõnholzer,

K. Müller, Tetrahedron 1995, 57, 10883-10900; D. Obrecht, C. Lehmann, C. Ruffieux, P. Schõnholzer, K. Müller, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 1567-1587;

D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580; D. Obrecht, H. Karajiannis, C. Lehmann, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 703-714).

Assim, para os fins da presente invenção, Templates (al) também podem consistir de -A70-CO- a A104-CO- em que bloco construtivo de A70 a A104 é tem configuração (D) ou (L), em combinação com um bloco construtivo -B-CO- de configuração (L).

Valores preferidos para R²⁰ em de A70 a A104 são H ou alquila inferior sendo que metila é o mais preferido. Valores preferidos para de 23/07/2018, pág. 48/186

R¹⁸, R¹⁹ e R²¹-R²⁹ nos blocos construtivos de A70 a A104 são os seguintes:

R¹⁸: alquila inferior

R¹⁹: alquila inferior; alquenila inferior; (CH^pOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)PSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)PNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)pN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)PCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_PCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_PSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH₂)_OC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²¹: H ; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOC)R⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²²: alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior;

de 23/07/2018, pág. 49/186 ou alquenila inferior); (CH₂)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôtUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²³: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)_oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); são particularmente favorecidos NR²⁰CO alquila inferior (R²⁰=H; ou alquila inferior); (CH₂)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)₂(em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH₂)_oSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôtUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²⁴: alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)_oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); são particularmente favorecidos NR²⁰CO alquila inferior (R²⁰=H; ou alquila inferior); (CH₂)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)₂(em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH₂)_oSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôtUR⁸ (em que R⁸: H;

de 23/07/2018, pág. 50/186

F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²⁵·. H; alquila inferior; alquenila inferior; (CFDmOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²⁶: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)_mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

Altemativamente, R²⁵ e R²⁶ tomados em conjunto podem ser -(CH2)2.6-; -(CH2)2O(CH2)2-; -(CH2)2S(CH2)2-; ou -(CH2)2NR³⁴(CH2)2-;

R²⁷: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou de 23/07/2018, pág. 51/186 alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)_oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF₃; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²⁸ alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF₃; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²⁹: alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_OSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); são particularmente favorecidos NR²⁰CO alquila inferior (R²⁰=H; ou alquila inferior); (CH₂)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF₃; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

No caso dos Templates de (b) a (p), como (bl) e (cl), os de 23/07/2018, pág. 52/186 valores preferidos para os diversos símbolos são os seguintes:

R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; (CH^oOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)OSR⁵⁶(em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H ou alquila inferior); (CH₂)_oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; ou alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R²⁰: H; ou alquila inferior

R³⁰: H, metila

R³¹: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)POR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_PNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH₂)_pN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_rC6Ü₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior); os mais preferidos são CH₂CONR⁵⁸R⁵⁹ (R⁵⁸: H; ou alquila inferior; R⁵⁹: alquila inferior; ou alquenila inferior).

- R³²: H, metila

R³³: alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_mSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H;

de 23/07/2018, pág. 53/186 ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mOCONR³³R⁷⁸ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)mNR²⁰CONR³³R⁷⁸ (em que R²⁰: H ou alquila inferior; R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R⁷⁸: H; ou alquila inferior); (CH2)_mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior).

R³⁴: H; ou alquila inferior.

R³⁵: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior).

R³⁶: alquila inferior; alquenila inferior; ou aril-alquila inferior.

R³⁷: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)POR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)PNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)PN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH₂)oSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôEUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R³⁸: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH₂)_POR⁵⁵ (em de 23/07/2018, pág. 54/186 que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)pNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)pN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R³⁹: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior).

R⁴⁰: alquila inferior; alquenila inferior; ou aril-alquila inferior.

R⁴¹: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)POR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_PNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH₂)_pN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO2R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH2)_qC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁴²: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)POR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_PNR³³R³⁴ (em que R³³:

de 23/07/2018, pág. 55/186 alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)_PN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH^oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior, ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH₂)oSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôtUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁴³: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOC)R⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); (CH2)oPO(OR⁶⁰)2 (em que R⁶⁰: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oSO₂R⁶² (em que R⁶²: alquila inferior; ou alquenila inferior); ou (CH^qCôFUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁴⁴: alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)POR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_PSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_PNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)PN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)pCOC)R⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_PCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); ou (CH^oCôFUR⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁴⁵: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH₂)_SOR⁵⁵ (em de 23/07/2018, pág. 56/186 que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH₂)_sSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)_oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); ou (CH₂)_SC6H4R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁴⁶: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)SOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_sSR⁵⁶ (em que R⁵⁶: H; ou alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)ONR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)_oN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); ou (CH₂)_SC6H4R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁴⁷: H; ou OR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior).

R⁴⁸: H; ou alquila inferior.

R⁴⁹: H; alquila inferior; (CH₂)_oCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)oCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); ou (CH2)_SC6H4R⁸(em que R⁸: H; F; Cl; CF3; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁵⁰: H; metila

R⁵¹: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)_mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior);

de 23/07/2018, pág. 57/186 (CH2)_mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH^pCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)PCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); ou (CH2)_rC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF₃; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁵²: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)pCOOR⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)PCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); ou (CH2)_rC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF₃; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁵³: H; alquila inferior; alquenila inferior; (CH2)mOR⁵⁵ (em que R⁵⁵: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)mNR³³R³⁴ (em que R³³: alquila inferior; ou alquenila inferior; R³⁴: H; ou alquila inferior); (CH2)mN(R²⁰)COR⁶⁴ (em que: R²⁰: H; ou alquila inferior; R⁶⁴: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)pCOC)R⁵⁷ (em que R⁵⁷: alquila inferior; ou alquenila inferior); (CH2)PCONR⁵⁸R⁵⁹ (em que R⁵⁸: alquila inferior; ou alquenila inferior; e R⁵⁹: H; alquila inferior); ou (CH2)_rC6H₄R⁸ (em que R⁸: H; F; Cl; CF₃; alquila inferior; alquenila inferior; ou alcóxi inferior).

R⁵⁴: alquila inferior; alquenila inferior; ou aril-alquila inferior.

Entre os blocos construtivos de A70 a A104 os seguintes são preferidos: A74 sendo que R²² é Η, A75, A76, A77 sendo que R²² é Η, A78 e A79.

O bloco construtivo -B-CO- dentro do template (al) e (a2) indica um radical de aminoácido L. Valores preferidos para B são: NR²⁰CH(R⁷¹)- e enanciômeros de grupos A5, sendo que R² é Η, A8, A22, de 23/07/2018, pág. 58/186

Α25, Α38 sendo que R² é

Ala

Arg

Asn

Cys Gin Gly His Ile

Leu Lys Met Phe Pro

Ser Thr Trp Tyr Vai

Cit Om tBuA Sar t-BuG

4AmPhe 3AmPhe 2AmPhe

Phe(mC(NH₂)=NH)

Phe(pC(NH₂)=NH)

Η, A42, A47, e A50. Os mais preferidos são L-Alanina L-Arginina L-Asparagine L-Cisteína L-Glutamina Glicina L-Histidina L-Isoleucina L-Leucina L-Lisina L-Metionina L-Fenilalanina L-Prolina L-Serina L-Treonina L-Triptofano L-Tirosina L-Valina L-Citrulina L-Omitina L-t-Butilalanina Sarcosina L-ter.-Butilglicina L-para-Aminofenilalanina L-meta-Aminofenilalanina L-orto-Aminofenilalanina L-meta-Amidinofenilalanina L-para-Amidinofenilalanina

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 59/186

Phe(mNHC (NH₂)=NH) Phe(pNHC (NH₂)=NH) Phg

Cha

C₄al

C₅al

Nle

2-Nal

1-Nal

4C1-Phe

3C1-Phe

2C1-Phe

3,4Cl₂.Phe

4F-Phe

3F-Phe

2F-Phe

Tic

Thi

Tza

Mso

AcLys

Dpr

A₂Bu

Dbu

Abu

Aha

Aib

Y(Bzl)

L-meta-Guanidinofenilalanina

L-para-Guanidinofenilalanina

L-Fenilglicina

L-Ciclo-hexilalanina

L-3-Ciclobutilalanina

L-3-Ciclopentilalanina

L-Norleucina

L-2-Naftilalanina

L-1 -Naftilalanina

L-4-Clorofenilalanina

L-3-Clorofenilalanina

L-2-Clorofenilalanina

L-3,4-Diclorofenilalanina

L-4-Fluorofenilalanina

L-3-Fluorofenilalanina

L-2-Fluorofenilalanina ácido L-1,2,3,4-Tetraidroisoquinolino-3carboxílico

L-P-2-Tienilalanina

L-2-Tiazolilalanina sulfóxido de L-Metionina

L-N-Acetillisina ácido L-2,3-Diaminopropiônico ácido L-2,4-Diaminobutírico ácido (S)-2,3-diaminobutírico ácido γ-Aminobutírico (GABA) ácido ε-aminoexanóico ácido a-aminoisobutírico

L-O-Benziltirosina

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 60/186

Bip	L-Bifenilalanina
S(Bzl)	L-O-Benzilserina
T(Bzl)	L-O-Benziltreonina
hCha	L-Homo-ciclo-hexilalanina
hCys	L-Homo-cisteína
hSer	L-Homo-serina
hArg	L-Homo-arginina
hPhe	L-Homo-fenilalanina
Bpa	L-4-Benzoilfenilalanina
Pip	ácido L-Pipecólico
OctG	L-Octilglicina
MePhe	L-N-Metilfenilalanina
MeNle	L-N-Metil norleucina
MeAla	L-N-Metil alanina
Melle	L-N-Metil isoleucina
MeVal	L-N-Metvalina
MeLeu	L-N-Metil leucina

Adicionalmente, os valores mais preferidos para B também incluem grupos de tipo A8’ de configuração (L):

A8’ em que R²⁰ é H ou alquila inferior e R⁶⁴ é alquila; alquenila;

arila; arila-alquila inferior; ou heteroarila-alquila inferior; especialmente aqueles em que R⁶⁴ é n-hexila (A8’-l).

As cadeias peptídicas Z dos miméticos de β-hairpin aqui descritos são geralmente definidas em termos de radicais de aminoácidos pertencentes aos seguintes grupos:

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 61/186

Grupo C -NR²⁰CH(R⁷²)CO-; «hidrofóbico: tamanho de pequeno a médio» Grupo D -NR²⁰CH(R⁷³)CO-; «hidrofóbico: heteroaromático ou aromático grande»

Grupo E -NR²⁰CH(R⁷⁴)CO-; polar-catiônico e derivado de uréia

Grupo F -NR²⁰CH(R⁸⁴)CO-; polar-não-carregado e “aniônico”

Grupo H -NR²⁰-CH(CO-)-(CH₂)₄-7-CH(CO-)-NR²⁰-;

-NR²⁰-CH(CO-)-(CH₂)_pSS(CH₂)p-CH(CO-)-NR²⁰-; -NR²⁰-CH(CO-)-(-(CH2)pNR²⁰CO(CH2)_p-CH(CO-)-NR²⁰-; e -NR²⁰-CH(CO-)-(-(CH2)pNR²⁰CONR²⁰(CH2)p-CH(CO-)-NR²⁰-; bgação interfilamentos

Além disso, os radicais de aminoácidos na cadeia Z também podem ser de fórmula -A-CO- em que A é como definido acima.

Grupo C compreende radicais de aminoácidos com grupos de cadeia lateral hidrofóbica com tamanho de pequeno a médio de acordo com a definição geral para substituinte R⁷². Um radical hidrofógico refere-se a uma cadeia lateral de aminoácidos que é não-carregada a pH fisiológico e que é repelida por solução aquosa. Adicionalmente, estas cadeias laterais geralmente não contêm grupos doadores de bgação de hidrogênio, como (embora sem bmitação) amidas primárias e secundárias, aminas primárias e secundárias e os seus sais protonados correspondentes, tióis, alcoóis, fosfonatos, fosfates, uréias ou tiouréias. No entanto, eles podem conter grupos receptores de ligação de hidrogênio, como éteres, tioéteres, ésteres, amidas terciárias, fosfonatos de alquila ou arila e fosfatos ou aminas terciárias. Aminoácidos com tamanho de pequeno a médio codificados geneticamente incluem alanina, isoleucina, leucina, metionina e vabna.

Grupo D compreende radicais de aminoácidos com grupos de cadeia lateral aromáticos e heteroaromáticos de acordo com a definição geral para substituinte R⁷³. Um radical de aminoácido aromático refere-se a um aminoácido hidrofógico apresentando uma cadeia lateral contendo pelo menos de 23/07/2018, pág. 62/186 um anel apresentando um sistema de elétron em π conjugado (grupo aromático). Adicionalmente eles podem conter grupos doadores de ligação de hidrogênio, como (embora sem limitação) amidas primárias e secundárias, aminas primárias e secundárias e os seus sais protonados correspondentes, tióis, alcoóis, fosfonatos, fosfatos, uréias ou tiouréias, e grupos receptores de ligação de hidrogênio, como (embora sem limitação) éteres, tioéteres, ésteres, amidas terciárias, fosfonatos e fosfatos de alquila ou arila ou aminas terciárias. Aminoácidos aromáticos codificados geneticamente incluem fenilalanina e tirosina.

Um radical de aminoácido heteroaromático refere-se a um aminoácido hidrofóbico apresentando uma cadeia lateral contendo pelo menos um anel apresentando um sistema em π conjugado incorporando pelo menos um heteroátomo, como (embora sem limitação) O, S e N de acordo com a definição geral para substituinte R⁷⁷. Adicionalmente, eles podem contém grupos doadores de ligação de hidrogênio, como (embora sem limitação) amidas primárias e secundárias, aminas primárias e secundárias e os seus sais protonados correspondentes, tióis, alcoóis, fosfonatos, fosfatos, uréias ou tiouréias, e grupos receptores de ligação de hidrogênio, como (embora sem limitação) éteres, tioéteres, ésteres, amidas terciárias, fosfonatos e fosfatos de alquila ou arila ou aminas terciárias. Aminoácidos heteroaromáticos codificados geneticamente incluem triptofano e histidina.

Grupo E compreende aminoácidos contendo cadeias laterais com radicais polares-catiônicos e derivados de uréia de acordo com a definição geral para substituinte R⁷⁴. Polar-catiônico refere-se a uma cadeia lateral básica que é protonada a pH fisiológico. Aminoácidos polar-catiônicos codificados geneticamente incluem arginina, lisina e histidina. Citrubna é um exemplo para um aminoácido contendo um radical derivado de uréia.

Grupo F compreende aminoácidos contendo cadeias laterais com radicais polares-não-carregado ou aniônicos de acordo com a definição

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 63/186 geral para substituinte R⁸⁴. Um radical polar-não-carregado ou aniônico refere-se a uma cadeia lateral hidrofílcia que é não-carregada e, respectivamente, aniônico a pH fisiológico (ácidos carboxílicos incluídos), mas que não é repelido por soluções aquosas. Referidas cadeias laterais contêm tipicamente grupos doadores de ligação de hidrogênio, como (embora sem limitação) amidas primárias e secundárias, ácidos carboxílicos e ésteres, aminas primárias e secundárias, tióis, alcoóis, fosfonatos, fosfatos, uréias ou tiouréias. Estes grupos podem formar retículas de ligação de hidrogênio com moléculas de água. Adicionalmente eles também podem conter grupos receptores de ligação de hidrogênio, como (embora sem limitação) éteres, tioéteres, ésteres, amidas terciárias, ácidos carboxílicos e carboxilatos, fosfonatos e fosfatos de alquila ou arila ou aminas terciárias. Aminoácidos polares-não-carregados e aniônicos codificados geneticamente incluem asparagina, cisteína, glutamina, serina e treonina, mas também ácido aspártico e ácido glutâmico.

Grupo H compreende cadeias laterais de, preferivelmente, aminoácidos (L) em posições opostas da região de filamento β que podem formar uma ligação interfilamentos. A ligação mais amplamente conhecida é a ponte dissulfeto formada por cisteínas e homo-cisteínas posicionadas em posições opostas do filamento β. Conhece-se diversos métodos que formam ligações dissulfeto, incluindo aqueles descritos por: J. P. Tam et al. Synthesis 1979, 955-957; Stewart et al., Solid Phase Peptide Synthesis, 2d Ed., Pierce Chemical Company, III., 1984; Ahmed et al. J. Biol. Chem. 1975, 250, 84778482 ; e Pennington et al., Peptides, páginas 164-166, Giralt e Andreu, Eds., ESCOM Leiden, The Netherlands, 1990. Da maneira mais vantajosa, visando a abrangência da presente invenção, é possível preparar ligações dissulfeto como descrito a seguir nos Exemplos pertinentes (procedimento 3), utilizando-se grupos protetores de acetamidometila (Acm) para cisteína. Uma ligação interfilamentos bem estabelecida consiste da ligação de omitinas e de 23/07/2018, pág. 64/186 lisinas, respectivamente, com radicais de ácido glutâmico e aspártico localizados em posições opostas no filamento beta, por meio de uma formação de ligação de amida. Grupos protetores preferidos para os grupos amino de cadeia lateral de omitina e lisina são aliloxicarbonila (Alloc) e alilésteres para ácido aspártico e glutâmico. Finalmente, ligações interfilamentos também podem ser estabelecidas ligando-se os grupos amino de Usina e omitina localizados em posições opostas no filamento β com reagentes, como Ν,Ν-carbonilimidazol para formar uréias cflicas.

Como indicado previamente, posições para bgações interfilamentos são as seguintes:

se η = 11: Posições P2 e PIO tomadas em conjunto.

Sabe-se que essas ligações interfilamentos estabibzam as conformações em β-hairpin e, portanto, constitutem um elemento estrutural importante para o projeto de miméticos de β-hairpin.

Radicais de aminoácidos mais preferidos na cadeia Z são aqueles derivados de aminoácidos α naturais. A seguir, apresenta-se uma bsta de aminoácidos, ou seus radicais, que são adequados para os fins da presente invenção, sendo que a abreviatura corresponde à prática usual geralmente adotada:

20	código de três letras		código de
	Ala	L-Alanina	A
	Arg	L-Arginina	R
	Asn	L-Asparagina	N
	Asp	ácido L-Aspártico	D
25	Cys	L-Cisteína	C
	Glu	ácido L-Glutâmico	E
	Gin	L-Glutamina	Q
	Gly	Gbcina	G
	His	L-Histidina	H

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 65/186

Ile	L-Isoleucina	I
Leu	L-Leucina	L
Lys	L-Lisina	K
Met	L-Metionina	M
Phe	L-Fenilalanina	F
Pro	L-Prolina	P
^DPro	D-Prolina	^DP
Ser	L-Serina	S
Thr	L-Treonina	T
Trp	L-Triptofano	W
Tyr	L-Tirosina	Y
Vai	L-Valina	V

Outros aminoácidos a, ou seus radicais, que são adequados para os fins da presente invenção incluem:

15	Cit	L-Citrulina
	Om	L-Omitina
	tBuA	L-t-Butilalanina
	Sar	Sarcosina
	Pen	L-Penicilamine
20	t-BuG	L-ter.-Butilglicina
	4AmPhe	L-para-Aminofenilalanina
	3AmPhe	L-meta-Aminofenilalanina
	2AmPhe	L-orto-Aminofenilalanina
	Phe(mC(NH₂)=NH)	L-meta-Amidinofenilalanina
25	Phe(pC(NH₂)=NH)	L-para-Amidinofenilalanina
	Phe(mNHC (NH₂)=NH)	L-meta-Guanidinofenilalanina
	Phe(pNHC (NH₂)=NH)	L-para-Guanidinofenilalanina
	Phg	L-Fenilglicina
	Cha	L-Ciclo-hexilalanina

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 66/186

C₄al

C₅al

Nle

2-Nal

1-Nal

4C1-Phe 3C1-Phe 2C1-Phe 3,4C1₂-Phe

4F-Phe

3F-Phe 2F-Phe Tic

Thi

Tza

Mso

AcLys

Dpr

A₂Bu

Dbu Abu Aha Aib

Y(Bzl)

Bip

S(Bzl)

T(Bzl) hCha

L-3-Ciclobutilalanina

L-3-Ciclopentilalanina

L-Norleucina

L-2-Naftilalanina

L-1 -Naftilalanina

L-4-Clorofenilalanina

L-3-Clorofenilalanina

L-2-Clorofenilalanina

L-3,4-Diclorofenilalanina

L-4-Fluorofenilalanina

L-3-Fluorofenilalanina

L-2-Fluorofenilalanina ácido 1,2,3,4-Tetraidroisoquinobno-3carboxflico

L-P-2-Tienilalanina

L-2-Tiazolilalanina sufóxido de L-Metionina

N-Acetilbsina ácido 2,3-Diaminopropiônico ácido 2,4-Diaminobutírico ácido (S)-2,3-diaminobutírico ácido γ-Aminobutírico (GABA) ácido £-Aminoexanóico acido-Ot- Aminoisobutírico L-O-Benziltirosina L-(4-fenil)fenilalanina L-O-Benzilserina L-O-Benziltreonina L-Homo-ciclo-hexilalanina

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 67/186

	hCys	L-Homo-cisteína
	hSer	L-Homo-serina
	hArg	L-Homo-arginina
	hPhe	L-Homo-fenilalanina
5	Bpa	L-4-Benzoilfenilalanina
	4-AmPirrl	ácido (2S,4S)-4-Amino-pirrolidino-L- carboxílico
	4-AmPirr2	ácido (2S ,4R)-4-Amino-pirrolidino-L- carboxílico
10	4-PhePirrl	ácido (2S ,5R)-4-Fenil-pirrolidino-L- carboxílico
	4-PhePirr2	ácido (2S ,5 S)-4-Fenil-pirrolidino-L- carboxílico
	5-PhePirrl	ácido (2S,5R)-5-Fenil-pirrolidino-L-
15		carboxílico
	5-PhePirr2	ácido (2S ,5 S)-5-Fenil-pirrolidino-L- carboxílico
	Pro(4-OH)1	(4S)-L-Hidroxiprolina
	Pro(4-OH)2	(4R)-L-Hidroxiprolina
20	Pip	ácido L-Pipecólico
	^DPip	ácido D-Pipecólico
	OctG	L-Octilglicina
	MePhe	L-N-Metilfenilalanina
	MeNle	L-N-Metila norleucina
25	MeAla	L-N-Metil alanina
	Melle	L-N-Metil isoleucina
	MeVal	L-N-Metil valina
	MeLeu	L-N-Metil leucina

Radicais particularmente preferidos para grupo C são:

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 68/186

Ala	L-Alanina
Ile	L-Isoleucina
Leu	L-Leucina
Met	L-Metionina
Vai	L-Valina
tBuA	L-t-Butilalanina
t-BuG	L-ter.-Butilglicina
Cha	L-Ciclo-hexilalanina
C₄al	L-3-Ciclobutilalanina
C₅al	L-3-Ciclopentilalanina
Nle	L-Norleucina
hCha	L-Homo-ciclo-hexilalanina
OctG	L-Octilgbcina
MePhe	L-N-Metilfenilalanina
MeNle	L-N-Metila norleucina
MeAla	L-N-Metil alanina
Melle	L-N-Metil isoleucina
MeVal	L-N-Metil vabna
MeLeu	L-N-Metil leucina Radicais particularmente preferidos para grupo
His	L-Histidina
Phe	L-Fenilalanina
Trp	L-Triptofano
Tyr	L-Tirosina
Phg	L-Fenilgbcina
2-Nal	L-2-Naftilalanina
1-Nal	L-1 -Naftilalanina
4C1-Phe	L-4-Clorofenilalanina
3C1-Phe	L-3-Clorofenilalanina

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 69/186

2C1-Phe	L-2-Clorofenilalanina
3,4C1₂-Phe	L-3,4-Diclorofenilalanina
4F-Phe	L-4-Fluorofenilalanina
3F-Phe	L-3-Fluorofenilalanina
2F-Phe	L-2-Fluorofenilalanina
Thi	L-P-2-Tienilalanina
Tza	L-2-Tiazolilalanina
Y(Bzl)	L-O-Benziltirosina
Bip	L-Bifenilalanina
S(Bzl)	L-O-Benzilserina
T(Bzl)	L-O-Benziltreonina
hPhe	L-Homo-fenilalanina
Bpa	L-4-Benzoilfenilalanina
Radicais particularmente preferidos para grupo E sã<
Arg	L-Arginina
Lys	L-Lisina
Om	L-Omitina
Dpr	ácido L-2,3-Diaminopropiônico
A₂Bu	ácido L-2,4-Diaminobutírico
Dbu	ácido (S)-2,3-diaminobutírico
Phe(pNH₂)	L-para-Aminofenilalanina
Phe(mNH₂)	L-meta-Aminofenilalanina
Phe(oNH₂)	L-orto-Aminofenilalanina
hArg	L-Homo-arginina
Phe(mC(NH₂)=NH)	L-meta-Amidinofenilalanina
Phe(pC(NH₂)=NH)	L-para-Amidinofenilalanina
Phe(mNHC (NH₂)=NH)	L-meta-Guanidinofenilalanina
Phe(pNHC (NH₂)=NH)	L-para-Guanidinofenilalanina
Cit	L-Citrulina

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 70/186

Radicais particularmente preferidos para grupo F são:

Asp	ácido L-Aspártico
Asn	L-Asparagina
Cys	L-Cisteína
Glu	ácido L-Glutâmico
Gin	L-Glutamina
Ser	L-Serina
Thr	L-Treonina
Cit	L-Citrulina
Pen	L-Penicilamina
AcLys	L-N^e-Acetillisina
hCys	L-Homo-cisteína
hSer	L-Homo-serina

Geralmente, a cadeia peptídica Z nos miméticos de β-haírpin da invenção compreende 7 ou 11 radicais de aminoácidos (n = 7 ou 11). As posições de P¹ a Pⁿ de cada radical de aminoácido na cadeia Z são definidas inequivocamente como a seguir: P¹ representa o primeiro aminoácido na cadeia Z que é acoplado com sua ponta N à ponta C dos Templates (b)-(p) ou do grupo -B-CO- no template (al), ou de grupo -A-CO- no template (A2) e Pⁿ representa o último aminoácido na cadeia Z que é acoplado com sua ponta C à ponta N dos Templates (b)-(p) ou de grupo -A-CO- no template (al) ou de grupo -B-CO- no template (A2). Cada uma das posições de P¹ a Pⁿ conterá, de preferência, um radical de aminoácido pertencente a um ou dois ou três dos tipos de C a F acima, ou é Pro, como a seguir:

- se n for 7, os radicais de aminoácidos na posição 1-7 são, de preferência:

PI: de tipo C ou de tipo F;

P2: de tipo E ou de tipo D ou de tipo C;

P3: de tipo F ou de tipo C;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 71/186

Ρ4: de tipo C ou tipo F ou de tipo D;

P5: de tipo F, ou o radical é Pro;

P6: de tipo C ou de tipo E, ou o radical é Pro;

P7: de tipo C ou de tipo F;

se n for 11, os radicais de aminoácidos na posição 1-11 são, de preferência:

PI: de tipo E ou de tipo F;

P2: de tipo C ou de tipo F;

P3: de tipo C;

P4: de tipo E ou de tipo D ou de tipo C;

P5: de tipo F ou de tipo C;

P6: de tipo C, ou de tipo D;

P7: de tipo F, ou o radical é Pro;

P8: de tipo C ou de tipo E, ou o radical é Pro;

P9: de tipo C ou de tipo F;

PIO: de tipo F ou de tipo C;

PI 1: de tipo D ou de tipo E; ou

P2 e PIO, tomados em conjunto podem formar a grupo de tipo H;

β-peptideomiméticos particularmente preferidos da invenção incluem aqueles descritos nos Exemplos 1,4, 7, 8 e 15,

O processo da invenção pode ser realizado vantajosamente como síntese de conjunto em paralelo dando bibliotecas de peptideomiméticos de β-hairpin fixados-a-template da fórmula geral I acima. Referida síntese em paralelo permite obter conjuntos de numerosos compostos (normalmente de 24 a 192, tipicamente 96) de fórmula geral I com altos rendimentos e purezas definidas, minimizando a formação de subprodutos diméricos e poliméricos. Assim, a escolha apropriada do suportesólido funcionalizado (i.e. suporte sólido mais molécula de ligando), os de 23/07/2018, pág. 72/186

Templates e o sítio de ciclização desempenham papéis-chave.

O suporte sólido funcionalizado é derivado vantajosamente de poliestireno reticulado com, de preferência, 1-5%, divinilbenzeno; pobestireno revestido com espaçadores em pobetilenoglicol (Tentagel^R); e resinas de poliacrilamida (ver também Obrecht, D.; Villalgordo, J.-M, “SobdSupported Combinatorial and Parallel Synthesis of Small-Molecular-Weight Compound Libraries”, Tetrahedron Organic Chemistry Series, Vol. 17, Pergamon, Elsevier Science, 1998).

O suporte sóbdo é funcionabzado por meio de um ligando, i.e. uma molécula espaçadora bifuncional que contém, em uma ponta, um grupo de ancoragem para bgação ao suporte sólido e, na outra ponta, um grupo funcional cbvável seletivamente usado para as transformações químicas e procedimentos de cbvagem subseqüentes. Para os fins da presente invenção o bgando precisa ser projetado para bberar eventualmente o grupo carboxila em condições ácidas brandas que não afetam grupos protetores presentes sobre qualquer grupo funcional nas cadeias laterais dos diversos aminoácidos. Ligandos que são vantajosos para os fins da presente invenção formam ésteres com labilidade para ácido com o grupo carboxila dos aminoácidos, usualmente benzila com labibdade para ácido, benzidrila e ésteres de tritila; exemplos de estruturas bgantes deste tipo incluem 2-metóxi-4hidroximetilfenóxi (ligando Sasrin^R), 4-(2,4-dimetoxifenil-hidroximetil)fenóxi (bgando Rink), ácido 4-(4-hidroximetil-3-metoxifenóxi)butírico (ligando HMPB), tritila e 2-clorotritila.

De preferência, o suporte é derivado de poliestireno reticulado com, o mais preferível, 1-5% de divinilbenzeno e funcionabzado por meio do bgando de 2-clorotritila.

Quando reabzado como uma síntese de conjunto em paralelo, o processo da invenção pode ser reabzado vantajosamente como descrito abaixo, porém aqueles versados na arte compreenderão imediatamente como de 23/07/2018, pág. 73/186 este procedimento precisará ser modificado caso se deseje sintetizar um único composto da fórmula I acima.

Uma quantidade determinada de vasos de reação (normalmente de 24 a 192, tipicamente 96) equivalente ao número total de compostos a serem sintetizados pelo método em paralelo, é carregada com de 25 a 1000 mg, de preferência 100 mg, do suporte sólido funcionalizado apropriado, de preferência de 1 a 3 % de poliestireno reticulado ou resina de tentagel.

O solvente a ser usado precisa ser capaz de intumescer a resina 10 e inclui, embora sem limitação, diclorometano (DCM), dimetil formamida (DMF), N-metilpirrolidona (NMP), dioxano, tolueno, tetraidrofurano (THF), etanol (EtOH), trifluoroetanol (TFE), álcool de isopropila e análogos. Misturas de solventes contendo, como pelo menos um componente, um solvente polar (p. ex. 20 % de TFE/DCM, 35% de THF/NMP) são benéficas para assegurar alta reatividade e solvatação das cadeias peptídicas ligadas a resina (Fields, G. B., Fields, C. G., J. Am. Chem. Soc. 1991,113, 4202-4207).

Com o desenvolvimento de diversos ligandos que liberam o grupo ácido carboxílico C-terminal em condições ácidas brandas, não afetando grupos com labilidade para ácido que protegem grupos funcionais na cadeia(s) lateral, realizou-se progressos consideráveis na síntese de fragmentos de peptídeos protegidos. O ligando derivado de 2-metóxi-4hidroxibenzilálcool (ligando Sasrin^R, Mergler et al., Tetrahedron Lett. 1988, 29 4005-4008) é clivável com ácido trifluoroacético diluído (0,5-1% de TFA em DCM) e é estável em condições de desproteção de Fmoc durante a síntese de peptídeos, sendo que grupos protetores adicionais baseados em Boc/tBu são compatíveis com este esquema de proteção. Outros ligandos que são adequados para o processo da invenção incluem o super ligando de 4-(2,4dimetoxifenil-hidroximetil)-fenóxi com labilidade para ácido (ligando de Rink, Rink, H. Tetrahedron Lett. 1987, 28, 3787-3790), sendo que a remoção

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 74/186 do peptídeo requer 10 % de ácido acético em DCM ou 0,2 % de ácido trifluoroacético em DCM; o ligando derivado de ácido 4-(4-hidroximetil-3metoxifenóxi)butírico (ligando HMPB, Flõrsheimer & Riniker, Peptides 1991,1990 131) que também é clivado com 1 % de TFA/DCM de modo a proporcionar um fragmento de peptídeo contendo todos os grups protetores de cadeia lateral com labilidade para ácido; e, adicionalmente, o ligando cloreto de 2-clorotritila (Barlos et al., Tetrahedron Lett. 1989, 30, 3943-3946), que permite o destacamento do peptídeo utilizando-se uma mistura de ácido acético glacial/trifluoroetanol/DCM (1:2:7) durante 30 min.

Grupos protetores vantajosos para aminoácidos e, respectivamente, para seus radicais são, por exemplo, para o grupo amino (como está presente, p. ex., também na cadeia lateral da lisina)

	Cbz	benziloxicarbonila
15	Boc	ter.-butiloxicarbonila
	Fmoc	9-fluorenilmetoxicarbonila
	Alloc	abloxicarbonila
	Teoc	trimetil sibletoxicarbonila
	Tcc	tricloroetoxicarbonila
20	Nps	o-nitrofenilsulfonila;

Trt trifenimetila ou tritila para o grupo carboxila (como está presente p. ex. também na cadeia lateral do ácido aspártico e glutâmico) por meio de conversão a ésteres com componentes álcool.

25	tBu	ter.-butila
	Bn	benzila
	Me	metila
	Ph	fenil
	Pac	Fenacila

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Alila

	Tse	trimetil sililetila
	Tce	tricloroetila;
		para o grupo guanidino (como está presente p. ex. na
5	cadeia lateral da arginina)
	Pmc	2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonila
	Ts	tosila (i. e. p-toluenossulfonila)
	Cbz	benziloxicarbonila
	Pbf	pentametil diidrobenzofuran-5 -sulfonila
10		para o grupo hidróxi (como está presente p. ex. na cadeia
	lateral da treonina e serina)
	tBu	ter.-butila
	Bn	benzila
	Trt	tritila
15		e para o grupo mercapto (como está presente p. ex. na
	cadeia lateral da cisteína)
	Acm	acetamidometila
	tBu	ter.-butila
	Bn	benzila
20	Trt	tritila
	Mtr	4-metoxitritilal.

Os derivados de aminoácido protegidos com 9fluorenilmetoxicarbonil- (Fmoc) são usados, de preferência, como os blocos construtivos para a construção dos miméticos de alça em β-hairpin fixados-a25 template de fórmula I. Para a desproteção, i.e. clivagem do grupo Fmoc, é possível usar 20 % de piperidina em DMF ou 2 % de DBU/2 % de piperidina em DMF.

A quantidade do reagente, i. e. do derivado de aminoácido, é usualmente de 1 a 20 equivalentes baseado na carga de miliequivalentes por

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 76/186 grama (meq/g) do suporte sólido funcionalizado (tipicamente de 0,1 a 2,85 meq/g para resinas de poliestireno) que foi introduzida originalmente no tubo de reação. Se necessário, é possível usar equivalentes adicionais de reagentes para impelir a reação até o completamento dentro de um período de tempo razoável. Os tubos de reação, em combinação com o bloco fixador e o coletor, são reinseridos no bloco de reservatório e o aparelho é fixado. Inicia-se o fluxo de gás através do coletor para proporcionar um ambiente controlado, por exemplo, nitrogênio, argônio, ar e análogos. O fluxo de gás também pode ser aquecido ou resfriado antes de fluir através do coletor. O aquecimento ou resfriamento dos poços de reação é obtido aquecendo-se o bloco de reação ou resfriando-se o mesmo extemamente com isopropanol/gelo seco e análogos de modo a proporcionar as reações sintéticas desejadas. A agitação é reabzada por sacudimento ou agitação magnética (dentro do tubo de reação). As estações de trabalho preferidas (sem, contudo, bmitar-nos às mesmas) são a

Labsource's Combi-chem station e MultiSyn Tech's-Syro synthesizer.

A formação da bgação de amida requer a ativação do grupo acarboxila para a etapa de acilação. Quando esta ativação é reabzada por meio das carbodiimidas comumente usadas, como diciclo-hexilcarbodiimida (DCC, Sheehan & Hess, J. Am. Chem. Soc. 1955, 77, 1067-1068) ou diisopropilcarbodiimida (DIC, Sarantakis et al Biochem. Biophys. Res. Commun.\916, 73, 336-342), a diciclo-hexiluréia resultante é insolúvel e, respectivamente, diisopropiluréia é solúvel nos solventes geralmente usados. Em uma variação do método da carbodiimida o 1-hidroxibenzotriazol (HOBt, Kõnig & Geiger, Chem. Ber 1970,103, 788-798) é incluído como um aditivo à mistura de acoplamento. HOBt impede a desidratação, suprime a racemização dos aminoácidos ativados e atua como um catabsador para aperfeiçoar as reações de acoplamento lentas. Determinados reagentes de fosfônio têm sido usados como reagentes de acoplamento direto, como hexafluorofosfato de benzotriazol-l-il-óxi-tris-(dimetilamino)-fosfônio (BOP)

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 77/186 (Castro et al., Tetrahedron Lett. 1975, 14, 1219-1222; Synthesís, 1976, 751752), ou hexafluorofosfato de benzotriazol-l-il-óxi-tris-pirrolidino-fosfônio (Py-BOP, Coste et al., Tetrahedron Lett. 1990, 31, 205-208), ou tetrafluoroborato de 2-(lH-benzotriazol-l-il-)l,l,3,3-tetrametil urônio (TBTU), ou hexafluorofosfato (HBTU, Knorr et al., Tetrahedron Lett. 1989, 30, 1927-1930); estes reagentes de fosfônio também são adequados para a formação in situ de ésteres de HOBt com os derivados de aminoácidos protegidos. Mais recentemente, tem-se utibzado como reagentes de acoplamento a azida de difenilfosforila (DPPA) ou tetrafluoroborato de O-(710 aza-benzotriazol-l-il)-N,N,N’,N’-tetrametil urônio (TATU) ou hexafluorofosfato de O-(7-aza-benzotriazol-l-il)-N,N,N’,N’-tetrametil urônio (HATU)/7-aza-l-hidróxi benzotriazol (HOAt, Carpino et al., Tetrahedron Lett. 1994, 35, 2279-2281).

Devido ao fato de que reações de acoplamento quase quantitativas são essenciais, é desejável ter evidência experimental para o completamento das reações. O teste da ninidrina (Kaiser et al., Anal. Biochemistry 1970, 34, 595), onde uma resposta colorimétrica positiva a uma fração de peptídeo ligado-a-resina indica quahtativametne a presença da amina primária, pode ser reabzado fácil e rapidamente após cada etapa de acoplamento. A químico do Fmoc permite a detecção espectrofotométrica do cromóforo Fmoc quando o mesmo é bberado com a base (Meienhofer et al., Int. J. Peptide Protein Res. 1979,13, 35-42).

O intermediário bgado-a-resina dentro de cada tubo de reação é lavado tomando-se livre do excesso de reagentes retidos, de solventes, e de subprodutos, por meio de exposição repetida a solvente(s) puro(s) por meio de um dos dois métodos a seguir:

1) Os poços de reação são enchidos com solvente (de preferência 5 ml), os tubos de reação, em combinação com o bloco fixador e coletor, são imersos e agitados durante de 5 a 300 minutos, de preferência

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 78/186 durante 15 minutes, e secados por gravidade, seguido de pressão de gás aplicada na entrada do coletor (enquanto se fecha a saída) para explir o solvente;

2) O coletor é removido do bloco fixador, frações de solvente 5 (de preferência 5 ml) são carregadas pelo topo dos tubos de reação e drenadas por gravidade através de um filtro para um vaso de recebimento, como um frasco ou tubo de ensaio.

Ambos os procedimentos de lavagem indicados acima são repetidos até cerca de 50 vezes (de preferência cerca de 10 vezes), monitorando-se a eficiência de remoção de reagente, solvente, e subprodutos por meio de métodos, como TLC, GC, ou inspeção das lavagens.

O procedimento de reagir o composto bgado a resina, descrito acima, com reagentes dentro de poços de reação, seguido de remoção do excesso de reagentes, subprodutos, e solventes é repetido com cada transformação sucessiva até se obter a preparação de um peptídeo bnear totalmente protegido, final, bgado a resina.

Antes que este peptídeo linear totalmente protegido seja destacado do suporte sóbdo, é possível, se desejado, desproteger seletivamente um ou vários grupos funcionais protegidos presentes na molécula e substituir apropriadamente o(s) grupo(s) reativo(s) assim bberados. Com este objetivo, o grupo(s) funcional em questão precisa ser inicialmente protegido por um grupo protetor que pode ser removido seletivamente sem afetar os grupos protetores remanescentes ainda presentes. Alloc (abloxicarbonila) é um exemplo para um tal grupo protetor para amino que pode ser removido seletivamente, p. ex. por meio de Pd° e fenilsilano em CH2CI2, sem afetar os grupos protetores remanescentes, como Fmoc, presentes na molécula. O grupo reativo assim liberado pode ser tratado então com um agente adequado para introduzir o substituinte desejado. Assim, por exemplo, um grupo amino pode ser acilado por meio de um agente acilador

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 79/186 correspondente ao substituinte acila a ser introduzido.

O destacamento do peptídeo linear totalmente protegido do suporte sólido é obtido por meio de imersão dos tubos de reação, em combinação com o bloco fixador e coletor, em poços de reação contendo uma solução do reagente de clivagem (de preferência de 3 a 5 ml). Fluxo de gás, controle de temperatura, agitação e monitoração da temperatura são implementados como descrito acima e como desejado para se efetuar a reação de destacamento. Os tubos de reação, em combinação com o bloco fixador e coletor, são desmontados do bloco reservatório e elevados acima do nível da solução, porém abaixo da borda superior dos poços de reação, e aplica-se pressão de gás pela entrada do coletor (enquanto se fecha a saída) de modo a expelir eficientemente a solução de produto final nos poços de reservatório. A resina que permanece nos tubos de reação é então lavada de 2 a 5 vezes como acima com de 3 a 5 ml de um solvente apropriado para extrair (remover por lavagem) a maior quantidade possível de produto destacado. As soluções de produto assim obtidas são combinadas, tomando-se cuidado para evitar misturação cruzada. As soluções/extratos individuais são então manipulados conforme necessário para isolar os compostos finais. Manipulações típicas incluem, embora sem limitação, evaporação, concentração, extração líquido/líquido, acidificação, basificação, neutralização ou reações adicionais em solução.

As soluções contendo derivados de peptídeos lineares totalmente protegidos que foram clivados do suporte sólido e neutralizadas com uma base, são evaporadas. Em seguida, efetua-se ciclização em solução empregando solventes, como DCM, DMF, dioxano, THF e análogos. E possível utilizar para a ciclização diversos reagente de acoplamento que foram indicados previamente. A duração da ciclização é de cerca de 6-48 horas, de preferência de cerca de 24 horas. O progresso da reação é monitorado, por exemplo, por meio de cromatografia líquida de alto desempenho de fase de 23/07/2018, pág. 80/186 invertida, RP-HPLC (Reverse Phase High Performance Liquid Chromatography). Em seguida, o solvente é removido por meio de evaporação, o derivado de peptídeo cíclico totalmente protegido é dissolvido em um solvente que não é miscível com água, como DCM, e a solução é extraída com água ou uma mistura de solventes miscíveis em água, para remover qualquer excesso do reagente de acoplamento.

Antes de se remover os grupos protetores do peptídeo cíclico totamente protegido, é possível, se desejado, formar um ligação interfilamentos entre cadeias laterais de radicais de aminoácidos apropriados em posições opostas da região de filamento β. Ligações interfilamentos e sua formação já foram discutidos acima, em conexão com as explicações dadas com relação a grupos do tipo H que, por exemplo, podem ser pontes dissulfeto formadas por cisteínas e homocisteínas em posições opostas do filamento β, ou radicais de ácido glutâmico e aspártico que ligam omitinas e, respectivamente, lisinas localizadas em posições opostas no filamento β por meio de formação de ligação de amida. A formação de referidas ligações interfilamentos pode ser efetuada por meio de métodos bem conhecidos na arte.

Finalmente, o derivado de peptídeo totalmente protegido de tipo I é tratado com 95 % de TFA, 2,5 % de H₂O, 2,5 % de TIS ou outra combinação de aglutinadores para efetuar a clivagem dos grupos protetores. O tempo de reação da clivagem é usualmente de 30 minutos a 12 horas, de preferência de cerca de 2 horas. Em seguida, a maior parte do TFA é evaporada e o produto é precipitado com éter/hexano (1:1) ou outros solventes que são adequados para isto. Após a remoção cuidadosa do solvente, o derivado de peptídeo cíclico obtido como produto final pode ser isolado. Dependendo de sua pureza, este derivado de peptídeo pode ser usado diretamente para ensaios biológicos, ou pode ser ainda mais purificado, por exemplo, por meio de HPLC preparativa.

de 23/07/2018, pág. 81/186

Como indicado previamente, se desejado, é possível converter depois um produto totalmente desprotegido assim obtido a um sal farmaceuticamente aceitável, ou converter um sal farmaceuticamente aceitável ou inaceitável assim obtido ao composto livre correspondente de fórmula I ou a um sal diferente, farmaceuticamente aceitável. Qualquer uma destas operações pode ser reabzada por meio de métodos conhecidos na arte.

Os materiais de partida usados no processo da invenção, os materiais preparatórios de partida para o mesmo, e a preparação destes materiais de partida e preparatórios de partida serão discutidos a seguir de maneira detalhada.

Blocos construtivos de tipo A podem ser sintetizados de acordo com os métodos da bteratura descritos abaixo. Os aminoácidos correspondentes foram descritos como racemizados não-protegidos ou protegidos com Boc ou Fmoc, isômeros (D) ou (L). Há de se considerar que blocos construtivos de aminoácidos não protegidos podem ser transformados facilmente em blocos construtivos correspondentes protegidos com Fmoc requeridos para a presente invenção por meio de manipulações convencionais de grupos protetores. Pubbcações que descrevem métodos gerais para a síntese de aminoácidos α incluem: R. Duthaler, Tetrahedron (Report) 1994, 349, 1540-1650; R. M. Wilbams, “Synthesis of optically active -amino acids”, Tetrahedron Organic Chemistry Series, Vol.7, J. E. Baldwin, P. D. Magnus (Eds.), Pergamon Press., Oxford 1989. Um método particularmente útil para a síntese de aminoácidos α opticamente ativos relevante para esta invenção inclui a separação cinética com o emprego de enzimas hidrolíticas (Μ. A. Verhovskaya, I. A. Yamskov, Russian Chem. Rev. 1991, 60, 11631179; R. M. Wilbams, “Synthesis of optically active -amino acids”, Tetrahedron Organic Chemistry Series, Vol.7, J. E. Baldwin, P. D. Magnus (Eds.), Pergamon Press., Oxford 1989, capítulo 7, p. 257-279). Enzimas hidrolíticas envolvem hidróbse de amidas e nitrilos por meio de de 23/07/2018, pág. 82/186 aminopeptidases ou nitrilases, clivagem de grupos N-acila por acilases, e hidrólise de éster por meio de lipases ou proteases. Está bem documentado que determinadas enzimas levarão especificamente a enanciômeros (L) puros, enquanto que outras proporcionarão os enanciômeros (D) correspondentes (p. ex.: R. Duthaler, Tetrahedron Report 1994, 349, 1540-1650; R. M. Williams, “Synthesis of optically active -amino acids”, Tetrahedron Organic Chemistry Series, Vol.7, J. E. Baldwin, P. D. Magnus (Eds.), Pergamon Press., Oxford 1989).

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2095-2100; G. Lowe, T. Vilaivan, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1997, 547554; B. Bellier, I. McCourt-Tranchepain, B. Ducos, S. Danascimenta, H. Mundal, J. Med. Chem. 1997, 40, 3947-3956; M. Peterson, R. Vince J. Med. Chem. 1991, 34, 2Ί&Ί-2Ί9Τ, E. M. Smith, G. F. Swiss, B. R. Neustadt, E. H. Gold, J. A. Sommer, J. Med. Chem. 1988, 37, 875-885; E. Rubini, C. Gilon,

Z. Selinger, M. Chorev, Tetrahedron 1986, 42, 6039-6045 (R^J= H; R⁵= OH); C. R. Noe, M. Knollmueller, H. Voellenkle, M. Noe-Letschnig, A. Weigand,

J. Mühl, Pharmazie, 1996, 57, 800-804 (R^J= CH₃; R⁵= OH); J. Kitchin, R. C. Berthell, N. Cammack, S. Dolan, D. N. Evans, J. Med. Chem. 1994, 37, 37033716; D. Y. Jackson, C. Quan, D. R. Artis, T. Rawson, B. Blackbum, J. Med.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 86/186

Chem. 1997, 40, 3359-3368 (R^J= H; R⁵= OBn); J. E. Baldwin, A. R. Field, C. C. Lawrence, K. D. Merritt, C. J. Schofield, Tetrahedron Lett. 1993, 34, 7489-7492; K. Hashimoto, Y. Shima, H. Shirahama, Heterocycles 1996, 42, 489-492 (R^J= H; R⁵= OTs); T. R. Webb, C. Eigenbrot, J. Org. Chem. 1991,

56, 3009-3016; D. C. Cafferty, C. A. Slate, B. M. Nakhle, H. D. Graham, T.

L. Anstell, Tetrahedron 1995, 57, 9859-9872 (R^J= H; R⁵= NH2); T. R. Webb, C. Eigenbrot, J. Org. Chem. 1991, 56, 3009-3016 (R^J= H; R⁵= CH2NH₂); J.

K. Thottatil, J. L. Moniot, Tetrahedron Lett. 1986, 27, 151-154 (R^J= H; R⁵= Ph); K. Plucinska, T. Kataoka, M. Yodo, W. Cody, J. Med. Chem. 1993, 36,

1902-1913 (R^J= H; R⁵= SBn); J. Krapcho, C. Turk, D. W. Cushman, J. R.

Powell, J. Med. Chem. 1988, 31, 1148-1160 (R^J= H; R⁵= SPh); A. J. Verbiscar, B. Witkop, J. Org. Chem. 1970, 35, 1924-1927 (R^J= H; R⁵= SCH₂(4-OMe)C6H4); S. I. Klein, J. M. Denner, B. F. Molino, C. Gardner, R. D'Alisa, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996, 6, 2225-2230 (R^J= H; R⁵=

O(CH₂)3Ph); R. Zhang, F. Brownewell, J. S. Madalengoita, Tetrahedron Lett.

1999, 40, 2707-2710 (R^J= H; R⁵= CH₂COOBn).

A9: Ver Blake, J. Am. Chem. Soc. 1964, 86, 5293-5297; J. Cooper, R. T. Gallagher, D. T. Knight, J. Chem. Soc. Chem. Perkin Trans.l, 1993, 1313-1318; D. W. Knight, A. W. Sibley, J. Chem. Soc. Perkin Trans.l,

1997, 2179, 2188 (R^J= H; R⁶= H); Blake, J. Am. Chem. Soc. 1964, 86, 52935297; Y. Yamada, T. Ishii, M. Kimura, K. Hosaka, Tetrahedron Lett. 1981, 1353-1354 (R^J= H; R⁶= OH); Y. Umio, Yakugaku Zasshi, 1958, 78, 727 (R^J= H; R⁶= iPr); Miyamoto, Yakugaku Zasshi, 1957, 77, 580-584; Tanaka, Proc. Jpn. Acad. 1957, 33, 47-50 (R^J= H; R⁶= CH(CH₃)CH₂N(CH₃)₂); L. E.

Overman, B. N. Rodgers, J. E. Tellew, W. C. Trenkle, J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 7159-7160 (R^J= H; R⁶= alila); Ohki, Chem. Pharm. Bull. 1976, 24,1362-1369 (R^J= CH₃; R⁶= H).

A10: Ver J. Mulzer, A. Meier, J. Buschmann, P. Luger, Synthesis 1996, 123-132 (R^J= H; R⁷= CH=CH₂); J. Cooper, P. T. Gallagher,

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 87/186

D. W. Knight, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1988, 509-510; E. Gõtschi, C. Jenny, P. Reindl, F. Ricklin, Helv. Chim. Acta 1996, 79, 2219-2234 (R^J= H; R⁷= OH); N. A. Sasaki, R. Pauli, C. Fontaine, A. Chiaroni, C. Riche, P. Potier, Tetrahedron Lett. 1994, 35, 241-244 (R^J= H; R⁷= COOH); R. Cotton,

A. N. C. Johnstone, M. North, Tetrahedron 1995, 57, 8525-8544 (R^J= H; R⁷= COOMe); J. S. Sabol, G. A. Flynn, D. Friedrich, E. W. Huber, Tetrahedron Lett. 1997, 38, 3687-3690 (R^J= H; R⁷= CONH₂); P. P. Waid, G. A. Flynn, E. W. Huber, J. S. Sabol, Tetrahedron Lett. 1996, 37, 4091-4094 (R^J= H; R⁷= (4-ΒηΟ)ΟόΗ4); N. A. Sasaki, R. Paub, P. Potier, Tetrahedron Lett. 1994, 35,

237-240 (R^J= H; R⁷= SO₂Ph); R. J. Heffner, J. Jiang, M. Jouilbé, J. Am.

Chem. Soc. 1992, 114, 10181-10189; U. Schmidt, H. Griesser, A. Lieberknecht, J. Hãusler, Angew. Chem. 1981, 93, 272-273 (R^J= H; R⁷= OAril); H. Mosberg, A. L. Lomize, C. Wang, H. Kroona, D. L. Heila, J. Med. Chem. 1994, 37, 4371-4383 (R^J= H; R⁷= 4-OHC₆H4); S. A. Kolodziej, G. V.

Nikiforovich, R. Sceean, M.-F. Lignon, J. Martinez, G. R. Marshall, J. Med. Chem. 1995, 38, 137-149 (R^J= H; R⁷= SCH₂(4-Me)C₆H4).

All: Ver Kuhn, Osswald, Chem. Ber. 1956, 89, 1423-1434; Patchett, Witkop, J. Am. Chem. Soc. 1957, 79, 185-189; Benz, Helv. Chim. Acta 1974, 57, 2459-2475; P. Wessig, Synlett, 1999, 9, 1465-1467; E. M.

Smit, G. F. Swiss, B. R. Neustadt, E. H. Gold, J. A. Sommer, J. Med. Chem. 1988, 37, 875-885; J. Krapcho, C. Turk, D. W. Cushman, J. R. Powell, J. M. DeForrest, J. Med. Chem. 1988, 37, 1148 (R^J= H; R⁶= H); D. Benlshai, S. Hirsh, Tetrahedron 1988, 44, 5441-5450 (R'= H; R⁶= CH₃); M. W. Holladay, C. W. Lin, C. S. Garvey, D. G. Witte, J. Med. Chem. 1991, 34, 455-457 (R^J=

H; R⁶= abla); P. Barralough, P. Hudhomme, C. A. Spray, D. W. Young, Tetrahedron 1995, 57, 4195-4212 (R^J= H; R⁶= Et); J. E. Baldwin, M. Rudolf, Tetrahedron Lett. 1994, 35, 6163-6166; J. E. Baldwin, S. J. Bamford, A. M. Fryer, M. Rudolf, Μ. E. Wood, Tetrahedron 1997, 53, 5233-5254 (R^J= H; R⁶= CH₂COOtBu); P. Gill, W. D. Lubell, J. Org. Chem. 1995, 60, 2658-2659

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 88/186 (R^J= H; R⁶= CH3; Bn; alila; CH2COOMe); M. J. Blanco, F. J. Sardina, J. Org. Chem. 1998, 63, 3411-3466 (R^J= H; R⁶= OCH2OMe).

A12: Ver Ahmed, Cheeseman, Tetrahedron 19T7, 33, 22552257; J. S. New, J. P. Yevich, J. Heterocycl. Chem. 1984, 27, 1355-1360; R.

Kikumoto, Y. Tamao, K. Ohkubo, T. Tezuka, S. Tonomura, J. Med. Chem. 1980, 23, 1293-1299; C. J. Blankley, J. S. Kaltenbronn, D. E. DeJohn, A. Wemer, L. R. Bennett, J. Med. Chem. 1987, 30, 992-998; S. Klutcho, C. J. Blankley, R. W. Fleming, J. M. Hinkley, R. E. Wemer, J. Med. Chem. 1986, 29, 1953-1961 (R^J= H; R⁸= H); L. J. Beeley, C. J. M. Rockwell, Tetrahedron

Lett. 1990, 31, 417-420 (R^J= COOEt; R⁸= H).

A13: Ver G. Flouret, W. Brieher, T. Majewski, K. Mahan, J.

Med. Chem. 1991, 43, 2089-2094; G. Galiendo, P. Grieco, E. Perissuti, V. Santagada, Farmaco, 1996, 57, 197-202; D. F. McComsey, M. J. Hawkins, P. Andrade-Gordon, M. F. Addo, B. E. Maryanoff, Bioorg. Med. Chem. Lett.

1999, 9, 1423-1428; G. B. Jones, S. B. Heaton, B. J. Chapman, M. Guzel,

Tetrahedron: Asymmetry 1997, 8, 3625-3636; M. Asami, H. Watanabe, K. Honda, S. Inoue, Tetrahedron: Asymmetry 1998, 9, 4165-4174; K. Gross, Y.

M. Yun, P. Beak, J. Org. Chem. 1997, 62, 7679-7689 (R^J= H; R⁶= H; R⁸= H);

K. Gross, Y. M. Yun, P. Beak, J. Org. Chem. 1997, 62, 7679-7689 (R^J= H;

R⁶= H; R⁸= 6-C1); Ch. Noe, M. Knollmueller, C. Schoedl, M. L. Berger, Sei.

Pharm. 1996, 64, 577-590; E. Reiman, W. Erdle, H. Unger, Pharmazie, 1994, 54, 418-421 (R^J= H; R⁶= CH₂COOH; R⁸= H); V. Collot, M. Schmitt, A. K. Marwah, B. Norberg, J.-J. Bourgignon, Tetrahedron Lett. 1997, 38, 80338036 (R^J= H; R⁶= Ph; R⁸= H); L. V. Dunkerton, H. Chen, B. P. McKillican,

Tetrahedron Lett. 1988, 29, 2539-2542 (R'= C(CH₃)₂CH=CH₂; R⁶= H; R⁸= H); E. J. Corey, J. Am. Chem. Soc. 1970, 92, 2476-2488; Neunhoeffer, Lehmann, Chem. Ber. 1961, 94, 2960-2963 (R^J= CH₃; R⁶= H; R⁸= H).

A14: Aminoácidos de tipo A14 podem ser preparados de acordo com o Esquema 1.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 89/186

Esquema 1

-^><COOMe

NR¹COPh

V-VII

O _sXCOOH \¹

Fmoc i: NaH, BrCH(R')COOMe, DMF; ii: LiOHxlFkO, MeOH, H₂O; iii: ácido polifosfórico (PPA); iv: NaH, CICOOMe, THF; v: resolução enzimática (p. ex., lipase), vi: NaOH, MeOH, H2O, calor; vii: FmocOSu, Na2CO.3aq., dioxano

A15: Ver D. S. Perlow, J. M. Erb, N. P. Gould, R. D. Tung, R. M. Freidinger, J. Org. Chem. 1992, 57, 4394-4400; D. Y. Jackson, C. Quan, D. R. Artis, T. Rawson, B. Blackburn, J. Med. Chem. 1997, 40, 3359-3368 (R'= H; R²= H); Η. H. Wasserman, K. Rodrigues, K. Kucharczyk, Tetrahedron Lett. 1989, 30, 6077-6080 (R'= H; R²= COOH).

A16: Ver Beyerman, Boekee, Recl. Trav. Chim. Pays-Bas, 1959, 78, 648-653; Μ. E. Freed, A. R. Day, J. Org. Chem. 1960, 25, 21052107; D. R. Adams, P. D. Bailey, I. D. Collier, J. D. Heferman, S. Slokes, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1996, 349-350; J. E. Baldwin, R. M. Adlington, C. R. A. Godfrey, D. W. Collins, J. D. Vaughan, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1993, 1434-1435; Y. Matsumura, Y. Takeshima, H. Ohita, Bull. Chem. Soc. Jpn. 1994, 67, 304-306 (R'= H; R⁶= H); C. Herdeis, W. Engel, Arch. Pharm. 1991, 324, 670 (R'= COOMe; R⁶= CH₃).

A17, Al8: Ver C. R. Davies, J. S. Davies, J. Chem. Soc. Perkin Trans 1, 1976, 2390-2394; K. Bevan, J. Chem. Soc. C, 1971, 514-522; K. Umezawa, K. Nakazawa, Y. Ikeda, H. Naganawa, S. Kondo, J. Org. Chem. 1999, 64, 3034-3038 (R'= R³= H); P. D. Williams, M. G. Bock, R. D. Tung, V. M. Garsky, D. S. Parlow, J. Med. Chem, 1992, 35, 3905-3918 ; K.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 90/186

Tamaki, K. Tanzawa, S. Kurihara, T. Oikawa, S. Monma, Chem. Pharm. Bull. 1995, 43, 1883-1893 (R'= R⁵= H; R³= COOBn); K. J. Hale, J. Cai, V. Delisser, S. Manaviazar, S. A. Peak, Tetrahedron 1996, 52, 1047-1068 ; M. H. Chen, O. P. Goel, J.-W. Hyun, J. Magano, J. R. Rubin, Bioorg. Med.

Chem. Lett. 1999, 9, 1587-1592 (R‘= R⁵= H; R³= COOtBu); R. Baenteli, I. Brun, P. Hall, R. Metternich, Tetrahedron Lett. 1999, 40, 2109-2112 (R*= R⁵= H; R³= COR); K. J. Hale, N. Jogiya, S. Manaviazar, Tetrahedron 1998, 39, 7163-7166 (R'= H; R³= COOBn; R⁵= OBn); T. Kamenecka, S. J. Danishewsky, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1998, 37, 2995-2998(R'= H; R³=

COO(CH₂)₂SiMe₃; R⁵= OSiMe₂tBu.

A19: Ver Beilstein, Número de registro 648833 (R*=R⁴=R⁸=H). Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o Esquema 2.

Esquema 2.

i: NaH, CH₂(COOMe)₂, DMSO; NaH, R’-X, DMSO; iii: NaOHaq., MeOH, 75°; iv: DBU, Mel, DMF; v: LDA, BocN-NBoc; vi: TFA, CH2CI2; vii: CbzCl, Na₂CCbaq., dioxano; viii: resolução enzimática (p. ex., lipase); depois DBU, Mel, DMF; ix: NaH, R⁴-X, THF; x: Pd/C, H₂, EtOH; xi: L1OHXIH2O, MeOH, H₂O; xii: FmocOSu, Na₂CO3aq., dioxano

A20: Ver D. Hagiwara, H. Miyake, N. Igari, M. Karino, Y.

Maeda, J. Med. Chem. 1994, 37, 2090-2099 (R'= H; R⁹= OH); Y. Arakawa, M. Yasuda, M. Ohnishi, S. Yoshifuji, Chem. Pharm. Bull. 1997, 45, 255-259 (R'= H; R⁹= COOH); P. J. Murray, I. D. Starkey, Tetrahedron Lett. 1996, 37, 1875-1878 (R'= H; R⁹= (CH₂)₂NHCOCH₂Ph); K. Clinch, A. Vasella, R.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 91/186

Schauer, Tetrahedron Lett. 1987, 28, 6425-6428 (R^J= H; R⁹= NHAc).

A21: Ver A. Golubev, N. Sewald, K. Burger, Tetrahedron

Lett. 1995, 36, 2037-2040; F. Machetti, F. M. Cordero, F. DeSario, A. Guama, A. Brandi, Tetrahedron Lett. 1996, 37, 4205-4208; P. L. Omstein, D.

D. Schoepp, Μ. B. Amold, J. D. Leander, D. Lodge, J. Med. Chem. 1991, 34, 90-97 ; R^R^H); P. D. Leeson, B. J. Wilbams, R. Baker, T. Ludduwahetty, K. W. Moore, M. Rowley, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1990, 1578-1580; D. I. C. Scopes, N. F. Hayes, D. E. Bays, D. Belton, J. Brain, J. Med. Chem.

1992, 35, 490-501; H. Kessler, M. Kuehn, T. Lõschner, Liebígs Ann. Chem.

1986, 1-20 (R^RMl); C. Herdeis, W. Engel, Arch. Pharm. 1992, 7, 419-424 (R^R^Bn); C. Herdeis, W. Engel, Arch. Pharm. 1992, 411-418 (R^COOMe; R⁶=H); C. Herdeis, W. Engel, Arch. Pharm. 1992, 419-424 (R^COOMe; R⁶=Bn).

A22: Ver P. D. Leeson, B. J. Wilbams, R. Baker, T. 15 Ladduwahetty, K. W. Moore, M. Rowley, J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1990,

1578-1580 (R^J= H; R¹⁰= NHOBn).

A23: Ver Beyerman, Boekee, Recl. Trav. Chim. Pays-Bas

1959, 78, 648-653; D. R. Adams, P. D . Bailey, I. D. Colber, J. D. Heffeman, S. Stokes J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1996, 349-350; J. E. Baldwin, R. M.

Adbngton, C. Godfrey, D. W. Collins, J. G. Vaughan, J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1993, 1434-1435 (R^R^H); C. Herdeis, W. Engel, Arch. Pharm.

1993, 297-302 (R^COOMe; R⁶=H).

A24: Ver Plieninger, Leonhãuser, Chem. Ber. 1959, 92, 15791584; D. W. Knight, N. Lewis, A. C. Share, D. Haigh, J. Chem. Soc. Perkin

Trans. 1 1998, 22, 3673-3684; J. Drummond, G. Johnson, D. G. Nickell, D. F. Ortwine, R. F. Bruns, B. Welbaum, J. Med. Chem. 1989, 32, 2116-2128; M. P. Moyer, P. L. Feldman, H. Rapoport, J. Org. Chem. 1985, 50, 5223-5230 (R^R^H); McElvain, Laughton, J. Am. Chem. Soc. 1951, 73, 448-451 (R'=H; R⁶=Ph); McElvain, Laughton, J. Am. Chem. Soc. 1951, 73, 448-451

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 92/186 (R¹ =Ph; R⁶=H);

A25: Ver L.-Y. Hu, T. R. Ryder, S. S. Nikam, E. Millerman,

B. G. Szoke, M. F. Rafferty, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9, 1121-1126; W. C. Lumma, R. D. Hartman, W. S. Saari, E. L. Engelhardt, V. J. Lotti, C.

A. Stone, J. Med. Chem. 1981, 24, 93-101; N. Hosten, M. J. O. Antenuis, Bull. Soc. Chim. Belg. 1988, 97, 48-50; C. F. Bigge, S. J. Hays, P. M. Novak,

J. T. Drummond, G. Johnson, T. P. Bobovski, Tetrahedron Lett. 1989, 30, 5193-5191; B. Aebischer, P. Frey, H.-P. Haerter, P. L. Herrbng, W. Müller, Helv. Chim. Acta 1989, 72, 1043-1051; W. J. Hoeckstra, B. E. Maryanoff, B.

P. Damiano, P. Andrade-Gordon, J. H. Coen, M. J. Constanzo, B. J. Haertlein,

L. R. Hecker, B. L. Hulshizer, J. A. Kauffman, P. Keane, J. Med. Chem. 1999, 42, 5254-5265 (R^H; Rⁿ=H); B. D. Dorsey, R. B. Levin, S. L. McDaniel, J. P. Vacca, J. P. Guare, J. Med. Chem. 1994, 37, 3443-3451; M. Cheng, B. De, S. Pikul, N. G. Almstaed, M. G. Natchus, Μ. V. Anastasio, S.

J. McPhail, C. J. Snider, Y. O. Taiwo, L. Chen, C. M. Dunaway, J. Med. Chem. 2000, 43, 369-380; R. Kuwano, Y. Ito, J. Org. Chem. 1999, 64, 12321237 (R^J=H; Rⁿ=COOtBu); J. Kitchin, R. C. Bethell, N. Cammack, S. Dolan, D. N. Evans, J. Med. Chem. 1994, 37, 3707-3716 (R^H; Rⁿ=COOPh); C. F. Bigge, S. J. Hays, P. M. Novak, J. T. Drummond, G. Johnson, T. P. Bobovski,

J. Med. Chem. 1990, 33, 2916-2924 (R¹=H;R¹¹=COOtBu; (CH₂)₃COOEt; (CH₂)₃PO(Me)OH; CH₂PO(OH)₂; (CH₂)₂PO(OEt)₂; (CH₂)₂PO(OH)₂).

Compostos de tipo A25 também podem ser preparadas de acordo com o Esquema 3:

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 93/186

Esquema 3

MeOOl

R¹

14 i: Reagente de Lawesson, tolueno, 80°; ii: DBU, Mel, DMF; iii: NaBFU ou NaCNBHs, MeOH; iv: Boc₂O, THF; v LiOHxlH₂O, MeOH, H₂O; vi: Pd/C, H₂, EtOH; vii: FmocOSu, Na₂CO3aq., dioxano

A26: Ver Koegel, J. Biol. Chem. 1953, 201, 547 (R‘=R¹²=H). A27: Ver G. Makara, G. R. Marshall, Tetrahedron Lett. 1997,

38, 5069-5072; R. N. Patel, A. Banerjee, R. L. Hanson, D. B. Brzozowski, L. 5 W. Parker, L. J. Szarka, Tetrahedron: Asymmetry 1999, 10, 31-36 (R'=H;

Rⁱ³=OH, OtBu); J. E. Johanson, B. D. Christie, H. Rapoport, J. Org. Chem. 1981, 46, 4914-4920; N. Moss, J.-S. Duceppe, J.-M- Ferland, J. Gauthier, J. Med. Chem. 1996, 39, 2178-2187 (R*= H ; R^l3= CONHMe); G. M. Makara, G. R. Marshall, Tetrahedron Lett. 1997, 38, 5069-5072 (R'=H; R¹³= SCH₂(410 MeO)C₆H₄).

A28: Ver A. Golubev, N. Sewald, K. Burger, Tetrahedron

Lett. 1995, 36, 2037-2040; P. L. Ornstein, D. D. Schoepp, Μ. B. Arnold, J. D. Leander, D. Lodge, J. Med. Chem. 1991, 34, 90-97 (R'=R⁶=H); P. D. Leeson, B. J. Williams, R. Baker, T. Ladduwahetty, K. W. Moore, M. Rowley, J.

Chem. Soc. Chem. Commun. 1990, 22, 1578-1580; C. Herdeis, W. Engel, Arch. Pharm. 1991, 324, 670 (R'=H ; R⁶=Me); C. Herdeis, W. Engel, Arch. Pharm. 1991, 324, 670 (R’=COOMe; R⁶=H, Me).

A29: Ver Kawase, Masami, Chem. Pharm. Bull. 1997, 45,

1248-1253; I. G. C. Coutts, J. A. Hadfield, P. R. Huddleston, J. Chem. Res. 20 Miniprint, 1987, 9, 2472-2500; I. G. C. Coutts, J. A. Hadfield, P. R.

Huddleston, J. Chem. Res. Miniprint, 1987, 9, 2472-2500; V. J. Hrubi, W. L. Cody, A. M. Castrucci, Μ. E. Hadley, Collect. Czech. Chem. Commun. 1988, 53, 2549-2573; R. T. Shuman, R. B. Rothenberger, C. S. Campbell, G. F.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 94/186

Smith, D. S. Gifford-Moore, P. D. Gesellchen, J. Med. Chem. 1993, 36, 314319; M. Kawase, Y. Okada, H. Miyamae, Heterocycles, 1998, 48, 285-294 (R^R^H); Kawase, Masami, Chem. Pharm. Bull. 1997, 45, 1248-1253 (R^H; R⁸=6,7-(MeO₂); D. F. Ortwine, T. C. Malone, C. F. Bigge, J. T.

Drummond, C. Humblet, J. Med. Chem. 1992, 35, 1345-1370 (R^H; R⁸=7CH2PO(OEt)2); E. J. Corey, D. Y. Gin, Tetrahedron Lett. 1996, 37, 71637166 (R'= CH2SCOOtBu); P. Dostert, M. Varasi, A. DellaTorre, C. Monti, V. Rizzo, Eur. J. Med. Chim. Ther. 1992, 27, 57-59 (R^J=Me; R⁸=6,7-(OH)2); Z. Czamocki, D. Suh, D. B. McLean, P. G. Hultin,W. A. Szarek, Can. J. Chem.

1992, 70, 1555-1561; B. Schõnenberger, A. Brossi, Helv. Chim. Acta 1986,

69, 1486-1497 (R'=Me; R⁸=6-OH; 7-MeO); Hahn, Stiel, Chem. Ber. 1936, 69, 2627; M. Chrzanowska, B. Schõnenberger, A. Brossi, J. L. FlippenAnderson, Helv. Chim. Acta 1987, 70, 1721-1731; T. Hudlicky, J. Org. Chem. 1981, 46, 1738-1741 (R'=Bn; R⁸=6,7-(OH)₂); A. I. Meyers, Μ. A. Gonzalez,

V. Struzka, A. Akahane, J. Guiles, J. S. Warmus, Tetrahedron Lett. 1991, 32, 5501-5504 (R¹=CH2(3,4-metilenodióxi)C6H3; R⁸=6,7-(OMe)2).

A30 e A31 podem ser preparados de acordo com os Esquemas

4e5,

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 95/186

Esquema 4

Br^

COOMe

PhOC COOMe '^Ν_( / COOMe COOtBu iv-vii

17

Br

MeOOC COOMe jj^^V^NCOPh r^b

COOH

i: NaH, N-benzoil glicinato de ter-butila, DMF; ii: NaH, Pd(0), tolueno; iii: TFA, CH2CI2; iv: ácido polifosfórico; v: NaOHaq., MeOH, 75°C; depois HClaq.; vi: DBU, Mel, DMF; vii: hexametildissilazida de lítio, THF, cloro trimetilsilano, -78°; depois R*-X; viii: resolução enzimática (p. ex., lipase); depois isolamento como éster de metila: DBU, Mel, DMF; ix: NaOHaq., MeOH, calor; x: FmocOSu, Na2COsaq., dioxano

Esquema 5

i: BOC2O, Na2CO.3aq., dioxano; ii: DBU, Mel, DMF; iii: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R²-X; iv: L1OHXIH2O, MeOH, H2O; v: TFA, CH2CI2; vi: FmocOSu, Na2CO.3aq., dioxano

A32 pode ser preparado de acordo com P. W. Schiller, G.

Weltrowska, T. M.-D. Nguyen, C. Lemieux, N. Nga, J. Med. Chem. 1991,34,

3125-3132; V. S. Goodfellow, Μ. V. Marathe, K. G. Kuhlman, T. D.

Fitzpatrick, D. Cuadrato, J. Med. Chem. 1996, 39, 1472-1484; G. Caliendo, F. Fiorino, P. Grieco, E. Perissutti, S. DeLuca, A. Guiliano, G. Santelli, D. Califano, B. Severino, V. Santagada, Farmacao, 1999, 54, 785-790; V. S. Goodfellow, Μ. V. Marathe, K. G. Kuhlman, T. D. Fitzpatrick, D. Cuadro, J.

Med. Chem. 1996, 39, 1472-1484 (R'= R⁸= H); D. Tourwe, E. Mannekens, N. T. Trang, P. Verheyden, H. Jaspers, J. Med. Chem. 1998, 41, 5167-5176; A.Pctição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 96/186

K. Szardenings, Μ. Gordeev, D. V. Patel, Tetrahedron Lett. 1996, 37, 36353638; W. Wiczk, K. Stachowiak, P. Skurski, L. Lankiewicz, A. Michniewicz, A. Roy, J. Am. Chem. Soc. 1996,118, 8300-8307; K. Verschuren, G. Toth, D. Tourwe, M. Lebl., G. van Binst, V. Hrubi, Synthesis 1992, 458-460 (R^J= H;

R⁸= 6-OH); P. L. Omstein, Μ. B. Amold, N. K. Augenstein, J. W. Paschal, J.

Org. Chem. 1991, 56, 4388-4392 (R^J= H; R⁸= 6-MeO); D. Ma, Z. Ma, A. P. Kozikowski, S. Pshenichkin, J. T. Wroblenski, Bioorg. Med. Lett. 1998, 8, 2447-2450 (R'= H; R⁸= 6-COOH); U. Schõllkopf, R. Hinrichs, R. Lonsky, Angew. Chem. 1987, 99, 137-138 (R^J= Me; R⁸=H); B. O. Kammermeier, U.

Lerch, C. Sommer, Synthesis 1992, 1157-1160 (R^J= COOMe; R⁸=H); T. Gees, W. B. Schweizer, D. Seebach, Helv. Chim. Acta 1993, 76, 2640-2653 (R^J= Me; R⁸=6,7-(MeO₂).

A33: Ver Hinton, Mann, J. Chem. Soc. 1959, 599-608.

A34: Ver G. P. Zecchini, Μ. P. Paradisi, J. Heterocycl. Chem.

1979, 16, 1589-1597; S. Cerrini, J. Chem. Soc. Perkin Trans.l, 1979, 10131019; P. L. Omstein, J. W. Paschal, P. D. Gesellchen, J. Org. Chem. 1990, 55, 738-741; G. M. Ksander, A. M. Yan, C. G. Diefenbacher, J. L. Stanton, J. Med. Chem. 1985, 28, 1606-1611; J. A. Robl, D. S. Karanewsky, Μ. M. Asaad, Tetrahedron Lett. 1995, 36, 1593-1596; S. Katayama, N. Ae, R.

Nagata, Tetrahedron: Asymmetry 1998, 9, 4295-4300 (R^R^H); K. Hino, Y. Nagai, H. Uno, Chem. Pharm. Bull. 1988, 36, 2386-2400 (R^J=Me; R⁸=H).

A35: Ver Beilstein Números de registro: 530775, 883013 (r!=r8=H).

A36: Ver R. W. Carling, P. D. Leeson, A. M. Moseley, R.

Baker, A. C. Foster, J. Med. Chem. 1992, 35, 1942-1953; S. Kano, T. Ebata, S. Shibuya, J. Chem. Soc. Perkin Trans.l, 1980, 2105-2111 (R^R^H); R. W. Carling, P. D. Leeson, A. M. Moseley, R. Baker, A. C. Foster, J. Med. Chem. 1992, 35, 1942-1953 (R^H; R⁸=5-C1; 7-C1).

A37: Ver Nagarajan, Indian J. Chem. 1973, 11, 112

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 97/186 (R’=CH₂COOMe; R⁸=H).

A38: Ver R. Pauly, N. A. Sasaki, P. Potire, Tetrahedron Lett.

1994, 35, 237-240; J. Podlech, D. Seebach, Liebigs Ann. Org. Bioorg. Chem.

1995, 7, 1217-1228; K. C. Nicolaou, G.-Q. Shi, K. Namoto, F. Bernal, J. 5 Chem. Soc. Chem. Commun. 1998, 1757-1758 (R'= H; R²= H).

A39: Ver Beilstein, Número de registro 782885,

A40: Ver F. P. J. C. Rutjes, N. M. Terhuis, H. Hiemstra, N. W.

Speckamp, Tetrahedron 1993, 49, 8605-8628 (R'= H; R³= Bn); compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o Esquema 6.

Esquema 6

Cbz^NHEloc

MeOOC' .COOMe

MeOOC' „COOMe

MeOOC P^bZ

-v^h

O

i: BocNHNH₂, NaCNBH₃, MeOH, AcOH; ii:CbzCl, Et₃N, CH2CI2; iii: TFA, CH2CI2; depois piridina, DMAP, calor; iv: resolução (p. ex., lípase); v: DBU, Mel, DMF; vi: reagente de Lawesson, tolueno, 75°C; vii: DBU, Mel, DMF; viii: NaBH₄ ou NaCNBFU, MeOH; ix: R³ introduzido por meio de aminação redutiva, alquilação ou acilação; x: L1OHXIH2O, MeOH, H2O; xi: Pd/C, H2, EtOH; xii: FmocOSu, Na2CO₃aq., dioxano

A41: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o Esquema 7,

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 98/186

Esquema 7

MeOOC

Cbz

i: resolução (p. ex., lipase); depois isolamento como metiléster: DBU, Mel, DMF; ii: NaH, R'-X, THF; LiOHxlH₂O, MeOH, H₂O; iv: Pd/C, H₂, EtOH; v: FmocOSu, Na₂CO₃aq„ dioxano

De A42 a A46: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o Esquema, de 8 a 12. Intermediário-chave 34 e síntese de aminoácido α envolvendo este bloco construtivo incluem: R. M. Williams, M.-N. Im, Tetrahedron Lett. 1988, 29, 6079-6082; R. M. Williams, M.-N. Im,

J. Am. Chem. SocA99\, 113, 9276-9286; J. F. Dellaria, B. D. Santarsiero, Tetrahedron Lett. 1988, 29, 6079-6082; J. F. Dellaria, B. D. Santarsiero, J.

Org. Chem. 1989, 54, 3916-3926; J. E. Baldwin, V. Lee, C. J. Schofield,

Synlett 1992, 249-251; J. E. Baldwin, V. Lee, C. J. Schofield, Heterocycles

1992,34, 903-906. Esquema 8

Ό

O O ii-v

VIII-X

Ph

,N

Boc O

Fmoc

R i: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R⁵-X; ii: HBr; iii: DBU, Mel, DMF; iv: DIBAL-H, THF; v: EtOH, p-toluenossulfonato de piridínio, peneiras mol. 4A; vi: hexametildissilazida de lítio, THF, -78°C, 33; vii: Pd/C, H₂, EtOH; depois DBU, Mel, DMF; depois TFA, CH₂C1₂; viii: HClaq., THF; depois Na(OAc)₃BH, AcOH, dicloroetano; ix: LiOHxlH₂O, MeOH, H₂O; x: FmocOSu, Na₂CO₃aq., dioxano

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 99/186

Esquema 9

OSÍPh₂tBu

O o

OSÍPh₂tBu R⁶

'0 O ll-V

Ph

Boc'

R i: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R⁶-X; ii: HBr; iii: DBU, Mel, DMF; iv: DIBAL-H, THF; v: EtOH, p-toluenossulfonato de piridínio, peneiras mol. 4A; vi: hexametildissilazida de lítio, THF, -78°C, 39; vii: Pd/C, H?, EtOH; depois DBU, Mel, DMF; depois TFA, CH2CI2; viii: HClaq., THF; depois Na(0Ac)₃BH, AcOH, dicloroetano; ix: clorocromiato de piridínio; x: L1OHXIH2O, MeOH, H2O; xi: TFA, CH2CI2; xii: FmocOSu, Na2CO₃aq., dioxano

Esquema 10

ν,νι l-IV

R¹⁶ OEt

OEt

Ph

Boc

NH_2lTFA

MeOOC*

R^1b OEt

OEt

i: HBr; ii: DBU, Mel, DMF; iii: DIBAL-H, THF; iv: EtOH, p-toluenossulfonato de piridínio, peneiras mol. 4A; v: hexametildissilazida de lítio, THF, -78°C, 43; vi: PD/C, H2, grupo EtOH; depois DBU, Mel, DMF; depois TFA, CH2CI2; vii: HClaq., depois Na(0Ac)₃BH, AcOH, dicloroetano; viii: LÍOHXIH2O, MeOH, H2O; ix: FmocOSu, Na2CO₃aq., dioxano.

Petição 87018006₃₃28, de 2₃/07/2018, pág. 100/186

Esquema 11

i: HBr; ii: DBU, Mel, DMF; iii: DIBAL-H, THF; iv: p-toluenossulfonato de piridínio, peneiras mol. 4A; v: hexametildissilazida de lítio, THF, -78°C, 47; vi: Pd/C, H2, EtOH; depois DBU, Mel, DMF; depois TFA, CH2CI2; vii: HClaq., THF; depois Na(0Ac)3BH, AcOH, dicloroetano; viii: BOC2O, Et3N, CH2CI2; ix: BU4NFXIOH2O, THF; x: clorocromiato de piridínio; xi: LiOHxlH₂O, MeOH, H2O; xii: TFA, CH2CI2; xiii: FmocOSu, Na2CC>3aq., dioxano

Esquema 12

Ph

JM

Boc'

R⁶

ν,νι

R⁶ OEt

OSiPh₂tBu

MeOOC

NH₂,TFA OSiPh₂tBu OEt

R⁶ OEt

VII-XIII

i: HBr; ii: DBU, Mel, DMF; iii: DIBAL-H, THF; iv: p-toluenossulfonato de piridínio, peneiras mol. 4A; v: hexametildissilazida de lítio, THF, -78°C, 51; vi: Pd/C, H2, EtOH; depois DBU, Mel, DMF; depois TFA, CH2CI2; vii: HClaq., THF; depois Na(0Ac)3BH, AcOH, dicloroetano; ; viii: BOC2O, Et3N, CH2CI2; ix: BU4NFXIOH2O, THF; x: clorocromiato de piridínio; xi: LÍOHXIH2O, MeOH, H2O; xii: TFA, CH2CI2; xiii: FmocOSu, Na2CO3aq., dioxano

A47: Ver P. Barraclough, R. D. Farrant, D. Kettle, S. Smith, J.

Chem. Res. Miniprint 1991, 11, 2876-2884 (R^R¹¹^, Bn, (CH₂)₂PO(OEt)₂).

A48: Ver A. Nouvet, M. Binard, F. Lamaty, J. Martinez, R. Lazaro, Tetrahedron 1999, 55, 4685-4698 (R'=R^I2=H).

A49: Ver Μ. Y. Kolleganov, I. G. Kolleganova, M. D.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 101/186

Mitrofanova, L. I. Martynenko, P. P. Nazarov, V. I. Spitsyn, Bull. Acad. Sei. USSR Div. Chem. Sei (Engl. Trans.) 1983, 32, 1293-1299; Izv. Akad. Nauk SSSR Ser. Khim. 1983, 6, 1293-1299 ; V. P. Vasilev, T. D. Orlova, S. F.

Ledenkov, J. Gen. Chem. USSR (Engl. Trans. 1989, 59, 1629-1634; Zh. 5 Obshch. Khim. 1989, 59, 1828-1833 (R'=H; R¹²= CH(COOH)CH₂COOH).

Compostos de tipo A49 também podem ser preparados de acordo com o Esquema 13.

Esquema 13 ^Me00C^-_C00BnBocNH R¹

i: NaH, CbzNH(CH₂)₂Br, THF; ii: Pd/C, H₂, EtOH; iii: EDC1, CH₂C1₂, diisopropiletilamina; iv: NaH, R^l2-X, THF; v: LiOHxlH₂O, MeOH, H₂O; vi: TFA, CH₂C1₂; vii: FmocOSu, Na₂CO.3aq., dioxano

A50 e A51: Compostos destes tipos podem ser preparados de acordo com os Esquemas 14 e 15.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 102/186

Esquema 14

60 i: HBr; ii: DBU, Mel, DMF; iii: DIBAL-H, THF; iv: p-toluenossulfonato de piridínio, peneiras mol. 4A; v: hexametildissilazol de lítio, THF, -78°C, 59; vi: Pd/C, H2, EtOH; depois DBU, MEI, DMF; depois TFA, CH2CI2; vii: HClaq., THF; depois Na(OAc).3BH, AcOH, dicloroetano; viii: LÍOHXIH2O, MeOH, H2O; ix: FmocOSu, Na2CC>3aq., dioxano

i: HBr; ii: DBU, Mel, DMF; iii: DIBAL-H, THF; iv: EtOH, p-toluenossulfonato de piridínio, peneiras mol. 4A; v: hexametildissilazida de lítio, THF, -78°C, 63; vi: Pd/C, H2, EtOH; depois DBU, vii: HClaq., THF; depois Na(OAc)3BH, AcOH, dicloroetano; viii: BOC2O, Et3N, CH2CI2; ix: BU4NFXIOH2O, THF; x: clorocromiato de piridínio; xi: LiOHxlHoO, MeOH, H2O; xii: TFA, CH2CI2; xiii: FmocOSu, Na2CO3aq., dioxano

A53: Ver P. Barraclough, R. D. Farrant, D. Kettle, S. Smith, J. Chem. Res. Miniprint 1991, 11, 2876-2884(R'=R=H ; R'=H ; R= Bn, (CH₂)₃PO(OH)₂); (CH₂)₃PO(Et)₂); J. I. Levin, J. F. DiJoseph, L. M. Killar; A.

Sung, T. Walter, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 2657-2662 (R'=H; R= 4CF₃OC₆H₄CO).

A 52 e A54: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com os Esquemas 16 e 17.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 103/186

Esquema 16

COOMe j

BocHN —( -►

COOMe O

\=N

vii

i: iBuMgCl, THF; ii: NaH, THF; iii: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R⁶-X; iv: NaOHaq., MeOH, 75°; depois HClaq., v: DBU, Mel, DMF; vi: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R*-X; vii: resolução (p. ex., lipase); depois DBU, Mel, DMF; viii: LiOHxlH^O, MeOH, H2O; ix: TFA, CH2CI2; x: FmocOSu, Na2CO3aq., dioxano

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 104/186

i: NaN₃, DMSO; ii: NaH, THF, CH₂=CHCOOBn; iii: Pd/C, H₂, EtOH; iv: EDC1, CH₂C1₂, diisopropiletilamina; v: NaH, R^l2-X, THF; vi: LiOHxlH₂O, MeOH, H₂O; vii: TFA, CH₂C1₂; viii: FmocOSu, Na₂CÜ3aq., dioxano

A55 e A56: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com os Esquemas 18 e 19.

Esquema 18

COOMe BOCHN—(-R¹

COOMe

BocNCOOMe

T^R'

COOMe

CbzHN

i: NaH, CbzNH(CH₂)₂Br, THF; ii: Pd/C, H₂, EtOH; depois tolueno, calor; iii: resolução (p. ex., lipase); iv: DBU, Mel, DMF; v: NaH, R¹²-X, THF; vi: LiOHxlH₂O, MeOH, H₂O; vii: TFA, CH₂C1₂; viii: FmocOSu, Na₂CO.aaq., dioxano

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 105/186

Esquema 19

Boc'

R¹⁷ Ο Ό ι-ιν

Ph

ν,νι

NH₂,TFA

MeOOC?'

SI f

OEt

87 i: HBr; ii: DBU, Mel, DMF; iii: DIBAL-H, THF; iv: EtOH, p-toluenossulfonato de piridínio, peneiras mol. 4A; v: hexametildissilazida de lítio, THF, -78°C, 86; vi: Pd/C, H₂, EtOH; depois EBU, Mel, DMF; depois TFA, CH2CI2; vii: HClaq., THF; depois Na(OAc)3BH, AcOH, dicloroetano; viii: L1OHXIH2O, MeOH, H2O; ix: FmocOSu, Na2CO3aq., dioxano

A57: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o Esquema 20.

Esquema 20

BocHN—(

COOMe

R^G

Br'

Br

i-v

VI-IX

i: NaOMe, MeOH; ii NaH, THF; iii: NaOHaq., MeOH, 75°C; depois HClaq., iv: DBU, Mel, DMF; v: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R'-X; vi: separação (p. ex., lipase); depois isolamento de metiléster: DBU, Mel, DMF; vii: LÍOHXIH2O, MeOH, H2O; viii: TFA, CH2CI2; ix: FmocOSu, Na2CO3aq., dioxano

A58: Ver C.-H. Lee, H. Kohn, J. Org. Chem. 1990, 55, 60986104 (R'=R⁸=H).

A59: pode ser preparada de acordo com o Esquema 21.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 106/186

Esquema 21

COOMe BocHN—(

COOMe

ii [

i: NaOMe, MeOH; ii NaH, THF; iii: NaOHaq., 75°C; depois HClaq.; iv: DBU, Mel, DMF; v: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R*-X; vi: separação (p. ex., lipase); depois isolamento de metiléster: DBU, Mel, DMF; vii: : L1OHXIH2O, MeOH, H2O; viii: TFA, CH2CI2; ix: FmocOSu, Na2CO₃aq., dioxano

A60: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o Esquema 22.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 107/186

Esquema 22

COOMe BOCHN—(

COOMe

NO-

i: NaH, DMSO; ii: NaOHaq., MeOH, 75°; depois HClaq.; iii: DBU, Mel, DMF; iv:NaOMe (2,2equiv.), R'-X; v: Raney-Ni, H2, EtOH; vi: CbzCl, Et3N, CH2CI2; vii: NaH, Br(CH2)2Br, THF; viii: resolução (p. ex., lipase); depois DBU, Mel, DMF; ix: Pd/C, H>, EtOH; x: NaH, R¹⁴-X, THF; xi: LiOHxlH₂O, MeOH, H₂O; xii: TFA, CH2CI2; xiii: FmocOSu, Na₂CO.3aq., dioxano

A61; Ver D. R. Armour, K. M. Morriss, M. S. Congreve, A. B. Hawcock, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1997, 7, 2037-2042 (R'=R¹²=H).

A62; Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo 5 com o Esquema 23.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 108/186

i: resolução (p. ex., lipase); depois DBU, Mel, DMF; ii: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R⁶-X; iii: LiOHxlI-bO, MeOH, H2O; iv: TFA, CH2CI2; v: FmocOSu, Na2CO.3aq., dioxano

A63: Ver S. E. Gibson, N. Guillo, R. J. Middleton, A.

Thuilliez, M. J. Tozer, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1997, 4, 447-456; S. E.

Gibson, N. Guillo, S. B. Kalindjan, M. J. Tozer, Bioorg. Med. Chem. Lett,. 5 1997, 7, 1289-1292 (R'=H; R⁸= H); Beilstein Registry Number: 459155 (R’=H; R^s= 4,5-MeO2).

A64: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o Esquema 24.

Esquema 24

i: NaH, DMSO; ii: PD/C, H2, EtOH; iii: iBuOCOCl, diisopropiletilamina, CH2CI2; depois diazometano; iv: HBr, CH₂C1₂; v: NaH, THF; vi: NaOHaq., MeOH, 75°; depois HClaq.; vii: DBU, Mel, DMF; viii: diisopropilamida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R*-X; ix: separação (p. ex., lipase); depois isolamento de metiléster: DBU, Mel, DMF; x: L1OHXIH2O, MeOH, H₂O; xi: TFA, CH2CI2; xii: FmocOSu, Na₂CO3aq., dioxano

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 109/186

Α65 e A 67: Compostos destes tipos podem ser preparados de acordo com os Esquemas 25 e 26.

Esquema 25

Boc Fmoc

MeOOC ι

M vi-viii

R⁸

118 119 i: NaH, DMSO, BrCH(R')COOMe; ii: LiOHxlHoO, MeOH, H₂; iii: ácido polifosfórico; iv: NaH, CICOOMe, THF; v: resolução (p. ex., lipase); depois isolamento como metiléster: DBU, Mel, DMF; vi: LiOHxlH₂O, MeOH, H₂; vii: TFA, CH₂C1₂; viii: FmocOSu, Na₂CO.3aq., dioxano

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 110/186

Esquema 26

120

Cbz

ii

OSiPh₂tBu

121 iii.iv

COOMe BocHN—(

COOMe

i: NaH, CH2CI2; ii: NaH, DMSO; iiÊBmNFxlOI-bO, THF; iv: cloreto de metanossulfonila, Et₃N, CH2CI2; depois NaH, THF; v: NaOHaq., MeOH, 75°; depois HClaq.; vi: DBU, Mel, DMF; vii: hexametildissilazida de lítio, THF, clorotrimetilsilano, -78°C; depois R'-X; viii: Pd/C, H₂, EtOH; ix: NaH, THF, R¹⁴-X; x: resolução (p. ex., lipase); depois isolamento de metiléster: DBU, Mel, DMF; xi: LÍOHXIH2O, MeOH, H₂O; xii: TFA, CH2CI2; xiii: FmocOSu, Na2CO₃aq., dioxano

A66: Ver G. L. Grunewald, L. H. Dahanukar, J. Heterocycl. Chem. 1994, 31, 1609-1618 (R’=H; R⁸=H, 8-NO₂; C(1)=O).

A68: Ver Griesbeck , H. Mauder, I. Müller, Chem. Ber. 1992, 5 77, 2467-2476; (R'=R⁸=H; C(1)=O).

A69: R. Kreher, W. Gerhardt, Liebigs Ann. Chem. 1981, 240247 (R'=R⁸=H).

Como explicado acima, blocos construtivos A70 pertencem à mesma classe de aminoácidos α substituídos em a, de cadeia aberta, A71 e

A72 à classe dos análogos de aminoácidos β correspondentes, e A73-A104 à classe dos análogos cíclicos de A70.

Blocos construtivos de tipos A70 e A73-A104 foram sintetizados por meio de vários métodos gerais diferentes: por meio de cicloadição [2+2] de cetenos com iminas (I. Ojima, H. J. C. Chen, X. Quin,

Tetrahedron Lett. 1988, 44, 5307-5318); por meio de reação assimétrica de aldol (Y. Ito, M. Sawamura, E. Shirakawa, K. Hayashikazi, T. Hayashi,

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 111/186

100

Tetrahedron Lett. 1988, 29, 235-238; por meio do método da oxazolidinona (J. S. Amato, L. M. Weinstock, S. Karady, US 4508921 A; M. GanderCoquoz, D. Seebach, Helv. Chim. Acta 1988, 71, 224-236; A. K. Beck, D. Seebach, Chimia 1988, 42, 142-144; D. Seebach, J. D. Aebi, M. GanderCoquoz, R. Naef, Helv. Chim. Acta 1987, 70, 1194-1216; D. Seebach, A. Fadei, Helv. Chim. Acta 1995, 68, 1243-1250; J. D. Aebi, D. Seebach, Helv. Chim. Acta 1985, 68, 1507-1518; A. Fadei, J. Salaun, Tetrahedron Lett. 1987, 28, 2243-2246); por meio de rearranjo de Schmidt de a-cetoésteres dissubstituídos em a,a (G. I. Georg, X. Guan, J. Kant, Tetrahedron Lett. 1988, 29, 403-406); síntese assimétrica via bases de Schiff derivadas de Ni(II) quiral (Y. N. Belokon, V. I. Bakhmutov, N. I. Chemoglazova, K. A. Kochetov, S. V. Vitt, N. S. Garbabnskaya, V. M. Bebkov, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1988, 305-312; M. Kolb, J. Barth, Liebigs Ann. Chem. 1983, 1668-1688); por meio da síntese de bis-lactim éter (U. Schõllkopf, R. Hinrichs, R. Lonsky, Angew. Chem. 1987, 99, 137-138); por meio de separação microbiana (K. Sakashita, I. Watanabe, JP 62/253397 A2) e por meio do método de hidantoína combinado com separação dos aminoácidos racêmicos com auxibares quirais derivados de amidas de L-fenilalanina (D. Obrecht, C. Spiegler, P. Schõnholzer, K. Müller, H. Heimgartner, F. Stierb, Helv. Chim. Acta 1992, 75, 1666-1696; D. Obrecht, U. Bohdal, J. Daly, C. Lehmann, P. Schõnholzer, K. Müller, Tetrahedron 1995, 57, 10883-10900; D. Obrecht, C. Lehmann, C. Ruffieux, P. Schõnholzer, K. Müller, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 1567-1587; D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580; D. Obrecht, H. Karajiannis, C. Lehmann, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 703-714; D. Obrecht, M. Altorfer, C. Lehmann, P. Schõnholzer, K. Müller, J. Org. Chem. 1996, 61, 4080-4086; D. Obrecht, C. Abrecht, M. Altorfer, U. Bohdal, A. Grieder, P. Pfyffer, K. Müller, Helv. Chim. Acta 1996, 79, 1315-1337). Este último método tem sido de 23/07/2018, pág. 112/186

101 particularmente útil na preparação de enanciômeros de blocos construtivos de tipo A70 (ver Esquema 27) e também de A73-A104 (ver Esquema 28) em forma pura. Esquema 27 d^{1 8} COOH

X ^H nh₂

131

or

H COOH V

R¹⁹nh₂

130

R¹⁹ H

132

Oj / 'N

Ph iv r¹⁸COOH

X

R¹%jh₂

128

R¹⁹ R¹⁸H-N /

H

127 =0

126

MeO

R¹⁹>0

8%v\ ^K NH

136b vii,viii

135

HO r¹⁹<>° p1 8\v\

NHF moc

137b

vii.viii vi

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 113/186

102 i: KCN, (NHO2CO3, EtOH/H2O; ii: Ba(OH)2, H2O; iii: NaOH, PhCOCl, dioxano; depois DCC, CH2CI2; iv: NaH, DMF, R¹⁸-X ou R¹⁹-X; v: ciclo-hexilamida de L-fenilalanina, Nmetilpirrolidona, 70°; vi: CH3SO3H, MeOH, 80°; vii: HClaq. 6N, dioxano, 100°; viii: Me3SiCl, DIEA, CH2CI2; depois FmocCl

O método ilustrado no Esquema 27 consiste no tratamento das cetonas apropriadas 126 com KCN, (NH₄)₂CO3 em uma mistura de etanol/água (E. Ware, J. Chem. Res. 1950, 46, 403; L. H. Goodson, I. L. Honigberg, J. J. Lehmann, W. H. Burton, J. Org. Chem. 1960, 25, 1920; S. N. Rastogi, J. S. Bindra, N. Anand, Ind. J. Chem. 1971, 1175) dando as hidantoínas correspondentes 127, que foram hidrobzadas com Ba(OH)₂ em água a 120-140° (R. Sarges, R. C. Schur, J. L. Belletire, M. J. Paterson, J Med. Chem. 1988, 31, 230) dando 128 com altos rendimentos. Acilação de Schotten-Baumann (Houben-Weyl, ’Methoden der Organischen Chemie’, Volume XI/2, Stickstoff-Verbindungen II und IIP, Georg Tieme Verlag, Stuttgart, pp 339) seguido de cicbzação com carbodiimida de N,N’-diciclohexila deu azlactonas 129 (D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580; D. Obrecht, C. Spiegler, P. Schõnholzer, K. Müller, H. Heimgartner, F. Stierb, Helv. Chim. Acta 1992, 75, 1666-1696). Altemativamente, também é possível preparar azlactonas 129 partindo de aminoácidos 130 e 131, acilação de Schotten-Baumann e cicbzação com Carbodiimida de Ν,Ν’-diciclo-hexila a azlactonas 132 e 133 e alquilação para dar 129 (D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580; D. Obrecht,

C. Spiegler, P. Schõnholzer, K. Müller, H. Heimgartner, F. Stierb, Helv. Chim. Acta 1992, 75, 1666-1696)(ver Esquema /). Tratamento de 129 com Ciclo-hexilamida de L-fenilalanina (D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580) deu peptídeos diaesteroméricos 134 e 135, que poderíam de 23/07/2018, pág. 114/186

103 ser separados vantajosamente por meio de cromatografia de flash ou cristalização. Tratamento de 134 e 135 com ácido metanossulfônico em metanol a 80° deu ésteres 136a e 136b que foram convertidos aos blocos construtivos finais protegidos com Fmoc 137a e 137b.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 115/186

104

Esquema 28

138 i; KCN, (NH₄)₂CO₃, EtOH/H₂O; ii: Ba(OH)₂, H₂O; iii: NaOHaq., PhCOCl, dioxano depois DCC, CH₂C1₂; iv: ciclo-hexilamida de fenilalanina, N-metilpirrolidona, 70°; v CH3SO3H, MeOH, 80°;vi: HClaq. 6N, dioxano, 100°; vii: Me₃SiCl, DIEA, CH2CI2; < FmocCl

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 116/186

105

De acordo com o método geral descrito no Esquema 28 (D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580; D. Obrecht, C. Spiegler, P. Schõnholzer, K. Müller, H. Heimgartner, F. Stierli, Helv. Chim. Acta 1992, 75, 1666-1696) A73-A104 podem ser preparados partindo das cetonas correspondentes 138, formação de hidantoína (139) (E. Ware, J. Chem. Res. 1950, 46, 403; L. H. Goodson, I. L. Honigberg, J. J. Lehmann, W. H. Burton, J. Org. Chem. 1960, 25, 1920; S. N. Rastogi, J. S. Bindra, N. Anand, Ind. J. Chem. 1971, 1175; D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580) e saponificação (Ba(OH)₂) para dar os aminoácidos racêmicos 140 que, após acilação de Schotten-Baumann e ciclização com N,N‘-diciclo-hexilcarbodiimida deu azlactonas 141. Reação com ciclohexilamida de L-fenilalanina (D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580) deu os peptídeos diastereoméricos 142 e 143, que foram separados por meio de cromatografia de flash ou cristalização. Tratamento de 142 e 143 com ácido metanossulfônico em metanol a 80° deu ésteres 144a e 144b que foram convertidos aos precursores de aminoácidos 145 a e 145b correspondentes adequadamente protegidos, prontos para síntese de peptídeos.

A71: Blocos construtivos de aminoácidos (ver fórmula 147) podem ser preparados de maneira vantajosa a partir dos succinatos dissubstituídos correspondentes 146 por meio de rearranjo de Curtius como mostrado no Esquema 29.

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106

Esquema 29

HOOC<\<^C q18^X r-,1

COOMe

CbzHN

COOMe

R R

146 r19

147 i: azida de difenilfosforila, tolueno, 80°; depois álcool de benzila

A71: Ver D. Seebach, S. Abele. T. Sifferlen, M. Haenggi, S.

Gruner, P. Seiler, Helv. Chim. Acta 1998, 81, 2218-2243 (R¹⁸ e R¹⁹ formam: (CH₂)₂-; -(CH₂)₃-; -(CH₂)₄-; -(CH₂)₅-; R²⁰=H); L. Ducrie, S. Reinelt, P. Seiler,

F. Diederich, D. R. Bolin, R. M. Campbell, G. L. Olson, Helv. Chim. Acta 1999, 82, 2432-2447; C. N. C. Drey, R. J. Ridge, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1981, 2468-2471; U. P. Dhokte, V. V. Khau, D. R. Hutchinson, M. J. Martinelli, Tetrahedron Lett. 1998, 39, 8771-8774 (R^I8=R^I9= Me; R²⁰=H); D. L. Varie, D. A. Hay, S. L. Andis, T. H. Corbett, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9, 369-374 (R¹⁸=R^I9= Et); Testa, J. Org. Chem. 1959, 24, 1928-1936 (R¹⁸= Et; R¹⁹= Ph); M. Haddad, C. Wakselman, J. Fluorine Chem. 1995 , 73, 57-60 (R^l8= Me; R¹⁹= CF3; R²⁰=H); T. Shono, K. Tsubata, N. Okinaga, J. Org. Chem. 1984, 49, 1056-1059 (R¹⁸=R¹⁹=R²⁰=Me); K. Ikeda, Y. Terão, M. Sekiya, Chem. Pharm. Bull. 1981, 29, 1747-1749 (R¹⁸e R¹⁹ formam: -(CH2)s; R²⁰=Me).

Blocos construtivos de aminoácidos de tipo A72 podem ser preparados de maneira vantajosa por meio de homologação de Amdt-Eistert Cl de compostos de tipo A70 de acordo com o Esquema 30.

Esquema 30

R¹⁸ R¹⁹ R¹⁸ R¹⁹

BocHN^cOOH BocHN'^V-^COOH

148 149 i: iBuOCOCl, diisopropiletilamina, CH2CI2; depois diazometano, hv ou Cu(I)

A72: Ver Y. V. Zeifman, J. Gen. Chem. USSR (Engl.Trans.)

1967, 37, 2355-2363 (R^l8=R^l9=CF₃); W. R. Schoen, J. M. Pisano, K. Pendergast, M. J. Wyvratt, Μ. H. Fisher, J. Med. Chem. 1994, 37, 897-906; S.

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107

Thaisrivongs, D. T. Pais, D. W. DuCharme, S. Tumer, G. L. DeGraaf, J. Med. Chem. 1991, 34, 655-642; T. K. Hansen, H. Thoegersen, B. S. Hansen, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1997, 7, 2951-2954; R. J. DeVita, R. Bochis, A. J. Frontier, A. Kotliar, Μ. H. Fisher, J. Med. Chem. 1998, 41, 1716-1728; D. Seebach, P. E. Ciceri, M. Overhand, B. Jaun, D. Rigo, Helv. Chim. Acta 1996, 79, 2043-2066; R. P. Nargund, K. H. Barakat, K. Cheng, W. Chan, B. R. Butler, A. A. Patchett, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996, 6, 1265-1270 (R¹⁸=R¹⁹=Me); E. Altmann, K. Nebel, M. Mutter, Helv. Chim. Acta 1991, 74, 800-806 (R¹⁸=Me; R¹⁹=COOMe).

A73: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com C. Mapelli, G. Tarocy, F. Schwitzer, C. H. Stammer, J. Org. Chem. 1989, 54, 145-149 (R²¹= 4-OHC6H4); F. Elrod, E. M. Holt, C. Mapelli, C. H. Stammer, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1988, 252-253 (R^2,= CH2COOMe); R. E. Mitchell, M. C. Pirrung, G. M. McGeehan, Phytochemistry 1987, 26, 2695 (R²¹= CH2OH), J. Bland, A. Batolussi, C. H. Stammer, J. Org. Chem. 1988, 53, 992-995 (R²¹= CH2NH₂). Derivados adicionais de A73 foram descritos por T. Wakamiya, Y. Oda, H. Fujita, T. Shiba, Tetrahedron Lett. 1986, 27, 2143-2134; U. Schõllkopf, B. Hupfeld, R. Gull, Angew. Chem. 1986, 98, 755-756; J. E. Baldwin, R. M. Adlington, B. J. Rawlings, Tetrahedron Lett. 1985, 26, 481-484; D. Kalvin, K. Ramalinggam, R. Woodard, Synth. Comm. 1985, 75, 267-272 e L. M. Izquierdo, I. Arenal, M. Bemabe, E. Alvarez, Tetrahedron Lett. 1985, 41, 215-220.

A74: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral descrito em Esquema 28 partindo das ciclobutanonas correspondentes.

A75 e A76: Compostos deste tipo podem ser preparados utilizando os métodos a seguir: P. Hughes, J. Clardy, J. Org. Chem. 1988, 53, 4793-4796; E. A. Bell, Μ. Y. Qureshi, R. J. Pryce, D. H. Janzen, P. Lemke, J. Clardy, J. Am. Chem. Soc. 1980, 102, 1409; Y. Gaoni, Tetrahedron Lett.

de 23/07/2018, pág. 119/186

108

1988, 29, 1591-1594; R. D. AUan, J. R. Haurahan, T. W. Hambley, G. A. R. Johnston, K. N. Mewett, A. D. Mitrovic, J. Med. Chem. 1990, 33, 2905-2915 (R²³= COOH); G. W. Fleet, J. A. Seijas, M. Vasquez Tato, Tetrahedron 1988, 44, 2077-2080 (R²³= CH₂OH).

A77: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com J. H. Burckhalter, G. Schmied, J. Pharm. Sei. 1966, 55, 443-445 (R²³= arila).

A78: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com J. C. Watkins, P. Kroosgard-Larsen, T. Honoré, TIPS 1990,11, 25-33; F. Trigalo, D. Brisson, R. Azerad, Tetrahedron Lett. 1988, 29, 6109 (R²⁴= COOH).

A79: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral descrito no Esquema 28 partindo das pirrobdino-3-onas correspondentes.

A80-A82: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com D. M. Walker, E. W. Logusch, Tetrahedron Lett. 1989, 30, 11811184; Y. Morimoto, K. Achiwa, Chem. Pharm. Bull. 1989, 35, 3845-3849; J. Yoshimura, S. Kondo, M. Ihara, H. Hashimoto, Carbohydrate Res. 1982, 99, 129-142.

A83: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Scheme 28 partindo das pirazobno-4-onas correspondentes.

A84: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com R. M. Pinder, B. H. Butcher, D. H. Buxton, D. J. Howells, J. Med. Chem. 1971, 14, 892-893; D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563580.

A85: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral descrito no Esquema 28 partindo das indano-l,3-dionas de 23/07/2018, pág. 120/186

109 correspondentes.

A86: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das indano-2-onas correspondentes.

A87: Compostos deste tipo e seus análogos podem ser preparados de acordo com C. Cativiela, M. D. Diaz de Villegas, A. Avenoza, J. M. Peregrina, Tetrahedron 1993, 47, 10987-10996; C. Cativiela, P. Lopez, J. A. Mayoral, Tetrahedron Assymmetry 1990, 1, 379; C. Cativiela, J. A. Mayoral, A. Avenoza, M. Gonzalez, Μ. A. Rey, Synthesis 1990, 1114,

A87 e A88: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com L. Munday, J. Chem. Soc. 1961, 4372; J. Ansell, D. Morgan, H. C. Price, Tetrahedron Lett. 1978, 47, 4615-4616.

A89: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das piperidino-3-onas correspondentes.

A90: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das tetraidrotiapiran-3onas correspondentes.

A91: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das tetraidropiran-3-onas correspondentes.

A92: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das piperidino-2,5dionas correspondentes.

A93: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das ciclo-hexanonas correspondentes.

A94: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com/. Org. Chem. 1990, 55, 4208.

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110

Α95: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com N. J. Lewis, R. L. Inloes, J. Hes, R. H. Matthews, G. Milo, J. Med. Chem. 1978, 27, 1070-1073.

A96: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das tetraidropiran-4-onas correspondentes.

A97: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das piperidino-2,4dionas correspondentes.

A98: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das 1-tetralonas correspondentes (D. Obrecht, C. Spiegler, P. Schõnholzer, K. Müller, H. Heimgartner, F. Stierli, Helv. Chim. Acta 1992, 75, 1666-1696).

A99: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo dos tetralina-l,4-diona mono-dietilacetais correspondentes.

A100: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das tetraidroquinolin-4onas correspondentes.

A101: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com o método geral desrito no Esquema 28 partindo das tetraidroquinolino2,4-dionas correspondentes.

A102: Compostos deste tipo podem ser preparados de acordo com K. Ishizumi, N. Ohashi, N. Tanno, J. Org. Chem. 1987, 52, 4477-4485;

D. Obrecht, U. Bohdal, C. Broger, D. Bur, C. Lehmann, R. Ruffieux, P. Schõnholzer, C. Spiegler, Helv. Chim. Acta 1995, 78, 563-580; D. Obrecht, C. Spiegler, P. Schõnholzer, K. Müller, H. Heimgartner, F. Stierli, Helv. Chim. Acta 1992, 75, 1666-1696; D. R. Haines, R. W. Fuller, S. Ahmad, D. T. Vistica, V. E. Marquez, J. Med. Chem. 1987, 30, 542-547; T. Decks, P. A.

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111

Crooks, R. D. Waigh, J. Pharm. Sei 1984, 73, 457-460; I. A. Blair, L. N. Mander, Austr. J. Chem. 1979,32, 1055-1065,

Sinopses relativas a blocos construtivos de tipos (b)-(p) são proporcionadas por: S. Hanessian, G. McNaughton-Smith, H.-G. Lombart, W. D. Lubell, Tetrahedron 1997, 38, 12789-12854; D. Obrecht, M. Altorfer, J. A. Robinson, Novel Peptide Mimetic Building Blocks and Strategies for Efficient Lead Finding, Adv. Med. Chem. 1999, Vol.4, 1-68

Templates de tipo (bl) podem ser preparados de acordo com os Esquemas 31 e 32.

Esquema 31

H hk

HOOC—/ J

150

ΌΗ l-lll

Boc hk

MeOOC-/ J

151

NPt iv

H hk

MeOOC—/ J ,CF₃CO₂H

NPt

152 i:

n:

in:

CO₂tBu

N.

ZHN MeOOC—

153

NPt

NHFmoc

Tratamento de 150 com um agente desidratante, como cloreto de tionila em metanol a uma temperatura elevada, vantajosamente em refluxo.

Introdução de Boc, p. ex. utilizando dicarbonato de di-ter-butila e trietilamina em um solvente adequado, como diclorometano; é possível introduzir de maneira análoga qualquer outro grupo Nprotetor adequado (não mostrado no Esquema de Reação 31). Reação de produto formado com ftalimida, diazodicarboxilato de dietila e trifenilfosfino em condições template de Mitsunobu (Mitsunobu, O.; Wada, M.; Sano, T. J. J. Am. Chem. Soc. 1972,

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94, 672) dando vantajosamente 151.

iv: Tratamento of 151 com ácido trifluoroacético em diclorometano.

v: 152 é acoplado em condições convencionais de acoplamento de peptídeo com Cbz-Asp(tBu)OH em DMF com reagentes, como HBTU e 1-hidroxibenztriazol (HOBt) com uma base, como diisopropiletilamina dando 153.

vi: Remoção do grupo Cbz, vantajosamente por meio de hidrogenação utibzando H₂ e um catalisador, como paládio sobre carvão, em solventes, como etanol, DMF e acetato de etila.

vii: O grupo ftabmida é clivado do produto resultante, vantajosamente por meio de tratamento com hidrazina em um solvente adequado, como etanol a uma temperatura elevada, vantajosamente a cerca de 80°C e cbvagem do produto formado com ácido trifluoroacético em CH₂C1₂.

viii: O aminoácido formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9-fluorenilmetoxicarbonila ou 9fbiorenilmetoxicarbonila succinimida utibzando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 154 como descrito por Bisang, C.; Weber, C.; Robinson, J. A. Helv. Chim. Acta 1996, 79, 1825-1842.

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113

Esquema 32

HOOC 'OH

I-III

150

VIII,IX

H hk

MeOOC-/ J tBuOOC^ NPt

156

I

i: Tratamento of 150 com um reagente desidratador, como cloreto de tionila em um solvente adequado, como metanol a uma temperatura elevada, vantajosamente em refluxo.

ii: O éster de aminoácido resultante é N-protegido utilizando-se condições convencionais para introduzir o grupo Cbz-group, p. ex. utilizando cloreto de benziloxicarbonila e trietilamina em um solvente adequado, como diclorometano.

iii: O metil éster de aminoácido protegido com Cbz é tratado com cloreto de trimetilsibla e uma base, como trietilamina em um solvente, como tetraidrofurano, resfriado, convenientemente a cerca de -78°C, seguido de reação com uma base forte, como diisopropilamida de lítio ou hexametil dissilazida de lítio e bromoacetato de ter-butila dando 155 como uma mistura de diaestereômeros como descrito por Bisang, C.; Jiang, L.; Freund,

E.; Emery, F.; Bauch, C.; Matile, H,; Pluschke, G.; Robinson, J.

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A. J. Am. Chem. Soc. 1998, 120, 7439-7449; Emery, F.; Bisang, C.; Favre, M.; Jiang, L.; Robinson, J. A. J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1996, 2155-2156.

iv: Reação de 155 com ftalimida, diazodicarboxilato de dietila e trifenilfosfino em condições template de Mitsunobu (Mitsunobu, O.; Wada, M.; Sano, T. J. J. Am. Chem. Soc. 1972, 94, 672).

v: O produto resultante é hidrogenado utilizando-se H₂ e um catalisador adequado, como paládio sobre carvão em um solvente, como acetato de etila, DMF ou etanol; subseqüentemente ocorre separação de diaestereômeros e dá 156. vi: 156 é acoplado com Fmoc-Asp(alila)OH em condições convencionais de acoplamento de peptídeo utilizando-se reagentes, como HATU, HOAt e a base, como diisopropiletilamina em um solvente adequado, como DMF. vii: Ciclização, vantajosamente com DBU em DMF dando 157, viii: O grupo ftalimida é clivado do produto resultante, vantajosamente por meio de hidrazinólise, p. ex. tratamento com metil hidrazina em um solvente adequado, como DMF.

ix: O produto formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9-fluorenilmetoxicarbonila ou 9fluorenilmetoxicarbonila succinimida utilizando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 158.

x: Remoção convencional de um grupo alil éster utilizando-se p. ex.

paládio(O) como catalisador dá 159.

Templates de tipo (b2) podem ser preparados de acordo com o

Esquema 33.

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Esquema 33

Vitamina C

xi.xii

i: 160 (obtenível da Vitamina C como descrito por Hubschwerlen,

C. (Synthesis 1986, 962) é treated com ftalimida, diazodicarboxilato de dietila e trifenilfosfino em condições template de Mitsunobu (Mitsunobu, O.; Wada, M.; Sano, T. J. J. Am. Chem. Soc. 1972, 94, 672).

ii: O grupo ftalimida é clivado do produto, vantajosamente por meio de hidrazinólise, p. ex. por meio de tratamento com metil hidrazina em um solvente adequado, como DMF.

iii: O grupo amino é protegido por meio de tratamento com um reagente benzoilador, como anidrido de ácido benzóico ou

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116 cloreto de benzoíla e uma base, como trietilamina ou 4-dimetilaminopiridina em um solvente adequado, como diclorometano ou DMF.

iv: Remoção do grupo 2,4-dimetoxibenzila, p. ex. com K2S2O8 e

Na₂HPO4 em acetonitrila aquosa a uma temperatura elevada, p.

ex. a cerca de 80°C.

v: Introdução de um grupo ter-butoxicarbonila utilizando-se, por exemplo, dicarbonato de di-ter-butiloxicarbonila, trietilamina e uma quantidade catalítica de 4-dimetilaminopiridina em um solvente adequado, como diclorometano.

vi: Reação com aqueous carbonato de sódio em tetraidrofuranoo seguido de acidificação.

vii: Esterificação do grupo ácido carboxílico, vantajosamente com diazometano em um solvente adequado, como éter de dietila dando 161.

viii Remoção do grupo Cbz, vantajosamente por meio de hidrogenação com H₂ na presença de um catabsador, como paládio sobre carvão em um solvente, como DMF dando 161 como descrito por Pfeifer, M.; Robinson, J. A. J. Chem. Soc.

Chem. Commun. 1998, 1977, ix: 161 é acoplado em condições convencionais de acoplamento de peptídeo com Cbz-Asp(tBu)OH em DMF com reagentes, como HBTU e 1-hidroxibenztriazol com uma base, como diisopropiletilamina dando 162 como descrito por Pfeifer, M.;

Robinson, J. A. J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1998, 1977.

x: Remoção do grupo Cbz, p. ex. por meio de hidrogenação utibzando H₂ e um catalisador, como paládio sobre carvão em condições convencionais, dá 163 como descrito por Pfeifer, M.; Robinson, J. A. J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1998, 1977,

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117 xi: Clivagem dos grupos ter-butil éster e ter-butiloxicarbonila, utilizando-se vantajosamente ácido trifluoroacético em diclorometano ou ácido clorídrico 4N em dioxano.

xii: O aminoácido livre intermediário formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9fluorenilmetoxicarbonila ou 9-fluorenilmetoxicarbonila succinimida utilizando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 164 como descrito por Pfeifer, M.; Robinson, J. A. J. Chem. Soc. Chem.

Commun. 1998, 1977.

Templates de tipo (cl) podem ser preparados de acordo com os Esquemas 34 a 37.

Esquema 34

168 170 i: 166 pode ser sintetizado de 165 de acordo com P. Waldmeier, “Solid-supported synthesis of highly substituted xanthenederived Templates for the synthesis of beta-tum stabilized cyclic

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118 peptide libraries”, PhD-thesis, University of Zurich, 1996. Para a clivagem o grupo ftalimida 166 é submetido vantajosamente a hidrazinólise, p. ex. por meio de tratamento com hidrato de hidrazina em um solvente adequado, como etanol a uma temperatura elevada, p. ex. a cerca de 80°C.

ii: A aminonitrilat intermediária é saponificada, vantajosamente em condições básicas, p. ex. com hidróxido de sódio aquoso em um solvente adequado, como etanol a uma temperatura elevada, vantajosamente em refluxo, dando 167.

iii: O aminoácido livre intermediário formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9fluorenilmetoxicarbonila ou 9-fluorenilmetoxicarbonila succinimida utilizando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 168 como descrito por P. Waldmeier, “Solid-supported synthesis of highly substituted xanthene-derived Templates for the synthesis of βtum stabilized cyclic peptide libraries”, PhD-thesis, University of Zurich, 1996.

iv: Bromatação regiosseletiva de 167 é realizada de preferência com bromo em ácido acético e diclorometano. De maneira semelhante R³⁷ = NO2 pode ser introduzido por meio de tratamento com HNO3 em ácido acético e R³⁷ = CH2-NPht por meio de tratamento com hidroximetil ftalimida em H2SO4, v: O grupo amino é vantajosamente protegido-com-Cbz com reagentes, como cloreto de benziloxicarbonila ou succinimida em um solvente adequado, como dioxano na presença de uma base, como hidróxido de sódio aquoso.

vi: O grupo ácido carboxílico é esterificado de preferência com

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DBU e iodeto de metila em DMF dando 169. vii: Introdução de alquila inferior, alquila inferior substituído e substituinte arila (R³⁷), vantajosamente por meio de acoplamentos de Stille (Stille, J.K. Angew. Chem.1986, 68, 504) e Suzuki (Oh-e, T.; Mijaura, N.; Suzuki, A. J. Org. Chem. 1993,

58, 2201) catabsados com paládio(O). É possível empregar qualquer outra funcionalização para brometos de arila para introdução de substituintes R^37, viii: Remoção do grupo Cbz, p. ex. por meio de hidrogenação utibzando H₂ e um catalisador, como paládio sobre carvão em um solvente adequado, como etanol, DMF e acetato de etila.

ix: Hidróbse do grupo éster, vantajosamente em condições ácidas, p.

ex. com 25 % de ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, de preferência a cerca de 100°C.

x: O aminoácido livre intermediário é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9-fhiorenilmetoxicarbonila ou 9fhiorenilmetoxicarbonila succinimida utibzando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 170.

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120

Esquema 35

i: A orto-bromatação dupla de 171 é realizada de preferência com excesso de bromo em acético e diclorometano. De maneira semelhante é possível introduzir R³⁷ = R³⁸ = NO2 por meio de tratamento com HNO3 em ácido acético e R³⁷ = R³⁸ = CH2-NPht por meio de tratamento com hidroximetil ftalimida em H2SO4, ii: O grupo amino é protegido, vantajosamente protegido com Cbz, com reagentes, como cloreto de benziloxicarbonila ou succinimida em um solvente adequado, como dioxano na presença de uma base, como hidróxido de sódio aquoso.

iii: O grupo ácido carboxílico é esterificado, de preferência com

DBU e iodeto de metila em DMF dando 172.

iv: Introdução de alquila inferior, alquila inferior substituído e substituintes arila (R³⁷ = R³⁸), p. ex. por meio de acoplamentos de Stille (Stille, J.K. Angew. Chem.1986, 68, 504) e Suzuki (Oh-e, T.; Mijaura, N.; Suzuki, A. J. Org. Chem. 1993, 58, 2201) catalisados com paládio(O). É possível empregar qualquer outra funcionalização conhecida para brometos de arila para a introdução de substituintes R³⁷ e R³⁸.

v: Remoção do grupo Cbz de 173, p. ex. por meio de hidrogenação utilizando H₂ e um catalisador, como paládio sobre carvão em

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121 um solvente adequado, como etanol, DMF ou acetato de etila. vi: Hidrólise do grupo éster, vantajosamente em condições ácidas, p.

ex. com 25 % ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, vantajosamente a cerca de 100°C.

vii: O aminoácido livre intermediário formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9fluorenilmetoxicarbonila ou 9-fluorenilmetoxicarbonila succinimida utilizando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 174.

Esquema 36

i: Clivagem dos grupos metóxi de 166, de preferência por meio de tratamento com um excesso de tribrometo de boro em um solvente adequado, como diclorometano.

ii: Hidrólise do grupo ciano em condições ácidas, de preferência

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122 com 25 % de ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, vantajosamente a cerca de 100°C.

iii: O ácido resultante é tratada com um agente desidratador, como cloreto de tionila em um solvente adequado, como dioxano dando 175.

iv: Tratamento de 175 com um agente triflador apropriado, de preferência anidrido de ácido trifluorometanossulfônico na presença de uma base, como 2,6-di-ter.-butil-piridina em um solvente adequado, como diclorometano.

v: Aquecimento do intermediário, vantajosamente em um solvente adequado, como metanol.

vi: Introdução de alquila inferior ou aril-alquila inferior (R³⁵) por meio de alquilação dando 177. É possível empregar qualquer outra funcionalização para grupos fenol para a introdução de substituintes R³⁵.

vii: Introdução de alquila inferior ou arila (R³⁶), vantajosamente por meio de acoplamento de Suzuki (Oh-e, T.; Mijaura, N.; Suzuki, A. J. Org. Chem. 1993, 58, 2201) catalisado com paládio(O) dando 178. É possível empregar qualquer outra funcionalização conhecida para brometos de arila para a introdução de substituintes R³⁶.

viii: Hidrólise do grupo éster em condições ácidas, vantajosamente com 25 % de ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, p. ex. a cerca de

100°C.

ix: Clivagem do grupo ftalimido, vantajosamente por meio de hidrazinólise, p. ex. com hidrato de hidrazina em um solvente adequado, como etanol.

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123 χ: Ο aminoácido livre intermediário formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9fluorenilmetoxicarbonila ou 9-fluorenilmetoxicarbonila succinimida utibzando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 179.

X

i: Bromatação de 175 utibzando-se reagentes, como bromo em uma mistura de ácido acético e diclorometano a temperaturas abrangendo de cerca de 0°C a cerca de a temperatura ambiente.

ii: Benzoilação do grupo hidróxi utilizando-se um agente acilador apropriado, como cloreto de benzoíla ou anidrido de ácido benzóico, uma base, como piridina ou trietilamina e um solvente adequado, como diclorometano dando 180.

iii: 180 é tratado com metanol e uma quantidade catalítica de um catalisador ácido, como ácido canforsulfônico sob aquecimento.

iv: Introdução de alquila inferior ou aril-alquila inferior (R³⁵) por

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124 meio de alquilação utilizando-se uma base, como hidreto de sódio ou ter-butóxido de potássio em um solvente, como tetraidrofurano, dimetoxietano ou DMF dá 181.

v: Introduz-se alquila inferior, alquila inferior substituído e substituintes arila (R³⁸), p. ex. por meio de acoplamentos de Stille (Stille, J.K. Angew. Chem.1986, 68, 504) e de Suzuki (Oh-e, T.; Mijaura, N.; Suzuki, A. J. Org. Chem. 1993, 58, 2201) catalisados com paládio(O). E possível empregar qualquer outra funcionabzação conhecida para brometos de arila para a introdução de substituintes R³⁸.

vi: Para a clivagem o grupo benzilóxi o intermediário é aquecido vantajosamente com cianeto de sódio adsorvido sobre óxido de alumínio e metanol.

vii: Tratamento com um reagente triflador apropriado, de preferência anidrido de ácido trifluorometanossulfônico, na presença de uma base, como 2,6-di-ter.-butil-piridina em um solvente adequado, como diclorometano.

viii: Introdução de alquila inferior e substituintes arila (R³⁶), p. ex. por meio de acoplamentos de Stille (Stille, J.K. Angew. Chem.\9&6,

68, 504) e Suzuki catalisados com paládio(O) (Oh-e, T.; Mijaura,

N.; Suzuki, A. J. Org. Chem. 1993, 58, 2201) dá 182. É possível empregar qualquer outra funcionabzação conhecida para brometos de arila para a introdução de substituintes R³⁶.

ix: Bromatação em condições convencionais, como utilizando-se bromo em ácido acético e diclorometano a temperaturas abrangendo de cerca de 0°C a cerca de a temperatura ambiente.

x: Introduz-se alquila inferior, alquila inferior substituído e substituintes arila (R³⁷), p. ex. por meio de acoplamentos de Stille (Stille, J.K. Angew. Chem.1986, 68, 504) e Suzuki (Oh-e, T.;

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125

Mijaura, N.; Suzuki, A. J. Org. Chem. 1993, 58, 2201) dando 184. É possível empregar qualquer outra funcionalização conhecida para brometos de arila para a introdução de substituintes R^37, xi: O grupo éster é hidrolisado em condições ácidas, vantajosamente com 25 % de ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, p. ex. a cerca de 100°C.

xii: O grupo ftabmido é cbvado, p. ex. por meio de hidrazinóbse, vantajosamente com hidrato de hidrazina em um solvente adequado, como etanol.

xiii: O aminoácido livre intermediário formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9fluorenilmetoxicarbonila ou 9-fluorenilmetoxicarbonila succinimida utibzando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 185.

Templates de tipo (c2) podem ser preparados como mostrado nos Esquemas 38 e 39.

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126

Esquema 38

i,ii

v-vii

V-VII

i: 3,7-Dimetoxifenotiazina 186 é preparada e convertida a 187 de acordo com Müller, K.; Obrecht, D.; Knierzinger, A.; Spiegler, C.; Bannwarth, W.; Trzeciak, A.; Englert, G.; Labhardt, A.; Schõnholzer, P. Perspectives in Medicinal Chemistry, Editor Testa, B.; Kyburz, E.; Fuhrer, W.; Giger, R., Weinheim, New York, Basel, Cambridge: Verlag Helvetica Chimica Acta, 1993, 513-531; Bannwarth, W.; Gerber, F.; Grieder, A.; Knierzinger, A.; Müller, K.; Obrecht. D.; Trzeciak, A. Can. Pat. Appl. CA2101599(131 páginas). O grupo benzila é clivado de 187 vantajosamente por meio de hidrogenação, p. ex. com H₂ e um catalisador, como paládio sobre carvão em um solvente adequado, como etanol, DMF ou acetato de etila.

ii: Introdução de alquila inferior (R⁴³) por meio de alquilação

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127 utilizando-se um agente alquilador apropriado (R⁴³-X'; X'= OTf, Br, I) e bases fortes, como amida de sódio em amônia líquida ou hidreto de sódio em tetraidrofurano, dioxano ou DMF na presença de um catabsador de transferência de fase, como TDA5 I. De uma maneira semelhante, é possível introduzir alquila inferior substituído (R⁴³); assim, por exemplo R⁴³ = CH2COOR⁵⁵e CH2CH2COOR⁵⁵ podem ser introduzidos por meio de tratamento com o 2-halo acético apropriado e, respectivamente, derivados de ácido 3-halo propiônico. Qualquer outra funcionabzação conhecida para diarilaminas pode ser empregada para a introdução de substituintes R⁴³.

iii: Clivagem dos grupos metóxi de 188, vantajosamente por meio de tratamento com um excesso de tribrometo de boro em um solvente adequado, como diclorometano a temperaturas abrangendo de cerca de -20°C a cerca de a temperatura ambiente.

iv: Para a introdução de alquila inferior, alquila inferior substituído ou substituintes de aril-alquila inferior (R³⁹ e R⁴⁰) o derivado de bis-fenol intermediário é reagido vantajosamente com um reagente da fórmula R³⁹-e R⁴⁰-X' (X' = OTf, Br, I) na presença de bases fortes, como hidreto de sódio em tetraidrofurano, dioxano ou DMF na presença de um catabsador de transferência de fase, como TDA-I. É possível empregar qualquer outra funcionabzação conhecida para grupos fenol para a introdução de substituintes R³⁹ e R⁴⁰.

v: O grupo ciano de 188 e, respectivamente, 189 é hidrobsado, vantajosamente em condições ácidas, p. ex. com 25 % de ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, p. ex. a cerca de 100°C.

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128 vi: O grupo ftalimida do intermediário é clivada, vantajosamente por meio de hidrazinólise, p. ex. com hidrato de hidrazina em um solvente adequado, como etanol.

vii: O grupo amino livre é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9-fluorenilmetoxicarbonila ou 9fluorenilmetoxicarbonila succinimida utibzando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 190 e, respectivamente, 191.

Esquema 39 i:

ii

O grupo ciano de 188 é hidrobsado, vantajosamente em condições ácidas, p. ex. com 25 % de ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, p. ex. a cerca de 100°C.

O grupo ftalimida do intermediário é cbvada, vantajosamente por meio de hidrazinóbse, p. ex. com hidrato de hidrazina em um

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129 solvente adequado, como etanol dando 192. iii: Orto-bromatação dupla de 192 é realizado de preferência com excesso de bromo em ácido acético e diclorometano. De maneira semelhante, é possível introduzir R⁴¹ = R⁴² = NO2 por meio de tratamento com HNO3 em ácido acético e R⁴¹ = R⁴² = CH2-NPht por meio de tratamento com hidroximetil ftalimida em H2SO4, É possível empregar qualquer outra funcionalização por meio de substituição aromática eletrofílica para a introdução de substituintes R⁴¹ e R⁴².

iv: O grupo amino é protegido, vantajosamente protegido com Cbz, com reagentes, como cloreto de benziloxicarbonila ou succinimida em um solvente adequado, como dioxano na presença de uma base, como hidróxido de sódio aquoso.

v: O grupo ácido carboxílico é esterificado, de preferência com

DBU e iodeto de metila em DMF dando 193.

vi: Bromatação regiosseletiva de 192 é realizado de preferência com bromo em ácido acético e diclorometano. De maneira semelhante, é possível introduzir R⁴¹ = NO2 por meio de tratamento com HNO3 em ácido acético e R⁴¹ = CH2-NPt por meio de tratamento com hidroximetil ftalimida em H2SO4, E possível empregar qualquer outra funcionalização por meio de substituição aromática eletrofílica para a introdução de substituintes R⁴¹.

vii: O grupo amino é vantajosamente Cbz-protected com reagentes, como cloreto de benziloxicarbonila ou succinimida em um solvente adequado, como dioxano na presença de uma base, como hidróxido de sódio aquoso.

viii: O grupo ácido carboxílico é esterificado, de preferência com

DBU e iodeto de metila em DMF dando 194,

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130 ix: Introdução de alquila inferior, alquila inferior substituído e substituintes arila (R⁴¹) para 194 e (R⁴¹ e R⁴²) para 193, vantajosamente por meio de acoplamentos de Stille (Stille, J.K. Angew. Chem.1986, 68, 504) e Suzuki (Oh-e, T.; Mijaura, N.;

Suzuki, A. J. Org. Chem. 1993, 58, 2201) catalisados com paládio(O). É possível empregar qualquer outra funcionalização conhecida para brometos de arila para a introdução de substituintes R⁴¹ e R⁴².

x: Remoção do grupo Cbz, p. ex. por meio de hidrogenação utibzando H₂ e um catalisador, como paládio sobre carvão em um solvente adequado, como etanol, DMF e acetato de etila. xi: Hidróbse do grupo éster, vantajosamente em condições ácidas, p.

ex. com 25 % ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, de preferência a cerca de 100°C.

xii: O aminoácido livre intermediário formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9fluorenilmetoxicarbonila ou 9-fluorenilmetoxicarbonila succinimida utibzando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 195 e 196.

Templates de tipo (c3) podem ser preparados como mostrado nos Esquemas 40 e 41.

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131

Esquema 40

Resorufina

i: 197 pode ser preparado a partir de resorufina comercial e convertido a 198 de acordo com Müller, K.; Obrecht, D.; Knierzinger, A.; Spiegler, C.; Bannwarth, W.; Trzeciak, A.; Englert, G.; Labhardt, A.; Schõnholzer, P. Perspectives in Medicinal Chemistry, Editor Testa, B.; Kyburz, E.; Fuhrer, W.; Giger, R., Weinheim, New York, Basel, Cambridge: Verlag Helvetica Chimica Acta, 1993, 513-531; Bannwarth, W.; Gerber, F.; Grieder, A.; Knierzinger, A.; Müller, K.; Obrecht. D.; Trzeciak, A. Can. Pat. Appl. CA2101599(131 páginas). Para separação, o grupo benzila 198 é vantajosamente hidrogenado p. ex. com H₂ e um catalisador, como paládio sobre carvão em um

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132 solvente adequado, como etanol, DMF ou acetato de etila. ii: Introdução de alquila inferior (R⁴³) por meio de alquilação, sendo que R⁴³-X' (X' = OTf, Br, I) utilizando-se bases fortes, como amida de sódio em amônia líquida ou hidreto de sódio em tetraidrofurano, dioxano ou DMF na presença de um catabsador de transferência de fase, como TDA-I dando 199. De maneira semelhante, é possível introduzir alquila inferior substituído (R⁴³); assim, por exemplo, R⁴³ = CH2COOR⁵⁵e CH2CH2COOR⁵⁵ podem ser introduzidos por meio de tratamento com os derivados apropriados de ácido 2-halo acético e, respectivamente, ácido 3-halo propiônico. É possível empregar qualquer outra funcionabzação de grupos diarilamino grupos conhecidos para a introdução de substituintes R⁴³.

iii: Clivagem dos grupos metóxi de 199, vantajosamente por meio de tratamento com excesso de tribrometo de boro em diclorometano a temperaturas abrangendo de cerca de -20° a cerca de a temperatura ambiente.

iv: O derivado de bis-fenol intermediário é reagido, de preferência, com R³⁹ e R⁴⁰-X' (X'= OTf, Br, I) na presença de bases fortes, como hidreto de sódio em tetraidrofurano, dioxano ou DMF na presença de um catabsador de transferência de fase, como TDAI. É possível empregar qualquer outra funcionalização para grupos fenol para a introdução de substituintes R³⁹ e R⁴⁰.

v: O grupo ciano de 199 e, respectivamente, 200 é hidrobsado em condições ácidas, p. ex. com 25 % de ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, vantajosamente a cerca de 100°C.

vi: O grupo ftabmida é cbvado, vantajosamente por meio de hidrazinóbse, p. ex. com hidrato de hidrazina em solvente

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133 adequado, como etanol.

vii: O grupo amino livre é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9-fluorenilmetoxicarbonila ou 9fluorenilmetoxicarbonila succinimida utilizando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 201 e, respectivamente, 202.

Esquema 41

ix-xii

R⁴³ i

vi-viii

ix-xii

i: O grupo ciano de 199 é hidrolisado, vantajosamente em condições ácidas, p. ex. com 25 % de ácido clorídrico aquoso em um solvente adequado, como dioxano a uma temperatura elevada, p. ex. a cerca de 100°C.

ii: O grupo ftalimida do intermediário é clivado, vantajosamente por meio de hidrazinólise, p. ex. com hidrato de hidrazina em um solvente adequado, como etanol dando 203.

iii: Orto-bromatação dupla of 203 é reabzada de preferência com

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134 excesso de bromo em ácido acético e diclorometano. De maneira semelhante, é possível introduzir R⁴¹ = R⁴² = NO2 por meio de tratamento com HNO3 em ácido acético e R⁴¹ = R⁴² = CH2-NPht por meio de tratamento com hidroximetil ftabmida em H2SO4. É possível empregar qualquer outra funcionabzação por meio de substituição aromática eletrofflica para a introdução de substituintes R⁴¹ e R⁴².

ν: O grupo ácido carboxíbco é esterificado, de preferência com

DBU e iodeto de metila em DMF dando 204.

vi: Bromatação regiosseletiva de 203 é reabzada de preferência com bromo em ácido acético e diclorometano. De maneira semelhante, é possível introduzir R⁴¹ = NO2 por meio de tratamento com HNO3 em ácido acético e R⁴¹=CH2-NPht por meio de tratamento com hidroximetil ftabmida em H2SO4, vii: O grupo amino é vantajosamente Cbz-protected com reagentes, como cloreto de benziloxicarbonila ou succinimida em um solvente adequado, como dioxano na presença de uma base, como hidróxido de sódio aquoso.

viii: O grupo ácido carboxíbco é esterificado, de preferência com

DBU e iodeto de metila in DMF dando 205.

ix: Introdução de alquila inferior, alquila inferior substituído e substituintes arila (R⁴¹) para 205 e (R⁴¹ e R⁴²) para 204, vantajosamente por meio de acoplamentos de Stille (Stille, J.K.

Angew. Chem.1986, 68, 504) e Suzuki (Oh-e, T.; Mijaura, N.;

Suzuki, A. J. Org. Chem. 1993, 58, 2201) catabsados com

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135 paládio(O). É possível empregar qualquer outra funcionalização conhecida para brometos de arila para a introdução de substituintes R⁴¹ e R⁴².

x: Remoção do grupo Cbz, p. ex. por meio de hidrogenação utilizando H₂ e um catalisador, como paládio sobre carvão em um solvente adequado, como etanol, DMF e acetato de etila.

xi: Hidrólise do grupo éster, vantajosamente em condições ácidas, p.

xii: O aminoácido livre intermediário formado é protegido vantajosamente com reagentes, como cloreto de 9fluorenilmetoxicarbonila ou 9-fluorenilmetoxicarbonila succinimida utilizando-se uma base, como carbonato de sódio ou trietilamina em um solvente adequado ou mistura de solventes, como dioxano e água, ou diclorometano dando 206 e 207.

Templates (d) podem ser preparados de acordo com D. Obrecht, U. Bohdal, C. Lehmann, P. Schõnholzer, K. Müller, Tetrahedron 1995, 57, 10883; D. Obrecht, C. Abrecht, M. Altorfer, U. Bohdal, A. Grieder, M. Kleber, P. Pfyffer, K. Müller, Helv. Chim. Acta 1996, 79, 1315-1337.

Templates (el) e (e2): Ver R. Mueller, L. Revesz, Tetrahedron Lett. 1994, 35, 4091; H.-G. Lubell, W. D. Lubell, J. Org. Chem. 1996, 61, 9437; L. Colombo, M. DiGiacomo, G. Papeo, O. Carugo, C. Scolastico, L. Manzoni, Tetrahedron Lett. 1994,35, 4031.

Templates (e3): Ver S. Hanessian, B. Ronan, A. Laoui,

Bioorg. Med. Chem. Lett. 1994, 4, 1397.

Templates (e4): Ver S. Hanessian, G. McNaughton-Smith,

Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996, 6, 1567.

Templates (f): Ver T.P. Curran, P. M. McEnay, Tetrahedron de 23/07/2018, pág. 147/186

136

Lett. 1995,36, 191-194.

Templates (g): Ver D. Gramberg, C. Weber, R. Beeb, J. Ingbs, C. Bruns, J. A. Robinson, Helv. Chem. Acta 1995, 78, 1588-1606; K. H. Kim,

J. P. Dumas, J. P. Germanas, J. Org. Chem. 1996, 61, 3138-3144.

Templates (h): Ver S. de Lombart, L. Blanchard, L. B. Stamford, D. M. Sperbeck, M. D. Grim, T. M. Jenson, H. R. Rodriguez, Tetrahedron Lett. 1994, 35, 7513-7516.

Templates (il): Ver J. A. Robl, D. S. Karanewski, Μ. M. Asaad, Tetrahedron Lett. 1995, 5, 773-758.

Templates (i2): Ver T. P. Burkholder, T.-B. Le, E. L. Giroux, G. A. Flynn, Bioorg. Med. Chem. Lett. 1992, 2, 579.

Templates (i3) e (i4): Ver L. M. Simpkins, J. A. Robl, Μ. P. Cimarusti, D. E. Ryono, J. Stevenson, C.-Q. Sun, E. W. Petrillo, D. S. Karanewski, Μ. M. Asaad, J. E. Bird, T. R. Schaeffer, N. C. Trippodo, Abstracts of papers, 210* Am. Chem. Soc Meeting, Chicago, 111, MEDI 064 (1995).

Templates (k): Ver D. Benlshai, A. R. McMurray, Tetrahedron 1993, 49, 6399.

Templates (1): Ver P. EX. von Roedem, H. Kessler, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1994, 33, 687-689.

Templates (m): Ver R. Gonzalez-Muniz, M. J. Dominguez, M. T. Garcia-Lopez, Tetrahedron 1992,48, 5191-5198.

Templates (n): Ver F. Esser, A. Carpy, H. Briem, H. Kõppen,

K. -H. Pook, Int. J. Pept. Res. 1995, 45, 540-546.

Templates (o): Ver N. De la Figuera, I. Alkorta, T. GarciaLopez, R. Herranz, R. Gonzalez-Muniz, Tetrahedron 1995, 57, 7841.

Templates (p): Ver U. Slomcynska, D. K. Chalmers, F.

Comille, M. L. Smythe, D. D. Benson, K. D. Moeller, G. R. Marshall, J. Org.

Chem. 1996, 61, 1198-1204.

de 23/07/2018, pág. 148/186

137

Medicamentos contendo um mimético de β-hairpin de fórmula geral I, um solvato ou um sal do mesmo também são objetos da presente invenção, como o é um processo para a manufatura de referidos medicamentos que compreende colocar um ou mais de referidos compostos e, onde desejado, uma ou mais substâncias adicionais terapeuticamente vabosas em uma forma de dosagem galênica.

Para o controle ou a prevenção de uma dada doença passível de tratamento com inibidores de protease, os miméticos de β-hairpin da invenção podem ser administrados singelamente, como misturas de diversos miméticos de β-hairpin, em combinação com outros inibidores de enzima protease ou em combinação com outros agentes farmaceuticamente ativos. Os miméticos de β-hairpin da invenção podem ser administrados per se ou como composições farmacêuticas. A dosagem da substância ativa, ou seja, um composto de fórmula I, pode variar dentro de amplos bmites e, evidentemente, será adequada às exigências individuais em cada caso particular. Em geral, no caso de administração oral ou parenteral, por exemplo, intravenosa ou subcutânea, uma dosagem de de cerca de 0,1-29 mg/kg, de preferência de cerca de 0,5-5 mg/kg, por dia deveria ser apropriada para adultos, embora o bmite superior indicado acima também possa ser incrementado ou reduzido, conforme indicado.

Composições farmacêuticas compreendendo miméticos de βhairpin da invenção podem ser fabricadas por meio de processos convencionais de misturação, dissolução, granulação, preparação de tabletes revestidos, levigação, emulsificação, encapsulação, aprisionamento ou bofibzação. É possível formular composições farmacêuticas de maneira convencional utibzando-se um ou mais carreadores, diluentes, excipientes ou auxiliares fisologicamente aceitáveis que facilitam o processamento dos miméticos de β-hairpin a preparações que podem ser usadas farmaceuticamente. A formulação apropriada depende do método de

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138 administração selecionado.

Formulações sistêmicas incluem aquelas projetadas para administração por meio de injeção, p. ex. injeção subcutânea, intravenosa, intramuscular, intratecal ou intraperitoneal, e também aquelas projetadas para administração transdérmica, transmucosal, oral ou pulmonar.

Para injeções, os miméticos de β-hairpin da invenção podem ser formulados em soluções aquosas, de preferência em tamponadores fisiologicametne compatíveis, como solução de Hink, solução de Ringer, ou tamponador de solução salina fisiológica. A solução pode conter agentes de formulação, como agentes de suspensão, estabilizadores e/ou dispersantes. Alternativamente, os miméticos de β-hairpin da invenção podem ser em forma de pó para combinação com um carreador adequado, p. ex. água estéril isenta de pirógenos, antes do uso.

Para administração transmucosal, utiliza-se na formulação penetrantes apropriados para que a barreira seja permeada, como se conhece na arte.

Para administração oral, os compostos podem ser formulados facilmente combinando-se os miméticos de β-hairpin ativos da invenção com carreadores farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos na arte. Referidos carreadores permitem que os miméticos de β-hairpin da invenção sejam formulados como tabletes, pílulas, drágeas, cápsulas, líquidos, géis, xaropes, caldas, suspensões etc., para ingestão oral de um paciente a ser tratado. Para formulações orais, como por exemplo, pós, cápsulas e tabletes, excipientes vantajosos incluem cargas, como açúcares, como lactose, sucrose, manitol e sorbitol; preparações de celulose, como amido de milho, amido de trigo, amido de arroz, amido de batata, geltaina, goma tragacanto, metil cellulose, hidroxipropilmetil celulose, carboximetilcelulose de sódio, e/ou polivinilpirrolidona (PVP); agentes de granulação; e agentes de ligação. Se desejado, é possível adicionar agentes desintegrantes, como

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139 polivinilpirrolidonas reticuladas, agar, ou ácido algínico ou um sal do mesmo, como alginato de sódio. Se desejado, formas de dosagem sólidas podem ser revestidas com açúcar ou revestidas entericamente utilizando-se técnicas convencionais.

Para preparações líquidas orais, como por exemplo, suspensões, elixires e soluções, carreadores, excipientes e diluentes adequados incluem água, glicóis, óleos, alcoóis, etc. Adicionalmente, é possível adicionar agentes flavorizantes, conservantes, agentes corantes e análogos.

Para administração bucal, a composição pode ter a forma de tabletes, losangos, etc. formulados como usualmente.

Para administração por meio de inalação, os miméticos de βhairpin da invenção são fornecidos de maneira vantajosa em forma de um spray de aerossol a partir de recipientes pressurizados ou de um nebubzador, com o uso de um propelente adequado, por exemplo, diclorodifluorometano, tricloroflurometano, dióxido de carbono ou outro gás adequado. No caso de um aerossol pressurizado, a unidade de dosagem pode ser determinada proporcionando-se uma válvula para fornecer uma quantidade dosada. É possível formular cápsulas e cartuchos de, p. ex., gelatina para uso em um inalador ou insuflador, contendo uma mistura de pó dos peptideomiméticos de β-hairpin da invenção e uma base em pó adequada, como lactose ou amido.

Os compostos também podem ser formulados em composições retais ou vaginais, como supositórios, em conjunto com bases adequadas para supositórios, como manteiga de cacau ou outros gbcerídeos.

Adicionalmente à formulação descrita previamente, os peptideomiméticos de β-hairpin da invenção também podem ser formulados como preparações de depósito. Referidas formulações de longa ação podem ser administradas por meio de implante (p. ex. subcutaneamente ou intramuscularmente) ou por meio de injeção intramuscular. Para a manufatur de 23/07/2018, pág. 151/186

140 de referidas preparações de depósito, os peptideomiméticos de β-haírpin podem ser formulados com materiais poliméricos ou hidrofóbicos adequados (p. ex. como uma emulsão em um óleo aceitável) ou resinas de troca de íons, ou como sais fracamente solúveis.

Adicionalmente, é possível empregar sistemas de fornecimento farmacêutico, como liposomas e emulsões bem conhecidas na arte. Também é possível empregar determinados solventes orgânicos, como sulfóxido de dimetila. Adicionalmente, os peptideomiméticos de β-hairpin podem ser fornecidos utilizando-se um sistema de liberação controlada, como matrizes semi-permeáveis de polímeros sólidos contendo o agente terapêutico. Diversos materiais de liberação controlada foram estabelecidos e são bem conhecidos por aqueles com prática na arte. Cápsulas de liberação controlada podem liberar, dependendo de sua natureza química, os compostos durante algumas semanas até durante mais de 100 dias. Dependendo da natureza química e da estabilidade biológica do agente terapêutico, é possível empregar estratégidas adicionais para estabilização da proteína.

Como os peptideomiméticos de β-hairpin da invenção podem conter radicais carregados, eles podem ser incluídos em qualquer uma das formulações descritas acima como bases livres ou como sais farmaceuticamente aceitáveis. Sais farmaceuticamente aceitáveis tendem a ser mais solúveis em solventes aquosos e em outros próticos do que as formas de base livre correspondentes.

Os peptideomiméticos de β-hairpin, ou composições dos mesmos, serão usados geralmente numa quantidade efetiva para se obter a resposta desejada. Compreende-se que a quantidade usada dependerá da aplicação particular.

Para uso no tratamento ou na prevenção de doenças passíveis de tratamento com inibidores de protease, os peptideomiméticos de β-hairpin da invenção, ou composições dos mesmos, são administrados ou aplicados de 23/07/2018, pág. 152/186

141 numa quantidade terapeuticamente efetiva. Por quantidade terapeuticamente efetiva compreende-se uma quantidade efetiva para melhorar os sintomas, ou melhorar, tratar ou prevenir doenças relacionadas com atividade de protease. A determinação de uma quantidade terapeuticamente efetiva encontra-se bem dentro da capacidade de alguém versado na arte, particularmente considerando-se a revelação detalhada aqui proporcionada.

Também é possível determinar dosagens iniciais a partir de dados in vivo, p. ex. em modelos animais, utilizando-se técnicas que são bem conhecidas na arte. Alguém com prática ordinária na arte poderá otimizar facilmente a administração a humanos com base em dados animais.

A quantidade de dosagem e o intervalo podem ser ajustados individualmente para proporcionar níveis plasmáticos de peptideomiméticos de β-hairpin da invenção que são suficientes para manter o efeito terapêutico. Dosagens usuais por paciente para administração por injeção variam de cerca de 0,l-5mg/kg/dia, de preferência de cerca de 0,5 a 1 mg/kg/dia. Níveis terapeuticamente efetivos no soro podem ser obtidos por meio de administração de doses múltiplas a cada dia.

A quantidade administrada de peptideomiméticos de β-hairpin dependerá, evidentemente, do sujeito que está sendo tratado, do peso do sujeito, da gravidade do sofrimento, da maneira de administração e da avabação do médico prescribente.

Normalmente, uma dose terapeuticamente efetiva dos peptideomiméticos de β-hairpin proporcionará benefício terapêutico sem causar toxicidade substancial.

A toxicidade dos peptideomiméticos de β-hairpin da invenção aqui descrita pode ser determinada por meio de procedimentos farmacêuticos convencionais em culturas de células ou animais experimentais, p. ex., determinando-se a LD50 (a dose letal para 50 % da população) ou a LD100 (a dose letal para 100 % da população). A relação de dosagem entre efeito tóxico de 23/07/2018, pág. 153/186

142 e terapêutico é o índice terapêutico. Prefere-se compostos que apresentam altos índices terapêuticos. Os dados obtidos destes ensaios de culturas de células e estudos animais podem ser usados na formulação de uma faixa de dosagem que não é tóxica para uso em humanos. A dosagem dos peptideomiméticos de β-hairpin da invenção situa-se, de preferência, dentro de uma faixa de concentrações circulantes que incluem a dose efetiva com pouca ou nenhuma toxicidade. A dosagem pode variar dentro da faixa dependendo da forma de dosagem empregada e da via de administração utilizada. A formulação exata, via de administração e dose podem ser selecionadas pelo médico individualmente considerando a condição do paciente (ver, p. ex. Fingí et al. 1975, em: The Pharmacological Basis of Therapeutics, capítulo 1, p. 1).

Compostos de fórmula I contendo um grupo tiol livre, i.e. compostos contendo como R²-R⁶, R⁸-R¹⁰, R¹², R¹³, R¹⁵-R¹⁹, R²¹-R²⁹, R³³ ou R⁶⁴ um radical da fórmula -(CH2)m(CHR⁶¹)sSR⁵⁶ em que R⁵⁶ é H, podem ser imobilizados sobre osciladores revestidos com ouro, e é possível determinar interações com ligandos por meio da assim-chamada análise com biossensor de ressonância de plasmon de superfície (SPR: surface plasmon resonance) (cf. M. Fivash, E.M. Towler e R.J. Fisher, Curr. Opin. in Biotechnol. 1998, 9, 97-101; e R.L. Rich e D.G. Myszka, Curr. Opin. in Biotechnol. 2000,11, 5461).

Os Exemplos a seguir ilustram a invenção de maneira mais detalhada, porém não se destinam a limitar de qualquer maneira sua abrangência. As abreviaturas a seguir são usadas nestes Exemplos:

HBTU: hexafluorofosfato de 1-benzotriazol-l-iltetrametilurônio (Knorr etal. Tetrahedron Lett. 1989, 30, 1927-1930)

HOBt: 1-hidroxibenzotriazol

DIEA: diisopropiletilamina de 23/07/2018, pág. 154/186

143

HOAT: 7-aza-l-hidroxibenzotriazol

HATU: hexafluorofosfato de O-(7-aza-benzotriazol-l-il)Ν,Ν,Ν’ ,N’ -tetrametilurônio

Carpino et al. Tetrahedron Lett. 1994,35, 2279-2281)

Exemplos

1. Síntese de peptídeos

Acoplamento do primeiro radical de aminoácido protegido

0,5 g de resina de cloreto de 2-clorotritila (Barlos et al. Tetrahedron Lett. 1989, 30, 3943-3946) (0,83 mMol/g, 0,415 mmol) foi carregada em um frasco seco. A resina foi suspensa em CH2CI2 (2,5 ml) e deixada intumescer à temperatura ambiente sob agitação constante. A resina foi tratada com 0,415 mMol (1 eq.) do primeiro radical de aminoácido adequadamente protegido (ver abaixo) e 284 1 (4 eq.) de diisopropiletilamina (DIEA) em CH₂C1₂ (2,5 ml), a mistura foi agitada a 25°C durante 15 minutos, despejada sobre resina pré-intumescida e agitada a 25°C durante 18 horas. A cor da resina modou para púrpura e a solução permaneceu amarelada. A resina foi lavada extensivamente (CH₂C1₂ /MeOHZDIEA: 17/2/1; CH₂C1₂, DMF; CH₂C1₂; Et₂O, 3 vezes cada) e secada em vácuo durante 6 horas.

Carregamento foi tipicamente de 0,6-0,7 mMol/g

Preparou-se as resinas pré-carregadas a seguir: resina de Fmoc-Ser(tBu)O-clorotritila e resina de Fmoc-AlaO-clorotritila.

1.1. Procedimento 1

A síntese foi reabzada utilizando-se um sintetizador Syropeptide (Multisyntech) utibzando de 24 a 96 vasos de reação. Em cada vaso colocou-se 60 mg (peso da resina antes do carregamento) da resina indicada acima. Os ciclos de reação a seguir foram programados e realizados:

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144

Etapa aminoácido

Reagente

CH2CI2, lavar e intumescimento (manual) DMF, lavar e intumescimento 40 % piperidina/DMF DMF, lavar equiv. aminoácido Fmoc/DMF + 5 eq. HBTU + 5 eq. HOBt + 5 eq. DIEA DMF, lavar

CH₂C1₂, lavar (ao final da síntese)

Etapas de 3 a 6 são repetidas para

Tempo 3x1 min. 1x5 min 1x5 min. 5x2 min.

x 120 min. 4x2 min. 3x2 min.

se adicionar cada

Clivagem do fragmento de peptídeo totalmente protegido Após completamento da síntese, a resina foi suspensa em 1 ml (0,39 mMol) de 1 % de TFA em CH₂C1₂ (v/v) durante 3 minutos, filtrada e o filtrado foi neutralizada com 1 ml (1,17 mMol, 3 eq.) de 20 % de DIEA em CH₂C1₂ (v/v). Este procedimento foi repetido duas vezes para assegurar o completamento da clivagem. O filtrado foi evaporado até à secura e o produto foi totalmente desprotegido para ser analisado por meio de HPLC de fase invertida (coluna Cig) para se monitorar a eficiência da síntese de peptídeo linear.

Ciclização do peptídeo linear

100 mg do peptídeo linear totalmente protegido foram dissolvidos em DMF (9 ml, cone, a 10 mg/ml). Em seguida, adicionou-se 41,8 mg (0,110 mMol, 3 eq.) de HATU, 14,9 mg (0,110 mMol, 3 eq.) de HOAt e 1 ml (0,584 mMol) de 10 % DIEA em DMF (v/v) e a mistura foi agitada com vórtex a 20°C durante 16 horas e subseqüentemente concentrada sob alto vácuo. O resíduo foi repartido entre CH₂C1₂ e H2O/CH3CN (90/10: v/v). A

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145 fase de CH2CI2 foi evaporada dando o peptídeo cíclico totalmente protegido.

Desproteção e purificação do peptídeo cíclico:

O peptídeo cíclico obtido foi dissolvido em 1 ml da mistura de cbvagem contendo 95 % de ácido trifluoroacético (TFA), 2,5 % água e 2,5 % triisopropilsilano (TIS). A mistura foi deixada descansar a 20°C durante 2,5 horas e depois concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma solução de H₂O/ácido acético (75/25: v/v) e a mistura extraída com éter de diisopropila.

A fase água foi secada em vácuo e, então, o produto foi purificado por meio de HPLC preparativa de fase invertida.

Em seguida, os produtos de liofibzação foram obtidos como um pó branco e anabsados por meio de ESI-MS. Os dados analíticos compreendendo tempos de retenção de HPLC e ESI-MS são mostrados na tabela 1.

Exemplos ex. 1-11 (n = 7) são mostrados na Tabela 1. Os peptídeos foram sintetizados partindo do aminoácido na posição P3 que foi acoplado à resina. Resinas de partida foram resina de Fmoc-Ser(tBu)Oclorotritila e resina de Fmoc-AlaO-clorotritila, que foram preparadas como descrito acima. Os peptídeos lineares foram sintetizados sobre suporte sóbdo de acordo com o procedimento 1 na seguinte seqüência: P4-P6-P7-^DPro-ProP1-P2-P3-resina, cbvados, ciclizados, desprotegidos e purificados como indicado.

Exemplos ex.12 e 13 (n = 7) também são mostrados na Tabela

1. Os peptídeos foram sintetizados partindo-se do aminoácido na posição P3 que foi enxertado na resina. A resina de partida foi resina de FmocSer(tBu)O-clorotritila, que foi preparada como descrito acima. Os peptídeos bneares foram sintetizados sobre suporte sóbdo de acordo com o procedimento 1 na seguinte seqüência: P4-P5-P6-P7-^DPro-(A8’-l)-Pl-P2-P3resina (ex 12) e, respectivamente, P4-P5-P6-P7- ^DPro-(A8”-l)-Pl-P2-P3de 23/07/2018, pág. 157/186

146 resin (ex. 13), clivados, ciclizados, desprotegidos e purificados como indicado.

Exemplo ex.14 (n = 7) também é mostrado na Tabela 1. O peptídeo foi sintetizado partindo-se do aminoácido na posição P3 que foi enxertado na resina. A resina de partida foi resina de Fmoc-Ser(tBu)Oclorotritila, que foi preparada como descrito acima. O peptídeo linear foi sintetizado sobre suporte sóbdo de acordo com o procedimento 1 na seguinte seqüência: P4-P5-P6-P7-(cl-l)-Pl-P2-P3-resina, cbvado, cicbzado, desprotegido e purificada como indicado.

Bloco construtivo (cl-1) é descrito abaixo.

Exemplo ex. 15 (n = 11) também é mostrado na Tabela 1. O peptídeo foi sintetizado partindo-se do aminoácido na posição P5 que foi acoplado à resina. A resina de partida foi resina de Fmoc-Ser(tBu)Oclorotritil, que foi preparada como descrito acima. O peptídeo bnear foi sintetizado sobre suporte sólido de acordo com o procedimento 3 (ver abaixo) na seguinte seqüência: P6-P7-P8-P9-P10-Pll-^DPro-Pro-Pl-P2-P3-P4-P5resina, clivado, cicbzado, oxidado, desprotegido e purificado como indicado.

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147

Tabela 1: Exemplos ex. 1-15

Ex.	Seq. ID	Sequência PI to P7 (ex. 1-14) PI to PI 1 (ex. 15)	Template	RT (min.)	Massa obtida [M+H]⁺
1	SEQIDNO:1	TKSIPPI	^DPro-^LPro	13,39^a)	931,63
2	SEQ ID NO:2	AKSIPPI	^DPro-^LPro	14,57^a)	901,8
3	SEQ ID NO:3	TASIPPI	^DPro-^LPro	14,28^a)	874,06
4	SEQ ID NO:4	TKAIPPI	^DPro-^LPro	13,97 ^a)	915,79
5	SEQ ID NO:5	TKSAPPI	^DPro-^LPro	12,71^a)	889,64
6	SEQ ID NO:6	TKSIAPI	^DPro-^LPro	14,40^a)	905,8
7	SEQ ID NO:7	TKSIPAI	^DPro-^LPro	13,44 ^a)	905,72
8	SEQ ID NO: 8	TKSIPPA	^DPro-^LPro	11,83 ^a)	889,7
9	SEQ ID NO:9	TYSIPPI	^DPro-^LPro	15,99 ^a)	966,7
10	SEQ ID NO: 10	TWSIPPI	^DPro-^LPro	17,32 ^a)	989,7
11	SEQ ID NO: 11	TFSIPPI	^DPro-^LPro	17,02 ^a)	950,7
12	SEQ ID NO: 12	TKSIPPI	^DPro-A8’-l	11,28^a)	1030,2
13	SEQ ID NO: 13	TKSIPPI	^DPro-A8”-l	12,55 ^a)	1044,3
14	SEQ ID NO: 14	TKSIPPI	(cl-1)	13,15»)	1076,5
15	SEQ ID NO: 15	RCTKSIPPICF 1 1	^DPro-^LPro	16,07^a)	1439,7

a) coluna Vydac C-18; gradiente: 5 % de MeCN/FhO + 0,1 % de CF3COOH durante 2 min.; depois 50 % de MeCN/ H₂O + 0,1 % de CF3COOH ao longo de 15 min. e 50-100 % de MeCN/FhO + 0,1 % CF3COOH ao longo de 4 min.

b) coluna Vydac C-18; gradiente: 5-60 % de MeCN/tFO + 0,1 % de CF3COOH ao longo de 20 min.

c) Nd: não determinado

1.2. Procedimento 2

Exemplo ex.13 também foi sintetizado utibzando-se o procedimento 2.

A síntese de peptídeo é realizada por meio do método de fase sóbda utibzando-se química Fmoc convencional em um sintetizador de peptídeo-ABI433A.

O primeiro aminoácido, Fmoc-Ser(tBu)-OH (0,68 g, 1,2 equiv.) é acoplado à resina de cloreto de 2-clorotritila (Barlos et al.

Tetrahedron Lett. 1989, 30, 3943-3946) (2 g, 0,83 mmol/g) na presença de DIEA (1,12 ml, 4 equiv.) em CH2CI2 (20 ml), com agitação com vórtex durante 3 h. à temperatura ambiente.

A resina é então lavada com 3 x CH2CÍ2/MeOH7DIEA (17:2:1), 3 x CH2CI2, 2 x DMF, 2 x CH2CI2, 2 x MeOH. Finalmente, a resina é secada em vácuo e o nível de substituição foi medido de acordo com o

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148 aumento do peso (~0,6 mmol/g).

No caso de se desejar utilizar agentes de acilação diferentes, a resina com o peptídeo linear sintetizado, Ile-Lys(Boc)-Pro-Pro-Ile-^DPro-212Thr(tBu)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-resina, de preferência, é dividida em partes iguais e colocada em vasos de reação diferentes para se realizar a reação de acilação em formato paralelo. As reações de acoplamento e desproteção nas etapas seguintes são monitoradas com o teste de Kaiser (Kaiser et al. Anal. Biochemistry 1970, 43, 595).

Remoção de grupo protetor Alloc:

A resina de peptídeo linear (100 mg por vaso de reação) é adiciona-se Pd(PPh3)₄ (15mg, 0,5 equiv.) sob argônio, seguido de CH2CI2 seco (10 ml) e fenilsilano (17 μΐ, 30 equiv.). A mistura de reação é deixada durante 1 hora no escuro, filtrada, e a resina é lavada duas vezes com CH2CI2, DMF, e CH₂C1₂.

Acilação do grupo 4-amino-prolina

Adiciona-se à resina o agente acilador correspondente (usualmente um ácido carboxílico (R⁶⁴’COOH, 3 equiv.), HBTU (22,3 mg, 4 equiv.), HOBt (8 mg, 4 equiv.) e DIEA (125 μΐ, 6 equiv.) em DMF (2 ml) durante 1,5-2 h. à temperatura ambiente. A resina é filtrada, lavada com 2 x DMF, 3 x CH₂C1₂, 2 x DMF.

Desproteção de grupo N^a-Fmoc:

Desproteção do grupo Fmoc é obtida tratando-se a resina com 20 % de piperidina em DMF durante 20 min. Subseqüentemente, a resina é filtrada e lavada três vezes com DMF, e CH₂C1₂, e duas vezes com DMF, e CH₂C1₂.

Clivagem de peptídeo da resina:

O peptídeo protegido de cadeia lateral bnear é cbvado da resina utibzando-se AcOH: TFE: CH₂C1₂ (2:2:6, v/v/v) durante 2 h. à temperatura ambiente. A resina é removida por filtração e lavada duas vezes de 23/07/2018, pág. 160/186

149 com uma mistura de AcOH:TFE:DCM e uma vez com CH2CI2. subseqüentemente, o filtrado é diluído com hexano (14 vezes em volume) e concentrado. A evaporação é repetidas duas vezes com hexano para remover traços de AcOH. O resíduo é secado em vácuo. O rendimento do peptídeo protegido bnear é geralmente de cerca de 40-50 mg.

Ciclização do peptídeo protegido linear:

A ciclização é reabzada em DMF a uma concentração de 5 mg/ml utibzando-se HATU (13,12 mg, 3 equiv.), HOAT (4,7 mg, 3 equiv.), DIEA (153 μΐ, 6 equiv.). A mistura de reação é agitada durante 16 h. à temperatura ambiente e o completamento da reação é monitorado por meio de HPLC. Após a evaporação do DMF, adicionou-se CH3CN/H2O (90/10, v/v) ao resíduo e isto foi extraído com DCM. A camada orgânica é lavada uma vez com água e evaporada à secura. Secada sob vácuo.

Clivagem de grupos protetores de cadeia lateral:

A desproteção final dos grupos protetores de cadeia lateral é reabzada tratando-se o peptídeo com TFA:triisopropilsilano:H2O (95:2,5:2,5, v/v/v) à temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, o TFA é evaporado e o resíduo triturado com éter frio.

Purificação:

Os peptídeos brutos assim obtidos são anabsados e purificados por meio de HPLC numa coluna preparativa VYDAC Cl8 utibzando-se 5-60 % de CH3CN/H2O+0,1 % de TFA em 30 min. como gradiente e uma taxa de fluxo de 10 ml/min. A pureza do peptídeo final é verificada por meio de HPLC analítica e por meio de ESI-MS.

1.3. Procedimento 3

Procedimento 3 descreve a síntese de miméticos de β-hairpin apresentando ligações dissulfeto de filamento β.

n = 11: Os peptídeos são sintetizados de acordo com o procedimento 1 partindo-se com o aminoácido na posição P5, acoplado à de 23/07/2018, pág. 161/186

150 resina. Os peptídeos lineares são sintetizados sobre suporte sóbdo de acordo com o procedimento 1 na seguinte seqüência: P6-P7-P8-P9-P10-Pll-^DProPro-Pl-P2-P3-P4-P5-resina, em que nas posições P2 e PIO FmocCys(Acm)OH ou Fmoc-Cys(Tr)OH são incorporados. Os peptídeos lineares são cbvados e cicbzados como descrito no procedimento 1.

Quando Cys(Acm) foi incorporado como bloco construtivo protegido, os miméticos de β-hairpin protegidos com cadeia lateral cicbzada são dissolvidos em metanol (0,5 ml) a que se adiciona por gotejamento uma solução de iodo em metanol (IN, 1,5 equiv.) à temperatura ambiente. A mistura de reação é agitada durante 4 horas à temperatura ambiente e o solvente evaporado. Subseqüentemente, o produto bruto é desprotegido e purificado como descrito no procedimento 1.

Quando Cys(Tr) foi incorporado como bloco construtivo de cisteína protegido, os peptideomiméticos de β-hairpin cícbcos protegidos, totalmente protegidos, são tratados com uma mistura contendo ácido trifluoroacético/tioanisol/fenol/H2O/etano-ditiol/triisopropilsilano (82,5:5:5:2,5:2,5:2,5) à temperatura ambiente durante 2 horas. O peptídeo reduzido é submetido a oxidação ao ar, com agitação durante 30 minutos em tamponador de sulfato de amônio e purificado como no procedimento 1.

2. Síntese dos Templates

2.1. As sínteses de (2S,4S)-4-[(alilóxi)carbonilamino]-l-[(9Hfhioren-9-il)metoxicarbonil]-prohna (212) e (2S,4R)-4[(ablóxi)carbonilamino] -1 - [(9H-fluoren-9-il)metóxi-carbonil]prohna (217) são mostradas nos Esquemas 42 e 43.

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151

Esquema 42 HQ

Ή

HO.

Oc 'N COOH H

III .VI n₃

208

V, VI

N COOMe Boc

N COOMe

AllocHN

VII-IX

AllocHN

211 212 i: SOCb, MeOH; Boc₂O, DMAP, Et₃N; iii: PNO2C6H4SO2CI, Et₃N; iv: NAN₃, DMF; v: SnCb, dioxano/FbO; vi: ClCOOCH2CH=CH₂, NaHCO₃aq., dioxano; vii: LiOHxlFkO, MeOH, H2O; vii: TFA, CH2CI2; ix: Fmoc-Osu, DIEA (2S,45)-4-[(Alilóxi)carbonilamino]-1 -[(9//-fluoren-9-il) metoxicarbonil]- prolina (212) i,ii: A uma solução de (25,4/?)-4-hidroxiprolina (30 g, 0,18 mol) em metanol abs.(300 ml) a 0°C, adicionou-se por gotejamento cloreto de tionila (38 ml, 2,5 eq., 0,45 mol). A solução foi aquecida ao refluxo e agitada durante 3 h. sob nitrogênio. Em seguida, solução foi concentrada por meio de evaporação rotativa e o éster precipitado mediante adição de éter de dietila. Após filtração o sólido branco foi lavado com éter de dietila, depois secado a HV: cloridrato de (2S,4/?)-4-hidroxiprolina-metiléster como um sólido branco (29.9 g, 90 %). %). TLC (CH₂Cl₂/MeOH/água 70:28:2): R_f 0,82, [cí]d²⁰= -24,5 (c = 1,01, MeOH). IR (KBr): 33785 (br.), 2950m, 2863w, 17455, 17005, 1590zn, 14505, 14155, 13605, 12155, 11855, 1080m, 700m. RMN Ή (300 MHz, MeOH-d4) 4,66-4,55 (m, 2H, H-C(4), H-C(2)); 3,85 (5, 3H, H3CO); 3,45 (dd, J= 12,2, 3,8, 1H, H-C(5)); 3,37-3,25 (m, 1H, H-C(5)); 2,44-2,34 (m, 1H, H-C(3)), 2,27-2,12 (m, 1H, H-C(3)). RMN ^l3C (75 MHz, MeOH-d4): 170,8 (5, COOMe); 70,8 (d, C(4)); 59,6 (d, C(2)); 55,2 (í, C(5)); 54,2 (q, Me);

38,7 (/, C(3)). CI-MS (NH₃): 146,1 ([M-C1]⁺).

(30 g, 0,17 mmol) do intermediário acima foram dissolvidos

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152 em CH2CI2 (300 ml), resfriados a 0°C e adicionou-se trietilamina (45 ml, 1,5 eq., 0,25 mol) por gotejamento. Em seguida adicionou-se dicarbonato de diter-butila (54,0 g, 1,5 eq., 0,25 mmol) em CH2CI2 (15 ml) e 4-N,Ndimetilaminopiridina (2,50 g, 0,1 eq., 17 mmol) e a solução foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Em seguida, a solução foi lavada com solução IN de ácido cítrico aquoso, sol aq. saturada de NaHCO₃, secada (Na2SC>4), evaporada e o resíduo secado sob alto vácuo: (25,4/?)-4Hidróxi-l-[(íer-butóxi)carbonil]prolina-metiléster (209) como um sóbdo branco (39,6 g, 78 %). TLC (CHzClz/MeOH 9:1): R_f 0,55, [a] ²D⁴ = -55,9 (c =

0,983, CHC1₃). IR (KBr): 3615w, 3440w (br.), 2980m, 2950m, 2880m, 17505,

1705^, I68O5, 1480ra, 14105, 13705, 1340ra, 12005, II6O5, 1130m, 1090m, 1055w, 960w, 915w, 895w, 855m, 715w. RMN Ή (300 MHz, CDC1₃): 4,474,37 (m, 2H, H-C(4), H-C(2)); 3,73 (5, 3H, H₃C-O)); 3,62 (dd, J= 11.8, 4,1, 1H, H-C(5)); 3,54-3,44 (m, 1H, H-C(5)); 2,32-2,25 (m, 1H, H-C(3)); 2,1015 2,03 (m, 1H, H-C(3)); 1.46+1.41 (25, 9H, íBu). RMN ¹³C (75 MHz, CDC1₃):

173,6 (5, COOMe); 154,3+153,9 (25, COO/Bu); 80,3 (5, C-íBu); 70,0+69,3 (2J, C(4)); 57,9+57,4 (2rf, C(2)); 54,6 (í, C(5)); 51.9 (q, Me); 39,0+38.4 (2í, C(3)); 28.1+27,6 (2q, íBu). CI-MS: 246.2 ([M+H]⁺); 190,1 ([M-íBu+H]⁺);

146.1 ([M-BOC+H]⁺).

iii,iv: (39 g, 0,16 mol) de 209 foram dissolvidos em

CH2CI2 (300 ml) seguido de adição de cloreto de 4-nitrobenzenossulfonila (46 g, 1,3 eq., 0,21 mol) e Et₃N (33 ml, 1,5 eq., 0,24 mol) a 0°C. Em seguida a solução foi agitada de um dia para o outro e trazida gradualmente à temperatura ambiente, lavada com ácido clorídrico IN, sol aq. saturada de

NaHCO₃ e secada (Na2SC>4). Os solventes foram evaporados e o produto bruto foi purificado por meio de filtração sobre gel de sílica com (2:1) hexano/AcOEt. O produto foi cristabzado de hexano/AcOEt: metiléster de (2S,45)-4- [(p-nitrobenzil)sulfonilóxi]-1 -[(íer-butóxi)carbonila]probna como cristais brancos (46,4 g, 65 %). TLC (hexano/AcOEt 1:1): Rf 0,78. Ponto de

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 164/186

153 fusão: 93-95°C. [α] ² D ⁰ = -32,3 ° (c = 0,907, CHC13). IR (KBr): 3110w, 3071w, 2971w, 17455, 16965, 16095, 15325, 1414s, 13655, 1348m, 1289m, 1190m, 1173w, 1122w, 1097w, 1043w, 954w, 912w, 755w, 578w. RMN Ή (600 MHz, CDC1₃): 8,42-8,34 (m, 2H, H-C(Nos)); 8,11-8,04 (m, 2H, HC(Nos)); 5,14 (5, 1H, H-C(4)); 4,39-4,28 (m, 1H, H-C(2)); 3,70-3,56 (m, 5H, H₂-C(5), H3C-O); 2,58-2,38 (m, 1H, H-C(3)); 2,25-2,11 (m, 1H, H-C(3)); 1.37+1,33 (25, 9H, íBu). RMN ¹³C (150 MHz, CDC1₃): 172,4+172,2 (25, COOMe); 153,6+153,0 (25, COOíBu); 150,8+142,0 (25, C(Nos)); 129,0+124,6 (2rf, C(Nos)); 80,4 (5, C-íBu); 80,8+79,9 (2J, C(4)); 57,1+56.9 (2J, C(2)); 52,2+51.7 (2í, C(5)); 52,3 (q, Me); 37,1+35,9 (2í, C(3)); 28,0 (q, íBu). ESI-MS (MeOH + NaI): 453,0 ([M+Na]⁺).

(38 g, 88 mmol) do intermediário acima foram dissolvidos em DMF (450 ml) depois aquecidos a 40°C quando se adicionou azida de sódio (34 g, 6 eq., 0,53 mol) e a solução foi agitada de um dia para o outro. DMF foi evaporado e o sólido suspenso em éter de dietila. A suspensão foi lavada com água e secada (Na₂SO4). O solvente foi evaporado e o produto secado sob alto vácuo: metiléster de (2S,45)-4-Azido-l-[(fór-butóxi)carbonila]prolina (210) óleo amarelo (21,1 g, 88 %). [a] ²D° = -36.9 (c = 0,965, CHC1₃). RMN Ή (600 MHz, CDCI3): 4,46-4,25 (2w, 1H, H-C(2)); 4,20-4,10 (m, 1H, HC(4)); 3,80-3,65 (m, 4H, H-C(5), H₃C-O); 3,53-3,41 (m, 1H, H-C(5)); 2,542,39 (m, 1H, H-C(3)); 2,21-2,12 (m, 1H, H-C(3)); 1,47+1,41 (25, 9H, íBu). RMN ¹³C (150 MHz, CDC13): 172,2+171,9 (25, COOMe); 153,9+153,4 (25, COOíBu); 80,5 (5, C-íBu); 59,2+58,2 (2rf, C(4)); 57,7+57,3 (2rf, C(2)); 52,4+52,2 (2q, Me); 51,2+50,7 (2í, C(5)); 36,0+35,0 (2í, C(3)); 28,3+28,2 (2q, íBu). EI-MS (70ev): 270,1 ([M]⁺); 227,1 ([M-CO2+H]⁺); 169,1 ([MBOC+H]⁺);.

v, vi: (21,1 g, 78 mmol) do intermediário acima foram dissolvidos em uma mistura (3:1) de dioxano/água (500 ml) e adicionou-se

SnCl₂ (59,2 g, 4 eq., 0,31 mol) a 0° e a solução foi agitada durante 30 min. e de 23/07/2018, pág. 165/186

154 trazida gradualmente à temperatura ambiente e agitada durante mais 5 h. Após ajustar o pH em 8 com NaHCCb sólido, adicionou-se cloroformiato de alila (41,5 ml, 5 eq., 0,39 mol) e a solução foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação foi evaporada e extraída com

AcOEt. A fase orgânica foi lavada com salmoura, secada (Na₂SO4), o solvente evaporado e o produto foi secado sob alto vácuo: metiléster de (25,45)-4- [(Alilóxi)carbonilamino] -1 - [(íer-butóxi)carbonila] prolina (211) como um óleo espesso transparente (22,3 g, 87 %). [a] ² d ⁰ = -30,2 ° (c = 1,25, CHC1₃). RMN Ή (300 MHz, CDC1₃): 5,98-5,77 (m, 1H, H10 C(P)(AUoc)); 5,32-5,12 (m, 2H, H₂-C(y)(AUoc); 4,59-4,46 (m, 2H, H₂C(a)(Alloc)); 4,40-4,16 (m, 2H, H-C(4), H-C(2)); 3,80-3,53 (m, 4H, H-C(5), H3C-O); 3,53-3,31 (m, 1H, H-C(5)); 2,54-2,17 (m, 1H, H-C(3)); 1,98-1,84 (m, 1H, H-C(3)); 1,41+1,37 (2s, 9H, íBu). ESI-MS (MeOH+ CH₂C1₂): 351,2 ([M+Na]⁺); 229,0 ([M-BOC+HR).

vii-ix: 22 g, 67 mmol) de 211 foram dissolvidos numa mistura (4:1) de metanol/água (100 ml) e adicionou-se LiOH (5 g, 2 eq., 134 mmol) à temperatura ambiente e a solução foi agitada durante 3,5 h. A mistura de reação foi evaporada e extraída com ácido clorídrico IV (100 ml) e AcOEt. O solvente foi removido e o sólido resultante foi dissolvido em 1:1

TFA/CH₂C1₂ (200ml) e agitado durante 2 h. Os solventes foram evaporados e o produto foi secado sob alto vácuo: (2S ,45)-4[(Alilóxi)carbonilamino]prolina como um óleo transparente (21 g, 96 %) RMN Ή (600 MHz, MeOH-cU): 5,98-5,85 (m, 1H, H-C(P)(Alloc)); 5,30 (dd, J=17,l, 1,5 Hz, 1H, H-C(Y)(AUoc)); 5,12 (d, J=10,7 Hz, 1H, H-C(y)(Alloc));

4,54 (d, J=4,4 Hz, 2H, H₂-C(a)(AUoc)); 4,44 (í, J=8,9 Hz, 1H, H-C(2)); 4,364,27 (m, 1H, H-C(4)); 3,58 (dd, 1=12,2, 7,3 Hz, 1H, H-C(5)); 3,34-3,32 (m,

1H, H-C(5)); 2,73 (ddd, J=13,6, 8,7, 7,2 Hz, 1H, H-C(3)); 2,23-2,15 (m, 1H,

H-C(3)). RMN ¹³C (150 MHz, MeOH-cU): 171,3 (s, COOMe); 158,3 (s,

COOAlil); 134,1 (d, C(P)(Alloc)); 118,0 (í, C(y)(Alloc)); 66,8 (í,

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C(a)(AUoc)); 59,7 (d, C(2)); 51,3 (d, C(4)); 51,1 (í, C(5)); 34,9 (í, C(3)). ESI-MS (DCM+MeOH): 237,0 ([M+Na]⁺); 215,0 ([M+H]⁺).

(15 g, 70 mmol) do intermediário acima e 9fluorenilmetoxicarbonilasuccinimid (28 g, 1,2 eq., 84 mmol) foram dissolvidos em DCM (700 ml) e adicionou-se DIEA (48 ml, 6 eq., 0,42 mol) e a solução foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. O solvente foi removido e o resíduo dissolvido em AcOEt e lavado com ácido clorídrico 1/V e secado (Na₂SO₄). Após evaporação, o produto bruto foi purificado por meio de filtração em gel de sflica com um gradient de (3:1) hexano/AcOEt para AcOEt. O solvente foi evaporado e o resíduo cristabzou de hexano a -20°C. O produto foi secado sob alto vácuo: (25,45)-4[(Ablóxi)carbonilamino] -1 - [(9H-fluoren-9-il)metoxicarboni 1J -probna (212) como um sóbdo branco (23,8 mg, 78 %) [a] ²d° = -27,0 (c = 1,1, CHCfi). IR (KBr): 3321w (br.), 3066w, 2953w, 17075, 1530ra, 145 Í5, 14225, 1354ra, 1250ra, 1205ra, 1173m, 1118m, 1033m, 977m, 936m, 759m, 739s, 621m, 597w, 57lw, 545s. RMN Ή (300 MHz, MeOH-d₄): 7,88-7,78 (m, 2H, HC(4‘)(Fmoc)); 7,71-7,61 (m, 2H, H-C(l‘)(Fmoc)); 7,49-7,29 (m, 4H, HC(3‘)(Fmoc), H-C(2‘)(Fmoc)); 6,08-5,68 (m, 1H, H-C(P)(Alloc)); 5,41-5,17 (m, 2H, H₂-C(y)(A11oc); 4,58 (5, 2H, H₂-C(a)(AUoc)); 4,74-4,17 (m, 5H, H₂C(10‘)(Fmoc), H-C(9‘)(Fmoc), H-C(4), H-C(2)); 3,94-3,73 (m, 1H, H-C(5)); 3,41-3,26 (m, 1H, H-C(5)); 2,74-2,54 (m, 1H, H-C(3)); 2,12-1,92 (m, 1H, HC(3)). ESI-MS (DCM+MeOH): 459,3 ([M+Na]⁺); 437,3 ([M+H]⁺).

de 23/07/2018, pág. 167/186

156

Esquema 43

HO.

HO,

HO.

Γν¹

N COOH H

208

213 vi.v

N COOMe

I

Boc

214 b

rv

N tOOMe Boc

AllocNH

AliOCHN vi, vii

VIII-X

N COOMe Boc

H

N 'COOH Fmoc

215 216 217 i: Ac₂O, AcOH; ii: SOC1₂, MeOH; iii: Boc₂O, DMAP, Et₃N; vi: PNO2C6H4SO2CI, Et₃N; v: NaN₃, DMF; vi: SnCb, dioxano/H2O; vii: C1COOCH₂CH=CH₂, NaHCO₃ aq., dioxano; viii: LiOH, MeOH, H₂O; ix: TFA, CH2CI2; x: Fmoc-Osu, DIEA

2.2. (2/?,4S)-4-[(Alilóxi)carbonilamino]-l-[(9//-fluoren-9-il) metoxicarbonil]-prolina (217) i: Uma solução de anidrido acético (1,02 kg, 5,3 eq., 10 mol) em ácido acético glacial (3 1) foi aquecida a 50°C e adicionou-se (25,4/?)-4hidroxiprolina (208) (247 g, 1,88 mol) de uma só vez. A solução foi refluxada durante 5,5 h., resfriada à temperatura ambiente e o solvente foi removido sob pressão reduzida dando um óleo espesso. O óleo foi então dissolvido em ácido clorídrico 2N (3,5 1) e aquecido ao refluxo durante 4 h. e tratado com carvão e filtrado através de Celite. A medida que a solução evaporava, formavam-se agulhas brancas, que foram filtradas. O produto foi secado sob alto vácuo: cloridrato de (2/?,4Á)-4-hidroxiprolina (213) agulhas de cristais brancos (220,9 g, 70 %). Ponto de fusão: 117°C. [α] V = +19,3 ° (c = 1,04, água). IR (KBr): 32385 30175, 2569m, 17125, 1584m, 13765, 1332m, 12555, 1204ra, 1181w, 1091w, 1066w, 994w, 725m, 4995. RMN Ή (600 MHz, MeOH-d₄): 9,64 (5, 1H, H-N); 8,89 (5, 1H, H-N); 4,55-4,53 (m, 1H, H-C(4)); 4,51 (dd, J= 10,4, 3,6 Hz, 1H, H-C(2)); 3,44-3,35 (m, 2H, H₂-C(5)); 2,54-2,48 (m, 1H, H-C(3)); 2,40-2,34 (m, 1H, H-C(3)). RMN ¹³C (150 MHz, MeOH-d₄): 171,9 (5, COOH); 70,3 (d, C(4)); 59,6 (d, C(2)); 55,0 (í, C(5)); 38,5 (í, C(3)).

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EI-MS (NH₃): 132,1 ([M-C1]⁺). O filtrado foi ainda mais concentrado dando mais 59,5 g (19 %).

ii,iii: A uma solução de 213 (30 g, 0,18 mol) em metanol abs. (550 ml) adicionou-se por gotejamento, a 0°C, cloreto de tionila (38 ml,

2,5 eq., 0,45 mol). A solução foi refluxada durante 3 h. sob atmosfera de nitrogênio. A solução foi evaporada e o cloridrato de éster foi precipitado por meio de adição de éter de dietila. Após filtração, o sólido branco foi lavado com éter de dietila e secado sob alto vácuo: Cloridrato de (2R,4R)-4hidroxiprolina metiléster, sólido branco (29 g, 89 %).

[a] ² D ⁰ = +8,6 ° (c = 0,873, MeOH). IR (KBr): 33885 (br.), 29805 (br.), 17305, 1634ra, 15865, 13845, 12485, 10955, 10645, 1030m, 877m. RMN Ή (300 MHz, MeOH-d4): 4,59-4,44 (m, 2H, H-C(4), H-C(2)); 3,81 (5, 3H, H3CO); 3,37-3,31 (m, 2H, H₂-C(5)); 2,50-2,37 (m, 1H, H-C(3)), 2,37-2,27 (m, 1H, H-C(3)). RMN ¹³C (75 MHz, MeOH-cU): 170,9 (5, COOMe); 70,2 (d, C(4));

59,8 (d, C(2)); 55,1 (í, C(5));)); 54,1 (q, C(Me)); 38,4 (í, C(3)). EI-MS (NH₃):

146,1 ([M-C1]⁺).

(10 g, 55 mmol) do intermediário acima foram dissolvidos em CH₂C1₂ (100 ml), resfriados a 0°C e adicionou-se trietilamina (15,2 ml, 2 eq., 0,11 mol) por gotejamento. Em seguida, adicionou-se dicarbonato de di-terbutila (18,0 g, 1,5 eq., 83 mmol) em CH₂C1₂ (10 ml) e 4-N,Ndimetilaminopiridina (0,67 g, 0,1 eq., 5 mmol) e a solução foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A solução foi lavada com 1M de solução aq. de ácido cítrico e solução aquosa sat. de NaHCO₃, secada (Na₂SC>4), os solventes evaporados e secados sob alto vácuo: metiléster de (2R,4R)-4-hidróxi-l-[(fór-butóxi)-carbonila]prolina (214) como um sólido branco (13 g, 97 %). [a] ² D ⁰ = +13,0 ⁰ (c = 1,06, CHC13). IR (KBr): 34665 (br.), 29855, 2930m, 17295, 16795, 1424s, 1283m, 1262m, 11225, 10895, 969m, 770m. RMN Ή (300 MHz, CDC1₃): 4,43-4,26 (m, 2H, H-C(4), HC(2)); 3,80+3,79 (25, 3H, H₃C-O)); 3,76-3,47 (m, 2H, H₂-C(5)); 2,44-2,24 (m, de 23/07/2018, pág. 169/186

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1Η, H-C(3)); 2,16-2,03 (m, 1H, H-C(3)); 1,47+1,43 (2s, 9H, íBu). ESI-MS:

268,1 ([M+Na]⁺).

ίν,ν: 214 (12,2 g, 50 mmol) foi dissolvido em CH2CI2 (130 ml), resfriado a 0°C e adicionou-se cloreto de 4-nitrobenzenosulfonila (14,3 g, 1,3 eq., 65 mmol) e Et₃N (10,3 ml, 1,5 eq., 75 mmol). A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro e trazida gradualmente à temperatura ambiente. A solução foi lavada por ácido clorídrico 1/V e solução aquosa saturada de NaHCCb, secada (Na₂SO₄), os solventes foram evaporados e o produto bruto foi purificado por meio de filtração sobre gel de sílica com uma mistura (2:1) de hexano/AcOEt: 18 g (84 %). O produto foi então recristalizado de hexano/AcOEt: metiléster de (2R,4R)-4-[(pnitrobenzil)sulfonilóxi]-l-[(ter-butóxi)carbonila]prolina como cristais brancos (13,7 g, 64 %). TLC (hexano/AcOEt 1:1): Rf 0,76, Ponto de fusão: 113115°C. [α] V = +21,6 ⁰ (c = 0,924, CHC13). IR (KBr): 31125· (br.), 29815, 29555, 2882m, 17555, 16835, 15325, 14135, 13755, 13485, 11925, 9285, 9115, 759m, 7455, 6IO5. RMN Ή (600 MHz, CDC13): 8,45-8,35 (m, 2H, HC(Nos)); 8,15-8,06 (m, 2H, H-C(Nos)); 5,27-5,16 (m, 1H, H-C(4)); 4,53-4,32 (m, 1H, H-C(2)); 3,75-3,60 (m, 5H, H2-C(5), H3C-O); 2,59-2,35 (m, 2H, H2C(3)); 1,42+1,39 (25, 9H, íBu). RMN ¹³C (150 MHz, CDC13): 171,8 + 171,6 (5, COOMe); 153,8+153,4 (5, COOíBu); 151,0+142,6 (5, C(Nos)); 129,2+124,7 (d, C(Nos)); 81,0 (5, C-íBu); 80,8+79,7 (d, C(4)); 57,4+57,1 (d, C(2)); 52,6+52,5+52,3+51,8 (í, C(5), q, Me); 37,2+36,3 (í, C(3)); 28,5+28,3 (q, íBu). ESI-MS (DCM + MeOH + NaI): 453,2 ([M+Na]⁺).

(13 g, 30 mmol) do intermediário acima foram dissolvidos em DMF (200 ml), aquecidos a 40°C e adicionou-se azida de sódio (14,3 g, 6 eq., 180 mmol) e a mistura de reação foi agitada de um dia para o outro. A mistura de reação foi evaporada e o resíduo suspenso em éter de dietila. A suspensão foi filtrada, o filtrado foi lavado com água e a fase orgânica secada (Na₂SO₄). O solvente foi evaporada e o produto secado sob alto vácuo: metiléster de de 23/07/2018, pág. 170/186

159 (2R,45)-4-azido-l-[(íer-butóxi)carbonila]probna (215) como um óleo amarelo (8,15 g, 99 %). [a] ² D ⁰ = +42,8 ° (c = 1,05, CHC13). RMN Ή (300 MHz, CDCI3): 4,58-4,37 (m, 1H, H-C(2)); 4,34-4,23 (m, 1H, H-C(4)); 3,92-3,51 (m, 5H, H₂-C(5), H3C-O); 2,52-2,33 (rn, 1H, H-C(3)); 2,33-2,20 (m, 1H, H-C(3)); 1,56+1,51 (2s, 9H, íBu). CI-MS (NH₃): 288,2 ([Μ+ΝΗ4Γ); 271,1 ([M+H]⁺).

vi,vii: 215 (8 g, 30 mmol) foram dissolvidos numa mistura (3:1) de dioxano/água (400 ml), resfriados a 0°C e adicionou-se SnCl₂ (22,4 g, 4 eq., 120 mmol) e a mistura de reação foi agitada durante 30 min. a 0°, aquecida gradualmente à temperatura ambiente e agitada durante mais 5 h. Após ajustar o pH da solução em 8 com NaHCO₃ sóbdo, adicionou-se cloroformiato de alila (15,7 ml, 5 eq., 150 mmol). A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente, evaporada e extraída com AcOEt e a fase orgânica foi lavada com salmoura. Após secagem, a fase orgânica (Na₂SC>4), o solvente foi evaporado e o produto foi secado sob alto vácuo: metiléster de (2R, 45)-4-[(alilóxi)carbonilaminoj-l-[(íerbutóxi)carbonila] probna como um óleo espesso transparente (216) (8,7 g, 89 %). [a] ²d° = +41,9° (c = 0,928, CHC1₃). RMN Ή (300 MHz, CDC1₃): 5,985,87 (m, 1H, H-C(P)(AUoc)); 5,34-5,02 (m, 2H, H₂-C(y)(A11oc); 4,62-4,49 (m, 2H, H₂-C(a)(AUoc)); 4,41-4,23 (m, 2H, H-C(4), H-C(2)); 3,82-3,66 (m, 4H, H-C(5), H3C-O); 3,43-3,20 (m, ÍH, H-C(5)); 2,33-2,07 (m, 2H, H₂-C(3)); 1,43+1,39 (2s, 9H, íBu). CI-MS (NH₃): 329,1 ([M+H]⁺).

vii-x: 216 (8,4 g, 25 mmol) foram dissolvidos numa mistura (4:1) de metanol/água (100 ml) à temperatura ambiente, adiciona-se LiOH (2,2 g, 2 eq., 50 mmol) e a solução foi agitada de um dia para o outro. Metanol foi evaporado e o resíduo despejado sobre ácido clorídrico W (100 ml) e extraído com AcOEt. O solvente foi removido e o resíduo dissolvido numa mistura (1:1) de TFA/CH₂C1₂ (200 ml) e agitado durante 2 h. Os solventes foram evaporados e o produto secado sob alto vácuo: (2/?,4/?)-4[(Ablóxi)carbonilamino]prolina como um óleo transparente (5,2 g, 96 %) de 23/07/2018, pág. 171/186

160

RMN Ή (300 MHz, MeOH-d₄): 6,04-5,88 (m, 1H, H₂-C(P)(A11oc)); 5,385,19 (m, 2H, H₂-C(y)(A11oc); 4,64-4,54 (m, 3H, H₂-C(a)(Alloc), H-C(4)); 4,39-4,22 (m, 1H, H-C(2)); 3,71-3,60 (m, 1H, H-C(5)); 3,45-3,32 (m, 1H, HC(5)); 2,51-2,41 (m, 2H, H₂-C(3)). CI-MS (NH₃): 215,1 ([M+H]⁺).

(200 mg, 0,86 mmol) do intermediário acima e 9fluorenilmetoxicarbonilasuccinimida (440 mg, 1,5 eq., 1,3 mmol) foram dissolvidos em CH₂C1₂ (10 ml) e adicionou-se DIEA (466 μΐ, 4 eq., 3,44 mmol), e a solução foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. O solvente foi removido e o resíduo dissolvido em AcOEt, lavado com ácido clorídrico 1/V, secado (Na₂SO₄). Após evaporação, o produto bruto foi purificado por meio de filtração sobre gel de sílica com, primeiramente, um gradiente de (3:1) hexano/AcOEt para AcOEt. O solvente foi coevaporado com CH₂C1₂ e o produto secado sob alto vácuo: (27?,45)-4[(Ablóxi)carbonilamino] -1 - [(9Z7-fluoren-9-il)metóxi-carbonilJ -probna (217) sóbdo branco (90 mg, 33 %) [a] ²D° = +29,3 ° (c = 1,08, CHC1₃). IR (KBr): 33145 (br.), 30665 (br.), 29525 (br.), 17085 (br.), 1536m, 14245, 13535, 1126m, 1030m, 909m, 759m, 7385, 620m. RMN Ή (300 MHz, CDC1₃): 8,74 (5, 1H, H-N); 7,79-7,66 (m, 2H, H-C(4‘)(fmoc)); 7,62-7,49 (m, 2H, HC(l‘)(fmoc)); 7,44-7,22 (m, 4H, H-C(3‘)(fmoc), H-C(2‘)(fmoc)); 6,03-5,74 (m, 1H, Η-0(β)(Α11οο)); 5,41-5,07 (m, 2H, H₂-C(y)(A11oc); 4,74-4,17 (m, 7H, H₂-C(10‘)(fmoc), H-C(9‘)(fmoc), H-C(4), H-C(2), H₂-C(a)(Alloc)); 3,913,76 (m, 1H, H-C(5)); 3,48-3,25 (m, 1H, H-C(5)); 2,45-2,08 (m, 2H, H₂-C(3)). ESI-MS (MeOH): 437,3 ([M+H]⁺); ESI-MS (MeOH+Na): 459,1 ([M+Na]⁺).

2.3. Partindo dos derivados 210 e 275 é possível preparar precursores-chave 219a e 221a de acordo com o Esquema 44.

R⁶⁴: n-hexila (219a, 221a).

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161

Boc ^Frnoc

220a ^221a i: SnCh, dioxano/HoO; ii: R^MCOCl, diisopropiletilamino, CH2CI2; iii: L1OHXIH2O, MeOH, H2O; x: FmocOSu, Na2CO3aq., dioxano Esquema 44 i, ii; Procedimentos típicos:

A uma solução de 78 mmol de azidas 210 e 275 em uma mistura (3:1) de dioxano/água (500 ml) adicionou-se, a 0°C, SnCh (59,2 g, 4 eq., 0,31 mol) e a solução foi agitada durante 30 minutos. A mistura de reação foi aquecida gradualmente até à temperatura ambiente e foi agitada durante mais 5 horas. Após ajustra o pH a 8 com NaHCÜ3 sólido, a mistura de reação foi extraída com CH2CI2, a fração orgânica foi secada (MgSCL), evaporada e o resíduo foi secada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em CH2CI2 (300ml), resfriado a 4°Com um banho de gelo, seguido de adição de DIEA (20,0ml, 117mmol) e da solução do cloreto de ácido apropriado R⁶⁴ COCl (101,0mmol) em CH2CI2 (50ml) a 4°C. A mistura de reação foi agitada durante 1 hora a 4° e durante 18 horas à temperatura ambiente e extraída com HCI aq. (O,5N, 200ml) e CH2CI2. A fração orgânica foi secada (MgSOA, evaporada e o resíduo cromatografado sobre SiO 2 com gradientes de acetato de etila/hexano dando 218a e 220a, que foram convertidos aos produtos finais 219a e 221a como descrito para a conversão de 216 a 217. Os rendimentos globais foram de 50-60 %.

Templates (b 1):

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 173/186

162

Síntese de ácido (25,65,8a/?)-8a-{ [(ter.butil)oxicarbonil]metil }peridro-5,8-dioxo- {[(9H-fluoren-9il)metoxicarbonil] amino} -pirrolo [ 1,2-a]pirazino-6-acético (222):

A uma solução agitada de 250 mg (0,414 mmol) de {(2S,6S,8a/?)-8a-L(ter.-butil)oxicarbonilJmetil}peridro-5,8-dioxo-{L(9Hfluoren-9-il)metoxicarbonil] amino} -pirrolo [ 1,2-a]pirazin-6-acetato de abla em uma mistura desgaseificada de diclorometano/metanol (9:1, 3ml) adicionou-se, sob argônio, 25 mg (0,0216 mmol) de tetraquis(trifenilfosfino)paládio, 0,05 ml of ácido acético e 0,025 ml de Nmetilmorfolina. A mistura de reação foi agitada durante 48 horas à temperatura ambiente e despejada sobre água e diclorometano. A fase orgânica foi secada (MgSO₄), evaporada e o resíduo cromatografado sobre S1O2 com diclorometano/metanol (9:1) dando 180 mg (77 %) de ácido (25,65,8a/?)-8a- {[(ter.-butil)oxicarbonil]metila}peridro-5,8-dioxo- {[(9Hfhioren-9-il)-metoxicarbonil]amino }-pirrolo[ 1,2-a]pirazino-6-ácido (222) como um pó branco.

RMN '11(300 MHz, DMSO-d₆): 8,30 (s, 1H); 7,88 (d, J= 7,2, 2H); 7,67 (d, J=7,4, 2H); 7,62 (br.s, 1H); 7,41 (t, J= 7,2, 2H); 7,33 (t, J=7,4, 2H); 4,35-4,2 (m, 5H); 3,55 (br.d, J= 6,3, 2H); 2,8-2,55 (m, 3H); 2,45-2,25 (m, 2H); 2,1-1,95 (m, 1H); 1,35 (s, 9H); MS(ESI): 586,1 (M+Na) ⁺, 564,1 (M+H)⁺.

Templates (cl):

de 23/07/2018, pág. 174/186

163

Procedimento experimental descrito em W. Bannwarth, A. Knierzinger, K. Müller, D. Obrecht, A. Trzeciak, EP 0 592 791 A2, 1993,

3. Métodos biológicos

3.1. Ensaios enzimáticos

As concentrações de enzima ativa foram calculadas utibzandose a equação descrita por Hendersen (P. J. F. Hendersen, Biochem. J. 1972, 127, 321-333). As concentrações de inibidor foram determinadas por meio de anábse quantitativa de aminoácidos. Todos os ensaios foram repetidos em quadrupbcata.

Determinação da atividade antitripsina

Uma solução de tripsina foi incubada durante 5 minutos com concentrações crescentes de inibidor. Os ensaios foram realizados a 20°C em tamponador de Tris-HCl (pH 7,8, 100 mM) contendo 10 mM de CaCl₂. O substrato foi N-a-benzoil-L-arginina-4-nitroanibda (3,2 mM) e a taxa de reação inicial foi monitorada durante de 30 minutos a 405 nm.

Determinação da atividade antielastase

Como acima, exceto o substrato foi N-succinil-L-alanil-Lalanil-L-probl-L-fenilalanin-4-nitroanibda (1,6 mM).

Valores Ki aparentes foram calculados adequando-se os dados da taxa inicial à equação a seguir, que presume inibição competitiva de bgação estreita (J. F. Wilbams, J. F. Morrison, Methods Enzymol. 1979, 63, 437-467):

^{V =} 2E^‘~^I‘~^K,+ Ιν, + Κ,-Ε,Ϋ + ΛΚ,Ι,]

Determinação da atividade anti-catepsina G ml de uma solução de catepsina G (0,2 U/ml, correspondendo a aproximadamente 2 M, adquirida da Calbiochem) foram incubados durante 15 minutos com concentrações crescentes de inibidor. Os ensaios foram realizados a 37 °C em um volume total de 700 1 de de 23/07/2018, pág. 175/186

164 tamponador HEPES (pH 7,5; 0,1 mol/1) contendo 0,05 mol/1 de CaCl₂. Em seguida, adicionou-se 70 1 de substrato de (N-succinil-L-alanil-L-alanil-Lprolyl—L-fenilalanin-4-nitroanilida, 20 mM em DMSO). A bberação de pnitroanilida foi monitorada a 405 nm para se determinar as velocidades iniciais das reações. Cada medição foi reproduzida três vezes (A. J. Barrett, Methods in Enzymology 1981, 80, 561-565).

3.2. Resultados

Exemplo	Ki(nM) Tripsina	Ki(nM) Quimiotripsina	Ki(nM) Catepsina G
Ex. 1	100	> 10.000	100.000
Ex. 2	1500	Nd	Nd
Ex. 3	> 10.000	Nd	Nd
Ex. 4	700	Nd	Nd
Ex. 5	1900	Nd	Nd
Ex. 6	> 25.000	Nd	Nd
Ex. 7	110	Nd	Nd
Ex. 8	710	Nd	Nd
Ex. 9	> 25.000	4400	Nd
Ex. 10	> 20.000	1400	Nd
Ex. 11	> 20.000	4700	Nd
Ex. 15	21	3800	10.000

Nd: não determinado

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 176/186

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser da fórmula geral

h. Template

em que

k. Template

é um grupo ^DPro-^LPro;

Z é uma cadeia de n radicais de aminoácidos α, n sendo o número inteiro 7 ou 11, em que as posições dos referidos radicais de aminoácidos na referida cadeia são contadas partindo do aminoácido Nterminal, e

- se n for 7; os radicais de aminocácidos nas posições 1-7 são:

- Pl:Thr;

P2: Lys;

P3: Ser;

P4: Ile;

P5: Pro;

P6: Pro;

P7: Ile; ou

PI: Ala;

P2: Lys;

P3: Ser;

P4: Ile;

P5: Pro;

P6: Pro;

de 23/07/2018, pág. 177/186

P7 Ile; ou - PI Thr; P2 Ala; P3 Ser; 5 P4 Ile; P5 Pro; P6 Pro; P7 Ile; ou - PI Thr; 10 P2 Lys; P3 Ala; P4 Ile; P5 Pro; P6 Pro; 15 P7 Ile; ou - PI Thr; P2 Lys; P3 Ser; P4 Ala; 20 P5 Pro; P6 Pro; P7 Ile; ou - PI Thr; P2 Lys; 25 P3 Ser; P4 Ile; P5 Ala; P6 Pro;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 178/186

P7 Ile; ou - PI Thr; P2 Lys; P3 Ser; 5 P4 Ile; P5 Pro; P6 Ala; P7 Ile; ou - PI Thr; 10 P2 Lys; P3 Ser; P4 Ile; P5 Pro; P6 Pro; 15 P7 Ala; ou - PI Thr; P2 Tyr; P3 Ser; P4 Ile; 20 P5 Pro; P6 Pro; P7 Ile; ou - PI Thr; P2 Trp; 25 P3 Ser; P4 Ile; P5 Pro; P6 Pro;

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 179/186

Ρ7: Ile; ou

- Pl:Thr;

P2: Phe;

P3: Ser;

P4: Ile;

P5: Pro;

P6: Pro;

P7: Ile; e

- se n for 11; os radicais de aminocácidos nas posições 1-11 são:

- Pl: Arg;

P2: Cys;

P3: Thr;

P4: Lys;

P5: Ser;

P6: Ile;

P7: Pro;

P8: Pro;

P9: Ile;

PIO: Cys;

Pll:Phe;

os dois radicais Cys formando uma ponte de dissulfeto; e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmos.

2. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que contém um composto ou sal, como definido na reivindicação 1, e um carreador farmaceuticamente inerte.
3. Processo para a fabricação de um composto, como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende:

(a) acoplamento de um suporte sóbdo apropriadamente de 23/07/2018, pág. 180/186 funcionalizado com um derivado apropriadamente N-protegido daquele aminoácido que, no produto final desejado, encontra-se na posição 72+¼ ou Λ-V2, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadamente protegido;

(b) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido;

(c) acoplamento do produto assim obtido com um derivado apropriadamente N-protegido daquele aminoácido que, no produto final desejado, encontra-se uma posição mais próxima do radical de aminoácido Nterminal, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadamente protegido;

(d) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido;

(e) repetição, se necessário, das etapas (c) e (d) até que o radical de aminoácido N-terminal tenha sido introduzido;

(f) acoplamento do produto assim obtido a um composto da fórmula geral

Template em que %_

JZZi

Template é como definido acima e X é um grupo N-protetor ou, altemativamente (fa) acoplamento do produto obtido na etapa (d) ou (e) com um derivado apropriadamente N-protegido de ^DPro;

(fb) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido; e (fc) acoplamento do produto assim obtido com um derivado de 23/07/2018, pág. 181/186 apropriadamente N-protegido de ^LPro;

(g) remoção do grupo N-protetor do produto obtido na etapa (f) ou (fc);

(h) acoplamento do produto assim obtido a um derivado apropriadamente N-protegido daquele aminoácido que, no produto final desejado, encontra-se na posição n, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadamente protegido;

(i) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido;

(j) acoplamento do produto assim obtido a um derivado apropriadamente N-protegido daquele aminoácido que, no produto final desejado, encontra-se em uma posição mais além da posição n, sendo que qualquer grupo funcional que pode estar presente no referido derivado de aminoácido N-protegido também pode ser apropriadamente protegido;

(k) remoção do grupo N-protetor do produto assim obtido;

(l) repetição, se necessário, das etapas (j) e (k) até que todos os radicais de aminoácidos tenham sido introduzidos;

(m) se desejado, desproteger seletivamente um ou vários grupos funcionais protegidos presentes na molécula e substituir apropriadamente o(s) grupo(s) reativo(s) assim liberados;

(o) destacamento do produto assim obtido do suporte sólido;

(p) ciclização do produto clivada do suporte sólido;

(q) se desejado, formação de uma ligação inter-filamentos entre cadeias laterais de radicais de aminoácidos apropriados em posições opostas da região de filamento β;

(r) remoção de quaisquer grupos protetores presentes em grupos funcionais de quaisquer membros da cadeia de radicais de aminoácidos e, se desejado, qualquer grupo(s) protetor(es) que, adicionalmente, pode(m) estar presente(s) na molécula; e de 23/07/2018, pág. 182/186 (r) se desejado, conversão do produto assim obtido em um sal farmaceuticamente aceitável ou conversão de um sal farmaceuticamente aceitável, ou inaceitável, assim obtido em um composto livre correspondente de fórmula I ou a um sal diferente, farmaceuticamente aceitável.
5 4. Uso de um composto, como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medicamento como definido no processo da reivindicação 3 para inibir serina proteases.

Petição 870180063328, de 23/07/2018, pág. 183/186