BR122020016731B1 - Forma f de tartarato cristalino de 5-(2,4-diamino-pirimidin-5-iloxi)-4-isopropil-2-metoxi- benzenossulfonamida, bem como sua composição farmacêutica e uso - Google Patents

Abstract

São fornecidos novos sais e polimorfos de 5-(2,4-diamino-pirimidin-5-iloxi)-4-isopropil-2-metoxi- benzenosulfonamida, que são potencialmente úteis para modular uma condição mediada por um receptor P2X3 ou P2X2/3. São também fornecidas formulações farmacêuticas e métodos de administração e dosagem desses sais e polimorfos a indivíduos necessitados dos mesmos.

Description

Antecedentes da invenção

[001] A presente invenção refere-se a formas cristalinas de 5-(2,4- diamino-pirimidin-5-iloxi)-4-isopropil-2-metoxi-benzenossulfonamida (“Composto A”) ou um sal do mesmo.

[002] O trato respiratório, ou vias aéreas, participa no processo vital de troca gasosa para suportar a demanda por admissão de oxigênio e eliminação de dióxido de carbono. Nervos autonômicos vagais controlam músculos lisos da árvore traqueobrônquica, e desse modo calibre de vias aéreas, bem como liberação e movimento de secreções (muco e fluido). O controle é coordenado nos núcleos de tronco cerebral que regulam escoamento autonômico e voluntário, se baseando em uma entrada rica de sinais sensoriais vagais a partir dos tecidos de vias aéreas que por sua vez transmitem sensação consciente e acionam reflexos autonômicos. Fibras sensoriais vagais se originam na maior parte de corpos de célula em gânglios nodosos e jugular, e sua atividade é regulada por uma gama de substâncias químicas como ATP, que sensibiliza aferentes vagais e serve como um sinal de vias aéreas mecanossensoriais convergentes.

[003] ATP ativa purinoceptores (por exemplo, P2X3 e P2X2/3), que mediam muitos papeis fisiológicos e patológicos. ATP estimula e sensibiliza terminações de nervos sensoriais resultando em sensações intensas como dor, desconforto, urgência, coceira e vontade e um aumento acentuado em descarga de nervo sensorial, amplamente através de ativação de receptor P2X3 em fibras de nervo aferente que inervam órgãos e tecidos de seres humanos e roedores, especialmente a víscera oca.

[004] O Composto A é descrito na publicação internacional WO2005/095359 (publicada em 13 de outubro de 2005) e patente US n°. 7,858,632 (publicado em 22 de setembro de 2005) que são pelo presente documento incorporados por referência na íntegra. O Composto A é um inibidor(es) de P2X3 e/ou P2X2/3 e é potencialmente útil para o tratamento de tosse, tosse crônica e vontade de tossir em distúrbios e condições respiratórias, entre outras condições.

Sumário da invenção

[005] São descritas aqui formas de sal e polimorfos do Composto A. Em uma modalidade, o polimorfo é uma Forma A de base livre cristalina do Composto A. Em outra modalidade, o polimorfo é uma Forma A de sal de citrato cristalino do Composto A. Em outra modalidade, o polimorfo é uma Forma B de sal de citrato cristalino do Composto A. Em outra modalidade, o polimorfo é uma Forma A de sal de tartarato cristalino do Composto A. Ainda em outra modalidade, o polimorfo é uma Forma F de sal de tartarato cristalino do Composto A.

Breve descrição dos desenhos

[006] A Figura 1 é um padrão XRPD característico para Forma A de base livre do Composto A.

[007] A Figura 2 é um padrão XRPD característico para Forma B de base livre do Composto B.

[008] A Figura 3 é um padrão XRPD característico para Forma A de sal de citrato do Composto A.

[009] A Figura 4 é uma sobreposição de DSC e TGA para Forma A de sal de citrato do Composto A.

[0010] A Figura 5 é um isoterma DVS para Forma A de sal de citrato do Composto A.

[0011] A Figura 6 é um padrão XRPD característico para Forma B de sal de citrato do Composto A.

[0012] A Figura 7 é um padrão XRPD característico para Forma A de sal de tartarato do Composto A.

[0013] A Figura 8 é uma sobreposição de DSC e TGA para Forma A de sal de tartarato do Composto A.

[0014] A Figura 9 é uma sobreposição de XRPD para Forma A de sal de tartarato, Forma B e Forma C do Composto A.

[0015] A Figura 10 é um padrão XRPD característico para Forma D de sal de tartarato do Composto A.

[0016] A Figura 11 é um padrão XRPD característico para Forma F de sal de tartarato do Composto A.

[0017] A Figura 12 é uma sobreposição de DSC e TGA overlay para Forma F de sal de tartarato do Composto A.

[0018] A Figura 13 é uma isoterma DVS para Forma F de sal de tartarato do Composto A.

[0019] A Figura 14 é um padrão XRPD característico para Forma G de sal de tartarato do Composto A.

[0020] A Figura 15 é um padrão XRPD característico para Forma H de sal de tartarato do Composto A.

[0021] A Figura 16 é uma sobreposição XRPD de moagem seca do Composto A equivalente molar de ácido cítrico.

[0022] A Figura 17 é uma sobreposição XRPD de moagem úmida do Composto A com equivalente molar de ácido cítrico.

Descrição detalhada da invenção

[0023] São descritos aqui sais e formas cristalinas novas do Composto A, um inibidor de receptor(es) P2X3 e/ou P2X2/3. O Composto A, 5-(2,4-diamino- pirimidin-5-iloxi)-4-isopropil-2-metoxi-benzenossulfonamida, tem a seguinte fórmula:

[0024] O Composto A pode ser preparado usando procedimentos descritos na publicação internacional WO2005/095359 (publicado em 13 de outubro de 2005) e patente US n°. 7,858,632 (publicado em 22 de setembro de 2005).

[0025] As novas formas cristalinas do Composto A ou um sal do mesmo, especialmente a Forma A de sal de citrato, Forma A de sal de tartarato e Forma F de sal de tartarato, descritos no presente documento, podem ser fornecidas estavelmente e constantemente a partir do ponto de vista do processo de fabricação e são úteis no tratamento potencial de condições mediadas por P2X3 e/ou P2X2/3. Esses polimorfos cristalinos têm muitas propriedades inesperadas em comparação com as formas de base livre como descrito em mais detalhe abaixo.

[0026] Em uma modalidade, os polimorfos cristalinos descritos no presente documento têm propriedades aperfeiçoadas quando comparados com outras formas.

[0027] As novas formas cristalinas do Composto A descritas no presente documento têm um efeito inibidor de P2X3 e/ou P2X2/3, e são portanto potencialmente úteis como agentes farmacêuticos para o tratamento de condições ou distúrbios incluindo, porém não limitado a, distúrbios do trato urinário (também conhecido como uropatia), estados de doença associados ao trato urinário (também conhecidos como estados de doença de trato urinário), bexiga hiperativa (também conhecida como incontinência de vontade ou hiperatividade detrusora), obstrução de saída (também conhecida como hipertrofia prostática benigna), insuficiência de saída, hipersensibilidade pélvica, síndrome de dor de bexiga, endometriose, sintomas respiratórios, tosse ou vontade de tossir associada a uma doença respiratória, asma, hipertensão, insuficiência cardíaca, dispneia (também conhecida como falta de ar), apneia de sono, sinais e sintomas de hipertonicidade de corpo de carótida e hiper-reflexia (como falta de ar e fadiga) e superatividade simpática em um indivíduo. Adicionalmente, sinais e sintomas de infecção de trato respiratório superior, incluindo sintomas de resfriado e gripe de faringite, rinite, congestão nasal, tosse em excesso, condições direcionadas a coriza e rinorreia podem ser potencialmente tratados por Composto A descrito no presente documento.

[0028] Em particular, as novas formas cristalinas do Composto A ou sal do mesmo, bem como Composto A por si, são potencialmente úteis como agentes farmacêuticos, por exemplo, para o tratamento de sintomas respiratórios, tosse ou vontade de tossir associado a uma doença respiratória, asma.

[0029] Estudos de difração de pó de raio-X (XRPD) são amplamente usados para caracterizar estruturas moleculares, cristalinidade e polimorfismo. Os padrões de XRPD dos novos polimorfos descritos no presente documento foram gerados em um difratômetro PANlytical MPD PRO X’Pert usando um feixe incidente de radiação de Cu produzida usando uma fonte longa de foco fino, Optix. Condições de XRPD mais detalhadas são descritas na seção de Exemplos.

[0030] O padrão XRPD da Forma A de base livre do Composto A é mostrado na Figura 1. Esse material foi usado como o material de partida para fazer outras formas como descrito em mais detalhe na seção de Exemplos.

[0031] Em uma modalidade, o padrão de XRPD de uma Forma A de sal de citrato do Composto A é mostrado na Figura 3. Em uma modalidade, a Forma A de citrato apresenta picos de difração característicos que correspondem a espaçamentos d de 11,69, 16,22 e 21,14 angstroms. Em outra modalidade, a Forma A de citrato é adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 9,38 e 26,31 angstroms. Em outra modalidade, a Forma A de citrato é mesmo adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 14,41 e 19,51 angstroms. Em outra modalidade, a Forma A de citrato é ainda adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 16,95 e 22,18 angstroms.

[0032] Em uma modalidade, o padrão de XRPD da Forma A de citrato apresenta picos de difração característicos que correspondem a espaçamentos d de 9,38, 11,69, 14,41, 16,22, 16,95, 19,54, 21,14, 22,18 e 26,31 angstroms.

[0033] Além do padrão de XRPD descrito acima, a Forma A de citrato também foi caracterizada por espectros de ressonância magnética nuclear de próton (NMR). Em uma modalidade, os dados de NMR de próton indicaram uma razão de 1:1 de Composto A para citrato.

[0034] A Forma A de citrato foi adicionalmente caracterizada usando DSC (Calorimetria de varredura diferencial) e TGA (Análise termogravimétrica). Em uma modalidade, os termogramas DSC/TGA para Forma A de citrato são mostrados na Figura 4. Perda de peso desprezível foi observada por TGA até 160 °C, compatível com um material anidro/não solvatado. Perda de peso em etapas de aproximadamente 24% em peso entre 160 °C e 250 °C e um evento endotérmico por DSC com início de 200 °C, provavelmente indicando fusão e decomposição simultâneas do material.

[0035] Em uma modalidade, imagens de estágio quente para Forma A de citrato confirmaram início de fusão em aproximadamente 193 °C, levemente mais baixo que o início de fusão marcado no termograma de DSC na Figura 4 (200 °C).

[0036] A Forma A de citrato foi adicionalmente caracterizada por análise de DVS (Sorção de vapor dinâmico). Em uma modalidade, a isoterma DVS, mostrada na Figura 5, ilustrou baixa higroscopicidade cinética (0,11% de perda/ganho total de peso entre 5% e 95% RH).

[0037] A Forma A de citrato tem propriedades inesperadas em comparação com a Forma A de base livre. Em uma modalidade, a Forma A de citrato apresentou solubilidade aquosa melhorada em comparação com a Forma A de base livre e não mostrou sinais de desproporção na concentração de 6 mg/mL por até um mês. Adicionalmente, nenhuma deliquescência foi observada após tensionar o sal a ~97% de umidade relativa por 14 dias.

[0038] Em uma modalidade, o padrão de XRPD de uma Forma B de sal de citrato do Composto A é mostrado na Figura 6. Em uma modalidade, a Forma B de citrato apresenta picos de difração característicos que correspondem a espaçamentos d de 8,42, 16,15 e 23,04 angstroms. Em outra modalidade, a Forma A de citrato é adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 5,71 e 18,77 angstroms. Em outra modalidade, a Forma A de citrato é adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 11,30 e 26,01 angstroms. Em outra modalidade, a Forma A de citrato é ainda adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 12,93 e 25,02 angstroms.

[0039] Em uma modalidade, o padrão de XRPD de Forma B de citrato apresenta picos de difração característicos que correspondem a espaçamentos d de 5,71, 8,42, 11,30, 12,93, 16,15, 18,77, 23,04, 25,02 e 26,01 angstroms.

[0040] Em uma modalidade, NMR de próton da Forma B de citrato indicou uma razão de 1:1 de Composto A e sal de citrato somente com etanol residual menor presente. Qualquer água que possa estar presente não podia ser quantificada por NMR de próton devido à presença inerente de água no solvente de NMR (DMSO deuterado).

[0041] Em uma modalidade, a análise de Karl Fischer indicou que uma amostra contendo Forma B de citrato continha aproximadamente 3% em peso de água. Essa quantidade de água correlaciona com um monoidrato de um sal de citrato 1:1.

[0042] Em uma modalidade, o padrão de XRPD de uma Forma A de sal de tartarato do Composto A é mostrado na Figura 7.

[0043] Em uma modalidade, um espectro de NMR de próton para Forma A de tartarato indicou um sal 2:1 com 0,4 mol de EtOH por mol do Composto A, sugerindo uma estequiometria de ~2:1:1 de Composto A/ácido/EtOH.

[0044] Em uma modalidade, uma sobreposição dos termogramas de TGA e DSC para Forma A de tartarato é mostrada na Figura 8. Uma endoterma ampla com um pico máximo a 78 °C e um pico de ombro a 95 °C no termograma de DSC corresponde com aproximadamente 5% de perda de peso entre 23 e 115 °C por TGA, compatível com a perda de solvente. A magnitude de perda de peso é compatível com ~1 mol de EtOH por mol de 2:1 de sal de tartarato do Composto A, compatível com a quantidade de EtOH medido por NMR de próton. Uma etapa de perda de peso adicional de aproximadamente 4% em peso corresponde a um evento endotérmico com um pico máximo a 158 °C, provavelmente que correspondem à fusão, dissociação e decomposição simultâneas do sal.

[0045] Em uma modalidade, o padrão de XRPD de uma Forma F de sal de tartarato do Composto A é mostrado na Figura 11. Em uma modalidade, a Forma F de tartarato apresenta picos de difração característicos que correspondem a espaçamentos d de 11,25, 18.73 e 22,67 angstroms. Em outra modalidade, a Forma F de tartarato é adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 12,06 e 17,74 angstroms. Em outra modalidade, a Forma F de tartarato é ainda adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 9,22 e 26,52 angstroms. Em outra modalidade, a Forma F de tartarato é ainda adicionalmente caracterizada pelos espaçamentos d de 16,37 e 21,69 angstroms.

[0046] Em uma modalidade, o padrão de XRPD de Forma F de tartarato apresenta picos de difração característicos que correspondem a espaçamentos d de 9,22, 11,25, 12,06, 16,37, 17,74, 18,73, 21,69, 22,67 e 26,52 angstroms.

[0047] Além do padrão de XRPD descrito acima, a Forma F de tartarato foi também caracterizada por análise de ressonância magnética nuclear de próton (NMR). Em uma modalidade, um espectro de NMR de próton indicou um sal de tartarato de Composto A 2:1.

[0048] A Forma F de tartarato foi adicionalmente caracterizada por DSC e TGA. Em uma modalidade, uma sobreposição dos termogramas de DSC e TGA para Forma F de tartarato é apresentada na Figura 12. Uma etapa de perda de peso inicial de aproximadamente 6,6% em peso entre 27 - 100 °C por TGA corresponde a uma endoterma ampla por DSC a 125 °C, provavelmente que correspondem à perda de solvente. A perda de peso é igual a ~3 mols de água por mol de sal 2:1, compatível com a quantidade de água permitida pelo volume de célula unitária. Praticamente nenhuma perda de peso é observada entre 100 - 180 °C. Uma endoterma relativamente acentuada a 179 °C é imediatamente seguida por perda de peso acentuada acima de 180 °C, provavelmente indicando fusão e decomposição simultâneas do material desidratado.

[0049] Em uma modalidade, a análise fotomicrográfica de estágio quente para a Forma F de tartarato ilustra alterações em birrefringência observada entre 70 °C e 98 °C, que correspondem com a perda de peso em etapas e endoterma ampla observada nos dados de TGA e DSC que provavelmente indicam desidratação da amostra após aquecimento. A fusão foi observada entre ~171 °C e 176 °C, confirmando que a endoterma de DSC acentuada no início a 173°C corresponde com a fusão do material desidratado.

[0050] Em uma modalidade, a análise de Karl Fischer da Forma F de tartarato indicou aproximadamente 7,3% de água, equivalente a aproximadamente 3,7 mols de água por mol de sal 2:1. Esse teor de água é levemente mais alto que ~3 mols de água indicados pela perda de peso de TGA.

[0051] Em uma modalidade, uma isoterma de DVS para Forma F de tartarato é mostrada na Figura 13. O material apresentou perda de peso relativamente pequena após equilíbrio a 5% RH (0,29% em peso), indicando que o hidrato provavelmente permaneceu intacto no início de adsorção. Higroscopicidade significativa foi observada entre 5% e 95% RH, com a amostra ganhando um total de aproximadamente 4,23% em peso. Aproximadamente metade do ganho de peso ocupou gradualmente entre 5% e 85% de RH, enquanto a outra metade ocorreu durante a etapa única entre 85% e 95% RH.

[0052] Embora ganho de peso significativo fosse observado a partir do experimento de DVS, o material hidratado não mostrou sinais de deliquescência a ~97% RH durante a triagem. O perfil de dessorção espelha o perfil de sorção com pouquíssima histerese observada. A perda de peso total de aproximadamente 4,25% em peso ocorreu entre 95% e 5% RH, com aproximadamente metade da perda de peso ocorrendo em uma etapa entre 95% e 85% RH. XRPD da amostra pós-DVS não indicou alteração de Forma.

[0053] A Forma F de tartarato apresentou solubilidade aquosa melhorada por adição de solvente em comparação com a Forma A de base livre do Composto A, embora desproporção em água pura fosse observada ter início após 1 dia.

Exemplos Exemplo 1: Caracterização de Forma A de base livre do Composto A

[0054] A Forma A de base livre do Composto A foi usada como o material de partida para obter outros sais e formas. A Forma A de base livre foi caracterizada por XRPD e espectroscopia de NMR de próton. O padrão XRPD (Figura 1) exibiu picos acentuados compatíveis com um material cristalino e foi indexado com sucesso. O volume de célula unitária obtido a partir da indexação de solução é compatível com o Composto A não solvatado/anidro. Um espectro de NMR de próton para o material é compatível com a estrutura química da base livre do Composto A.

[0055] Uma triagem de sal utilizando Forma A de base livre foi conduzida e resultou nos sais e polimorfos descritos em mais detalhe abaixo.

[0056] Estimativas de solubilidade (por adição de solvente) para a Forma A de base livre do Composto A em vários solventes são fornecidos na Tabela 1. Esse material apresentou solubilidade baixa a limitada em todos os solventes testados. Tabela 1. Solubilidades aproximadas de Forma A de base livre do Composto A em vários solventes

a As solubilidades são calculadas com base no total de solvente usado para fornecer uma solução; solubilidades efetivas podem ser maiores devido ao volume das porções de solvente usado ou uma taxa lenta de dissolução. Valores são arredondados para o número inteiro mais próximo. Se a dissolução não ocorreu como determinado por avaliação visual, o valor é reportado como “<”.

Exemplo 2: Forma B de Base livre do Composto A

[0057] A Forma B de Base livre pode consistir em um solvato de acetona da base livre do Composto A, embora a composição química não tenha sido confirmada. O padrão de XRPD (Figura 2) foi indexado com sucesso, confirmando que a amostra consiste principalmente ou exclusivamente de uma única fase cristalina. O volume de célula unitária a partir da solução de indexação pode acomodar até ~1 mol de acetona por mol da base livre do Composto A.

Exemplo 3. Triagem de sal do Composto A

[0058] Triagens de sal foram montados usando Forma A de base livre e ácido cítrico e ácido L-tartárico respectivamente. A triagem começou por combinar a base livre do Composto A e ácidos selecionados em uma razão molar de 1:1. Devido à baixa solubilidade da base livre, a maioria dos experimentos envolveu a adição de ácido (como sólidos ou uma solução) a uma pasta de base livre. Em alguns experimentos, soluções claras ou quase claras foram obtidas após contato, seguido por precipitação, indicando a formação de sal. Condições experimentais detalhadas para obter sais de citrato e tartarato são listadas na Tabela 2. Tabela 2. Triagem de sal do Composto A usando Forma A de base livre como material de partida

arazão molar dada como API/ácido. bAPI = Forma A de base livre do Composto A. c Temperaturas (°C) reportadas são máximas de transição a menos que de outro modo mencionado. As temperaturas são arredondadas para o grau mais próximo. d Perda de peso (%) em certa temperatura; alterações de peso (%) são arredondadas para 1 casa decimal; temperaturas são arredondadas para o grau mais próximo. a Temperaturas (°C) reportadas são máximas de transição a menos que de outro modo mencionado. As temperaturas são arredondadas para o grau mais próximo. b Perda de peso (%) em certa temperatura; alterações de peso (%) são arredondadas para 1 casa decimal; temperaturas são arredondadas para o grau mais próximo.

[0059] Vários materiais novos foram descobertos a partir do primeiro round de experimentos, porém base livre não reagida em excesso foi observada em muitos dos padrões de XRPD. Ácido em excesso (1:1.2 a 1:1.5 de Composto A/ácido) foi adicionado no round seguinte de experimentos em um esforço para evitar precipitação da base livre. Essa técnica foi mais bem sucedida na produção de novos materiais como uma fase sólida única. Em geral, materiais exclusivos foram submetidos à indexação por XRPD para medir a pureza de fase e possíveis razões estequiométricas permitidas pelo volume de célula unitária, se a indexação foi bem sucedida.

[0060] Materiais selecionados foram adicionalmente caracterizados por NMR de próton para confirmar a composição química. Certos materiais de interesse que foram verificados ser solvatados foram secos em várias condições em um esforço para produzir formas de sal anidra/não solvatada. Adicionalmente, solubilidade aquosa aproximada e estabilidade física foram avaliadas para sais selecionados. a Temperaturas (°C) reportadas são máximas de transição a menos que de outro modo mencionado. As temperaturas são arredondadas para o grau mais próximo.

[0061] A partir da triagem inicial, formas exclusivas incluindo Forma A de citrato e Formas A, D e F de tartarato foram obtidas.

[0062] Além dos sais confirmados e em potencial encontrados, vários experimentos de triagem de sal conduzidos em acetona forneceram um material designado como, provavelmente, Forma B de base livre. O volume de célula unitária obtido da solução de indexação de XRPD pode acomodar a base livre de Composto A com até 1 mol de acetona por mol de Composto A. Considerando as múltiplas preparações, todos dos sistemas de solvente contendo acetona, e o volume de célula unitária, o material provavelmente consiste em um solvato de acetona da base livre de Composto A.

[0063] Múltiplas formas foram observadas para os sais de tartarato. O tartarato do Composto A apresentou uma propensão para Formar várias formas solvatadas bem como um hidrato.

[0064] A Forma A de tartarato resultou de um experimento de formação de sal em EtOH usando 1 M de ácido L-tartárico aquoso. Dados de caracterização para a Forma A de tartarato indicam um sal hemi-tartarato solvatado de EtOH. Com base nisso, a Forma A de tartarato foi seca a vácuo a ~66 °C por 1 dia, resultando em conversão em um material novo, designado como Forma B de tartarato e ~9% perda de peso gravimétrica. Similaridades em algumas das posições de pico de XRPD com aquelas para a Forma A foram observadas, possivelmente indicando dissolução parcial nas condições testadas, assim a amostra de Forma B foi adicionalmente seca a vácuo a ~83-86 °C por 1 dia, resultando em conversão em outro material novo, designado Forma C de tartarato. Com relação à Forma B, similaridades nos padrões de XRPD para a Forma C e Forma A foram observadas, possivelmente indicando secagem incompleta. A Forma C foi usada como sementes para vários experimentos de formação de sal de tartarato em um esforço para obter uma Forma não solvatada/anidra. Considerando a propensão para o sal de tartarato existir como um solvato, vários experimentos adicionais foram montados em um esforço para produzir um sal de tartarato não solvatado/anidro. Um experimento de formação de sal foi conduzido em EtOH a ~70 °C utilizando sementes de Forma C de tartarato e uma razão molar de 2:1 Composto A/ácido (provavelmente a estequiometria preferida com base na caracterização de amostras de tartarato anteriormente geradas). A pasta resultante foi deixada em agitação a ~70-71 °C por 1 dia, e Forma D de tartarato, um solvato de EtOH confirmado resultou. Um experimento de formação de sal adicional em 2-BuOH foi montado, também semeado com Forma C, em um esforço para evitar a formação de solvato por empregar um solvente quimicamente mais volumoso. Esse experimento resultou em Forma E, um sal solvatado de 2-BuOH. aPerda de peso (%) em certa temperatura; alterações de peso (%) são arredondadas para 1 casa decimal; temperaturas são arredondadas para o grau mais próximo.

[0065] Após confirmação de um número de formas solvatadas do sal de tartarato, um foco foi colocado na formação de um hidrato. Um experimento de formação de sal foi montado em água a ~50 °C. A temperatura levemente elevada foi empregada para aumentar a solubilidade da base livre, que aumentaria provavelmente a cinética de reação e facilitaria a formação de um sal. Um sal hemi-tartarato hidratado, designado como Forma F de tartarato, resultou do experimento e foi selecionado para estudo adicional.

[0066] Materiais de citrato e tartarato selecionados foram avaliados por tensionar em umidade relativa alta e estimar a solubilidade aquosa em temperatura ambiente. A Forma A de citrato e a Forma B de tartarato (solvato de EtOH seco) não mostraram sinais de deliquescência a ~97 °C RH após 7-14 dias. A Forma A de citrato e a Forma F de tartarato mostraram, ambas, solubilidade aquosa melhorada em comparação com a Forma A de base livre do Composto A por adição de solvente (6 mg/mL para citrato, 2 mg/mL para tartarato, < 1 mg/mL para base livre). A Forma A de citrato não mostrou sinais de desproporção, mantendo uma solução clara na concentração de 6 mg/mL por até 1 mês com um pH medido de ~4. Desproporção provável foi observada para a amostra de solubilidade de Forma F de tartarato, visto que uma quantidade pequena de precipitado branco foi observada após ficar em repouso em condições ambientes por 1 dia.

[0067] A Forma A de citrato (sal de citrato 1:1 não solvatado/anidro0 e a Forma F de tartarato (sal de tartarato de Composto A 2:1 hidratado) foram adicionalmente caracterizadas. Os dois materiais foram reproduzidos com sucesso em uma escala de ~1-1,2 g. A Forma A de citrato foi produzida por combinar 1 M de ácido cítrico aquoso com uma pasta da Forma A de base livre de Composto A em EtOH. O experimento foi repetido em uma escala de ~5,6 g, fornecendo com sucesso a Forma de citato A. O material resultante foi usado na triagem de Forma estável abreviada da Forma A de citrato. O aumento de Forma F de tartarato em uma escala de ~1 g foi também bem sucedido por combinar uma solução aquosa de ácido L-tartárico com Forma A de base livre a ~51 °C, semeando com Forma F de tartarato, e permitindo que a mistura agite a ~51 °C por 1 dia. O material de Forma F de tartarato aumentado foi utilizado para secagem e estudos de pasta, descritos em mais detalhe abaixo. Procedimentos detalhados para o aumento de ambos os materiais são fornecidos abaixo.

Exemplo 4. Forma A de citrato do Composto A

[0068] A Forma A de citrato consiste em um sal de citrato de Composto A 1:1 anidro/não solvatado e foi preparada de Forma reprodutível por adicionar ácido cítrico aquoso a uma pasta de base livre do Composto A em EtOH e agitando por uma duração prolongada. Em uma modalidade, a Forma A de citrato foi preparada usando condições listadas na Tabela 2.

[0069] O padrão de XRPD para a Forma A de citrato do Composto A é mostrado na Figura 3. Listas de picos observados e proeminentes são mostrados nas Tabelas 3 e 4, respectivamente. Tabela 3. Lista de picos de XRPD observados para a Forma A de citrato

[0070] A Forma A de citrato foi analisada por NMR de próton, e o espectro foi compatível com um sal de citrato de Composto A 1:1 com menor EtOH residual presente.

[0071] Uma sobreposição dos termogramas de DSC e TGA para a Forma A de citrato é mostrada na Figura 4. Perda de peso desprezível foi observada por TGA até 160 °C, compatível com um material não solvatado/anidro. Perda de peso em etapas de aproximadamente 24% em peso entre 160 °C e 250 °C corresponde a um evento endotérmico por DSC com um início de 200 °C, provavelmente indicando fusão e decomposição simultâneas do material.

[0072] Imagens de estágio quente para o material confirmam um início de fusão em aproximadamente 193 °C, ligeiramente mais baixo que o início de fusão marcado no termograma de DSC na Figura 4 (200 °C).

[0073] A isoterma de DVS (Sorção de vapor dinâmico), mostrada na Figura 5, ilustra baixa higroscopicidade cinética (aproximadamente 0,11% de perda/ganho de peso total entre 5% e 95% RH).

[0074] A Forma A de citrato tem várias propriedades inesperadas. Apresentou solubilidade aquosa melhorada por adição de solvente (6 mg/mL) em comparação com Forma A de base livre e não mostrou sinais de desproporção na concentração de 6 mg/mL por até ~1 mês. Tem estabilidade física melhorada em uma variedade de condições, e não mostrou deliquescência após tensionar o sal a ~97% RH por 14 dias. Além disso, o volume de célula unitária obtido da solução de indexação de XRPD é compatível com um sal de citrato de Composto A 1:1 não solvatado/anidro.

Exemplo 5. Forma B de citrato do Composto A

[0075] A Forma B de citrato consiste em um monoidrato provável de um sal de citrato de Composto A 1:1 e foi gerado de um aumento do sal de citrato. A amostra foi analisada por XRPD (com indexação) e NMR de próton.

[0076] O padrão de XRPD para a Forma B de citrato (Figura 6) foi indexado com sucesso, indicando que a amostra consiste principalmente ou exclusivamente de uma fase cristalina única. O volume de célula unitária é compatível com um sal de citrato de Composto A 1:1 e poderia acomodar até 1 mol de água.

[0077] O padrão de XRPD para a Forma B de citrato foi pego do pico, e listas de picos observados e proeminentes são mostrados nas tabelas 5 e 6, respectivamente. Tabela 5. Lista de picos de XRPD observados para Forma B de citrato

[0078] NMR de próton da amostra confirma um sal de citrato do Composto A 1:1 com apenas etanol residual menor presente.

[0079] Dados de Karl Fischer indicaram que uma amostra contendo Forma B de citrato continha aproximadamente 3% em peso de água. Essa quantidade de água correlaciona com um monoidrato de um sal de citrato de 1:1.

Exemplo 6. Forma A de tartarato do Composto A

[0080] A Forma A de tartarato consiste em um sal de tartarato de Composto A solvatado ~2:1:1 de Composto A/ácido/EtOH. Em uma modalidade, o material resultou de um experimento de formação de sal com ácido L-tartárico em EtOH como mostrado na Tabela 2.

[0081] O padrão de XRPD da Forma A de tartarato (Figura 7) foi indexado com sucesso, indicando que a amostra consiste principalmente ou exclusivamente de uma fase cristalina única. O volume de célula unitária obtido a partir da solução de indexação pode acomodar um sal de tartarato de Composto A 2:1 com até 2 mols de EtOH presentes por mol de sal 2:1.

[0082] Um espectro de NMR de próton para Forma A de tartarato é compatível com um sal 2:1 com 0,4 mol de EtOH por mol do Composto A, indicando uma estequiometria de ~2:1:1 de Composto A/ácido/EtOH.

[0083] Uma sobreposição dos termogramas de DSC e TGA para a Forma A de tartarato é mostrada na Figura 8. Uma endoterma ampla com um pico máximo a 78 °C e um pico de ombro a 95 °C no termograma de DSC corresponde a aproximadamente 5% de perda de peso entre 23 e 115 °C por TGA, compatível com a perda de solvente. A magnitude de perda de peso é compatível com ~1 mol de EtOH por mol de 2:1 sal de tartarato de Composto A, compatível com a quantidade de EtOH medida por NMR de próton. Uma etapa adicional de perda de peso de aproximadamente 4% em peso corresponde a um evento endotérmico com um pico máximo a 158 °C, provavelmente que correspondem à fusão, dissociação e decomposição simultâneas do sal.

Exemplo 7: Forma B de tartarato e Forma C do Composto A

[0084] Verificou-se que a Forma A de tartarato converte em um material novo, designado como Forma B de tartarato após secagem a vácuo a ~66 °C por 1 dia. Similaridades em posições de pico de XRPD entre a Forma A (Figura 9, padrão superior) e Forma B (Figura 9, padrão médio) foram observadas, possivelmente indicando dissolução parcial da Forma A nessas condições e uma mistura de materiais.

[0085] Verificou-se que a Forma B de tartarato converte em Forma C após secagem a vácuo a ~83-86 °C (Figura 9, padrão inferior). A Forma B de tartarato foi tensionada a ~97% RH por 14 dias e não mostrou sinais de deliquescência.

Exemplo 8: Forma D de tartarato do Composto A

[0086] A Forma D de tartarato consiste em um de sal de tartarato de Composto A solvatado com ~2:1:1 de Composto A/ácido/EtOH e resultou inicialmente a partir de um experimento de formação de sal em EtOH a ~70 °C (Tabela 2). O padrão de XRPD foi indexado com sucesso, indicando que o material consiste principalmente ou exclusivamente de uma fase cristalina única (Figura 10). O volume de célula unitária pode acomodar um sal de tartarato de Composto A 2:1 com até ~2 mols de EtOH por mol de 2:1 de sal.

[0087] NMR de próton de Forma D de tartarato é compatível com um sal hemi-tartarato solvatado de EtOH em uma razão molar de 2:1:1 de Composto A/ácido/EtOH.

Exemplo 9. Forma F de tartarato do Composto A

[0088] A Forma F de tartarato consiste em um sal de tartarato de Composto A hidratado com ~2:1:3 de Composto A/ácido/água, embora o teor de água possa ser variável. O material foi reprodutivamente preparado por combinar a Forma A de base livre de Composto A com ácido L-tartárico aquoso a ~50 °C (Tabela 7). Tabela 7. Forma F de tartarato do Composto A

[0089] A Forma F de tartarato melhorou a solubilidade aquosa em comparação com a base livre de Composto A (2 mg/mL versus < 1 mg/mL, respectivamente). Esse material apresenta alguma desproporção em água pura, higroscopicidade e uma propensão a converter em uma variedade de formas solvatadas. A Forma F de tartarato foi caracterizada por XRPD (Figura 11), NMR de próton, DSC, TGA, microscopia de estágio quente, DVS e titulação Karl Fischer.

[0090] O volume de célula unitária a partir da solução de indexação é compatível com um sal de tartarato de Composto A 2:1 com até ~3 mols de água presente (isto é, célula unitária poderia acomodar 2:1:3 de Composto A/ácido/água). Deslocamentos de pico menores para picos selecionados foram observados entre múltiplas preparações, que pode indicar teor variável de água.

[0091] Um padrão de XRPD para Forma F de tartarato foi pego do pico, e listas de picos observados e proeminentes são mostrados nas Tabelas 8 e 9, respectivamente. Tabela 8. Lista de picos de XRPD observados para Forma F de tartarato

[0092] Um espectro de NMR de próton para Forma F de tartarato é compatível com um sal de tartarato de Composto A 2:1.

[0093] Uma sobreposição dos termogramas de DSC e TGA para a Forma F de tartarato é mostrada na Figura 12. Uma etapa inicial de perda de peso de aproximadamente 6,6% em peso entre 27 - 100 °C por TGA corresponde a uma endoterma ampla por DSC a 125 °C, provavelmente que correspondem à perda de solvente. A perda de peso é igual a ~3 mols de água por mol de 2:1 sal, compatível com a quantidade de água permitida pelo volume de célula unitária. Virtualmente nenhuma perda de peso é observada entre 100 - 180 °C.

[0094] A análise fotomicrográfica de estágio quente para Forma F de tartarato ilustrou alterações em birrefringência observadas entre 70 °C e 98 °C, que correspondem à perda de peso em etapas e endoterma ampla observada nos dados de TGA e DSC que provavelmente indicam desidratação da amostra após aquecimento. Fusão foi observada entre ~171 °C e 176 °C, confirmando que a endoterma de DSC acentuada no início a 173 °C corresponde à fusão do material desidratado.

[0095] A análise de Karl Fischer de Forma F de tartarato indicou aproximadamente 7,298% de água, equivalente a aproximadamente 3,7 mols de água por mol de sal 2:1. Esse teor de água é levemente mais alto que ~3 mols de água indicados pela perda de peso de TGA e permitida pelo volume de célula unitária.

[0096] Uma isoterma DVS para Forma F de tartarato é mostrada na Figura 13. O material apresentou perda de peso relativamente pequena após equilíbrio a 5% de TH (0,29% em peso) indicando que o hidrato provavelmente permaneceu intacto no início de absorção. Higroscopicidade significativa foi observada entre 5% e 95% RH, com a amostra ganhando um total de aproximadamente 4,23% em peso. Aproximadamente metade do ganho de peso ocorreu gradualmente entre 5% e 85% RH enquanto a outra metade ocorreu durante a etapa única entre 85% e 95% RH.

[0097] Embora ganho de peso significativo fosse observada a partir do experimento de DVS, o material hidratado não mostrou sinais de deliquescência a ~97% RH durante a triagem. O perfil de dessorção espelha o perfil de sorção com pouquíssima histerese observada. A perda total de peso de aproximadamente 4,25% em peso ocorreu entre 95% e 5% RH, com aproximadamente metade da perda de peso ocorrendo em uma etapa entre 95% e 85% RH. O XRPD da amostra pós-PVD indicou nenhuma alteração de Forma.

[0098] A Forma F de tartarato apresentou solubilidade aquosa melhorada por adição de solvente quando comparado com a Forma A de base livre do Composto A, embora desproporção em água pura fosse observada iniciar após 1 dia.

[0099] Verificou-se que a Forma F de tartarato converte em uma Forma de tartarato diferente após desidratação e foi convertido de volta na Forma F (com picos de XRPD adicionais menores) por tensionar a ~97% RH.

Exemplo 10. Forma G de tartarato do Composto A

[00100] A Forma G de tartarato consiste em ~2:1:2 de sal de tartarato solvatado com Composto A/ácido/ACN e resultou de uma pasta de Forma F de tartarato em ACN a ~76 °C. o padrão de XRPD da Forma G é mostrado na Figura 14, indicando que a amostra consiste principalmente ou exclusivamente de uma fase cristalina única. O volume de célula unitária obtido da solução de indexação podia acomodar um sal de tartarato de Composto A 2:1 com até 2 mols de ACN por mol de sal 2:1.

[00101] Um espectro de NMR de próton para Forma G de tartarato é compatível com um sal solvatado de ~2:1:2 de Composto A/tartarato/CAN.

Exemplo 11. Forma H de tartarato do Composto A

[00102] A Forma H de tartarato consiste em um sal de tartarato solvatado ~2:1:1.5 de Composto A/ácido/THF e provavelmente é solvatada isoestruturalmente com IPA. O material resultou de experimentos de pasta iniciando com Forma F de tartarato em THF (resultou em Forma H) e em IPA (resultou em uma mistura de Forma H e Forma D). O padrão de XRPD de Forma H gerado de THF foi indexado com sucesso, indicando o material consistindo principalmente ou exclusivamente de uma fase cristalina única (Figura 15). Os parâmetros de célula unitária para a Forma H são similares aqueles da Forma F de tartarato (um hidrato), possivelmente sugerindo materiais isoestruturais, embora os padrões de XRPD apresentem diferenças significativas em posições de pico e intensidades de pico. O volume de célula unitária da Forma H é significativamente maior do que aquele da Forma F e pode acomodar até 2 mols de THF por 2:1 de Composto A/sal de tartarato.

[00103] Um espectro de NMR de próton para a amostra da Forma H de THF é compatível com um sal solvatado de ~2:1:1.5 de Composto A/tartarato/THF.

[00104] Considerando a variedade de solventes dos quais foi produzido e a comparação de parâmetros de célula unitária, a Forma H pode consistir em uma família de solvatos isoestruturais de sal hemi-tartarato envolvendo THF, IPA e água.

Exemplo 12. Estudos de moagem e triagem de Forma estável abreviada

[00105] Para avaliar formação de sal de citrato possível durante preparados de formulação, dois experimentos de moagem foram conduzidos usando Forma A de base livre e um molar equivalente de ácido cítrico, como mostrado na Tabela 10. Tabela 10. Experimentos de moagem usando Forma A de base livre de Composto A e ácido cítrico

[00106] Em um dos experimentos, os compostos foram moídos juntos em condições secas, enquanto o outro experimento de moagem envolveu a adição de uma pequena quantidade de água para simular granulação úmida. A moagem seca resultou em uma mistura física de base livre e ácido cítrico (Figura 16) enquanto a moagem úmida produziu Forma A de citrato com uma quantidade menor de base livre não reagida (Figura 17). Esses resultados indicam que um processo de formulação como granulação úmida provavelmente facilitaria a formação de um sal de citrato em uma formulação contendo base livre de Composto A e ácido cítrico. Adicionalmente, a formação de sal na formulação foi confirmada pela análise de XRPD de vários lotes de tabletes formulados, que apresentaram picos compatíveis com formas de sal de citrato além de outros componentes cristalinos da formulação.

[00107] Valores de solubilidade aproximada para a Forma A de citrato são mostrados na Tabela 11. Tabela 11. Solubilidades aproximadas de sais de Composto A em vários solventes em temperatura ambiente

a Solubilidades são calculadas com base no solvente total usado para fornecer uma solução; solubilidades efetivas podem ser maiores devido ao volume das porções de solvente usadas ou uma taxa lenta de dissolução. Os valores são arredondados para o número inteiro mais próximo. Se a dissolução não ocorreu como determinado por avaliação visual, o valor é reportado como “<”. Se a dissolução ocorreu como determinado pela avaliação visual após a adição da primeira alíquota, o valor é reportado como ““>”.

[00108] A Forma A de citrato apresentou solubilidade baixa à limitada na maioria dos sistemas de solvente orgânico, com os valores de solubilidade mais altos observados em DMSO (~33 mg/mL), HFIPA (~10 mg/mL), MeOH (~9 mg/mL) e água (6 mg/mL). Esses valores facilitaram a seleção de sistemas de solvente para uso na triagem de Forma estável. Misturas de solvente foram exploradas para encontrar valores de solubilidade ótima para experimentos de pasta de longo prazo.

[00109] Doze experimentos de pasta foram montados usando Forma A de citrato em uma variedade de sistemas de solvente orgânico e em água pura (Tabela 12). Todos os sistemas de solvente foram explorados em temperatura ambiente (RT), e pastas subambiente adicionais foram montadas em MeOH e em água. Tabela 12. Triagem de Forma estável abreviada da Forma A de citrato de Composto A

a A maioria dos sólidos dissolveu em concentração reportada, porém algumas partículas flutuantes permaneceram e não dissolveram quando solvente adicional foi acrescentado.

[00110] Todas as pastas resultaram em Forma A de citrato. O sal apresentou solubilidade mensurável por adição de solvente em muitos dos sistemas de solvente empregados, o que facilitaria a cinética de formar conversão se uma forma mais estável existiu. Adicionalmente, as pastas foram todas deixadas agitar por 24-25 dias, uma duração extensa que teria fornecido provavelmente tempo adequado para conversão em uma forma mais estável se uma existiu. Considerando esses fatores, a Forma A de citrato é provavelmente a Forma anidra mais termodinamicamente estável do sal de citrato nas condições testadas.

Exemplo 13. Preparações de sais de Composto A selecionados

[00111] Além dos processos descritos acima, vários sais do Composto A podem ser preparados usando os seguintes procedimentos.

[00112] Forma A de citrato de Composto A - Os sólidos de Forma A de base livre de Composto A (1,1957 g) foram combinados com EtOH (70 mL) em uma concentração de 17 mg/mL, resultando em uma pasta. A solução de ácido cítrico 1 M aquosa (1,2 equivalentes molares, 4,06 mL) foi adicionada à pasta e nenhuma alteração visível foi observada. A mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente por 12 dias, resultando em uma suspensão branca opaca. Os sólidos foram coletados em um filtro de papel por filtração a vácuo e secos em ar no filtro sob pressão reduzida por aproximadamente 4 minutos. Os sólidos foram transferidos para um frasco limpo, resultando em aproximadamente 98% de rendimento.

[00113] Alternativamente, os sólidos do Composto A (5,5987 g) foram combinados com EtOH (330 mL) em uma concentração de 17 mg/mL, resultando em uma pasta. Solução de ácido cítrico 1 M aquosa (1,2 molar equivalentes, 19 mL) foi adicionada à pasta, e nenhuma alteração visível foi observada. As sementes da Forma A de citrato foram adicionadas em carga de 1% de semente (55,6 mg) e nenhuma alteração visível foi observada. A mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente por 3 dias, resultando em uma suspensão branca opaca. Os sólidos foram coletados em um filtro de papel por filtração a vácuo e secos a ar no filtro sob pressão reduzida por aproximadamente 10 min. e os sólidos foram transferidos para um frasco limpo.

[00114] Forma F de tartarato do Composto A - Os sólidos da Forma A de base livre do Composto A (1,002 g) foram combinados com 1,5 molar equivalentes de ácido L-tartárico aquoso (0,6319 g de ácido dissolvido em 12 mL de água) com agitação a ~51 °C, resultando em uma suspensão branca opaca. Uma pequena quantidade de sementes de Forma F de tartarato foi adicionada e a mistura foi deixada agitar a ~51 °C por 1 dia, resultando em uma suspensão branca opaca. Os sólidos foram coletados em um filtro de papel por filtração a vácuo enquanto ainda quentes e secos em ar no filtro sob pressão reduzida por aproximadamente 4 min.

Exemplo 14. Técnicas de cristalização

[00115] As seguintes técnicas de cristalização usadas nos processos de triagem e/ou preparação de sal são descritas em mais detalhe abaixo.

[00116] Resfriamento rápido (FC) - Soluções saturadas de materiais de sal do Composto A dados foram preparadas em um solvente dado em uma temperatura elevada. O frasco foi tampado e colocado na bancada do laboratório para resfriar rapidamente até a temperatura ambiente. Os sólidos foram isolados e analisados.

[00117] Moagem - Quantidades pesadas dos materiais de Composto A dados (por exemplo, base livre de Composto A com ácidos dados) foram transferidas para um recipiente de moagem de ágata. Uma esfera de moagem de ágata e uma pequena quantidade de um solvente dado (se especificado) foram adicionados ao recipiente, que foi então fixado em um moinho Retsch. A mistura foi moída por três ciclos de 10 minutos a 30 Hz, e os sólidos foram raspados das paredes do jarro entre ciclos. Os sólidos resultantes foram transferidos para um frasco limpo e analisados.

[00118] Experimentos de pasta - As suspensões de materiais de Composto A dados (por exemplo, sais preparados ou misturas de base livre de Composto A com vários ácidos) foram preparadas por adicionar sólidos suficiente a um solvente dado ou um sistema de solvente na temperatura mencionada de modo que sólidos não dissolvidos estavam presentes. Onde especificado, sementes de materiais selecionados foram adicionadas. A mistura foi então agitada (tipicamente por agitação ou oscilação) em um frasco vedado nas condições mencionadas por um período de tempo prolongado. Os sólidos foram isolados e analisados.

[00119] Tensão de umidade relativa - Os sólidos de materiais de Composto A dado foram transferidos para um frasco, que foi então destampado e colocado dentro de um jarro contendo uma solução de sulfato de potássio aquosa saturada por ~97% de RH. Experimentos de tensão de umidade relativa foram conduzidos em temperatura ambiente.

[00120] Filtração a vácuo - Os sólidos foram coletados em filtros de náilon ou papel por filtração a vácuo e secos em ar nos filtros sob pressão reduzida brevemente antes de transferir para um frasco.

[00121] Identificação de pico de XRPD - As Figuras 1 até 3, 6 até 7, 9 até 11 e 14 até 17 nesse documento contêm padrões de difração de raio-X, alguns com picos rotulados e/ou tabelas com listas de pico. Picos compreendidos na faixa de até aproximadamente 30° 2θ foram selecionados. Algoritmos de arredondamento foram usados para arredondar cada pico até o 0.01° 2θ mais próximo. A localização dos picos ao longo do eixo x (°2θ) nas duas Figuras e nas listas foram determinadas usando software de propriedade (TRIADSTM v2.0) e arredondados até dois algarismos significativos após o ponto decimal. Variabilidades de posição de pico são dadas até ±0.2° 2θ com base nas recomendações delineadas na discussão de USP de variabilidade em difração de pó de raios-x.

[00122] Para listagens de espaço d, o comprimento de onda usado para calcular espaçamentos d foi 1,5405929Â, e comprimento de onda Cu-Kα1. Variabilidade associada a estimativas de espaçamento-d foi calculada a partir da recomendação de USP, em cada espaçamento-d e fornecida nas tabelas de dados respectivas.

[00123] De acordo com as diretrizes de USP, hidratos e solvatos variáveis podem exibir variâncias de pico maiores que 0,2° 2θ e, portanto, variâncias de pico de 0,2° 2θ não são aplicáveis a esses materiais.

[00124] Se múltiplos padrões de difração estiverem disponíveis, então avaliações de estatísticas de partícula (PS) e/ou orientação preferida (PO) são possíveis. A reprodutibilidade entre padrões de XRPD a partir de múltiplas amostras analisadas em um único difratômetro indica que as estatísticas de partícula são adequadas. A consistência de intensidade relativa entre padrões de XRPD a partir de múltiplos difratômetros indica boa estatística de orientação. Alternativamente, o padrão de XRPD observado pode ser comparado com um padrão de XRPD calculado com base em uma única estrutura de cristal, se disponível. Padrões de dispersão bidimensional usando detectores de área também podem ser usados para avaliar PS/PO. Se os efeitos tanto de PS como PS forem determinados como sendo desprezíveis, então o padrão de XRPD é representativo da intensidade média de pó para a amostra e picos proeminentes podem ser identificados como “Picos representativos”.

[00125] “Picos característicos”, até o ponto em que existem, são um subconjunto de Picos representativos e são usados para diferenciar um polimorfo cristalino do outro polimorfo cristalino (polimorfos sendo formas cristalinas tendo a mesma composição química). Picos característicos são determinados por avaliar quais picos representativos, se algum, estão presentes em um polimorfo cristalino de um Composto contra todos os outros polimorfos cristalinos conhecidos daquele composto para compreendido em ±0,2 °2θ. Nem todos os polimorfos cristalinos de um composto tem necessariamente pelo menos um pico característico.

Exemplo 15. Técnicas instrumentais

[00126] As técnicas instrumentais usadas nos processos de caracterização e triagem de sal são descritas em mais detalhe abaixo.

[00127] Calorimetria de varredura diferencial (DSC) - DSC foi executado usando um calorímetro de varredura diferencial da TA Instruments Q2000. Calibragem de temperatura foi executada usando metal de índio rastreável NIST. Uma amostra foi colocada em um recipiente de DSC de alumínio, coberta com uma tampa e o peso foi precisamente registrado. Um recipiente de alumínio pesado configurado como o recipiente de amostra foi colocado no lado de referência da célula. Os parâmetros de captação de dados e configuração de recipiente para cada termograma são exibidos na imagem na seção de Dados dessa invenção. O código de método no termograma é uma abreviatura para a temperatura de início e término bem como a taxa de aquecimento, por exemplo, -30-250-10 significa “de -30°C a 250°C, a 10°C/min”. A tabela a seguir resume as abreviaturas usadas em cada imagem para configurações de recipiente: Abreviatura (em comentários) Significando T0C recipiente frisado Tzero HS tampa hermeticamente vedada HSLP tampa hermeticamente vedada e perfurada com um orifício a laser C tampa frisada NC Tampa não frisada

[00128] Sorção de vapor dinâmico (DVS) - dados de sorção de vapor dinâmico (DVS) foram coletados em um Analisador de Sorção de Vapor VTI SGA- 100. NaCl e PVP foram usados como padrões de calibragem. Amostras não foram secas antes da análise. Dados de sorção e dessorção foram coletados em uma faixa de 5% a 95% de RH em incrementos de 10% de RH sob uma purga de nitrogênio. O critério de equilíbrio usado para análise foi menor que 0,0100% de alteração de peso em 5 minutos com um tempo de equilíbrio máximo de 3 horas. Os dados não foram corrigidos para o teor de umidade inicial das amostras.

[00129] Microscopia de estágio quente - a microscopia de estágio quente foi executada usando um estágio quente Linkam (FTIR 600) montado em um microscópio Leica DM LP equipado com uma câmera digital a cores SPOT Insight™. Calibragens de temperatura foram realizadas usando padrões de ponto de fusão USP. As amostras foram colocadas em uma cobertura de vidro e uma segunda cobertura de vidro foi colocada no topo da amostra. À medida que o estágio foi aquecido, cada amostra foi visualmente observada usando um 20’ 0,40N. Uma objetiva de distância de trabalho longa com polarizadores cruzados e um compensador vermelho de primeira ordem. Imagens foram capturadas usando software SPOT (v. 4.5.9).

[00130] Microscopia ótica - amostras foram observadas sob um microscópio ótico Wolfe com polarizadores cruzados em objetivos 2’ ou 4’ ou sob um estereomicroscópio Leica com um compensador vermelho de primeira ordem com polarizadores cruzados em objetivas de 0,8x a 10x.

[00131] Espectroscopia 1H NMR de solução - o espectro NMR de solução foi adquirido com um espectrômetro Agilent DD2-400. A amostra foi preparada por dissolver aproximadamente 5-10 mg de amostra em DMSO-d6 contendo TMS. Os parâmetros de captação de dados são exibidos no primeiro gráfico do espectro na seção de Dados dessa invenção. O pico residual de DMSO incompletamente deuterado está em aproximadamente 2,50 ppm. O pico relativamente amplo em aproximadamente 3,3 ppm, se presente, é devido à água.

[00132] Alternativamente, parâmetros de captação de dados são exibidos no primeiro gráfico do espectro na seção de Dados dessa invenção. O pico residual de DMSO incompletamente deuterado está em aproximadamente 2,50 ppm. O pico relativamente amplo em aproximadamente 3,3 ppm, se presente, é devido à água.

[00133] Termogravimetria (TGA) - Análises de TG foram realizadas usando um analisador termogravimétrico de TA Instruments Discovery. A calibragem de temperatura foi executada usando níquel e Alumínio. Cada amostra foi colocada em um recipiente de alumínio e inserida no forno TG. O forno foi aquecido sob uma purga de nitrogênio. Os parâmetros de captação de dados são exibidos acima de cada termograma na seção de Dados dessa revelação. O código de método no termograma é uma abreviatura para a temperatura de início e final bem como a taxa de aquecimento; por exemplo, 25-350-10 significa “de 25 °C a 350 °C, a 10 °C/min”.

[00134] Difração de pó de raios-X (XRPD) - Padrões de XRPD foram coletados com um difratômetro PANalytical X’Pert PRO MPD usando um feixe incidente de radiação de Cu produzida usando uma fonte de foco fino, longo Optix. Um espelho de multicamadas elipticamente graduado foi usado para focar raios-X Cu Kα através do espécime e sobre o detector. Antes da análise, um espécime de silício (NIST SEM 640d) foi analisado para verificar se a posição observada do pico Si 111 é compatível com a posição certificada por NIST. Um espécime da amostra foi encaixado entre filmes com 3 μm de espessura e analisado em geometria de transmissão. Uma extensão anti-dispersão curta, de parada de feixe e borda de faca anti-dispersão foram usados para minimizar o segundo plano gerado por ar. Fendas Soller para os feixes difratados e incidentes foram usadas para minimizar alargamento de divergência axial. Padrões de difração foram coletados usando um detector sensível à posição de varredura (X’Celerator) localizado 240 mm a partir do espécime e software de Coletor de dados v. 2.2b. Os parâmetros de captação de dados para cada padrão são exibidos acima da imagem na seção de Dados dessa revelação incluindo a fenda de divergência (DS) antes do espelho e a fenda anti-dispersão de feixe incidente (SS), se aplicável.

[00135] Alternativamente, padrões de XRPD foram coletados com um difratômetro PANalytical X’Pert PRO MPD usando um feixe incidente de radiação de Cu Kα produzido usando uma fonte de foco fino, longa e um filtro de níquel. O difratômetro foi configurado usando uma geometria Bragg-Brentano simétrica. Antes da análise, um espécime de silício (NIST SEM 640d) foi analisado para verificar se a posição observada do pico Si 111 é compatível com a posição certificada por NIST. Um espécime da amostra foi preparado como uma camada circular, delgada centrada em um substrato de segundo plano zero de silício. Fendas anti-dispersão (SS) foram usadas para minimizar o segundo plano gerado por ar. Fendas Soller para os feixes incidentes e difratados foram usadas para minimizar alargamento de divergência axial. Padrões de difração foram coletados usando um detector sensível a posição de varredura (X’Celerator) localizado 240 mm a partir da amostra e software de Coletor de dados v. 2.2b. Os parâmetros de aquisição de dados para cada padrão são exibidos acima da imagem na seção de Dados dessa invenção incluindo a fenda de divergência (DS) e o feixe incidente SS.

Exemplo 16: Preparação de comprimidos com Composto A e Ácido Tartárico

[00136] Duas bateladas de comprimidos contendo o Composto A e ácido tartárico foram feitas usando granulação úmida seguindo os mesmos procedimentos. A fórmula de batelada e procedimento de preparação foram fornecidos na Tabela 13 que mostra as quantidades de ingredientes usados nas formulações e composições subsequentes de comprimidos na batelada 1 e batelada 2.

Procedimento de preparação para fazer comprimidos da batelada 1 e batelada 2: 1) Todos os ingredientes intragranulares (IG) foram pesados e misturados em um almofariz usando uma espátula por pelo menos 1 minuto. 2) Durante mistura, água foi adicionada lentamente em incrementos de 5% até a obtenção de umidade de granulação apropriada. A quantidade total de água adicionada foi em torno de 20% peso/peso da mistura de ingredientes. 3) A massa úmida foi passada através de um crivo de malha 18 e os grânulos foram coletados e secos em um forno durante a noite a 35°C. 4) Os grânulos coletados foram medidos e as quantidades de cada dos ingredientes extragranulares (EG) foram calculadas de acordo. 5) Os extragranulares Ac-di-sol e Avicel foram pesados e misturados com os grânulos por 2 minutos. 6) O estearato de magnésio foi pesado e misturado com a blenda da etapa 5 por 0,5 minutos. 7) A blenda resultante foi comprimida para fornecer um comprimido usando ferramenta côncava redonda padrão de 3/8” em 400 mg de peso de comprimido. A faixa de peso da blenda para compressão foi de 390 a 410 mg. As forças de compressão foram ajustadas para obter 10 a 15 kp de dureza.

Exemplo 17 - Preparação de comprimidos com Composto A e ácido cítrico

[00137] Os comprimidos contendo Composto A e ácido cítrico foram fabricados usando granulação úmida seguindo um procedimento similar como com os comprimidos de ácido tartárico no Exemplo 16. A fórmula de batelada e procedimento de preparação foram fornecidos na Tabela 14 que mostra as quantidades de ingredientes usados na formulação e composição subsequente de tabletes na batelada 1.

IG - intragranular; EG - extragranular Procedimento de preparação para fabricação de tabletes da batelada 1: 8) Todos os ingredientes intragranulares (IG) foram pesados e misturados em um granulador por pelo menos 1 minuto. 9) Durante mistura, água foi adicionada lentamente em incrementos até a obtenção de umidade de granulação apropriada. A quantidade total de água adicionada foi em torno de 20% peso/peso da mistura de ingredientes. 10) A massa úmida foi seca durante a noite a 25 °C, a seguir em um secador de leito fluido por aproximadamente 40 minutos a 50 °C. 11) Os grânulos foram coletados, moídos e foram medidos e as quantidades de cada dos ingredientes extragranulares (EG) foram calculadas de acordo. 12) Os extragranulares Acdisol e Avicel foram pesados e misturados com os grânulos por 2 minutos. 13) O estearato de magnésio foi pesado e misturado com a blenda da etapa 5 por 0,5 minutos. 14) A blenda resultante foi comprimida para fornecer um comprimido usando ferramenta côncava redonda padrão de 7 mm em 150 mg de peso de comprimido. As forças de compressão foram ajustadas para obter 10 a 15 kp de dureza. 15) Os núcleos dos comprimidos resultantes foram revestidos com um Opadry aquoso em um meio de revestimento de recipiente até obtenção de um ganho de peso de aproximadamente 3 por cento.

Exemplo 18 - Dissolução de comprimidos com Composto A e ácidos cítricos ou tartáricos em pH 6,8

[00138] Os comprimidos usados nesse exemplo foram preparados usando os procedimentos delineados nos Exemplos 16 e 17. Os comprimidos foram feitos até um peso total de ~150 mg com 50 mg de Composto A.

[00139] A tabela 15 mostra as taxas de dissolução de comprimidos contendo Composto A e ácido cítrico, a quantidade equivalente de lactose ou ácido tartárico em 500 mL de solução salina tamponada com fosfato 50 mM, pH 6,8. Cada composição (ácido cítrico, lactose e ácido tartárico) foi testada em três experimentos separados. Tabela 15. Taxas de dissolução

Dissolução citada para cada amostra dos experimentos está em % do Composto A dissolvido.

[00140] Como pode ser visto a partir dos resultados na tabela 15, o Composto A no comprimido de ácido cítrico e o comprimido de ácido tartárico dissolveram mais prontamente do que o comprimido de lactose em pH 6,8.

Exemplo 19 - Teste in vivo de comprimido com Composto A e ácido tartárico

[00141] Os comprimidos da batelada 2 (Exemplo 16, tabela 13) foram usados para realizar esse estudo. Os comprimidos foram administrados por via oral em onze cães. Quatro cães receberam pentagastrina (6 μg/kg) por via intramuscular 30 minutos antes do comprimido. Quatro cães receberam famotidina (40 mg/cão) por via oral 2 horas antes do comprimido. Três cães não receberam tratamento prévio.

[00142] Famotidina inibe produção de ácido estomacal e é usado para elevar o pH gástrico (isto é, para tornar o mesmo mais neutro). Pentagastrina estimula a produção de ácido estomacal e é usado para reduzir o pH gástrico (isto é, para tornar o mesmo mais ácido).

[00143] Os cães foram colocados em jejum durante a noite e cada cão recebeu um único comprimido contendo 150 mg do Composto A. Os cães pesavam aproximadamente 10 kg cada, a taxa de dose alvo era 15 mg/kg.

[00144] Um estudo prévio similar foi realizado usando uma suspensão do Composto A (isto é, com ácido tartárico ou cítrico) e os resultados do presente estudo são comparados com os resultados desse estudo prévio.

[00145] As amostras de sangue foram coletadas pré-dose e a 0,083, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 24, 32 e 48 horas após a dosagem. O sangue foi centrifugado para obter plasma, que foi ensaiado para níveis do Composto A por LC-MS e parâmetros farmacocinéticos foram calculados. Os parâmetros farmacocinéticos foram reportados em concentrações medidas efetivas e também ajustados para o peso de cada cão individual. As concentrações abaixo do limite de detecção (BLQ) foram consideradas como sendo zero para cálculos.

[00146] A tabela 16 mostra os parâmetros farmacocinéticos médios do Composto A no comprimido de ácido tartárico da batelada 2 administrada por via oral aos cães. Tabela 16

[00147] Cães tratados previamente com pentagastrina, famotidina e aqueles que não tiveram tratamento prévio tiveram valores Cax e AUC médios de grupo aproximadamente iguais (Tabela 16).

[00148] Os resultados desse estudo sugerem que a variabilidade de absorção do Composto A devido a diferenças em pH gastrointestinal pode ser superada por formular o Composto A em um comprimido contendo ácido tartárico. É levantada a hipótese que isso se deve às propriedades melhoradas do sal de tartarato formado na formulação contendo ácido tartárico.

[00149] Um técnico no assunto reconheceria prontamente que a presente revelação é bem adaptada para obter as finalidades e vantagens mencionadas, bem como aqueles inerentes na mesma. Os métodos, variâncias e composições descritas na presente invenção como atualmente representativas de modalidades preferidas são exemplificadoras e não pretendem ser limitações do escopo. Alterações nas mesmas e outros usos ocorrerão para aqueles técnicos no assunto, que são abrangidas no espírito da presente invenção, são definidas pelo escopo das reivindicações.

Claims (4)

1. Forma F de tartarato cristalino de 5-(2,4-diamino-pirimidin-5-iloxi)-4- isopropil-2-metoxi-benzenossulfonamida, caracterizada pelo fato de ter picos de difração de pó de raios-X em valores de 2θ de 9,2, 11,2, 12,1, 16,4, 17,7, 18,5, 18,7, 21,7, 22,3, 22,7, 26,5 e 26,8 ± 0,2 graus; tendo adicionalmente termogramas de DSC e TGA mostrando uma etapa de perda de peso inicial de 6,6% em peso entre 27 e 100°C por TGA e uma endoterma ampla por DSC a 125°C.

2. Forma F de tartarato cristalino de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ter adicionalmente dados de ressonância magnética nuclear de próton (NMR) mostrando uma razão de 2:1 de composto A para tartarato.

3. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende a Forma F de tartarato cristalino definida na reivindicação 1 e um carreador farmaceuticamente aceitável.

4. Uso da Forma F de tartarato cristalino definida na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para modular uma condição mediada por um receptor P2X3 ou P2X2/3, em que a condição mediada por um receptor P2X3 ou P2X2/3 é selecionada a partir de tosse, tosse crônica e vontade de tossir.

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