BR112021014361A2

BR112021014361A2 - Composto heteroarila em anel fundido como um inibidor de alk4/5

Info

Publication number: BR112021014361A2
Application number: BR112021014361-0A
Authority: BR
Inventors: Jeongbeob Seo; Moonhwan KIM; Cheolkyu HAN; Cheolhwan Yoon; Jonghwan BAE; Hongjun KANG
Original assignee: Bisichem Co., Ltd.
Priority date: 2019-01-22
Filing date: 2020-01-19
Publication date: 2021-09-28
Also published as: MX2021008678A; KR20210111313A; EP3914594A4; US11932639B2; SG11202107707UA; WO2020153676A1; US20200231591A1; CA3126689C; CN113330012A; AU2020211253B2; EP3914594A1; AU2020211253A1; JP2022538706A; CA3126689A1; JP7335344B2

Abstract

a invenção fornece novos compostos heterocíclicos substituídos representados pela fórmula i, ou sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável dos mesmos, e uma composição compreendendo esses compostos. os compostos fornecidos podem ser usados como inibidores de alk5 e/ou alk4 e são úteis no tratamento de fibrose pulmonar, nash, obesidade, diabetes, cânceres e outras inflamações.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para: “COMPOSTO HETEROARILA EM ANEL FUNDIDO COMO UM INIBIDOR DE ALK4/5” Campo Técnico

[001] Essa invenção se refere a novos compostos heterocíclicos substituídos e ao uso dos mesmos. Além disso, essa invenção se refere a uma composição farmacêutica compreendendo o composto da invenção, o uso do composto na preparação de um medicamento e método de tratamento para doenças hiperproliferativas em mamíferos, especialmente humanos, por administração do composto do mesmo.

Técnica Anterior

[002] Os inibidores do receptor tipo I do fator de transformação do crescimento- (TGF-) (Quinase Semelhante à Ativina 5) e/ou do receptor de ativina tipo I (ALK4) são conhecidos por serem úteis no tratamento de obesidade, diabetes, glomerulonefrite, nefropatia diabética, nefrite lúpica, nefropatia induzida por hipertensão, fibrose intersticial renal, fibrose renal resultante de complicações de exposição a fármacos, nefropatia associada ao HIV, nefropatia de transplante, fibrose hepática devido a todas as etiologias, disfunção hepática atribuível a infecções, hepatite induzida por álcool, NASH (esteato-hepatite não alcoólica), distúrbios da árvore biliar, fibrose pulmonar, lesão pulmonar aguda, síndrome da dificuldade respiratória do adulto, fibrose pulmonar idiopática, doença pulmonar obstrutiva crônica, doença pulmonar devido a agentes infecciosos ou tóxicos, fibrose cardíaca pós-infarto, insuficiência cardíaca congestiva, cardiomiopatia dilatada, miocardite, estenose vascular, remodelação vascular induzida por hipertensão, hipertensão arterial pulmonar, reestenose coronária, reestenose periférica, reestenose carotídea, reestenose induzida por stent, aterosclerose, cicatriz ocular, cicatriz corneana, vitreorretinopatia proliferativa, cicatriz excessiva ou hipertrófica ou formação de queloide na derme ocorrendo durante a cicatrização de feridas resultantes de trauma ou feridas cirúrgicas, adesão peritoneal e subdérmica, esclerodermia, fibrosclerose, esclerose sistêmica progressiva, dermatomiosite, polimiosite, artrite, osteoporose, úlceras, função neurológica prejudicada, disfunção erétil masculina, doença de Peyronie, contratura de Dupuytren, doença de Alzheimer, síndrome de Raynaud, cânceres fibróticos, crescimento de metástase tumoral, fibrose induzida por radiação e trombose.

[003] O fator de transformação do crescimento- (TGF- ) é uma citocina pleiotrópica potente, ubiquamente expressada, que mantém a homeostase fisiológica por meio da regulação de processos celulares, tais como, apoptose, proliferação e diferenciação. A superfamília de TGF- representa um conjunto diversificado de fatores de crescimento, que sinalizam por meio dos receptores serina/treonina quinases. A superfamília é subdividida em duas ramificações: a ramificação de TGF-/Activina e a ramificação de Proteína Morfogenética Óssea (BMP)/Fator de Crescimento e Diferenciação (GDF). Cada ramificação é dividida em subgrupos com base na similaridade de sequência.

A ramificação de TGF-/Activina inclui ligandos TGF-, Activina, Inibina, Nodal e Lefty. A ramificação de BMP/GDF inclui ligandos de BMP, GDF e substância inibitória de Mulleriana (MIS). Quase todas as células secretam TGF- e expressam receptores de TGF-.

[004] Após a ligação do TGF- ativo ao receptor ALK5 e tipo II (TGF-RII), o ALK5 é fosforilado e ativado por TGF- RII. O ALK5, por sua vez, fosforila e ativa R-Smads, Smad2 e Smad3, que formam um complexo com Smad4. Esse complexo se transloca para o núcleo, que se liga ao DNA em conjunto com outros fatores de transcrição e interage com a maquinaria geral de transcrição para regular a expressão de aproximadamente 100- 300 genes alvo. Consistente com os muitos defeitos de desenvolvimento que resultam da sinalização da família TGF- experimentalmente desregulada, alterações moderadas na função da proteína da família TGF- têm sido ligadas a síndromes de desenvolvimento e muitas doenças, incluindo cicatrização prejudicada de feridas, fibrose crônica, doenças cardiovasculares, obesidade, diabetes e câncer.

[005] O TGF- está fortemente implicado em uma variedade de doenças fibrosas (Border WA et al, N Engl J Med. 331 (19): 1286-1292 (1994)). A fibrose ocorre quando há um desequilíbrio na deposição e na degradação da matriz extracelular (MEC). Muitos ligandos de TGF- são motores potentes de deposição de MEC e, adicionalmente, têm afinidade natural para a MEC, criando um agrupamento concentrado de fatores pró-fibróticos no local da lesão (Kelly L et al, Front in Pharm 8:461 (2017)). Em resposta à lesão, o influxo de granulócitos, plaquetas, leucócitos e células parenquimatosas adicionais aumenta a presença de TGF- no local da ferida (Branton MH, et al, Microbes Infect.

1(15):1349-1365 (1999); Border WA et al, N Engl J Med.

331(19):1286-1292(1994)). O TGF- induz então a proliferação de fibroblastos, diferenciação de miofibroblastos e remodelação da matriz extracelular (Branton MH et al, Microbes Infect. 1(15):1349-1365 (1999); Border WA et al, N Engl J Med. 331(19):1286-1292(1994); Xiao L et al, Front Biosci. 17:2667-2674(2012); Roverts AB et al, Proc Natl Acad Sci EUA. 83(12):4167-4171(1986)). Foi demonstrado que os fibroblastos derivados de cicatrizes hipertróficas NÃO apresentam uma alteração na sinalização do TGF-. Estudos indicaram expressão e fosforilação aumentadas de Smads2 e/ou 3 em cicatrizes hipertróficas (Xie JL et al, Dermatol surg.

34(9):1216-1224 (2008); Kopp J et al, J Biol chem.

280(22):21570-6(2005)). A ativação de Smad2/3 regula a expressão de vários genes profibróticos, incluindo colágenos [COL1A1, COL3A1, COL5A2, COL6A1, COL6A3, COL7A1] (Verrecchia F et al, J Biol chem. 276, 17058-17062 (2001)), inibidor do ativador de plasminogênio-1 (PAI-1) (Dennler S et al, EMBO J. 17:3091-3100 (1998); Hua X et al, Genes Dev. 12:3084-3095 (1998)), vários proteoglicanos (Schonherr E et al, J Biol Chem. 266:17640-17647 (1991); Romaris M et al, Biochem J.

310:73-81 (1995); Dadlani H et al, J Biol chem. 283:7844- 7852 (2008)), integrina (Margadant C et al, EMBO Rep. 11:97- 105 (2010)), fator de crescimento do tecido conjuntivo (Chen Y et al, Kidney Int. 62:1149-1159 (2002)), e metaloproteases de matriz (MMPs) (Yuan W et al, J Biol Chem. 276:38502-38510 (2001)). Portanto, a neutralização de TGF- em modelos animais inibe a fibrose hepática e reduz o risco de desenvolver colangiocarcinoma (Fan X et al, PLoS One.

8(12):82190 (2013); Ling H et al, PLoS One. 8(1):e54499 (2013)). O inibidor de ALK5 inibe a transcrição e a deposição da matriz extracelular e melhora a deterioração da função hepática em camundongos (Gouville AC et al, Br J Pharmacol. 145(2):166-77 (2005)). Com base em relatórios anteriores, a sinalização de TGF- parece ser um alvo potencial para a prevenção ou o tratamento de doenças fibróticas. Assim, a inibição direta de ALK5 representa uma forma atraente de prevenir efeitos profibróticos prejudiciais de TGF-. Inibidores sintéticos recentemente descritos de ALK5 mostraram bloquear os efeitos de TGF- em ensaios celulares (Callahan JF et al, J Med Chem. 45:999- 1001 (2002); Inman G et al, Mol Pharmacol. 62:65-74 (2002); Laping N et al, Mol Pharmacol. 62:58-64 (2002); Sawyer JS et al, J Med Chem. 46:3953-3956 (2003)).

[006] Descobertas recentes sobre o papel da sinalização de TGF- via ALK5 na patogênese da obesidade e diabetes tipo 2 ressaltaram sua importância no metabolismo e na adiposidade. De fato, TGF- elevado foi previamente relatado no tecido adiposo humano durante a obesidade mórbida e a neuropatia diabética. Resultados in vivo sobre o papel da sinalização de TGF- no metabolismo com base nos estudos usando camundongos com genes Smad3 inativados (Smad3-/-). A sinalização de TGF- via ALK5 regula a transcrição do gene da insulina nas células  da ilhota pancreática (Lin HM et al, J Biol Chem. 284: 12246-12257 (2009)), enquanto a deficiência de Smad3 em camundongos protege contra a resistência à insulina e diabetes tipo 2 durante a obesidade induzida por dieta rica em gordura (Tan CK et al, Diabetes 60:464-476 (2011); Yadav H et al, Cell Metab.14:67-79 (2011)). Esses camundongos Smad3-/- exibiram adiposidade diminuída com tolerância à glicose e sensibilidade à insulina melhoradas. Esses camundongos mutantes também exibiram oxidação  aumentada no tecido adiposo após a administração de uma dieta rica em gordura, melhorando assim a glucotoxicidade e a lipotoxicidade no pâncreas, músculo esquelético e fígado ao prevenir o acúmulo de gordura ectópica (Tan CK et al, Diabetes. 60:464-476 (2011)).

Notavelmente, quando a sinalização de TGF- bloqueia a fosforilação de Smad3 por tratamento com um anticorpo neutralizante de TGF-, ela protege os camundongos da obesidade e do diabetes tipo 2 (Yadav H et al, Cell Metab.

14:67-79 (2011)). Inibidores de pequenas moléculas da sinalização de TGF- via ALK5 promovem a replicação de células  em ilhotas humanas transplantadas em camundongos NOD-scid IL-2Rgnull (Dhawan S et al, Diabetes. 65(5):1208- 1218 (2016)). Essas verificações indicam que Smad3, o mediador intracelular canônico de TGF-/ALK5, atua como um regulador multifacetado da homeostase metabólica, identificando assim a fosforilação de Smad3 mediada por ALK5 como um alvo potencial no tratamento da obesidade e seus distúrbios associados.

[007] A superexpressão da, e/ou os defeitos na, sinalização de TGF- têm sido associados a muitos cânceres, incluindo câncer de pulmão, pâncreas, cólon, próstata e mama (Eliott RL et al, J clin Oncol. 23:2078-2093 (2005)). Por meio desses estudos, tornou-se claro que o TGF- pode funcionar tanto como supressor do tumor quanto como promotor do tumor (Akhurst RJ et al, Trends Cell Biol. 11(11):44-51 (2011)). Em epitélios benignos e em muitos tumores em estágio inicial, o

TGF- é um potente indutor de interrupção do crescimento. No entanto, em tumores avançados, as vias de sinalização de TGF- são gravemente desreguladas. Em vez de inibir a carcinogênese, o TGF- promove o crescimento e a progressão do tumor em estágios finais (Akhurst RJ et al, Trends Cell Biol.

11(11):S44-51 (2011); Massague J et al, Cell. 134(2):215-230 (2008); Padua D et al, Cell Res. 19(1):89-102 (2009); Inman GJ et al, Curr Opin Genet Dev. 21(1):93-99 (2011); Pasche B et al, J Cell Physiol. 186(2):153-168 (2001); Langenskiold M et al, J Surg Oncol. 97(5):409-415 (2008)). Essa troca funcional é conhecida como paradoxo de TGF-. Também há evidências de que os efeitos supressores versus oncogênicos do tumor do TGF- são contextuais e/ou dependem do estágio temporal da transformação celular. Por exemplo, a expressão do mutante de ALK5 que é incapaz de se ligar a Smad2/3 resulta em tumores mamários maiores, mais proliferativos e menos diferenciados. No entanto, a expressão do mesmo mutante em células mamárias altamente malignas suprime sua capacidade de metástase para os pulmões (Tian F et al, Cancer Res. 64:4523-30 (2004)).

[008] A natureza pluripotente do TGF- oferece oportunidades e desafios para neutralizar seus efeitos. No entanto, muitos cânceres frequentemente se tornam refratários a essa inibição do crescimento devido à perda genética dos componentes de sinalização de TGF- ou, mais comumente, devido à perturbação a jusante por outras vias de sinalização integradas. Durante esse tempo, as ações protumorigênicas de TGF- podem prevalecer, incluindo propriedades imunomoduladoras, indução de angiogênese e/ou promoção da transição epitelial-mesenquimal (TEM) facilitando a migração e a invasão do câncer.

[009] O TGF- tem um efeito adverso na imunidade antitumoral e inibe significativamente a vigilância imunológica do tumor do hospedeiro. O TGF- desempenha um papel crucial na repressão do sistema imunológico, conforme atestado pela autoimunidade bruta desenvolvida em camundongos nulos para TGF-1 (Shull MM et al, Nature.

359(6397):693-699 (1992)). Interessantemente, esse bloqueio específico de células T da sinalização de TGF- permite a geração de linfócitos T citotóxicos específicos de tumor (CTLs) que são capazes de erradicar tumores em camundongos desafiados com timoma EL-4 ou células tumorais de melanoma B16-F10 (Thomas DA et al, Cancer Cell. 8(5):369-380 (2005)).

O TGF- também tem um impacto significativo na diferenciação e na função das células T CD4+ e inibe a proliferação e a função das células NK, que são em parte moduladas pelas células T reguladoras CD4+ CD25+ que são conhecidas por produzirem altos níveis de TGF- (Nakamura et al, J Exp Med.

194(5):629-644 (2001); Ghiringhelli F et al, J Exp Med.

202(8):1075-1085 (2005); Shevach EM et al, Immunity.

30(5):636-645 2009)).

[0010] Um estudo anterior sugeriu os papéis da sinalização de TGF- na angiogênese. A inibição da sinalização de TGF- através de ALK5 resulta em aumento da migração e da proliferação de células endoteliais (CE), que são ainda mais potencializadas na presença de fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) (Liu Z et al, J Cell Sci. 122:3294-3302 (2009)). Foi relatado que as CEs expressam dois ALK5 e ALK1 distintos. A importância desses dois receptores na mediação do desenvolvimento de vasos por TGF- é evidenciada pela letalidade embrionária observada no dia E11.5 e no dia E10.5 em camundongos sem ALK1 (Oh SP et al, Proc Natl Sci EUA.

97:2626-2631 (2000)) ou ALK5 (Larsson J et al, EMBO J. 20:1663- 1673 (2001)), respectivamente. A via canônica SMAD2/3 é ativada por ALK5, induzindo a expressão de PAI-1 e fibronectina, impedindo assim a angiogênese-(Goumans MJ et al, Mol Cell. 12:817-828 (2003); Goumans MJ et al, EMBO J. 21:1743- 1753 (2002); Wu X et al, Microvasc Res. 71:12-19 (2006); Ota T et al, J Cell Physiol. 193:299-318 (2002); Safina A et al, Oncogene 26(17):2407-22 (2007)). A TEM também é marcada pela perda de E-caderina e pela expressão de proteínas mesenquimais, tais como, vimentina, fibronectina e N-caderina, facilitando o processo de invasão e piorando o prognóstico.

Em células cancerígenas, a repressão de E-caderina e a indução de vimentina, metaloproteinases da matriz (MMPs) e outros fatores pró-TEM podem ser impulsionados por TGF- (Lee JM et al, J Cell Biol. 172(7):973-981 (2006); Zhao Y et al, Cell Biochem Funct. 26(5):571-577 (2008)).

[0011] O amplo conhecimento em torno da sinalização dependente de ALK5, mediada por TGF- e fosforilação de Smad2/Smad3 como um evento proximal no complexo receptor heteromérico concentrou os esforços iniciais de descoberta de fármacos no receptor quinase tipo I como um alvo terapêutico (Laping NJ et al, Curr Opin Pharm. 3:204-208 (2003); Singh J et al, Curr Opin Drug Disc Dev. 7:437-445 (2004)). SB-505124, um inibidor competitivo do sítio de ligação de ATP de ALK5, diminui o crescimento em células de câncer pancreático conduzidas por KRAS que carecem de Rb (Gore et al, J Cli Invest. 124(1):338-352 (2014)). LY2157299 (Galunisertib), um inibidor de pequena molécula oral do ALK5 que especificamente regula negativamente a fosforilação de Smad2, anulando a ativação da via canônica. LY2157299 está atualmente nos primeiros ensaios clínicos para o tratamento de cânceres metastáticos avançados (Herbertz et al, Drug Des Devel Ther. 10(9):4479-4499 (2015)). TEW-7197, um inibidor de pequena molécula de ALK5 para terapia anti-mieloma múltiplo, está sendo avaliado em ensaios clínicos de fase I em pacientes com tumores sólidos (NCT02160106).

Divulgação Problema Técnico

[0012] O problema técnico a ser resolvido pela presente invenção é fornecer novos compostos heterocíclicos substituídos.

[0013] Outro problema técnico a ser resolvido pela presente invenção é fornecer novos compostos heterocíclicos substituídos tendo atividade inibidora para ALK5 e/ou ALK4.

[0014] Ainda outro problema técnico a ser resolvido pela presente invenção é fornecer uma composição farmacêutica compreendendo os compostos acima, sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável da mesma e sais da mesma.

[0015] Ainda outro problema técnico a ser resolvido pela presente invenção é fornecer uma composição farmacêutica para prevenir e/ou tratar as doenças associadas com ALK4/5.

Solução para o Problema

[0016] A fim de resolver os problemas acima, a presente invenção fornece um composto de fórmula I, ou sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármacos farmaceuticamente aceitável do mesmo: em que, cada R1 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CF3, acila, amino, amino substituído, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído, haloalquila C1-C6, cicloalquila C3-C7, alquilcarboxi, ciano, nitro e alcoxi; cada R2 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CF3, acila, amino, amino substituído, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído, haloalquila C1-C6, ciano, nitro, alcoxi, aciloxi e ariloxi; m é 0, 1, 2, 3 ou 4; n é 0, 1, 2, 3, 4 ou 5; X é CH ou N; A é -CH2Y-, -CHR3Y-, -CR3R4Y-, -C(O)Y-, -YCH2-, -YCHR3-, -YCR3R4-, ou -YC(O)-, Y é NH, NR5, O, S, S(O) ou S(O)2; R3 é selecionado do grupo que consiste em F, CF3, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído e ciano; ou R3 e R4 juntamente com o átomo ao qual estão ligados formam um anel carbocíclico ou heterocíclico de 3 a 7 membros; R4 é F, CF3 ou alquila C1-C6; e R5 é alquila C1-C6, fluoroalquila C1-C6, difluoroalquila C1-C6 ou trifluoroalquila C1-C6.

[0017] Em uma forma de realização da presente invenção, os compostos de Fórmula I incluem adicionalmente os compostos de configuração absoluta de Fórmula IIa e IIb ou sal dos mesmos, em que;

cada R1 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CF3, acila, amino, amino substituído, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído,

haloalquila C1-C6, cicloalquila C3-C7, alquilcarboxi, ciano,

nitro e alcoxi;

cada R2 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CF3, acila, amino, amino substituído, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído,

haloalquila C1-C6, ciano, nitro, alcoxi, aciloxi e ariloxi;

R3 é selecionado do grupo que consiste em F, CF3, alquila

C1-C6, alquila C1-C6 substituído e ciano;

ou R3 e R4 juntamente com o átomo ao qual estão ligados formam um anel carbocíclico ou heterocíclico de 3 a 7 membros;

R4 é F, CF3 ou alquila C1-C6;

Y é NH, NR5, O, S, S(O) ou S(O)2;

m é 0, 1, 2, 3 ou 4;

n é 0, 1, 2, 3, 4 ou 5;

R5 é alquila C1-C6, fluoroalquila C1-C6, difluoroalquila

C1-C6 ou trifluoroalquila C1-C6.

[0018] Em alguns aspectos, os compostos da presente invenção são inibidores do receptor de fator de transformação do crescimento- (TGF-) tipo I (ALK5) e/ou do receptor de ativina tipo I (ALK4) e, consequentemente, são úteis para o tratamento de fibrose pulmonar, obesidade, diabetes, NASH (esteato-hepatite não alcoólica), cânceres e outras inflamações.

[0019] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada a uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármacos farmaceuticamente aceitável da mesma. Em algumas formas de realização, a composição farmacêutica compreende adicionalmente um carreador, adjuvantes e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em algumas formas de realização, tal composição pode conter pelo menos um de conservantes, agentes para retardar a absorção, cargas, aglutinantes, adsorventes, tampões, agentes desintegrantes, agentes solubilizantes e outros carreadores, adjuvantes e/ou excipientes como ingredientes inertes. A composição pode ser formulada com um método bem conhecido na técnica.

[0020] Em alguns aspectos, a presente invenção é direcionada a um método de tratamento de uma doença em um indivíduo que sofre da referida doença, compreendendo a administração ao referido indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição compreendendo um composto de fórmula I ou um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0021] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada a um método de tratamento de um distúrbio em um mamífero, compreendendo a administração ao referido mamífero de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I ou um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0022] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada a um método de tratamento de um distúrbio em um humano, compreendendo a administração ao referido humano de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I ou um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0023] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada a um método de tratamento de obesidade, diabetes, NASH (esteato-hepatite não alcoólica), câncer, fibrose hepática devido a todas as etiologias, fibrose intersticial renal, fibrose pulmonar, inflamação, certas doenças infecciosas, condição, ou distúrbio em um mamífero, incluindo um humano, compreendendo a administração ao referido mamífero de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula I, ou um sal, éster, pró-fármaco,

solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, tal como, hidrato, polimorfo ou tautômero do mesmo.

[0024] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada a um método de tratamento de um distúrbio ou uma condição que é modulado(a) pelo receptor de tipo I de fator de crescimento transformador (TGF- ) (ALK5) e/ou pelo receptor de ativina tipo I (ALK4) cascata em um mamífero, incluindo um humano, compreendendo a administração ao referido mamífero de uma quantidade do composto de fórmula I, ou de um sal, éster, pró-fármaco, solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, tal como hidrato, polimorfo ou tautômero do mesmo, eficaz para modular a referida cascata. A dosagem apropriada para um determinado paciente pode ser determinada, de acordo com métodos conhecidos, por aqueles habilitados na técnica.

[0025] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada ao uso do composto de fórmula I ou um sal, éster, pró-fármaco, solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, tal como hidrato, polimorfo ou tautômero do mesmo na preparação de uma composição farmacêutica. A composição farmacêutica pode ser usada para tratar um distúrbio ou uma condição que é modulado(a) pela cascata ALK em um mamífero, incluindo um humano. A composição farmacêutica é útil para o tratamento de fibrose pulmonar, obesidade, diabetes, cânceres e outras inflamações.

[0026] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada a uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula I ou um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas formas de realização, a composição farmacêutica está em uma forma adequada para administração oral. Em formas de realização a mais ou adicionais, a composição farmacêutica está na forma de um(a) comprimido, cápsula, pílula, pó, formulação de liberação prolongada, solução e suspensão. Em algumas formas de realização, a composição farmacêutica está em uma forma adequada para injeção parenteral, tal como, uma solução, suspensão ou emulsão estéril; para administração tópica como uma pomada ou um creme ou para administração retal como um supositório.

Em formas de realização a mais ou adicionais, a composição farmacêutica está em formas de dosagem unitária adequadas para administração única de dosagens precisas. Em outras formas de realização a mais ou adicionais, a quantidade de composto de fórmula I está na faixa de cerca de 0,001 a cerca de 1000 mg/kg de peso corporal/dia. Em formas de realização a mais ou adicionais, a quantidade de composto de fórmula I está na faixa de cerca de 0,5 a cerca de 50 mg/kg de peso corporal/dia.

[0027] Em outros aspectos, a presente invenção é direcionada a um processo para preparar um composto de fórmula I ou um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Efeitos Vantajosos da Invenção

[0028] Na presente invenção, novos compostos são fornecidos para inibir ALK4/5. A esse respeito, a presente invenção pode ser usada para prevenir e/ou tratar várias doenças associadas a TGF-, em particular ALK5 e/ou ALK4.

Melhor Modo para Realizar a Invenção

[0029] As novas características da invenção são apresentadas com particularidade nas reivindicações anexas.

Uma melhor compreensão das características e das vantagens da presente invenção será obtida por referência à seguinte descrição detalhada que estabelece formas de realização ilustrativas, nas quais os princípios da invenção são utilizados. Embora formas de realização preferidas da presente invenção tenham sido mostradas e descritas nesse documento, tais formas de realização são fornecidas apenas a título de exemplo. Deve ser entendido que várias alternativas às formas de realização da invenção descritas nesse documento podem ser empregadas na prática da invenção.

Aqueles habilitados comuns na técnica apreciarão que numerosas variações, mudanças e substituições são possíveis sem se afastar da invenção. Pretende-se que as seguintes reivindicações definam o escopo dos aspectos da invenção e que métodos e estruturas dentro do escopo dessas reivindicações e seus equivalentes sejam cobertos pelas mesmas. Os títulos das seções usados nesse documento são apenas para fins organizacionais e não devem ser interpretados como limitando o assunto descrito. Todos os documentos, ou partes de documentos citados no pedido, incluindo, sem limitação, patentes, pedidos de patentes, artigos, livros, manuais e tratados são expressamente incorporados por referência em sua totalidade para qualquer finalidade.

[0030] A menos que definido de outra forma, todos os termos técnicos e científicos usados nesse documento têm o mesmo significado que é comumente entendido por alguém habilitado na técnica à qual o assunto reivindicado pertence.

Todas as patentes, os pedidos de patentes, os materiais publicados referidos ao longo de toda a divulgação nesse documento, a menos que indicado de outra forma, são incorporados por referência em sua totalidade. No caso de haver uma pluralidade de definições para os termos nesse documento, aquelas nessa seção prevalecem. Quando é feita referência a um URL ou outro identificador ou endereço, entende-se que tais identificadores podem mudar e informações específicas na Internet podem ir e vir, mas informações equivalentes podem ser encontradas pesquisando na Internet ou em outra fonte de referência apropriada. A referência a isso evidencia a disponibilidade e a divulgação pública de tais informações.

[0031] Deve ser entendido que a descrição geral anterior e a descrição detalhada a seguir são exemplificativas e explicativas apenas e não são restritivas de qualquer assunto reivindicado. Nesse pedido, o uso do singular inclui o plural, a menos que especificamente indicado de outra forma. Deve ser notado que, como usado no relatório descritivo e nas reivindicações em anexo, as formas singulares “um”, “uma” e “o/a” incluem referentes plurais, a menos que o contexto dite claramente o contrário. Deve ser notado também que o uso de “ou” significa “e/ou” a menos que indicado de outra forma. Além disso, o uso do termo “incluindo”, bem como outras formas, como “incluem”, “inclui” e “incluído” não é limitante. Da mesma forma, o uso do termo “compreendendo”, bem como outras formas, tais como “compreendem”, “compreende” e “compreendido” não é limitante.

[0032] A definição de termos de química padrão pode ser encontrada em obras de referência, incluindo Carey e Sundberg “ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4a ED.” Vols. A (2000) e B (2001), Plenum Press, Nova Iorque. Salvo indicação em contrário, são empregados métodos convencionais de espectroscopia de massa, RMN, HPLC, IV e espectroscopia de UV/Vis e farmacologia, dentro da habilidade da técnica. A menos que definições específicas sejam fornecidas, a nomenclatura empregada em conexão com, e os procedimentos e técnicas laboratoriais de, química analítica, química orgânica sintética e química medicinal e farmacêutica descritos nesse documento são aqueles conhecidos na técnica.

As técnicas padrão podem ser usadas para sínteses químicas, análises químicas, preparação farmacêutica, formulação e ministração e tratamento de pacientes. As reações e técnicas de purificação podem ser realizadas, por exemplo, usando kits de especificações do fabricante ou como comumente realizado na técnica ou como descrito nesse documento. As técnicas e os procedimentos anteriores podem ser geralmente realizados de métodos convencionais bem conhecidos na técnica e como descritos em várias referências gerais e mais específicas que são citadas e discutidas ao longo do presente relatório descritivo. Ao longo do relatório descritivo, grupos e substituintes dos mesmos podem ser escolhidos por uma técnica na área para fornecer porções e compostos estáveis.

[0033] Quando os grupos substituintes são especificados por suas fórmulas químicas convencionais, escritas da esquerda para a direita, eles abrangem igualmente os substituintes quimicamente idênticos que resultariam da escrita da estrutura da direita para a esquerda. Como um exemplo não limitativo, CH2O é equivalente a OCH2.

[0034] Salvo indicação em contrário, o uso de termos químicos gerais, tais como, embora não se limitando a “alquila”, “amina”, “arila”, são equivalentes às suas formas opcionalmente substituídas. Por exemplo, “alquila”, como usado nesse documento, inclui alquila opcionalmente substituído.

[0035] Os compostos apresentados nesse documento podem possuir um ou mais de estereocentros e cada centro pode existir na configuração R ou S, ou combinações dos mesmos.

Da mesma forma, os compostos apresentados nesse documento podem possuir uma ou mais de ligações duplas e cada um pode existir na configuração E (trans) ou Z (cis), ou combinações das mesmas. A apresentação de um estereoisômero, regioisômero, diastereômero, enantiômero ou epímero particular deve ser entendida como incluindo todos os estereoisômeros, regioisômeros, diastereômeros, enantiômeros ou epímeros possíveis e misturas dos mesmos.

Assim, os compostos apresentados nesse documento incluem todas as formas estereoisoméricas, regioisoméricas, diastereoméricas, enantioméricas e epiméricas configuracionais separadas, bem como as misturas correspondentes das mesmas. As técnicas para inverter ou deixar inalterado um estereocentro particular e aquelas para resolver misturas de estereoisômeros são bem conhecidas na técnica e está dentro da capacidade de um versado na técnica escolher um método apropriado para uma situação particular.

Ver, por exemplo, Fumiss et al. (eds.), VOGEL'S ENCYCLOPEDIA OF PRACTI-CAL ORGANIC CHEMISTRY 5a ED., Longman Scientific and Technical Ltd., Essex, 1991, 809-816; e Heller, Acc.

Chem. Res. 1990, 23, 128.

[0036] O termo “ligação” ou “ligação simples” se refere a uma ligação química entre dois átomos, ou duas porções, quando os átomos unidos pela ligação são considerados parte de uma subestrutura maior. O termo “opcional” ou “opcionalmente” significa que o evento ou a circunstância subsequentemente descrito(a) pode ou não ocorrer, e que a descrição inclui casos em que tal evento ou circunstância ocorre e casos em que não ocorre. Por exemplo, “alquila opcionalmente substituído” significa “alquila” ou “alquila substituído” conforme definido abaixo. Além disso, um grupo opcionalmente substituído pode ser não substituído (por exemplo, CH2CH3), totalmente substituído (por exemplo, CF2CF3), monossubstituído (por exemplo, CH2CH2F) ou substituído em um nível em qualquer lugar entre totalmente substituído e monossubstituído (por exemplo, CH2CHF2, CF2CH3, CFHCHF2, etc). Será entendido por aqueles habilitados na técnica em relação a qualquer grupo contendo um ou mais de substituintes que tais grupos não se destinam a introduzir qualquer substituição ou quaisquer padrões de substituição (por exemplo, alquila substituído inclui grupos cicloalquila opcionalmente substituídos, que por sua vez são definidos como incluindo grupos alquila opcionalmente substituídos, potencialmente ad infinitum) que são estericamente impraticáveis e/ou sinteticamente inviáveis. Assim, quaisquer substituintes descritos devem geralmente ser entendidos como tendo um peso molecular máximo de cerca de

1.000 daltons e, mais tipicamente, até cerca de 500 daltons (exceto nos casos em que substituintes macromoleculares são claramente pretendidos, por exemplo, polipeptídeos, polissacarídeos, polietilenoglicóis, DNA, RNA e semelhantes).

[0037] Como usado nesse documento, C1-Cn, inclui C1-C2, C1-C3, ... C1-Cn. A título de exemplo apenas, um grupo designado como “C1-C4” indica que há um a quatro átomo(s) de carbono na porção, isto é, grupos contendo 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono ou 4 átomos de carbono, bem como as faixas de C1-C2 e C1-C3. Assim, a título de exemplo apenas, “alquila C1-C4” indica que há um a quatro átomo(s) de carbono no grupo alquila, isto é, o grupo alquila é selecionado dentre metila, etila, propila, iso- propila, n-butila, isobutila, sec-butila e t-butila. Sempre que aparece nesse documento, uma faixa numérica tal como “1 a 10” se refere a cada número inteiro na faixa dada; por exemplo, “1 a 10 átomos de carbono” significa que o grupo pode ter 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, 4 átomos de carbono, 5 átomos de carbono, 6 átomos de carbono, 7 átomos de carbono, 8 átomos de carbono, 9 átomos de carbono ou 10 átomos de carbono.

[0038] Os termos “heteroátomo” ou “hetero”, como usados nesse documento, sozinhos ou em combinação, se referem a um átomo diferente de carbono e hidrogênio. Os heteroátomos são selecionados independentemente de oxigênio, nitrogênio, enxofre, fósforo, silício, selênio e estanho, mas não estão limitados a esses átomos. Em formas de realização nas quais dois ou mais de heteroátomos estão presentes, os dois ou mais heteroátomos podem ser iguais entre si, ou alguns ou todos os dois ou mais heteroátomos podem ser diferentes uns dos outros.

[0039] O termo “alquila”, como usado nesse documento, sozinho ou em combinação, se refere a um hidrocarboneto saturado de cadeia linear opcionalmente substituído ou de cadeia ramificada opcionalmente substituído tendo de um a cerca de dez átomo(s) de carbono, mais de preferência, de um a seis átomo(s) de carbono. Exemplos incluem, mas não estão limitados a metila, etila, n-propila, isopropila, 2-metil- l-propila, 2-metil-2-propila, 2-metil-l-butila, 3-metil-l- butila, 2-metil-3-butila, 2,2-dimetil-l-propila, 2-metil-l- pentila, 3-metil-1-pentila, 4-metil-l-pentila, 2-metil-2- pentila, 3-metil-2-pentila, 4-metil-2-pentila, 2,2-dimetil- l-butila, 3,3-dimetil-1-butila, 2-etil-l-butila, n-butila, isobutila, sec-butila, t-butila, n-pentila, isopentila, neo-

pentila, terc-amila e hexila, e grupos alquila mais longos, tais como heptila, octila e semelhantes. Sempre que aparece nesse documento, uma faixa numérica, tal como “alquila C1- C6” ou “alquila C1-6”, significa que o grupo alquila pode consistir em 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, 4 átomos de carbono, 5 átomos de carbono ou 6 átomos de carbono, embora a presente definição também cubra a ocorrência do termo “alquila” onde nenhuma faixa numérica é designada.

[0040] O termo “alifático” como usado nesse documento, sozinho ou em combinação, se refere a um hidrocarboneto não aromático opcionalmente substituído, de cadeia linear ou ramificada, não cíclico, saturado, parcialmente insaturado ou totalmente insaturado. Assim, o termo coletivamente inclui grupos alquila, alquenila e alquinila.

[0041] Os termos “ciclo”, “cíclico”, “anel” e “anel com membros”, como usados nesse documento, sozinhos ou em combinação, se referem a qualquer estrutura covalentemente fechada, incluindo sistemas de anel alicíclicos, heterocíclicos, aromáticos, heteroaromáticos e policíclicos fundidos ou não fundidos como descritos nesse documento. Os anéis podem ser opcionalmente substituídos. Os anéis podem fazer parte de um sistema de anéis fundidos. O termo “com membros” pretende denotar o número de átomos do esqueleto que constituem o anel. Assim, a título de exemplo apenas,

ciclo-hexano, piridina, pirano e pirimidina são anéis de seis membros e ciclopentano, pirrol, tetra-hidrofurano e tiofeno são anéis de cinco membros.

[0042] O termo “cicloalquila”, como usado nesse documento, sozinho ou em combinação, se refere a um anel monorradical de hidrocarboneto opcionalmente substituído, saturado, contendo de três a cerca de quinze átomos de carbono no anel ou de três a cerca de dez átomos de carbono no anel, embora possa incluir átomos de carbono fora do anel adicionais como substituintes (por exemplo, metilciclopropila).

[0043] Um exemplo não limitativo de “cicloalquila” inclui azinila, azetidinila, oxetanila, tietanila homopiperidinila, oxepanila, tipanila, oxazepinila, diazepinila, tiazepinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, 2- pirrolinila, 3-pirrolinila, 2H-piranila, 4H-piranila dioxanila, 1,3-dioxolanila, pirazolinila, ditianila, ditiolanila, di-hidropiranila, di-hidrotienila, di- hidrofuranila, pirazolidinila, imidazolinila, imidazolidinila, 3-azabiciclo[[3.1.0]hexila, 3- azabiciclo[4.1.0]heptila, 3H-indolila e quinolizinila e semelhantes. Os termos também incluem todas as formas de anel dos carboidratos, incluindo, mas não se limitando aos monossacarídeos, dissacarídeos e oligossacarídeos.

[0044] O termo “aromático”, como usado nesse documento,

se refere a uma porção de anel planar, cíclico ou policíclico, tendo um sistema de elétrons deslocalizado contendo 4n+2 n elétrons, em que n é um número inteiro. Os anéis aromáticos podem ser formados por cinco, seis, sete, oito, nove ou mais de nove átomos. Os aromáticos podem ser opcionalmente substituídos e podem ser monocíclicos ou policíclicos de anel fundido. O termo aromático abrange todos os anéis contendo carbono (por exemplo, fenila) e aqueles anéis contendo um ou mais heteroátomo(s) (por exemplo, piridina).

[0045] O termo “inibidor de ALK”, como usado nesse documento, se refere a um composto que exibe um IC50, em relação à atividade de ALK, de não mais do que cerca de 100 M ou não mais do que cerca de 50 M, como medido no ensaio de quinase descrito geralmente nesse documento. “IC50” é a concentração de inibidor que reduz a atividade de uma enzima para metade do nível máximo. Verificou-se que os compostos descritos nesse documento exibem inibição contra ALK. Os compostos da presente invenção exibem, de preferência, um IC50 em relação ao ALK de não mais do que cerca de 10 M, mais de preferência, não mais do que cerca de 5 M, ainda mais de preferência não mais do que cerca de 1 M, e mais de preferência, não mais do que cerca de 200 nM, como medido no ensaio de quinase descrito nesse documento.

[0046] O termo “seletivo”, “seletivamente” ou

“seletividade”, como usado nesse documento, se refere a um composto dessa invenção com um valor de IC50 inferior para a enzima em comparação com quaisquer outras enzimas (por exemplo, pelo menos 2, 5, 10 ou mais vezes inferior).

[0047] O termo “indivíduo”, “paciente” ou “ser”, conforme usado nesse documento em referência a seres que sofrem de um distúrbio, uma condição e semelhantes, abrange mamíferos e não mamíferos. Exemplos de mamíferos incluem, mas não estão limitados a, qualquer membro da classe dos mamíferos: humanos, primatas não humanos, tais como, chimpanzés, e outras espécies de macacos grandes e macacos; animais de fazenda, tais como, gado, cavalos, ovelhas, cabras, porcos; animais domésticos, tais como coelhos, cães e gatos; animais de laboratório, incluindo roedores, tais como, ratos, camundongos e porquinhos-da-índia e semelhantes. Exemplos de não mamíferos incluem, mas não estão limitados a, pássaros, peixes e semelhantes. Em uma forma de realização dos métodos e composições fornecidos nesse documento, o mamífero é um humano.

[0048] Os termos “tratar”, “tratando” ou “tratamento” e outros equivalentes gramaticais, como usados nesse documento, incluem aliviar, atenuar ou melhorar os sintomas de uma doença ou condição, prevenir sintomas adicionais, melhorar ou prevenir as causas metabólicas subjacentes dos sintomas, inibir a doença ou condição, por exemplo,

interromper o desenvolvimento da doença ou condição, aliviar a doença ou condição, causar a regressão da doença ou condição, aliviar uma condição causada pela doença ou condição ou interromper os sintomas da doença ou condição, e pretendem incluir profilaxia. Os termos incluem adicionalmente alcançar um benefício terapêutico e/ou um benefício profilático. Por benefício terapêutico entende-se a erradicação ou melhoria do distúrbio subjacente a ser tratado. Além disso, um benefício terapêutico é alcançado com a erradicação ou melhoria de um ou mais dos sintomas fisiológicos associados ao distúrbio subjacente, de modo que uma melhora seja observada no paciente, não obstante o paciente ainda poder sofrer do distúrbio subjacente. Para benefício profilático, as composições podem ser administradas a um paciente em risco de desenvolver uma doença específica, ou a um paciente que relata um ou mais dos sintomas fisiológicos de uma doença, mesmo que um diagnóstico desta doença possa não ter sido feito.

[0049] Os termos “quantidade eficaz”, “quantidade terapeuticamente eficaz” ou “quantidade farmaceuticamente eficaz”, como usados nesse documento, se referem a uma quantidade suficiente de pelo menos um agente ou composto a ser administrado que irá aliviar até certo ponto um ou mais dos sintomas da doença ou condição em tratamento. O resultado pode ser a redução e/ou o alívio dos sinais, sintomas ou causas de uma doença, ou qualquer outra alteração desejada de um sistema biológico. Por exemplo, uma “quantidade eficaz” para usos terapêuticos é a quantidade da composição que compreende um composto como divulgado nesse documento, necessário para fornecer uma diminuição clinicamente significativa em uma doença. Uma quantidade “eficaz” apropriada em qualquer caso individual pode ser determinada usando técnicas, tal como um estudo de escalonamento de dose.

[0050] Os termos “administrar”, “administrando”, “administração” e semelhantes, como usados nesse documento, se referem aos métodos que podem ser usados para permitir a dispensação de compostos ou composições ao local desejado de ação biológica. Esses métodos incluem, mas não estão limitados a, administração vias orais, vias intraduodenais, injeção parenteral (incluindo intravenosa, subcutânea, intraperitoneal, intramuscular, intravascular ou infusão), administrações tópica e retal. Os habilitados na técnica estão familiarizados com as técnicas de administração que podem ser empregadas com os compostos e métodos descritos nesse documento, por exemplo, como discutido em Goodman e Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, current ed.; Pergamon; e Remington's, Pharmaceutical Sciences (edição atual), Mack Publishing Co., Easton, Pa. Em formas de realização preferidas, os compostos e as composições descritos nesse documento são administrados por via oral.

[0051] O termo “aceitável” como usado nesse documento, em relação a uma formulação, uma composição ou um ingrediente, significa não ter nenhum efeito prejudicial persistente na saúde geral do indivíduo a ser tratado.

[0052] O termo “farmaceuticamente aceitável”, como usado nesse documento, se refere a um material, tal como um carreador ou diluente, que não anula a atividade biológica ou propriedades dos compostos descritos nesse documento e é relativamente não tóxico, isto é, o material pode ser administrado a um indivíduo sem causar efeitos biológicos indesejáveis ou interagir de forma deletéria com qualquer um dos componentes da composição em que está contido.

[0053] O termo “composição farmacêutica”, como usado nesse documento, se refere a um composto biologicamente ativo, opcionalmente misturado com pelo menos um componente químico farmaceuticamente aceitável, tal como, embora não limitado a carreadores, estabilizantes, diluentes, agentes dispersantes, agentes de suspensão, agentes espessantes e/ou excipientes.

[0054] O termo “carreador”, como usado nesse documento, se refere a compostos ou agentes químicos relativamente não tóxicos que facilitam a incorporação de um composto nas células ou tecidos.

[0055] O termo “agonista”, como usado nesse documento, se refere a uma molécula tal como um composto, um fármaco,

um ativador enzimático ou um modulador hormonal que potencializa a atividade de outra molécula ou a atividade de um sítio receptor.

[0056] O termo “antagonista”, como usado nesse documento, se refere a uma molécula, tal como um composto, um fármaco, um inibidor de enzima ou um modulador de hormônio, que diminui ou evita a ação de outra molécula ou a atividade de um sítio receptor.

[0057] O termo “modular”, como usado nesse documento, significa interagir com um alvo direta ou indiretamente de modo a alterar a atividade do alvo, incluindo, a título de exemplo apenas, para potencializar a atividade do alvo, para inibir a atividade do alvo, para limitar a atividade do alvo ou para estender a atividade do alvo.

[0058] O termo “modulador”, como usado nesse documento, se refere a uma molécula que interage com um alvo direta ou indiretamente. As interações incluem, mas não estão limitadas a, as interações de um agonista e um antagonista.

[0059] O termo “sal farmaceuticamente aceitável”, como usado nesse documento, se refere a sais que retêm a eficácia biológica dos ácidos e bases livres do composto especificado e que não são biologicamente ou de outra forma indesejáveis.

Os compostos descritos nesse documento podem possuir grupos ácidos ou básicos e, portanto, podem reagir com qualquer uma de uma série de bases inorgânicas ou orgânicas e ácidos inorgânicos e orgânicos, para formar um sal farmaceuticamente aceitável. Esses sais podem ser preparados in situ durante o isolamento e a purificação finais dos compostos da invenção, ou reagindo separadamente um composto purificado na sua forma de base livre com um ácido orgânico ou inorgânico adequado e isolando o sal assim formado.

Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem aqueles sais preparados pela reação dos compostos descritos nesse documento com um ácido mineral ou orgânico ou uma base inorgânica, tais sais incluindo acetato, acrilato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, benzenossulfonato, bissulfato, bissulfito, brometo, butirato, butin-1,4-dioato, canforato, canforossulfonato, caprilato, clorobenzoato, cloreto, citrato, ciclopentanopropionato, decanoato, digluconato, dihidrogenofosfato, dinitrobenzoato, dodecilssulfonato, etanossulfonato, formiato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, glicolato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, hexino-1,6-dioato, hidroxibenzoato, hidroxibutirato, cloridrato, bromidrato, iodidrato, 2- hidroxietanossulfonato, iodeto, isobutirato, lactato, maleato, malonato, metanossulfonato, mandelato, metafosfato, metoxibenzoato, metilbenzoato, monohidrogenofosfato, 1- naftalenossulfonato, 2-naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, palmoato, pectinato, perssulfato, 3- fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato,

pirossulfato, pirofosfato, propiolato, ftalato, fenilacetato, fenilbutirato, propanossulfonato, salicilato, succinato, sulfato, sulfito, suberato, sebacato, sulfonato, tartarato, tiocianato, tosilato undeconato e xilenossulfonato. Outros ácidos, tal como o oxálico, embora não sejam eles próprios farmaceuticamente aceitáveis, podem ser empregados na preparação de sais úteis como intermediários na obtenção dos compostos da invenção e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis (ver exemplos em Berge et al., J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19.).

Além disso, os compostos descritos nesse documento que podem compreender um grupo de ácido livre podem reagir com uma base adequada, tal como o hidróxido, carbonato ou bicarbonato de um cátion de metal farmaceuticamente aceitável, com amônia ou com uma amina orgânica primária, secundária ou terciária farmaceuticamente aceitável. Sais alcalinos ou alcalino- terrosos representativos incluem os sais de lítio, sódio, potássio, cálcio, magnésio e alumínio e semelhantes.

Exemplos ilustrativos de bases incluem hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de colina, carbonato de sódio e semelhantes. Aminas orgânicas representativas úteis para a formação de sais de adição de base incluem etilamina, dietilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina e semelhantes. Deve ser entendido que os compostos descritos nesse documento também incluem a quaternização de quaisquer grupos contendo nitrogênio básico que eles possam conter. Produtos solúveis ou dispersíveis em água ou óleo podem ser obtidos por tal quaternização. Ver, por exemplo, Berge et al., supra.

[0060] O termo “solvato”, como usado nesse documento, se refere a uma combinação de um composto dessa invenção com uma molécula de solvente formada por solvatação. Em algumas situações, o solvato se refere a um hidrato, isto é, a molécula de solvente é uma molécula de água, a combinação de um composto dessa invenção e água forma um hidrato.

[0061] O termo “polimorfo” ou “polimorfismo”, como usado nesse documento, se refere a um composto dessa invenção presente em diferentes formas de rede cristalina.

[0062] O termo “éster”, como usado nesse documento, se refere a um derivado de um composto dessa invenção derivado de um grupo oxoácido e um grupo hidroxila, qualquer um dos quais pode estar presente no composto dessa invenção.

[0063] O termo “tautômero”, como usado nesse documento, se refere a um isômero facilmente interconvertido a partir de um composto dessa invenção, por exemplo, migração de um átomo de hidrogênio ou próton.

[0064] O termo “derivado ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável”, como usado nesse documento, se refere a qualquer sal, éster, sal de um éster ou outro derivado farmaceuticamente aceitável de um composto dessa invenção, que, após administração a um receptor, é capaz de fornecer, direta ou indiretamente, um composto dessa invenção ou um metabólito ou resíduo farmaceuticamente ativo do mesmo. Derivados ou pró-fármacos particularmente favorecidos são aqueles que aumentam a biodisponibilidade dos compostos dessa invenção quando tais compostos são administrados a um paciente (por exemplo, permitindo que o composto administrado oralmente seja mais prontamente absorvido no sangue) ou que potencializam a ministração do composto precursor a um compartimento biológico (por exemplo, o cérebro ou sistema linfático).

[0065] Os pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis dos compostos descritos nesse documento incluem, mas não estão limitados a, ésteres, carbonatos, tiocarbonatos, derivados de N-acila, derivados N-aciloxialquila, derivados quaternários de aminas terciárias, bases de N-Mannich, bases de Schiff, conjugados de aminoácidos, ésteres de fosfato, sais de metal e ésteres de sulfonato. Várias formas de pró- fármacos são bem conhecidas na técnica. Ver, por exemplo, Design of Prodrugs, Bundgaard, A. Ed., Elseview, 1985 e Method in Enzymology, Widder, K. et al., Ed.; Academic, 1985, vol. 42, págs. 309-396; Bundgaard, H. "Design and Application of Prodrugs" em A Textbook of Drug Design and Development, Krosgaard-Larsen e H. Bund-gaard, Ed., 1991, Capítulo 5, págs. 113-191; e Bundgaard, H., Advanced Drug Delivery

Review, 1992, 8, 1-38, cada um dos quais é incorporado nesse documento por referência. Os pró-fármacos descritos nesse documento incluem os, mas não estão limitados aos, seguintes grupos e combinações desses grupos; pró-fármacos derivados de amina: Pró-Fármacos de hidroxi incluem, mas não estão limitados a, ésteres de aciloxialquila, ésteres de alcoxicarboniloxialquila, ésteres de alquila, ésteres de arila e ésteres contendo dissulfeto.

[0066] Os termos “pontecializar” ou “pontecializando”, como usados nesse documento, significam aumentar ou prolongar a potência ou a duração de um efeito desejado.

Assim, no que se refere à potencialização do efeito de agentes terapêuticos, o termo “potencialização” se refere à capacidade de aumentar ou prolongar, seja em potência ou duração, o efeito de outros agentes terapêuticos em um sistema.

[0067] Uma “quantidade eficaz para pontecialização”, como usada nesse documento, se refere a uma quantidade adequada para potencializar o efeito de outro agente terapêutico em um sistema desejado.

[0068] Os termos “combinação farmacêutica”, “administração de uma terapia adicional”, “administração de um agente terapêutico adicional” e semelhantes, como usados nesse documento, se referem a uma terapia farmacêutica resultante da mistura ou combinação de mais de um ingrediente ativo e inclui combinações tanto fixas como não fixas dos ingredientes ativos. O termo “combinação fixa” significa que pelo menos um dos compostos descritos nesse documento, e pelo menos um coagente, são ambos administrados a um paciente simultaneamente na forma de uma única entidade ou dosagem.

O termo “combinação não fixa” significa que pelo menos um dos compostos descritos nesse documento, e pelo menos um coagente, são administrados a um paciente como entidades separadas simultaneamente, concorrentemente ou sequencialmente com limites de tempo intermediários variáveis, em que tal administração fornece níveis eficazes de dois ou mais de compostos no corpo do paciente. Esses também se aplicam a coquetéis terapêuticos, por exemplo, a administração de três ou mais ingredientes ativos.

[0069] Os termos “coadministração”, “administrado em combinação com” e seus equivalentes gramaticais ou semelhantes, como usados nesse documento, pretendem abranger a administração dos agentes terapêuticos selecionados a um único paciente e pretendem incluir regimes de tratamento nos quais os agentes são administrados pela mesma ou diferente via de administração ou ao mesmo tempo ou em momentos diferentes. Em algumas formas de realização, os compostos descritos nesse documento serão coadministrados com outros agentes. Esses termos abrangem a administração de dois ou mais agentes a um animal de modo que ambos os agentes e/ou seus metabólitos estejam presentes no animal ao mesmo tempo.

Eles incluem a administração simultânea em composições separadas, administração em momentos diferentes em composições separadas e/ou administração em uma composição em que ambos os agentes estão presentes. Assim, em algumas formas de realização, os compostos da invenção e o(s) outro(s) agente(s) são administrados em uma única composição.

[0070] O termo “metabólito”, como usado nesse documento, se refere a um derivado de um composto que é formado quando o composto é metabolizado.

[0071] O termo “metabólito ativo”, como usado nesse documento, se refere a um derivado biologicamente ativo de um composto que é formado quando o composto é metabolizado.

[0072] O termo “metabolizado”, como usado nesse documento, se refere à soma dos processos (incluindo, mas não se limitando a, reações de hidrólise e reações catalisadas por enzimas) pelos quais uma substância particular é alterada por um organismo. Assim, as enzimas podem produzir alterações estruturais específicas em um composto. Por exemplo, o citocromo P450 catalisa uma variedade de reações oxidativas e redutivas enquanto as uridina difosfato glucuroniltransferases catalisam a transferência de uma molécula de ácido glucurônico ativado para álcoois aromáticos, álcoois alifáticos, ácidos carboxílicos, aminas e grupos sulfidrila livres. Mais informações sobre o metabolismo podem ser obtidas em The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9ª edição, McGraw- Hill (1996).

[0073] Os espectros de RMN foram registrados em solução de CDCl3 e DMSO-d6 em tubos de d.e. de 5 mm (Norell, Inc.

507-HP) a 25 C e foram coletados em VNMRS-400 Varian a 400 MHz para 1H. Os desvios químicos () são relativos ao tetrametilssilano (TMS = 0,00 ppm) e expressados em ppm.

LC/MS foi obtido no Espectrômetro de Massa de Captação de íons no FINNIGAN Thermo LCQ Advantage MAX, Agilent LC série 1200 (Coluna: YMC Hydrosphere (C18, Ø4,6 x 50 mm, 3 m, 120 Å, 40 C) operando em modo de ionização ESI(+); vazão = 1,0 ml/min. Fase móvel = 0,01% de ácido heptafluorobutírico (HFBA) e 1,0% de álcool isopropílico (IPA) em água ou CH3CN.

Intermediário 1: pirazol[1,5-a]piridina-5-carbaldeído Etapa A:

2,4,6-trimetilbenzenossulfonato de 1-amino-4- (hidroximetil)piridínio

[0074] A uma solução de N- mesitilssulfoniloxiacetimidato de (Z)-etila (1,96 g, 6,87 mmol) em dioxano (4,0 ml) foi adicionado HClO4 (solução de 70% em peso em água, 0,717 ml, 8,43 mmol) a 0 C. A mistura foi agitada a 0 C por 30 minutos e tratada com água gelada.

Um sólido precipitado foi coletado para proporcionar O- (metilSsulfonil)hidroxilamina como um sólido branco, que foi dissolvido em DCM (21 ml), seco em Na2SO4 e filtrado para obter uma solução de O-(metilsulfonil)hidroxilamina em DCM.

A solução foi adicionada a uma solução de piridina-4- ilmetanol (500 mg, 4,58 mmol) em DCM (21 ml) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 6 horas e depois concentrada in vacuo. O sólido residual foi colocado em suspensão em éter dietílico, coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco sob vácuo para obter 2,4,6-trimetilbenzenossulfonato de 1-amino- 4-(hidroximetil)piridínio (1,49 g, 100%) como um sólido amarelo. MS: 124,99[M+H]+ Etapa B: 5-(hidroximetil)pirazol[1,5-a]piridina-3-

carboxilato de etila

[0075] A uma solução de 2,4,6-trimetilbenzenossulfonato de 1-amino-4-(hidroximetil)piridínio (1,49 g, 4,59 mmol) em DMF (15 ml) foi adicionado K2CO3 (1,27 g, 9,16 mmol) e propiolato de etila (541 mg, 5,51 mmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. Depois de extinta com água, a mistura foi extraída com EtOAc duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos:EtOAc = 1:5 a 3:2) para obter 5- (hidroximetil)pirazol[1,5-a]piridina-3-carboxilato de etila (398 mg, 39%) como um sólido marrom. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  8.46 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.37 (1H, s), 8.09 (1H, s), 6.97 (1H, dd, J = 7.4, 1.8 Hz), 4.81 (2H, d, J = 4.8 Hz), 4.38 (2H, q, J = 7.2 Hz), 1.41 (3H, t, J = 6.8 Hz).

Etapa C: pirazol[1,5-a]piridin-5-ilmetanol

[0076] Uma solução de 5-(hidroximetil)pirazol[1,5- a]piridina-3-carboxilato de etila (398 mg, 1,81 mmol) em H2SO4 (solução de 40% de água, 12 ml) foi aquecida a 110 C por 6 horas e resfriada em temperatura ambiente. Após neutralização com NaOH aq. 5 N, a mistura foi extraída com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (apenas EtOAc) para obter pirazol[1,5-a]piridin-5-ilmetanol (176 mg, 66%) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  8.58 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.92 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.53 (1H, s), 6.77 (1H, dd, J = 7.0, 1.4 Hz), 6.51 (1H, d, J = 2.0 Hz), 5.39 (1H, t, J = 5.8 Hz), 4.50 (2H, d, J = 5.6 Hz).

Etapa D: pirazol[1,5-a]piridina-5-carbaldeído

[0077] A uma solução de pirazol[1,5-a]piridin-5- ilmetanol (176 mg, 1,19 mmol) em DCM (12 ml) foi adicionado MnO2 (1,03 g, 11,9 mmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 6 18 horas.

Após filtração através de uma almofada de Celite, o filtrado foi concentrado in vacuo para obter pirazol[1,5-a]piridina- 5-carbaldeído (153 mg, 88%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  10.0 (1H, s), 8.80 (1H, d, J = 7.2 Hz),

8.46 (1H, s), 8.19 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.20 (1H, dd, J =

7.2, 1.6 Hz), 7.05 (1H, d, J = 2.0 Hz).

Intermediário 2

[1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7-carbaldeído Etapa A: (E)-N’-hidroxi-N-(4-(hidroximetil)piridin-2- il)formimidamida

[0078] A uma solução de (2-aminopiridin-4-il)metanol (500 mg, 4,03 mmol) em i-PrOH (10 ml) foi adicionado DMF-DMA (1,62 ml, 12,1 mmol) em temperatura ambiente. A mistura foi agitada a 90 C por 3 horas sob N2 e resfriada a 50 C. Após a adição de cloridrato de hidroxilamina (840 mg, 12,1 mmol), a mistura reacional resultante foi agitada a 50 C durante a noite. Após concentração in vacuo, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna SiO2 (Hexanos:EtOAc = 1:9) para obter (E)-N’-hidroxi-N-(4-(hidroximetil)piridin-2-il) formimidamida (415 mg, 62%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  9.98 (1H, s), 9.26 (1H, d, J = 9.6 Hz),

8.02 (1H, d, J = 5.2 Hz), 7.82 (1H, d, J = 9.6 Hz), 6.99 (1H, s), 6.75 (1H, d, J = 5.2 Hz), 5.32 (1H, t, J = 5.2 Hz),

4.40 (2H, d, J = 5.2 Hz).

Etapa B: [1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-ilmetanol

[0079] A uma solução de (E)-N’-hidroxi-N-(4-

(hidroximetil) piridin-2-il) formimidamida (415 mg, 2,48 mmol) em THF (12 ml) foi adicionado TFAA (382 ml, 2,73 mmol) a 0 C. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas sob N2. Após a neutralização com NaHCO3 aquoso saturado a 0 C, a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos e, em seguida, concentrada in vacuo.

O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH- SiO2 (EtOAc:MeOH = 99:1) para obter [1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-ilmetanol (250 mg, 67%) como um sólido branco.

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  8.87 (1H, d, J = 6.4 Hz), 8.44 (1H, s), 7.69 (1H, s), 7.12 (1H, d, J = 6.8 Hz), 5.59 (1H, t, J = 5.2 Hz), 4.64 (2H, d, J = 5.2 Hz).

Etapa C: [1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7-carbaldeído

[0080] A uma solução de (COCl)2 (264 ml, 3,02 mmol) em DCM (10 ml) foi adicionado DMSO (333 ml, 4,69 mmol) a -78 C. A mistura foi agitada a -78 C durante 30 minutos. Após a adição de [1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-ilmetanol (250 mg, 1,68 mmol), a mistura reacional foi agitada a -78 C por 90 minutos e, em seguida, tratada com TEA (929 ml, 6,70 mmol). A mistura foi aquecida em temperatura ambiente e extinta com água. A camada aquosa separada foi extraída com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos: EtOAc = 1:9) para obter [1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7- carbaldeído (181 mg, 73%) como um amarelo sólido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  10.13 (1H, s), 8.72 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.52 (1H, s), 8.28 (1H, s), 7.57 (1H, dd, J = 7.2, 1.6 Hz).

Intermediário 3: 5-(6-emtilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H- imidazol-2-carbaldeído Etapa A: difenil(6-metilpiridin-2- il)(fenilamino)metilfosfonato

[0081] Uma mistura de 6-metilpicolinaldeído (1,00 g, 8,26 mmol), fosfito de difenila (1,92 ml, 9,91 mmol), anilina (754 L, 8,26 mmol) e ZrOCl28H2O (266 mg, 0,826 mmol) em i- PrOH (16 ml) foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.

A mistura reacional foi extinta com água e, em seguida, extraída com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos:EtOAc = 7:3 a 3:2) para obter (6-metilpiridin-2- li)(fenilamino)metilfosfonato de difenila (3,67 g, quant.) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  7.51 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.35 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.25-7.23 (4H, m),

7.21-7.10 (4H, m), 7.08-7.00 (4H, m), 6.78-6.73 (3H, m),

5.48 (1H, t, J = 7.6 Hz), 5.32 (1H, dd, J = 21.0, 8.0 Hz),

2.52 (3H, s).

Etapa B: 1-(6-metilpiridin-2-il)-2-(pirazol[1,5-a]piridin-5- il)etanona

[0082] Uma mistura de (6-metilpiridin-2- il)(fenilamino)metilfosfonato de difenila (451 mg, 1,05 mmol), pirazol[1,5-a]piridina-5-carbaldeído (Intermediário 1, 153 mg, 1,05 mmol) e Cs2CO3 (444 mg, 1,36 mmol) em uma mistura de THF (4,9 ml) e IPA (1,2 ml) foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. Após a adição de HCl aq.

2 N (4,0 ml, 8,0 mmol), a mistura reacional resultante foi agitada em temperatura ambiente por mais 1 hora e resfriada a 0 C. Após a neutralização com NaHCO3 aquoso saturado a 0

C, a mistura foi extraída com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos:EtOAc = 1:1) para resultar em 1-(6-metilpiridin-2-il)-2-(pirazol[1,5- a]piridin-5-il)etanona (178 mg, 68%) como um sólido amarelo.

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  5.58 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.93 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.89 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.78 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.54 (2H, d, J = 7.6 Hz), 6.78 (1H, dd, J =

7.2, 1.6 Hz), 6.50 (1H, d, J = 2.0 Hz), 4.56 (2H, s), 2.60 (3H, s).

Etapa C: 1-(6-metilpiridin-2-il)-2-(pirazol[1,5-a]piridin- 5-il)etano-1,2-diona

[0083] A uma solução de 1-(6-metilpiridin-2-il)-2- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)etanona (178 mg, 0,708 mmol) em dioxano (7,1 ml) foi adicionado dióxido de selênio (118 mg, 1,06 mmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi refluxada por 2 horas e resfriada até a temperatura ambiente.

Após filtração através de uma almofada de Celite, o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos:EtOAc = 1:1) para proporcionar 1-(6-metilpiridin-2-il)-2-(pirazol[1,5- a]piridin-5-il)etano -1,2-diona (70 mg, 37%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  8.85 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.31 (1H, s), 8.16 (1H, d, J = 2.4 Hz), 8.05 (1H, s),

7.63 (1H, q, J = 3.1 Hz), 6.78 (1H, dd, J = 7.2, 1.6 Hz),

7.30 (1H, dd, J = 7.2, 2.0 Hz), 6.95 (1H, d, J = 2.0 Hz),

2.39 (3H, s).

Etapa D: 5-(2-(dimetoximetil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H- imidazol-4-il)pirazol[1,5-a]piridina

[0084] A uma solução de 1-(6-metilpiridin-2-il)-2- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)etano-1,2-diona (70 mg, 0,264 mmol) em MTBE (1,8 ml) foi adicionado 2,2- dimetoxiacetaldeído (0,080 ml, 0,528 mmol) seguido por uma solução de acetato de amônio (61 mg, 0,792 mmol) em MeOH (0,90 ml) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora e depois concentrada in vacuo. O resíduo foi dividido entre CHCl3 e NaHCO3 aq.. A camada aquosa separada foi extraída com CHCl3 duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de SiO2 (apenas EtOAc)

para obter 5-(2-(dimetoximetil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H- imidazol-4-il)pirazol[1,5-a]piridina (77 mg, 84%) como um sólido amarelo pálido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  10.4 (1H, s), 8.46 (1H, d, J = 6.8 Hz), 7.96 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.89 (1H, s), 7.46 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.35 (1H, d, J = 8.0 Hz),

7.05-7.01 (2H, m), 6.51 (1H, d, J = 2.0 Hz), 5.57 (1H, s),

3.48 (6H, s), 2.59 (3H, s).

Etapa E: 5-(6-emtilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5-a]piridin- 5-il)-1H-imidazol-2-carbaldeído

[0085] Uma mistura de 5-(2-(dimetoximetil)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-4-il)pirazol[1,5-a]piridina (77 mg, 0,222 mmol) e HCl aq. 1 N (2,2 ml, 2,2 mmol) foi agitada a 70 C por 4 horas e resfriado a 0 C. A mistura reacional foi neutralizada com NaHCO3 aquoso saturado de a 0 C e extraída com uma mistura de CHCl3 e MeOH (v/v = 4/1) duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O sólido residual foi colocado em suspensão em éter dietílico coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco sob vácuo para obter 5-(6-emtilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5-a]piridin-5- il)-1H-imidazol-2-carbaldeído (16 mg, 24%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  9.83 (1H, s), 8.54 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.01 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.90 (1H, s), 7.53 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.43 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.13 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.04 (1H, dd, J = 6.8, 1.6 Hz), 6.59 (1H, d, J = 2.0 Hz), 2.62 (3H, s).

Intermediário 4 Etapa A

[0086] Uma mistura de (6-metilpiridin-2- il)(fenilamino)metilfosfonato de difenila (527 mg, 1,22 mmol), [1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7-carbaldeído (Intermediário 2, 180 mg, 1,22 mmol) e carbonato de césio (518 mg, 1,59 mmol) em uma mistura de THF (8,0 ml) e i-PrOH (2,0 ml) foi agitada em temperatura ambiente durante a noite.

Após a adição de HCl aq. 2 N (6,0 ml), a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por mais 1 hora e depois neutralizada com NaHCO3 aquoso saturado a 0 C. A mistura foi extraída com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos:EtOAc = 1:2 a 1:4) para obter 2- ([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-1-(6-metilpiridin-2- il)etanona (283 mg, 92%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  8.53 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.30 (1H, s), 7.88 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.75-7.71 (2H, m), 7.37 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.06 (1H, dd, J = 7.2, 1.6 Hz), 4.68 (2H, s), 2.68 (3H, s).

Etapa B: 1-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-2-(6- metilpiridin-2-il)etano-1,2-diona

[0087] A uma solução de 2-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-1-(6-metilpiridin-2-il)etanona (220 mg, 0,793 mmol) em dioxano (7,9 ml) foi adicionado dióxido de selênio (132 mg, 1,19 mmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi refluxada por 2 horas e resfriada até a temperatura ambiente. Após filtração através de uma almofada de Celite, o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos:EtOAc = 1:1) para obter 1-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridina-7-il)-2-(6-metilpiridin-2-il)etano-1,2-diona

(130 mg, 56%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  8.75 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.49 (1H, s), 8.18 (1H, s), 8.05 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.85 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.70 (1H, dd, J = 7.0, 1.4 Hz), 7.42 (1H, d, J = 8.0 Hz), 2.47 (3H, s).

Etapa C: 7-(2-(dimetoximetil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H- imidazol-4-il)[1,2,4]triazol[1,5a]piridina

[0088] A uma solução de 1-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-2-(6-metilpiridin-2-il)etano-1,2-diona (160 mg, 0,601 mmol) em MTBE (4,0 ml) foi adicionado 2,2- dimetoxiacetaldeído (0,180 ml, 1,20 mmol) seguido por uma solução de acetato de amônio (139 mg, 1,80 mmol) em MeOH (2,0 ml) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora e depois concentrada in vacuo. O resíduo foi dividido entre CHCl3 e NaHCO3 aq.. A camada aquosa separada foi extraída com CHCl3 duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (DCM:MeOH = 100:1) para obter 7-(2-(dimetoximetil)-5-(6-metilpiridin-2- il)-1H-imidazol-4-il)[1,2,4]triazol[1,5a]piridina (142 mg, 67%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  10.61

(1H, brs), 8.59 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.35 (1H, s), 8.08 (1H, s), 7.51-7.46 (2H, m), 7.38 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.07 (1H, d, J = 8.0 Hz), 5.57 (1H, s), 3.47 (6H, s), 2.59 (3H, s).

Etapa D: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-carbaldeído

[0089] Uma mistura de 7-(2-(dimetoximetil)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-4-il)- [1,2,4]triazol[1,5a]piridina (142 mg, 0,405 mmol) e HCl aq.

1 N (4,0 ml) foi agitada a 70 C por 4 horas e resfriado a 0 C. Depois de neutralizada com solução aquosa saturada de NaHCO3 a 0 C, a mistura foi extraída com uma mistura de CHCl3 e MeOH (v/v = 4/1) duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O sólido residual foi colocado em suspensão em éter dietílico coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco sob vácuo para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2- carbaldeído (86 mg, 70%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  9.80 (1H, s), 8.93 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.52 (1H, s), 8.25 (1H, s), 7.81 (2H, t, J = 7.6 Hz), 7.69 (1H, brs), 7.50 (1H, dd, J = 7.4, 1.8 Hz), 7.30 (1H, brs), 2.50

(3H, s).

Modo para a Invenção Exemplo Exemplo 1: 3-cloro-2-fluoro-N-((5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-il)metil)anilina

[0090] Uma mistura de 5-(6-emtilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-carbaldeído (Intermediário 3, 16 mg, 0,0530 mmol), 3-cloro-2- fluoroanilina (0,0870 ml, 0,0790 mmol) e ácido acético (3,0 L, 0,0530 mmol) em DCE (1,1 ml) foi refluxada por 2 horas e resfriada a 0 C. Após a adição de MeOH (1,1 ml), THF (0,3 ml) seguido por NaBH4 (8,0 mg, 0,211 mmol), a mistura reacional foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por mais 1 hora. Depois de extinta com solução aquosa saturada de NH4Cl, a mistura foi extraída com CHCl3 duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter 3-cloro-2-fluoro-N-((5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-il)metil)anilina

(6,4 mg, 28%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.46 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.94 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.82 (1H, s), 7.66 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.34 (1H, d, J = 8.0 Hz),

7.20 (1H, d, J = 7.2 Hz), 6.94-6.89 (2H, m), 6.74 (1H, t, J = 8.0 Hz), 6.68 (1H, t, J = 7.2 Hz), 6.59 (1H, d, J = 2.0 Hz), 4.55 (2H, s), 2.52 (3H, s). MS: 433.1 (M+H+).

Exemplo 2: 3,4-dicloro-N-((5-(6-metilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5- a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-il)metil)anilina

[0091] 5-(6-emtilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5- a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-carbaldeído (Intermediário 3, 70 mg, 0,231 mmol) foi reagido com 3,4-dicloroanilina (56 mg, 0,346 mmol) nas condições do Exemplo 1. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (EtOAc:MeOH = 100:1) para obter 3,4-dicloro-N-((5-(6- metilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H- imidazol-2-il)metil)anilina (24 mg, 24%) como um sólido de marfim. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.46 (1H, s), 7.94 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.84 (1H, s), 7.64 (1H, s), 7.28 (1H, s),

7.21-7.19 (2H, m), 6.98 (1H, s), 6.85 (1H, d, J = 2.4 Hz),

6.64 (1H, dd, J = 8.8, 2.8 Hz), 6.59 (1H, d, J = 2.0 Hz),

4.45 (2H, s), 2.53 (3H, s). MS: 449.1 (M+H+).

Exemplo 3: N-((4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-il)metil)-2-fluoroanilina

[0092] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-carbaldeído (Intermediário 4, 37 mg, 0,122 mmol) foi reagido com 2-fluoroanilina (18 ml, 0,182 mmol) sob as condições do Exemplo 1. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (DCM:MeOH = 95:5) para obter N-((4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2- il)metil)-2-fluoroanilina (34 mg, 70%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  10.70 (1H, brs), 8.60 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.36 (1H, s), 8.09 (1H, s), 7.52-7.45 (2H, m), 7.36 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.07-6.98 (3H, m), 6.79-

6.69 (2H, m), 4.60-4.57 (3H, m), 2.48 (3H, s). MS: 400.2 (M+H+).

Exemplo 4: N-((4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-il)metil)-3-cloro-2- fluoroanilina

[0093] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-carbaldeído (Intermediário 4, 42 mg, 0,138 mmol) foi reagido com 3-cloro-2-fluoroanilina (23 ml, 0,207 mmol) nas condições do Exemplo 1. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter N-((4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2- il)metil)-3-cloro-2-fluoroanilina (16 mg, 27%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.71 (1H, d, J =

7.2 Hz), 8.34 (1H, s), 7.96 (1H, s), 7.70 (1H, s), 7.40-7.34 (2H, m), 7.24 (1H, d, J = 7.6 Hz), 6.92 (1H, td, J = 8.2,

1.3 Hz), 6.74 (1H, t, J = 8.0 Hz), 6.69 (1H, td, J = 7.3,

1.3 Hz), 4.56 (2H, s), 2.53 (3H, s). MS: 434.1 (M+H+).

Exemplo 5: N-((4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6-etilpiridin- 2-il)-1H-imidazol-2-il)metil)-3,4-dicloroanilina

[0094] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6-

metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-carbaldeído (Intermediário 4, 42 mg, 0,138 mmol) foi reagido com 3,4-dicloroanilina (34 mg, 0,207 mmol) sob as condições do Exemplo 1. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (EtOAc:MeOH = 100:1) para obter N-((4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2- il)metil)-3,4-dicloroanilina (22 mg, 35%) como um sólido branco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.71 (1H, d, J = 7.2 Hz),

8.38 (1H, s), 7.96 (1H, s), 7.71 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.38 (2H, s), 7.24 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.20 (1H, d, J = 8.8 Hz),

6.86 (1H, d, J = 2.8 Hz), 6.64 (1H, dd, J = 8.8, 2.8 Hz),

4.46 (2H, s), 2.52 (3H, s). MS: 450.1 (M+H+).

Intermediário 5 Etapa A: 1-(6-metilpiridin-2-il)etanona

[0095] A uma solução de 6-metilpicolinonitrila (4,50 g, 38,1 mmol) em THF seco (127 ml) foi adicionado lentamente brometo de metilmagnésio (solução 3,0 M em THF, 38,1 ml, 114 mmol) a -20 C. A mistura reacional foi agitada a -20 C por 5 horas e extinta com NH4Cl aquoso saturado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite e extraída com EtOAc duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos: EtOAc = 5:1) para resultar em 1-(6-metilpiridin-2-il)etanona (3,70 g, 72%) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  7.62 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.49 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.12 (1H, d, J = 7.2 Hz), 2.51 (3H, s), 2.41 (3H, s).

Etapa B: 2-bromo-1-(6-metilpiridin-2-il)etanona

[0096] A uma solução de 1-(6-metilpiridin-2-il)etanona (3,70 g, 27,4 mmol) e HBr (solução de 33% em AcOH, 9,01 ml,

54,7 mmol) foi adicionado lentamente Br2 (1,55 ml, 30,1 mmol) a 0 C. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora e depois tratada com água. A mistura foi extraída com EtOAc duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos:EtOAc = 10:1) para resultar em 2-bromo-1-(6-metilpiridin-2- il)etanona (4,40 g, 75%) como um óleo incolor. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  7.84 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.69 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.32 (1H, d, J = 7.2 Hz), 4.85 (2H, s), 2.56 (3H, s).

Etapa C: 2-(6-metilpiridin-2-il)imidazo[1,2-a]pirimidina

[0097] A uma solução de 2-bromo-1-(6-metilpiridin-2- il)etanona (4,40 g, 20,6 mmol) em DMF (69 ml) foi adicionada pirimidin-2-amina (5,86 g, 61,7 mmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi aquecida a 80 C por 2 horas. Após concentração in vacuo, o resíduo foi tratado com DCM. Um sólido precipitado foi coletado por filtração, lavado com DCM e seco sob vácuo para se obter 2-(6-metilpiridin-2- il)imidazo[1,2-a]pirimidina (2,96 g, 69%) como um sólido amarelo pálido. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.92 (1H, dd, J =

6.8, 2.0 Hz), 8.60 (1H, dd, J = 3.6, 2.0 Hz), 8.39 (1H, s),

7.96 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.80 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.25 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.08 (1H, dd, J = 6.7, 3.7 Hz), 2.59 (3H, s).

Intermediário 6 5-(6-metilpiridin-2-il)4-(pirazol[1,5-a]piridina-5il)-1H- imdazol-2-amina Etapa A: 2-(6-metilpiridin-2-il)-3-(pirazol[1,5-a]piridina-5- il)imidazo[1,2-a]pirimidina

[0098] Uma mistura de 2-(6-metilpiridin-2- il)imidazo[1,2-a]pirimidina (Intermediário 5, 300 mg, 1,43 mmol), 5-bromopirazol[1,5-a]piridina (281 mg, 1,43 mmol), Pd(OAc)2 (26,0 mg, 0,114 mmol), PPh3 (60 mg, 0,228 mmol) e

Cs2CO3 (511 mg, 1,57 mmol) em dioxano (4,8 ml) foi desgaseificada por purga e reenchida com Ar em várias vezes.

A mistura reacional foi agitada a 120 C durante a noite.

Depois de resfriada em temperatura ambiente, a mistura reacional foi diluída com EtOAc e lavada com água e salmoura.

A camada orgânica separada foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (EtOAc apenas para EtOAc:MeOH = 100:1) para obter 2-(6-metilpiridin-2-il)-3- (pirazol[1,5-a]piridina-5-il)imidazo[1,2-a]pirimidina (178 mg, 38%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3): 

8.63 (1H, q, J = 2.0 Hz), 8.58 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.46 (1H, dd, J = 6.8, 2.0 Hz), 8.07-8.04 (2H, m), 7.83 (1H, s),

7.65 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.06 (1H, d, J = 8.0 Hz), 6.93-

6.89 (2H, m), 6.63 (1H, d, J = 2.4 Hz), 2.33 (3H, s).

Etapa B: 5-(6-metilpiridin-2-il)4-(pirazol[1,5-a]piridina- 5-il)-1H-imdazol-2-amina

[0099] Uma mistura de 2-(6-metilpiridin-2-il)-3- (pirazol[1,5-a]piridina-5-il)imidazo[1,2-a]pirimidina (178 mg, 0,545 mmol) e 20% de hidrazina (1,1 ml) em EtOH (5,5 ml)

foi submetida a refluxo por 1 hora. Após concentração in vacuo, o resíduo foi tratado com DCM. Um sólido precipitado foi coletado por filtração e seco sob vácuo para obter 5-(6- metilpiridin-2-il)4-(pirazol[1,5-a]piridina-5il)-1H- imdazol-2-amina (108 mg, 68%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.42 (1H, d, J = 6.8 Hz), 7.92 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.78 (1H, s), 7.56 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.27 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.08 (1H, d, J = 7.6 Hz), 6.95 (1H, d, J =

7.6 Hz), 6.55 (1H, d, J = 2.0 Hz), 2.50 (3H, s).

Intermediário 7 Etapa A: (E)-N-(4-bromopiridin-2-il)-N’- hidroxiformimidamida

[00100] A uma solução de 4-bromopiridin-2-amina (10 g, 57,8 mmol) em IPA (193 ml) foi adicionado 1,1-dimetoxi- N,N-dimetilmetanamina (9,98 ml, 75,0 mmol) em temperatura ambiente. A mistura foi refluxada por 3 horas e resfriada a 50 C. Após a adição de cloridrato de hidroxilamina (5,22 g,

75,0 mmol), a mistura reacional foi agitada a 50 C durante a noite e resfriada em temperatura ambiente. Um sólido precipitado foi coletado por filtração, lavado com DCM e seco sob vácuo para obter (E)-N-(4-bromopiridin-2-il)-N’- hidroxiformimidamida (11,2 g, 90%) como um sólido branco.

RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  δ 8.01 (1H, d, J = 5.6 Hz), 7.90 (1H, s), 7.17 (1H, d, J = 1.2 Hz), 7.06 (1H, dd, J = 5.6,

1.6 Hz).

Etapa B: 7-bromo-[1,2,4]triazol[1,5-a]piridina

[00101] A uma solução (E)-N-(4-bromopiridin-2-il)-N’- hidroxiformimidamida (11,2 g, 51,8 mmol) em THF seco (173 ml) foi adicionado TFAA (8,05 ml, 57,0 mmol) a 0 C . Depois de aquecida a 50 C por 2 horas, a mistura reacional foi neutralizada com NaHCO3 aquoso saturado e extraído com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em SiO2 (Hexanos:EtOAc = 1:1) para resultar em 7-bromo- [1,2,4]triazol[1,5-a]piridina (8,49 g, 83%) como um branco sólido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  8.47 (1H, d, J = 7.6 Hz),

8.33 (1H, s), 7.98 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.16 (1H, dd, J =

7.4, 1.8 Hz).

Etapa C: 7-(2-(6-metilpiridin-2-il)imidazo[1,2-a]pirimidin- 3-il)-[1,2,4]triazol[1,5-a]piridina

[00102] Uma mistura de 2-(6-metilpiridin-2- il)imidazo[1,2-a]pirimidina (Intermediário 5, 4,45 g, 21,2 mmol), 7-bromo-[1,2,4]triazol[1,5 -a]piridina (6,29 g, 31,8 mmol), Pd(OAc)2 (380 mg, 1,69 mmol), PPh3 (888 mg, 3,39 mmol) e Cs2CO3 (7,59 g, 23,4 mmol) em dioxano (71 ml) foi desgaseificada purgando e enchendo novamente com Ar várias vezes. A mistura reacional foi agitada a 120 C durante a noite. Depois de resfriada em temperatura ambiente, a mistura reacional foi dividida entre EtOAc e água. A camada orgânica separada foi lavada com salmoura, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter 7-(2-(6-metilpiridin-2-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)- [1,2,4]triazol[1,5-a]piridina (3,63 g, 52%) como um sólido amarelo pálido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  8.69 (1H, d, J =

7.2 Hz), 8.66 (1H, dd, J = 4.2, 1.8 Hz), 8.48 (1H, dd, J =

6.6, 1.8 Hz), 8.45 (1H, s), 8.14 (1H, d, J = 8.0 Hz), 8.02

(1H, s), 7.68 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.31 (1H, dd, J = 7.0,

1.4 Hz), 7.07 (1H, d, J = 7.6 Hz), 6.94 (1H, dd, J = 6.8,

4.0 Hz), 2.29 (3H, s).

Etapa D: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00103] Uma mistura de 7-(2-(6-metilpiridin-2- il)imidazo[1,2-a] pirimidin-3-il)-[1,2,4]triazol[1,5- a]piridina (3.63 g, 11,1 mmol) e 20% de hidrazina (2,2’) em EtOH (111’) foi refluxada durante 1 hora e, em seguida, concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (DCM:MeOH = 20:1) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (2,30 g, 71%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.65 (1H, d, J =

7.2 Hz), 8.35 (1H, s). 7.91 (1H, s), 7.63 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.33 (2H, d, J = 7.2 Hz), 7.15 (1H, d, J = 7.6 Hz),

2.51 (3H, s).

Exemplo 6: N-(2-fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5- a]piridina-5-il)-1H-imidazol-2-amina

[00104] Uma mistura de 5-(6-metilpiridin-2-il)4- (pirazol[1,5-a]piridina-5il)-1H-imdazol-2-amina (Intermediário 6, 54 mg, 0,186 mmol), 2-fluorobenzaldeído (0,0300 ml, 0,242 mmol) e K2CO3 (51,0 mg, 0,372 mmol) em MeOH (1,9 ml) foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas.

Depois de filtrado através de uma almofada de Celite, o resíduo foi concentrado in vacuo. O resíduo foi dissolvido em MeOH (1,9 ml). Após a adição de Pd/C (10% em peso, 20,0 mg, 0,0190 mmol), a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 4 horas sob atmosfera de H2 (balão).

Após filtração através de uma almofada de Celite, o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi diluído com DCM e lavado com água e salmoura. A camada orgânica separada foi seca em Na2SO4, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (DCM:MeOH = 200:1) para obter N-(2-fluorobenzil)-5-(6- metilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5 -a]piridina-5-il)-1H- imidazol-2-amina (3,0 mg, 4%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.42 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.92 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.78 (1H, s), 7.56 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.50 (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.30-7.25 (2H, m), 7.15 (1H, t, J = 7.6 Hz),

7.12-7.08 (2H, m), 6.92 (1H, d, J = 6.8 Hz), 6.55 (1H, d, J = 1.6 Hz), 4.62 (2H, s), 2.50 (3H, s). MS: 398.44 (M+H+).

Exemplo 7: N-(3-fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridina-5-il)-1H-imidazol-2-amina

[00105] 5-(6-metilpiridin-2-il)4-(pirazol[1,5- a]piridina-5il)-1H-imdazol-2-amina (1) (Intermediário 6, 250 mg, 0,861 mmol) foi reagido com 3-fluorobenzaldeído (0,119 ml, 1,12 mmol) nas condições do Exemplo 6. O produto bruto foi purificado por HPLC prep. (coluna C18) para obter N-(3- fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5- a]piridina-5-il)-1H-imidazol-2-amina (30 mg, 9%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.42 (1H, d, J =

6.7 Hz), 7.92 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.78 (1H, s), 7.57 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.35 (1H, q, J = 7.2 Hz), 7.28-7.22 (2H, m),

7.17 (1H, d, J = 10.4 Hz), 7.09 (1H, d, J = 7.6 Hz), 6.98 (1H, t, J = 8.4 Hz), 6.92 (1H, d, J = 7.2 Hz), 6.55 (1H, d, J = 1.6 Hz), 4.57 (2H, s), 2.50 (3H, s). MS: 399.2 (M+H+).

Exemplo 8: N-(3-cloro-2-fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-amina

[00106] Uma mistura de 5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 6, 150 mg, 0,517 mmol), 3-cloro-2- fluorobenzaldeído (82,0 mg, 0,517 mmol) e K2CO3 (143 mg, 1,03 mmol) em MeOH (5,0 ml) foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. Após concentração, o resíduo foi dissolvido em THF (5,0 ml). Após adição de complexo borano-THF (solução THF 1 M, 2,58 ml, 2,58 mmol) em temperatura ambiente, a mistura reacional foi submetida a refluxo por 6 horas, resfriada em temperatura ambiente e extinta com água. A mistura foi extraída com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter N-(3-cloro-2-fluorobenzil)-5-(6- metilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H- imidazol-2-amina (71 mg, 32%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.41 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.91 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.77 (1H, s), 7.56 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.43 (1H, t, J = 7.0 Hz), 7.37 (1H, t, J = 6.8 Hz), 7.25 (1H, d, J =

7.6 Hz), 7.13 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.09 (1H, d, J = 8.0 Hz),

6.92 (1H, d, J = 6.8 Hz), 6.55 (1H, d, J = 2.0 Hz), 4.64 (2H, s), 2.49 (3H, s). MS: 433.1 (M+H+).

Exemplo 9: N-(4-cloro-2-fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-amina

[00107] Uma mistura de 5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 6, 54 mg, 0,186 mmol), 4-cloro-2- fluorobenzaldeído (38 mg, 0,242 mmol) e K2CO3 (51 mg, 0,372 mmol) em MeOH (1,9 ml) foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. Depois de filtrada através de uma almofada de Celite, NaBH4 (21 mg, 0,558 mmol) foi adicionado ao filtrado.

A mistura reacional foi refluxada por 3 horas e depois concentrada in vacuo. O resíduo foi diluído com NH4Cl aquoso saturado e extraído com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter N-(4-cloro-2-fluorobenzil)-5-(6- metilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H- imidazol-2-amina (24 mg, 30%) como um sólido amarelo. RMN 1H

(400 MHz, CDCl3):  8.45 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.95 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.83 (1H, s), 7.44 (1H, t, J = 7.0 Hz), 7.39 (1H, t, J = 8.4 Hz), 7.30 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.14-7.09 (2H, m),

7.01 (1H, dd, J = 7.4, 1.8 Hz), 6.90 (1H, d, J = 6.8 Hz),

6.50 (1H, d, J = 2.4 Hz), 4.68 (1H, t, J = 7.0 Hz), 4.58 (2H, d, J = 6.0 Hz), 2.50 (3H, s). MS: 433.0 (M+H+).

Exemplo 10: N-(3,4-diclorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-amina

[00108] Uma mistura de 5-(6-metilpiridin-2-il)-4- (pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 6, 100 mg, 0,344 mmol), 3,4- diclorobenzaldeído (60 mg, 0,344 mmol) e K2CO3 (95 mg, 0,689 mmol) em MeOH (3,4 ml) foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. Após adição de LiBH4 (15 mg, 0,689 mmol), a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. Após concentração in vacuo, o resíduo foi diluído com NH4Cl aquoso saturado e extraído com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo.

O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-

SiO2 (apenas EtOAc) para obter N-(3,4-diclorobenzil)-5-(6- metilpiridin-2-il)-4-(pirazol[1,5-a]piridin-5-il)-1H- imidazol-2-amina (47 mg, 30%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.42 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.92 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.77 (1H, s), 7.59-7.55 (2H, m), 7.48 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.35 (1H, dd, J = 8.6, 1.8 Hz), 7.26 (1H, s),

7.10 (1H, d, J = 8.0 Hz), 6.91 (1H, d, J = 6.0 Hz), 6.55 (1H, d, J = 2.0 Hz), 4.53 (2H, s), 2.50 (3H, s). MS: 449.0 (M+H+).

Exemplo 11: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(2-fluorobenzil)-5- (6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00109] Uma mistura de 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 100 mg, 0,343 mmol), 2-fluorobenzaldeído (55 mg, 0,446 mmol) e K2CO3 (95 mg, 0,687 mmol) em MeOH (3,4 ml) foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. Após filtração através de uma almofada de Celite, NaBH4 (39 mg, 1,03 mmol) foi adicionado ao filtrado em temperatura ambiente. A mistura reacional foi refluxada por 3 horas e depois concentrada in vacuo. O resíduo foi diluído com NH4Cl aquoso saturado e extraída com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (DCM apenas para DCM:MeOH = 100:1) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-N-(2-fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)- 1H-imidazol-2-amina (83 mg, 61%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  11.3 e 11.1 (1H, dois s), 8.81 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.42 (1H, s), 8.17 (1H, s), 7.65 (1H, t, J = 6.8 Hz), 7.51 (2H, t, J = 7.0 Hz), 7.33-7.29 (2H, m), 7.22-

7.17 (2H, m), 7.11 (1H, d, J = 8.0 Hz), 6.59 e 6.38 (1H, dois s), 4.57 (2H, d, J = 6.4 Hz), 2.51 (3H, s). MS: 400.1 (M+H+).

Exemplo 12: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(3-fluorobenzil)-5- (6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2ilamina

[00110] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 100 mg, 0,343 mmol) foi reagido com 3-fluorobenzaldeído (0,0470 ml, 0,446 mmol) sob a condição do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em

NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter 4-([1,2, 4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-N-(3-fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)- 1H-imidazol-2-ilamina (99 mg, 73%) como um sólido amarelo.

RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.65 (1H, brs), 8.35 (1H, s), 7.93 (1H, brs), 7.63 (1H, brs), 7.37-7.32 (2H, m), 7.24 (2H, d, J = 7.2 Hz), 7.17 (2H, d, J = 10.8 Hz), 6.98 (1H, t, J = 9.0 Hz), 4.58 (2H, s), 2.51 (3H, s). MS: 400.3 (M+H+).

Exemplo 13: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(3-clorobenzil)-5- (6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00111] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 40 mg, 0,137 mmol) foi reagido com 3-clorobenzaldeído (25 mg, 0,179 mmol) sob a condição do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para fornecer 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)- N-(3-clorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2- amina (28 mg, 50%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, MeOH-d4):  8.64 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.35 (1H, s), 7.89 (1H, brs), 7.65 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.46 (1H, s), 7.37-7.28 (4H,

m), 7.25 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.17 (1H, d, J = 7.2 Hz), 4.56 (2H, s), 2.51 (3H, s). MS: 416.00 (M+H+).

Exemplo 14: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(4-clorobenzil)-5- (6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00112] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 40 mg, 0,137 mmol) foi reagido com 4-clorobenzaldeído (25 mg, 0,179 mmol) nas condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N- (4-clorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (20 mg, 35% ) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, MeOH- d4):  8.64 (1H, d, J = 6.0 Hz), 8.35 (1H, s), 7.89 (1H, brs), 7.64 (1H, brs), 7.42 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.35-7.22 (4H, m), 7.16 (1H, d, J = 6.8 Hz), 4.55 (2H, s), 2.51 (3H, s). MS: 416.1 (M+H+).

Exemplo 15: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(2,3- difluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-

ilamina

[00113] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 100 mg, 0,343 mmol) foi reagido com 2,3-difluorobenzaldeído (0,0490 ml, 0,446 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-N-(2,3-difluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2- il)-1H-imidazol-2-ilamina (115 mg, 80%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.64 (1H, s), 8.35 (1H, s), 7.92 (1H, brs), 7.63 (1H, brs), 7.38-7.29 (3H, m), 7.20-

7.12 (3H, m), 4.67 (2H, s), 2.51 (3H, s). MS: 418.2 (M+H+).

Exemplo 16: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(2,6- difluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00114] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 50 mg, 0,172 mmol) foi reagido com 2,6-difluorobenzaldeído (0,0240 ml, 0,223 mmol) nas condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (DCM apenas DCM:MeOH = 100:1) para obter 4- ([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(2,6-difluorobenzil)- 5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (14 mg, 20%) como um sólido amarelo. RMN 1H (CDCl3, Varian 400 MHz): 

8.55 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.34 (1H, s), 8.05, (1H, s), 7.44-

7.39 (2H, m), 7.35-7.32 (1H, m), 7.30-7.24 (1H, m), 6.96-

6.92 (3H, m), 4.86 (1H, brs), 4.62 (2H, d, J = 6.4 Hz), 2.56 (3H, s). MS: 418.0 (M+H+).

Exemplo 17: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(4-cloro-2- fluorobenzilideno)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2- amina

[00115] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 50 mg, 0,172 mmol) foi reagido com 5-cloro-2-fluorobenzaldeído (35 mg, 0,223 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (DCM:MeOH = 100:1) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-N-(4-cloro-2-fluorobenzilideno)-5-(6-

metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (20 mg, 28%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  11.4 e 11.2 (1H, s+s), 8.80 (1H, d, J = 7.6 Hz), 8.42 (1H, s), 8.16 (1H, s),

7.65 (2H, t, J = 10.0 Hz), 7.54-7.48 (2H, m), 7.42 (1H, dd, J = 10.0, 2.0 Hz), 7.32-7.28 (1H, m), 7.11 (1H, d, J = 7.6 Hz), 6.65 e 6.44 (1H, s+s), 4.53 (2H, d, J = 6.0 Hz), 2.50 (3H, s). MS: 434.0 (M+H+).

Exemplo 18: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(3-cloro-2- fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00116] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 144 mg, 0,494 mmol) foi reagido com 3-cloro-2- fluorobenzaldeído (102 mg, 0,643 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter 4- ([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(3-cloro-2- fluorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (58 mg, 27%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  9.52 (1H, brs), 8.55 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.34 (1H, s),

8.06 (1H, s), 7.44-7.38 (3H, m), 7.35-7.31 (2H, m), 7.07

(1H, t, J = 8.0 Hz), 6.94 (1H, d, J = 8.0 Hz), 4.72 (1H, t, J = 6.0 Hz), 4.63 (2H, d, J = 6.4 Hz), 2.48 (3H, s). MS:

434.0 (M+H+).

Exemplo 19: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(5-cloro-2- fluorobenzilideno)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2- amina

[00117] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 50 mg, 0,172 mmol) foi reagido com 5-cloro-2-fluorobenzaldeído (35 mg, 0,223 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (DCM:MeOH = 100:1) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-N-(5-cloro-2-fluorobenzilideno)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (18 mg, 25%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6):  11.4 e 11.2 (1H, s+s), 8.81 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.42 (1H, s,), 8.16 (1H, s),

7.66 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7.55 (1H, d, J = 4.0 Hz), 7.49 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.39-7.25 (2H, m), 7.12 (1H, d, J = 7.2 Hz), 6.68 e 6.48 (1H, s+s), 4.54 (2H, d, J = 6.0 Hz), 2.50 (3H, s). MS: 434.0 (M+H+).

Exemplo 20: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(3,4- diclorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00118] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 40 mg, 0,137 mmol) foi reagido com 3,4-diclorobenzaldeído (31 mg, 0,179 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin- 7-il)-N-(3,4-diclorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H- imidazol-2-amina (1,9 mg, 3,1%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 8.64 (1H, d, J = 7.0 Hz), 8.35 (1H, s),

7.89 (1H, s), 7.65 (1H, t, J = 7.4 Hz), 7.60 (1H, d, J = 1.6 Hz), 7.48 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.36 (1H, dd, J = 8.4, 2.0 Hz), 7.36-7.32 (m, 2H), 7.17 (1H, d, J = 7.6 Hz), 4.55 (2H, s), 2.51 (3H, s). MS: 450.0 (M+H+).

Exemplo 21: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(2,4- diclorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00119] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 40 mg, 0,137 mmol) foi reagido com 2,4-diclorobenzaldeído (31 mg, 0,179 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (apenas EtOAc) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin- 7-il)-N-(2,4-diclorobenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H- imidazol-2-amina (14 mg, 22%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD): 8.64 (1H, d, J = 6.4 Hz), 8.35 (1H, s),

7.90 (1H, brs), 7.63 (1H, brs), 7.53 (1H, d, J = 8.8 Hz),

7.48 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.40-7.24 (2H, m), 7.32 (1H, dd, J = 8.0, 2.4 Hz), 7.16 (1H, d, J = 7.6 Hz), 4.64 (2H, s),

2.51 (3H, s). MS: 450.0 (M+H+).

Exemplo 22: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(2-fluoro-3- metoxibenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00120] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6-

metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 50 mg, 0,172 mmol) foi reagido com 2-fluoro-3-metoxibenzaldeído (34 mg, 0,223 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (EtOAc:MeOH = 100:1) para obter 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-N-(2-fluoro-3-metoxibenzil)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (8,6 mg, 12%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 11.3 e 11.1 (1H, s+s), 8.81 (1H, d, J = 7.6 Hz), 8.42 (1H, s), 8.16 (1H, s),

7.68-7.62 (1H, m), 7.49 (1H, dd, J = 7.2, 1.6 Hz), 7.31 (1H, d, J = 7.6 Hz), 7.12-7.03 (4H, m), 6.57 e 6.36 (1H, t+t, J = 6.2 Hz), 4.55 (2H, d, J = 6.4 Hz), 3.83 (3H, s), 2.50 (3H, s). MS: 430.1 (M+H+).

Exemplo 23: 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(2-fluoro-4- metoxibenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina

[00121] 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 50 mg, 0,172 mmol) foi reagido com 2-fluoro-4-metoxibenzaldeído (34 mg, 0,223 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2

(apenas EtOAc) para obter o 4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin- 7-il)-N-(2-fluoro-4-metoxibenzil)-5-(6-metilpiridin-2-il)- 1H-imidazol-2-amina (10 mg, 14%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 1.3 e 11.1 (1H, s+s), 8.81 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.42 (1H, s), 8.17 (1H, s), 7.71-7.62 (1H, m),

7.51 (1H, dd, J = 7.4, 1.8 Hz), 7.42 (1H, t, J = 9.0 Hz),

7.31 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.11 (1H, d, J = 7.2 Hz), 6.82 (1H, d, J = 11.2 Hz), 6.78 (1H, d, J = 8.0 Hz), 6.48 e 6.26 (1H, t+t, J = 6.4 Hz), 4.46 (2H, d, J = 5.2 Hz), 3.74 (3H, s), 2.50 (3H, s). MS: 430.1 (M+H+).

Exemplo 24: 3-((4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2ilamino)metil)-N- metilbenzamida

[00122] 4-(1-metil-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-6-il)- 5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 137 mg, 0,471 mmol) foi reagido com 3-formil-N- metilbenzamida (100 mg, 0,613 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (EtOAc para EtOAc:MeOH = 100:1) para obter 3-((4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6-

metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-ilamino)metil)-N- metilbenzamida (32 mg, 16%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.64 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.35 (1H, s),

7.89 (2H, s), 7.69 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.66-7.62 (1H, m),

7.61 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.44 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.32 (2H, brs), 7.44 (1H, t, J = 7.8 Hz), 4.62 (2H, s), 2.91 (3H, s), 2.50 (3H, s). MS: 439.1(M+H+).

Exemplo 25: 4-((4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-ilamino)metil)-N- metilbenzamida

[00123] 4-(1-metil-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-6-il)- 5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 125 mg, 0,429 mmol) foi reagido com 4-formil-N- metilbenzamida (70 mg, 0,429 mmol) sob as condições do Exemplo 11. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (DCM:MeOH = 50:1) para obter 4-((4- ([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin-2- il)-1H-imidazol-2-ilamino)metil)-N-metilbenzamida (2,4 mg, 1,3%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):  8.83 (1H, d, J = 7.2 Hz), 8.49 (1H, s), 8.00 (1H, s), 7.85 (2H,

d, J = 8.0 Hz), 7.70 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.54 (2H, d, J =

8.4 Hz), 7.35-7.25 (3H, m), 4.74 (2H, s), 2.91 (3H, s), 2.56 (3H, s). MS: 439.1(M+H+).

Exemplo 26: N-(4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin- 2-il)-1H-imidazol-2-il)-2-fluorobenzamida

[00124] A uma solução de 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 80 mg, 0,275 mmol) em DCM (2,8 ml) foi adicionado cloreto de 2-fluorobenzoila (44 mg, 0,275 mmol) e TEA (0,080 ml, 0,549 mmol) em temperatura ambiente. Depois de agitada por 3 horas em temperatura ambiente, a mistura reacional foi diluída com água e extraída duas vezes com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH-SiO2 (EtOAc apenas para EtOAc:MeOH = 10:1) para obter N-(4-([1,2,4]triazol[1,5-a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin- 2-il)-1H-imidazol-2-il)-2-fluorobenzamida (24 mg, 22%) como um sólido amarelo pálido. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  11.60 (1H, brs), 9.82 (1H, brs), 8.57 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.36

(1H, s), 8.16 (1H, t, J = 7.8 Hz), 8.08 (1H, s), 7.60-7.56 (1H, m), 7.49 (1H, t, J = 7.4 Hz), 7.40-7.31 (3H, m), 7.21 (1H, t, J = 10.0 Hz), 7.06 (1H, d, J = 7.6 Hz), 2.63 (3H, s). MS: 414.2 (M+H+).

Exemplo 27: 4-([1,2,4]tiazol[1,5-a]piridin-7-il)-N-(1-(2- fluorofenil)etil)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2- amina

[00125] Uma mistura de 4-([1,2,4]triazol[1,5- a]piridin-7-il)-5-(6-metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (Intermediário 7, 100 mg, 0,343 mmol), 2-fluorobenzaldeído (0,0500 ml, 0,446 mmol) e K2CO3 (95,0 mg, 0,687 mmol) em MeOH (3,4 ml) foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas.

Depois de filtrado através de uma almofada de Celite, o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi dissolvido em THF seco (3,4 ml). Após a adição de ZnCl2 (4,68 mg, 0,034 mmol) e cloreto de metilmagnésio (solução 3,0 M em THF, 0,34 ml, 1,03 mmol) a 0 C, a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora e depois extinta com NH4Cl aq.. A mistura foi extraída com DCM duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em NH2-SiO2 (Hexanos:EtOAc = 1:3) para obter 4-([1,2,4]tiazol[1,5- a]piridin-7-il)-N-(1-(2-fluorofenil)etil)-5-(6- metilpiridin-2-il)-1H-imidazol-2-amina (40 mg, 28%) como um sólido amarelo. RMN 1H (400 MHz, CDCl3):  9.65 (1H, brs),

8.53 (1H, d, J = 6.8 Hz), 8.33 (1H, s), 8.04 (1H, s), 7.45 (1H, td, J = 7.6, 1.6 Hz), 7.41-7.38 (2H, m), 7.30 (1H, d, J = 9.2 Hz), 7.24 (1H, d, J = 6.0 Hz), 7.14 (1H, t, J = 7.2 Hz), 7.06 (1H, t, J = 9.4 Hz), 6.90 (1H, d, J = 7.6 Hz),

5.02 (1H, quint, J = 6.8 Hz), 4.87 (1H, d, J = 6.8 Hz), 2.37 (3H, s), 1.57 (3H, d, J = 6.8 Hz). MS: 414.1 (M+H+).

Atividade biológica Cultura de células

[00126] As células de linhas de células cancerígenas humanas Hs578T (ATCC® HTB-22TM) foram cultivadas em DMEM (meio de Eagle modificado por Dulbecco) suplementado com soro fetal bovino a 10% e mistura de penicilina a 1% e estreptomicina (Gibco). As células foram mantidas em atmosfera com CO2 a 5% umidificada a 37 C.

Ensaio de quinase ALK5

[00127] Proteínas ALK5 recombinantes, substrato ATP e ALK5 (Promega, Madison, EUA) em concentrações finais de 25 ng, 50 M e 0,2 g/l, respectivamente, foram aliquotadas em 50 l de tampão de quinase suplementado com 50 uM de DTT em placas de 96 poços, em combinação com compostos inibidores diluídos em concentrações variáveis em tampão quinase em triplicata. Amostras de controle positivo sem compostos inibidores e controles negativos sem quinase recombinante também foram medidos em triplicata. A mistura reagiu em TA por 120 min. 50 l de reagente ADP-Glo (Promega) foi adicionado e incubado em TA por 40 min e então 100 l de reagente de detecção de quinase foram adicionados e incubados em temperatura ambiente por 30 min. As atividades da quinase foram medidas pelo leitor de microplacas multimodo Varioskan LUX (Thermo Fisher Scientific, Waltham, EUA). SigmaPlot (software Systat) foi usado para gráficos e análise de regressão por dose sigmoidal-resposta com coeficiente de Hill variável.

Ensaio de Repórter de Luciferase baseado em Células para Atividade de ALK5

[00128] A atividade biológica dos compostos de BSC- 1200 foi determinada pela inibição seletiva com o promotor responsivo a Smad 2/3 em resposta à estimulação de TGF-1 a nível celular. As células foram semeadas a 3 x 104/poço em placas de 24 poços transitoriamente transfectadas com 500 ng de construção repórter (CAGA)-12-luciferase e 5 ng de vetor de pRL-TK Renilla luciferase (Promega, Madison, WI), um controle interno para eficiência de transfecção, usando o reagente Lipofectamine 3000 (Thermo Fisher Scientific, Waltham, EUA). Após 24 horas de transfecção, as células foram pré-tratadas com inibidor de ALK5 de maneira dependente da dose. E então, as células foram estimuladas com 2 ng/ml de TGF-1 recombinante por 12 horas. Após a estimulação, as atividades da lucíferas do pirilampo e da Renilla foram medidas pelo Ensaio de Repórter de Luciferase Duplo (Promega).

Imunoblotting de Fósforo-Smad 2/3

[00129] A atividade biológica dos compostos de BSC- 1200 foi determinada medindo sua capacidade de inibir os níveis de fósforo-Smad 2/3 induzidos por TGF- em células Hs578T. As células foram pré-tratadas com inibidores de ALK5 (10, 20, 50, 100 nM) por 1 hora e tratadas com 2ng/ml de TGF-1 de humano recombinante por 1 hora sob soro livre. As células foram lisadas em um tampão contendo 25 mM de HEPES, pH 7,6, NaCl 150 mM, 1% de NP40, 1% de desoxicolato de sódio, 0,1% de SDS e mistura de inibidor de protease (Bimake, Houston, EUA). Os extratos foram separados por SDS-PAGE seguido por eletrotransferência para membranas de difloreto de polivinilideno (PVDF) e sondados com um Ab anti-fosfo- Smad2, Ab anti-fosfo-Smad3, Ab anti-Smad 2/3 e -tubulina, seguido por anti-coelho conjugado com peroxidase de rábano, IgG anti-camundongo e revelado com o kit Super Signal® West dura (Pierce). As membranas são colocadas em um analisador de imagens (Imagequant LAS 500; GE Heathcare), conectado a um computador que permite a geração das imagens (Software

Image Reader LAS 500).

Atividade relativa da luciferase: valor de IC50 (nM) A: abaixo de 10 nM, B: 10 ~ 100 nM, C: acima de 100 nM [Tabela 1] Exemplo Estrutura ID de Composto (BSC-1200-XX) Ensaio 1 50 B 2 51 A 3 8 B 4 46 A 5 47 A

6 24 B

7 53 B

8 42 B

9 29 A

10 43 B

11 15 B

12 52 B

13 31 B

14 32 A

15 54 B

16 19 B

17 23 B

18 30 A

19 22 B

20 34 A

21 33 B

22 35 B

23 36 B

24 41 C 25 40 C 26 18 B 27 28 B Aplicabilidade Industrial

[00130] A presente invenção seria usada para desenvolver uma composição farmacêutica para prevenir e/ou tratar várias doenças associadas a ALK5 e/ou ALK4.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser de fórmula I: em que, cada R1 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CF3, acila, amino, amino substituído, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído, haloalquila C1-C6, cicloalquila C3-C7, alquilcarboxi, ciano, nitro e alcoxi; cada R2 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CF3, acila, amino, amino substituído, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído, haloalquila C1-C6, ciano, nitro, alcoxi, aciloxi e ariloxi; m é 0, 1, 2, 3 ou 4; n é 0, 1, 2, 3, 4 ou 5; X é CH ou N; A é -CH2Y-, -CHR3Y-, -CR3R4Y-, -C(O)Y-, -YCH2-, -YCHR3-, -YCR3R4-, ou -YC(O)-; Y é NH, NR5, O, S, S(O) ou S(O)2; R3 é selecionado do grupo que consiste em F, CF3, alquila

C1-C6, alquila C1-C6 substituído e ciano; ou R3 e R4 juntamente com o átomo ao qual estão ligados formam um anel carbocíclico ou heterocíclico de 3 a 7 membros; R4 é F, CF3 ou alquila C1-C6; e R5 é alquila C1-C6, fluoroalquila C1-C6, difluoroalquila C1-C6 ou trifluoroalquila C1-C6.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a fórmula I inclui adicionalmente os compostos de configuração absoluta de Fórmula IIa e IIb: ou sal dos mesmos, em que; cada R1 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CF3, acila, amino, amino substituído, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído, haloalquila C1-C6, cicloalquila C3-C7, alquilcarboxi, ciano, nitro e alcoxi; cada R2 é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, CF3, acila, amino, amino substituído, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído,

haloalquila C1-C6, ciano, nitro, alcoxi, aciloxi e ariloxi; R3 é selecionado do grupo que consiste em F, CF3, alquila C1-C6, alquila C1-C6 substituído e ciano; ou R3 e R4 juntamente com o átomo ao qual estão ligados formam um anel carbocíclico ou heterocíclico de 3 a 7 membros; R4 é F, CF3 ou alquila C1-C6; Y é NH, NR5, O, S, S(O) ou S(O)2; m é 0, 1, 2, 3 ou 4; n é 0, 1, 2, 3, 4 ou 5; e R5 é alquila C1-C6, fluoroalquila C1-C6, difluoroalquila C1-C6 ou trifluoroalquila C1-C6.

3. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade farmaceuticamente eficaz de um composto conforme definido na reivindicação 1 ou 2 ou um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo e um carreador farmaceuticamente aceitável.

4. Uso de um composto da reivindicação 1 ou 2 ou de um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na preparação de uma composição farmacêutica para inibir a enzima ALK.

5. Uso de um composto, conforme definido na reivindicação 1 ou 2, ou de um sal, solvato, polimorfo,

éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento ou a profilaxia de uma doença ou condição mediada por ALK quinase, em que a doença ou a condição é carcinoma papilar da tireoide, câncer pancreático, câncer do pulmão, câncer do cólon, carcinoma da mama, neuroblastoma, dor, caquexia, dermatite ou asma.

6. Uso de um composto conforme definido na reivindicação 1 ou 2 ou de um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento ou a profilaxia de distúrbios proliferativos.

7. Uso, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que os distúrbios proliferativos são selecionados do grupo que consiste em dor, câncer, inflamação, doença neurodegenerativa e certas doenças infecciosas.

8. Método para inibir uma enzima ALK, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de contactar a enzima ALK com uma quantidade suficiente para inibir a referida enzima de um composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 ou 2 ou um sal, solvato, polimorfo, éster, tautômero ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Método para o tratamento ou a profilaxia de uma doença ou condição mediada por ALK, caracterizado pelo fato de que compreende a administração a um indivíduo, em necessidade do mesmo, de uma quantidade eficaz de uma composição que compreende um composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, ou um sal, solvato, polimorfo, éster farmaceuticamente aceitável, tautômero ou pró-fármaco do mesmo, em que a doença ou condição é carcinoma papilar de tireoide, câncer de pâncreas, câncer de pulmão, câncer de cólon, carcinoma de mama, neuroblastoma, dor, caquexia, dermatite ou asma.

10. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o distúrbio ou a doença são distúrbios proliferativos.

11. Método, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que os distúrbios proliferativos são selecionados do grupo que consiste em doenças inflamatórias e cânceres.