BR112021013515A2

BR112021013515A2 - Compostos de anandamida

Info

Publication number: BR112021013515A2
Application number: BR112021013515-4A
Authority: BR
Inventors: David Lawrence Silver; Mahmood Ahmed; Sing Yeung Frankie Mak
Original assignee: Travecta Therapeutics Pte. Ltd.
Priority date: 2019-01-10
Filing date: 2020-01-10
Publication date: 2021-09-14
Also published as: EP3908375A1; SG11202107213WA; MX2021008188A; KR20210138572A; IL284703A; WO2020146771A1; AU2020206722A1; JP2022517993A; US20220112225A1; CN113784754A; CA3125980A1

Abstract

compostos de anandamida. a presente invenção refere-se a compostos de anandamida e 2-araquidonil glicerol úteis para o tratamento de uma doença ou transtorno em um indivíduo que precisa do mesmo. também são fornecidas composições farmacêuticas que compreendem os compostos e métodos de tratamento de doenças ou transtornos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COM- POSTOS DE ANANDAMIDA".

REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido Provisório U.S. com o número de série 62/790.787, depositado em 10 de janeiro de 2019, cuja divulgação é incorporada neste documento por referência em sua totalidade.

CAMPO DA TÉCNICA

[002] A presente invenção refere-se a compostos de anandamida e 2-araquidonil glicerol úteis para o tratamento de uma doença ou dis- túrbio em um sujeito com necessidade dos mesmos.

ANTECEDENTES

[003] O sistema endocanabinoide (eCB) tem sido implicado em uma variedade de processos, incluindo sinalização celular, codificação de memória, mecanismos compensatórios e respostas imunossupres- soras e anti-inflamatórias. O sistema eCB compreende pelo menos dois receptores: o receptor canabinoide CB1, amplamente distribuído no cérebro e presente em alguns órgãos periféricos, e o receptor CB2, encontrado principalmente nos sistemas periférico e imunológico e em algumas regiões do cérebro. Os agonistas endógenos desses recepto- res são os canabinoides endógenos (eCBs), uma família de lipídios que compreende anandamida (AEA) e 2-araquidonil glicerol (2-AG), bem como outros compostos intimamente relacionados (consultar, por exemplo, Piomelli, Nat. Rev. Neurosci. 2003, 4 (11), 873).

SUMÁRIO

[004] A presente invenção refere-se a, inter alia, compostos de Fórmula I:

I ou sais farmaceuticamente aceitáveis, em que os membros constituin- tes são definidos neste documento.

[005] A presente invenção fornece ainda composições farmacêu- ticas que compreendem um composto de Fórmula I, ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, e um transportador farmaceutica- mente aceitável.

[006] A presente invenção fornece ainda métodos de tratamento de uma doença ou distúrbio em um sujeito, que compreende adminis- trar a um sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz de um com- posto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[007] A menos que definido de outra forma, todos os termos téc- nicos e científicos usados neste documento têm o mesmo significado como comumente entendido por alguém versado na técnica à qual es- ta invenção pertence. Métodos e materiais são descritos neste docu- mento para uso na presente invenção; outros métodos e materiais adequados conhecidos na técnica também podem ser usados. Os materiais, métodos e exemplos são apenas ilustrativos e não se desti- nam a ser limitantes. Todas as publicações, pedidos de patentes, pa- tentes, sequências, entradas de banco de dados e outras referências mencionadas neste documento são incorporadas por referência em sua totalidade. Em caso de conflito, o presente relatório descritivo, incluindo definições, prevalecerá.

DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[008] As Figuras 1A a 1B mostram separação de fosfolipídios de células hMfsd2a (WT), células HEK293 transfectadas com D97A (D97A) e células transfectadas com vetor vazio (EV) tratadas com Composto 3 (anandamida PC) por cromatografia de camada fina (TLC) via coloração de iodo (Figura 1A) e coloração de acetato cúprico (Figu- ra 1B).

[009] As Figuras 2A a 2B mostram separação de fosfolipídios de células hMfsd2a (WT), células HEK293 transfectadas com D97A (D97A) e células transfectadas com vetor vazio (EV) tratadas com Composto 4 por cromatografia de camada fina (TLC) via coloração de iodo (Figura 2A) e coloração de acetato cúprico (Figura 2B).

[0010] As Figuras 3A a 3B mostram separação de fosfolipídios de células hMfsd2a (WT), células HEK293 transfectadas com D97A (D97A) e células transfectadas com vetor vazio (EV) tratadas com Composto 5 por cromatografia de camada fina (TLC) via coloração de iodo (Figura 3A) e coloração de acetato cúprico (Figura 3B).

[0011] As Figuras 4A a 4B mostram separação de fosfolipídios de células hMfsd2a (WT), células HEK293 transfectadas com D97A (D97A) e células transfectadas com vetor vazio (EV) tratadas com Composto 6 por cromatografia de camada fina (TLC) via coloração de iodo (Figura 4A) e coloração de acetato cúprico (Figura 4B).

[0012] As Figuras 5A a 5B mostram separação de fosfolipídios de células hMfsd2a (WT), células HEK293 transfectadas com D97A (D97A) e células transfectadas com vetor vazio (EV) tratadas com Composto 7 por cromatografia de camada fina (TLC) via coloração de iodo (FIG. 5A) e coloração de acetato cúprico (Figura 5B).

[0013] As Figuras 6A a 6B mostram separação de fosfolipídios de células hMfsd2a (WT), células HEK293 transfectadas com D97A (D97A) e células transfectadas com vetor vazio (EV) tratadas com Composto 8 por cromatografia de camada fina (TLC) via coloração de iodo (FIG. 6A) e coloração de acetato cúprico (FIG. 6B).

[0014] As Figuras 7A a 7B mostram separação de fosfolipídios de células hMfsd2a (WT), células HEK293 transfectadas com D97A (D97A) e células transfectadas com vetor vazio (EV) tratadas com Composto 20 por cromatografia de camada fina (TLC) via coloração de iodo (FIG. 7A) e coloração de acetato cúprico (Figura 7B).

[0015] As Figuras 8A a 8G mostram resultados do ensaio de transporte de MFSD2A in vitro em células hMfsd2a (WT), células HEK293 transfectadas com D97A (D97A) e células transfectadas com vetor vazio (EV) tratadas com Composto 3 (Figura 8A), Composto 4 (Figura 8B), Composto 5 (Figura 8C), Composto 6 (Figura 8D), Com- posto 7 (Figura 8E), Composto 8 (Figura 8F) ou Composto 20 (Figura 8G).

[0016] A Figura 9A mostra a quantidade de Composto 3 restante no homogenato de cérebro descrito no Exemplo 11.

[0017] A Figura 9B mostra a quantidade de Composto 2 formado no homogenato de cérebro tratado com o Composto 3, conforme des- crito no Exemplo 11.

[0018] A Figura 9C mostra a quantidade de Composto 4 restante no homogenato de cérebro descrito no Exemplo 11.

[0019] A Figura 9D mostra a quantidade de Composto 2 formado no homogenato de cérebro tratado com o Composto 4, conforme des- crito no Exemplo 11.

[0020] A Figura 9E mostra a quantidade de Composto 5 restante no homogenato de cérebro descrito no Exemplo 11.

[0021] A Figura 9F mostra a quantidade do Composto 2 formado no homogenato de cérebro tratado com o Composto 5, conforme des- crito no Exemplo 11.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0022] A magnitude e a duração da modulação do receptor CB1 e/ou CB2 in vivo por AEA e 2-AG é relativamente curta, presumivel- mente devido ao rápido processo de inativação envolvendo proteínas desativadoras de endocanabinoides, com AEA e 2-AG predominante- mente hidrolisado por Hidrolase de Amida de Ácido Graxo (FAAH) e monoacilglicerol lipase (MAGL), respectivamente. FAAH e MAGL são hidrolase de serina e sua inibição é conhecida por aumentar o nível de ligantes canabinoides endógenos, incluindo AEA e 2-AG. O aumento do nível de ativação dos receptores canabinoides resultante do au- mento do nível de AEA e/ou 2-AG mostrou efeito analgésico em mode- los de dor aguda e crônica, bem como em uma série de outros mode- los animais (por exemplo, depressão, ansiedade, inflamação, trauma cerebral, esclerose múltipla, câncer e glaucoma) (consultar, por exem- plo, Nomura, Life Sci. 2013, 92 (8 a 9), 492; e Mallet, Int. J. Clin. Pharmacol. Ther. 2016; 54 (7), 498).

[0023] Consequentemente, o presente pedido fornece uma abor- dagem alternativa para aumentar os níveis de ligantes canabinoides endógenos por meio da administração dos compostos descritos neste documento.

COMPOSTOS

[0024] O presente pedido fornece, inter alia, um composto de Fórmula I:

I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, e C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alqui- leno, em que cada C1-4 alquileno é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 representa C1-6 alquileno, que é opcionalmente substitu- ído por OH ou CO2; Y1 é selecionado a partir do grupo que consiste em O, S e NR5; R1 é C1-10 alquila;

R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2; e R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2.

[0025] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I não é um composto selecionado a partir de: ; ;e .

[0026] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I é um composto de Fórmula VI:

VI ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al-

quileno, C1-4 alquileno-OC(O)OC1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquile- no, e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 representa C1-6 alquileno, que é opcionalmente substitu- ído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila.

[0027] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VI é um composto de Fórmula VIa: VIa ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)OC1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1- 4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquile- no, e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 representa C1-6 alquileno, que é opcionalmente substitu- ído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2A é H ou CH2CO2;

R2B é H ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila.

[0028] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I é um composto de Fórmula VII:

VII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)OC1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquile- no, e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 representa C1-6 alquileno, que é opcionalmente substitu- ído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila.

[0029] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VII é um composto de Fórmula VIIa: VIIa ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)OC1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquile- no, e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 representa C1-6 alquileno, que é opcionalmente substitu- ído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2A é H ou CH2CO2; R2B é H ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila.

[0030] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I é um composto de Fórmula Ia: Ia ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, e C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alqui- leno, em que cada C1-4 alquileno é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 representa C1-6 alquileno, que é opcionalmente substitu-

ído por OH ou CO2; Y1 é selecionado a partir do grupo que consiste em O, S e NR5; R1 é C1-10 alquila; R2A é H ou CH2CO2; R2B é H ou CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2; e R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2.

[0031] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I, Fór- mula Ia, Fórmula VII ou Fórmula VIIa não é: , ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0032] Em algumas modalidades, o composto é um composto de Fórmula Ia, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, desde que quando R2A for H, então R2B seja CO2 e R4 não seja hidroximetila.

[0033] Em algumas modalidades, L1 é CO. Em algumas modalida- des das Fórmulas I-Ia, VI-VIa e VII-VIIa, L1 é PO2.

[0034] Em algumas modalidades, X1 é selecionado a partir do gru- po que consiste em CH2, CH2OC(O)OC1-4 alquileno, CH2OC(O)C1-4 alquileno, CH2OC1-4 alquileno, CH2O-C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno e CH2-OC1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquileno é opcionalmente substituído por OH.

[0035] Em algumas modalidades, X1 é selecionado a partir do gru-

po que consiste em C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquile- no, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno e C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquileno é opcio- nalmente substituído por OH ou CO2.

[0036] Em algumas modalidades, X1 é selecionado a partir do gru- po que consiste em CH2, CH2OC(O)O-C1-4 alquileno, CH2OC(O)C1-4 alquileno, CH2OC1-4 alquileno, CH2OC1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, CH2-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquileno, e C1-4 alquileno-OC(O)NH- C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquileno é opcionalmente substituído por OH.

[0037] Em algumas modalidades, X1 é selecionado a partir do gru- po que consiste em CH2, CH2OC(O)OCH2CH2, CH2OC(O)OCH2CH(OH)CH2, CH2OC(O)CH2CH2CH2, CH2OC(O)CH2CH2, CH2OCH(CH3), CH2OCH(CH3)OCH2CH(OH)CH2, CH2OCH(CH3)OCH2CH2, CH2OCH(CH3)OC(O)CH2, e CH2OC(O)NHCH2CH2.

[0038] Em algumas modalidades, X1 é selecionado a partir do gru- po que consiste em CH2, CH2OC(O)OCH2CH2, CH2OC(O)OCH2CH(OH)CH2, CH2OC(O)CH2CH2CH2, CH2OC(O)CH2CH2, CH2OCH(CH3), CH2OCH(CH3)OCH2CH(OH)CH2, CH2OCH(CH3)OCH2CH2, e CH2OCH(CH3)OC(O)CH2. Em algumas modalidades, X1 é CH2OC(O)OCH2CH2, CH2OC(O)OCH2CH(OH)CH2, CH2OC(O)CH2CH2CH2, CH2OC(O)CH2CH2, CH2OCH(CH3), CH2OCH(CH3)OCH2CH(OH)CH2, CH2OCH(CH3)OCH2CH2, e CH2OCH(CH3)OC(O)CH2. Em algumas modalidades, X1 é CH2.

[0039] Em algumas modalidades, X2 é C1-3 alquileno, que é opcio- nalmente substituído por OH ou CO2.Em algumas modalidades, X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por CO2. Em algumas modalidades, X2 é selecionado a partir do grupo que consiste em CH2,

CHCH3 e CH2CO2. Em algumas modalidades, X2 é CH2 ou CH2CO2.

[0040] Em algumas modalidades, Y1 é O ou NR5. Em algumas modalidades, Y1 é NR5. Em algumas modalidades, R5 é H ou C1-3 al- quila. Em algumas modalidades, Y1 é NH. Em algumas modalidades, Y1 é O.

[0041] Em algumas modalidades, R1 é C1-6 alquila.Em algumas modalidades, R1 é C1-3 alquila. Em algumas modalidades, R1 é propila.

[0042] Em algumas modalidades, R2 é selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por OH ou CO2. Em algumas modalidades, R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substi- tuída por CO2. Em algumas modalidades, R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, CHCH3 e CH2CO2. Em algumas modalida- des, R2 é H ou CH2CO2.

[0043] Em algumas modalidades, cada R3 é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila. Em al- gumas modalidades, cada R3 é H. Em algumas modalidades, cada R3 é um grupo C1-3 alquila selecionado independentemente. Em algumas modalidades, cada R3 é um grupo C1-3 alquila, em que cada R3 é um grupo do mesmo. Em algumas modalidades, cada R3 é metila ou etila. Em algumas modalidades, cada R3 é metila. Em algumas modalida- des, cada R3 é etila.

[0044] Em algumas modalidades, R4 é selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por OH ou CO2. Em algumas modalidades, R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substi- tuída por OH. Em algumas modalidades, R4 é H ou hidroximetila.

[0045] Em algumas modalidades: L1 é CO ou PO2; X1 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; Y1 é O ou NR5; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por OH ou CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por OH ou CO2; e R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H ou C1-3 alquila.

[0046] Em algumas modalidades: L1 é CO ou PO2; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; Y1 é O ou NH; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por OH.

[0047] Em algumas modalidades: L1 é PO2; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; Y1 é NH; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por OH.

[0048] Em algumas modalidades: L1 é CO; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; Y1 é O; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por OH.

[0049] Em algumas modalidades: L1 é CO ou PO2; X1 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por OH ou CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila.

[0050] Em algumas modalidades: L1 é CO ou PO2; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila.

[0051] Em algumas modalidades da Fórmula VI ou Fórmula VIa: L1 é PO2; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila.

[0052] Em algumas modalidades da Fórmula VII ou Fórmula VIIa: L1 é CO; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, que é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila que é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila.

[0053] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VI é um composto de Fórmula II:

II ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que as variá- veis L1, X2, R2 e R3 são definidas de acordo com as definições forneci- das neste documento para compostos de Fórmula I e Fórmula VI.

[0054] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VI é um composto de Fórmula III:

III ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que as variá- veis X2, R2 e R3 são definidas de acordo com as definições fornecidas neste documento para compostos de Fórmula I e Fórmula VI.

[0055] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VII é um composto de Fórmula IV:

IV ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que as variá- veis L1, X2, R2 e R3 são definidas de acordo com as definições forneci- das neste documento para compostos de Fórmula I e Fórmula VII.

[0056] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VII é um composto de Fórmula V:

V ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que as variá- veis X2, R2 e R3 são definidas de acordo com as definições fornecidas neste documento para compostos de Fórmula I e Fórmula VII.

[0057] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I é sele- cionado do grupo que consiste em: ; ; ; ; ; ; ;

;

O O O O N O

H P N O O O ; ; ; ; ; ; ;e ; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0058] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I é sele- cionado do grupo que consiste em: ;

;

;e

; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0059] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VI é selecionado do grupo que consiste em: ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;

;

;e

;

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0060] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VII é selecionado do grupo que consiste em: ; ; ; ; ; ; ; ; ;

; ; ; ; ;e ; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0061] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula Ia ou Fórmula VIa é selecionado a partir do grupo que consiste em: ; ;

; ; ; ; ; ; ;e ; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0062] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I ou Fórmula VI é: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

SÍNTESE

[0063] Como será apreciado, os compostos fornecidos neste do- cumento, incluindo seus sais, podem ser preparados usando técnicas de síntese orgânica conhecidas e podem ser sintetizados de acordo com qualquer uma das numerosas vias sintéticas possíveis.

[0064] Os compostos fornecidos neste documento podem ser pre- parados, por exemplo, de acordo com os procedimentos gerais mos- trados nos Esquemas 1 a 2, usando materiais de partida apropriada- mente substituídos. ESQUEMA 1.

ESQUEMA 2.

[0065] Será apreciado por um versado na técnica que os proces- sos descritos não são os meios exclusivos pelos quais os compostos fornecidos neste documento possam ser sintetizados e que um amplo repertório de reações orgânicas sintéticas esteja disponível para ser potencialmente utilizado na síntese de compostos fornecidos neste documento. O versado na técnica sabe como selecionar e implementar rotas sintéticas apropriadas. Métodos sintéticos adequados de materi-

ais de partida, intermediários e produtos podem ser identificados por referência à literatura, incluindo fontes de referência, tais como: Ad- vances in Heterocyclic Chemistry, Vols. 1 a 107 (Elsevier, 1963 a 2012); Journal of Heterocyclic Chemistry Vols. 1 a 49 (Journal of Hete- rocyclic Chemistry, 1964 a 2012); Carreira, et al. (Ed.) Science of Synthesis, Vols. 1 a 48 (2001 a 2010) e Knowledge Updates KU2010/1 a 4; 2011/1 a 4; 2012/1 a 2 (Thieme, 2001 a 2012); Katritzky, et al. (Ed.) Comprehensive Organic Functional Group Transformations, (Pergamon Press, 1996); Katritzky et al. (Ed.); Comprehensive Organic Functional Group Transformations II (Elsevier, 2a edição, 2004); Katri- tzky et al. (Ed.), Comprehensive Heterocyclic Chemistry (Pergamon Press, 1984); Katritzky et al., Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, (Pergamon Press, 1996); Smith et al., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 6a edição. (Wiley, 2007); Trost et al. (Ed.), Comprehensive Organic Synthesis (Pergamon Press, 1991).

[0066] A preparação dos compostos descritos neste documento pode envolver a proteção e desproteção de vários grupos químicos. A necessidade de proteção e desproteção, e a seleção de grupos de proteção apropriados, podem ser prontamente determinadas por um versado na técnica. A química dos grupos de proteção pode ser en- contrada, por exemplo, em T.W. Greene e P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edição, Wiley & Sons, Inc., New York (1999).

[0067] As reações podem ser monitoradas de acordo com qual- quer método adequado conhecido na técnica. Por exemplo, a forma- ção do produto pode ser monitorada por meios espectroscópicos, co- mo espectroscopia de ressonância magnética nuclear (por exemplo, 1 13 H ou C), espectroscopia de infravermelho, espectrofotometria (por exemplo, UV-visível), espectrometria de massa ou por métodos croma-

tográficos, como cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC), espectroscopia de massa e cromatografia líquida (LCMS) ou cromato- grafia em camada fina (TLC). Os compostos podem ser purificados por aqueles versados na técnica por uma variedade de métodos, inclu- indo cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) e cromatogra- fia de sílica de fase normal.

[0068] Em vários locais no presente relatório descritivo, substituin- tes de encadeamento divalente são descritos. Pretende-se especifi- camente que cada substituinte de encadeamento divalente inclua as formas direta e inversa do substituinte de encadeamento. Por exem- plo, -NR(CR'R'')n- inclui tanto -NR(CR'R'')n- e -(CR'R'')nNR-. Em que a estrutura requer claramente um grupo de encadeamento, as variáveis Markush listadas para esse grupo são entendidas como grupos de en- cadeamento.

[0069] Conforme usado neste documento, a expressão "opcional- mente substituído" significa não substituído ou substituído. Conforme usado neste documento, o termo "substituído" significa que um átomo de hidrogênio é removido e substituído por um substituinte. Deve ser entendido que a substituição em um dado átomo é limitada pela valên- cia.

[0070] Ao longo das definições, o termo "Cn-m" indica um intervalo que inclui os pontos finais, em que n e m são números inteiros e indi- cam o número de carbonos. Os exemplos incluem C1-4, C1-6 e seme- lhantes.

[0071] Tal como aqui utilizado, o termo "Cn-m alquileno", utilizado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de encadeamento alquila divalente que tem n a m carbonos. Exem- plos de grupos alquileno incluem, mas não estão limitados a, metileno, etan-1,2-di-il, propan-1,3-di-il, propan-1,2-di-il e semelhantes. Em al- gumas modalidades, a porção química de alquileno contém 1 a 6, 1 a

3 ou 1 a 2 átomos de carbono.

[0072] Conforme usado neste documento, o termo "Cn-m alquila", utilizado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo hidrocarboneto saturado que pode ser de cadeia linear ou ramificada, tendo n a m carbonos. Exemplos de porções químicas de alquila incluem, mas não estão limitados a, grupos químicos tais como metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, terc-butila, isobutila, sec- butila; homólogos superiores, tais como 2-metil-1-butila, n-pentila, 3- pentila, n-hexila, 1,2,2-trimetilpropila e semelhantes. Em algumas mo- dalidades, o grupo alquila contém de 1 a 6 átomos de carbono, de 1 a 4 átomos de carbono, de 1 a 3 átomos de carbono ou 1 a 2 átomos de carbono.

[0073] O termo "composto", tal como utilizado neste documento, pretende incluir todos os estereoisômeros, isômeros geométricos, tautômeros e isótopos das estruturas representadas. Os compostos identificados neste documento pelo nome ou estrutura como uma for- ma tautomérica particular têm a intenção de incluir outras formas tau- toméricas, a menos que especificado de outra forma.

[0074] Os compostos fornecidos neste documento também inclu- em formas tautoméricas. As formas tautoméricas resultam da troca de uma ligação simples por uma ligação dupla adjacente, juntamente com a migração concomitante de um próton. As formas tautoméricas inclu- em tautômeros prototrópicos que são estados de protonação isomérica com a mesma fórmula empírica e carga total. Tautômeros prototrópi- cos de exemplo incluem pares cetona - enol, pares amida - ácido imí- dico, pares lactama - lactima, pares enamina - imina e formas anulares em que um próton pode ocupar duas ou mais posições de um sistema heterocíclico, por exemplo, 1H- e 3H-imidazol, 1H-, 2H- e 4H- 1,2,4- triazol, 1H- e 2H- isoindol e 1H- e 2H-pirazol. As formas tautoméricas podem estar em equilíbrio ou estericamente bloqueadas em uma for-

ma por substituição apropriada.

[0075] Todos os compostos, e seus sais farmaceuticamente acei- táveis, podem ser encontrados juntamente com outras substâncias, tais como água e solventes (por exemplo, hidratos e solvatos) ou po- dem ser isolados.

[0076] Em algumas modalidades, a preparação de compostos po- de envolver a adição de ácidos ou bases para afetar, por exemplo, a catálise de uma reação desejada ou a formação de formas de sal, co- mo sais de adição de ácido.

[0077] Exemplos de ácidos podem ser ácidos inorgânicos ou or- gânicos e incluem, mas não estão limitados a, ácidos fortes e fracos. Alguns exemplos de ácidos incluem ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido p-toluenossulfônico, ácido 4- nitrobenzoico, ácido metanossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido trifluoroacético e ácido nítrico. Alguns ácidos fracos incluem, mas não estão limitados a ácido acético, ácido propiônico, ácido butanoico, áci- do benzoico, ácido tartárico, ácido pentanoico, ácido hexanoico, ácido heptanoico, ácido octanoico, ácido nonanoico e ácido decanoico.

[0078] Bases de exemplo incluem hidróxido de lítio, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato de lítio, carbonato de sódio, carbonato de potássio e bicarbonato de sódio. Alguns exemplos de bases fortes incluem, mas não estão limitados a, hidróxido, alcóxidos, amidas de metal, hidretos de metal, dialquilamidas de metal e arilami- nas, em que; alcóxidos incluem sais de lítio, sódio e potássio de óxidos de metila, etila e t-butila; as amidas de metal incluem amida de sódio, amida de potássio e amida de lítio; hidretos de metal incluem hidreto de sódio, hidreto de potássio e hidreto de lítio; e as dialquilamidas de metal incluem os sais de lítio, sódio e potássio de amidas substituídas por metila, etila, n-propila, iso-propila, n-butila, terc-butila, trimetilsilila e ciclo-hexila.

[0079] Em algumas modalidades, os compostos e sais fornecidos neste documento são substancialmente isolados. Por "substancialmen- te isolado" entende-se que o composto é pelo menos parcialmente ou substancialmente separado do ambiente no qual foi formado ou detec- tado. A separação parcial pode incluir, por exemplo, uma composição enriquecida nos compostos fornecidos neste documento. A separação substancial pode incluir composições que contêm pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 60%, pelo menos cerca de 70%, pelo me- nos cerca de 80%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 95%, pelo menos cerca de 97% ou pelo menos pelo menos cerca de 99% em peso dos compostos fornecidos neste documento, ou sal dos mesmos. Os métodos para isolar compostos e seus sais são rotineiros na técnica.

[0080] O termo "temperatura ambiente" ou "RT", tal como utilizado neste documento, é entendido na técnica e refere-se geralmente a uma temperatura (por exemplo, uma temperatura de reação) que é cerca da temperatura do ambiente em que a reação é realizada por exemplo, uma temperatura de cerca de 20 ºC a cerca de 30 ºC.

[0081] Os compostos descritos neste documento podem ser assi- métricos (por exemplo, tendo um ou mais estereocentros). Todos os estereoisômeros, tais como enantiômeros e diastereômeros, são pre- tendidos, a menos que indicado de outra forma. Os compostos da pre- sente invenção que contêm átomos de carbono substituídos assimetri- camente podem ser isolados em formas opticamente ativas ou racêmi- cas. Métodos sobre como preparar formas opticamente ativas a partir de materiais de partida opticamente inativos são conhecidos na técni- ca, tais como por resolução de misturas racêmicas ou por síntese es- tereosseletiva. Muitos isômeros geométricos de olefinas, ligações du- plas C=N e semelhantes também podem estar presentes nos compos- tos descritos neste documento, e todos esses isômeros estáveis são contemplados na presente invenção. Os isômeros geométricos cis e trans dos compostos da presente invenção são descritos e podem ser isolados como uma mistura de isômeros ou como formas isoméricas separadas.

[0082] A resolução de misturas racêmicas de compostos pode ser realizada por qualquer um dos vários métodos conhecidos na técnica. Um método de exemplo inclui recristalização fracionada usando um ácido de resolução quiral que é um ácido orgânico formador de sal op- ticamente ativo. Os agentes de resolução adequados para métodos de recristalização fracionada são, por exemplo, ácidos opticamente ati- vos, tais como as formas D e L de ácido tartárico, ácido diacetiltartári- co, ácido dibenzoiltartárico, ácido mandélico, ácido málico, ácido lácti- co ou os vários ácidos canforsulfônicos opticamente ativos, tais como ácido-canforsulfônico. Outros agentes de resolução adequados para métodos de cristalização fracionada incluem formas estereoisomeri- camente puras de -metilbenzilamina (por exemplo, formas S e R, ou formas diastereomericamente puras), 2-fenilglicinol, norefedrina, efe- drina, N-metilefedrina, ciclo-hexiletilamina, 1,2-diaminociclo-hexano e semelhantes.

[0083] A resolução de misturas racêmicas também pode ser reali- zada por eluição em uma coluna cheia com um agente de resolução opticamente ativo (por exemplo, dinitrobenzoilfenilglicina). A composi- ção de solvente de eluição adequada pode ser determinada por um versado na técnica.

[0084] Os compostos fornecidos neste documento também inclu- em formas tautoméricas. As formas tautoméricas resultam da troca de uma ligação simples por uma ligação dupla adjacente, juntamente com a migração concomitante de um próton. As formas tautoméricas inclu- em tautômeros prototrópicos que são estados de protonação isomérica com a mesma fórmula empírica e carga total. As formas tautoméricas podem estar em equilíbrio ou estericamente bloqueadas em uma for- ma por substituição apropriada.

[0085] A expressão "farmaceuticamente aceitável" é utilizada nes- te documento para se referir aos compostos, materiais, composições e/ou formas de dosagem que são, dentro do escopo do julgamento médico sensato, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem excessos toxicidade, irritação, resposta alérgica ou outro problema ou complicação, proporcional a uma razão risco/benefício razoável.

[0086] O presente pedido também inclui sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos descritos neste documento. Conforme usa- do neste documento, "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se a derivados dos compostos divulgados em que o composto parental é modificado pela conversão de um ácido ou porção química de base existente em sua forma de sal. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, sais de ácidos minerais ou orgânicos de resíduos básicos, tais como aminas; sais alcalinos ou orgânicos de resíduos ácidos, tais como ácidos carboxílicos; e seme- lhantes. Os sais farmaceuticamente aceitáveis do presente pedido in- cluem os sais não tóxicos convencionais do composto parental forma- do, por exemplo, a partir de ácidos inorgânicos ou orgânicos não tóxi- cos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis do presente pedido podem ser sintetizados a partir do composto parental que contém uma porção química básica ou ácida por métodos químicos convencionais. Geral- mente, esses sais podem ser preparados fazendo reagir as formas de ácido ou base livres destes compostos com uma quantidade estequi- ométrica da base ou ácido apropriado em água ou em um solvente or- gânico, ou em uma mistura dos dois; geralmente, meios não aquosos como éter, acetato de etila, álcoois (por exemplo, metanol, etanol, iso- propanol ou butanol) ou acetonitrila (MeCN) são preferenciais. Listas de sais adequados são encontradas em Remington's Pharmaceutical Sciences, 17ª edição, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p.

1.418 e Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977). Os métodos convencionais para a preparação de formas de sal são descritos, por exemplo, em Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Wiley-VCH, 2002.

MÉTODOS DE USO

[0087] O presente pedido fornece ainda métodos de tratamento de uma doença ou distúrbio em um sujeito. Conforme usado neste docu- mento, o termo "sujeito" refere-se a qualquer animal, incluindo mamífe- ros. Sujeitos de exemplo incluem, mas não estão limitados a, camun- dongos, ratos, coelhos, cães, gatos, suínos, bovinos, ovelhas, cavalos, primatas e humanos. Em algumas modalidades, o sujeito é um huma- no. Em algumas modalidades, o método compreende a administração ao sujeito (por exemplo, um sujeito em necessidade do mesmo) de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto fornecido neste documento (por exemplo, um composto de Fórmula I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0088] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é selecio- nado a partir do grupo que consiste em dor, uma doença ou distúrbio relacionado à dor, uma doença ou distúrbio do humor, uma doença ou distúrbio do sistema nervoso central, uma doença ou distúrbio óptico, câncer, um doença ou distúrbio gastrointestinal, uma doença ou dis- túrbio renal, uma doença ou distúrbio relacionado aos rins, uma doen- ça ou distúrbio cardiovascular e uma doença ou distúrbio de pele.

[0089] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é dor ou uma doença ou distúrbio relacionado à dor. Em algumas modalidades, a dor ou uma doença ou distúrbio relacionado à dor é selecionado a partir do grupo que consiste em dor aguda, dor crônica, dor neuropáti- ca, dor nociceptiva, dor inflamatória, dor oncológica, fibromialgia, artri-

te reumatoide, osteoartrite, dor relacionada à cirurgia, e osteoporose.

[0090] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é uma do- ença ou distúrbio do humor. Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio do humor é selecionado a partir do grupo que consiste em ansiedade, depressão, um distúrbio do sono, um distúrbio alimentar, distúrbio de estresse pós-traumático, sintomas de abstinência de dro- gas ou álcool, esquizofrenia, transtorno obsessivo-compulsivo, trans- torno bipolar, disfunção sexual, transtorno de déficit de atenção (ADD) e transtorno de déficit de atenção com hiperatividade (TDAH).

[0091] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é uma do- ença ou distúrbio do sistema nervoso central ou uma doença ou dis- túrbio óptico. Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é uma doença ou distúrbio do sistema nervoso central. Em algumas modali- dades, a doença ou distúrbio é uma doença ou distúrbio óptico. Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio do sistema nervoso cen- tral ou uma doença ou distúrbio óptico é selecionado a partir do grupo que consiste em uma doença desmielinizante, glaucoma, degeneração macular relacionada à idade (AMD), esclerose lateral amiotrófica (ALS), um distúrbio cognitivo, mal de Alzheimer, um distúrbio do mo- vimento, coreia de Huntington, síndrome de Tourette, doença de Nie- mann-Pick, doença de Parkinson, epilepsia, um distúrbio cerebrovas- cular e lesão cerebral.

[0092] Em algumas modalidades, a doença desmielinizante é se- lecionada a partir do grupo que consiste em esclerose múltipla (MS), neuromielite óptica (NMO), doença de Devic, neuropatia do sistema nervoso central, mielinólise pontina central, mielopatia sifilítica, leuco- encefalopatias, leucodistrofias, síndrome de Guillain-Barre, polineuro- patia desmielinizante inflamatória crônica, neuropatia periférica relaci- onada à glicoproteína associada à antimielina (MAG), doença de Charcot-Marie-Tooth, neuropatia periférica, mielopatia, neuropatia óp-

tica, neuropatia inflamatória progressiva, neurite óptica e mielite trans- versa.

[0093] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é câncer. Em algumas modalidades, o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em leucemia, linfoma de células do manto, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, carcinoma hepatocelular, câncer de ovário, câncer colorretal, câncer de pâncreas, câncer de próstata, cân- cer de mama, glioma, câncer de pele, carcinoma renal e câncer de pulmão.

[0094] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é uma do- ença ou distúrbio gastrointestinal. Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio gastrointestinal é selecionado a partir do grupo que con- siste em doença inflamatória intestinal, doença do refluxo gastroesofá- gico, íleo paralítico, diarreia secretora, úlcera gástrica, náusea, vômito e uma doença hepática.

[0095] Em algumas modalidades, a doença hepática é selecionada a partir do grupo que consiste em insuficiência hepática aguda, sín- drome de Alagille, hepatite, fígado aumentado, síndrome de Gilbert, cisto hepático, hemangioma hepático, doença hepática gordurosa, es- teato-hepatite, colangite esclerosante primária, fasciolíase, cirrose bili- ar primária, síndrome de Budd-Chiari, hemocromatose, doença de Wil- son e amiloidose hereditária relacionada à transtirretina

[0096] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é uma do- ença ou distúrbio renal ou uma doença ou distúrbio relacionado aos rins. Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio renal ou uma doença ou distúrbio relacionado aos rins é selecionado a partir do gru- po que consiste em diabetes, nefropatia diabética, lesão renal inflama- tória aguda, isquemia renal, incontinência urinária e bexiga hiperativa.

[0097] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é uma do- ença ou distúrbio de pele. Em algumas modalidades, a doença ou dis-

túrbio de pele é psoríase ou lúpus.

[0098] Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio é uma do- ença ou distúrbio cardiovascular. Em algumas modalidades, a doença ou distúrbio cardiovascular é selecionado a partir do grupo que consis- te em doença cardiovascular, inflamação vascular, fibrose pulmonar idiopática e hipertensão.

[0099] O presente pedido fornece ainda um composto descrito neste documento, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em qualquer um dos métodos descritos neste documento.

[00100] O presente pedido fornece ainda o uso de um composto descrito neste documento, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a preparação de um medicamento para uso em qualquer um dos métodos descritos neste documento.

[00101] Conforme usado neste documento, a expressão "quantida- de terapeuticamente eficaz" refere-se à quantidade de composto ativo ou agente farmacêutico que elicita a resposta biológica ou medicinal que está sendo procurada em um tecido, sistema, animal, indivíduo ou humano por um pesquisador, veterinário, médico ou outro clínico.

[00102] Conforme usado neste documento, o termo "tratar" ou "tra- tamento" refere-se a um ou mais dentre (1) inibir a doença; por exem- plo, inibir uma doença, afecção ou distúrbio em um indivíduo que está experimentando ou exibindo a patologia ou sintomatologia da doença, afecção ou distúrbio (isto é, interromper o desenvolvimento posterior da patologia e/ou sintomatologia); e (2) amenizar a doença; por exem- plo, amenizar uma doença, afecção ou distúrbio em um indivíduo que está experimentando ou exibindo a patologia ou sintomatologia da do- ença, afecção ou distúrbio (isto é, reverter a patologia e/ou sintomato- logia), como diminuir a gravidade da doença ou reduzir ou aliviar um ou mais sintomas da doença.

TERAPIAS DE COMBINAÇÃO

[00103] Um ou mais agentes terapêuticos adicionais, tais como, por exemplo, agentes quimioterapêuticos, anestésicos (por exemplo, para uso em combinação com um procedimento cirúrgico) ou outros agen- tes úteis para o tratamento de doenças ou distúrbios fornecidos neste documento podem ser usados em combinação com os compostos e sais fornecidos neste documento.

[00104] Anestésicos de exemplo incluem, mas não estão limitados a, anestésicos locais (por exemplo, lidocaína, procaína, ropivacaína) e anestésicos gerais (por exemplo, desflurano, enflurano, halotano, iso- flurano, metoxiflurano, óxido nitroso, sevoflurano, amobarbital, meto- exital, tiamilal, tiopental, diazepam, lorazepam, midazolam, etomidato, cetamina, propofol, alfentanil, fentanila, remifentanil, buprenorfina, bu- torfanol, hidromorfona levorfanol, meperidina, metadona, morfina, nal- bufina, oximorfona e pentazocina).

[00105] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é administrado simultaneamente com o composto ou sal fornecido neste documento. Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é administrado após a administração do composto ou sal fornecido neste documento. Em algumas modalidades, o agente terapêutico adi- cional é administrado antes da administração do composto ou sal for- necido neste documento. Em algumas modalidades, o composto ou sal fornecido neste documento é administrado durante um procedi- mento cirúrgico. Em algumas modalidades, o composto ou sal forneci- do neste documento é administrado em combinação com um agente terapêutico adicional durante um procedimento cirúrgico.

FORMULAÇÕES FARMACÊUTICAS

[00106] Quando utilizados como produtos farmacêuticos, os com- postos e sais fornecidos neste documento podem ser administrados na forma de composições farmacêuticas. Estas composições podem ser preparadas como descrito neste documento ou em outro lugar, e po-

dem ser administradas por uma variedade de vias, dependendo se o tratamento local ou sistêmico é desejado e da área a ser tratada. A administração pode ser tópica (por exemplo, transdérmica, epidérmica, oftálmica e às membranas mucosas incluindo entrega intranasal, vagi- nal e retal), pulmonar (por exemplo, por inalação ou insuflação de pós ou aerossóis, incluindo por nebulizador; intratraqueal ou intranasal), oral ou parenteral. A administração parenteral inclui intravenosa, intra- arterial, subcutânea, intraperitoneal intramuscular ou injeção ou infu- são; ou intracraniana (por exemplo, administração intratecal ou intra- ventricular). A administração parenteral pode ser na forma de uma úni- ca dose em bolus, ou pode ser, por exemplo, por uma bomba de per- fusão contínua. Em algumas modalidades, os compostos fornecidos neste documento (por exemplo, compostos de Fórmula I) são adequa- dos para administração parenteral. Em algumas modalidades, os com- postos fornecidos neste documento (por exemplo, os compostos de Fórmula I) são adequados para administração intravenosa. As compo- sições e formulações farmacêuticas para administração tópica podem incluir adesivos transdérmicos, pomadas, loções, cremes, géis, gotas, supositórios, sprays, líquidos e pós. Podem ser necessários ou dese- jáveis transportadores farmacêuticos convencionais, bases aquosas, em pó ou oleosas, espessantes e semelhantes. Em algumas modali- dades, as composições farmacêuticas fornecidas neste documento são adequadas para administração parenteral. Em algumas modalida- des, as composições fornecidas neste documento são adequadas para administração intravenosa.

[00107] Também são fornecidas composições farmacêuticas que contêm, como ingrediente ativo, um composto fornecido neste docu- mento, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combi- nação com um ou mais transportadores farmaceuticamente aceitáveis (excipientes). Ao fazer as composições fornecidas neste documento, o ingrediente ativo é tipicamente misturado com um excipiente, diluído por um excipiente ou encerrado em tal transportador na forma de, por exemplo, uma cápsula, sachê, papel ou outro recipiente. Quando o excipiente serve como diluente, pode ser um material sólido, semissó- lido ou líquido, que atua como um veículo, transportador ou meio para o ingrediente ativo. Assim, as composições podem estar na forma de comprimidos, pílulas, pós, pastilhas, sachês, hóstias, elixires, suspen- sões, emulsões, soluções, xaropes, aerossóis (como um sólido ou em um meio líquido), pomadas, cápsulas de gelatina mole e dura, suposi- tórios, soluções injetáveis estéreis e pós embalados estéreis.

[00108] Alguns exemplos de excipientes adequados incluem, sem limitação, lactose, dextrose, sacarose, sorbitol, manitol, amidos, goma de acácia, fosfato de cálcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de cálcio, celulose microcristalina, polivinilpirrolidona, celulose, água, xa- rope e metil celulose. As formulações podem incluir, adicionalmente, sem limitação, agentes lubrificantes, tais como talco, estearato de magnésio e óleo mineral; agentes umectantes; agentes emulsionantes e de suspensão; agentes conservantes, tais como metil- e propil- hidroxibenzoatos; agentes adoçantes; agentes aromatizantes ou com- binações dos mesmos.

EXEMPLOS

[00109] A invenção será descrita em maior detalhe por meio de exemplos específicos. Os exemplos a seguir são oferecidos para fins ilustrativos e não se destinam a limitar a invenção de qualquer manei- ra. Aqueles versados na técnica reconhecerão prontamente uma vari- edade de parâmetros não críticos que podem ser alterados ou modifi- cados para produzir essencialmente os mesmos resultados. Os méto- dos analíticos descritos ao longo dos Exemplos foram realizados de acordo com os seguintes procedimentos:

LC-MS - MÉTODO A Instrumento Shimadzu Volume de injeção 3 µl Solvente A ACN Solvente B Água + 0,01% de HCOOH Taxa de fluxo 0,5 ml/min Temperatura Ambiente Coluna LUNA-C18, 50 x 2,1 mm, 1,6 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 95 8 10 10 10 LC-MS - MÉTODO B Instrumento Shimadzu Volume de injeção 3 µl Solvente A ACN Solvente B Água + 5 mM NH4HCO3 Taxa de fluxo 0,5 ml/min Temperatura Ambiente Coluna LUNA-C18, 50 x 2,1 mm, 1,6 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 95 8 10 10 10 LC-MS - MÉTODO C Instrumento Shimadzu Volume de injeção 8 µl Solvente A Água + 0,1% de HCOOH Solvente B ACN Taxa de fluxo 0,5 ml/min Temperatura Ambiente

Coluna KINETEX EVO, 50 X 2,1 mm, 1,6 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 5 0,5 5 7 95 12 95 LC-MS - MÉTODO D Instrumento Agilent Volume de injeção 3/8 µl Solvente A Água + 0,1% de HCOOH Solvente B ACN Taxa de fluxo 0,5 ml/min Temperatura Ambiente Coluna LUNA OMEGA POLAR (50 X 2,1 mm), 1,6 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0,01 5 1,8 95 4,5 95 LC-MS - MÉTODO E Instrumento Agilent Volume de injeção 3 µl Solvente A Água + 0,1% de HCOOH Solvente B ACN Taxa de fluxo 0,5 ml/min Temperatura Ambiente Coluna Kinetex, EVO, C18, 50 x 2,1 mm, 1,6 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0,01 5 1,8 95 8,5 95

LC-MS - MÉTODO F Instrumento Shimadzu Volume de injeção 3 µl Solvente A Água + 0,01% de HCOOH Solvente B CAN Taxa de fluxo 0,6 ml/min Temperatura Ambiente Coluna Gemini C18, 50 X 2,0 mm, 3,0 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 5 8 90 12 90 MÉTODO A DE PREP-HPLC Instrumento Shimadzu Volume de injeção 80 mg por injeção Solvente A ACN Solvente B Água Taxa de fluxo 30 ml/min Temperatura Ambiente Coluna LUNA-C18, 250 x 21,2 mm, 1,6 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 80 10 50 22 50 35 90 MÉTODO B DE PREP-HPLC Instrumento Agilent Volume de injeção 10 mg por injeção Solvente A ACN Solvente B 0,1% de ácido fórmico em água Taxa de fluxo 15 ml/min

Temperatura Ambiente Coluna LUNA-C18, 250 x 21,2 mm, 5 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 10 15 80 30 95 MÉTODO C DE PREP-HPLC Instrumento Agilent Volume de injeção 20 mg por injeção Solvente A ACN Solvente B 0,1% de ácido fórmico em água Taxa de fluxo 15 ml/min Temperatura Ambiente Coluna Gemini C18, 250 x 21,2 mm, 5 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 10 15 70 30 95 MÉTODO D DE PREP-HPLC Instrumento Shimadzu Volume de injeção 80 mg por injeção Solvente A ACN Solvente B 0,1% de ácido fórmico em água Taxa de fluxo 15 ml/min Temperatura Ambiente Coluna Gemini-C18, 250 x 21,2 mm, 5,0 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 30 20 75 25 95

MÉTODO E DE PREP-HPLC Instrumento Agilent Volume de injeção 50 mg por injeção Solvente A ACN Solvente B 0,1% de ácido fórmico em água Taxa de fluxo 15 ml/min Temperatura Ambiente Coluna Gemini-C18, 250 x 21,2 mm, 5,0 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 70 20 20 MÉTODO F DE PREP-HPLC Instrumento Agilent Volume de injeção 50 mg por injeção Solvente A ACN Solvente B 0,1% de ácido fórmico em água Taxa de fluxo 15 ml/min Temperatura Ambiente Coluna Gemini-C18, 250 x 21,2 mm, 5,0 µm Gradiente de Solvente Tempo (min) Solvente B [%] 0 60 20 30 25 5 PARÂMETROS DE SINTONIA MS/MS Instrumento AB Sciex QTRAP 5500 Coluna Cortecs UPLC C18 30 mm x 2,1 mm x 1,6 µM Solvente A Água + 0,1% de ácido fórmico Solvente B Acetonitrila + 0,1% de ácido fórmico

Tempo (min) Taxa de fluxo (ml/min) % de A % de B 0,1 0,650 95 5 0,7 0,650 5 95 0,9 0,650 5 95 1,0 0,650 95 5 1,1 0,650 95 5 PARÂMETROS DE MS/MS ADICIONAIS Parâmetro Cortina de gás 35 Colisão de gás média/baixa Ionspray (V) 5.500 Temperatura 650/600 Fonte de gás de íons 1 30/50 Fonte de gás de íons 2 60/50 INTERMEDIÁRIO 1. 2-HIDROXIETIL (2-(TRIMETILAMÔNIO)ETIL)

FOSFATO ETAPA 1. 2-(BENZILÓXI)ETAN-1-OL

[00110] A uma solução agitada de NaH (1,93 g, 80,645 mmol, 1,0 eq.) em THF (50 ml) a 0°C foi adicionado etilenoglicol (5 g, 80,645 mmol, 1,0 eq.), seguido pela quantidade catalítica de TBAI (100 mg). A mistura de reação foi agitada durante 10 min a 0°C e, em seguida, agitada à RT durante 1 h. Brometo de benzila (13,7 ml, 80,645 mmol, 1,0 eq.) foi então adicionado gota a gota à mistura de reação a 0°C. Em seguida, a reação foi deixada em agitação a 25°C. A mistura de reação foi extinta com água fria (250 ml) e extraída com EtOAc (3 x 250 ml). A camada orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 anidro e concentrou-se sob vácuo. O produto bruto obtido (9 g) foi purificado por meio de cromatografia em sílica-gel usando eluição gradiente com 30% de EtOAc/Hexano, dando o composto do título como um óleo amarelo-pálido (2,5 g). RMN de 1H (CDCl3): δ 7,38 a 7,30 (m, 5H), 4,56 (s, 2H), 3,78 a 3,74 (m, 2H), 3,61 a 3,59 (m, 2H), 2,06 (t, J = 6,4 Hz, 1H). ETAPA 2. 2-(BENZILÓXI)ETIL (2-(TRIMETILAMÔNIO)ETIL) FOSFA-

TO

O O P N+ O -O

O

[00111] A uma solução agitada de 2-(benzilóxi)etan-1-ol (1 g, 6,535 mmol, 1 eq.) em clorofórmio (10 ml) foi adicionada Et3N (1,18 ml, 8,169 mmol, 1,25 eq.) seguido por POCl3 (0,78 ml, 8,169 mmol, 1,25 eq.) a - 10°C. Em seguida, a mistura de reação foi agitada por 1 h a 25°C. Após 1 h, foi adicionada piridina (2,5 ml, 56,208 mmol, 8,6 eq.) seguida por tosilato de colina (2,6 g, 9,803 mmol, 1,5 eq) a -10°C e a reação foi agitada a 25°C durante 18 h. A massa de reação foi então resfriada a 0°C e extinta com água (5 ml) e extraída com DCM (3 x 50 ml). A ca- mada aquosa foi purificada a partir de cromatografia instantânea (Mé- todo: Coluna: Biotage-C18, 60 g de Duo-100 Å 30 µm; Fase móvel: (ACN: Água + 0,1% de TFA); B%: B%: 0 a 8%, 0 a 20 min/8% 20 a 45 min), as frações puras foram liofilizadas para proporcionar o composto do título como um líquido incolor (1,1 g). [M+H]+ (m/z): 318,4; RMN de 1 H (CDCl3): δ 7,34 a 7,28 (m, 5H), 4,46 (s, 2H), 4,25 (bs, 2H), 4,04 (bs, 2H), 3,64 (bs, 2H), 3,52 (bs, 2H), 3,03 (s, 9H). RMN de 31P: δ -2,23. ETAPA 3. 2-HIDROXIETIL (2-(TRIMETILAMÔNIO)ETIL) FOSFATO

[00112] A uma solução agitada de 2-(benzilóxi)etil (2- (trimetilamônio)etil) fosfato (300 mg, 0,946 mmol, 1,0 eq.) em IPA (3 ml) foi adicionado 10% de Pd/C (50% úmido) (50 mg) a 25°C. Em se- guida, a mistura de reação foi agitada sob pressão de hidrogênio a 25°C durante 18 h. A mistura de reação foi filtrada através de almofada de celite, lavada com IPA e o filtrado resultante foi concentrado até a secura. O resíduo bruto obtido foi seco sob vácuo para proporcionar o composto do título como um líquido incolor (200 mg). [M+H]+ (m/z): 227,5; RMN de 1H (CD3OD): 4,32 a 4,28 (m, 2H), 3,96 a 3,92 (m, 2H), 31 3,70 (t, J = 4,8 Hz, 2H), 3,65 a 3,63 (m, 2H), 3,22 (s, 9H). RMN de P: δ -0,17. INTERMEDIÁRIO 2. 3-HIDROXIPROPIL (2-(TRIMETILAMÔNIO)ETIL)

FOSFATO ETAPA 1. 3-(BENZILÓXI)PROPAN-1-OL

[00113] A uma solução agitada de NaH (1,5 g, 65,703 mmol, 1,0 eq.) em THF (50 ml) a 0°C foi adicionado propano-1,3-diol (5 g, 65,703 mol, 1,0 eq.), seguido pela quantidade catalítica de iodeto de tetrabuti- lamônio (TBAI; 100 mg). Em seguida, a mistura de reação foi agitada por 10 min a 0°C e, em seguida, agitada à RT por 1 h. O brometo de benzila (7,8 ml, 65,703 mol, 1,0 eq.) foi então adicionado à mistura de reação gota a gota a 0°C. A mistura de reação foi agitada durante 18 h a 25°C e foi então extinta com água gelada (250 ml) e extraída com EtOAc (3 x 250 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 anidro e concentradas até à secura. O resíduo bruto ob- tido (11 g) foi purificado por meio de cromatografia em sílica-gel usan- do eluição gradiente com 30% de EtOAc/Hexano para proporcionar o composto do título como um líquido amarelo-pálido (4,6 g). RMN de 1H (CDCl3): δ 7,37 a 7,27 (m, 5H), 4,52 (s, 2H), 3,79 (q, J = 11,2, 5,6 Hz, 2H), 3,66 (t, J = 6 Hz, 2H), 2,26 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 1,90 a 1,84 (m, 2H). ETAPA 2. 3-(BENZILÓXI)PROPIL (2-(TRIMETILAMÔNIO)ETIL) FOS-

FATO

[00114] A uma solução agitada de 3-(benzilóxi)propan-1-ol (1 g, 5,988 mmol, 1 eq.) em clorofórmio (10 ml) foi adicionada Et3N (1,05 ml, 7,485 mmol, 1,25 eq.) e seguido por POCl3 (0,699 ml, 7,485 mmol, 1,25 eq.) a -10°C. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 1 h. A piridina (2,5 ml, 51,496 mmol, 8,6 eq.) e tosilato de colina (2,47 g, 8,982 mmol, 1,5 eq) a -10°C foram adicionados à mistura de reação e a reação foi agitada a 25°C. Após 18 h, a mistura de reação foi resfria- da a 0°C, a água (5 ml) foi adicionada e a mistura foi extraída com DCM (3 x 20 ml). A camada aquosa foi purificada por meio de croma- tografia instantânea (Método: Coluna: Biotage-C18, 60 g de Duo-100 Å 30 µm; Fase móvel: (ACN: Água + 0,1% de TFA]; B%: B%: 0 a 8%, 0 a 20 min/8% 20 a 45 min). As frações puras foram liofilizadas para pro- porcionar o composto do título como um líquido incolor (430 mg). [M+H]+ (m/z): 332,4; RMN de 1H (CDCl3): δ 7,36 a 7,25 (m, 5H), 5,55 (bs, 4H), 4,44 (s, 2H), 4,28 (bs, 2H), 4,01 (q, J = 12,8, 6,4 Hz, 2H), 3,60 (bs, 2H), 3,57 (t, J = 6 Hz, 2H), 3,09 (s, 9H), 1,94 a 1,88 (m, 2H). RMN de 31P: δ -2,28. ETAPA 3. 3-HIDROXIPROPIL (2-(TRIMETILAMÔNIO)ETIL) FOSFATO

[00115] A uma solução agitada de 3-(benzilóxi)propil (2- (trimetilamônio)etil) fosfato (100 mg, 0,302 mmol, 1,0 eq.) em IPA (1 ml) foi adicionado 10% de Pd/C (50% úmido) (10 mg) a 25°C. A mistu- ra de reação foi agitada sob pressão de hidrogênio a 25°C durante 18 h, filtrada através de almofada de celite e lavada com IPA. O filtrado foi então concentrado e o resíduo bruto obtido foi seco sob pressão reduzida para proporcionar o composto do título (60 mg) como um lí- + quido incolor (60 mg). [M+Na] (m/z): 264,1; RMN de 1H (CD3OD): 4,26 (bs, 2H), 3,98 (q, J = 12,4, 6 Hz, 2H), 3,67 (t, J = 6 Hz, 2H), 3,64 a 3,61 (m, 2H), 3,22 (s, 9H), 1,86 a 1,79 (m, 2H). RMN de 31P: δ -0,03. INTERMEDIÁRIO 3. 2-AMINOETIL (2-(TRIMETILAMÔNIO)ETIL)

FOSFATO

ETAPA 1. (2-HIDROXIETIL)CARBAMATO DE BENZILA

[00116] A uma solução agitada de 2-aminoetan-1-ol (50 g, 0,819 mol, 1,0 eq.) em DCM (1,5 l) a 0°C foi adicionada Et3N (137 ml, 0,983 mol, 1,2 eq.) gota a gota. A mistura de reação foi agitada durante 10 min a 0°C e após 10 min, carbonocloridato de benzila (Cbz-Cl; 50%; 302 ml, 1,064 mol, 1,2 eq) foi adicionado à mistura de reação, gota a gota a 0°C. Em seguida, a reação foi agitada durante 3 h a 0°C e mo- nitorada por cromatografia em camada fina (TLC). A mistura de reação foi então extinta com água (500 ml) e extraída com DCM (3 x 500 ml). A camada orgânica total foi então seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada para obter o composto bruto (200 g), que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando eluição gradiente com 3% de MeOH/DCM para se obter (2-hidroxietil)carbamato de ben- zila (95 g) como um sólido branco. Massa [m/z]: 196,09 [M+H]+. Ren- dimento: 95 g (59,7%). ETAPA 2. 2-(((BENZILÓXI)CARBONIL)AMINO)ETIL(2- (TRIMETILAMÔNIO)ETIL)FOSFATO

[00117] A uma solução agitada de (2-hidroxietil)carbamato de ben- zila (5 g, 25,641 mmol, 1 eq.) em clorofórmio (100 ml) foi adicionada Et3N (5,5 ml, 38,461 mmol, 1,5 eq.) seguido por POCl3 (2,65 ml, 28,205 mmol, 1,1 eq.) a -10°C. Em seguida, a mistura de reação foi agitada durante 1 h a 25°C e monitorada por TLC. Após 1 h, piridina (17,5 ml, 220,512 mmol, 8,6 eq.) e tosilato de colina (10,55 g, 38,461 mmol, 1,5 eq) foram adicionados a -10°C e a mistura resultante foi agi- tada a 25°C durante 18 h. A massa de reação foi então resfriada a 0°C, extinta com água (20 ml) e extraída com DCM (3 x 100 ml). A camada aquosa foi purificada por cromatografia instantânea [Coluna: Biotage-C18, 60 g de Duo-100 Å 30 µm; Fase móvel: [ACN: Água + 0,1% de TFA]; B%: B%: 0 a 8%, 0 a 20min/8% de 20 a 45 min.] para se obter 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)etil(2-(trimetilamônio)etil)fosfato (2,4 g) como um líquido incolor. Massa [m/z]: 361,01 [M+H]+. Rendi- mento: 2,4 g (26%). ETAPA 3. 2-AMINOETIL(2-(TRIMETILAMÔNIO)ETIL)FOSFATO

[00118] A uma solução agitada de 2- (((benzilóxi)carbonil)amino)etil(2-(trimetilamônio)etil)fosfato (2,3 g, 0,638 mmol, 1,0 eq.) em álcool isopropílico (IPA; 20 ml) foi adicionado 10% de Pd/C (50% úmido; 500 mg) a 25°C. A mistura de reação foi agitada sob pressão de hidrogênio a 25°C durante 18 h. A mistura re- sultante foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com IPA. O filtrado foi concentrado e seco sob vácuo para produzir 2- aminoetil(2-(trimetilamônio)etil)fosfato (1,6 g) como um líquido incolor. O produto foi usado nos seguintes Exemplos sem purificação adicio- nal. Massa [m/z]: 227,5 [M+H]+. Rendimento: 1,6 g (93%). EXEMPLO 1. (5Z,8Z,11Z,14Z)-N-(2-HIDROXIETIL)ICOSA-5,8,11,14- TETRAENAMIDA (COMPOSTO 2; ANANDAMIDA)

O OH N H

[00119] A uma solução agitada de ácido araquidônico (Composto 1) (5 g, 1,64 mmol, 1,0 eq.) em CH2Cl2 (100 ml) foi adicionada DMAP (2,0 g, 1,64 mmol, 1,0 eq.) e HOBT (1,1 g, 0,82 mmol, 0,5 eq.) em porções à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 0°C. Depois de ser agitado durante 30 min, EDCI.HCl (9,45 g, 4,93 mmol, 3,0 eq.) foi adicionado à mistura reacional a 0°C; a mistura foi então aquecida à temperatura ambiente e continuou a agitação durante 3 h. Em segui- da, etanol amina (5,0 ml, 8,22 mmol, 5,0 eq.) foi adicionado gota a go- ta e a mistura de reação foi agitada durante 16 h à temperatura ambi- ente. A mistura de reação foi extinta com água (200 ml) e extraída com DCM (2 x 300 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com 2 N de HCl (150 ml) seguido por solução de cloreto de sódio (150 ml), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão redu- zida. O resíduo obtido foi purificado adicionalmente por cromatografia em coluna de sílica-gel usando acetato de etila: hexano (15:85) como um eluente para fornecer anandamida (Composto 2) (3,8 g) como um líquido de cor amarelo-claro. [M+H]+ (m/z): 348,2; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,94 (bs, 0,8 H), 5,44 a 5,30 (m, 8H), 3,73 a 3,71 (m, 2H), 3,44 a 3,35 (m, 2H), 2,85 a 2,79 (m, 6H), 2,22 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,10 a 2,03 (m, 4H), 1,77 a 1,69 (m, 3H), 1,39 a 1,24 (m, 7H), 0,88 (t, J = 6,8 Hz, 3H). EXEMPLO 2. 2-(5Z, 8Z, 11Z, 14Z)-ICOSA-5,8,11,14- TETRAENAMIDOETIL 2-(TRIMETILAMÔNIO) ETILFOSFATO (COM- POSTO 3; ANANDAMIDA-PC)

[00120] A uma solução agitada de anandamida (Composto 2) (2,5 g, 7,20 mmol, 1,0 eq.) em CH2Cl2 anidro (30 ml) foi adicionada trietila- mina (1,5 ml, 10,8 mmol, 1,5 eq.), seguido pela adição gota a gota de POCl3 (0,72 ml, 7,92 mmol, 1,1 eq. em 1 ml de CH2Cl2) e a mistura re- sultante foi agitada durante 30 min a -78°C. A piridina seca (4,9 ml, 61,9 mmol, 8,6 eq.) e tosilato de colina (2,85 g, 10,8 mmol, 1,5 eq.) foram adicionados a -78°C e a mistura foi agitada à temperatura ambi- ente durante 16 h. A mistura de reação foi resfriada a 0°C, extinta com água (20 ml) e agitada durante 1 h, em seguida, extraída com 10% de MeOH/DCM (2 x 50 ml). A camada orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada.

O solvente foi concentrado sob pres- são reduzida para gerar um resíduo bruto, que foi dissolvido em DCM (50 ml) e lavado com MeOH:H2O (1:1, 32 ml), seguido por 3% de Na2CO3/MeOH (1:1, 20 ml) e adicionalmente com MeOH:H2O (1:9, 30 ml).A camada orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio, fil- trada, concentrada sob pressão reduzida e codestilada com álcool iso- propílico (2 ml) até a secura.

O resíduo resultante foi triturado em ace- tona (55 ml) por cerca de 30 min, filtrado e concentrado sob pressão reduzida a 25 a 30°C para obter material parcialmente puro, que foi dissolvido em EtOH (55 ml) e filtrado para remover partículas insolú- veis.

O filtrado foi tratado com 30 ml de resina Amberlite MB 3®. Após agitação durante 4 h, o solvente foi filtrado e concentrado para propor- cionar o produto bruto que foi purificado por PREP-HPLC (Coluna: LUNA-C18, 250 x 21,2 mm, 1,6 µm; Fase móvel: [CH3CN:Água]; B %: 80% a 50%, 22 min.; 50% a 90%, 35 min) para proporcionar ananda- mida-PC (Composto 3) (170 mg) como um sólido de cor castanho- claro. [M+H]+ (m/z): 513,2; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,35 (bs, 1H), 5,34 a 5,28 (m, 8H), 4,03 a 4,02 (m, 2H,), 3,67 a 3,62 (m, 2H), 3,52 a 3,49 (t, J = 4,8 Hz, 2H), 3,16 a 3,12 (m, 11H), 2,82 a 2,77 (m, 6H), 2,08 a 2,00 (m, 6H), 1,59 a 1,50 (m, 2H), 1,32 a 1,24 (m, 6H), 13 0,860 (t, J = 6,8 Hz, 3H). RMN de C (100 MHz, DMSO-d6): δ 172,27, 130,42, 129,92, 128,59, 128,50, 128,46, 128,26, 128,16, 128,00, 65,94, 63,07, 63,01, 58,77, 58,72, 53,57, 35,38, 31,35, 29,18, 27,08, 26,81, 25,72, 25,67, 22,44, 14,40. RMN de 31P (161,9 MHz, DMSO-d6): δ -0,27. EXEMPLO 3. 2-AMONIOETIL (2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-ICOSA-5,8,11,14- TETRAENAMIDO)ETIL) FOSFATO (COMPOSTO 4)

ETAPA 1. 2(((BENZILÓXI)CARBONIL)AMINO)

ETIL(2((TERTBUTOXICARBONIL) AMINO)ETIL) FOSFATO

[00121] A uma solução agitada de (2-hidroxietil)carbamato de ben- zila (1 g, 5,128 mmol, 1 eq.) em clorofórmio (20 ml) foi adicionada Et3N (1,1 ml, 7,692 mmol, 1,5 eq.) seguido por POCl3 (0,52 ml, 5,641 mmol, 1,1 eq.) a -10°C. A mistura de reação foi então agitada durante 1 h a 25°C, seguida pela adição de piridina (3,6 ml, 44,102 mmol, 8,6 eq.) e N-Boc etanol amina (1,23 g, 7,692 mmol, 1,5 eq) a -10°C. A mistura de reação foi agitada durante 18 h a 25°C. A mistura foi então resfriada a 0°C, a água foi adicionada (20 ml) e a mistura foi extraída com diclo- rometano (DCM; 3 x 30 ml). A camada orgânica foi concentrada e puri- ficada por cromatografia instantânea Coluna: Biotage-C18, 30g de Duo-100 Å 30 µm; Fase móvel: ACN: Água + 0,015% de NH4HCO3; min/B%: 0/0, 5/5, 30/5, 35/14, 55/14, 58/100. As frações puras foram liofilizadas para proporcionar o composto do título (200 mg) como um sólido esbranquiçado. [M-H]+ (m/z): 417,2; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,69 (br s, 1H), 7,38 a 7,27 (m, 5H), 7,09 (br s, 1H), 4,99 (s, 2H), 3,72 a 3,57 (m, 4H), 3,14 a 3,10 (m, 2H), 3,05 a 3,01 (m, 2H), 1,36 (9H). RMN de 31P (400 MHz, DMSO-d6): 0,14. ETAPA 2. 2-AMINOETIL (2-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)ETIL)

FOSFATO

[00122] A uma solução agitada de 2(((benzilóxi)carbonil)amino) etil(2((tertbutoxicarbonil) amino)etil) fosfato (50 mg, 0,119 mmol, 1,0 eq.) em isopropanol (IPA; 2 ml) foi adicionado 10% de Pd/C (50% úmi- do) (15 mg) a 25°C. A mistura de reação foi agitada sob atmosfera de hidrogênio a 25°C por 2 h e foi filtrada através de almofada de celite e lavada com IPA (5 ml). O filtrado foi concentrado e seco sob vácuo pa-

ra proporcionar o produto de título (40 mg, bruto) como um sólido es- branquiçado, que foi usado na etapa seguinte sem purificação. [M+H]+ (m/z): 285,2; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,36 (br s, 2H), 6,96 (br s, 1H), 3,87 a 3,79 (m, 2H), 3,68 a 3,60 (m, 2H), 3,10 a 3,02 (m, 31 2H), 2,97 a 2,92 (m, 2H), 1,37 (s, 9H).RMN de P (400 MHz, DMSO- d6): 0,82. ETAPA 3. 2-((TERC-BUTOXICARBONIL)AMINO)ETIL (2- ((5Z,8Z,11Z,14Z)-ICOSA-5,8,11,14-TETRAENAMIDO)ETIL) FOSFATO

[00123] A uma solução agitada de ácido araquidônico (43 mg, 0,141 mmol, 1,0 eq.) em DMF (2 ml) foi adicionado HATU (64 mg, 0,167 mmol, 1,2 eq.) e agitado durante 30 min. Após 30 min, DIPEA (0,07 ml, 0,424 mmol, 3,0 eq.) e 2-aminoetil (2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil) fosfato (40 mg, 0,141 mmol, 1,0 eq.) foram adicionados à mistura de reação a 25°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 h. O solvente foi então evaporado sob pressão reduzida para pro- duzir o sólido bruto, que foi usado na próxima etapa sem purificação. [M+H]+ (m/z): 571,5. ETAPA 4. 2-AMONIOETIL (2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-ICOSA-5,8,11,14- TETRAENAMIDO)ETIL) FOSFATO

[00124] A uma solução agitada de 2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil (2-((5Z, 8Z, 11Z, 14Z)-icosa-5,8,11,14-tetraenamido)etil) fosfato (48 mg, 0,084 mmol, 1,0 eq.) em DCM (2 ml) foi adicionado ácido trifluoro- acético (TFA; 0,2 ml) a 0°C, em seguida, agitado a 25°C por 2 h. Após a conclusão do material de partida, a mistura de reação foi evaporada sob pressão reduzida para obter o 2-amonioetil (2-((5Z, 8Z, 11Z, 14Z)- icosa-5,8,11,14-tetraenamido)etil) fosfato bruto (35 mg). O sólido bruto foi purificado por Método B de PREP-HPLC como um sólido esbran- quiçado (3,7 mg): LUNA-C18, 250 x 21,2 mm, 5 µm; Fase móvel:

ACN:Água + HCOOH (0,1%); B%: 80%, 15 min a 95%, 30 min. [M+H]+ (m/z): 471,4. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,36 (s, 2H), 8,10 (s, 1H), 5,44 a 5,22 (m, 5H), 3,85 a 3,79 (m, 2H), 3,66 a 3,64 (m, 2H), 3,18 (q, J = 5,6 Hz, 2H), 2,95 (s, 2H), 2,83 a 2,75 (m, 4H), 2,07 a 1,99 (m, 5H), 1,57 a 1,49 (m, 2H), 1,35 a 1,24 (m, 7H), 0,85 (t, J = 6,8 Hz, 3H). RMN de 31P (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,0 EXEMPLO 4. 2-AMÔNIO-2-CARBOXIETIL (2-((5Z, 8Z, 11Z, 14Z)- ICOSA-5,8,11,14-TETRAENAMIDO)ETIL) FOSFATO (COMPOSTO 5) ETAPA 1. 2-(((BENZILÓXI)CARBONIL)AMINO)ETIL (3-(TERC- BUTÓXI)-2-((TERT-BUTOXICARBONIL)AMINO)-3-OXOPROPIL)

FOSFATO

[00125] A uma solução agitada de (2-hidroxietil)carbamato de ben- zila (1 g, 5,128 mmol, 1,0 eq.) em clorofórmio (20 ml) foi adicionada Et3N (1,1 mL, 7,692 mmol, 1,5 eq.), seguido por POCl3 (0,52 ml, 5,641 mmol, 1,1 eq.) a -10°C. A mistura de reação foi então agitada por 1 h a 25°C. A piridina (3,6 ml, 44,102 mmol, 8,6 eq.) e éster de terc-butila Boc-L-Serina (2 g, 7,692 mmol, 1,5 eq) foram adicionados a -10°C e a mistura foi agitada a 25°C durante 18 h. A mistura de reação foi então resfriada a 0°C, e água foi adicionada (20 ml). A mistura foi extraída com DCM (3 x 30 ml) e a camada orgânica foi concentrada e purifica- da por cromatografia instantânea (Coluna: Biotage-C18, 30g Duo-100 Å 30 µm; Fase móvel: ACN: Água + 0,015% de NH4HCO3; min./B%: 0/0, 30/5, 35/20, 50/20, 55/100). As frações puras foram liofilizadas para proporcionar o produto de título (220 mg) como um sólido es-

branquiçado.[M-H]+ (m/z): 517,2; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,94 a 7,89 (m, 1H), 7,64 a 7,58 (m, 1H), 7,39 a 7,27 (m, 5H), 7,09 (bs, 3H), 4,99 (s, 2H), 3,88 a 3,78 (m, 3H), 3,67 a 3,58 (m, 2H), 3,16 a 3,08 (m, 2H), 1,42 a 1,32 (m, 18H). RMN de 31P (400 MHz, DMSO-d6): 0,66. ETAPA 2. 2-AMINOETIL (3-(TERC-BUTÓXI)-2- ((TERTBUTOXICARBONIL)AMINO)-3-OXOPROPIL) FOSFATO

[00126] A uma solução agitada de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)etil (3-(tert-butóxi)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-oxopropil) fosfato (50 mg, 0,096 mmol, 1,0 eq.) em IPA (2 ml) foi adicionado 10% de Pd/C (50% úmido) (15 mg) a 25°C. A mistura de reação foi agitada sob a atmosfera de gás hidrogênio a 25°C por 2 h. A mistura de reação foi filtrada através de almofada de celite, lavada com IPA (5 ml) e o filtra- do foi concentrado e seco sob vácuo para fornecer o composto do títu- lo (22 mg) como um sólido esbranquiçado. [M+H]+ (m/z): 385,3; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,23 (bs, 2H), 3,95 a 3,81 (m, 5H), 2,97 31 a 2,93 (m, 2H), 1,44 a 1,35 (m, 18H). RMN de P (400 MHz, DMSO- d6): 1,09. ETAPA 3. 3-(TERC-BUTÓXI)-2-((TERT-BUTOXICARBONIL)AMINO)- 3-OXOPROPIL (2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-ICOSA-5,8,11,14- TETRAENAMIDO)ETIL) FOSFATO

[00127] A uma solução agitada de ácido araquidônico (18 mg, 0,059 mmol, 1,0 eq.) em DMF (1 ml) foi adicionado HATU (26 mg, 0,071 mmol, 1,2 eq.) e agitado durante 30 min. Em seguida, DIPEA (0,03 mL, 0,177 mmol, 3,0 eq.) e 2-aminoetil (3-(terc-butóxi)-2- ((tertbutoxicarbonil)amino)-3-oxopropil) fosfato (22 mg, 0,059 mmol, 1,0 eq.) foram adicionados à mistura de reação a 25°C. A mistura re- sultante foi ainda agitada por 18 h a 25°C. A massa de reação foi en- tão concentrada sob pressão reduzida e o 3-(terc-butóxi)-2-((tert- butoxicarbonil)amino)-3-oxopropil (2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etil) fosfato sólido bruto (63 mg) foi usado na próxima etapa sem qualquer purificação adicional.[M+H]+ (m/z) 671,5. ETAPA 4. 2-AMÔNIO-2-CARBOXIETIL (2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-ICOSA- 5,8,11,14-TETRAENAMIDO)ETIL) FOSFATO

[00128] A uma solução agitada de 3-(terc-butóxi)-2-((tert- butoxicarbonil)amino)-3-oxopropil (2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etil) fosfato (63 mg, 0,094 mmol, 1,0 eq.) em DCM (50 mL) foi adicionado TFA (0,15 ml) a 0°C e a mistura foi agitada a 25°C por 18 h. A mistura de reação foi então concentrada sob pressão redu- zida e o sólido bruto (40 mg) foi purificado via Método C de PREP- HPLC (Gemini C18,250 x 21,2 x 5 µm, 1,6 µm; Fase móvel: ACN/0,1% de ácido fórmico em água; min./B%: 0/10, 15/70, 30/95). As frações resultantes foram liofilizadas para proporcionar o composto do título como um sólido esbranquiçado (7 mg). [M+H]+ (m/z): 515,4; RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,05 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 5,39 a 5,29 (m, 8H), 4,09 a 4,03 (m, 2H), 3,70 a 3,64 (m, 2H), 3,18 (q, J = 5,6 Hz, 2H), 2,84 a 2,74 (m, 6H), 2,10 a 1,99 (m, 6H), 1,55 a 1,51 (m , 2H), 1,35 a 31 1,24 (m, 6H), 0,85 (t, J = 6,8 Hz, 3H). RMN de P (400 MHz, DMSO- d6): 0,18. EXEMPLO 5. 2-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-ICOSA-5,8,11,14- TETRAENAMIDO)ETÓXI)CARBONIL)ÓXI)ETIL (2- (TRIMETILAMÔNIO)ETIL) FOSFATO (COMPOSTO 6)

[00129] A uma solução agitada do Composto 2 (Exemplo 1;100 mg, 0,2873 mmol, 1,0 eq.) em 6 ml de DCM a 0°C foi adicionada piridina (45 µl, 0,5747 mmol, 2,0 eq.), seguida por cloroformato de 4-nitro fenila (69 mg, 0,3448 mmol, 1,2 eq.) e a mistura de reação foi agitada a 25°C durante 6 h. A mistura reacional foi então concentrada sob vácuo até à secura. O resíduo bruto obtido foi dissolvido em DMF (2 ml) e DMAP (45 mg, 0,3735 mmol, 1,3 eq.) foi adicionado, seguido por Intermediá- rio 1 (65 mg, 0,2873 mmol, 1,0 eq.) a 25°C. A mistura reacional foi en- tão agitada durante 18 h à mesma temperatura. Em seguida, a mistura de reação foi diluída com IPE (20 ml) e o solvente foi decantado para se obter um sólido bruto (130 mg), que foi purificado de acordo com Método D de PREP-HPLC: Gemini-C18, 250 X 21,2 mm, 5,0 µm; Fase móvel: (ACN: Água + HCOOH (0,1%)); B%: 30%, 20 min a 75%, 25 min a 95%) para proporcionar o composto do título como um sólido castanho-pálido (3,8 mg). [M+H]+ (m/z): 601,5; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,22 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 5,39 a 5,27 (m, 8H), 4,16 (t, J = 4,4 Hz, 2H), 4,07 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 4,05 a 3,98 (m, 2H), 3,84 a 3,77 (m, 2H), 3,49 (t, J = 4,8, 2H), 3,31 a 3,26 (m, 2H), 3,12 (s, 9H), 2,83 a 2,74 (m, 6H), 2,08 (t, J = 7,6, 2H), 2,05 a 1,97 (m, 4H), 1,57 a 1,49 (m, 31 2H), 1,35 a 1,22 (m, 6H), 0,85 (t, J = 6,8 Hz, 3H). RMN de P (400 MHz, DMSO-d6): δ -1,10 EXEMPLO 6. 3-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-ICOSA-5,8,11,14- TETRAENAMIDO)ETÓXI)CARBONIL)ÓXI)PROPIL (2- (TRIMETILA- MÔNIO)ETIL) FOSFATO (COMPOSTO 7)

[00130] A uma solução agitada do Composto 2 (Exemplo 1; 100 mg, 0,287 mmol, 1,0 eq.) em 5 ml de DCM a 0°C foi adicionada piridi- na (46 µl, 0,574 mmol, 2,0 eq.) seguida por cloroformato de 4-nitro fe- nila (69 mg, 0,344 mmol, 1,2 eq.), e a reação foi agitada a 25°C duran-

te 6 h. A mistura reacional foi então concentrada sob vácuo até à se- cura. O resíduo bruto obtido foi dissolvido em DMF (2 ml) e DMAP (45 mg, 0,373 mmol, 1,3 eq.) foi adicionado, seguido por Intermediário 2 (69 mg, 0,287 mmol, 1,0 eq.) a 25°C, e agitado durante 18 h à mesma temperatura. Em seguida, a mistura de reação foi diluída com IPE (20 ml) e o solvente foi decantado para obter um sólido em bruto (150 mg), que foi purificado de acordo com Método E de PREP-HPLC: Gemini- C18, 250 X 21,2 mm, 5,0 µm; Fase móvel: (ACN: Água + HCOOH (0,1%); B%: 70%, 20 min a 20%) para se obter o composto do título como um sólido castanho-pálido (8 mg). [M+H]+ (m/z): 615,5; RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,24 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 5,37 a 5,31 (m, 8H), 4,13 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,06 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 4,01 (bs, 2H), 3,68 (q, J = 6,4 Hz, 2H), 3,49 (t, J = 4,4 Hz, 2H), 3,31 a 3,25 (m, 2H), 3,12 (s, 9H), 2,85 a 2,74 (m, 6H), 2,08 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,06 a 1,97 (m, 4H), 1,83 a 1,77 (m, 2H), 1,58 a 1,48 (m, 2H), 1,35 a 1,21 (m, 6H), 0,85 (t, J = 6,8 Hz, 3H). RMN de 31P (400 MHz, DMSO-d6): δ -0,90 EXEMPLO 7. 2 -(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-ICOSA-5,8,11,14- TETRAENAMIDO)ETÓXI)CARBONIL)AMINO)ETIL (2- (TRIMETILAMÔNIO)ETIL) FOSFATO (COMPOSTO 8)

[00131] A uma solução agitada do Composto 2 (Exemplo 1; 100 mg, 0,287 mmol, 1,0 eq.) em 5 ml de DCM foi adicionada piridina (46 µl, 0,574 mmol, 2,0 eq.) a 0°C, seguida por cloroformato de 4-nitro fe- nila (69 mg, 0,344 mmol, 1,2 eq.). A mistura foi agitada a 25°C por 6 h e foi concentrada sob vácuo até à secura. O resíduo bruto foi dissolvi- do em DMF (2 ml) e foi adicionado DMAP (45 mg, 0,373 mmol, 1,3 eq.) seguido por Intermediário 3 (64 mg, 0,287 mmol, 1,0 eq.) a 25°C e deixado em agitação por 18 h na mesma temperatura.A mistura de re- ação foi então diluída com IPE (20 ml), e o solvente foi decantado para obter um sólido bruto (150 mg). O sólido em bruto foi purificado de acordo com o Método F de PREP-HPLC: Gemini-C18, 250 x 21,2 mm, 5,0 µm; Fase móvel: (ACN: Água + HCOOH (0,1%); B%: 60%, 20 min a 30%, 25 min a 5%) para proporcionar o composto do título como um sólido castanho-pálido (10 mg). [M+H]+ (m/z): 600,5; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,02 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 7,459 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 5,39 a 5,28 (m, 8H), 4,02 (bs, 2H), 3,91 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,69 a 3,62 (m, 2H), 3,52 a 3,47 (m, 2H), 3,21 (q, J = 5,6 Hz, 2H), 3,12 (s, 9H), 3,11 a 3,07 (m, 2H), 2,83 a 2,74 (m, 6H), 2,11 a 1,97 (m, 6H), 1,57 a 1,48 (m, 2H), 1,36 a 1,22 (m, 7H), 0,85 (t, J = 6,8 Hz, 3H). RMN de 31P (400 MHz, DMSO-d6): δ -0,31

[00132] Os seguintes compostos podem ser preparados usando procedimentos semelhantes aos descritos nos Esquemas 1 e 2 e/ou nos Exemplos fornecidos neste documento, usando materiais de parti- da apropriadamente substituídos. Nº do Estrutura e Nome do Composto Composto 9 3-(2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)-3-oxopropil (2-(trimetilamônio)etil) fos- fato 10 4-(2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)-4-oxobutil (2-(trimetilamônio)etil) fosfa- to 11 2-amonioetil (2-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)carbonil)óxi)etil) fosfato

Nº do Estrutura e Nome do Composto Composto

12 2-amonioetil (2-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)carbonil)amino)etil) fosfato

13 2-amonioetil (4-(2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)-4-oxobutil) fosfato

14 2-amônio-3-(((2-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenami- do)etóxi)carbonil)óxi)etóxi)oxidofosforil)óxi)propanoato

15 2-amônio-3-(((2-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)carbonil) ami- no)etóxi)oxidofosforil)óxi)propanoato

16 2-amônio-3-(((4-(2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)-4- oxobutóxi)oxidofosforil)óxi)propanoato

17 2-hidróxi-3-(1-(2 -((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)etóxi)propil (2-(trimetilamônio)etil) fos- fato

Nº do Estrutura e Nome do Composto Composto

18 2-(1-(2-((5Z, 8Z, 11Z, 14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)etóxi)etil (2-(trimetilamônio)etil) fosfato

19 2-hidróxi-3-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)carbonil)óxi)propil (2- (trimetilamônio)etil) fosfato

20 3-hidróxi-2 -(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenoil)óxi)propil (2-(trimetilamônio)etil) fosfato

21 2-amônio-3-(((3-hidróxi-2-(((5Z, 8Z, 11Z, 14Z)-icosa- 5,8,11,14-tetraenoil)óxi)propóxi)oxidofosforil) óxi)propanoato

22 2-amonioetil (3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa- 5,8,11,14-tetraenoil)óxi)propil) fosfato

23 2-(((3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenoil)óxi)propóxi)carbonil)amino)etil (2- (trimetilamônio)etil) fosfato

Nº do Estrutura e Nome do Composto Composto

24 2-(((3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenoil)óxi)propóxi)carbonil)óxi)etil (2- (trimetilamônio)etil) fosfato

25 3-(((3-hidróxi-2-(((5Z, 8Z, 11Z, 14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenoil)óxi)propóxi)carbonil)óxi) propil (2- (trimetilamônio)etil) fosfato

26 4-(3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenoil)óxi)propóxi)-4-oxobutil (2-(trimetilamônio)etil) fosfato

27 2-amonioetil (2-(((3-hidróxi-2-(((5Z, 8Z, 11Z, 14Z)-icosa- 5,8,11,14-tetraenoil)óxi)propóxi) carbonil)óxi)etil) fosfato

28 2-amonioetil (2-(((3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa- 5,8,11,14-tetraenoil)óxi)propóxi) carbonil)amino)etil) fosfa- to

29 2-amonioetil (4-(3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa- 5,8,11,14-tetraenoil)óxi)propóxi)-4-oxobutil) fosfato

Nº do Estrutura e Nome do Composto Composto 30 2-amônio-3-(((2-(((3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa- 5,8,11,14-tetraenoil)óxi)propóxi)carbonil)óxi)- etóxi)oxidofosforil)óxi)propanoato

OH O H O N O

O O P NH3

O O O CO2 31 2-amônio-3-(((2-(((3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa- 5,8,11,14-tetraenoil)óxi)propóxi)carbonil) ami- no)etóxi)oxidofosforil)óxi)propanoato 32 2-amônio-3-(((4-(3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa- 5,8,11,14-tetraenoil)óxi)propóxi)-4-oxobutóxi) oxidofosfo- ril)óxi)propanoato 33 3-(((3-hidróxi-2-(((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenoil)óxi)propóxi)oxidofosforil)óxi)-4- (trimetilamônio)butanoato 34 3-(((3-hidróxi-2-(((5Z, 8Z, 11Z, 14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenoil)óxi)propóxi)carbonil)óxi)-4- (trimetilamônio)butanoato

Nº do Estrutura e Nome do Composto Composto 35 1-(2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)etil (2-(trimetilamônio)etil) fosfato 36 3-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)oxidofosforil)óxi)-4- (trimetilamônio)butanoato 37 3-(((2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)carbonil)óxi)-4- (trimetilamônio)butanoato 38 2-(1-(2-((5Z,8Z,11Z,14Z)-icosa-5,8,11,14- tetraenamido)etóxi)etóxi)-2-oxoetil (2-(trimetilamônio)etil) fosfato EXEMPLO 8. TRANSPORTE IN VITRO DE MFSD2A

METODOLOGIA

[00133] O ensaio foi conduzido em um formato de 6 poços de baixo rendimento com células HEK293 preparadas e então transfectadas em poços duplicados com plasmídeos que contêm a versão de tipo selva- gem (WT) de hMfsd2a, a versão mutante D97A ou um vetor vazio co- mo controle. A absorção nas células foi avaliada por cromatografia em camada fina (TLC) e cromatografia líquida de ultra-alto desempenho com espectrometria de massa hifenizada.

TRANSFECÇÃO CELULAR

[00134] As células HEK293 foram semeadas a 6,25 x 105 por 6 po-

ços em 2 ml de DMEM com 10% de FBS e 1% de meio (Sigma) de penicilina-estreptomicina (P/S) e incubadas durante a noite a 37°C em 5% de CO2. As células foram verificadas quanto à confluência na ma- nhã seguinte. Em uma base por poço, a seguinte mistura de lipídios foi gerada; 6 µl de Lipofectamine 2000 foram adicionados gota a gota a 200 µl de OptiMEM, este foi deixado em repouso por 5 minutos em temperatura ambiente (RT). 1 µg de hMfsd2a WT, D97A ou plasmídeo vazio foi preparado em 200 µl de OptiMEM conforme apropriado para cada poço; o Lipofectamine 2000 em solução OptiMEM foi então adici- onado gota a gota a um volume total de 400 µl (isso pode ser escalado para suportar o número de poços/placas a serem testados(as)). Esta preparação de transfecção foi então incubada à RT durante 20 minu- tos. DMEM com 10% de FBS e nenhum meio P/S foi aquecido a 37°C, o meio de placa HEK293 foi trocado e as células foram lavadas cuida- dosamente com 1 ml de DMEM aquecido com 10% de FBS sem meio P/S, 1,6 ml do DMEM aquecido com FBS a 10% sem meio P/S foi en- tão adicionado a cada poço. 400 µl da preparação de transfecção fo- ram então adicionados gota a gota a cada poço conforme apropriado e a placa foi agitada suavemente em movimento circular. A placa foi en- tão incubada durante a noite a 37°C em 5% de CO2.

INCUBAÇÃO DE COMPOSTO E PREPARAÇÃO DE AMOSTRAS DE ANÁLISE

[00135] As soluções de estoque de composto foram preparadas em uma solução de BSA a 12% em PBS de modo que um pico de 40 µl em 2 ml de DMEM simples renderia uma concentração de 50 µM do composto de teste (o meio tratado com composto). A solução estoque do composto restante em BSA a 12% em PBS foi congelada a -20°C para permitir o teste de estabilidade do meio. A placa de 6 poços HEK293 foi removida da incubadora e os poços cuidadosamente en- xaguados com 1 ml de DMEM simples que tinha sido pré-aquecido a

37°C. 2 ml do meio tratado com composto foram então adicionados a cada poço. Uma amostra de 100 µl do meio tratado com composto foi testada para representar uma amostra T = 0 h; 5 µl dessa amostra (o restante foi reservado e congelado no caso de ser necessária uma no- va análise) foram diluídos com 45 µl de DMEM e quebrados com 50 µl de MeCN em uma placa de 96 poços que foi selada e mantida em ge- lo. A placa de 6 poços HEK293 foi então incubada a 37°C em 5% de CO2 durante 1 hora, a placa foi então removida da incubadora e uma amostra de 100 µl de meios retirados de cada poço para representar uma amostra de T = 1 h; 5 µl dessa amostra (o restante foi reservado e congelado no caso de ser necessária uma nova análise) foram diluídos com 45 µl de DMEM e quebrados com 50 µl de MeCN na placa de 96 poços que foi novamente selada e armazenada a -20°C. O meio res- tante foi então removido da placa de 6 poços HEK293, os poços foram cuidadosamente enxaguados duas vezes com 1 ml de BSA a 0,5% em DMEM, o meio foi então removido e a placa de 6 poços deixada secar completamente à RT. 1 ml de 3:2 hexano:isopropanol (HIP) foi adicio- nado a cada poço em um armário de exaustão e a placa deixada em repouso por 30 minutos à RT sem agitação. A solução de HIP foi então transferida para tubos Eppendorf de 2 ml e o processo foi repetido com uma segunda alíquota de 1 ml de HIP e as duas alíquotas combina- das. As amostras de HIP foram então secas sob uma corrente de ni- trogênio. ANÁLISE DE CROMATOGRAFIA EM CAMADA FINA (TLC)

[00136] As placas de sílica-gel foram preparadas em um armário de exaustão desenhando inicialmente uma linha a 1,5 cm da borda inferi- or da placa e, em seguida, desenhando rotas de amostra com uma largura de 1 cm e uma separação de 0,5 cm entre as rotas. O tampão de TLC para fosfolípidos foi preparado como uma mistura de solventes 31:62:7 de Metanol:Clorofórmio:Hidróxido de Amónio. As placas foram pré-executadas em uma câmara úmida que contém 200 ml do tampão de TLC até que a frente do solvente estivesse a 1,5 cm da borda da placa, a placa foi então deixada secar.

As amostras de HIP preparadas como descrito acima foram reconstituídas em 50 µl de clorofórmio, brevemente agitadas 3 vezes e depois mantidas em gelo.

As amostras foram carregadas na placa (juntamente com o composto de referência) riscando suavemente com uma ponta de pipeta, as amostras foram deixadas secar entre os riscos.

Após a conclusão do carregamento da amostra, a placa foi colocada em uma câmara úmida selada que con- tém o tampão de TLC como descrito acima por aproximadamente 1,5 hora ou até que a frente do solvente quase atinja o topo da placa.

A placa foi removida da câmara e secada.

Uma imagem inicial foi obtida usando Bio-Rad Image lab 6.0. Cristais de iodo foram adicionados a uma nova câmara que foi selada para permitir que o vapor de iodo sa- turasse o recipiente, a placa foi então exposta ao vapor de iodo na câmara para permitir a visualização de fitas de ácidos graxos insatura- dos, uma vez que a placa foi desenvolvida, uma segunda imagem foi tirada usando Bio-Rad Image lab 6.0. A placa foi então seca ao ar para remover o iodo.

A placa foi então saturada usando um frasco de spray com solução de acetato cúprico que consiste em acetato cúprico a 3% em peso, ácido fosfórico a 8% em volume, preparado em uma solução aquosa.

A placa foi deixada secar por 5 minutos em RT e então aque- cida em um armário de exaustão usando uma pistola de ar quente pa- ra tornar as fitas mais visíveis.

Uma imagem final foi adquirida usando o Bio-Rad Image lab 6.0. A diferença na intensidade entre as fitas ge- radas a partir de células HEK293 transfectadas com hMfsd2a (WT) ou D97A foi comparada às células transfectadas com vetor vazio (EV), permitindo a absorção nas células acionadas por hMfsd2a para serem identificadas contra a referência (REF). Os resultados da análise de TLC são mostrados nas Figuras 1A a 7B.

[00137] As Figuras 1A e 1B mostram as imagens de TLC da colora- ção de iodo e acetato cúprico, respectivamente, conforme descrito acima com o composto 3 - rota da esquerda: composto de referência, amostra HIP de células WT, células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e vetor vazio, com fitas correspondentes ao Composto 3 mos- trando maior intensidade em células WT em comparação com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirman- do assim que o composto é transportado via Mfsd2a.

[00138] As Figuras 2A e 2B correspondem a imagens de TLC con- forme descrito acima para o composto 4, com fitas correspondentes ao Composto 4 mostrando maior intensidade em células WT em compa- ração com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é transportado via Mfsd2a.

[00139] As Figuras 3A e 3B correspondem a imagens de TLC con- forme descrito acima para o composto 5, com fitas correspondentes ao Composto 5 mostrando maior intensidade em células WT em compa- ração com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é transportado via Mfsd2a.

[00140] As Figuras 4A e 4B correspondem a imagens de TLC con- forme descrito acima para o composto 6, com fitas correspondentes ao Composto 6 mostrando maior intensidade em células WT em compa- ração com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é transportado via Mfsd2a.

[00141] As Figuras 5A e 5B correspondem a imagens de TLC con- forme descrito acima para o composto 7, com fitas correspondentes ao Composto 7 mostrando maior intensidade em células WT em compa- ração com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é transportado via Mfsd2a.

[00142] As Figuras 6A e 6B correspondem a imagens de TLC con- forme descrito acima para o composto 8, com fitas correspondentes ao

Composto 8 mostrando maior intensidade em células WT em compa- ração com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é transportado via Mfsd2a.

[00143] As Figuras 7A e 7B correspondem a imagens de TLC con- forme descrito acima para o composto 20, com fitas correspondentes ao Composto 20, em que não há diferenciação significativa de intensi- dade em células WT em comparação com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio. Portanto, não pode ser confir- mado se o composto é transportado via Mfsd2a por este método. EXEMPLO 9. TRANSPORTE IN VITRO DE MFSD2A ANÁLISE UPLC-MS-MS

[00144] As amostras de HIP preparadas conforme descrito acima foram reconstituídas em 100 µl de MeCN, misturadas em vórtice e in- vertidas várias vezes para garantir que todas as superfícies do tubo Eppendorf fossem enxaguadas com MeCN e finalmente centrifugadas por pulso. Uma alíquota de 50 µl da solução de reconstituição MeCN foi então tomada como uma amostra de extrato de HIP não diluída e adicionada à placa de 96 poços, junto com isso uma amostra de dilui- ção de 1:10 foi preparada obtendo uma alíquota de 5 µl e diluindo com 45 µl de MeCN; 50 µl de água Millipore foram adicionados a cada amostra. Uma linha de calibração bioanalítica foi preparada para cobrir uma faixa de concentração de 0,0001 a 10 µM por aumento de 2 µl de um estoque de DMSO de 0,5 mM do composto de teste em 98 µl de MeCN para gerar um padrão superior de 10 µM que foi então diluído em série com MeCN para produzir 6 estoques padrão de calibração. 50 µl de cada estoque padrão de calibração foram adicionados à placa de 96 poços e diluídos com 50 µl de água Millipore. 50 µl de um pa- drão interno apropriado em MeCN foram então adicionados a cada um dos poços na placa de 96 poços que continha uma amostra ou padrão de calibração, a placa foi selada e transferida para o sistema UPLC-

MS-MS para análise. A absorção do composto de teste nas células HEK293 determinada a partir da análise da amostra HIP com o impac- to de hMfsd2a avaliado comparando a razão da concentração do com- posto de teste nas células transfectadas com hMfsd2a e D97A com as células transfectadas com vetor vazio, conforme mostrado nas Figuras 8A a 8G.

[00145] A Figura 8A mostra a concentração do Composto 3 medida em amostras HIP de células WT, células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e vetor vazio, com mais Composto 3 detectado em célu- las WT em comparação com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é trans- portado via Mfsd2a.

[00146] A Figura 8B mostra a concentração do composto 4 medida em amostras HIP de células WT, células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e vetor vazio, com mais Composto 4 detectado em célu- las WT em comparação com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é trans- portado via Mfsd2a.

[00147] A Figura 8C mostra a concentração do composto 5 medida em amostras de HIP de células WT, células transfectadas com mutan- te D97A Mfsd2a e vetor vazio, com mais Composto 5 detectado em células transfectadas com vetor vazio, em comparação com mutante D97A e/ou WT. Portanto, não pode ser confirmado se o composto é transportado via Mfsd2a por este método.

[00148] A Figura 8D mostra a concentração do composto 6 medido em amostras de HIP de células WT, células transfectadas com mutan- te D97A Mfsd2a e vetor vazio, com mais Composto 6 detectado em células WT em comparação com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é transportado via Mfsd2a.

[00149] A Figura 8E mostra a concentração do composto 7 medida em amostras de HIP de células WT, células transfectadas com mutan- te D97A Mfsd2a e vetor vazio, com mais Composto 7 detectado em células WT em comparação com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é transportado via Mfsd2a.

[00150] A Figura 8F mostra a concentração do composto 8 medida em amostras HIP de células WT, células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e vetor vazio, com mais Composto 8 detectado em célu- las WT em comparação com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é trans- portado via Mfsd2a.

[00151] A Figura 8G mostra a concentração do composto 8 medida em amostras HIP de células WT, células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e vetor vazio, com mais Composto 20 detectado em cé- lulas WT em comparação com células transfectadas com mutante D97A Mfsd2a e/ou vetor vazio, confirmando assim que o composto é transportado via Mfsd2a. EXEMPLO 10. ADME IN VIVO PROTOCOLO 1: ESTUDO DE PK DE RATO DE JVC IV A 3 MG/KG

[00152] O Composto 3 foi administrado por via intravenosa em 3 mg/kg em um grupo de 3 ratos Sprague Dawley machos alojados indi- vidualmente, normalmente alimentados que foram adaptados com ca- teteres na veia jugular (JVCs). A dosagem foi realizada com 2 ml/kg de volumes de dosagem com 5% de DMSO, 95% de água usada como veículo de dosagem. Amostras de sangue em série (150 µl) foram reti- radas de cada animal em cada momento após a dose (0,08 h, 0,25 h, 0,5 h, 1 h, 2 h, 4 h, 8 h e 24 h) em tubos Eppendorf heparinizados (contendo 5 µl de heparina) em gelo que contêm quantidade igual de água. Duas alíquotas de 100 µl foram então colocadas em placas de

96 poços duplicadas em gelo seco. As amostras foram armazenadas em freezer a -20°C até a bioanálise. PROTOCOLO 2: ESTUDO DE PK DE RATO DE JVC PO A 10 MG/KG

[00153] O Composto 3 foi administrado por via oral a 10 mg/kg a um grupo de 3 ratos Sprague Dawley machos alojados individualmente que jejuaram durante a noite e alimentados 4 h após a dose, os ratos foram adaptados com JVCs. A dosagem foi realizada com volumes de dosagem de 5 ml/kg com 5% de DMSO, 95% de água usada como veículo de dosagem. Amostras de sangue em série (150 µl) foram reti- radas de cada animal em cada ponto de tempo (0,25 h, 0,5 h, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h e 24 h) em tubos Eppendorf heparinizados (contendo 5 µl de heparina) em gelo que contêm uma quantidade igual de água. Duas alíquotas de 100 µl foram então colocadas em placas de 96 poços du- plicadas em gelo seco. As amostras foram armazenadas em freezer a -20°C até a bioanálise.

PREPARAÇÃO DE AMOSTRAS BIOANALÍTICAS

[00154] As amostras foram descongeladas e acetonitrila (contendo padrão interno) foi usada para precipitar as proteínas. Todas as amos- tras foram misturadas, centrifugadas e os sobrenadantes analisados por LC-MS-MS, de acordo com os seguintes procedimentos:

1. 20 µl de plasma foram transferidos para uma placa de 96 poços com fundo em v.

2. 80 µl de acetonitrila (ACN) que contém IS foram adicio- nados a cada poço.

3. A placa foi selada e suavemente misturada por aproxi- madamente 30 s.

4. As placas foram centrifugadas durante 10 min a 3.500 rpm.

5. 50 µl de sobrenadante foram transferidos para uma placa de 96 poços com fundo em v nova que contém 100 µl de água MilliQ.

[00155] As placas foram seladas termicamente e armazenadas a 4°C até a análise. Os parâmetros PK resultantes são mostrados abai- xo na Tabela 1. TABELA 1. Dose Traje- Cmáx Tmáx Cl Vdss t1/2 AUC0-t AUC0-inf Biodisponibili- (mg/kg) to (ng/ml) (h) (ml/min/kg) (l/kg) (h) (ng/ml*h) (ng/ml*h) dade (% de F) 3 IV - - 31 6,3 7,4 2462,2 2561,0 - 10 PO 372 2,5 - - - 2348,5 2426,6 28 PROTOCOLO 3: ESTUDO DE PK TERMINAL DE RATO DE JVC PO A 20 MG/KG

[00156] O Composto 3 foi administrado por via oral a 20 mg/kg a um grupo de nove ratos Sprague Dawley machos alojados individual- mente, canalizados na veia jugular que jejuaram durante à noite e fo- ram alimentados 4 h após a dose para avaliar seu perfil de distribuição nos tecidos. A dosagem foi realizada com volumes de dosagem de 5 m/kg com 5% de DMSO, 95% de água usada como veículo de dosa- gem. Amostras de sangue terminal (> 230 µl) foram retiradas de gru- pos de 3 animais em cada um dos 3 pontos de tempo após a dose (1 h, 2 h e 4 h) por punção cardíaca sob CO2 em tubos Eppendorf hepa- rinizados (contendo 5 µl de heparina) em gelo que contêm uma quan- tidade igual de água. Duas alíquotas de 100 µl foram então colocadas em placas de 96 poços duplicadas em gelo seco. Imediatamente após a amostragem de amostras de sangue, par de cérebro e olho foram excisados, pesados, lavados, apagados, e congelados em N2 líquido. As amostras foram armazenadas em freezer a -20°C até a bioanálise.

[00157] As amostras de tecido foram pesadas e um volume de água de 3 vezes a massa adicionado às amostras antes da homogeneiza- ção. No caso do globo ocular, a lente não pôde ser homogeneizada, mas todos os outros tecidos homogeneizados. Os dados resultantes (parâmetros de distribuição de tecido) são mostrados abaixo na Tabela

2.

TABELA 2. Tempo Sangue Cérebro Olho Razão entre cérebro Composto (h) (ng/ml) (ng/g) (ng/g) e sangue (corrigido)* 1 108,4 28,3 1035,4 0,25 Composto 2 16,7 28,5 105,0 1,69 3 4 12,8 34,6 104,4 2,69 *Corrigido para 15 µl de sangue por grama de contaminação do tecido cerebral. Brown et al BR. J. Pharmac. (1986), 87, 569 a 578. PROCOTOLO 4. ANÁLISE DE HOMOGENATO CEREBRAL

[00158] O desenvolvimento de uma metodologia bioanalítica mais sensível para a detecção do Composto 2 em tecidos cerebrais foi ne- cessário, uma vez que o Composto 2 não foi detectado acima do limite inferior de quantificação na análise acima.

[00159] A reanálise dos tecidos cerebrais coletados acima (consul- tar Exemplo 4) foi conduzida de acordo com os procedimentos a seguir e os dados são mostrados na Tabela 3.

1. 100 µl de homogenato cerebral foram transferidos para uma placa de poço profundo de matriz quadrada de 2 ml.

2. 300 µl de acetonitrila (ACN) que contém IS foram dispen- sados às amostras e misturados em um agitador.

3. As amostras foram centrifugadas por 15 min a 3.500 rpm.

4. 300 µl de sobrenadante foram transferidos para uma pla- ca de poço profundo de matriz quadrada de 2 ml.

5. As amostras foram concentradas usando nitrogênio e en- tão reconstituídas em 80 µl de 50:50 de ACN:água MilliQ e agitadas em um agitador de placas.

6. As amostras foram então analisadas por LC-MS-MS.

TABELA 3. Composto Tempo (h) Cérebro (ng/g) 1 526,21 Composto 2 2 495,03 4 548,75 EXEMPLO 11. ESTABILIDADE DE HOMOGENATO CEREBRAL IN

VITRO

[00160] Cérebros de roedores novos foram congelados imediata- mente após coleta e o ensaio realizado no mesmo dia. Os cérebros foram pré-incubados a 37°C antes de serem enriquecidos com o com- posto de teste a 1 µM. As amostras foram coletadas em 6 pontos de tempo (0, 10, 20, 30, 45 e 60 minutos) e quebradas em acetonitrila fria que contém um padrão interno (Leucina Encefalina) e mantidas em gelo até que todas as amostras tivessem sido coletadas. As amostras foram então agitadas e centrifugadas. 100 µl do sobrenadante foram transferidos para uma placa que contém 50 µl de água MilliQ e mistu- rados. Estas placas foram analisadas por LC-MS/MS ao longo dos 6 pontos de tempo, em que a porcentagem de composto de teste restan- te foi calculada usando a área do pico do ponto de tempo inicial (T = 0 minutos) como 100%. O log natural da porcentagem restante foi então calculado. O log natural da porcentagem restante em função do tempo (minutos) foi traçado em um gráfico e o gradiente desse gráfico foi usado para calcular a constante de taxa de eliminação (K). A meia- vida (t1/2) do composto de teste foi calculada usando o log natural de 2 dividido pela constante de taxa de eliminação. A porcentagem do Composto 2 formado é relatada abaixo nas Tabelas 4 a 6. As Figuras 9A a 9F mostram resultados da estabilidade do homogenato cerebral conduzida com compostos representativos dos Exemplos.

TABELA 4. Composto Rato t1/2 % de Rato Camun- % de Camundongo (min) Composto 2 dongo t1/2 Composto 2 (T = 60 min) (min) (T = 60 min) Composto 3 56 - 100 - Composto 2 - 5,3 - 4,3 TABELA 5. Composto Rato % de Rato Camun- % de Camundongo t1/2 Composto 2 dongo t1/2 Composto 2 (min) (T = 60 min) (min) (T = 60 min) Composto 4 76 - 120 - Composto 2 - 5,8 - 6,8 TABELA 6. Composto Rato t1/2 % de Rato Camun- % de Camundongo (min) Composto 2 dongo t1/2 Composto 2 (T = 60 min) (min) (T = 60 min) Composto 5 126 - 258 - Composto 2 - 5,7 - 7,9

[00161] Conforme mostrado na Tabela 4 a 6 e nas Figuras 9A a 9F, os Compostos 3, 4, 5 demonstraram, cada um, um nível de depuração em ambos os estudos de estabilidade de homogenato cerebral de rato e camundongo, com a formação crescente do Composto 2 farmacolo- gicamente ativo (anandamida) ao longo do período de incubação de uma hora. Estes dados são consistentes com os dados de penetração no CNS de rato in vivo usando o Composto 3, em que o Composto 2 também foi detectado no cérebro.

ANÁLISE BIOANALÍTICA

[00162] As amostras bioanalíticas foram preparadas de acordo com os procedimentos descritos acima para análise LC-MS-MS. As amos- tras foram analisadas por LC-MSMS utilizando o AB Sciex QTRAP

5500. O instrumento foi configurado para operar no modo de íon posi- tivo para todas as análises e os dados são mostrados abaixo na Tabe-

la 7. TABELA 7.

OUTRAS MODALIDADES

[00163] Deve ser entendido que embora a invenção tenha sido des- crita em conjunto com a descrição detalhada da mesma, a descrição anterior pretende ilustrar e não limitar o escopo da invenção, que é de- finido pelo escopo das reivindicações anexas. Outros aspectos, vanta- gens e modificações estão dentro do escopo das seguintes reivindica- ções. Deve ser apreciado por aqueles versados na(s) técnica(s) a que a presente invenção refere-se que qualquer uma das características descritas neste documento em relação a qualquer aspecto e/ou moda- lidade particular da presente invenção pode ser combinada com um ou mais de qualquer uma das outras características de quaisquer outros aspectos e/ou modalidades da presente invenção descritos neste do- cumento, com modificações conforme apropriado para garantir a com- patibilidade das combinações. Tais combinações são consideradas parte da presente invenção contemplada por esta divulgação.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método de tratamento de uma doença ou transtorno se- lecionado a partir do grupo que consiste em dor, uma doença ou trans- torno relacionado à dor, uma doença ou transtorno do humor, uma do- ença ou transtorno do sistema nervoso central, uma doença ou trans- torno óptico, câncer, uma doença ou transtorno gastrintestinal, uma doença ou transtorno renal, uma doença ou transtorno relacionado aos rins, uma doença ou transtorno cardiovascular e uma doença ou trans- torno da pele em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que com- preende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula VI:

VI ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquile- no e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 é C1-6 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila.

2. Método de tratamento de uma doença ou transtorno se- lecionado a partir do grupo que consiste em dor, uma doença ou trans- torno relacionado à dor, uma doença ou transtorno do humor, uma do- ença ou transtorno do sistema nervoso central, uma doença ou trans- torno óptico, câncer, uma doença ou transtorno gastrintestinal, uma doença ou transtorno renal, uma doença ou transtorno relacionado aos rins, uma doença ou transtorno cardiovascular e uma doença ou trans- torno da pele em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que com- preende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula VII:

VII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquile- no e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 é C1-6 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-6 alquila, em que a C1-6 alquila é opcionalmente substituída por OH ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracteri-

zado pelo fato de que L1 é CO.

4. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracteri- zado pelo fato de que L1 é PO2.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracteri- zado pelo fato de que X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno- OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O- C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno e C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O- C(O)C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquileno é opcionalmente substi- tuído por OH ou CO2.

6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em CH2, CH2OC(O)O-C1-4 alquileno, CH2OC(O)C1-4 alqui- leno, CH2O-C1-4 alquileno, CH2O-C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, CH2- O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquileno e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquileno é opcionalmente substituído por OH.

7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em CH2, CH2OC(O)O-C1-4 alquileno, CH2OC(O)C1-4 alqui- leno, CH2O-C1-4 alquileno, CH2O-C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno e CH2- O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquileno é opcionalmente substituído por OH.

8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em CH2, CH2OC(O)OCH2CH2, CH2OC(O)OCH2CH(OH)CH2, CH2OC(O)CH2CH2CH2, CH2OC(O)CH2CH2, CH2OCH(CH3), CH2OCH(CH3)OCH2CH(OH)CH2, CH2OCH(CH3)OCH2CH2, CH2OCH(CH3)OC(O)CH2 e CH2OC(O)NHCH2CH2.

9. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X1 é CH2.

10. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 9, caracterizado pelo fato de que X2 é C1-3 alquileno o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2.

11. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 9, caracterizado pelo fato de que X2 é CH2 ou CH2CO2.

12. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 11, caracterizado pelo fato de que R1 é C1-6 alquila.

13. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 11, caracterizado pelo fato de que R1 é propila.

14. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 13, caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila a qual é opcionalmente substituída por OH ou CO2.

15. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 13, caracterizado pelo fato de que R2 é H ou CH2CO2.

16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 15, caracterizado pelo fato de que cada R3 é independente- mente selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila.

17. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 15, caracterizado pelo fato de que cada R3 é H.

18. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 15, caracterizado pelo fato de que cada R3 é metila ou etila.

19. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracte- rizado pelo fato de que: L1 é CO ou PO2; X1 é C1-3 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 é C1-3 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por

OH ou CO2; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila a qual é opcionalmente substituída por OH ou CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila.

20. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracte- rizado pelo fato de que: L1 é CO ou PO2; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila a qual é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila.

21. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: L1 é PO2; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila a qual é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila.

22. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que:

L1 é CO; X1 é C1-4 alquileno; X2 é C1-3 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-6 alquila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila a qual é opcionalmente substituída por CO2; cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-3 alquila.

23. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula VI é um composto de Fórmu- la II:

II ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

24. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula VI é um composto de Fórmu- la III:

III ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

25. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula VII é um composto de Fórmu- la IV:

IV ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

26. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula VII é um composto de Fórmu- la V:

V ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

27. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado a partir do grupo que con- siste em: ; ; ; ; ; ; ;

;

; ;e ; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

28. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado a partir do grupo que con- siste em: ; ; ; ; ; ;

; ; ; ; ; ; ; ;e ; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

29. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

30. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 29, caracterizado pelo fato de que o composto é administrado ao indivíduo na forma de uma composição farmacêutica que compre- ende o composto e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitá- veis.

31. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 30, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é dor ou doença ou transtorno relacionado à dor.

32. Método, de acordo com a reivindicação 31, caracteriza- do pelo fato de que a dor ou uma doença ou transtorno relacionado à dor é selecionada a partir do grupo que consiste em dor aguda, dor crônica, dor neuropática, dor nociceptiva, dor inflamatória, dor oncoló- gica, fibromialgia, artrite reumatoide, osteoartrite, dor relacionada à cirurgia e osteoporose.

33. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 30, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é uma doença ou transtorno do humor.

34. Método, de acordo com a reivindicação 33, caracteriza- do pelo fato de que a doença ou transtorno do humor é selecionado a partir do grupo que consiste em ansiedade, depressão, transtornos do sono, transtorno alimentar, transtorno de estresse pós-traumático, sin- tomas de abstinência de drogas ou álcool, esquizofrenia, transtorno obsessivo-compulsivo, transtorno bipolar, disfunção sexual, transtorno de déficit de atenção (ADD) e transtorno de déficit de atenção e hipe- ratividade (ADHD).

35. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica-

ções 1 a 30, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é uma doença ou transtorno do sistema nervoso central ou uma doença ou transtorno óptico.

36. Método, de acordo com a reivindicação 35, caracteriza- do pelo fato de que a doença ou transtorno do sistema nervoso central ou uma doença ou transtorno óptico selecionado a partir do grupo que consiste em uma doença desmielinizante, glaucoma, degeneração macular relacionada à idade (AMD), esclerose lateral amiotrófica (ALS), um transtorno cognitivo, mal de Alzheimer, um transtorno do movimento, Coreia de Huntington, síndrome de Tourette, doença de Niemann-Pick, mal de Parkinson, epilepsia, um transtorno cerebrovas- cular e lesão cerebral.

37. Método, de acordo com a reivindicação 36, caracteriza- do pelo fato de que a doença desmielinizante é selecionada a partir do grupo que consiste em esclerose múltipla (MS), neuromielite óptica (NMO), doença de Devic, neuropatia do sistema nervoso central, mie- linólise pontina central, mielopatia sifilítica, leucoencefalopatias, leuco- distrofias, síndrome de Guillain-Barré, polineuropatia desmielinizante inflamatória crônica, neuropatia periférica de glicoproteína associada à antimielina (MAG), doença de Charcot-Marie-Tooth, neuropatia perifé- rica, mielopatia, neuropatia óptica, neuropatia inflamatória progressiva, neurite óptica e mielite transversa.

38. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 30, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é câncer.

39. Método, de acordo com a reivindicação 38, caracteriza- do pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo que con- siste em leucemia, linfoma de células do manto, linfoma de Hodgkin, linfoma não-Hodgkin, carcinoma hepatocelular, câncer de ovário, cân- cer colorretal, câncer de pâncreas, câncer de próstata, câncer de ma-

ma, glioma, câncer de pele, carcinoma renal e câncer de pulmão.

40. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 30, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é uma doença ou transtorno gastrintestinal.

41. Método, de acordo com a reivindicação 40, caracteriza- do pelo fato de que a doença ou transtorno gastrintestinal é seleciona- do a partir do grupo que consiste em doença inflamatória intestinal, doença do refluxo gastroesofágico, íleo paralítico, diarreia secretora, úlcera gástrica, náusea, emese e doença hepática.

42. Método, de acordo com a reivindicação 41, caracteriza- do pelo fato de que a doença hepática é selecionada a partir do grupo que consiste em insuficiência hepática aguda, síndrome de Alagille, hepatite, fígado aumentado, síndrome de Gilbert, cisto hepático, he- mangioma hepático, doença hepática gordurosa, esteato-hepatite, co- langite esclerosante primária, fasciolíase, cirrose biliar primária, sín- drome de Budd-Chiari, hemocromatose, doença de Wilson e transtirre- tina amiloidose hereditária.

43. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 30, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é uma doença ou transtorno renal ou uma doença ou transtorno relacio- nado ao sistema renal.

44. Método, de acordo com a reivindicação 43, caracteriza- do pelo fato de que a doença ou transtorno renal ou uma doença ou transtorno relacionado ao sistema renal é selecionado a partir do gru- po que consiste em diabetes, nefropatia diabética, lesão renal inflama- tória aguda, isquemia renal, incontinência urinária e bexiga hiperativa.

45. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 30, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é uma doença ou transtorno da pele.

46. Método, de acordo com a reivindicação 45, caracteriza-

do pelo fato de que a doença ou transtorno da pele é psoríase ou lú- pus.

47. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 30, caracterizado pelo fato de que a doença ou transtorno é uma doença ou transtorno cardiovascular.

48. Método, de acordo com a reivindicação 47, caracteriza- do pelo fato de que a doença ou transtorno cardiovascular é selecio- nado a partir do grupo que consiste em doença cardiovascular, infla- mação vascular, fibrose pulmonar idiopática e hipertensão.

49. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 30 a 48, caracterizado pelo fato de que o composto é um com- posto de Fórmula VIa: VIa ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquile- no e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 é C1-6 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2A é H ou CH2CO2; R2B é H ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru-

po que consiste em H e C1-6 alquila.

50. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 30 a 48, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula VII é um composto de Fórmula VIIa: VIIa ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquile- no e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 é C1-6 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2A é H ou CH2CO2; R2B é H ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila.

51. Composto de Fórmula VIa: VIa ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que:

L1 é CO ou PO2; X1 é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-4 al- quileno, C1-4 alquileno-OC(O)O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-OC(O)C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquile- no-O-C1-4 alquileno, C1-4 alquileno-O-C1-4 alquileno-O-C(O)C1-4 alquile- no e C1-4 alquileno-OC(O)NH-C1-4 alquileno, em que cada C1-4 alquile- no é opcionalmente substituído por OH ou CO2; X2 é C1-6 alquileno, o qual é opcionalmente substituído por OH ou CO2; R1 é C1-10 alquila; R2A é H ou CH2CO2; R2B é H ou CO2; e cada R3 é independentemente selecionado a partir do gru- po que consiste em H e C1-6 alquila.

52. Composto, de acordo com a reivindicação 51, caracteri- zado pelo fato de que é selecionado a partir do grupo que consiste em: ; ; ; ; ;

; ; ; ;e ; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

53. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido na reivindicação 51 ou 52 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.